生物安全二级(BSL-2)实验室标准操作手册培训..
BSL-2ABSL-2生物安全实验室病毒实验室-培训知识点
BSL-2/ABSL-2生物安全实验室/病毒实验室培训知识点基本要求BSL-2实验室培训申请人具备3个月以上的细胞室工作经验；能够严格遵守本单位及实验室生物安全规程；既往无不良安全行为记录。
特别要求BSL-2+实验室培训除满足基本要求外，还应具备以下条件：申请人参加过BSL-2实验室培训，并具备3个月以上BSL-2实验室工作经验。
特别要求ABSL-2实验室培训除满足BSL-2+实验培训要求外，还应具备以下条件：已取得上海市实验动物上岗证；或参加过上海巴斯德研究所实验动物上岗培训并考试合格生物安全狭义指现代生物技术的研究、开发、应用以及转基因生物的跨国越境转移可能对生物多样性、生态环境和人类健康产生潜在的不利影响。
广义指与生物有关的各种因素对社会、经济、人类健康及生态系统所产生的危害或潜在风险。
实验室生物安全1防止发生病原体或毒素无意中暴露或意外释放的防护原则、技术和行为。
2实验室的生物安全条件和状态不低于容许水平，可避免实验室人员、来访人员、社区和环境受到不可接受的损害，符合相关法规、标准等对实验室生物安全责任的要求。
生物安全防止发生病原体或毒素无意中暴露或意外释放的防护原则、技术和行为。
生物安全保障单位和个人为防止病原体或毒素丢失、被窃、滥用、转移或有意释放而采取的安全措施。
实验室相关感染实验室感染主要途径注射器针头或其他污染锐器意外接种；液体溢洒和喷溅到皮肤和粘膜；通过口吸移液或用手指或污染的物体触摸口或眼睛从而摄入或接触；动物咬伤和抓伤；吸入传染性气溶胶；20%可明确感染的原因；80%是由工作人员操作失误引起；20%是由设备故障引起；80%是不明原因的感染，可能为气溶胶传播感染。
实施实验室生物安全管理的目的保护人员和环境免受感染性生物因子的潜在暴露实验室生物安全管理体系目标保证实验室设施、设备、个体防护装备及相关物品符合国家有关的安全要求，定期检查、维护、更新，确保不降低其设计性能。
保证实验工作人员均可得到持续培训及继续教育。
实验室生物安全级别——生物安全二级
实验室生物安全级别——生物安全二级生物安全二级(BSL—2)BSL—2与BSL—1类似，适合于对人和环境有中度潜在危险的病源，与BSL—1的区别在于：(1)实验人员均同意过病源处理方面的专门培训，并由有资格的科学工作者指导；(2)进行实验时，限制进入实验室；(3)关于污染的锐器，要专门注意；(4)某些可能产生传染性气溶胶或飞溅物的过程。
应在生物安全柜中或其它物理遏制设备中进行。
以下的标准及专门操作、安全设备及设施和BSL—2病源有关：一、标准微生物操作：1、实验时，未经实验室主任同意，限制或禁止进入实验室。
2、进行活体处理后，实验人员要洗手；离开实验空前脱手套。
3、不许在工作区域饮食、吸烟、清洗隐型眼镜和化妆。
食物应存放在工作区域以外专用橱柜或冰箱中。
4、不能用嘴移液，只能用机械装置移液。
5、制定锐器安全使用规范。
6、所有的操作过程应尽量细心，幸免产生溅出和气溶胶。
7、实验完毕、下班前、活体溅出或溢出时，都应使用对病源有效的消毒剂进行台面消毒。
8、所有的培养物、储存物及其它规定的废物在开释前，均应使用可行的消毒方法进行消毒，如高压灭菌。
转移到就近实验室消毒的物料应置于耐用、防漏容器内，密封运出实验室。
离开该系统进行消毒的物料，在转移前应包装，其包装应符合有关地点、州、联邦法规。
9、实施操纵昆虫和龋齿动物的程序(参见附录G)(另发)二、专门操作：1、在开展有关传染病源工作时，实验室主任应禁止或限制人员进入实验室。
一样情形下，易感人员或感染后会显现严峻后果的人员，不承诺进入实验室或动物房，例如，患有免疫缺陷或免疫抑制的人，其被感染的危险性增加。
实验室主任对每种情形的估量和决定谁能进入实验室或动物房工作，负有最终责任。
2、实验室主任应制定规章和程序，只有告知潜在风险并符合进入实验室专门要求(如，通过免疫接种)的人，才能进入实验室。
3、存在外源性病源时，实验室入口处应贴有生物危险标志，并显示以下信息：有关病源、生物安全级别、免疫接种要求、研究人员姓名、号码、在实验室中必须佩带的个人防护设施、出实验室所要求的程序。
生物安全培训--二级生物安全实验室操作规范
切记：
• 仅有先进的设施、设备和装备还不足以 保证实验室的生物安全，作为实验室活 动主体的操作者必须履行良好的行为规 范才能最大限度保证实验室的生物安全。
• 良好的生物安全实验室技术规范要满足 保护操作者和实验环境的要求，必要时 还要考虑对操作对象的保护。
• 对于良好的实验室操作技术规范每个操作者 都必须时刻铭记在心。
• 对于每一个新进入实验室的工作人员都应该 给予严格的训练，以使其掌握正确的要领， 避免养成不良的习惯，从而保证以正确的意 识、操作技术和工作习惯展开工作。
• 养成正确的生物安全意识非常重要，它可以 使操作者最大限度的保护自己，避免失误和 事故的发生，哪怕即使发生意外，也会进行 妥善的处理。
从事实验活动都应遵循下列基本
• 为了防止眼睛或面部受到喷溅物的污染、 碰撞或人工紫外线辐射的伤害，必须戴 合适的安全眼镜、面罩或其他防护设备。
• 严禁穿着实验防护服离开实验室工作区 域。
• 不得在实验室内穿露脚趾的鞋。 • 禁止在实验室工作区域进食、饮水、吸
烟、化妆和处理角膜接触镜。 • 禁止在实验室工作区域储存食品和饮料。 • 在实验室内用过的防护服不得和日常服
• 当发生大量的溢出时，液体会通过前面或后部 的格栅流到下面去，这时要求更广泛的消毒。 安全柜内的所有的物品应该进行表面消毒并拿 出安全柜。
• 应该使消毒液维持20-30分钟的适当接触时间 • 如果溢出的液体含有放射性材料，可采取类似
的程序。并应该与辐射安全人员联系，寻求特 殊的指导。
八）气体消毒
对于关键的危险步骤设计出可行的防护 措施；
• ③熟悉各级生物安全实验室运行的一般 规则，掌握各种仪器、设备、装备的操 作步骤和要点，进行正确的操作和使用， 对于各种可能的危害应非常熟悉；
BSL-2ABSL-2生物安全实验室病毒实验室 培训知识点
BSL-2/ABSL-2生物安全实验室/病毒实验室培训知识点基本要求BSL-2实验室培训申请人具备3个月以上的细胞室工作经验；能够严格遵守本单位及实验室生物安全规程；既往无不良安全行为记录。
特别要求BSL-2+实验室培训除满足基本要求外，还应具备以下条件：申请人参加过BSL-2实验室培训，并具备3个月以上BSL-2实验室工作经验。
特别要求ABSL-2实验室培训除满足BSL-2+实验培训要求外，还应具备以下条件：已取得上海市实验动物上岗证；或参加过上海巴斯德研究所实验动物上岗培训并考试合格生物安全狭义指现代生物技术的研究、开发、应用以及转基因生物的跨国越境转移可能对生物多样性、生态环境和人类健康产生潜在的不利影响。
广义指与生物有关的各种因素对社会、经济、人类健康及生态系统所产生的危害或潜在风险。
实验室生物安全1防止发生病原体或毒素无意中暴露或意外释放的防护原则、技术和行为。
2实验室的生物安全条件和状态不低于容许水平，可避免实验室人员、来访人员、社区和环境受到不可接受的损害，符合相关法规、标准等对实验室生物安全责任的要求。
生物安全防止发生病原体或毒素无意中暴露或意外释放的防护原则、技术和行为。
生物安全保障单位和个人为防止病原体或毒素丢失、被窃、滥用、转移或有意释放而采取的安全措施。
实验室相关感染实验室感染主要途径注射器针头或其他污染锐器意外接种；液体溢洒和喷溅到皮肤和粘膜；通过口吸移液或用手指或污染的物体触摸口或眼睛从而摄入或接触；动物咬伤和抓伤；吸入传染性气溶胶；20%可明确感染的原因；80%是由工作人员操作失误引起；20%是由设备故障引起；80%是不明原因的感染，可能为气溶胶传播感染。
实施实验室生物安全管理的目的保护人员和环境免受感染性生物因子的潜在暴露实验室生物安全管理体系目标保证实验室设施、设备、个体防护装备及相关物品符合国家有关的安全要求，定期检查、维护、更新，确保不降低其设计性能。
保证实验工作人员均可得到持续培训及继续教育。
生物安全二级(BSL2)实验室标准操作手册培训
【生物安全实验室/主要术语】
气锁air lock
具备机械送排风系统、整体消毒灭菌条件、 化学喷淋（适用时）和压力可监控的气密 室，其门具有互锁功能，不能同时处于开 启状态。
缓冲间buffer room
设置在被污染概率不同的实验室区域间的 密闭室，需要时，设置机械通风系统，其 门具有互锁功能，不能同时处于开启状态
【生物安全实验室/主要术语】
主要术语
气溶胶aerosols 悬浮于气体介质中的粒径一般为 0.001μm～100μm的固态或液态微 小粒子形成的相对稳定的分散体系
【生物安全实验室/主要术语】
生物安全柜biological safety cabinet， BSC 具备气流控制及高效空气过滤装置的操 作柜，可有效降低实验过程中产生的有 害气溶胶对操作者和环境的危害
【生物安全实验室/负压状态BSL－2/生物安全柜】
BSC-II-B2型
▪ 实验区有垂直层流 ▪ 前窗进风气流平均
流速≥0.50m/s ▪ 用风道连接排至室
外 ▪ 循环气流比例为
0 — 全排 ▪ 正压污染区被负压
区域包围
【生物安全实验室/负压状态BSL－2/生物安全柜】
A1型、A2型 排风方式
室内循环 室外排风
【生物安全实验室/BSL－2/常压状态】
若房间面积足够，宜在进口处设置隔 断，形成前室和核心工作间
衣柜
核心实验间
前室
双扉传递窗
边台
实验室工作区域外应有存放备用物品的条件
【生物安全实验室/BSL－ 2/负压状态】
负压状态——建设要点
平面设置 / 布局 压力梯度 气流组织 人流组织 物流组织
【生物安全实验室/BSL－ 2/负压状态】
生物安全二级实验室
第二节生物安全二级（BSL-2）实验室防护屏障根据所操作的生物因子的危害程度和采取的防护措施，相关防护屏障要符合相应生物安全级别的要求。
生物安全二级水平（BSL-2）实验室：一、警示标识1、实验室的建筑物入口、实验室入口、实验室操作间，仪器设备等都粘贴相应的警示标识，列明该实验室内各种潜在危险。
2、生物危害标识：标志底色为黄色，文字为黑色生物危险二级非工作人员禁止入内3、化学品危险标识根据实验室现有危险化学品的危险特性和状态，做以下标识：爆炸品、易燃气体、易燃液体、易燃固体、有毒品、腐蚀品、致癌致畸品。
二、物理防护屏障实验室生物安全必须配备初级物理防护屏障，它包括各级生物安全设备和个人防护装备（初级防护屏障）。
实验室的设施结构和通风设计构成次级物理防护屏障（次级防护屏障）。
能产生传染物外溢、溅出和气溶胶的操作，包括离心、研磨、搅拌、强力震荡混合、超声波破碎、打开装有传染性材料的容器、动物鼻腔注射、收取感染动物和孵化卵的组织等，都要使用Ⅱ级生物安全柜和物理防护设备。
三、设施和设备1、实验室设施（次级防护屏障）在建筑中，实验室与一般区域隔离。
1.1 建筑结构和平面布局建筑物抗震能力八级，防鼠、防虫、防盗。
建筑物内实验室安装有门禁系统，禁止无关人员进入。
实验室门口处设有柜子，将个人服装与实验服分开放置。
实验室有安全通道和紧急出口，有明显标识。
1.2 密闭性和内表面实验室的墙壁、天花板和地面的表面光滑、易清洁、不积尘、不渗水、不凝集蒸汽、耐化学品和消毒剂的腐蚀。
地表面平整，防滑。
工作台面易于清洁，防水，耐热、有机溶剂、酸、碱和常用消毒剂的损害和腐蚀。
实验室内所有的门可关闭；实验室出口有在黑暗中可明确辨认的标识。
1.3 空调每个实验室都安装有空调。
1.4 照明适合于室内一切活动。
1.5 可靠的电力供应。
冰箱配置有备用电源。
2、安全设备（初级防护屏障）2.1 防护服装2.2 防护手套2.3 生物安全柜感染性材料的操作，如细菌分离、组织培养、鸡胚接种、动物体液的收取等，都应在Ⅱ级生物安全柜内进行。
二级生物安全实验室ABSL-2标准
二级生物安全实验室ABSL-2标准BSL—2与BSL—1类似，适合于对人和环境有中度潜在危险的病源，与BSL—1的区别在于：(1)实验人员均接受过病源处理方面的特殊培训，并由有资格的科学工作者指导；(2)进行实验时，限制进入实验室；(3)对于污染的锐器，要特别注意；(4)某些可能产生传染性气溶胶或飞溅物的过程。
应在生物安全柜中或其它物理遏制设备中进行。
以下的标准及特殊操作、安全设备及设施和BSL—2病源有关：一、标准微生物操作：1、实验时，未经实验室主任同意，限制或禁止进入实验室。
2、进行活体处理后，实验人员要洗手；离开实验空前脱手套。
3、不许在工作区域饮食、吸烟、清洗隐型眼镜和化妆。
食物应存放在工作区域以外专用橱柜或冰箱中。
4、不能用嘴移液，只能用机械装置移液。
5、制定锐器安全使用规范。
6、所有的操作过程应尽量细心，避免产生溅出和气溶胶。
7、实验完毕、下班前、活体溅出或溢出时，都应使用对病源有效的消毒剂进行台面消毒。
8、所有的培养物、储存物及其它规定的废物在释放前，均应使用可行的消毒方法进行消毒，如高压灭菌。
转移到就近实验室消毒的物料应置于耐用、防漏容器内，密封运出实验室。
离开该系统进行消毒的物料，在转移前应包装，其包装应符合有关地方、州、联邦法规。
9、实施控制昆虫和龋齿动物的程序(参见附录G)(另发)二、特殊操作：1、在开展有关传染病源工作时，实验室主任应禁止或限制人员进入实验室。
一般情况下，易感人员或感染后会出现严重后果的人员，不允许进入实验室或动物房，例如，患有免疫缺陷或免疫抑制的人，其被感染的危险性增加。
实验室主任对每种情况的估计和决定谁能进入实验室或动物房工作，负有最终责任。
2、实验室主任应制定规章和程序，只有告知潜在风险并符合进入实验室特殊要求(如，经过免疫接种)的人，才能进入实验室。
3、存在外源性病源时，实验室入口处应贴有生物危险标志，并显示以下信息：有关病源、生物安全级别、免疫接种要求、研究人员姓名、电话号码、在实验室中必须佩带的个人防护设施、出实验室所要求的程序。
BSL-2ABSL-2生物安全实验室病毒实验室-培训知识点
BSL-2/ABSL-2生物安全实验室/病毒实验室培训知识点基本要求BSL-2实验室培训申请人具备3个月以上的细胞室工作经验；能够严格遵守本单位及实验室生物安全规程；既往无不良安全行为记录。
特别要求BSL-2+实验室培训除满足基本要求外，还应具备以下条件：申请人参加过BSL-2实验室培训，并具备3个月以上BSL-2实验室工作经验。
特别要求ABSL-2实验室培训除满足BSL-2+实验培训要求外，还应具备以下条件：已取得上海市实验动物上岗证；或参加过上海巴斯德研究所实验动物上岗培训并考试合格生物安全狭义指现代生物技术的研究、开发、应用以及转基因生物的跨国越境转移可能对生物多样性、生态环境和人类健康产生潜在的不利影响。
广义指与生物有关的各种因素对社会、经济、人类健康及生态系统所产生的危害或潜在风险。
实验室生物安全1防止发生病原体或毒素无意中暴露或意外释放的防护原则、技术和行为。
2实验室的生物安全条件和状态不低于容许水平，可避免实验室人员、来访人员、社区和环境受到不可接受的损害，符合相关法规、标准等对实验室生物安全责任的要求。
生物安全防止发生病原体或毒素无意中暴露或意外释放的防护原则、技术和行为。
生物安全保障单位和个人为防止病原体或毒素丢失、被窃、滥用、转移或有意释放而采取的安全措施。
实验室相关感染实验室感染主要途径注射器针头或其他污染锐器意外接种；液体溢洒和喷溅到皮肤和粘膜；通过口吸移液或用手指或污染的物体触摸口或眼睛从而摄入或接触；动物咬伤和抓伤；吸入传染性气溶胶；可明确感染的原因；80%是由工作人员操作失误引起；20%是由设备故障引起；80%是不明原因的感染，可能为气溶胶传播感染。
实施实验室生物安全管理的目的保护人员和环境免受感染性生物因子的潜在暴露实验室生物安全管理体系目标保证实验室设施、设备、个体防护装备及相关物品符合国家有关的安全要求，定期检查、维护、更新，确保不降低其设计性能。
保证实验工作人员均可得到持续培训及继续教育。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
【生验室 适用于操作在通常情况下不会引 起人类或者动物疾病的微生物
【生物安全实验室/适用性】
【2】 二级（BSL-2）实验室
适用于操作能够引起人类或者动物 疾病，但一般情况下对人、动物或环 境不构成严重危害，传播风险有限， 实验室感染后很少引起严重疾病，并 且具备有效治疗和预防措施的微生物。
【生物安全实验室/BSL－2实验室】
类型
常 压 状态 负 压 状态
负压状态的生物安全防护性能 高于常压状态。 选择 —— 根据需要
【生物安全实验室/BSL－2/常压状态】
常压状态
“无特别要求” 生物安全柜 洗眼器/洗手池 标志 实验室主入口的门、放置生物安全柜 实验间的门应可自动关闭 实验室主入口的门应有进入控制措施
地面 应平整、防滑，不应铺设地毯
【生物安全实验室/设计原则及基本要求】
不得循环使用动物实验室排出的空气 动物实验室的设计，如：空间、进出 通道、解剖室、笼具等应考虑动物实 验 及 动物福利的要求
【生物安全实验室】
二级生物安全实验室BSL－2
【生物安全实验室/ BSL-2实验室】
位置
BSL-2实验室在建筑物中的位置通 常无特别要求； 可根据实验活动的需要确定； 当建筑条件允许时，宜设于人流、 物流相对较少的僻静处，自成隔 离区域。
生物安全二级（BSL-2）实验室 标准操作手册培训
主讲人：陈贤平 日 期：2013.07.03
【生物安全实验室】
概念 生物安全（biosafety）指避免危险生物
因子造成实验室人员暴露，向实验室外扩 散并导致危害的综合措施。
WHO定义为“保护工作人员避免接触与 所进行实验工作（临床或研究）有关的微 生物因子的生物安全原则和技术的实践”。
【生物安全实验室/主要术语】
高效空气过滤器（HEPA过滤器）high efficiency particulate air filter
通常以0.3μm微粒为测试物，在规定的 条件下滤除效率高于99.97%的空气过滤 器
【生物安全实验室/设计原则及基本要求】
设计原则及基本要求
实验室的走廊和通道应不妨碍人员和 物品通过 应设计紧急撤离路线，紧急出口应有 明显的标识
【生物安全实验室/设计原则及基本要求】
房间的门根据需要安装门锁，门锁应 便于内部快速打开 需要时（如：正当操作危险材料时）， 房间的入口处应有警示和进入限制
【生物安全实验室/设计原则及基本要求】
应评估生物材料、样本、药品、化学 品和机密资料等被误用、被偷盗和被 不正当使用的风险，并采取相应的物 理防范措施 实验室内温度、湿度、照度、噪声和 洁净度等室内环境参数应符合工作要 求和卫生等相关要求
【生物安全实验室/BSL－2/常压状态】
若房间面积足够，宜在进口处设置隔 断，形成前室和核心工作间
衣柜
核心实验间
前室
双扉传递窗
边台
实验室工作区域外应有存放备用物品的条件
【生物安全实验室/BSL－ 2/负压状态】
负压状态——建设要点
平面设置 / 布局 压力梯度 气流组织 人流组织 物流组织
【生物安全实验室/BSL－ 2/负压状态】
【生物安全实验室/适用性】
【3】 三级（BSL-3）的实验室 适用于操作能够引起人类或者动物
严重疾病，比较容易直接或者间接在 人与人、动物与人、动物与动物间传 播的微生物 。
【生物安全实验室/适用性】
【4】 四级（BSL-4）实验室 适用于操作能够引起人类或者动物
非常严重疾病的微生物，以及我国尚 未发现或者已经宣布消灭的微生物 。
【生物安全实验室/设计原则及基本要求】
实验室设计还应考虑节能、环保及舒 适性要求， 应符合职业卫生要求和人机工效学要 求 实验室应有防止节肢动物和啮齿动物 进入的措施
【生物安全实验室/设计原则及基本要求】
门 应有可视窗并可锁闭，门锁及门的 开启方向应不妨碍室内人员逃生
墙壁、天花板、地面 应易清洁、不渗水、耐化学品和消 毒灭菌剂的腐蚀
生物安全标识
【生物安全实验室】
目的
保 护操作人员 保护环境 保护样品
【生物安全实验室】
实验室生物安全防护水平分级
防护水平分为 一级、二级、三级、四级， BSL-1、BSL-2、BSL-3、BSL-4 ABSL-1、ABSL-2、ABSL-3、ABSL-4 （表示动物活体操作）
一级防护水平最低，四级防护水平最高
【生物安全实验室/主要术语】
气锁air lock
具备机械送排风系统、整体消毒灭菌条件、 化学喷淋（适用时）和压力可监控的气密 室，其门具有互锁功能，不能同时处于开 启状态。
缓冲间buffer room
设置在被污染概率不同的实验室区域间的 密闭室，需要时，设置机械通风系统，其 门具有互锁功能，不能同时处于开启状态
平面布局——要点
应符合 人流组织 物流组织 其他各环节 的生物安全性要求
【生物安全实验室/BSL－ 2/负压状态】
平面设置
更衣室＋缓冲间＋主实验室 ［准备间/洗消间＋淋浴室＋样品库］
使用独立空调时应设（预留）机房， 无需设污物专用走廊 及 二更衣室
【生物安全实验室/BSL－ 2/负压状态】
基本平面结构示意图
【生物安全实验室】
概念 生物安全实验室（biosafety laboratory）
是通过实验室设计建造、实验设备的配置、 个人防护装备的使用，通过严格遵守预先 制定的标准操作程序和管理规范等综合措 施，确保操作生物危险因子的工作人员不 受实验对象的伤害，确保周围环境不受其 污染的实验室。
生物安全标识
【生物安全实验室/主要术语】
主要术语
气溶胶aerosols 悬浮于气体介质中的粒径一般为 0.001μm～100μm的固态或液态微 小粒子形成的相对稳定的分散体系
【生物安全实验室/主要术语】
生物安全柜biological safety cabinet， BSC 具备气流控制及高效空气过滤装置的操 作柜，可有效降低实验过程中产生的有 害气溶胶对操作者和环境的危害
更衣室 缓冲间
准备间
核心工作间
边台 传递窗
【生物安全实验室/负压状态BSL－ 2/平面布局】
人流进入路线
公共清洁区
更衣室 污染区
缓冲间
【生物安全实验室/负压状态BSL－2/平面布局】