液相色谱-质谱联用
液相色谱-质谱联用(LC-MS)
液相色谱-质谱联用(LC-MS)LCMS分别的含义是：L液相C色谱M质谱S分离（友情赠送：G是气相^_^）LC-MS/MS就是液相色谱质谱/质谱联用MS/MS是质谱-质谱联用（通常我们称为串联质谱，二维质谱法，序贯质谱等）LC-MS/MS与LC-MS比较，M（质谱）分离的步骤是串联的，不是单一的。
色谱法也叫层析法，它是一种高效能的物理分离技术，将它用于分析化学并配合适当的检测手段，就成为色谱分析法。
色谱法的最早应用是用于分离植物色素，其方法是这样的：在一玻璃管中放入碳酸钙，将含有植物色素（植物叶的提取液）的石油醚倒入管中。
此时，玻璃管的上端立即出现几种颜色的混合谱带。
然后用纯石油醚冲洗，随着石油醚的加入，谱带不断地向下移动，并逐渐分开成几个不同颜色的谱带，继续冲洗就可分别接得各种颜色的色素，并可分别进行鉴定。
色谱法也由此而得名。
现在的色谱法早已不局限于色素的分离，其方法也早已得到了极大的发展，但其分离的原理仍然是一样的。
我们仍然叫它色谱分析。
一、色谱分离基本原理：由以上方法可知，在色谱法中存在两相，一相是固定不动的，我们把它叫做固定相；另一相则不断流过固定相，我们把它叫做流动相。
色谱法的分离原理就是利用待分离的各种物质在两相中的分配系数、吸附能力等亲和能力的不同来进行分离的。
使用外力使含有样品的流动相（气体、液体）通过一固定于柱中或平板上、与流动相互不相溶的固定相表面。
当流动相中携带的混合物流经固定相时，混合物中的各组分与固定相发生相互作用。
由于混合物中各组分在性质和结构上的差异，与固定相之间产生的作用力的大小、强弱不同，随着流动相的移动，混合物在两相间经过反复多次的分配平衡，使得各组分被固定相保留的时间不同，从而按一定次序由固定相中先后流出。
与适当的柱后检测方法结合，实现混合物中各组分的分离与检测。
二、色谱分类方法：色谱分析法有很多种类，从不同的角度出发可以有不同的分类方法。
从两相的状态分类：相色谱和经典液相色谱没有本质的区别。
液相色谱质谱联用
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质谱仪
质谱仪包括真空系统、进样系统、离子源、质量分析 器、检测器和数据处理系统。
进样系统
Sample Inlet
离子源
Ionization Source
真空系统
Vacuum System
质量分析器
Mass Analyser
检测器
Detector
数据处理系统
Data System
Nebulizer
HPLC inlet
APCI
+ +
+
++
Corona
大气压化学电离源示意图
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基质辅助激光解析电离源 MALDI
MALDI源原理：待测物质的溶液与基质的溶液混合后蒸发，使 分析物与基质成为晶体或半晶体，用一定波长的脉冲式激光进行 照射时，基质分子能有效的吸收激光的能量，使基质分子和样品 分子进入气相并得到电离。
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大气压化学电离源 APCI
APCI源原理：喷嘴下游放置一个针状放电电极，进行高压放电， 使空气中某些中性分子电离，产生H3O+，N2+，O2+ 和O+ 等离子， 溶剂分子也会被电离，这些离子与样品分子进行离子-分子反应， 使样品分子离子化。
特点： 属于“软”电离方式，适 于分析质量数小于2000u的 弱极性小分子化合物。 只产生单电荷离子，主要 是准分子离子，很少有碎片 离子。 主要应用于液相色谱-质 谱联用仪。
快原子轰击电离源示意图
特点： 适用于分析大分子 量、难气化、热稳定 性差的样品。
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电喷雾电离源 ESI
ESI源原理：流出液在高电场下形成带电喷雾，在电场力作用下 穿过气帘；从而雾化、蒸发溶剂、阻止中性溶剂分子进入后端检 测。
液相色谱质谱联用仪使用说明书
液相色谱质谱联用仪使用说明书1. 产品概述液相色谱质谱联用仪（Liquid Chromatography Mass Spectrometry,LC-MS）是一种高效且准确的分析仪器，常用于生物医药、环境监测、食品安全等领域。
本说明书旨在向用户介绍该仪器的基本使用方法和注意事项，以帮助用户顺利操作和获取准确的分析结果。
2. 仪器部件及参数2.1 液相色谱部分（此部分根据具体仪器的配置进行介绍，包括进样器、色谱柱、流动相体系等，具体参数包括但不限于：进样方式、柱温、流速范围、浓度范围等）2.2 质谱部分（此部分根据具体仪器的配置进行介绍，包括离子源、激发源、质谱分析器等，具体参数包括但不限于：扫描方式、离子化方式、质谱范围等）3. 仪器操作步骤3.1 准备工作在使用液相色谱质谱联用仪之前，确保以下准备工作已完成：（1）确认仪器及相关设备已接通电源，并处于正常工作状态；（2）检查流动相及其他试剂的储存量，并进行必要的更换或补充；（3）保证色谱柱处于良好的状态，检查柱温控制装置的工作情况。
3.2 进样设置（此部分根据具体仪器的配置进行介绍，包括进样器的基本设置、进样方式的选择、进样量的确定等）3.3 色谱条件设置（此部分根据具体仪器的配置进行介绍，包括流动相体系的选择、流速的设置、柱温的控制等）3.4 质谱条件设置（此部分根据具体仪器的配置进行介绍，包括离子化方式的选择、质谱范围的设置、激发源的参数调整等）3.5 数据采集和分析（此部分根据具体仪器的配置进行介绍，包括数据采集软件的使用、质谱图的分析、定量分析方法的建立等）4. 注意事项4.1 安全操作（根据仪器的特点和操作需要，提醒用户注意电源使用、化学品的安全储存和处理、仪器的地耐压等事项）4.2 仪器维护与保养（根据仪器的特点和使用需求，介绍仪器的日常维护与保养，如色谱柱的清洗和更换、离子源的清洗等）4.3 故障排除与常见问题解答（根据仪器的特点和常见故障情况，提供故障排除的方法和常见问题的解答。
液相色谱质谱联用法
液相色谱质谱联用法嘿，朋友们！今天咱来聊聊液相色谱质谱联用法呀！这玩意儿可神奇了，就好比是一个超级侦探，能把那些隐藏在复杂混合物里的小秘密都给揪出来。
你想想看，我们面对的那些样品，就像是一团乱麻，各种成分交织在一起。
而液相色谱呢，就像是一把梳子，把这团乱麻给慢慢梳理开，让不同的成分按照它们的特性依次排好队。
然后呢，质谱这个厉害的家伙就登场啦！它就像一个火眼金睛，能准确地识别出每个成分是什么，还能告诉你它们的量有多少。
说起来，这可真是个精细的活儿呢！就好像是在解一道超级复杂的谜题。
要是稍微有一点不注意，可能就会得出错误的答案哦。
比如说，液相色谱的条件没设置好，那就像是梳子的齿断了几根，怎么能把乱麻梳好呢？或者质谱的参数没调好，那不就像是火眼金睛近视了一样，还怎么能看清那些小秘密呢？咱再打个比方，液相色谱质谱联用法就像是一场接力赛。
液相色谱跑第一棒，它要努力地把任务完成好，然后把接力棒稳稳地交到质谱手里。
质谱呢，就必须要接住这个棒，然后奋力冲刺，给出准确的结果。
这中间可不能有任何闪失呀，要不然这场比赛可就输啦！在实际操作中，可得特别小心呢。
要仔细地准备样品，不能有任何杂质混进去，不然就像是在跑道上放了块石头，会把选手绊倒的。
而且仪器的维护也很重要呀，就像运动员要保持好身体状态一样，仪器也得经常保养，这样才能保证它一直发挥出最佳性能。
还有哦，数据分析也是个关键环节。
这就像是比赛结束后看成绩一样，得仔细分析每个数据的意义，从中找出我们需要的信息。
可不能马虎大意，不然就白忙活一场啦！总之呢，液相色谱质谱联用法是个非常强大但又需要我们精心对待的技术。
它能帮我们解决很多难题，让我们对各种物质有更深入的了解。
只要我们认真对待，就像对待我们最宝贝的东西一样，它一定能给我们带来意想不到的惊喜！所以呀，还等什么呢，赶紧去和这个超级侦探好好合作吧！。
液相色谱-质谱联用仪原理
液相色谱-质谱联用仪原理液相色谱-质谱联用仪（LC-MS）是一种结合了液相色谱（LC）和质谱（MS）的分析技术，用于分离、识别和定量分析复杂样品中的化合物。
它的原理如下：1.液相色谱（LC）：LC是一种基于溶液中化合物的分配行为进行分离的技术。
样品通过液相色谱柱，在流动相（溶剂）的作用下，不同的化合物会以不同的速率通过柱子。
这样，样品中的化合物就可以被分离出来。
2.质谱（MS）：质谱是一种分析技术，通过测量化合物的质荷比（m/z）和相对丰度来确定化合物的分子结构和组成。
在质谱中，化合物首先被电离形成离子，然后通过一系列的质量分析器进行分离和检测。
3.LC-MS联用原理：LC-MS联用仪将液相色谱和质谱相连接，使得从液相色谱柱出来的化合物可以直接进入质谱进行分析。
联用仪的关键部分是接口，它将液相色谱柱的流出物引入质谱。
接口通常采用喷雾电离技术，将液相中的化合物通过气雾化形成气相离子，并将其引入质谱。
常见的接口类型包括电喷雾离子源（ESI）和大气压化学电离（APCI）等。
4.分析过程：样品首先通过液相色谱柱进行分离，不同的化合物进入质谱前的接口。
接口中的喷雾电离源将液相中的化合物转化为气相离子，并将其引入质谱。
在质谱中，离子会根据其质荷比通过一系列的分析器进行分离和检测，最终生成质谱图谱。
质谱图谱提供了化合物的质荷比和相对丰度信息，可以用于确定化合物的结构和组成。
液相色谱-质谱联用仪的原理使得它能够在分离的同时对样品进行快速、高效的分析。
它在生物医药、环境监测、食品安全等领域具有广泛的应用，可以帮助科学家们解决复杂样品中的化学分析难题。
液相色谱-质谱联用技术
液相色谱-质谱联用技术液相色谱-质谱联用技术（LC-MS）是一种结合了液相色谱和质谱两种技术的分析方法。
它通过液相色谱的分离能力和质谱的物质鉴定能力，可以同时获得化合物的分离和结构信息，适用于复杂样品的定性和定量分析。
液相色谱（LC）是一种基于不同化合物在液相中的分离速度差异来分离化合物的方法。
它具有高分离能力、高选择性和易于操作等特点，广泛应用于生物、制药、环境和食品等领域。
液相色谱的核心是通过固定相和流动相之间的相互作用来实现化合物的分离。
而质谱（MS）则是一种基于化合物的质量与电荷比（m/z）来确定化合物结构和组成的方法。
质谱利用化合物在质谱仪内的质荷比来生成化合物的质谱图谱，从而实现化合物的鉴定和定量分析。
LC-MS联用技术的基本原理是将液相色谱与质谱相连接，通过在液相色谱柱出口处将待分析的化合物分子引入质谱仪中进行分析。
这样一来，通过液相色谱对样品进行分离，可以避免复杂样品矩阵的干扰，并使待分析化合物逐一进入质谱仪进行离子化和探测。
质谱仪将产生的质谱信号转化为质谱图谱，进而进行化合物的鉴定和定量分析。
整个过程中，液相色谱和质谱的运行参数需要相互匹配和优化，以保证良好的分离效果和质谱信号。
LC-MS联用技术具有许多优点。
首先，它能够提供化合物的分离和结构信息，有效地应对样品复杂性的挑战。
其次，它能够对目标化合物进行快速定性和定量分析，为化合物的鉴定和生物活性评估提供支持。
此外，LC-MS联用技术还具有高灵敏度、高选择性和高分辨率的特点，可以检测并鉴定一些浓度较低的化合物，如药物代谢产物和生物标志物。
此外，LC-MS联用技术还适用于多种化合物类别的分析，如有机物、无机物、生物大分子和药物等。
在实际应用中，LC-MS联用技术被广泛用于药物研究和开发、环境监测、食品安全和生物科学等领域。
例如，在药物研究中，LC-MS联用技术可以用于药物的代谢研究、药物动力学研究、药物质量控制和药物残留分析等。
液相色谱—质谱联用
液相色谱—质谱联用来进行物质分离的实验一、实验目的1.了解液相色谱—质谱联用的基本原理；2.掌握液相色谱—质谱联用时的操作步骤及实验方法；3.学习分析色谱图和质谱图。
二、实验原理利用不同的物质在固定相和流动相中具有不同的分配系数，当两相作相对位移时，使这些物质在两相间进行反复多次分配，使得原来微小的分配差异产生明显的分离效果，从而依先后次序流出色谱柱，以此来达到分离多种物质的目的。
然后依次流出的物质进入质谱中被打碎成为各种离子而被检测到。
以此达到分离的目的。
三、实验仪器和材料高效液相色谱仪及质谱仪（见下图）、甲醇、水、TADB（相对分子量516）、TAIW（相对分子量336）、色谱柱四、实验步骤1.将待分离的两种物质的混合物配成溶液加入到2号样瓶中去；2.启动联机软件，在四元泵模块的空白处右键单击，在弹出的“方法”选项中编辑好流动相和流速，点击确定，以使体系过渡到目标状态，直到压力稳定为止；3.进入“方法”菜单，“编辑完整方法菜单”，按照“方法参考”进行编辑（“方法参考”中的参数编辑完成后继续进行编辑，编辑质谱的相关参数：选择正负极及电压等），编辑完成后再次进入“方法菜单”，选择“方法另存为”命名后点击“确定”进入“序列”菜单，“序列表菜单”，然后编辑样品瓶位置为1号、样品名称、使用方法、进样次数、数据文件、进样量，确定后再次进入“序列菜单”的“序列参数”菜单，再选择文件夹，确定；4.方法编辑完成且压力稳定后，点击进样器左上方的“序列/开始序列”按钮，进行测试，等待测试完毕，点击停止按钮。
然后进入“脱机”软件，查看积分测试报告。
五、实验结果及分析实验时的液相色谱条件统一为：70%的甲醇，流速0.4ml/min，进样量1ul，波长230nm，测试时间15min。
在正极性条件下：在负极性情况下：由图中信息可以看出有337、359、和517、539这些峰，正好比TAIW （336）和TADB（516）的分子量多1、23，也就是多加了一个氢离子和钠离子，符合实验预测，可以证明实验所测物质就是TAIW和TADB，实验达到了分离的目的。
液相色谱-质谱联用仪的原理及应用
要点二
多组学分析
未来，液相色谱-质谱联用技术将更 多地应用于多组学分析，如代谢组学 、蛋白质组学等。这些分析需要高通 量、高灵敏度和高准确性的技术支持 ，为液相色谱-质谱联用技术的发展 提供了新的机遇。
要点三
临床医学应用
液相色谱-质谱联用技术在临床医学 领域的应用将不断增加，如疾病诊断 、药物代谢研究等。这些应用需要快 速、准确和可靠的分析方法，为液相 色谱-质谱联用技术的发展提供了新 的挑战和机遇。
更灵敏的检测器
质谱检测器的灵敏度不断提高，将使得液相色谱-质谱联用技术能 够检测到更低浓度的分析物，提高分析的准确性和可靠性。
自动化和智能化
随着自动化和人工智能技术的不断发展，液相色谱-质谱联用仪的 操作将更加简便，数据分析将更加快速和准确。
未来挑战与机遇分析
要点一
复杂样品分析
随着生命科学、环境科学等领域的不 断发展，对复杂样品的分析需求将不 断增加。液相色谱-质谱联用技术需 要不断提高分离效能和检测灵敏度， 以满足这些领域的需求。
广泛的应用领域
LC-MS在化学、生物、医学、环境等领域 中具有广泛的应用，如药物分析、代谢组 学、蛋白质组学、环境污染物分析等。
高灵敏度
质谱技术具有高灵敏度，可以对痕量组分 进行检测。
高通量
随着技术的发展，LC-MS已经实现了高通 量分析，可以同时处理多个样品。
宽检测范围
LC-MS可以检测多种类型的化合物，包括 极性、非极性、挥发性以及大分子化合物 等。
环境毒理学研究
通过液相色谱-质谱联用仪对环境中的有毒有害物质进行 分析，可研究其对生物体的毒性作用机制和生态风险。
生物医学领域应用
代谢组学研究
液相色谱-质谱联用仪可用于生物体液中代谢产物的定性和定量分析，从而揭示生物体 的代谢状态和疾病机制。
液相色谱-质谱联用法
液相色谱-质谱联用法液相色谱-质谱联用法是一种用于分离及分析化学分子中微量成分的有效方法。
它是通过在两个色谱电器仪器中，分别对原始样品进行分离和分离后的色谱物质进行定性和定量的分析，来检测微量的化学物质各自的活性分子结构的总体宏观成分。
这种方法不仅可以确定和测定样品中各自的化学成分，而且可以识别组分及其构成以及相对价值，从而得到样品中具体原子和分子的结构信息。
液相色谱-质谱联用法是将液相色谱仪和离子化质谱仪相结合，来分析及鉴定各类样品成分。
在液相色谱-质谱联用法中，液相色谱-质谱联用法是根据样品的分子量和分子结构，把它们进行加速和减速的离子化，由检测系统加以分析，从中获得原子结构的分析数据，也可以进行定量分析。
液相色谱-质谱联用法的优势在于，其能够检测分子中极为微量的成分，比传统的液相色谱能力更 is 。
它可以检测分子的总体特性、反应活性成分和相对价值。
此外，液相色谱-质谱联用法中，质谱仪可以实现样品的细微分离及进一步检测，从而可对样品中的活性分子结构和宏观成分进行定性和定量分析，从而较大限度地判断样品的复杂性、活性及特定分子键的分子结构。
液相色谱-质谱联用法在物质特性分析中的应用，可以更全面、准确的反映样品的总体特征，包括其成分的宏观构成和相对价值、以及分子结构的分布等因素。
另外，该技术也可以获得原子结构、反应活性成分及各类指标的定量数据，这在比较复杂的材料及生物样品中特别有用。
液相色谱-质谱联用法作为一种新兴的分析技术，已广泛应用于食品及制药行业的科学研究，以及汽车、矿山、石油等工业应用。
由于它可以更准确快速地反映样品的化学组成及分布，它也被广泛应用于药物开发、气体分析、生物分析、环境分析等多个领域中，帮助人们更好更准确地分析样品成分，由此发现新物质，为新药物开发和新产品开发提供理论依据。
液相色谱 - 质谱联用法既能够检测出样品中的微量成分，又能够检测出样品中构成其特性和反应活性成分的结构，使更复杂的物质特征分析变得更加可靠准确。
液相色谱-质谱联用仪的工作原理
液相色谱-质谱联用仪的工作原理液相色谱- 质谱联用仪，这听起来就很高级的家伙，到底是咋工作的呢？咱先来说说液相色谱这部分。
液相色谱就像是一个超级分拣员。
想象一下，你有一堆混合在一起的小珠子，有红色的、蓝色的、绿色的，它们全都混在一个大盒子里。
液相色谱干的事儿呢，就是把这些混在一起的东西给分开。
它有一个流动相，这流动相就像是一条小河，那些混在一起的东西就在这条小河里流动。
而液相色谱柱就像是河道里那些弯弯曲曲的石头和障碍物。
不同颜色的珠子（其实就是不同的化合物啦）在这个河道里流动的时候，因为它们和那些石头（液相色谱柱里的固定相）的相互作用不一样，所以它们在河道里走的速度就不一样。
有些珠子可能特别容易被石头挡住，走得就慢；有些珠子不怎么受石头影响，就跑得比较快。
这样，原本混在一起的珠子就慢慢被分开了，沿着小河一个一个地流出来。
那质谱这边呢？质谱就像是一个超级侦探，专门负责给每个从液相色谱里出来的小珠子（化合物）做身份鉴定。
当化合物从液相色谱柱出来，进入质谱仪的时候，质谱仪就开始施展它的魔法了。
它首先会给这个化合物来点“刺激”，让这个化合物带上电荷，变成离子。
这就好比是给这个小珠子贴上一个特殊的标签，这样就方便识别它了。
然后呢，这些带了电荷的离子就会被电场加速，就像一群被驱赶的小羊，跑得飞快。
接着，它们会进入一个磁场区域。
在磁场里，这些离子就像是被一阵风吹着的风筝，不同质量和电荷的离子会按照不同的轨迹飞行。
质量小、电荷多的离子可能就飞得比较弯，质量大、电荷少的离子飞得就比较直。
最后，这些离子就会打到探测器上，探测器就会记录下每个离子的信息，就像侦探记录下每个嫌疑人的特征一样。
根据这些信息，我们就能知道这个化合物是什么了，它的分子量是多少，结构大概是什么样子的。
把液相色谱和质谱联用起来，那可真是强强联合。
液相色谱先把混合物里的化合物一个个分开，就像把一群混在一起的小动物按照种类分开，然后质谱再对每个单独的化合物进行身份鉴定，就像给每一种小动物都取个名字，还知道它的来历和特点。
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2、 色谱分类
按流动相主要可分为气相色谱和液相色谱
3、气相色谱和液相色谱的比较
气相色谱 1、只能分析挥发性物质，约20%的 化合物 2、不能用于热不稳定物质的分析 3、可得到很高的柱效 5、流动相为气体，无毒、易处理 6、仪器制造难度较小 高效液相色谱 几乎可以分析各种化合物 可用于热不稳定物质的分析 柱效不会很高 流动相有毒，费用较高 仪器制造难度较大
五、几种常用的计算办法
1. 归一化法
若n个组分全部出峰，则i组分的百分含量wi(%)为：
mi mi wi 100% 100% m m1 m2 m3 ... mi ... mn Ai fi 100% A1 f1 A2 f 2 .....Ai fi ... An f n
2. 外标法： 以欲测组分的纯物质来制作标准曲线。
mi f i Ai
Ai
mi
3.内标法
将一定量的，纯物质作内标物，加入到准确称量的 试样中，根据被测物和内标物的质量，及其在色谱峰上 的峰面积比，求出某组分的含量。 原理：若试样中组分质量为mi ,质量分数为wi , 在其中加 入质量为ms的内标物，试样质量为m,则
流动相
A+B+C C B A C B A C
B
A
C B C
图11-1
色谱洗脱原理图
A+B+C C B A C B A C B A
C B
C
信 号 A B C t，min
图11-1 色谱洗脱过程与色谱图
三. 色谱图的特征值
tR
检测信号
tM
时间t
图11-1 色谱图中的相关参数
四、 色谱的定性和定量分析
内标物的选择： * 试样中不存在 ** 峰保留时间较接近，但与组分完全分离。 ***与组分的物理化学性质接近，有利于操作条件变化时， 被测组分和内标物的面 f i ms m A f Af m wi i 100% s s 100% i i s 100% m m As f s m
mi f i Ai ms f s As
mi Ai f i Asf s ms Ai f i mi ms As f s Ai f i ms mi As f s Ai f i m s wi 100% 100% 100% m m As f s m
一般以内标物为基准，fs=1, 则上式可简化为：
1、定性分析(Qualitative Analysis)
定性分析的依据： 1）组分保留时间或保留体积 2）色谱技术与其它技术连用。 气相色谱--质谱检测器（GC-MS） 高效液相色谱--紫外二极管阵列检测器 --红外光谱检测器（HPLC-IR --质谱检测器（LC-MS） *通过与标准化合物相比较，判断该物质是存在或不存在。
2、定量分析(Quantitative Analysis)
1）用峰高定量 必须保证在改变色谱条件下峰形不变化。另 外，峰高必须与样品的浓度成正比。 可变的条件如柱温，流速和进样体积必须精 确控制。此外，也应避免加样量的超载。 2）用峰面积定量 峰的展宽对定量结果没有影响，常用计算机 辅助积分计算。
Ai f i ms mi As f s Ai ms wi 100% 100% f i 100% m m As m
* 只需测量试样中的几个组分，试样所有组分不能全部 出峰时，可采用此法。 * 由于是通过测量被测物和内标物在色谱峰上的峰面积 比值来进行计算的, 因而由于操作条件变化而引起的误差， 都将同时反映在被测组分和内标物的面积上，所以可以 得到较准确的结果。
液相色谱-质谱联用 分析实习
分析测试中心
一、高效液相色谱概述
1、色谱分析的特点和优点：
1）分离度高：分离效率远大于其他分离技术如蒸馏、
萃取、离心等方法 2）应用范围广：几乎可以用于所有化合物的分析 3）分析速度快： 4）样品用量小：
5）灵敏度高
6）分离和测定一次完成（和光度法、电化学检测） 7）易于自动化，可在工业流程中使用
二、色谱分离的基本原理
使混合物中各组分在两相间进行分配，其中一相是
不动的，称为固定相，另一相是携带混合物流过此固定 相的流体，称为流动相。当流动相中所含混合物经过此 固定相时，就会与固定相发生作用。由于各组分在性质 和结构上的差异，与固定相发生作用的大小强弱也有差 异，因此在同一推动力的作用下，不同组分在固定相中 的滞留时间有长有短，从而按先后不同的次序从固定相 中流出。流出的物质用相应的检测器进行检测。
若称量同样量的的试样，加 入恒定量的内标物，此时
f i ms 100% 为常数此时： fs m
Ai wi 常数 100% As Ai As
wi
六、HPLC的应用
1. 药学
2. 植物学
3. 环境检测
4. 食品分析 5. 化工
6. 临床、药物代谢