天然产物化学实验指导书
天然产物化学实验技术教学设计
天然产物化学实验技术教学设计一、实验目的本实验的主要目的是掌握天然产物的分离、提取和鉴定的基本原理和实验技术，培养学生自主探究的能力和实验操作能力，同时提高学生对天然产物和其中化学成分的认识。
二、实验内容1.植物的提取：通过浸泡、煎煮、蒸馏等方法，提取植物中的有效成分，得到植物提取物。
比如，利用水提法从红薯中提取淀粉。
2.外部特征鉴定：通过肉眼观察、显微镜观察等方法，对提取物的颜色、形态、质地等外部特征进行鉴定。
3.化学成分鉴定：利用常用化学试剂对始终物中的主要成分进行鉴定。
比如，加入碘酸钾试剂，能检测出淀粉的存在。
4.分子结构鉴定：通过对分离和提取的化合物进行分子结构鉴定，了解化合物的物理性质和化学性质。
比如，通过核磁共振谱和红外光谱进行对淀粉的分子结构进行鉴定。
三、实验步骤1.实验前准备：准备好所需的实验器材、试剂和样品。
同时，了解样品性质和实验操作方法，制定实验计划和步骤。
2.植物的提取：按照所选方法提取植物中的有效成分，得到植物提取物。
3.外部特征鉴定：对提取物的颜色、形态、质地等外部特征进行鉴定。
4.化学成分鉴定：利用常用化学试剂对提取物进行鉴定，如碘酸钾对淀粉进行鉴定。
5.分子结构鉴定：通过核磁共振谱和红外光谱对分离和提取的化合物进行分子结构鉴定。
四、实验器材和试剂1. 实验器材：•显微镜•试管•反应瓶•称量器•蒸馏器•滤纸2. 实验试剂：•碘酸钾•酚酞溶液•硫酸•CHCl3•NaHCO3五、实验注意事项1.实验器材和试剂的选择要符合实验要求，保证实验的可靠性和准确性。
2.实验过程中要注意操作规范，避免实验操作失误导致意外发生。
3.实验的化学试剂和有毒气体要妥善处理，避免对人体、环境和设备造成损害。
4.实验完成后，要将实验器材、试剂和废弃物等进行妥善处理，保持实验室的整洁和清洁。
六、实验结论通过本实验，可以得到有关植物提取、鉴定和分子结构的有用信息，培养学生自主探究的能力和实验操作能力，提高学生对天然产物和其中化学成分的认识和理解。
天然产物分离提取实验讲义正文
实验一番茄红素和ß-胡萝卜素的提取与分离番茄中含有红色色素番茄红素和黄色色素ß-胡萝卜素，番茄红素具有很强的抗氧化作用，其抗氧化能力为维生素的100倍，同时番茄红素具有显著的抗癌作用，现已查明：番茄红素可以防止前列腺癌，乳腺癌及消化道癌的发生，并可以降低皮肤癌的发病率。
ß-胡萝卜素是人体不可缺少的维生素的前体物质并具有抗氧化活性。
本实验从新鲜番茄中提取天然色素，通过自动层析仪分离番茄红素和ß-胡萝卜素实验仪器：自动层析仪（上海沪西分析仪器厂）；紫外分光光度计1810（北京普析通用科技有限公司）实验试剂：95%乙醇，二氯甲烷；苯；氧化铝，石油醚（60-90℃）实验步骤：称取10g新鲜番茄，捣碎后置于100mL三口瓶中，加20mL95%乙醇将混合物在水浴上加热回流5min，用纱布将番茄包好，挤出其中汁液，将液体保存于锥形瓶中，固体重新置入三口瓶中加20mL二氯甲烷加热回流5min，抽滤，将滤液与前面的液体合并，将合并液体倒入分液漏斗中，加入10mL饱和食盐水，静置分层，放出下层带颜色的二氯甲烷层，使其流经一个在颈部塞有松软棉花的且在棉花上铺有无水硫酸钠的漏斗，将滤液置于蒸馏装置中蒸发,蒸馏瓶中的残留物为类胡萝卜素粗品，将此粗品用1苯溶解，通过柱色谱分离番茄红素和ß-胡萝卜素。
自动层析仪的使用1.装柱：拧下层析柱两端的旋钮，注意要将垫片和垫圈保存好，将柱子在热风干燥器上吹干，将下端旋钮旋上，干法装入氧化铝至离上端约有5处，拧上上端旋塞，用木棒轻轻敲打柱体使氧化铝填充均匀，2.打开恒流泵，以较大的速度向柱内注入石油醚，当层析柱下端有稳定的液体流出时，关闭恒流泵，拧开层析柱上端旋塞，注入0.2-0.5色素，迅速拧上旋塞，开动恒流泵和自动部分收集器，设定好工作参数，收集样品，待红色ß-胡萝卜素全部洗脱后，可用乙醇作洗脱剂洗脱黄色的番茄红素。
3.将带有红色和黄色的试管在水浴上蒸发至干，得到番茄红素和ß-胡萝卜素纯品。
天然产物分离制备技术实验讲义
天然产物分离制备技术实验指导四川理工学院生物工程学院2015年9月实验一、槐米中芦丁的提取与鉴定实验学时：6学时[槐米中主要化学成分]1．芦丁（rutin）：浅黄色小针状结晶，C3连两分子糖，难溶于亲脂性溶剂，易溶于热醇（MeOH、EtOH），可溶于热水、碱水。
2．槲皮素（quercetin）：黄色针晶，可溶极性有机溶剂，难溶于水、苯、乙醚、CHCl3等溶剂。
3．其它成分：皂苷、白桦脂醇、槐二醇、槐花米甲、乙、丙素以及多糖、粘液质等。
一、实验目的通过从槐花米中提取芦丁的实验，掌握用酸碱调节提取黄酮类化合物的方法。
二、实验原理芦丁（Rutin）广泛存在于植物界中，现已发现含芦丁的植物至少在70种以上，如烟叶、槐花、荞麦和蒲公英中均含有。
尤以槐花米（为植物Sophora japonica的未开放的花蕾）和荞麦中含量最高，可作为大量提取芦丁的原料。
芦丁是由斛皮素（Quercetin）3位上的羟基与芸香糖（Rutinose）〔为葡萄糖（Glucose）与鼠李糖（Rhamnose）组成的双糖〕脱水合成的苷。
芦丁具有维生素P样作用。
有助于保持及恢复毛细血管的正常弹性，主要用作防治高血压病的辅助治疗剂，亦可用于防治因缺乏芦丁所致的其他出血症。
芦丁为浅黄色粉末或极细的针状结晶，含有三分子的结晶水，熔点为174~178℃，无水物188~190℃。
溶解度：冷水中为1:10000；热水中1:200；冷乙醇1:650；热乙醇1:60；冷吡啶1:12。
微溶于丙酮、乙酸乙酯，不溶于苯、乙醚、氯仿、石油醚，溶于碱而呈黄色。
结构式如下：O HOOH OHOHO O CH2O本实验方法一是：利用芦丁在冷热水中的溶解度差异进行提取；方法二是：利用芦丁分子中具有酚羟基，显弱酸性，在碱水中成盐增大溶解能力，用碱水为溶剂煮沸提取，提取液加酸酸化后又成为游离的芦丁而析出，利用芦丁对冷水和热水的溶解度悬殊的特性进行精制，并通过显色反应和纸色谱法进行检识。
天然产物实验
（一）实验原理
由槐花米中提取芸香苷的方法很多， 本实验是根据芸香苷在冷水和热水中的溶 解度差异的特性进行提取和精制，或根据 芸香苷分子中具有酚羟基，显弱酸性，能 与碱成盐而增大溶解度，以碱水为溶剂煮 沸提取，其提取液加酸酸化后则芸香苷游 离析出。
（二）芸香苷的提取
方法Ⅰ：水提取法
槐花米粗粉20g 加10倍量沸水煮沸20min， 反复2次，趁热脱脂棉滤过
2％柠檬酸甲醇溶液3～4滴 褪色 不褪色
（六）注意事项
1．在提取前应将槐花米略捣碎，使芸 香苷易于被热水溶出。
2．在提取过程中，加入硼砂的目的是 使其与芸香苷分子中的邻二酚羟基发生络 合，既保护了邻二酚羟基不被氧化破坏， 又避免了邻二酚羟基与钙离子络合（芸香 苷的钙络合物不溶于水），使芸香苷不受 损失，提高收得率。
滤液 静置析晶，苷
（四）芸香苷的水解
精制芸香苷 加2％硫酸100ml，加热回流30min， 至沉淀不再增加为止，放冷抽滤
沉淀
滤液
用少量水洗去余酸，晾干 加氢氧化钡中和至中性，滤过
槲皮素粗品 硫酸钡沉淀
95％乙醇 重结晶
槲皮素精制品
滤液
浓缩至干，加 2～3ml乙醇溶解
糖供试液
注：抽滤瓶的使用：
①开始顺序：减滤纸（大小 应合适）→安装分液漏斗（分 液漏斗下斜口应对准抽气口） →连接真空泵→打开真空泵→ 抽滤。
②结束时顺序：先拔掉抽滤 瓶上与真空泵连接的像皮管， 再拆除装置。否则真空泵中的 水回因为压力较抽滤瓶中空气 的压力大而流入抽滤瓶。
（五）芸香苷、槲皮素及糖的检识
实验名称 Molish反应 盐酸-镁粉反应 醋酸镁反应 三氯化铝反应 锆-柠檬酸反应
实验试剂
现象
《天然产物提取工艺学》实验
《天然产物提取工艺学》《天然产物提取工艺学》实验实验实验指导指导指导书书编者：徐怀德西北农林科技大学食品科学与工程学院二00九年五月目录实验室规则 (2)实验室安全守则 (3)急救常识 (4)实验一从辣椒中提取分离辣椒红色素 (5)实验二从槐米中提取芸香甙与定性反应 (10)实验室规则1、实验室所用的溶剂、药品很多是易燃、易爆、有毒、有腐蚀性、刺激性的物质，且实验操作又常在加温或减压情况下进行，需用各种电源、电器及其他仪器，操作不慎会造成火灾、爆炸、中毒、触电、漏水等事故，因此必须遵守实验室各项制度，严格遵守操作规程，听从教师指导，维护实验室安全，如发生事故应立即采取措施并报告教师。
2、实验前应做好预习，明确实验目的、要求、操作步骤、方法和基本原理，做好计划，在不清楚实验目的及每一操作步骤之前，切勿开始做任何实验。
3、实验时要做到整齐、清洁，保持桌面、仪器、水槽、地面四洁。
任何固体物质不能投入水槽，切不可将可燃或易挥发的溶剂倒入水槽。
4、实验前应检查仪器、装置是否合格，公用仪器和试剂应在指定地点使用，并保持清洁，不能任意挪动。
5、进入实验室必须穿工作服，实验过程中不能擅自离开，认真做好实验记录，实验室内应保持安静，严禁吸烟。
6、实验过程中要节约水、电、药品，爱护仪器，仪器损坏后应填写报损单，注明原因，由实验教师按规定处理。
7、实验完毕，值日生应将实验室打扫干净，关好水、电、门、窗，方可离开。
实验室安全守则在实验中，常使用甲醇、乙醇、乙醚、石油醚等易挥发、易燃、有毒的有机溶剂及易碎的玻璃仪器，操作不慎，容易发生事故。
常见事故有“火灾”、“爆炸”、“外伤”、“中毒”等，为防止事故发生，必须随时注意以下几点：1、在使用或存放易燃、易挥发的有机溶剂时，必须远离明火，万一有机溶剂着火，应立即用棉布或其它物品盖住，使之隔绝空气而熄。
2、不得在烘箱内干燥带有有机溶剂的仪器和物品。
3、回流或蒸馏易燃有机溶剂时，瓶内液量不超出三分之二，不能使用明火加热，应根据情况选用水浴、油浴或沙浴，加热前要在溶液内放入沸石，防止暴沸，但在加热途中不得加入沸石或活性炭，否则也会暴沸。
天然药化实验指导书-2014版
实验一甘草中总皂苷的提取、分离与含量测定一、实验目的1．熟练进行甘草中总皂苷的提取和精制方法。
2．能够用化学法和色谱法检识甘草中的皂苷类物质。
二、实验原理甘草酸和甘草次酸均为含有羧基的酸性三萜皂苷，甘草酸酸性较强，在植物中与钾成盐而溶于水，易溶于热水。
而甘草酸在冷水中的溶解度较小，所以我们可用水提取甘草酸的钾盐，再加稀酸，放冷，使甘草酸游离沉淀析出。
也可以用乙醇提取后，乙酸乙酯萃取除去甘草中的黄酮类化合物，然后利用大孔吸附树脂的吸附作用，对甘草总皂苷进行富集，再利用硅胶进行柱层析分离。
三、主要仪器及耗材仪器：水浴锅、旋转蒸发仪、循环水真空泵、三用紫外仪。
原料与试剂：甘草粗粉、乙醇、乙酸乙酯、D101大孔吸附树脂（或AB-8大孔树脂）、色谱用硅胶、氯仿、丙酮、硅胶薄层板。
四、实验内容与步骤1．甘草总皂苷的提取（1）水提法：取甘草粗粉20克，加水煎煮提取2～3次，滤过得水提液，静置，取上清液，浓缩得甘草浸膏（含甘草酸>20%）。
浸膏加3倍量水溶解，加硫酸酸化，放置，滤过得甘草酸粗品。
（2）醇提法：取甘草粗粉20g，150mL60%乙醇溶液于70℃下回流提取1.5h，抽滤制得甘草提取液，放置待用。
2．甘草总皂苷的富集甘草提取液减压浓缩至50mL左右，等体积的乙酸乙酯萃取2次，除去黄酮类化合物。
萃取后的水相减压浓缩除去残留的乙酸乙酯后上大孔吸附树脂。
以下两种大孔吸附树脂任选一种即可。
D101型大孔吸附树脂：称取20~25克D101型大孔吸附树脂（或者30gAB-8型大孔吸附树脂），预处理后装柱，甘草总皂苷的粗提液过D101型大孔吸附树脂，待吸附完全后，先用蒸馏水冲洗树脂至流出液无颜色，再用50%乙醇溶液2~3个柱体积冲洗树脂，并收集该部分的洗脱液。
AB-8型大孔吸附树脂：取30克AB-8型大孔吸附树脂，预处理后装柱，甘草总皂苷的粗提液过AB-8型大孔吸附树脂，待吸附完全后，先用蒸馏水冲洗树脂至流出液无颜色，再用2~3个柱体积的70%乙醇溶液冲洗树脂，并收集该部分的洗脱液。
天然产物化学实验
实验十一 秦皮中七叶苷、七叶内酯的提取、分离和鉴定秦皮为本樨科白蜡树属植物白蜡树（Fraxinus Chinensis Poxb ）或苦沥白蜡树（F.rhynchophylla Hance ）或小叶白蜡树（F.bungeana DC ）的树皮,味苦，性微寒。
具有清热、燥湿、收涩作用。
主治温热痢疾、目赤肿瘤等症。
秦皮中含有多种内酯类成分及皂苷、鞣质等，其中主要有七叶苷、七叶内酯、秦皮苷及秦皮素等。
多有抗菌消炎的生理活性，七叶内酯对细菌性痢疾、急性肠炎有较好治疗效果，兼有退热作用，毒付作用小，几无苦味。
适于小儿服用。
一．秦皮中主要成分的结构及性质1．七叶苷（esculin ），又叫马粟树皮苷：白色粉末状结晶，mp205～206℃。
易溶于热水（1:15），可溶于乙醇（1:24），微溶于冷水（1:610），难溶于乙酸乙酯，不溶于乙醚、氯仿。
在稀酸中可水解。
水溶液中有蓝色荧光。
O HO HOO O O HO O glu七叶苷（esculin ） 七叶内酯（esculetin ）2．七叶内酯（esculetin ）：黄色针状结晶，mp276℃。
易溶于沸乙醇及氢氧化钠溶液，可溶于乙酸乙酯，稍溶于沸水，几不溶于乙醚、氯仿。
3．秦皮苷（fraxin ）：mp205℃。
O CH 3O HOO Oglu O CH 3O HO O OH秦皮苷（fraxin ） 秦皮素（fraxetin ）4．秦皮素（fraxetin ）：mp227～228℃。
二．实验目的1．掌握从秦皮中提取、分离七叶苷、七叶内酯的方法。
2．熟悉七叶苷、七叶内酯的性质及鉴定法。
三．实验原理根据七叶苷、七叶内酯均能溶于沸乙醇，可用沸乙醇将二者提取出来，再利用二者在乙酸乙酯中的溶解性不同而分离之。
四．实验材料材料秦皮粗粉、乙醇、氯仿、乙酸乙酯、无水硫酸钠、甲醇、1%FeCl 3、浓氨水、甲苯、甲酸乙酯仪器索氏提取器、紫外灯、试管、梨形分液漏斗、布氏漏斗、精制棉、循环水泵、旋转蒸发器、电热套、水浴锅五．实验内容（一）提取：取秦皮粗粉150g 于索氏提取器中，加400ml 乙醇回流10-12小时，得乙醇提取液，减压回收溶剂至浸膏状，即得总提取物。
天然产物化学实验指导书
天然产物化学实验指导书适用专业：化学工程与工艺专业学时：10福建农林大学材料工程学院20 D 实验一 陈皮中橙皮苷的提取分离与检识（10学时）（综合性实验）一、目的要求1．掌握橙皮苷的结构特点和理化性质及一般提取方法。
2．了解橙皮苷的检识方法。
二、主要化学成分的结构及性质陈皮为芸香科植物福橘Citrus tangerina Hort.et Tanaka 、朱橘Citrus erythrosa Tanaka 的果皮。
含挥发油和黄酮类成分橙皮苷、川陈皮素等。
橙皮苷(hesperidin) 又称陈皮苷、橘皮苷。
分子式C 28H 34O 15，为细树枝状针形结晶，mp.258～262℃，［α］ -76℃（C=2,吡啶）。
易溶于稀碱及吡啶，微溶于甲醇及热冰醋酸，几乎不溶于丙酮、苯及氯仿，在60℃溶于二甲基甲酰胺及甲酰胺。
O O OH OH OCH 3橙皮苷三、实验原理本实验是根据陈皮中的主要成分是挥发油和橙皮苷，先用石油醚溶除挥发油，再用甲醇提取及用活性炭精制得到橙皮苷。
也可利用橙皮苷易溶于稀碱水的性质，进行碱溶酸沉法提取，用甲酰胺精制得橙皮苷。
四、实验步骤1．提取、精制方法Ⅰ：陈皮粗粉 加50%～60％ 乙醇回流并连续提取至提取液无色，合并取液，回收乙醇，过滤后放置，待其沉淀完全，滤过沉淀物↓ 水洗净，70℃下低温干燥粗制橙皮苷↓加50％乙醇（内含2%KOH）的碱性溶液溶解，滤除不溶物滤液↓加稀HCl中和，析出沉淀，收集沉淀，乙醇重结晶白色结晶（橙皮苷）方法Ⅱ：川陈皮粉Et2O-MeOH 冷浸数次，滤过↓↓O-MeOH 液残渣Et2（挥发油、色素、鞣质等）↓MeOH热提多次，至提取液无色甲醇溶液加中性醋酸铅MeOH溶液，静置，滤过↓↓滤液沉淀物（杂质）通H2S，滤过↓↓PbS↓滤液↓减压浓缩、冷却、析晶，EtOH重结晶橙皮苷2．检识（1）Molish反应取橙皮苷少许置于试管中，加乙醇1ml，在水浴中加热溶解，加α-萘酚乙醇溶液2～3滴振摇，倾斜试管45°，沿管壁徐徐滴加1ml 浓硫酸，静置，观察二层溶液界面变化，应呈现紫红色环。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
天然产物化学实验指导书
适用专业：化学工程与工艺专业
学时：10
福建农林大学材料工程学院
20 D 实验一 陈皮中橙皮苷的提取分离与检识（10学时）（综合性实验）
一、目的要求
1．掌握橙皮苷的结构特点和理化性质及一般提取方法。
2．了解橙皮苷的检识方法。
二、主要化学成分的结构及性质
陈皮为芸香科植物福橘Citrus tangerina Tanaka 、朱橘Citrus erythrosa Tanaka 的果皮。
含挥发油和黄酮类成分橙皮苷、川陈皮素等。
橙皮苷(hesperidin) 又称陈皮苷、橘皮苷。
分子式C 28H 34O 15，为细树枝状针形结晶，mp.258～262℃，［α］ -76℃（C=2,吡啶）。
易溶于稀碱及吡啶，微溶于甲醇及热冰醋酸，几乎不溶于丙酮、苯及氯仿，在60℃溶于二甲基甲酰胺及甲酰胺。
O OH OH OCH 3
橙皮苷
三、实验原理
本实验是根据陈皮中的主要成分是挥发油和橙皮苷，先用石油醚溶除挥发油，再用甲醇提取及用活性炭精制得到橙皮苷。
也可利用橙皮苷易溶于稀碱水的性质，进行碱溶酸沉法提取，用甲酰胺精制得橙皮苷。
四、实验步骤
1．提取、精制
方法Ⅰ：
陈皮粗粉 加50%～60％ 乙醇回流并连续提取至提取液无色，合并
取液，回收乙醇，过滤后放置，待其沉淀完全，滤过
沉淀物
↓ 水洗净，70℃下低温干燥
粗制橙皮苷
↓加50％乙醇（内含2%KOH）的碱性溶液溶解，滤除不溶物
滤液
↓加稀HCl中和，析出沉淀，收集沉淀，乙醇重结晶
白色结晶（橙皮苷）
方法Ⅱ：
川陈皮粉
Et2O-MeOH 冷浸数次，滤过
↓↓
O-MeOH 液残渣
Et
2
（挥发油、色素、鞣质等）↓MeOH热提多次，至提取液无色
甲醇溶液
加中性醋酸铅MeOH溶液，静置，滤过
↓↓
滤液沉淀物（杂质）
通H2S，滤过
↓↓
PbS↓滤液
↓减压浓缩、冷却、析晶，EtOH重结晶
橙皮苷
2．检识
（1）Molish反应取橙皮苷少许置于试管中，加乙醇1ml，在水浴中加热溶解，加α-萘酚乙醇溶液2～3滴振摇，倾斜试管45°，沿管壁徐徐滴加1ml 浓硫酸，静置，观察二层溶液界面变化，应呈现紫红色环。
（2）盐酸-镁粉反应取橙皮苷少许置于试管中，加乙醇2ml，在水浴中加热溶解，加入镁粉约50mg振摇后，滴加浓盐酸3～4滴，产生剧烈反应，溶液逐渐由黄色变为红色。
（3）三氯化铝反应取橙皮苷少许置于试管中，加甲醇2ml，在水浴中加热溶解，加1％三氯化铝甲醇试剂2～3滴，呈鲜黄色。
（4）四氢硼钠反应取橙皮苷少许置于试管中，加2ml甲醇溶解，加入等量的2％四氢硼钠的甲醇液，一分钟后，再加浓盐酸或浓硫酸数滴，生成紫色～紫红色。
此反应也可在滤纸上进行。
五、实验说明及注意事项
1．精制橙皮苷粗品时所用活性炭，应事先用稀盐酸处理。
2．橙皮苷微溶于甲醇，故工业生产中，以甲醇为溶剂提取时，应加热提取多次。