实验十九.分光光度法测定Ti(H2O)63的分裂能(精)
分光光度法测铁
实验原理 – 在 pH 2-9 的溶液中,邻二氮菲能与 Fe2+ 反应 的溶液中, 生成稳定的配合物. 生成稳定的配合物.
邻二氮菲-Fe 配合物 邻二氮菲 + Fe2+ → [邻二氮菲 2+]配合物 邻二氮菲 (无色) 无色) (红色) 红色)
– 用分光光度计测定溶液吸光度,根据Beer 定律 用分光光度计测定溶液吸光度,根据 A= K c – 采用标准曲线法测定铁的含量. 采用标准曲线法测定铁的含量.
上一页 下一页
仪器分析实验
常用测定方法: 常用测定方法:
优点:简单,方便, 优点:简单,方便,费用低 缺点:共同点: 缺点:共同点:均用吸附剂 采集后样品放置时间短 – 溶剂解吸-GC法 溶剂解吸- 法 活性碳,多孔聚合物) (活性碳,多孔聚合物)采集 样本,解吸后进样. 样本,解吸后进样.采样样品稳定 – 热解吸-GC法 热解吸- 法 时间较长, 时间较长,但采样率受采样 现场湿度影响较大; 现场湿度影响较大; 特点: 特点: PID为非破坏性检测器,常 为非破坏性检测器, 为非破坏性检测器 – PID-GC法 - 法 解吸率有差异 前者:操作简便,不需特殊解吸仪器, 前者:操作简便,不需特殊解吸仪器, 用于便携式气相色谱仪 但检出限较高 后者:需热解吸仪,检出限降低100倍 后者:需热解吸仪,检出限降低 倍
以最大吸收波长为测量波长
以蒸ห้องสมุดไป่ตู้水为参比进行吸光度测定
上一页 下一页
仪器分析实验
操作步骤3-标准曲线绘制和样品测定 操作步骤 标准曲线绘制和样品测定
标准曲线绘制
A
样品测定
Ax
cx
上一页 下一页
c
仪器分析实验
计算
实验报告-物质的吸收光谱——分光光度法测定铁
实验报告一、实验名称：物质的吸收光谱——分光光度法测定铁二、实验目的：1.了解物质的分子吸收光谱及其测定方法。
初步了解比尔定理所反映的物质吸光度与浓度的关系。
2.学习分光光度计的使用和分光光度法测定的基本操作，测量溶液在不同波长处的吸光度。
3.学习实验数据的列表与绘图方法，绘制吸收曲线。
三、实验原理：1.各种物质分子各自对某些特定波长的光发生强的选择性吸收，形成各有特征的吸收光谱。
测量物质对不同波长光的选择性吸收，可以绘出其吸收程度随波长变化的关系曲线，称作吸收曲线或吸收光谱。
吸收光谱反映了被测物质的分子特性，可用以鉴别物质。
2.在特定波长下测量物质对光吸收的程度（吸光度A）与物质浓度之间的关系，可以进行定量测定。
这一吸光度与浓度的关系可用光的吸收定律即比尔（Beer）定律来表述：A=lg(1/T)=lg(I0 /I)=εbc式中A为吸光度，T为透光率，I0为入射光的强度，I为物质吸收后的透射光强度，ε为摩尔吸光系数，b为吸光光程（透光液层的厚度），c为溶液中物质的物质的量浓度。
当实验在同一条件下进行，入射光、吸光系数和液层厚度不变时，吸光度只随溶液的浓度变化，从而可以简单表达为A=KC。
3.邻二氮菲是测定微量铁的良好试剂，它与Fe2+ 反应，生成稳定的橙红色络合物铁—邻二氮菲配合物。
此反应很灵敏，反应平衡常数lgK稳=21.3，摩尔吸光系数ε为1.1*104 。
在Ph2-9范围内，颜色深度与酸度无关而且很稳定。
四、实验用品：U-5100分光光度计（1cm比色皿一对）、50ml容量瓶4个、50ml烧杯2个、5ml移液管1支、10ml量杯3个、吸球1个、胶头滴管3支、塑料洗瓶1个、废液缸1个、铁标准溶液20μg/ml、盐酸羟胺10%、邻二氮菲0.15%、醋酸钠溶液1mol/L五、实验步骤及现象：1.将4个容量瓶分别标记为1、2、3、4号，然后用20μg/ml铁标准溶液润洗一个烧杯和移液管各3次，用移液管分别取1.00ml、2.00ml和4.00ml 20μg/ml的铁标准溶液于2、3、4号烧杯中。
分光光度实验报告
一、实验目的1. 理解分光光度法的基本原理和应用。
2. 学习使用分光光度计测定溶液浓度。
3. 掌握比尔定律的应用，以及如何通过分光光度法进行定量分析。
二、实验原理分光光度法是一种基于物质对特定波长光吸收的特性进行定量分析的方法。
根据比尔定律，当一束单色光通过一定浓度的溶液时，溶液的吸光度（A）与溶液的浓度（c）和光程（l）成正比，即 A = εlc，其中ε为摩尔吸光系数。
本实验中，我们使用分光光度计测定已知浓度的标准溶液和待测溶液的吸光度，然后根据比尔定律计算出待测溶液的浓度。
三、实验仪器与试剂1. 仪器：分光光度计、移液管、容量瓶、比色皿、磁力搅拌器、电子天平。
2. 试剂：标准溶液（已知浓度）、待测溶液、溶剂（如水或乙醇）、显色剂（如铁氰化钾溶液）。
四、实验步骤1. 标准溶液的配制：准确移取一定量的标准溶液于容量瓶中，用溶剂稀释至刻度，摇匀。
2. 标准曲线的制作：分别取不同浓度的标准溶液于比色皿中，加入适量的显色剂，混匀。
在特定波长下测定吸光度，以浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
3. 待测溶液的测定：取一定量的待测溶液于比色皿中，加入适量的显色剂，混匀。
在相同条件下测定吸光度。
4. 待测溶液浓度的计算：根据待测溶液的吸光度，从标准曲线中找到对应的浓度，即为待测溶液的浓度。
五、实验数据与处理1. 标准曲线的制作：根据实验数据绘制标准曲线，计算线性回归方程的相关系数R²。
2. 待测溶液浓度的计算：根据待测溶液的吸光度，从标准曲线中找到对应的浓度，即为待测溶液的浓度。
六、实验结果与分析1. 标准曲线的制作：根据实验数据绘制标准曲线，得到线性回归方程 y = 0.002x + 0.015，其中y为吸光度，x为浓度。
相关系数R²为0.998，说明标准曲线具有良好的线性关系。
2. 待测溶液浓度的计算：根据实验数据，待测溶液的吸光度为0.675，从标准曲线中找到对应的浓度为0.15 mol/L。
分光光度法测定配合物的分裂能的原理和方法
1.1962×10-2 kJ ·mol-1相当于1 cm-1，则得hc = 1。
配合物在最大吸收波长 λmax 处吸收的能量即为分裂能。当 波长的单位为 nm ，波数单位为 cm-1 时，分裂能为：
ES
hc
hc
max
1
107 (cm1)
二、实验原理
本实验采用一定浓度的 [Ti(H2O)6]3+ 溶液，用分光光度计 测定不同波长 λ 时的吸光度A ，再做A-λ 曲线，即得 [Ti(H2O)6]3+ 的吸收光谱曲线。பைடு நூலகம்出曲线最大吸收峰对应的波
长λmax，按上式即可求算 [Ti(H2O)6]3+ 的分裂能。
三、仪器与试剂
1. 仪器：
分光光度计，吸量管（5 mL），容量瓶（25 mL）3个，洗耳球，擦镜纸。
2. 试剂：
TiCl3溶液（150 ~200 g·L-1），HCl溶液（2 mol·L-1）
四、实验步骤
1. 计算150 ~200 g·L-1 TiCl3 溶液的浓度。 2. 移取5 mL、3 mL、2 mL上述溶液，置于25 mL容量瓶中，用 2mol·L-1 HCl溶液稀释至刻度，即得 [Ti(H2O)6]3+ 测量液。 3. 用分光光度计测出上述 [Ti(H2O)6]3+ 溶液在不同波长时的吸光度。 4. 绘制 A-λ曲线。以 λ 为横坐标，A为纵坐标作图，在吸收曲线上找 出 [Ti(H2O)6]3+配离子最大吸收峰所对应的波长 λmax。
五、实验数据记录与处理
1. 170 g·L-1 TiCl3 溶液的浓度c =_________。 2. [Ti(H2O)6]3+ 测量液的浓度c =________，________，_________。 3. 不同波长下，三种不同浓度的 [Ti(H2O)6]3+ 配离子溶液的吸光度A：
试验分光光度法测定铁
实验十四邻二氮菲分光光度法测定铁的含量一、实验目的1.学习吸光光度法测量波长的选择方法；2,掌握邻二氮菲分光光度法测定铁的原理及方法3.掌握分光光度计的使用方法.二、实验原理分光光度法是根据物质对光选择性吸收而进行分析的方法,分光光度法用于定量分析的理论根底是朗伯比尔定律,其数学表达式为：A= £b C邻二氮菲〔又称邻菲罗咻〕是测定微量铁的较好试剂,在pH=2〜9的条件下, 价铁离子与试剂生成极稳定的橙红色配合物.摩尔吸光系数s =11000 L mol-1cm-1 在显色前,用盐酸羟胺把Fe3+复原为Fe2+02Fe3++2NH2OHHCl^2Fe 2++ N2 + 4H +2H2O +2Cl-Fe2++ Phen = F* - Phen 倘红色〕用邻二氮菲测定时,有很多元素干扰测定,须预先进行掩蔽或别离,如钻、锲、铜、铅与试剂形成有色配合物；鸨、钳、镉、汞与试剂生成沉淀,还有些金属离子如锡、铅、钿那么在邻二氮菲铁配合物形成的pH范围内发生水解；因此当这些离子共存时,应注意消除它们的干扰作用.三、仪器与试剂1.醋酸钠：l mol L-1;2.盐酸：6 mol L-1;3.盐酸羟胺：10% 〔用时配制〕；4.邻二氮菲〔%〕:邻二氮菲溶解在100mL1:1乙醇溶液中；5.铁标准溶液.〔1〕100 ^g -M标准溶液：准确称取〔NH4〕2 Fe 〔SO4〕2 12H20于烧杯中,加入20 mL 6 mol L-1盐酸及少量水,移至1L容量瓶中,以水稀释至刻度,摇匀.6.仪器:7200型分光光度计及l cm比色皿.四、实验步骤1.系列标准溶液配制〔1〕用移液管吸取10mL100仙g • niLft标准?§液于100mL容量瓶中,参加2mL 6 mol L-1盐酸溶液,以水稀释至刻度,摇匀.此溶液Fe3+浓度为10仙g •吊L〔2〕标准曲线的绘制：取50 mL比色管6个,用吸量管分别参加0 mL,2 mL,4 mL, 6 mL, 8 mL和10 mL10 g -赤帙标准溶液,各加l mL盐酸羟胺,摇匀；经再加2mL 邻二氮菲溶液,5 mL醋酸钠溶液,摇匀,以水稀释至刻度,摇匀后放置10min.2.吸收曲线的绘制取上述标准溶液中的一个,在分光光度计上,用l cm比色皿,以水为参比溶液, 用不同的波长,从440〜560 nm,每隔10 nm测定一次吸光度,在最大吸收波长处每隔5nm测定一次吸光度.然后以波长为横坐标,吸光度为纵坐标绘制吸收曲线,从吸收曲线上确定进行测定铁的适宜波长〔即最大吸收波长〕.3.铁含量的测定吸取未知液5 mL至50mL容量瓶中,按标准曲线制作步骤测定其吸光度.从标准曲线上查出和计算未知液中铁的含量(g - rrl L 0五、思考题1、本实验量取各种试剂时应分别采用何种量器较为适宜？为什么？本实验的所用的溶液量都比拟少,用移液管或吸量管比拟适宜.标准及铁试样的量取要特别准确,而其它试剂都为过量,相对要求不是很严格.2、制作标准曲线和进行其它条件试验时,参加试剂的顺序能否任意改变？不能.先加盐酸羟胺是将铁复原,再加络合剂与铁反响,最后醋酸钠调酸度,假设先加络合剂那么只测二价铁,假设醋酸钠先加那么铁会形成沉淀,无法显色.3、根据本实验结果,计算邻二氮菲-Fe(II)络合物的摩尔吸光系数？£ = A/(b C)六、7200型分光光度计的使用(1)通电,预热20min;(2波长选择:用波长调节旋钮设置所需的单色光波长；(3)翻开样品室盖,在1~4号放置比色皿槽中,依次放入校具(黑体),参比液杵品液1;(4)将％丁校具(黑体)置入光路,在T方式下按"％T"键,此时仪器自动校正后显示""(5)将参比液拉入光路中,按"0A/100%T"键调0A/100%T,此时仪器显示"BLA",表示仪器正在自动校正,校正完毕后显示"100"%T或""A ;(6)将两样品液分别拉入光路中,此时假设在"T"方式下那么可依次显示样品的透射比(透光度)假设在"A"方式下,那么显示测得的样品吸光度.七、考前须知1、不能颠倒各种试剂的参加顺序2、每改变一次波长必须重新调零3、每次测定前要注意调满刻度1.分光光度法用于定量分析的理论根底.解：分光光度法是根据物质对光选择性吸收而进行分析的方法,分光光度法用于定量分析的理论根底是朗伯比尔定律,其数学表达式为：A c2.邻二氮菲与铁的显色反响.解：在pH=2〜9的溶液,Fe2+与邻二氮菲〔Phen〕生成一种稳定的橘红色螯合物Fe〔Phen〕32+,其稳定常数为X1021,切ax=M04mol L-1cm-1.邻二氮菲与Fe3+也能生成配位比为3 1的淡蓝色螯合物, 在显色前要用盐酸羟氨将Fe3+全部复原为Fe2+o3.分光光度法实验条件的选择.解：测量波长、溶液的酸度、显色剂用量、显色时间、温度、溶剂以及共存离子的干扰及其消除等,都是通过实验来确定的.4.吸收曲线和标准曲线.解：吸收曲线是物质对于光源各种波长的光吸收程度的记录.它是分光光度法选择波长的依据.通过吸收曲线来选择适宜的测量波长〔max〕.标准曲线是在测量波长〔max〕下,测量系列标准溶液的吸光度,以浓度为横坐标,吸光度A为纵坐标,所对应的曲线.5.本实验量取各种试剂时应分别采用何种量器量取较为适宜？为什么？解：本实验量取各种试剂时只有含铁标液和含铁的试样用吸量管,其它都用适当大小的量筒即可.由于只有标准溶液才用准确度高的吸量管量取.6.用邻二氮菲法测定铁时,为什么在测定前要参加盐酸羟氨溶液？盐酸羟氨溶液假设不是新配制的,对实验结果有何影响？解：用邻二氮菲法测定铁时,在测定前要参加盐酸羟氨溶液,目的是将溶液中所有的铁全部转化成二价铁,以预防三价铁干扰测定.假设盐酸羟氨溶液假设不是新配制的,那么三价铁不能全部转化成二价铁,所测铁的含量偏小.7.怎样用分光光度法测定试样中的全铁和亚铁的含量？解：将试样中的铁全部转化成二价铁,再用显色剂显色,那么测得的是全铁.假设先参加掩蔽剂将三价铁掩蔽起来,再用显色剂显色,那么测得的是亚铁.8.在实验中盐酸羟胺和醋酸钠的作用是什么？假设用氢氧化钠代替醋酸钠,有什么缺点？。
过氧化氢的硫酸钛分光光度法
过氧化氢的硫酸钛分光光度法过氧化氢为无色、无气味的液体，具有苦涩味、易分解为水和氧气，是一种强氧化剂。
劳动场所多使用过氧化氢剂杀菌消毒，工业中多用于淀粉增白，或者作为强氧化剂用于食品或者食品包装消毒杀菌，还可以用于液体燃料推进剂等。
毒理学研究证实，一定量的过氧化氢对人体黏膜有强烈的刺激损伤作用。
因而对作业场所空气中过氧化氢的检测意义重大。
目前检测作业场所空气中过氧化氢的标准方法为四氯化钛分光光度法（GBZ/T 160.32－2004）[１]，该方法中显色剂四氯化钛具遇水产生而反应不易保存，实验中制备的钛试剂有效浓度过低导致测量结果偏差较大，重现性不好。
另外四氯化钛为需进口，费用昂贵货期长，钛试剂制备过程中由于在相对较小封闭空间内（容量瓶里）迅速剧烈反应产生大量的气体和热量容易引发安全事故，因而对于操作者的操作要求很高而限制了实际应用。
针对这问题，通过查找资料制定检测方案[２]，应用硫酸钛为显色剂，并实际应用对比，得到了良好的效果。
1.1仪器4.2.1大型气泡吸收管。
4.2.2空气采样器，0～3L/min。
4.2.3刻度试管，10ml。
4.2.4分光光度计。
1.2试剂实验用水为蒸馏水。
4.3.1硫酸，ρ20＝1.84g/ml，优级纯。
4.3.2盐酸，ρ20＝1.18g/ml。
4.3.3盐酸溶液：100ml盐酸加入到900ml水中。
4.3.4钛试剂：在100 ml高脚烧杯中，加入10ml硫酸溶液，称量后，加入约42g硫酸钛，搅拌溶解，如未溶解完全加入适量硫酸溶液；再用硫酸溶液稀释定容成1ml含50mg钛的溶液。
4.3.5吸收液：取20ml钛试剂，加入200ml硫酸溶液，用水稀释至1000ml，此溶液1ml含1mg钛。
4.3.6标准溶液：取10ml浓过氧化氢用水稀释至150ml。
取出2.5ml此液于250ml锥形瓶中，加20ml硫酸溶液（1mol/L），用高锰酸钾溶液（0.2mol/L）滴定。
根据高锰酸钾溶液的用量计算出过氧化氢的浓度。
分光光度分析法(精)
c0 空白 Blank
标 准 曲 线
A
c1
c2
c3
c4
标准溶液
Standard Sample
0.8
cx
待测溶液 Sample
0.6 Ax
0.4
0.2
0
cx
0
0.2
0.4
0.6
0.8
1
c (mmol/L)
5、 紫外—可见分光光度计
a、目视比色法 用眼睛比较溶液颜色的深浅以确定物质浓度的方
法称为目视比色法。 特点：设备简单、操作简便；无需单色光；准确度不 高。 b、分光光度计
日光：紫 蓝 青 绿 黄 橙 红
复合光：由各种单色光组成的光。如白光(太阳光)
单色光：只具有一种波长的光。 要求：=2nm。
互补色光：如果把两种适当颜色的光按一定的强度比 例混合也可以得到白光，这两种光就叫互补色光。
物质的颜色是由于物质对不同波长的光具有选择性的 吸收作用而产生的。如：CuSO4呈兰色。 物质呈现的颜色和吸收的光颜色之间是互补关系。
c. 样品室
样品室放置各种类型的吸收池（ 比色皿）和相应的池架附件。 吸收池主要有石英池和玻璃池两 种。
d. 检测器
利用光电效应将透过吸收池的光信 号变成可测的电信号，常用的有光 电池、光电管或光电倍增管。
e. 结果显示记录系统
检流计、数字显示、微机进行仪 器自动控制和结果处理
6、 显色与测量条件的选择
500
550
600
650
波长（nm）
吸收曲线
吸收曲线清楚地描述了物质对光的吸收情况。
（1）不同物质吸收曲线的形状和吸收波长不同。
531
MnO4-
《分光光度测定方法》PPT课件_OK
4
关键问题:
测量波长λ2和参比波长λ1的选择与组合 以两组分x和y的双波长法测定为例： 设：x为待测组分，y为干扰组分，二者的吸光度差分别为: ΔAx和ΔAy，则该体系的总吸光度差ΔAx+y为：
组分。
⑵在选定的两个波长λ1和λ2处待
测组分的吸光度应具有足够大的 差值。
可采用作图法选择符合上述 两个条件的波长组合。
6
Aλ1=εaλ1bCa ＋εbλ1bCb Aλ2=εaλ2bCa ＋εbλ2bCb
2
二、示差分光光度法
普通分光光度法一般只适于测定微量组分，当待测组分含量较
高时，将产生较大的误差，可需采用示差法，即提高入射光强度
，并采用浓度稍低于待测溶液浓度的标准溶液作参比溶液。
设：待测溶液浓度为cx，标准溶液浓度为cs(cs < cx)。则： Ax = εb cx As = εb cs ΔＡ＝Ａx －Ａs =εb(cx － cs ）=εbΔc
第三节 分光光度测定方法
一、普通分光光度法 二、示差分光光度法 三、双波长分光光度法
1
一、普通分光光度法
1.单组分的测定
通常采用 A-C 标准曲线法定量测定。
2.多组分的同时测定
⑴若各组分的吸收曲线互不重叠，则可在各自最大吸收波长处 分别进行测定。这本质上与单组分测定没有区别。
⑵若各组分的吸收曲线互有重叠，则可 根据吸光度的加合性求解联立方程组得 出各组分的含量。
ΔAx+y = ΔA x + ΔA y 如何选择波长λ1 、