实验3-微生物接种技术
细菌接种实验报告范文
一、实验目的1. 掌握细菌接种的基本操作技术。
2. 学习细菌在不同培养基上的生长情况。
3. 观察细菌的菌落特征，了解细菌的分类。
二、实验原理细菌接种是将细菌从一环境转移到另一环境的过程，通过接种，可以使细菌在适宜的培养基上生长繁殖，便于观察和研究。
接种方法主要有划线法、涂布法、点接种法等。
本实验采用划线法进行细菌接种。
三、实验材料1. 培养基：牛肉膏蛋白胨固体培养基、营养琼脂固体培养基。
2. 菌种：金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌。
3. 仪器：接种环、酒精灯、无菌试管、无菌培养皿、无菌水、无菌操作台等。
四、实验方法1. 划线法接种：（1）将接种环在酒精灯火焰上灼烧至红热，待冷却后，挑取少量金黄色葡萄球菌，在牛肉膏蛋白胨固体培养基平板上划线。
（2）将接种环灼烧，待冷却后，挑取少量大肠杆菌，在营养琼脂固体培养基平板上划线。
（3）将接种环灼烧，待冷却后，挑取少量枯草芽孢杆菌，在牛肉膏蛋白胨固体培养基平板上划线。
2. 观察菌落特征：（1）将接种好的平板倒置，放入恒温培养箱中培养24小时。
（2）观察菌落特征，包括菌落大小、形状、颜色、边缘等。
五、实验结果1. 金黄色葡萄球菌在牛肉膏蛋白胨固体培养基上生长出圆形、金黄色、表面光滑、边缘整齐的菌落。
2. 大肠杆菌在营养琼脂固体培养基上生长出圆形、白色、表面光滑、边缘整齐的菌落。
3. 枯草芽孢杆菌在牛肉膏蛋白胨固体培养基上生长出圆形、淡黄色、表面粗糙、边缘不整齐的菌落。
六、实验讨论1. 细菌接种是微生物实验的基本操作，掌握正确的接种方法对于后续实验至关重要。
2. 划线法接种适用于观察细菌的菌落特征，便于分离纯化细菌。
3. 不同细菌在相同培养基上的生长情况不同，这与其生理特性有关。
4. 通过观察菌落特征，可以初步判断细菌的种类。
七、实验结论通过本次实验，我们掌握了细菌接种的基本操作技术，学会了观察细菌的菌落特征，了解了细菌的分类。
八、注意事项1. 实验过程中，严格遵循无菌操作原则，防止细菌污染。
(完整版)微生物的接种技术
微生物的接种技术1 目的1.1学习掌握微生物的几种接种技术1.2 建立无菌操作的概念，掌握无菌操作的基本环节2 实验说明将微生物的培养物或含有微生物的样品移植到培养基上的操作技术称之为接种。
接种是微生物实验及科学研究中的一项最基本的操作技术。
无论微生物的分离、培养、纯化或鉴定以及有关微生物的形态观察及生理研究都必须进行接种。
接种的关键是要严格的进行无菌操作，如操作不慎引起污染，则实验结果就不可靠，影响下一步工作的进行。
3 实验器材3.1 器械和用品酒精灯，玻璃铅笔，火柴，试管架、接种环、接种针、接种钩、滴管、移液管、三角型接种棒等接种工具。
3.2 菌种和培养基菌种：大肠杆菌（Escherichia coli），金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）。
培养基：普通琼脂斜面和平板,营养肉汤,普通琼脂高层(直立柱)。
4 实验流程斜面接种法→液体接种法→固体接种法→穿刺接种法。
5 操作步骤5.1 斜面接种法斜面接种法主要用于接种纯菌，使其增殖后用以鉴定或保存菌种。
通常先从平板培养基上挑取分离的单个菌落，或挑取斜面，肉汤中的纯培养物接种到斜面培养基上。
操作应在无菌室、接种柜或超净工作台上进行，先点燃酒精灯。
将菌种斜面培养基(简称菌种管)与待接种的新鲜斜面培养基(简称接种管)持在左手拇指、食指、中指及无名指之间，菌种管在前，接种管在后，斜面向上管口对齐，应斜持试管呈45～0度角，并能清楚地看到两个试管的斜面，注意不要持成水平，以免管底凝集水浸湿培养基表面。
以右手在火焰旁转动两管棉塞，使其松动，以便接种时易于取出。
右手持接种环柄，将接种环垂直放在火焰上灼烧。
镍铬丝部分（环和丝）必须烧红，以达到灭菌目的，然后将除手柄部分的金属杆全用火焰灼烧一遍，尤其是接镍铬丝的螺口部分，要彻底灼烧以免灭菌不彻底。
用右手的小指和手掌之间及无名指和小指之间拨出试管棉塞，将试管口在火焰上通过，以杀灭可能沾污的微生物。
微生物的分离、接种和培养技术
微生物的分离、接种和培养技术一、实验的目的和内容目的：掌握微生物接种和分离纯化技术，掌握无菌操作技术。
内容：用平板划线法分离微生物；学习斜面接种及穿刺接种等无菌操作技术。
二、基本原理在自然界中，各种微生物是在互为依赖的关系下共同生活的。
因此，为了取出特定的微生物进行纯培养，必须从中把他们分离出来。
微生物接种技术是进行微生物实验和相关研究的基本操作技能。
无菌操作是微生物接种技术的关键。
接种是将微生物或微生物悬液引入新鲜培养基的过程。
由于实验目的、培养基种类及实验器皿等不同，所用接种方法不尽相同。
斜面接种、液体接种、固体接种和穿刺接种操作均以获得生长良好的纯种微生物为目的。
分离培养微生物时，要考虑微生物对外界的物理、化学等因素的影响。
即选择该类微生物最适合的培养基和培养条件。
在分离、接种、培养过程中，均需严格的无菌操作，防止杂菌侵入，所用的器具必须经过灭菌，接种工具无论使用前后都要经过灭菌，且在无菌室或无菌箱中进行。
三、材料及器材（一）菌种：大肠杆菌、枯草杆菌，金黄色葡萄球菌，酵母菌。
（二）培养基：肉汤培养基试管斜面，肉汤半固体培养基，肉汤固体培养基试管斜面，肉汤固体培养基平板，查氏培养基试管斜面，查氏培养基平板。
易（三）仪器及其他工具：接种环，接种针，接种钩，镊子，酒精灯，火柴，酒精棉，试管架，标签纸，恒温培养箱等。
四、方法与步骤（一）接种。
1、试管菌种转接：试管细菌菌种转接主要用于菌种的活化、分离、纯化。
（1）将菌种试管与待接种的试管培养基依次排列，挟于左手的拇指与其他四指之间，用右手的无名指与小指和手掌边拔出棉塞并挟住。
（2）置试管口于酒精火焰附近。
（3）将接种工具垂直插入酒精火焰中烧红，再横过火焰3次，然后再放入有菌试管中，在管壁上停留片刻待其冷却。
（4）取少许菌种置于另一支试管中，按一定的接种方式把菌种接种到新的培养基上。
（5）取出接种工具，试管口和棉塞进行火焰灭菌。
（6）重新塞上棉塞。
（7）烧死接种工具上的残余菌，把试管和接种工具放回原处。
实验3-微生物接种技术
实验三微生物接种技术一、实验目的1、掌握无菌操作在微生物接种过程中的重要性。
2、掌握几种常用的微生物接种方法。
3、掌握微生物微生物扩大繁殖的基本方法。
4、认识微生物接种工具二、实验原理微生物接种技术是生物科学研究中最基本的操作技术。
由于实验目的、培养基种类及容器等不同，所用接种方法不同，如斜面接种、液体接种、固体接种和穿刺接种等，以获得生长良好的纯种微生物。
为此，接种必须在一个无杂菌污染的环境中进行严格的无菌操作；同时，因接种方法的不同，常采用不同的接种工具，如接种针、接种环、移液管和玻璃刮铲等。
三、实验器材主要仪器及设备无菌室、超净工作台、培养箱、振荡器、接种针、接种环、接种钩、接种铲，试管固体斜面培养基、培养基平板、三角瓶液体培养基，PDA平板及斜面，牛肉膏-蛋白胨-琼脂平板、斜面培养基、牛肉膏-蛋白胨液体培养基、试管半固体培养基。
菌种大肠杆菌（Escherichia coli)、青霉(Penicillium sp．)、酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae Hansen)、细黄链霉菌(Streptomyces microflavus)放线菌等。
四、操作步骤(一)斜面接种技术具体操作如下：1、贴标签接种前在试管上贴上标签，注明菌名、接种日期、接种人姓名等。
贴在距试管口径2-3厘米的位置。
2、点燃酒精灯。
3、接种用接种环将菌种移接到贴好标签的试管斜面上。
无菌操作程序简述如下：⑴手持试管将菌种和用于接种的斜面两支试管用大拇指和其他四指握在左手中、使中指位于两试管之间。
斜面向上，并使它们位于水平位置(图a)。
⑵旋松棉塞先用右手将棉塞旋松，以便接种时易于拔出。
⑶取接种环右手拿接种环在火焰将环端烧红灭菌，然后将有可能伸入试管的其余部分，均用火烧过灭菌。
⑷拔棉塞用右手的无名指、小指和手掌边先后拔出试管的棉塞，然后让试管口缓缓过火灭菌(切勿烧得过烫)，如图b、c所示。
⑸环冷却将灼烧过的接种环伸入菌种管，先使环接触没有长菌的培养基部分，使其冷却。
实验微生物接种技术讲解
实验微生物接种技术讲解实验微生物接种技术讲解微生物接种篇一：实验微生物接种技术一、目的：学习微生物工作的基本接种方法，建立纯培养技术中的“无菌”概念，掌握无菌操作技术。
二、原理：所谓接种就是将一定量的纯种微生物在无菌操作条件下转移到另一已灭菌，并适宜于该菌生长繁殖所需的培养基上的过程。
本实验要求严格进行无菌操作，一般是在无菌操作台或在实验室内火焰旁进行。
根据不同的实验目的和培养方式，可以采用不同的接种工具和接种方法。
三、实验材料：斜面培养基、液体培养基、平板培养基、记号笔、酒精灯、接种针、消毒酒精、涂布棒等。
四、操作步骤（一）无菌操作菌种分离或移接工作应在无菌环境中进行，接种室、接种箱或超净工作台是常用的接种环境。
用前先清洁好卫生，再进行消毒处理。
可用紫外线灯和甲醛熏蒸的双重作用，或用3%来苏尔及其他表面消毒进行喷雾。
操作者的手应先用肥皂洗净，再用酒精棉球消毒；整个操作过程都要靠近酒精灯火焰；接种工具在用前和用后必须在灯焰上灭菌；棉塞不得乱放，操作中只能夹在手上；不能有跑、跳等力度大的动作，以免引起空气大振动而增加染菌机会。
（二）接种方法（1）斜面接种：从已长好微生物的菌种管移接到另一斜面管的方法。
此法用于好气性微生物的接种。
左手持菌种管和斜面管，使斜面向上，并尽量放平。
用右手先将棉塞拧转松动，再拿接种环，用右手的小指、无名指和手掌拨下棉塞并夹紧，同时将管口在火焰上燃烧一圈，接种环灼烧灭菌后插入管内，冷却、挑菌，立即转入斜面管底部，沿斜面划曲线或直线。
图1.斜面接种示意图（2）液体接种：由斜面菌接种到液体培养基（如试管或三角瓶等）中的方法。
操作与上法基本一致，只是在将接种环送入液体培养基中时使环在液体与管壁接触的地方轻轻磨擦，使菌体分散，然后塞上棉塞，再轻轻摇动均匀，即可培养。
如果菌种是培养在液体培养基中时，一般用移液管或滴管接种。
（3）穿刺接种：用接种针挑取菌种后，插入深层固体培养基内，（不要刺到底部），再沿原路拔出，此法用于厌气性细菌接种、检查细菌的运动能力。
微生物的接种分离和纯培养
穿刺接种技术：用接种针从菌种斜面上挑取 少量菌体并竖直穿刺到半固 体培养基中；
接种无菌操作步骤
1. 将菌种斜面和待接种新鲜斜面夹在左手 的食指、中指和无名指之间，大拇指按在两 只试管中间。右手旋松棉塞，便于拔出； 2. 右手拿接种环，竖直伸入火焰中，环端 及伸入试管中部分均充分灭菌；
I
冷却至 45℃左右
每皿约倒入15ml
肉汤培养基
II
III
0.2ml 0.2ml
0.2ml
微生物的计数
血球计数法 平板活菌计数法
计繁殖数法只适宜于单细胞状态的微生物 或丝状微生物产生的孢子
血球计数法
一、实验原理
血球计数器是一特制的厚载玻片，上面 刻有一定面积的方格，将盖玻片盖上后，由 于两者之间存在着距离使之形成一定容积的 小室。滴入待测样品后，使样品均匀充满小 室，在显微镜下计算小室内的菌数，换算成 单位体积的样品中所含的菌数。
度。
思考题
1. 微生物的纯种分离通常采用那些方法，并说明个 方法的特点。
2. 什么叫微生物的污染？如何防止？ 3. 从两种方法计数得出的菌液浓度是否一致？分析
误差产生的原因，由此比较一下两者的优缺点及 各自的适用范围。 4. 平板活菌计数中，为何选择生长有25～250个菌 落的平板？
碰到火焰，以免烧死菌体 6. 血球计数器要洁净干燥，滴入菌液时在盖玻片与
载玻片间不能有气泡 7. 血球计数时显微镜光线不宜太亮
实验安排（三人一组）
斜面接种：每组三支 液体接种：每组三支（大肠、四联、枯草各一支） 穿刺接种：每组二支（四联一支、变形一支） 平板划线分离：每人划一块平板（混合菌液) 稀释分离：I、II、III各一块平板（混合菌液) 血球计数：写出小格数目，并算出酵母菌液
微生物的接种技术
（二）穿刺接种
用接种针挑取菌种（针必须挺直），自培养基的 中心垂直地刺入半固体培养基中，直至接近管底， 但不要穿透，然后沿原穿刺线将针拔出，塞上试管 塞，烧灼接种针。
五、实验结果 1、待接种菌种培养长出后，看划线是否标准 2、观察穿刺接种生长状态 六、思考题 1、什么是无菌操作 2、接种时应注意的问题有哪些
实验七 微生物的接种技术
Hale Waihona Puke 一、实验目的熟悉微生物的无菌接种技术和方法
二、实验原理
微生物接种是将一种微生物移接到另一灭过菌 的新鲜培养基中，使其繁殖生长的过程。
方法有：斜面接种、液体接种、平板接种、穿 刺接种等。
无菌操作：培养基灭菌后，用灭过菌的无菌工 具将含菌材料接种于灭菌培养基上的过程。
三、实验材料 1、菌种：大肠杆菌（Ec） 2、培养基：营养琼脂斜面培养基、
4、右手拿接种环通过火焰烧灼灭菌，在火焰边用 右手的手掌边缘和小指/小指和无名指分别夹持 试管帽，将其取出，并迅速烧灼管口。
5、将灭菌的接种环伸入菌种试管内，先将环接触试 管 内壁或未长菌的培养基，达到冷却的目的，然后再 挑取少许菌苔。将接种环退出菌种试管，迅速伸入 待接种的斜面试管，用环在斜面上自试管底部向上 端轻轻地划直线，勿将培养基划破，也不要使环接 触管壁或管口。
牛肉膏蛋白胨半固体培养基 3、器材：接种环、接种针、酒精灯
四、操作步骤
（一）斜面接种
1、在斜面试管上，用记号笔写上 将接种的菌名、日期和接种者；
2、点燃煤气灯；
3、将菌种试管和待接种的斜面试 管，用大拇指和食指、中指、无 名指握在左手中，并将中指夹在 两试管之间，使斜面向上，成水 平状态，在火焰边用右手松动试 管塞，以利于接种时拔出。
微生物的接种技术
引言：微生物的接种技术是一种利用活体微生物来改变或影响其宿主环境以达到某种特定目的的方法。
它在农业、医疗、环境保护等领域中有着广泛的应用。
本文将详细介绍微生物的接种技术的原理、分类以及在不同领域中的应用。
概述：微生物的接种技术是通过将特定的微生物引入特定的环境中，从而影响宿主环境中的生物群落，并达到改变环境的目的。
接种技术的成功与否取决于合适的微生物选择、适当的接种方法和适宜的环境条件。
正文：一、微生物接种技术的原理1.1接种微生物的目的和原因1.2微生物的选择原则1.3接种微生物的策略二、微生物接种技术的分类2.1入侵性接种技术2.2非入侵性接种技术2.3增强型接种技术2.4保护性接种技术2.5组合接种技术三、农业领域中的微生物接种技术应用3.1有益微生物的接种3.2有害微生物的控制3.3好氧微生物的应用3.4厌氧微生物的应用3.5接种微生物的途径与技术四、医疗领域中的微生物接种技术应用4.1微生物解毒剂的应用4.2高效微生物生产技术的应用4.3微生物酶的应用4.4微生物制剂的应用4.5微生物植入技术的应用五、环境保护领域中的微生物接种技术应用5.1污水处理中的微生物接种技术5.2土壤修复中的微生物接种技术5.3水质净化中的微生物接种技术5.4生态系统修复中的微生物接种技术5.5环境监测与评估中的微生物接种技术总结：微生物的接种技术是一种重要的生物技术手段，可以在农业、医疗、环境保护等领域中发挥重要作用。
它有助于改善宿主环境、增强微生物活性和促进生态平衡。
在应用微生物接种技术时，需注意选择适宜的微生物菌种、合适的接种方法以及适当的环境条件，以达到最佳的效果。
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实验三微生物接种技术
一、实验目的
1、掌握无菌操作在微生物接种过程中的重要性。
2、掌握几种常用的微生物接种方法。
3、掌握微生物微生物扩大繁殖的基本方法。
4、认识微生物接种工具
二、实验原理
微生物接种技术是生物科学研究中最基本的操作技术。
由于实验目的、培养基种类及容器等不同，所用接种方法不同，如斜面接种、液体接种、固体接种和穿刺接种等，以获得生长良好的纯种微生物。
为此，接种必须在一个无杂菌污染的环境中进行严格的无菌操作；同时，因接种方法的不同，常采用不同的接种工具，如接种针、接种环、移液管和玻璃刮铲等。
三、实验器材
主要仪器及设备无菌室、超净工作台、培养箱、振荡器、接种针、接种环、接种钩、接种铲，试管固体斜面培养基、培养基平板、三角瓶液体培养基，PDA平板及斜面，牛肉膏-蛋白胨-琼脂平板、斜面培养基、牛肉膏-蛋白胨液体培养基、试管半固体培养基。
菌种大肠杆菌（Escherichia coli)、青霉(Penicillium sp．)、酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae Hansen)、细黄链霉菌(Streptomyces microflavus)放线菌等。
四、操作步骤
(一)斜面接种技术具体操作如下：
1、贴标签接种前在试管上贴上标签，注明菌名、接种日期、接种人姓名等。
贴在距试管口径2-3厘米的位置。
2、点燃酒精灯。
3、接种用接种环将菌种移接到贴好标签的试管斜面上。
无菌操作程序简述如下：
⑴手持试管将菌种和用于接种的斜面两支试管用大拇指和其他四指握在左手中、使中指位于两试管之间。
斜面向上，并使它们位于水平位置(图a)。
⑵旋松棉塞先用右手将棉塞旋松，以便接种时易于拔出。
⑶取接种环右手拿接种环在火焰将环端烧红灭菌，然后将有可能伸入试管的其余部分，均用火烧过灭菌。
⑷拔棉塞用右手的无名指、小指和手掌边先后拔出试管的棉塞，然后让试管口缓缓过火灭菌(切勿烧得过烫)，如图b、c所示。
⑸环冷却将灼烧过的接种环伸入菌种管，先使环接触没有长菌的培养基部分，使其冷却。
⑹取菌种待环冷却后轻轻沾取少量菌或孢子，然后将接种环移出接种管，如图d所示，注意不要使环的部分碰到管壁，取出后不可使环通过火焰。
⑺接种在火焰旁迅速将沾有菌种的接种环伸入另一支待接斜面试管。
从斜面培养基的
底部向上部作“之”字形来回划线，方向是从下部开始，一直划至上部，勿划破培养基(图e)。
有时也可用接种针仅在斜面培养基的中央划一条线作斜面接种，以便观察菌种的生长特点。
⑻塞棉塞取出接种环，灼烧试管口，并在火焰旁将棉塞塞上。
塞棉塞时，不要用试管迎棉塞，以免试管在移动时带入不洁空气，如图f、g所示。
⑼环灭菌将接种环烧红灭菌。
放下接种环，再将棉花塞旋紧，如图所示。
斜面接种时的无菌操作
（二）穿刺接种
（1）取两支新鲜半固体牛肉膏蛋白胨柱状培养基，做好标记（写上菌名）、接种日期，接种人等）。
（2）接种的方法是，用接种针沾取少量待接菌种，然后从柱状培养基的中心穿入其底部（但不要穿透），然后沿原刺入路线抽出接种针，注意接种针不要移动。
（3）接种后30℃恒温培养， 24h后观察，比较两种菌的生长结果。
穿刺接种示意
（三）液体接种
1、用斜面菌种接种液体培养基，分为两种情况：
（1）如接种量小，可用接种环（铲、针等）取不量菌体移入培养基容器中，将环在液体表面处的器壁上轻轻摩擦，使菌苔碾散；抽出接种环再摇动液体培养基使菌体均匀分布在液体中。
（2）如接种量大，可先在斜面菌种管中倒入一定量的无菌水，用接种环将菌苔刮下，再将菌悬液倒入液体培养基中，倒前需将管口在火焰上灼烧灭菌。
（四）平板接种
以中指、无名指及小指托住培养皿下盖底部，用虎口及食指扶住上盖，再将斜面菌种管放于培养皿上之上，以拇指压住。
然后以移菌环挑菌苔的菌体移入平板的中央，也可在平板上划线3-5条。
五、接种后的培养
将接种后的试管、平板放适宜的条件下培养，分别于48h、72h后进行观察。
六、报告
1、观察记述所有接种培养的微生物的形态特征、生长情况等，结果填入表内：
2、思考题：
1）接种前后为什么要灼烧接种环？
2）为什么要待接种环冷却后才能与菌种接触？是否可以将接种环放在台子上冷却？如何如何知道接种环是否已经冷却？
3）微生物接种为什么要在无菌条件下进行？
4）接种应注意哪些环节才能避免杂菌污染？。