叶酸受体靶向性基因载体的合成和细胞转染机理研究
肿瘤靶向性药物载体叶酸-壳聚糖微球的制备及特性研究
肿瘤靶向性药物载体叶酸-壳聚糖微球的制备及特性研究龚金兰;汪森明;胡喜钢;曹漫明;张积仁【期刊名称】《南方医科大学学报》【年(卷),期】2008(28)12【摘要】目的探索叶酸偶联壳聚糖(FA-CTS)纳米粒的合成方法及对肿瘤细胞的靶向性.方法利用叶酸活性酯与壳聚糖分子上的氨基反应形成稳定的酰胺键,制备FA-CTS.再利用壳聚糖在偏酸性溶液中带正电荷,在高速磁力搅拌作用下能与阴离子凝集的特性,将紫杉醇(PTX)做模型药物,制备负载PTX叶酸偶联壳聚糖(FA-CTS/PTX)纳米粒.采用荧光标记法和MTT法评价其肿瘤细胞靶向性.结果所制备的FA-CTS/PTX纳米粒,形态均质规则,无粘连,平均粒径282.8 nm,包封率75.4%,载药量9.0%.荧光标记法结果表明FA-CTS纳米粒的肿瘤细胞亲和性均高于普通CTS纳米粒.MTT法结果显示FA-CTS/PTX纳米粒组的肿瘤细胞抑制率均高于普通CTS/PTX纳米粒组.结论合成的FA-CTS纳米粒可通过叶酸受体途径特异靶向于叶酸受体丰富的肿瘤细胞.【总页数】4页(P2183-2186)【作者】龚金兰;汪森明;胡喜钢;曹漫明;张积仁【作者单位】南方医科大学珠江医院肿瘤中心,广东,广州,510282;南方医科大学珠江医院肿瘤中心,广东,广州,510282;南方医科大学珠江医院肿瘤中心,广东,广州,510282;南方医科大学珠江医院肿瘤中心,广东,广州,510282;南方医科大学珠江医院肿瘤中心,广东,广州,510282【正文语种】中文【中图分类】R73.3【相关文献】1.离子交联法制备叶酸——壳聚糖微球工艺研究 [J], 邢志华;方桂珍2.载阿霉素的叶酸-壳聚糖微球的制备及其体外缓释性研究 [J], 邢志华3.固定化酶载体——多孔壳聚糖微球的制备研究 [J], 马骏;宁光辉;廖子夷;赵仕林4.尺寸均一的壳聚糖微球的制备及其作为胰岛素控释载体的研究 [J], 古永红;王连艳;谭天伟;马光辉5.肿瘤靶向载体N-正辛基-N′-琥珀酰基壳聚糖的制备和结构表征 [J], 许向阳;李玲;殷晓进;周建平;霍美蓉因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
叶酸受体靶向制剂作用机制及临床应用进展
叶酸受体靶向制剂作用机制及临床应用进展
周潮
【期刊名称】《安徽医药》
【年(卷),期】2006(010)011
【摘要】对癌症治疗，传统的药物传递系统已经显示是低效的，化疗因剧烈的副
作用使其使用常常受到限制。
抗肿瘤药物特定传递已经逐渐成为一个吸引人的癌症治疗方法。
叶酸受体靶向制剂作为一个有前途的癌症治疗方法逐渐引起人们的关注，归因于叶酸的小分子体积和结合到细胞表面的叶酸受体的高亲和力。
【总页数】2页(P877-878)
【作者】周潮
【作者单位】广西省玉林市第二人民医院药剂科,广西,玉林,537000
【正文语种】中文
【中图分类】R9
【相关文献】
1.胰高血糖素样肽1受体激动剂作用机制及其临床应用进展 [J], 陈诚;蒋艳敏;卜瑞芳
2.叶酸受体α在胃癌组织中的表达及其与叶酸、亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性以及胃癌生物学行为的关系 [J], 翁玉蓉;房静远;孙丹凤;陈朝飞;陆嵘;顾伟齐;朱红音
3.氟尿嘧啶亚叶酸钙伊立替康与靶向制剂治疗直肠癌转移患者的药学监护 [J], 范蕾;朱亚兰;何依玲
4.叶酸修饰壳聚糖在肿瘤靶向制剂中的研究进展 [J], 冯自立;孙茜;陈旺;胡代花;白
瑜;朱志斌
5.肿瘤治疗用靶向制剂--叶酸介导靶向的阿霉素聚舍物胶束 [J],
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以叶酸受体为靶向的阳离子脂质体的制备与性质考察_闫颖
以叶酸受体为靶向的阳离子脂质体的制备与性质考察闫 颖,齐宪荣＊(北京大学药学院,北京100083)摘要:为了研制一种能通过叶酸受体途径靶向肿瘤细胞的叶酸受体靶向脂质体,将叶酸(f o l a t e ,f o l i c a c i d ,F )、聚乙二醇二胺(p o l y o x y e t h y l e n e -b i s -a m i n e ,N H 2-P E G -N H 2)、琥珀酸酐(s u c c i n i c a n h y d r i d e ,S U C )和二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(d i s t e a r o y l p h o s p h a t i d y l e t h a n o l a m i n e ,D S P E )按序共价连接,并使用薄层色谱和飞行时间质谱确证合成产物为叶酸-聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(f o l a t e -p o l y e t h y l e n e g l y c o l -d i s t e a r o y l p h o s p h a t i d y l e t h a n o l a m i n e ,F -P E G -D S P E )。
膜材选用二棕榈酰磷脂酰胆碱(d i p a l m i t o y l p h o s p h a t i d y l c h o l i n e ,D P P C ),3β-[N -(N ′,N ′-二甲基胺乙基)胺基甲酰基]胆固醇(3β-[N (N ′,N ′-d i m e t h y l a m i n o e t h a n e )c a r b a m o y l ]c h o l e s t e r o l ,D C -C h o l )和F -P E G -D S P E ,以10∶10∶0.75(摩尔比)的配比,以荧光素标记的阴离子葡聚糖(d e x t r a n f l u o r e s c e i n a n i o n i c ,D F A )为模型,用薄膜分散法制备含D F A 的叶酸受体靶向脂质体,其包封率较高(>55%)、稳定性好,平均粒径为144n m ,体外释放慢。
受体介导的叶酸-牛血清白蛋白肿瘤细胞靶向给药系统的研究的开题报告
受体介导的叶酸-牛血清白蛋白肿瘤细胞靶向给药系统的研
究的开题报告
研究背景
肿瘤是人类健康的重要威胁之一，治疗效果存在一定限制，因此开发新型肿瘤治疗方法势在必行。
目前，一些纳米给药系统已被用于肿瘤治疗。
其中牛血清白蛋白（BSA）纳米粒子具有较好的生物相容性和生物降解性，在肿瘤治疗中被广泛研究。
然而，现有的BSA纳米粒子给药系统存在药物转运效率低、药物稳定性差、靶向性不够
等问题。
研究内容
本研究将开发一种新型BSA纳米粒子给药系统，该系统将聚焦于以叶酸为引物
的受体介导的肿瘤细胞靶向性。
具体而言，将选择叶酸作为靶向分子，通过BSA纳米
粒子表面的化学修饰，使其与叶酸有效结合，从而实现肿瘤细胞的靶向输运。
研究方法
本研究将采用化学合成的方法制备BSA纳米粒子，并通过化学修饰方法，在
BSA纳米粒子表面引入叶酸，从而构建具有靶向性的给药系统。
通过扫描电镜、荧光
显微镜、动态光散射仪等实验手段，对制备的靶向性BSA纳米粒子进行形态、大小、
粒散分布等表征分析；再进行体外细胞实验，探究该靶向性给药系统在细胞内的吸收、转运和毒性；最后进行动物体内实验，检测其肿瘤靶向性和治疗效果。
预期结果
本研究将探究一种新型叶酸-BSA纳米粒子给药系统，在肿瘤治疗中的应用前景。
预计，该给药系统将具有较高的靶向性和药物转运效率，能够有效地减轻肿瘤患者的
副作用，并提高治疗效果。
叶酸类化合物介导的主动靶向载体的制备方法[发明专利]
![叶酸类化合物介导的主动靶向载体的制备方法[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/71ef3f8368dc5022aaea998fcc22bcd126ff4219.png)
[19]中华人民共和国国家知识产权局[12]发明专利申请公开说明书[11]公开号CN 1733309A [43]公开日2006年2月15日[21]申请号200510028249.4[22]申请日2005.07.28[21]申请号200510028249.4[71]申请人同济大学地址200092上海市四平路1239号[72]发明人任杰 郁晓 任天斌 袁华 [74]专利代理机构上海正旦专利代理有限公司代理人张磊[51]Int.CI.A61K 47/34 (2006.01)A61K 47/22 (2006.01)A61K 49/04 (2006.01)A61K 49/10 (2006.01)A61K 48/00 (2006.01)A61P 35/00 (2006.01)权利要求书 2 页 说明书 5 页[54]发明名称叶酸类化合物介导的主动靶向载体的制备方法[57]摘要本发明属纳米材料技术领域，具体涉及一种叶酸类化合物介导的主动靶向载体的制备方法。
本发明采用对甲苯磺酸酯法活化聚乙二醇，最终转化端羟基变成端氨基，形成双端氨基聚乙二醇后，与活化了的聚乳酸类共聚物反应，再利用端氨基与叶酸类化合物连接，完成叶酸类化合物与聚乳酸类共聚物的复合物的合成，利用叶酸类化合物受体在一部分人体肿瘤如卵巢癌、宫颈癌、子宫内膜癌、乳腺癌、结肠癌、肺癌、脉络膜癌、室管膜细胞瘤等细胞表面过分表达，而正常组织很少有叶酸类化合物受体过分表达的性质，通过叶酸类化合物与聚乳酸类共聚物受体之间的亲和力，使带有叶酸基团的药物载体有着主动靶向的效果。
200510028249.4权 利 要 求 书第1/2页 1、一种叶酸类化合物介导的主动靶向载体的制备方法，其特征在于具体步骤如下： (1)制备聚乙二醇-对甲苯磺酸酯纯品将聚乙二醇即PEG溶于二氯甲烷中，聚乙二醇在二氯甲烷中的浓度为50-500mg/ml；对甲苯磺酰氯溶于吡啶中，对甲苯磺酰氯在吡啶中的浓度为0.5-2g/ml；将两种溶液混合，在N2条件下搅拌，室温反应18-30小时，分离提纯，真空干燥，得到聚乙二醇-对甲苯磺酸酯纯品，其中聚乙二醇与对甲苯磺酰氯的摩尔比为1∶2-1∶5；(2)制备双端氨基聚乙二醇将步骤(1)得到的聚乙二醇-对甲苯磺酸酯纯品和氨水反应，氨水浓度为25-28mg/ml，反应温度为120-200℃，反应压力为1-10MPa，反应时间为12-40小时，聚乙二醇-对甲苯磺酸酯纯品在氨水中的浓度为50-200mg/ml，然后将所得产物冷却至室温，分离提纯，水洗至中性，旋转蒸干，得到双端氨基聚乙二醇即PEG-(NH2)2；(3)制备活化的聚乳酸类共聚物将聚乳酸类共聚物、二环己基碳酰亚胺和N-羟基丁二酰亚胺按比例分别加入到二氯甲烷中，反应18-30小时，纯化干燥，得到活化的聚乳酸类共聚物；聚乳酸类共聚物在二氯甲烷中的浓度为50-1000mg/ml，聚乳酸类共聚物∶二环己基碳酰亚胺∶N-羟基丁二酰亚胺的摩尔比为：1∶1∶1-1∶5∶5；(4)制备聚乳酸类共聚物-PEG-NH2固体将活化后的聚乳酸类共聚物溶于二氯甲烷中，聚乳酸类共聚物在二氯甲烷中的浓度为50-1000mg/ml，向溶液中滴加步骤(2)中所得到的双端氨基聚乙二醇，搅拌，在充氮条件下反应6-10小时，纯化，过滤，真空干燥，即得到聚乳酸类共聚物-PEG-NH2固体，活化的聚乳酸类共聚物与双端氨基聚乙二醇摩尔比为1∶2-1∶10；(5)制备叶酸类化合物的复合物将步骤(4)中得到的聚乳酸类共聚物-PEG-NH2固体溶于二甲亚砜中，向其中加入叶酸类化合物、二环己基碳酰亚胺，在室温下反应5-10小时，然后纯化，冷冻干燥，得到干燥的产物；聚乳酸类共聚物-PEG-NH2固体在二甲亚砜中浓度为30-500mg/ml，聚乳酸类共聚物-P E G-N H2、叶酸和二环己基碳酰亚胺三者摩尔比为1∶2∶2-1∶10∶10。
叶酸受体在血液肿瘤细胞株的表达及叶酸-聚乙烯亚胺共聚物的制备
叶酸受体在血液肿瘤细胞株的表达及叶酸-聚乙烯亚胺共聚物的制备韩新爱;曾慧兰;古晨;蒋建伟;钟启;朱海扬【期刊名称】《暨南大学学报（自然科学与医学版）》【年(卷),期】2009(030)006【摘要】目的:研究叶酸受体(folate receptor,FR)在血液肿瘤细胞表达的特点,合成叶酸-聚乙烯亚胺(FA-PEI)聚合物,探讨其作为靶向性基因输送载体的可行性.方法:用实时荧光定量PCR(real time PCR)法检测α、β、γ3种FR在血液肿瘤细胞K562、K562/A02、U266细胞株上的表达;利用叶酸(FA)活性酯在微碱性条件下与聚乙烯亚胺(polyethylenimine,PEI)的支链氨基反应,合成FA-PEI共聚物;用葡聚糖凝胶柱G-25分离、纯化;用紫外分光光度计波长扫描法及氢核磁共振谱(~1H NMR)法验证交联是否成功.结果:α、β、γ3种FR在K562、K562/A02、U266 3种细胞株上均表达,其中,α-FR的表达占优势,较β-FR和γ-FR表达量高;紫外分光光度计扫描图谱在365 nm处出现叶酸的特征性吸收峰;核磁共振(~1H NMR)示:在2.5～3.2处出现PEI亚甲基质子的特征性化学位移,在6.5～9.0处出现叶酸芳香质子的特征性氢信号.结论:FR在K562、K562/A02、U266 3种细胞株上均有较高表达;FA-PEI偶联成功,为其作为血液肿瘤治疗中1种潜在的靶向性基因输送载体提供了依据.【总页数】6页(P658-663)【作者】韩新爱;曾慧兰;古晨;蒋建伟;钟启;朱海扬【作者单位】暨南大学附属第一医院,血液科,广东,广州,510630;暨南大学附属第一医院,血液科,广东,广州,510630;中山大学医学院,临床医学系,广东,广州,510089;暨南大学医学院,生化教研室,广东,广州510632;暨南大学附属第一医院,血液科,广东,广州,510630;嘉应学院医学院,药理教研室,广东,梅州,514031【正文语种】中文【中图分类】R733.3;R979.1【相关文献】1.叶酸受体靶向的聚乳酸共聚物胶束的制备及性质研究 [J], 曹俊;吴瑶;陈元维;欧静;陈年操;罗祥林2.靶向叶酸受体的蟾酥提取物长循环脂质体的制备及其体外抗肿瘤活性 [J], 郭波红;廖灿城;许丹翘;刘晓红;方宇奇;赵宇红;3.子宫内膜样腺癌和子宫内膜增生组织中叶酸受体-α和β的表达及其与肿瘤生长增殖的关系 [J], 沈祥丽;张勇;柳怡;张勇武4.叶酸修饰的聚乙烯亚胺-聚乙二醇共聚物载体在体内外转染效率的研究 [J], 梁姬寰;华颖;冯宇婷;刘国峰;朱莉娜;周毅5.叶酸受体-α在卵巢癌耐药细胞株中的表达及其介导的多药耐药的靶向逆转 [J], 杨琰;卢实;钟俊;李敏芳;王泽华因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
叶酸高分子复合物靶向抗肿瘤药效及机理的探讨
复旦大学博士学位论文叶酸高分子复合物靶向抗肿瘤药效及机理的探讨姓名：韩慧兰申请学位级别：博士专业：药剂学指导教师：陆伟跃20040508叶酸高分子复合物靶向抗肿瘤药效及机理的探讨摘要叶酸（Ｆｏｌｉｃａｃｉｄ）是一种分子结构中含有喋呤环的小分子维生素，为真核细胞单碳代谢和核昔合成所必需。
动物细胞缺乏叶酸生物合成的关键酶，它们只能依赖细胞表面的叶酸特异结合蛋白（即叶酸受体，Ｆｏｌａｔｅｒｅｃｅｐｔｏｒｓ）主动摄取外源性叶酸来维持正常的生命活动。
近５０年来的叶酸受体的研究表明，叶酸受体既广泛分布在正常组织，又分布在肿瘤组织中，其不同点在于，多数肿瘤细胞叶酸受体的数量和活性远远超过正常细胞。
目前，肿瘤细胞叶酸受体受到广泛关注，已成为肿瘤诊断和治疗研究的新靶点。
肿瘤细胞表面的叶酸受体及叶酸受体介导的叶酸高分子复合物的肿瘤靶向性是本研究的主题。
本研究的主要目的在于结合体内外抗肿瘤活性试验，从组织、细胞和分子水平探讨并初步确立叶酸一右旋糖酐复合物类药物靶向抗肿瘤机理，为叶酸一右旋糖酐复合物作为抗肿瘤药物的后续研究提供理论依据。
本研究的主要内容包括：常规细胞培养基和实验动物饲料中叶酸含量的调整；叶酸高分子复合物抗肿瘤谱的筛选；叶酸一右旋糖酐复合物抗肿瘤活性初步研究；叶酸一右旋糖酐复合物靶向抗肿瘤机理的初步探讨：其它叶酸商分子复合物作为介导叶酸受体靶向肿瘤细胞药物或药物载体的可能性探讨：防御素对肿瘤细胞作用的初步探讨。
集落形成法考察不同浓度叶酸培养液对肿瘤细胞生长的影响结果表明，在一定浓度范围内，Ｈｅｌａ２２９细胞集落形成率随叶酸浓度的增加而急剧增加，当口；酸浓度达到４５３．１ｎｍｏｌ／Ｌ时逐渐趋于饱和。
使用人体生理条件下叶酸浓度的培养液时的集落形成率为７３％左右，不影响细胞维持正常生理功能。
这为后续的叶酸受体分析和药效学研究中低叶酸培养液，提供了依据。
通过放射免疫法测定市售实验动物饲料中的叶酸含量，调整饲料中的叶酸含量，并考察其对小鼠血清浓度和生长的影响。
叶酸靶向聚合物载药微粒的研究进展
叶酸靶向聚合物载药微粒的研究进展∗李姝婷;王卫京;陈淑花;王景昌;李鸣明;詹世平【摘要】The characteristics and principle on the folate-targeted drug particles are described briefly in this arti-cle.It is especially discussed that the different polymers as carrier and preparation methods of the folate-targeted drug loading particles.Aim at the questions of the residual organic solvents,particle size and morphology hard to control and so on in traditional methods,a green and efficient method,supercritical anti-solvent method (SAS)is put forward,and the principles and applications of the method are discussed.Finally new folate-poly-mer targeted drug loading microspheres that prepared by the supercritical CO2 anti-solvent method are prospec-ted.%介绍了叶酸靶向载药微粒的特性及其作用机制，本节就叶酸靶向药物的高分子载体进行了简要综述。
重点阐述了叶酸靶向药物微粒的不同聚合物载体以及制备方法。
其中针对传统方法中存在的有机溶剂残留、粒径和形貌难控制等缺点，介绍了一种绿色有效的方法—超临界抗溶剂法(SAS)，并对该方法制备载药微粒的原理以及应用进行了简要概括。
叶酸靶向化疗
叶酸介导的大分子抗癌治疗药物的传递摘要：叶酸受体是肿瘤特异性药物传递的有效靶点，主要原因是：（1）它可以调节许多人类癌细胞，包括卵巢、脑、肾、乳腺、髓细胞和肺的恶性肿瘤细胞，（2）在正常组织中被叶酸受体识别，由于其在极化上皮细胞的顶端（外面）膜的位置，可以严重限制其在正常组织中的表达，（3）叶酸受体密度随着癌症恶化的阶段/分级增加。
因此，最难用经典方法治疗的癌症可能在叶酸靶向治疗中是最容易的。
利用这些叶酸受体表达的特点，叶酸已被链接到两个低分子量和高分子配合物上，用于靶向分子靶向恶性细胞的研究。
叶酸与大分子的结合，在体外几乎所有的情况下都能增强其对叶酸受体表达癌细胞的传递作用。
然而，叶酸介导的分子靶向在体内只产生了混合的结果，很大程度上是因为实体肿瘤分子的渗透问题。
尽管如此，叶酸靶向性显著改善了一种以高分子为基础的治疗的例子也确实存在，这导致在许多情况下，完全治愈了确定的肿瘤细胞。
这篇综述讲述了一个简短的叶酸靶向大分子疗法的机械背景，然后总结了各大技术在应用中的优缺点。
1.介绍蛋白质、基因治疗载体、脂质体包裹药物、核酸适配体、反义寡核苷酸、药物衍生的生物降解的聚合物对癌症治疗都显示极大的潜力，主要是因为其特异性的改进、作用时间的延长、或更传统的化疗药物效力的增强。
然而，不同于低分子量的药物，大分子药物往往会遇到显着的渗透性障碍，从而限制上述理想的性能的实现。
因此，尽管肿瘤的选择性往往是由于肿瘤的高度差形成的血管和随之而来的被动积累的大分子在恶性肿块{称为增强渗透和滞留（EPR）效应}，但肿瘤细胞膜仍然可以构成一个强大的屏障，这些大分子必须进入他们的靶细胞，从而导致细胞死亡。
如果肿瘤淋巴管引流不发达，瘤内压力的增加也可以限制大分子药物在肿瘤部位深部的药物传递。
为了克服这些限制，许多人采用已经采用癌细胞特异性配体作为靶向部分，在肿瘤组织提高大分子传递和治疗。
这篇综述的目的是总结在开发维生素、叶酸作为配体的选择性靶向和交付的大分子药物进入肿瘤细胞的进展。
叶酸受体介导靶向药物载体的研究进展
６２．１３％和３６．１２％。纳米粒子的包裹使得ＣＰＴ得到有效的 保护，能够长期缓慢的释放ＣＰＴ，而叶酸化修饰使其肿瘤靶 向性也得到提高。Ｓａｈａｎ等’１４１用叶酸一异丁烯酰胺修饰超 顺磁氧化铁纳米粒子表面后，叶酸受体阳性表达的５ＲＰ７细 胞对其的摄取效率明显提高。Ｌｉｕ等¨副综合纳米微粒和脂 质体在药物输送方面的优点，制备了由单层混合脂外壳和可 生物降解内核组成的纳米微粒体系，然后在混合脂外层接上 叶酸，并以此纳米微粒作为紫衫萜的运载体系。通过调整混 合脂肪单层中类脂部分的比例，可定量控制该纳米微粒靶向 作用的效果。Ｈｏｕ等‘１ ６。将叶酸和荧光试剂一４一乙炔基一Ｎ 一乙基一１，８一萘亚胺（ＮＡ）连接到叠氮化聚氯甲基苯乙烯 （ＰＣＭＳ）上，制得ＰＣＭＳ—ＮＡ—ＦＡ荧光纳米微粒。荧光图像 显示宫颈癌Ｈｅｌａ细胞（ＦＲ＋）对ＰＣＭＳ—ＮＡ—ＦＡ纳米微粒 的吸收要明显高于肺癌上皮Ａ５４９细胞（ＦＲ一），且细胞摄取 的ＰＣＭＳ—ＮＡ～ＦＡ纳米粒子荧光强度随游离ＦＡ浓度的增 加而减弱。病理实验结果显示ＰＣＭＳ—ＮＡ—ＦＡ纳米微粒在 肿瘤位点的分布要远高于肝、脾、肾等组织。以上结果说明 ＰＣＭＳ—ＮＡ—ＦＡ纳米微粒对叶酸受体阳性表达的肿瘤细胞 具有特异性靶向作用，有望成为肿瘤诊断的重要工具。Ｄｕ 等‘１７ ｏ通过叶酸修饰硬脂酸接枝壳聚糖制备了叶酸一硬脂酸 接枝壳聚糖（ＦＡ—ＣＳ—ＳＡ）胶束，由于壳聚糖的阳离子特性， 该胶束可与质粒ＤＮＡ（ｐＤＮＡ）形成胶束／ｐＤＮＡ复合纳米微 粒。而此复合物可有效防止ＤＮＡ酶对浓缩ＤＮＡ的降解，且 其毒副作用较脂质体转染剂Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ ＴＭ２０００低。同 样，ｘｕ等Ｈ ８。将甲基ＰＥＧ一２０００、ＰＥＩ和葵二酰氯的共聚物进
２０１３，２１（０５）：１１２８—１１３１
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A1/A2
2000/Final V +N2 7.2/140+60 B3/B4 6:1/Final V +N2 7.2/140+60 C5/C6
A3/A4
Cpa/Final V+N2 7.2/140+60 B5/B6 9:1/Final V +N2 7.2/140+60 D1/D2
A5/A6
1:1/Final V+N2 7.2/140+60 C1/C2 (3:1+N2)+FA(10) b=120+a=60+20 D3/D4 (3:1 +FA(10)) +N2 b=120+20+a=60
实验结论与分析
实验结论与分析
实验结论与分析
谢谢观赏
方案实施
2d 细胞培养 铺板 1d 转染
pGFP-N2 48h 5h 换液 48h
pGL3 5h 换液
荧光检测
荧光蛋白酶活 性检测方案实施源自脂质体制备氯仿溶解脂材
氮气吹膜
Zeta电位 粒径检测
水化
真空干燥
方案实施
RLU/mg
数据分析过程
荧光照片最优化
回归方程分析
实验结论与分析
实验结论与分析
实验结论与分析
叶酸受体靶向性基因载体的合 成和细胞转染机理研究
姓名：曹玮 学号：20090311120 班级：生物工程091班 指导教师：崔韶晖
报告内容
研究背景 方案设计
方案实施 实验结论与分析
研究背景
叶酸
研究背景
复合物
脂质体
质粒
叶酸
复 合
细胞核
内 涵 体
铺板
实验设计
a 质粒/Final V 48/6 00 b 3：1/Final V 14.4/240 c 3：1/Final V 14.4/200 d 3：1/Final V 14.4/160 e 3：1/Final V 14.4/120
B1/B2
3:1/Final V +N2 7.2/140+60 C3/C4 (3:1+N2)+FA(20) c=100+a=60+40 D5/D6 (3:1 +FA(20)) +N2 c=100+60+a=40
(3:1+N2)+FA(30)
(3:1+N2)+FA(40)
d=80+a=60+60
e=60+a=60+80