医学生开题报告范文
医学开题报告模板(通用12篇)

医学开题报告范文模板医学开题报告范文模板大学生活将要谢下帷幕,学生们就要开始做毕业设计了,而做毕业设计前要先写开题报告,开题报告应该怎么写才好呢?以下是小编为大家收集的医学开题报告模板(通用12篇),仅供参考,希望能够帮助到大家。
医学开题报告1(一)选题背景随着科学技术的日新月异和生活水平的迅速提高,人们对于身体健康保障的要求越来越高。
当病人突出心脏病、脑溢血、低血糖、癫痫病等突发性疾病时,病人的生命安危将在很大程度上决定于病人能否在最短时间内得到有效的救助。
由此自然促进了急救业务的发展和常用急救知识的普及。
但是在国内,整个急救体系还处于起步阶段,存在的很多隐患可能在病人突发症病后影响急救效率。
例如,如果一个心脏病人在路边散步时突然发病倒在路过该怎么办?打电话?如果附近没有公共电话呢?找人帮忙?一旦被非专业人员错误处理,导致延误治疗很可能弄巧成拙。
打车送医院?资料表明,当病人心跳停止后5-10min脑细胞就开始死亡。
换句话说:在这种情况下必须要让专业急敌人员尽快到场才能保证病人的生命安全。
从这个角度进行思考,我提出了这么一个设想:能不能设计一种装置使得病人因突然发病而跌倒到医生赶到救治的过程得到尽快的简化呢?我在专利局查阅有关资料之后,发现国内目前尚没有此类产品的设计。
一个类似创意的设计是:在一个瓶子内设置两个金属接点,瓶子内部灌一些水银。
当人站立时,水银集中在一个接点处,电路断开。
当人倒地时,瓶子的倾斜使水银同时接触到2个接点,电路被触发,瓶子内置的警报器发出警报,示意求助。
这个设计显然是很粗糙的。
(1)它只是通过身体倾斜的角度来决定是否报警,而不是按照真正的生理状况,必然会出现很高的误报率。
(2)它无非是在最短时间内引起了别人注意,却并没有使整个过程简化,所以对于提高救护效率不会起到实质影响。
结合我自己的设想和现有设施的缺陷,我希望做出一套“倒地后急救体系”:当病人倒地之后,用一个监测装置感知病人诸如血压、脉搏等生理状况并进行数值分析。
2023最新-医学开题报告【优秀7篇】

医学开题报告【优秀7篇】在日常生活或是工作学习中,大家都听说过或者使用过一些比较经典的灯谜吧,灯谜增添节日气氛,展现了古代汉族劳动人民的聪明才智和对美好生活的向往。
你知道民间灯谜都有哪些吗?以下内容是壶知道为您带来的7篇《医学开题报告》,亲的肯定与分享是对我们最大的鼓励。
医学开题报告篇一医学开题报告范文模板立论依据(包括研究意义、国内外研究现状分析,并附主要参考文献及出处)对基础研究,着重结合国际科学发展趋势,论述本课题的科学意义;对应用基础研究,着重结合学科前沿、围绕国民经济和社会发展中的重要科技问题,论述其应用情景。
研究意义:新生儿坏死性小肠结肠炎(NEC)是新生儿时期严重威胁生命的消化系统急症,以早产儿、小于胎龄儿发病者较多,在NICU患儿中的发病率高达10%,是早产儿死亡的重要原因之一。
临床以腹胀、腹泻、黏液血便和胆汁样呕吐为主要表现,腹部X线平片以肠壁囊样积气为特征,肠道病变范围可局限或广泛,回肠累及最多,黏膜呈凝固性坏死,粘膜下层弥漫性出血或坏死,严重者肠壁全层坏死甚至穿孔。
目前有很多方法用于诊断NEC。
除了可以根据临床表现诊断外,腹部X线片是最常用的辅助检查方法,虽然其用于诊断NEC 的特异度较高,但对于早期诊断NEC帮助不大,目前也有很多关于IL-8、IL-10、IL-1受体拮抗剂等生化指标用于诊断NEC的研究,但缺乏较好的用于早期诊断NEC的血生化指标。
TLR是由Nomuria等在哺乳动物体内发现与果蝇Toll蛋白相似的一种蛋白。
TLR在不同细胞的表达和识别不同细胞因子在多种疾病的发病机制中起重要作用,目前研究发现TLR参与肿瘤、肠道免疫性疾病等多种疾病的发病。
在人类体内发现的TLR家族共有10个成员,其中TLR4是近年来研究较多的其中一个,TLR4主要表达在内皮细胞、巨噬细胞、中性粒细胞及DC上。
I-FABP是由小肠单层柱状上皮细胞分泌的一种小分子蛋白质,占成熟的细胞基质蛋白的2%。
开题报告范文医学

开题报告医学开题报告,就是当课题方向确定之后,课题负责人在的基础上撰写的报上级批准的选题计划。
下面给大家分享几篇开题报告医学,一起看一下吧!开题报告医学篇1论临床医学检验的现状及趋势几十年,我国的临床医学取得了稳健并且快速的,随之一起的循证医学也在临床医学中起到了应用。
而临床检验学科已经从医学检验向检验医学,检验科不再是以往的辅助科室,其渐渐的在与临床相关联,已经成为一门的学科.医学检验是一门运用科学的现代物理化学知识和手段进行医学诊断的学科,其主要研究如何运用科学的实验技术和先进的设备为临床诊断和治疗提供依据。
医学检验涉及了基础医学、生物化学、临床医学、管理学等诸多的科目,运用这些学科可以快速的准确的为疾病提供诊断的确实依据,是现代医疗工作中所不可缺少的一个环节.我国检验医学的现状近年,我国的临床医学检验教育得到了飞速的,20世纪50年代初期,我国便在中专卫生学校开设了医学检验的专业,借此培养初级、中级医学检验相关人才.1983年有相继在高等医学院校设置了本科医学检验的专业,并为我国培养出大批的医学检验相关高等人才。
直至今日,我国的医学检验相关人才的培养体系已经初步完成,了一套专业的人才培养渠道.现已经了目标确,具有普通检验本专科、硕士和博士研究生(医学科学学位)、本硕连读七年制(医学专业学位)、检验本专科、高职检验本专科等层次齐全、形式多样的教育体系.这种完善的人才培养体系,为我国临床检验医疗事业培养出了大批的优秀人才,并使得临床检验人员的基本素质得到了普片的提高。
我国的质量控制管理体系起步较晚,但部分学科以及了较为合理的质控体系。
目前,分析前质控、分析中质控和分析后质控都取得了一定程度的良好,其已经可以基本的保证结果的准确性和可比性。
同时随着深化和经济增长,我国也在大力的运用国际信息技术交流,学习和引进医疗发达国家的先进专业技术和检验设备.我国临床医学检验中存在的主要问题资管理的不合理目前,许多医院的资管理工作做得不好,其具体体现在人员编配不合理(存在部分岗位人员配置过多或过少的情况)和医疗设备的编配不合理。
医学类开题报告范文

医学类开题报告范文医学类开题报告范文摘要:本文旨在探讨医学领域中的一个重要问题,并提出一个可行的研究方案。
通过对该问题的深入研究和分析,我们希望能够为医学领域的发展做出一定的贡献。
1. 引言医学作为一门重要的学科,一直以来都在不断发展和创新。
然而,随着社会的进步和科技的发展,医学领域面临着越来越多的挑战和机遇。
因此,有必要对医学领域中的某个问题进行深入研究,以期找到解决方案。
2. 问题描述在医学领域中,患者的疼痛管理一直是一个重要的问题。
疼痛是一种身体或心理上的不适感,可以严重影响患者的生活质量。
目前,虽然有各种各样的疼痛管理方法,但仍然存在一些挑战。
例如,一些药物可能会产生副作用,而其他方法可能不够有效。
因此,我们有必要研究并寻找更好的疼痛管理方法。
3. 目标和研究问题本研究的目标是探索一种新的疼痛管理方法,以提高患者的生活质量。
具体而言,我们将研究以下问题:- 这种新方法是否比传统方法更有效?- 这种新方法是否会产生更少的副作用?- 这种新方法是否适用于不同类型的疼痛?4. 研究方法为了回答上述问题,我们将采用以下研究方法:- 文献综述:我们将对相关文献进行综述,以了解目前已有的疼痛管理方法,并分析它们的优缺点。
- 实验设计:我们将设计一项实验,招募一定数量的患者,并将他们随机分为两组。
一组接受传统疼痛管理方法,另一组接受新的疼痛管理方法。
然后,我们将比较两组患者的疼痛程度和生活质量。
- 数据分析:我们将使用统计方法对实验结果进行分析,并得出结论。
5. 预期结果和意义我们预计,新的疼痛管理方法将比传统方法更有效,并且会产生更少的副作用。
此外,我们还希望发现这种新方法适用于不同类型的疼痛。
如果我们的研究结果证实了这些假设,将对医学领域的发展具有重要意义,能够为患者提供更好的疼痛管理方案。
6. 计划和时间安排我们计划在接下来的一年内完成这项研究。
具体的时间安排如下:- 第一季度:进行文献综述,了解已有的疼痛管理方法。
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关于医学开题报告范文关于医学开题报告范文篇1选题背景和意义选题背景几十年来,在计划经济体制下,我国医疗服务属福利化范畴;医疗服务市场化是在宏观的市场化改革推动下进行的。
随着医疗体制改革的不断深入,医疗服务具有市场的性质已是不争的事实。
加入WTO以后,医疗市场逐渐开放,民营医院的迅速崛起,中外合资合作医院的建立,医疗市场竞争日趋激烈。
作为省会城市,郑州除了省市各级医疗机构之外,还有很多不同种类的专科医院和专家门诊,近年来,郑州市医疗卫生行业更是进入快速发展阶段,目前医院总数已经达到300余家。
作者在大三学习期间,承担了河南省中医院服务营销管理的研究,本文从服务质量差距模型的角度,对医院服务营销存在的问题及应对策略进行分析。
选题意义现实意义通过对河南省中医院200名患者服务满意度调查,围绕就医环境、技术水平、服务态度、服务效率、服务收费、医德医风等6方面的分析,客观公正地收集患者及家属对医院各方面的意见和建议,从而为科室考核、医院的管理和发展提供可行的依据。
理论意义河南省中医院作为一家集医疗、教学、科研为一体的现代化综合性三级甲等中医院,目前在郑州市医疗行业属上游位置,通过对其服务质量差距模型的分析,探究服务质量差距产生的原因,并寻求应对的措施,使每一位医务工作者都树立强烈的市场意识、服务意识、竞争意识和营销意识,在全院建立起医疗服务营销模式,不但对自已是一个提高,同时也对河南省其他医院的发展作出应有的贡献。
国内外相关研究综述目前国际上比较流行的是以下三种模型,当然在服务营销领域,这三种理论模型并非全部,其它学者还提出了很多其它的理论模型,但这三种是最具影响和代表意义的,因为这三种模型无一例外地将研究的重点放在面对面的服务体验上。
服务体验及其构成要素任何服务体验都由四个要素构成:1)服务员工;2)服务设施;3)服务顾客;4)服务过程。
尽管各种服务体验都包括这四种要素,但四要素对服务体验的贡献程度却因服务而异。
2023年医学毕业设计开题报告学习范文

2023年医学毕业设计开题报告学习范文一、研究背景本研究旨在探讨XXX领域的问题,针对该领域的现有挑战和需要解决的难题展开深入研究。
XXX是一个关键领域,对社会发展和人类健康至关重要。
然而,目前在该领域内还存在一些未解决的问题,因此本研究将围绕这些问题展开。
二、研究目的本研究的主要目的是解决XXX领域中的问题,并提出相应的解决方案。
通过深入研究和分析,我们希望能为该领域的发展和进步贡献一份力量。
三、研究方法本研究将采用多种研究方法,包括文献综述、实地调查和数据分析等。
通过收集大量的数据和资料,我们将对XXX领域中的问题进行系统性分析,并提出相应的解决方案。
四、预期成果通过本研究,我们期望能够获得以下成果:1. 深入了解XXX领域的问题和挑战;2. 提出解决问题的创新方案;3. 推动XXX领域的发展和进步;4. 提供给相关从业人员和决策者的参考和借鉴。
五、研究计划本研究计划分为以下几个阶段:1. 文献综述:对XXX领域的相关文献进行系统梳理和分析,了解研究领域的前沿动态和现有成果;2. 调研设计:根据问题的实际情况,进行实地调研和问卷设计,收集数据和意见;3. 数据分析与结果呈现:对收集到的数据进行分析和统计,得出结论并形成报告;4. 结果讨论与解决方案:根据数据分析结果,进行讨论和总结,提出解决问题的方案;5. 论文撰写与答辩准备:根据研究成果撰写毕业论文,并进行答辩准备工作。
六、研究意义本研究的意义在于解决XXX领域的问题,为相关从业人员和决策者提供参考和借鉴,推动该领域的发展和进步。
通过本研究的成果,我们可以为社会和人类健康做出贡献。
以上是对2023年医学毕业设计开题报告的学习范文的简要介绍,希望对您的研究有所启发。
医学毕业论文开题报告范文(精选3篇)

医学毕业论文开题报告范文第1篇分析化学是一门实践性非常强的专业,因此实验在其中占据着重要意义。
教学的开展离不开实验教学,在实验教学中学到更多实践知识,动手能力与实际操作能力也会随之获得提升。
而随着科学技术的发展,大量的新型仪器以及检验技术相继出现,医学检验专业对学生动手能力的要求也会越来越高,学生只有同时兼具高实验操作技能、较高的理论水平、独立设计医学实验的能力以及较强的分析问题能力才能成为时代所需要的医学检验人才。
由此,在医学检验专业的日常教学活动中,需要重视实验教学、利用实验教学来提升整体教学质量,让医学检验专业的学生在掌握牢固理论知识的同时可以同时获得实践机会,提升实践操作能力。
此外,需要注意的是,在教学过程中,教师还需要纠正学生只重视医学部分内容而忽视化学部分内容的不正确思想,全面巩固基础知识,以免由于知识的漏洞而影响到实验教学的效果。
强化医学检验专业分析化学教学效果的措施1、在教学内容方面,抓住重点,积极进行总结和归纳。
医学检验的学生在学习分析化学之前就已经学习过相关的医用基础化学课程,教师只需要将教学内容梳理一次学生就会明确自己薄弱以及所需要掌握的地方。
然后教师可以针对性地对重点内容进行讲解,节省教学时间。
分析化学所涉及的内容包括数学统计以及化学等,都属于比较复杂的内容,并且会出现比较多的公式。
因此,教师在教学过程中需要善于归纳,将相似内容总结在一起,让学生可以更快记住重点内容。
比如在计算弱酸性体系的分布系数时,涉及到的公式比较复杂,教师可以通过其中发掘规律的方式为学生找出便于记忆的方法:公式中的分母是按照氢离子浓度降幂的顺序排列的,分子则取决于型体中所含氢的个数。
抓住这样的规律之后学生就可以更快并且更深刻地记住计算公式。
2、在教学模式方面,多种教学模式相结合,丰富课堂。
在教学模式方面,教师可以在确保教学质量的基础上加强与学生之间的互动。
以讲授为主,同时结合谈论、提问、小论文以及习题课等辅助手段让学生的思考成为教学中心,激发学生的创造性思维,让学生感受到学习的乐趣并逐渐取得进步。
医学毕业论文开题报告

医学毕业论文开题报告医学毕业论文开题报告一、选题背景医学作为一门综合性的学科,涉及到人类健康和生命的方方面面。
随着社会的发展和人们对健康的关注度增加,医学领域的研究也日益深入。
作为一名即将毕业的医学生,我深感有责任在毕业论文中做出一些有意义的贡献。
二、选题意义本次毕业论文的选题是研究心脏病的早期诊断方法。
心脏病是当前世界范围内的主要健康问题之一,对人们的生活和健康造成了很大的威胁。
早期诊断是治疗心脏病的关键,因此研究心脏病的早期诊断方法具有重要的临床意义。
三、研究目的本次研究的目的是探索一种新的心脏病早期诊断方法,以提高早期诊断的准确性和敏感性。
通过对心脏病患者的临床数据进行分析和比对,寻找出一些与心脏病相关的指标和特征,建立相应的诊断模型,为早期诊断提供科学依据。
四、研究方法本次研究将采用回顾性研究和前瞻性研究相结合的方法。
首先,我们将收集一定数量的心脏病患者的临床数据,包括病史、体征、实验室检查结果等。
然后,通过数据分析和统计学方法,筛选出与心脏病相关的指标和特征。
最后,建立相应的诊断模型,并对该模型进行验证和评估。
五、预期结果通过本次研究,我们预期能够找到一些与心脏病早期诊断相关的指标和特征,建立一种准确性和敏感性较高的诊断模型。
这将有助于医生在早期发现心脏病,提高治疗效果,减少患者的痛苦和死亡率。
六、研究局限性本次研究也存在一些局限性。
首先,由于时间和资源的限制,我们只能选择一部分心脏病患者进行研究。
其次,由于心脏病的病因复杂多样,可能存在其他未考虑到的因素对早期诊断的影响。
最后,由于个体差异的存在,诊断模型在不同人群中的适用性可能会有所不同。
七、研究意义本次研究的意义在于提供一种新的心脏病早期诊断方法,为临床医生提供科学依据,帮助他们更早地发现和治疗心脏病。
同时,本次研究还有助于加深对心脏病发病机制的理解,为心脏病的防治提供新的思路和方法。
八、研究计划在接下来的研究中,我们将按照以下步骤进行:1. 收集心脏病患者的临床数据,包括病史、体征、实验室检查结果等。
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医学生开题报告范文
开题报告是学位论文的一个总体规划和设计,是监督和保证学位论文质量的先决条件下面是店铺为大家带来的医学生开题报告范文,仅供参考。
医学生开题报告范文1:
摘要:高等医学院校担负着培养适合于国家未来发展需要的医学生的重任,通过提高医学生的职业素质,使其具备精益求精的医疗技术和高尚的医德医风,在医务工作中做到尽职尽责,成为让人满意的医务工作者。
关键词:医学生职业素质培养
高等医学院校的使命在于结合自身的特点发挥优势,培养适合于国家未来发展需要的医学生,同时做好社会服务,拓宽发展空间,为社会发展、卫生建设作出贡献。
职业素养是大学生成长的根基,需要大学与社会协作加强医学生职业素质教育。
职业素质是指职业内在的规范和要求,是在职业过程中表现出来的综合品质,包含职业道德、职业技能、职业行为、职业作风和职业意识等方面。
作为一名合格的医务人员不仅要有精益求精的医疗技术,更要有高尚的医德医风,这样才能做到履职尽责,让患者满意。
根据我国医疗环境和医学专业教育的特点,通过引导医学生对职业的认同,加强医学生思想道德素质、科学文化素质、业务技能素质和心理素质的培养,从而促进医学生职业素质的形成。
医学生职业素质培养作为大学生思想政治教育工作的重要内容,要紧密联系时代特点和社会要求,不断改善工作方式方法,使医学生职业素质教育符合思想政治教育要求。
一、培养医学生职业素质的重要性
1.加强医学生职业素质是适应社会发展的必然要求
医生这一职业所需要的知识和技能处于不断发展和变化中,只有通过自身不断地学习才能获得新理论、新技术和新方法。
培养医学生职业素质就是要提高学生不断学习、适应社会发展的能力,而不是局
限于现有的知识和能力。
高超的医疗技艺和高尚的医德品质不是与生俱来的,而是要靠后天实践中不断地逐渐培养和锻炼。
当前社会快速发展,作为一名医学生要能跟上时代的步伐,通过不断地学习,掌握新知识、新技术,满足社会的发展和人民的需求。
2.良好的职业素质是医学生的必备品质
职业素质决定着医学生未来的发展,也是用人单位在录用新人时最为看重的品质。
良好的职业素质可以帮助医学生了解自己的优势和不足,根据自身情况合理规划职业生涯,并通过学习不断完善自己,接受医学前沿知识,提高临床技能,得到全面健康发展。
医学生通过培养良好的职业素质,明确自身的责任和义务,使自己在人生观、价值观、职业观等方面保持积极的态度,从而在工作中做到爱岗敬业、诚实守信和团结协作。
3.培养医学生职业素质是适应就业的需要
选择医学既是学生对未来发展方向的确定,也是出于改善家庭经济状况的目的。
面对日益严峻的就业形势,找份理想的工作是学生和家长的共同期望。
如何面对激烈的就业竞争,一方面需要学校为学生提供职业训练,提升学生就业竞争能力;另一方面需要学生努力学习,掌握知识技能,增强自身实力。
通过双方共同努力,帮助学生适应社会成功就业,使大学生完成从学生到职业者的转变,成为一名具备优秀职业素质的医生。
二、加强医学生职业素质的主要途径
1.设置职业指导课程
结合医学生的特点,开展从一年级到五年级的就业指导课程,明确教育目标,突出教育特点,逐步实施教学计划。
在大学一年级开设职业生涯规划课,使学生认识医学专业的特点,合理规划自己的未来,学会搜集相关专业的就业信息,根据自身情况和社会需求确定自己的职业发展方向。
在大学二年级开设以职业为导向的基础课,学习医学伦理、医护礼仪、医务人员执业法律知识等课程,从职业态度和职业能力方面培养医学生。
在大学三、四年级开设与专业相结合的特色课,如就业心理培训、求职技巧等,培养医学生积极向上的择业观。
在大
学五年级进行综合训练,在学生实习过程中配备就业指导老师,在实习岗位上进行临床技能的培养和锻炼,满足用人单位要求。
2.培养医学生的职业意识
职业意识的培养是指通过理论学习和实践,培养医学生良好的职业行为习惯,养成高尚的职业道德,增强职业意识,提高文化科学水平和业务能力,从而适应市场要求,实现成功就业。
在新生入学时,通过主题班会的形式让大学生对自己的未来进行合理的规划。
让其认识自我,了解自己的兴趣、爱好、需要和价值观,明白自己将来想成为什么样的人,身边的环境能给予什么样的支持。
通过认知自我,了解自身的个性特征和个性倾向,客观分析自身的优缺点,结合现实环境,确定自己未来发展的方向,进一步明确自己职业发展的目标。
3.提高医学生的业务能力
医学生要掌握系统和完备的基础护理诊疗知识,这是衡量医学生职业素质的中心和基础。
作为一名医学生要不断完善自己的知识结构,扩展自己的知识范围,在工作中能够灵活运用自己所掌握的知识,将理论付诸实践。
同时,医学生还应具有刻苦钻研和积极向上的精神,在工作中不断学习和总结,努力提高自身的理论水平和业务能力。
医学生除了具备专业知识外,还要掌握其它专业学科知识,特别是人文科学和社会科学知识,从而开阔思路,拓宽视野,为做好医务工作打下坚实的基础。
当前社会和经济的发展对人才的质量提出更高的要求,高等医学院校担负着培养国家高级医学人才的重任,要不断提升医学生的职业素质,使其具备高尚的医德医风和精益求精的医疗技术。
把提升医学生职业素质作为医学教育的重点内容,使医学生自身的思维和行为与职业角色相一致,为今后更好地融入社会打下基础,实现就业,进而取得职业生涯的成功。
医学生开题报告范文2:
一、立题依据(科学意义及国内外现状分析及参考文献)
恶性黑色素瘤是一种高度恶性且最具侵袭性的癌之一,多发生于皮肤,早期发生血行转移。
对放、化疗不敏感,在世界范围内发病率
增高,人们一直在期待着可以征服恶性黑素瘤的新的疗法的出现!
最近大量的数据表明恶性肿瘤的发展与T-钙粘蛋白的表达变化相关.T-钙粘蛋白已在乳腺癌、前列腺癌、肝癌、肺癌[1-3] 、胃癌、胰腺癌、卵巢癌[4-9]等多种恶性肿瘤中被检测到表达减少.最近的研究表明T/H—钙粘蛋白在乳腺癌中的重新表达能抑制肿瘤细胞的生长,降低体外培养的肿瘤细胞的侵袭潜能[1].T/H—钙粘蛋白这个新型钙粘蛋白分子在人类许多癌细胞中表达都降低表明它或许在肿瘤细胞的侵袭和转移[10]及维持正常细胞的表型中起重要作用[11].
T/H—钙粘蛋白与肿瘤的发生、发展有着密切的联系,也许它会为肿瘤的诊断和治疗带来新的契机.
T-钙粘蛋白是否对恶性黑色素瘤也有作用,目前还没有相关研究的报道,所以本实验将进行相关方面的探讨性研究!
二、研究内容及预期成果(说明具体研究内容、创新点及拟解决的关键问题、预期成果及提供形式)
研究内容:
第一部分:正常表皮组织、痣细胞及黑色素瘤细胞中T-cadherin 表达情况
第二部分 T-cadherin基因克隆和真核表达载体的构建
第三部分:T-cadherin基因的真核表达及生物活性分析
创新点:首次将T-cadherin基因转染黑素瘤细胞
拟解决的关键问题:通过RT-PCR反应扩增出T-cadherin的基因全长。
预期成果及提供形式:
观察T-钙粘蛋白在正常皮肤组织细胞、痣细胞及黑色素瘤细胞中的表达情况!
进一步阐明T-钙粘蛋白作用机制
T-钙粘蛋白基因转染入黑色素瘤细胞后观察对其增殖和转移活性的抑制情况,探索临床诊断和治疗黑色素瘤及其它肿瘤的方法!
三、研究方案(包括研究方法、技术路线、研究进度安排)
研究方法:
第一部分:正常表皮组织、痣细胞及黑色素瘤细胞中T-cadherin 表达情况
免疫组织化学和免疫细胞化学
1.材料:从正常人皮肤切取的痣组织,人黑色素瘤细胞株
2.主要试剂和溶液
(1)第一抗体:兔抗人T-cadherin 抗体
(2)第二抗体:生物素标记羊抗兔IgG
(3) “三抗” :链亲和霉素标记HRP
3.设备
4.方法
(1)冷冻切片的免疫染色程序
(2)活细胞的免疫染色程序
5.荧光显微镜检
注意:为保证结果的可靠性应该同时设有对照
阳性对照(正常组织) ;
阴性对照(PBS代替一抗)以证明抗体的特异性。
第二部分 T-cadherin基因克隆和真核表达载体的构建
1.材料:
(1)组织和细胞
(2)菌株与质粒
(3)工具酶
(4)试剂
(5)仪器
2.方法
(1)引物的设计
(2)总RNA的提取:异硫氰酸胍-酚-氯仿抽提一步法
(3)甲醛变性琼脂糖凝胶电泳分析其质量,观察所提RNA有无明显降解;
(4)逆转录RT反应:为了证实RT反应的成功设管家基因GAPDH 为内对照
(5)PCR扩增:利用上下游引物,在DNA聚合酶下对目的片段进行扩增,PCR过程设β-actin为内对照
(6)PCR产物的回收、纯化
(7)PCR产物的克隆
(8)DNA序列测定
(9)真核重组表达质粒的构建
(10)阳性重组质粒的鉴定和筛选
(11)质粒的大量提取
(12)转染黑色素瘤细胞
第三部分:T-钙粘蛋白基因的真核表达及生物活性分析。