2013届高考一轮生物复习课件：2.2 动物细胞工程(人教版)
(4)单克隆抗体产生的过程由细胞融合和杂交细胞的培养两部
分组成。
【解析】(1)a的花粉基因型为Hr和hr，b的花粉基因型为hR和 hr，只有HhRr的基因组合方式没有隐性纯合基因，所以杂种细 胞HhRr能在光照强度大于800lx时生长。
(2)植物体细胞杂交形成植株，是植物细胞全能性的表现，克
服了自然条件下物种之间的生殖隔离。 (3)在单克隆抗体产生过程中细胞d是杂交瘤细胞，具备了融合
2013届高考一轮生物复习课件（人教版）
2.2 动物细胞工程
一、动物细胞培养
1.概念与操作流程
取动物相关组织块 组 织
剪 碎胰蛋白酶处理
分 散成单个细胞
单 个细胞
放人适宜培养基
细 胞悬液 原 代培养
让 细胞生长和增殖
胰 蛋白酶处理分瓶培养
传 代培养
2.条件 培养液和所有培养用具 (1)无菌、无毒：对_____________________无菌处理，添加 抗生素 _______，定期更换培养液以清除代谢产物。 血清、血浆 (2)营养：除正常的有机和无机营养外，加入____________。 36.5±0.5 ℃ (3)适宜的温度和pH：温度为_____________(哺乳动物)，pH 7.2～7.4 为__________。 5%CO2 (4)气体环境：含____的空气加_______的混合气体。 95%
2.过程
供体体细胞 细胞培养 供体细胞核
细 胞 融合
注
人
重 组细胞
卵 巢卵 母细胞
减Ⅱ
中 期
去核
无核卵母细胞
发育
胚 胎
胚 胎移植
代 孕母体
生出与供体遗传物质 基 本相同的个体
3.应用
(1)加速家畜遗传改良进程，促进优良畜群繁育。 濒危物种 (2)保护_________。
(3)生产医用蛋白。 供体 (4)作为异种移植的_____。 移植 (5)用于组织器官的_____。 【点拨】核移植过程中供体理论上是提供细胞核，但操作过程 中可以把整个体细胞注入去核的卵母细胞中去，原因是体细胞 体积相对较小，取核难度较大，另外细胞膜对核融合的障碍性
【解析】选D。克隆就是“复制”的意思，将某种瘤细胞培养成一
个细胞系属于克隆；A、B选项都属于转基因技术；C项属于细胞融 合。
3.下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是（
）
A．培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞
B．克隆培养法培养过程中多数细胞的基因型会发生改变
C．二倍体细胞的传代培养次数通常是无限的 D．恶性细胞系的细胞可进行传代培养
2.解题关键：(1)明确①→③过程是将目的基因导入受体细胞， ④的形成过程为核移植； (2)明确细胞培养在10代以内，细胞核型不会发生变化。
【解析】(1)图中形成④的过程为核移植，由重组细胞发育成
⑤的过程需经动物细胞培养。
(2)获取目的基因的方法主显微注 射法。 (3)动物组织分散成单个细胞常用胰蛋白酶处理，对卵母细胞 的去核处理一般选择在MⅡ时期。 (4)动物细胞培养时，一般不超过10代，超过10代后细胞的核 型可能会发生变化。
融合 方法 结果 纤维素酶和果胶酶 物理法:离心、电激、振动; 化学法:聚乙二醇等试剂诱导 杂种植株 克服了远缘杂交的不亲和性, 获得杂种植株
动物细胞融合
胰蛋白酶或胶原蛋白酶 除物理法和化学法外还可以 用灭活的病毒诱导 杂交细胞 突破了有性杂交方法的局限,使 远缘杂交成为可能
意义
2.单克隆抗体的制备 (1)取相应B淋巴细胞前必须先注射相应抗原，否则不能获得单
3.应用
有毒物质 生物制品的生产、检测_________、医学研究。
二、动物体细胞核移植技术和克隆动物 1.动物核移植概念 去核的卵母细胞 细胞核 是将动物的一个细胞的_______移入一个_______________中，
动 使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新胚胎最终发育为___
物个体 _______。
合基因(rr或hh)的作用，在光照强度大于800lx时都不能生长。 要想从融合细胞的培养液中分离出基因型为HhRr的杂种细胞，
较为简便的筛选方法是__________。
(2)若a、b表示两种植物体细胞，则由d细胞形成杂种植株的原 理是_________，这种育种方法的优点是__________。 (3)若a、b分别为骨髓瘤细胞和B淋巴细胞，则d细胞特点是 ____________。由d细胞产生的抗体与普通血清抗体相比较， 具有_________的特点。生产上一般不能通过直接培养B淋巴细 胞的方法生产单克隆抗体的主要原因是__________。
前两种细胞的优点，能无限增殖且产生特定抗体。而且反复筛
选的细胞d产生的抗体品质优良。B淋巴细胞能产生特定抗体， 但不能无限增殖，无法得到大量的抗体。
(4)只能注射特定抗原后才能得到特定的B淋巴细胞，再与瘤细 胞融合，经筛选后可体内培养也可体外培养以得到大量单克隆 抗体。 答案：(1)给予大于800lx的光照 (2)植物细胞的全能性
(5)桑椹胚或囊胚
动物细胞融合与单克隆抗体
1.植物体细胞杂交与动物细胞融合的比较
植物体细胞杂交
原理 细胞膜的流动性、细胞的全能性 细胞A、B
去壁
动物细胞融合
细胞膜的流动性
细胞A、B
融合
原生质体A、B
融合
过 程
融合的原生质体 杂种细胞
植物组织培养
杂交细胞
有丝分裂
多个相同杂交细胞
杂种植株
植物体细胞杂交 相 关 酶
②制备单克隆抗体时，需进行两次筛选，第一次是为了选出杂 交瘤细胞，第二次是为了获得足够数量的能分泌所需抗体的杂
交瘤细胞。
植物组织培养、动物细胞培养和核移植的比较
植物组织培养 动物细胞培养
动物组织块
剪 碎、胰 蛋 白 酶处理
核移植 供体 受体 体细胞核
导入
外植体
脱分化
细胞悬液
放 入培养 瓶
卵母细胞
去核
【典例训练1】人的血清白蛋白(HAS)在临床上需求量很大，通
常从血液中提取。但由于艾滋病病毒等的威胁与日俱增，使人
们对血液制品的使用顾虑重重。如果应用现代生物科学技术， 将人的血清白蛋白基因导入奶牛细胞中，那么利用牛的乳汁生 产血清白蛋白就会安全、高效地满足人类需求。如图是利用奶 牛乳汁生产人类血清白蛋白的图解，根据图示回答：
除目的基因外，基因表达载体还必须含有_______________
_________，将①导入③的常用方法是_________________。 (3)图中②一般经过____________处理可以得到③，从③到④的 过程中一般利用未受精的卵母细胞去核后作为受体细胞，对卵 母细胞的去核处理一般选择在_______________期进行。
【典例训练2】有性生殖的生物产生后代需进行受精作用，植 物体细胞杂交要进行原生质体的融合，单克隆抗体的制备需进
行动物细胞融合，可见细胞的融合技术有着广泛的应用。下列
为细胞融合的简略过程，据图回答相关问题：
(1)若a、b分别是基因型为Hhrr、hhRr两个烟草品种的花粉，
且这两对基因分别位于两对同源染色体上。由于受一对隐性纯
克隆抗体。
(2)细胞融合后需经二次筛选： ①第一次：在特定的选择性培养基上，未融合的亲本细胞(B淋 巴细胞和骨髓瘤细胞)和融合的具有同种核的细胞(BB融合细胞、 瘤瘤融合细胞)都会死亡，只有融合的杂种细胞(杂交瘤细胞) 才能生长。这种杂种细胞的特点是既能迅速大量繁殖，又能产 生单一的特异性抗体。
②第二次：经选择性培养的杂交瘤细胞并非都是能分泌所需抗 体的细胞(很多种杂交瘤细胞)，需经克隆化培养和抗体检测， 经筛选后才可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。
细胞的脱分化、再分化、 细胞分化、细胞癌变 分化
核融合、细胞分化
【高考警示钟】 1.植物组织培养和动物细胞培养过程都存在细胞的培养过程，
但植物细胞可以先分裂再分化，而动物细胞不分化只分裂。
2.区分原代培养和传代培养的关键是是否分瓶培养。贴壁生长 到一定程度需要用胰蛋白酶处理，然后再分瓶培养，原代培养 结束，开始了传代培养。 3.植物组织培养成的植株与提供外植体的植株完全相同，而动 物细胞核移植形成的个体与供体大部分性状相同，也有部分性 状与受体相同。
2.单克隆抗体 (1)制备: B淋巴细胞 骨髓瘤细胞
培养、筛选
灵敏度高 (2)优点：特异性强、_________，可大量制备。
运载药物 诊断试剂 (3)用途：作为_________；用于治疗疾病和_________。
【点拨】①植物细胞融合获得的杂交细胞可形成杂种植株，而
动物细胞融合获得的杂交细胞不会发育成个体。
(4)用④细胞进行培养发育成胚胎时，一般不超过_______代， 原因是________________________，此培养过程与植物细胞培 养所用的培养基有何不同？_________________________。 (5)将⑤送入⑦的最佳时期是_____________期。 【解题指南】
1.考查实质：动物细胞核移植过程、基因工程操作过程。
（4）下列各图表示单克隆抗体制备过程的各阶段图解，请用
箭头把代表各图解的字母按单克隆抗体制备过程的顺序连接起 来：__________________________________________。
【解题指南】
1.考查实质：植物体细胞杂交与单克隆抗体的制备。 2.解题关键： (1)hr是a、b产生配子中相同的配子，另外两种配子分别是Hr、 hR。 (2)两个不同的细胞形成的杂种细胞发育成植株。 (3)瘤细胞特点、B淋巴细胞特点与融合后的细胞具备的特点之 间的关系。
【解析】选D。由于细胞之间相互接触而发生接触抑制，细胞在培
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高三生物一轮复习课件细胞工程【动物】
传代培养
响外，还会发生接触抑制现象）
生 概念 原理
命 观
注意事项
念
动物细胞培养 地位 条件： 过程： 取动物组织
➢ 为什么要传代培养：悬浮培养的细胞会因细胞密度
过大、有害代谢物积累和培养液中营养物质等因素 制成细胞悬液
传代培养
放入CO2培养 箱中培养
制成细胞悬液
转入培养液进行原代培养 细胞贴壁 接触抑制
分瓶
进行传代培养
生 概念 原理
动物细胞培养 地位 条件： 过程：
命 观
细胞悬液用胰蛋白酶或胶原蛋白酶将组织分散成单个细胞后制成培养液。
念 细胞贴壁大多数体外培养的细胞需要__贴__附__于__某__些__基__质表__面_才能生长
，然后
在 适宜的培养条件 下，让这些细胞生__长___和_增__殖__的技术；
原理： 细胞增殖（有丝分裂） 地位： 动物细胞工程的基础 条件：
✓ 营养 ✓ 无菌、无毒 ✓ 温度、pH 和渗透压 ✓ 气体环境
生 概念 原理
动物细胞培养 地位
命 观
条件：
血清中不仅含有蛋白质、氨基酸、葡
念
萄糖、激素等多种营养物质，还有激
✓ 营养
葡萄糖、不包括 素及多种未知的促细胞生长因子、促
1.成分
淀粉、蔗糖等
贴附因子及其他活性物质，能促进细
①已知成分
胞的生长、增殖和贴附。
将细胞所需的_营__养__物__质_（糖类、氨基酸、无机盐、维生素等）按其
_种__类__和所__需__量___严格配制而成的培养基，称为合__成__培__养__基___
②未知成分
使用合成培养基时，通常需加入_血__清_等一些天然成分
原因：血清中含有尚未全部研究清楚的细胞所需的营养物质 。
高考生物 第一轮复习 2.2动物细胞工程精品课件 新人教版选修3
第四页，共46页。
二、植物体细胞杂交(zájiāo)与动物细胞融合 的比较
植物体细胞杂交
细胞 融合 原理
细胞膜的流动性、细胞 的全能性
动物细胞融合 细胞膜的流动性
细胞 用纤维素酶、果胶酶去 用胰蛋白酶或胶原蛋白
融合 除细胞壁后诱导原生质 酶使细胞分散后，诱导
方法
体融合
细胞融合
第五页，共46页。
植物体细胞杂交 动物细胞融合
上表中还需进行(jìnxíng)的操作是 ____________。 ③培养一段时间后，取4组装置中的等量培养 液，分别添加到4份备用的淋巴细胞培养液中 继续培养。 ④一段时间后取淋巴细胞分别染色、制片。在 显微镜下观察________，并对比分析。若丙组 淋巴细胞出现异常，而甲组的淋巴细胞正常， 则说明_______________________。
第二十一页，共46页。
病毒表面的A蛋白为主要抗原，因此可用A蛋 白制备疫苗，刺激机体产生抗体。对于病毒的 检测可采用与已知病毒进行核酸序列比较的方 法，也可根据抗原与抗体发生特异性结合 (jiéhé)的特点，用抗A蛋白的单克隆抗体进行 检测。
第二十二页，共46页。
【答案】 (1)逆(反)转录 (2)限制性核酸内切 酶(限制性内切酶、限制酶) DNA连接酶(注： 两空顺序可颠倒) (3)细胞(xìbāo)融合 杂交 瘤细胞(xìbāo) (4)A蛋白 核酸(基因)序列 抗A蛋白的单克隆抗体
第二十五页，共46页。
其碳源为蔗糖，在组织培养的脱分化阶段必 须在黑暗条件下进行，而再分化过程需要一 定的光照条件；动物细胞培养就是细胞的增 殖，不能体现细胞的全能性，而植物(zhíwù) 组织培养体现了植物(zhíwù)细胞的全能性。 【答案】 C
二、植物体细胞杂交(zájiāo)与动物细胞融合 的比较
植物体细胞杂交
细胞 融合 原理
细胞膜的流动性、细胞 的全能性
动物细胞融合 细胞膜的流动性
细胞 用纤维素酶、果胶酶去 用胰蛋白酶或胶原蛋白
融合 除细胞壁后诱导原生质 酶使细胞分散后，诱导
方法
体融合
细胞融合
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植物体细胞杂交 动物细胞融合
上表中还需进行(jìnxíng)的操作是 ____________。 ③培养一段时间后，取4组装置中的等量培养 液，分别添加到4份备用的淋巴细胞培养液中 继续培养。 ④一段时间后取淋巴细胞分别染色、制片。在 显微镜下观察________，并对比分析。若丙组 淋巴细胞出现异常，而甲组的淋巴细胞正常， 则说明_______________________。
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病毒表面的A蛋白为主要抗原，因此可用A蛋 白制备疫苗，刺激机体产生抗体。对于病毒的 检测可采用与已知病毒进行核酸序列比较的方 法，也可根据抗原与抗体发生特异性结合 (jiéhé)的特点，用抗A蛋白的单克隆抗体进行 检测。
第二十二页，共46页。
【答案】 (1)逆(反)转录 (2)限制性核酸内切 酶(限制性内切酶、限制酶) DNA连接酶(注： 两空顺序可颠倒) (3)细胞(xìbāo)融合 杂交 瘤细胞(xìbāo) (4)A蛋白 核酸(基因)序列 抗A蛋白的单克隆抗体
第二十五页，共46页。
其碳源为蔗糖，在组织培养的脱分化阶段必 须在黑暗条件下进行，而再分化过程需要一 定的光照条件；动物细胞培养就是细胞的增 殖，不能体现细胞的全能性，而植物(zhíwù) 组织培养体现了植物(zhíwù)细胞的全能性。 【答案】 C
生物：2.2《动物细胞 工程》课件(新人教版选修3)
没发生改变。 • 细胞系：超过50代的细程
胚胎成幼龄动物的组织器官（细胞来源） 剪碎胰蛋白酶 分离细胞 单个细胞
洗涤、稀释、分离 原代培养 原代细胞 传代培养
细胞株（遗传物质没有发生改变）
细胞系（遗传物质发生改变）
动物细胞培养应用
1. 生产有价值的蛋白质制品，（如病毒疫 苗、干扰素、单克隆抗体、动物激素）
场景记忆法小妙招
超级记忆法--身 体法
1. 头--神经系统 2. 眼睛--循环系统 3. 鼻子--呼吸系统 4. 嘴巴--内分泌系统 5. 手--运动系统 6. 胸口--消化系统 7. 肚子--泌尿系统 8. 腿--生殖系统
超级记忆法-记忆 方法
TIP1：在使用身体记忆法时，可以与前面提到过的五感法结合起来，比如产生 一 些听觉、视觉、触觉、嗅觉、味觉，记忆印象会更加深刻； TIP2：采用一些怪诞夸张的方法，比如上面例子中腿上面生长出了很多植物， 正 常在我们常识中不可能发生的事情，会让我们印象更深。
硬背“在复合句中，修饰某一名词或代词的从句叫做定语从句”这个概念。
3.这个步骤可以使用思维导图或流程图，可以更好加深自己的理解哦~
费曼学习法-实操
第三步 没有任何参考的情况下，仅靠大脑，复述你所获得的主要内容
（三） 仅 靠 大 脑 复 述
1.与上一步不同的是，这一步不能有任何参考， 合上你的书本、笔记等，看看此时你的大脑里还剩下了什么； 2.仅凭记忆，如果可以复述很多，说明掌握状况还可以； 3.如果一合上书，就连关系词有哪些都想不起来了， 说明还 没有掌握，需要继续回顾。
TIP3：认知获取是学习的开始，而不是结束。
为啥总是听懂了， 但不会做，做不好？
高效学习模型-内外脑 模型
2
胚胎成幼龄动物的组织器官（细胞来源） 剪碎胰蛋白酶 分离细胞 单个细胞
洗涤、稀释、分离 原代培养 原代细胞 传代培养
细胞株（遗传物质没有发生改变）
细胞系（遗传物质发生改变）
动物细胞培养应用
1. 生产有价值的蛋白质制品，（如病毒疫 苗、干扰素、单克隆抗体、动物激素）
场景记忆法小妙招
超级记忆法--身 体法
1. 头--神经系统 2. 眼睛--循环系统 3. 鼻子--呼吸系统 4. 嘴巴--内分泌系统 5. 手--运动系统 6. 胸口--消化系统 7. 肚子--泌尿系统 8. 腿--生殖系统
超级记忆法-记忆 方法
TIP1：在使用身体记忆法时，可以与前面提到过的五感法结合起来，比如产生 一 些听觉、视觉、触觉、嗅觉、味觉，记忆印象会更加深刻； TIP2：采用一些怪诞夸张的方法，比如上面例子中腿上面生长出了很多植物， 正 常在我们常识中不可能发生的事情，会让我们印象更深。
硬背“在复合句中，修饰某一名词或代词的从句叫做定语从句”这个概念。
3.这个步骤可以使用思维导图或流程图，可以更好加深自己的理解哦~
费曼学习法-实操
第三步 没有任何参考的情况下，仅靠大脑，复述你所获得的主要内容
（三） 仅 靠 大 脑 复 述
1.与上一步不同的是，这一步不能有任何参考， 合上你的书本、笔记等，看看此时你的大脑里还剩下了什么； 2.仅凭记忆，如果可以复述很多，说明掌握状况还可以； 3.如果一合上书，就连关系词有哪些都想不起来了， 说明还 没有掌握，需要继续回顾。
TIP3：认知获取是学习的开始，而不是结束。
为啥总是听懂了， 但不会做，做不好？
高效学习模型-内外脑 模型
2
高三生物一轮复习 专题3.2.2.2动物细胞工程同步课件 新人教版
(3)杂交瘤细胞具备__________的特点。 (4)在单克隆抗体制备过程中，还应用了细胞工程中的 __________和__________两大技术。
【解析】本题主要考查单克隆抗体的制备过程和原理。 (1) 经免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后的杂交瘤细胞既能 无限增殖，又能产生专一抗体。(2)杂交瘤细胞有两种合成 DNA的途径，因此在选择培养基上只有杂交瘤细胞能生存并 无限增殖。(3)由题图不难看出，生产单克隆抗体，应用到 了两种细胞工程技术：细胞融合和动物细胞培养。
还可将调控细胞周期的基因导入相应B淋巴细胞内，使其能
大量增殖并产生相应抗体。可将骨髓瘤细胞在培养液中培养， 也可以植入小鼠体内培养，因此单克隆抗体的产生可以在体
内进行，也可在体外进行。
4.如图为制备单克隆抗体的流程图，据图回答：
(1)制备单克隆抗体的原理是，克隆_______细胞形成的细胞
群，并产生_______的抗体。 (2)已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基 嘌呤阻断，一般情况下，细胞中有D或S途径即能分裂增殖。 人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但一般不分裂增殖。
1.(2011·绍兴模拟)某研究小组为测定药物对体外培养细胞 的毒性，准备对某种动物的肝肿瘤细胞(甲)和正常肝细胞
(乙)进行动物细胞培养。下列说法正确的是(
A.甲、乙细胞是直接从人体肝脏中取出的
)
B.甲、乙细胞在克隆培养过程中，均需要加入血清 C.细胞培养应在含CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是刺 激细胞的呼吸 D.在利用两种肝组织块制备肝细胞悬液时，也可用胃蛋白酶 处理
2.我国科学家在山东莱阳农学院培养出了克隆牛“康康”和
“双双”，其过程如图所示：
下列叙述中错误的是(
【解析】本题主要考查单克隆抗体的制备过程和原理。 (1) 经免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后的杂交瘤细胞既能 无限增殖，又能产生专一抗体。(2)杂交瘤细胞有两种合成 DNA的途径，因此在选择培养基上只有杂交瘤细胞能生存并 无限增殖。(3)由题图不难看出，生产单克隆抗体，应用到 了两种细胞工程技术：细胞融合和动物细胞培养。
还可将调控细胞周期的基因导入相应B淋巴细胞内，使其能
大量增殖并产生相应抗体。可将骨髓瘤细胞在培养液中培养， 也可以植入小鼠体内培养，因此单克隆抗体的产生可以在体
内进行，也可在体外进行。
4.如图为制备单克隆抗体的流程图，据图回答：
(1)制备单克隆抗体的原理是，克隆_______细胞形成的细胞
群，并产生_______的抗体。 (2)已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基 嘌呤阻断，一般情况下，细胞中有D或S途径即能分裂增殖。 人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但一般不分裂增殖。
1.(2011·绍兴模拟)某研究小组为测定药物对体外培养细胞 的毒性，准备对某种动物的肝肿瘤细胞(甲)和正常肝细胞
(乙)进行动物细胞培养。下列说法正确的是(
A.甲、乙细胞是直接从人体肝脏中取出的
)
B.甲、乙细胞在克隆培养过程中，均需要加入血清 C.细胞培养应在含CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是刺 激细胞的呼吸 D.在利用两种肝组织块制备肝细胞悬液时，也可用胃蛋白酶 处理
2.我国科学家在山东莱阳农学院培养出了克隆牛“康康”和
“双双”，其过程如图所示：
下列叙述中错误的是(
动物细胞工程高三一轮复习(超好)PPT课件
3）、两次筛选目的是什么？
第1次-----杂交瘤细胞（多种）。 第2次-----能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。
4）、为什么细胞融合过程中使用病毒需要灭活？不灭活行吗？ 灭活的病毒能使细胞膜打开，细胞发生融合，不灭 活的话会感染细胞，而不能诱导细胞融合。
.
13
1.(2014·课标卷Ⅰ，40) 研究者用抗原(A)分别免疫3只小鼠(X、Y和Z)，每只 小鼠免疫5次，每次免疫一周后测定各小鼠血清抗体的效价(能检测出抗原抗 体反应的血清最大稀释倍数)，结果如下图所示。
发生了接触抑制。
癌细胞
(3)E点后细胞大多数具有异倍体核型，这样的细胞有什么特点？
E点后的细胞属于细胞系，能无限增殖。
.
6
[例 1] 实验小鼠皮肤细胞培养(非克隆培养)的基本过程如下
图所示。下列叙述错误的是
() C
实验 小鼠
―甲―→
皮肤 组织
―乙―→
皮肤 细胞
―丙 ―→
培养 细胞1
―丁 ―→
培养 细胞2
.
5
1.分析命题热图，明确答题要点 阅读题目 圈出关键词 分析考点
如图，为动物细胞培养过程中细胞增殖情况的变化曲线，图中B、E两点表 示经筛选、分装后继续培养。据图分析：
(1)原代培养和传代培养的分界点是哪个？
B点之前的培养称为原代培养，之后的培养称为传代培养。
(2)AB段和DE段繁殖速度缓慢的原因是什么？
考点三、动物细胞融合与单克隆抗体的制备
1.动物细胞融合 (1)原理：细胞膜的流动_性_ 。 (2)融合方法：聚乙二醇(PEG)、灭活的病__毒_ 、电激等。 (3)意义：突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成 为 可 能 ， 也为制造_单__克__隆__抗__体_开辟了新途径。
第1次-----杂交瘤细胞（多种）。 第2次-----能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。
4）、为什么细胞融合过程中使用病毒需要灭活？不灭活行吗？ 灭活的病毒能使细胞膜打开，细胞发生融合，不灭 活的话会感染细胞，而不能诱导细胞融合。
.
13
1.(2014·课标卷Ⅰ，40) 研究者用抗原(A)分别免疫3只小鼠(X、Y和Z)，每只 小鼠免疫5次，每次免疫一周后测定各小鼠血清抗体的效价(能检测出抗原抗 体反应的血清最大稀释倍数)，结果如下图所示。
发生了接触抑制。
癌细胞
(3)E点后细胞大多数具有异倍体核型，这样的细胞有什么特点？
E点后的细胞属于细胞系，能无限增殖。
.
6
[例 1] 实验小鼠皮肤细胞培养(非克隆培养)的基本过程如下
图所示。下列叙述错误的是
() C
实验 小鼠
―甲―→
皮肤 组织
―乙―→
皮肤 细胞
―丙 ―→
培养 细胞1
―丁 ―→
培养 细胞2
.
5
1.分析命题热图，明确答题要点 阅读题目 圈出关键词 分析考点
如图，为动物细胞培养过程中细胞增殖情况的变化曲线，图中B、E两点表 示经筛选、分装后继续培养。据图分析：
(1)原代培养和传代培养的分界点是哪个？
B点之前的培养称为原代培养，之后的培养称为传代培养。
(2)AB段和DE段繁殖速度缓慢的原因是什么？
考点三、动物细胞融合与单克隆抗体的制备
1.动物细胞融合 (1)原理：细胞膜的流动_性_ 。 (2)融合方法：聚乙二醇(PEG)、灭活的病__毒_ 、电激等。 (3)意义：突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成 为 可 能 ， 也为制造_单__克__隆__抗__体_开辟了新途径。
人教版教学课件2.2 动物细胞工程
需抗体的细胞(很多种杂交瘤细胞),需经克隆化培
养和抗体检测,经多次筛选后就可获得足够数量的
能分泌所需抗体的细胞。
(4)2个培养提取场所
①体外培养——培养液提取。
②体内小鼠腹腔中培养——小鼠腹水中提取。
提醒
取相应B细胞前必需先注射相应抗原,形
象地说先“打针”,否则失败。 (5)原理：细胞膜的流动性和细胞增殖。 拓展提升 植物体细胞杂交和单克隆抗体的制备的比较
障碍,大大扩展杂交的亲本 组合范围 (2)克服有性杂交的母系遗 传现象、获得细胞质基因的 杂合子、研究细胞质遗传
(1)制备单克隆抗体 (2)诊断、治疗、预
防疾病。例如:单抗
诊断盒、“生物导
弹”治 疗癌症
对位训练
3.利用细胞工程方法，以SARS病毒核衣壳蛋白为抗 原制备出单克隆抗体。下列相关叙述正确的是 （ D ） A.用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产 生的血清抗体为单克隆抗体 B.体外培养单个B淋巴细胞可以获得大量针对SARS 病毒的单克隆抗体 C.将等量B淋巴细胞和骨髓瘤细胞混合，经PEG诱 导融合后的细胞均为杂交瘤细胞 D.利用该单克隆抗体与SARS病毒核衣壳蛋白特异 性结合的方法可诊断出病毒感染者
冷冻（或超低温、 （5）在细胞培养过程中，通常在________________ 液氮） 条件下保存细胞。因为在这种条件下，细 胞中 酶 的活性降低，细胞 新陈代谢 的速率降低。
（6）给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后，发
生了排斥现象，这是因为机体把移植的皮肤组织当
作 抗原 进行攻击。
考点二
动物体细胞核移植技ຫໍສະໝຸດ 与克隆动物植物体细胞杂交 动物细胞融合(单克隆抗体 的制备)
理论基础 细胞膜的流动性、细胞的 细胞膜的流动性、细胞增殖 (原理) 全能性 融合前 酶解法去除细胞壁(纤维 注射特定抗原,免疫处理正 处理 素酶、果胶酶) 常小鼠
新课标高中生物专题2细胞工程2.2动物细胞工程2.2.1动物细胞培养和核移植技术课件新人教版选修
生长 特点
接种前 处理
培养条件
培养 目的
培养 结果
贴壁生长，细胞增殖不分化
诱导形成愈伤组织，细胞增 殖分化
细胞进行异养需氧代谢
灭菌、用胰蛋白酶处理，使 组织分散成单个细胞
灭菌
恒温、无菌、无需光照 常温、无菌、光照条件
①生产蛋白质生物制品 ①快速繁育无病毒植株
②获取大量细胞
②生产药物、食品添加剂、
③检测有毒物质
解析：克隆过程中细胞质遗传物质来自一方，而细胞核中遗传 物质来自另一方，所以小马的性状与甲马不完全一致。该过程只能 说明动物细胞核具有全能性，而不能证明动物细胞的全能性。
答案：C
3．关于克隆，除个体水平外，还有分子、细胞、器官等水平 的克隆。下列不属于克隆技术的是( )
A．从出生不久的小鼠心脏取下的细胞在体外离体培养成细胞 系
变。( × ) (5)传代培养的细胞因为以有丝分裂方式增殖，所以在传代过程
中其遗传物质保持不变。( × )
(6)只要培养条件适宜，细胞都可在体外无限繁殖。(× ) (7)可用于检测有毒物质、构建人造皮肤、大量生产药物蛋白。 (√ ) (8)为了防止培养过程中发生微生物污染，应将培养箱抽成真空 以消毒、灭菌。( × )
(2)在动物细胞培养时，通常在合成培养基中加入适量血清，其 原因是_血__清__可__以__补__充__合__成__培__养__基__中__缺__乏___的__物__质________________
________。细胞培养应在含 5%CO2 的恒温培养箱中进行，CO2 的作用是__维__持__培__养__液__的__p_H_________________________________。
①先用胰蛋白酶等处理贴满瓶壁的细胞
高三一轮生物课件：专题2.2 动物细胞工程(人教版必修三
为什么要用胰蛋白酶对取出的动物 组织进行处理？
胰蛋白酶处理动物组织，可以使动物组织细胞 间的胶原纤维和细胞外的其他成分酶解，获得单 个细胞。
有关概念:
原代培养：从机体取出后立即培养的细胞为 原代细胞。培养的第1代细胞与传10代以内 的细胞称为原代细胞培养。 传代培养：将原代细胞从培养瓶中取出，配 制成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的 培养瓶中继续培养，称为传代培养。
2、动物细胞培养的应用和概念： 动物细胞培 养就是从动物有 机体中取出相关 的组织,将它分 散成单个细胞, 然后,放在适宜 的培养基中,让 这些细胞生长和 增殖.
动物胚胎或幼龄动 3、动物细胞培养过程： 物的组织、器官
动物组织细胞间隙中 含有一定量的弹性纤 维等蛋白质，将细胞 网络起来形成具有一 定弹性和韧性的组织 和器官。
细胞核移植
重组细胞 电脉冲刺激 早期胚胎 胚胎移植
另一头绵羊的子宫
妊娠、出生
克隆羊多利
多利羊
2.体细胞核移植技术的应用前景
3.体细胞核移植技术存在的问题
思考下列问题：
1、什么叫动物细胞融合？植物体杂交技术与动物细胞 融合有什么不同呢？
2、动物细胞在结构上有何区别？这与它们杂交或融合
过程有什么影响？
二、动物体细胞核移植技术和克隆动物 动物核移植是将动物的一个细胞的细胞 核,移如入一个已经去掉细胞核的卵母细胞 中.使其重组并发育成一个新的胚胎,这个 新的胚胎最终发育为动物个体.
胚胎移植技术
胚胎移植的基本程序如下（以牛胚胎移植为例）
核移植技术
1.克隆羊培育过程
黑面绵羊去 核卵细胞 白面绵羊乳 腺细胞核
原理
培养基性质 培养基特有成分
胰蛋白酶处理动物组织，可以使动物组织细胞 间的胶原纤维和细胞外的其他成分酶解，获得单 个细胞。
有关概念:
原代培养：从机体取出后立即培养的细胞为 原代细胞。培养的第1代细胞与传10代以内 的细胞称为原代细胞培养。 传代培养：将原代细胞从培养瓶中取出，配 制成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的 培养瓶中继续培养，称为传代培养。
2、动物细胞培养的应用和概念： 动物细胞培 养就是从动物有 机体中取出相关 的组织,将它分 散成单个细胞, 然后,放在适宜 的培养基中,让 这些细胞生长和 增殖.
动物胚胎或幼龄动 3、动物细胞培养过程： 物的组织、器官
动物组织细胞间隙中 含有一定量的弹性纤 维等蛋白质，将细胞 网络起来形成具有一 定弹性和韧性的组织 和器官。
细胞核移植
重组细胞 电脉冲刺激 早期胚胎 胚胎移植
另一头绵羊的子宫
妊娠、出生
克隆羊多利
多利羊
2.体细胞核移植技术的应用前景
3.体细胞核移植技术存在的问题
思考下列问题：
1、什么叫动物细胞融合？植物体杂交技术与动物细胞 融合有什么不同呢？
2、动物细胞在结构上有何区别？这与它们杂交或融合
过程有什么影响？
二、动物体细胞核移植技术和克隆动物 动物核移植是将动物的一个细胞的细胞 核,移如入一个已经去掉细胞核的卵母细胞 中.使其重组并发育成一个新的胚胎,这个 新的胚胎最终发育为动物个体.
胚胎移植技术
胚胎移植的基本程序如下（以牛胚胎移植为例）
核移植技术
1.克隆羊培育过程
黑面绵羊去 核卵细胞 白面绵羊乳 腺细胞核
原理
培养基性质 培养基特有成分
高考生物一轮复习专题2细胞工程2动物细胞工程课件新人教选修3
【高考模拟精练】 1.(2015·福建高考)GDNF是一种神经营养因子，对损 伤的神经细胞具有营养和保护作用。研究人员构建了 含GDNF基因的表达载体(如图1所示)，并导入大鼠神经 干细胞中，用于干细胞基因治疗的研究。请回答：
(1)在分离和培养大鼠神经干细胞的过程中，使用胰蛋 白酶的目的是____________。 (2)构建含GDNF基因的表达载体时，需选择图1中的 ____________限制酶进行酶切。
2.2 动物细胞工程
考点一
动物细胞培养和核移植技术 【核心知识通关】
动物细胞培养 、动 1.动物细胞工程常用的技术手段：_____________
生产单克隆抗体 等。 物细胞核移植、动物细胞融合、_______________ 动物细胞培养技术 是基础。 _________________
2.动物细胞培养：
抗生素 ；定期___________ 更换培养液 以 理，还要添加一定量的_______ 清除代谢产物。 ②营养：除糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量 血清、血浆 等一些天然成分。 元素之外通常还需加入___________
36.5±0.5℃ 哺乳动 ③适宜的温度和pH：温度为____________(
【特别提醒】 动物细胞培养和核移植技术的理解误区 (1)动物细胞培养中两次使用胰蛋白酶的作用不同：第 一次用胰蛋白酶处理剪碎的组织使之分散成单个细胞 ，第二次用胰蛋白酶处理使贴壁细胞从瓶壁上脱落下 来。
(2)克隆动物性状的影响因素： ①克隆动物遗传物质来自两个亲本，即提供核的个体 和提供卵细胞的个体，所以，性状受两个个体影响， 但主要与提供核的个体相似。 ②在发育过程中可能发生基因突变、染色体变异导致 性状改变。 ③外界环境条件的影响引起不可遗传的变异。
2.2 动物细胞工程
第2章细胞工程第2节动物细胞工程一、动物细胞培养1.概念：从动物体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后在适宜的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。
2.原理：细胞增殖3.地位：动物细胞工程的基础4.关键操作：原代培养和传代培养。
（一）动物细胞培养的条件1.营养（1）成分①已知成分将细胞所需的营养物质（糖类、氨基酸、无机盐、维生素等）按其种类和所需量严格配制而成的培养基，称为合成培养基。
①未知成分使用合成培养基时，通常需加入血清等一些天然成分。
（2）培养基的物理性质培养动物细胞一般使用液体培养基，也称为培养液。
2.无菌、无毒的环境①对培养液和所有培养用具进行灭菌处理；①在无菌环境下进行操作；①还需要定期更换培养液。
3.温度、pH和渗透压（1）适宜的温度：哺乳动物细胞培养的温度多以36.5±0.5①为宜。
（2）适宜的pH：多数动物细胞生存的适宜pH为7.2~7.4。
（3）适宜的渗透压：维持适宜渗透压的目的维持细胞正常的形态和功能。
4.气体环境（1）组成：动物细胞培养所需气体主要有O2和CO2。
（2）气体作用：①O2：O2是细胞代谢所必需的；①CO2：CO2的主要作用维持培养液的pH。
（二）动物细胞培养的过程①原代培养：将分瓶之前的细胞培养，即动物组织经处理后的初次培养称为原代培养。
①传代培养：将分瓶后的细胞培养称为传代培养；①细胞贴壁：大多数体外培养的细胞需要贴附于某些基质表面才能生长增殖，这类细胞往往贴附在培养瓶的瓶壁上，这种现象称为细胞贴壁；①接触抑制：当贴壁细胞生长到表面相互接触时，细胞通常会停止分裂增殖。
1.取动物组织（1）取材：动物胚胎或幼龄动物的组织、器官。
（2）取材原因：细胞分化程度低，增殖能力强，容易培养。
2.制成细胞悬液（1）制成细胞悬液的步骤：①将组织分散成单个细胞；①用培养液将细胞制成细胞悬液。
（2）将组织分散成单个细胞的原因：①从动物体取出的成块组织中，细胞与细胞靠在一起，彼此限制了生长和增殖；①能使细胞与培养液充分接触，更易进行物质交换。