应用微生物学的基本技术
微生物学的前沿技术和应用
微生物学的前沿技术和应用微生物学作为一门基础学科，一直被人们忽视。
但是随着科技的不断发展，以及人们对于健康意识的提高，在微生物学方面也有了很多的突破和应用。
本文将从微生物学的前沿技术和应用进行探讨。
一、微生物群落组学微生物群落包括细菌、真菌、病毒等微生物共同生存的社区。
微生物群落组学技术是指通过对于微生物群落中所有微生物的基因组信息进行测序分析，探究微生物群落的特征、功能及其对宿主健康的影响。
微生物群落组学技术的应用已经扩展到包括消化道、皮肤、口腔、泌尿生殖系统等多个领域，既有助于提高人类健康水平，也有利于优化微生物共生的生态系统。
例如，在2018年的一项研究中，科学家们发现Populus叶片中，由特定微生物所组成的微生物群落的多样性与植株光合作用密切相关。
如此深入掌握微生物群落即可有效提高植物的光合效率，在提高植物光合作用效率的同时有利于人们的生态环境。
二、CRISPR-Cas9基因编辑技术CRISPR-Cas9技术是一种革命性的基因编辑技术，它基于细菌天然的防御机制，并使用导向RNA将Cas9蛋白导向靶DNA序列进行切割修复。
该技术的出现，在医学和制造业方面都有着巨大的影响。
在医学领域，CRISPR-Cas9技术被广泛开发用于基因治疗。
例如在2019年，科学家们使用CRISPR-Cas9技术将HIV基因从患者的DNA中删除，使患者免于HIV的攻击。
此外，CRISPR-Cas9还可用于治疗遗传性疾病、修复DNA缺陷等。
除此之外，CRISPR-Cas9技术也被广泛应用于转基因制造领域。
一些制药厂商已开始采用CRISPR-Cas9技术来优化生产菌株，特定地编辑生物系统中的基因组，使其表达目标蛋白，进而生成所需的公用品。
三、重构生物合成途径重构合成生物学是一种革命性的技术，它将基因工程、微生物学、化学及系统生物学等学科建立了紧密连接，通过改变微生物代谢途径和蛋白质信号传递等生物化学反应，快速而灵活地生产多种生物大分子。
微生物学研究及其应用
微生物学研究及其应用微生物学是一门研究微生物及其生命活动的学科，在现代生命科学中具有重要的地位。
微生物是指体型微小、由单一或少数个体组成的生物个体，包括细菌、真菌、病毒和原生动物等。
微生物生产、分解和转化各种物质，对生态环境和人类健康具有非常重要的作用。
一、微生物学的基本研究1. 微生物分类学微生物的分类学是微生物学的基础。
目前，微生物按照遗传信息和形态等方面的特征，分成细菌、真菌、病毒和原生动物四大类。
其中细菌和真菌是最常见的微生物。
2. 微生物生理学微生物生理学研究微生物的代谢途径、发酵过程、营养要求等方面的问题。
微生物生理学的研究在农业、食品、制药等领域都有着非常广泛的应用。
3. 微生物遗传学微生物遗传学研究微生物基因组的结构、功能和调控等方面的问题。
微生物的基因组研究对于深入了解微生物的生命活动和功能具有十分重要的意义。
二、微生物学的应用1. 生物农药生物农药是一种新型的杀虫剂，利用微生物如嗜酸菌、放线菌、细菌等对害虫的致病能力进行防治，这样可以有效地降低农药的使用量，减少对环境的污染。
2. 食品工业微生物在食品工业中有着广泛的应用，如利用大肠杆菌进行蛋白质生产、利用乳酸菌进行食品发酵、利用酿酒酵母制造啤酒等。
3. 制药工业微生物是制造抗生素、维生素和激素等药物的重要原料。
例如，青霉素、链霉素、土霉素、头孢菌素等广泛使用的抗生素均是由微生物发酵产生的。
4. 环保领域微生物在环保领域中有着广泛的应用，如利用微生物降解有机物、清除水中的污染物、消除环境污染等。
三、微生物学的未来发展随着基因工程技术的发展，微生物的研究已经进入了一个新的阶段。
微生物基因组和功能的深入研究将为微生物学的发展提供重要的支持。
此外，微生物在生态环境中的作用也将成为微生物学的一个重要研究领域。
总之，微生物学的研究和应用涉及到人类生命和健康的各个方面。
微生物学家们将继续在微生物学的各个领域进行研究，并开发更多更为广泛的应用。
微生物学在医学中的应用
微生物学在医学中的应用微生物学是研究微生物（包括细菌、病毒、真菌、寄生虫等）的科学，它有着广泛的应用，其中医学领域是它应用最广泛的一个方向。
微生物学在医学中的应用主要包括以下几个方面。
一、微生物在疾病诊断中的应用1.细菌培养细菌培养是细菌学中最基本的实验技术之一，也是诊断病原菌最重要的手段之一。
通过培养，可以得到细菌的单一纯种，进一步进行鉴定和药敏试验，确定病原菌种类和药物敏感性，为治疗提供依据。
2.病毒检测病毒是许多传染病的致病根源，病毒检测可以帮助医生和研究者诊断病毒性疾病，制定相应的治疗方案。
病毒检测的方法包括血清学检测、PCR技术、免疫荧光等方法，其中PCR技术是目前常用的高效病毒检测技术之一。
3.真菌检测真菌感染是一种非常常见的疾病，真菌检测帮助医生确定感染类型和严重程度，所以也是非常重要的。
真菌检测常用的方法包括真菌培养、快速真菌检测技术、血清学检测等。
4.寄生虫检测寄生虫感染是一些热带地区经常出现的疾病，寄生虫检测有助于确定感染类型、严重程度和治疗方案。
寄生虫检测常用的方法包括血液检测、粪便检测、尿液检测等。
二、微生物在药物研发中的应用微生物在药物研发中有着重要作用，其中包括以下几个方面。
1.抗生素的发现和研制抗生素是临床上治疗细菌性感染必不可少的药物之一，而绝大部分抗生素都是从微生物中发现并提取出来的。
比如，青霉素最初就是由青霉属真菌所产生的一种抗生素，而阿奇霉素则是由镰刀菌属真菌所产生的一种。
2.疫苗的研发疫苗是预防传染病的最有效工具之一，大部分疫苗都是以微生物基础研究为基础的。
例如，百日咳疫苗是由百日咳杆菌制备的，流感疫苗则是由多种不同的流感病毒制备并混合而成的。
3.药物筛选微生物在药物筛选中也起到了重要的作用。
在药物研发过程中，首先需要在大量微生物中筛选出具有治疗效果的化合物，这些化合物可以被人工合成为新药，并用于临床治疗。
其中，金黄色葡萄球菌和大肠杆菌等细菌常常被用于药物筛选。
现代微生物学检验基本技术
现代微生物学检验基本技术随着现代医学及相关科学技术的发展，各学科相互交叉和渗透，医学微生物学检验技术已深入到细胞、分子和基因水平，许多新技术、新方法已在临床微生物实验室得到广泛应用。
医学微生物学实验室的基本任务之一是利用微生物学检验技术，准确、快速检验和鉴定临床标本中的微生物，并对引起感染的微生物进行耐药性监测，为临床对感染性疾病诊断、治疗、流行病学调查及研究等提供科学依据。
第一节微生物形态学检查细菌形态学检查是细菌检验的重要方法之一，它是细菌分类和鉴定的基础，可根据其形态、结构和染色反应性等，为进一步鉴定提供参考依据。
一、显微镜检查由于细菌个体微小，肉眼不能看到，必须借助显微镜的放大才能看到。
一般形态和结构可用光学显微镜观察，其内部的超微结构则需用电子显微镜才能看清楚。
常用显微镜有如下几种。
1．普通光学显微镜采用自然光或灯光为光源，其波长约为0.4μm。
显微镜的分辨率为波长的二分之一，即0.2μm，而肉眼可见的最小形象为0.2mm。
故用油（浸）镜放大1 000倍，能将0.2μm的微粒放大成肉眼可见的0.2mm。
普通光学显微镜可用于细菌、放线菌和真菌等的观察。
2．暗视野显微镜常用于观察不染色微生物形态和运动。
在普通显微镜安装暗视野聚光器后，光线不能从中间直接透入，视野呈暗色，当标本接受从聚光器边缘斜射光后可发生散射，因此可在暗视野背景下观察到光亮的微生物如细菌或螺旋体等。
3．相差显微镜相差显微镜利用相差板的光珊作用，改变直射光的光位相和振幅，将光相的差异转换为光强度差。
在相差显微镜下，当光线透过不染色标本时，由于标本不同部位的密度不一致而引起光相的差异，可观察到微生物形态、内部结构和运动方式等。
4．荧光显微镜荧光显微镜与普通光学显微镜基本相同，主要区别在于光源、滤光片和聚光器。
目前大多数使用的是落射光装置，常用高压汞灯作为光源，可发出紫外光或蓝紫光。
滤光片有激发滤光片和吸收滤光片二种。
用蓝光的荧光显微镜除可用一般明视野聚光器外，也可用暗视野聚光器，以加强荧光与背景的对比。
微生物学在工业中的应用
微生物学在工业中的应用微生物学是研究微生物的科学，广泛应用于各个领域。
在工业中，微生物学的应用发挥着重要的作用，涉及到食品加工、药物生产、环境保护等方面。
本文将从这些方面来探讨微生物学在工业中的应用。
一、食品加工1. 发酵食品微生物学在食品加工中最常见的应用就是发酵过程。
通过微生物的代谢活动，食物中的糖类、蛋白质等物质得到分解和转化，使得食物呈现出丰富的风味和口感。
以面包为例，添加酵母菌在高温下进行发酵作用，使面团中的淀粉发酵生成二氧化碳，从而使面团膨胀，形成蓬松的面包。
2. 发酵剂微生物学在食品行业中还广泛应用于发酵剂的制备。
通过提取和纯化微生物发酵液中的酶，可以制备出高效的发酵剂。
这些发酵剂可以用于面包、饼干等食品的生产过程中，提高产品的质量和产量。
3. 保鲜处理微生物学在食品保鲜方面也发挥着重要的作用。
利用抑制微生物生长的菌株，可以制备出具有抗菌作用的保鲜剂，延长食品的保鲜期限。
二、药物生产1. 抗生素抗生素是指由微生物代谢产生的具有抑制或杀死其他微生物生长的物质。
通过对微生物的分离、培养和发酵等技术，可以获得大量的抗生素。
这些抗生素可以用于医药领域，治疗各种细菌性感染疾病。
2. 酶制剂微生物在药物生产中还被广泛用于酶制剂的制备。
通过筛选和改造微生物菌株，可以获得高效的酶产生菌，并利用其代谢产物来制备出酶制剂。
这些酶制剂可以用于药物合成中的催化反应，提高合成效率和减少废料产生。
三、环境保护1. 污水处理微生物学在污水处理中被广泛应用。
微生物可以利用有机物质进行分解和代谢，从而实现有机物的降解和去除。
通过调控微生物群落的结构和功能，可以高效地去除废水中的有机物、氮、磷等污染物质，减少对环境的污染。
2. 油污处理微生物学在油污处理中也发挥着重要的作用。
某些微生物菌株可以利用油类物质为代谢底物，通过生物降解来去除油污。
这种方法比传统的物理化学方法更环保，同时也可以实现资源的回收利用。
3. 废弃物处理利用微生物学手段可以对一些废弃物进行有效处理和利用。
微生物学常用技术
微生物学常用技术
1. 原位杂交：一种用于检测细胞内特定RNA 或DNA 序列的技术。
它使用标记的探针与目标RNA 或DNA 的互补序列进行杂交，然后使用显微镜观察杂交信号。
2. PCR：聚合酶链反应，一种体外复制DNA 的技术。
它使用DNA 建模酶、起始物和引物分别为反向和正向链引导反应，形成两条相同的DNA 分子。
3. 限制性酶切：一种通过特定酶切断DNA 链的技术。
它可以用于构建DNA 序列库、分析基因组结构和筛选重组DNA 片段等应用。
4. 克隆：通过将DNA 片段插入宿主细胞中复制的方法，使DNA 在数量和空间上得到扩增。
克隆是制造重组DNA 或生产重组蛋白的重要技术。
5. RFLP：限制性片段长度多态性，一种通过检测DNA 片段长度差异来确定基因型的技术。
它可以用于人类基因组和微生物基因组的分析。
6. 蛋白质电泳：分离蛋白质并确定它们的分子量和电荷。
这是鉴定微生物特征蛋白质和确定其功能的重要技术。
7. 荧光原位杂交：一种使用荧光标记探针的原位杂交技术。
它可以广泛应用于分离、定量和可视化微生物群落中的不同成分。
8. 全基因组测序：一种测定一个生物体完整基因组的序列的技术。
它可以提供比传统方法更全面的生物信息学数据，有助于深入了解微生物系统的功能和多样性。
第一章 应用微生物学的基本技术
高温短时灭菌是一种最佳的灭菌方法，一般采用120℃下灭菌。
2.灭菌操作方式
工业上现行的操作方式主要有两种，即分批灭菌和连续灭菌。 分批灭菌：也叫间歇灭菌，操作简单，投资少，灭菌效果好；加热冷却
时间长，蒸汽用量不均，锅炉负荷大，适用于小型发酵厂。 连续灭菌：对营养物质破坏小，灭菌时间短，设备利用率高，蒸汽用量
（2）培养基pH值的影响：在pH值6.0～8.0时，微生物最耐热，不易死 亡，培养基的pH值愈低所需的灭菌时间愈短。
（3）培养基成分的影响：糖类、油脂和蛋白质会增加微生物的耐热 性；盐类增加渗透压，促进热的传导，降低耐热性，易于灭菌。
第一节 无菌操作技术
三、灭菌在微生物工业中的应用
（一）培养基的灭菌 3.影响培养基灭菌的几个因素
熏蒸：常用福尔马林(含37-40%甲醛水溶液)，6-10ml/m3的用 量，盛入容器中进行加热，或加半量的高锰酸钾，通过氧 化作用加热，使其蒸发。熏蒸后保持密闭12h以上。也可 用乳酸、硫磺等进行熏蒸。
紫外线灭菌：接种前后，打开紫外灯照射半小时。 石炭酸喷雾：操作前，用5%石炭酸溶液喷于接种台面和地
上烧至红热进行灭菌。
第一节 无菌操作技术
二、灭菌的方法
（一）火焰灭菌和干热灭菌 2.干热灭菌 干燥热空气（170℃）杀死微生物的方法
玻璃器皿、金属用具等凡不适用于用其他方法灭菌而又能 耐高温的物品都可用此法灭菌。液体培养基、橡胶制品、 塑料制品等不能用于干热灭菌。
第一节 无菌操作技术
二、灭菌的方法
第一节 无菌操作技术
四、微生物的接种技术 （二）接种工具
第一节 无菌操作技术
四、微生物的接种技术 （三）接种方法
微生物学实验技术
微生物学实验技术
微生物学实验技术是研究和发掘微生物的重要方法，也是一门多种实验技术和方法的
综合。
它既可以应用于生物体内，对微生物调查，可以使用培养基或特定介质进行鉴定，
也可以用来通过遗传工程分离、改造微生物，了解不同微生物的全部 trait 特性。
一、培养微生物
培养微生物是一种最常用的微生物实验技术，需要使用特定的培养基，通过控制温度、湿度等变量的变化来培养不同的微生物。
通过检测培养基中的微生物数量及某些代表性特征，可确定微生物的分类特征，来鉴定微生物的种类和形式。
二、基因组测序
基因组测序是一种实验技术，是分析一个微生物种类全部 genetic 的方法。
主要利
用高通量DNA测序技术，对样品中贮藏的 DNA 进行范围检测，得到 DNA 的测定序列，从
而确定微生物的遗传结构、物种种类，以及特定物种生态和功能特征。
三、共价法抗菌药敏试验
共价法抗菌药敏试验是研究微生物对一类药物或多类药物的抗性程度的重要方法之一。
通过检测药物剂量的不同，在药物浓度相同的情况下微生物在某种时间内生长情况不同，
来确定微生物对某种药物或多类药物的抗性情况。
四、特异性提取
特异性提取是一种以特定方法从微生物中提取出特定“ biomolecule ”，比如 DNA、蛋白质等，分离和纯化微生物某功能元件或特征分子的实验技术。
这种技术既可以提取大
量的基因片段，也可提取微量的特异性物质。
五、遗传修饰
遗传修饰是一种利用遗传工程改造或添加微生物特定遗传物质来改变微生物的特性的
实验技术，常用来进行分子育种和改良育种，以提高产品的质量和性能。
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3、掌握微生物分离纯化培养技术
4、了解生产用菌种的扩大培养技术
5、掌握微生物的发酵工艺及产品处理流程
第一节 无菌操作技术
无菌技术的概念：泛指在培养微生物的操作
中，所有防止杂菌污染的方法。 外界不相干的微生物混入的现象，在微生物 学叫做污染杂菌。彻底灭菌和防止污染是无 菌技术的两个方面。
基本步骤
1.配料
2.溶解
淀粉溶解：少量冷水调成糊状 加热溶解，特 别是加有琼脂的培养基，一定要煮沸，琼脂 的熔解温度95～97℃，且需要边加热边搅拌 以防止烧焦。 3.调PH 用盐酸或NaOH把培养基调节到所要求的值。
4.过滤 滤纸或棉花进行过滤。 5.分装 一般培养基放在三角瓶或试管中灭菌使用。 （1）三角瓶 若作静臵培养，则100 ml培养基／250 ml的三角瓶， 最多不能超过150 ml培养基／250 ml的三角瓶，否 则灭菌时培养基沸腾容易污染棉塞，造成染菌；若 作摇瓶培养，则15～20 ml培养基／250 ml的三角瓶， 保证通气良好。 （2）试管分装 液体培养基一般装4～5 ml，约试管的1／4高度； 固体斜面培养基一般装3～4 ml，约试管的1／5高度。
重点阐述微生物制品的研究方法、菌种筛选
技术、制品作用机理、生产技术、工艺流程 及其使用方法与效果等内容。通过此门课程 的学习，将进一步加深对微生物学理论知识 的巩固和理解,并掌握更多的微生物生产工程 技能。
目的要求
了解掌握我国及世界微生物肥料、生物农药、
微生物环境处理和微生物饲料研究的最新成 果、生产与应用的新技术及发展趋势； 了解常见发酵产品的生产工艺、各类微生物 发酵食品的生产工艺，食用菌栽培和微生物 在农业、冶金、能源、环境等领域的应用等， 为全面学习生命科学和技术奠定基础。
目的菌的无色代谢产物发生显色反应的 指示剂，从而达到只须用肉眼辨别颜色 就能方便的从近似菌落中找出目的菌菌落 的培养基。例如伊红美蓝乳糖培养基料 2.发酵培养基：廉价原料
3.保藏培养基 普通
配臵培养基的原则和方法
1.目的明确
培养不同的微生物必须采用不同的培养条件；培养 目的不同，原料的选择和配比不同； 例如枯草芽孢杆菌： 一般培养：肉汤培养基或LB培养基； 自然转化：基础培养基； 观察芽孢：生孢子培养基； 产蛋白酶：以玉米粉、黄豆饼粉为主的产酶培养基；
除了用凝固剂配制固体培养基外，一些天然 的固体营养物质也能制成固体培养基。 例如，马铃薯块、胡萝卜条和米饭等。
选择性培养基 根据某微生物的特
殊营养要求或对某化学，物理因素的抗 性而设计的培养基，具有使混合菌样中 的劣势菌变成优势菌的功能，广泛用于 菌种筛选等领域。
作用分类 鉴别培养基 一类在成分中加有能与
（二）课程类别：专业选修课
（三）学时：54,3学分。
（四）考查方式：闭卷考试&4:6。
前言
微生物制品技术及应用是微生物学与现代生
物学科的深入结合和广泛应用，也是科学技 术现代化和农业现代化的重要学科领域之一。 就其学科性质而言它是一门实践性较强的学 科。反映我国及世界微生物肥料、生物农药、 微生物环境处理和微生物饲料研究的最新成 果、生产与应用的新技术及发展趋势.
）
细菌： 放线菌： 酵母菌： 霉菌： 藻类： 原生动物：
pH 7.0~8.0 pH 7.5~8.5 pH 3.8~6.0 pH 4.0~5.8 pH 6.0~7.0 pH 6.0~8.0
pH的调节包括pH的内源调节和pH的外源调节。
a.pH的内源调节:通过培养基内在成分所起的调节作 用，就是pH的内源调节。 第一种是采用磷酸缓冲液进行调节。 ［K2HPO4］/［KH2PO4］＝1时，溶液的pH稳定在6.8。 调节K2HPO4和K2HPO4两者浓度比可获得pH 6.0～7.6 间的一系列稳定的pH。 反应原理：K2HPO4＋HCl→KH2PO4＋KCl KH2PO4＋KOH→K2HPO4＋H2O
课程说明
（一）课程名称：微生物制品技术及应用 （Microbial Products Technologies and Application） （二）适用专业：生物科学本 （三）课程类别：专业选修课 （四）学时：54,3学分。 （五）考核方式：闭卷考试&3:7。
微生物制品技术及应用
Microbial Products Technologies and Application （一）适用专业：生物科学本
2.营养协调
微生物细胞组成元素的调查或分析，是设计培养基 时的重要参考依据。
微生物细胞内各种成分间有一较稳定的比例。
在大多数化能异养菌的培养基中，各营养要 素间在量上的比例大体符合以下十倍序列的 递减规律： 要素：H2O＞C源+能源＞N源＞P、S＞K、Mg＞ 生长因子 含量(～10-1)(～10-2)(～10-3)(～10-4) (～ 10-5)(～10-6)
消毒与灭菌 概念，区别，分类 （1）培养细菌用的培养基与培养皿（需要灭
菌） （2）玻棒、试管、烧瓶和吸管（需要灭菌） （3）实验操作者的双手（需要消毒） （4）接种环、针、涂布棒：灼烧灭菌（外 焰）。 进行灭菌。
大型工业生产中的发酵罐等机械设备也需要
常用灭菌方法 1加热法 ⑴干热灭菌：火焰灼烧，热空气 ⑵湿热灭菌：高压蒸汽灭菌，煮沸消毒，超 高温灭菌 2过滤法 蔡氏过滤器，微孔滤膜过滤器 3辐射灭菌
c 固体接种法 普通斜面和平板接种均属 于固体接种.固体接种的另 一种形式是接种固体曲料 进行固体发酵。按所用菌 种或种子菌来源不同可分为： ⅰ用菌液接种固体料，包括用菌苔刮洗制成的 菌悬液和直接培养的种子发酵液。接种时按 无菌操作将菌液直接倒入固体料中，搅拌均 匀。
ⅱ用固体种子接种固体料。包括用孢子粉、
第二节 微生物分离培养技术
含有一种以上的微生物培养物称为混和培养
物（Mixed culture）。 如果在一个菌落中所有细胞均来自于一个亲 代细胞，那么这个菌落称为纯培养（Pure culture）。 在进行菌种鉴定时，所用的微生物一般均要 求为纯的培养物。得到纯培养的过程称为分 离纯化，方法有许多种。
分类
天然培养基 利用动、植物或微生物
。
体及其提取物制成的培养基。牛肉膏 蛋白胨培养基，麦芽汁培养基。
组合培养基 一类按微生物的营养要求
化学分类
精确设计后用多种高纯化学试剂配臵成 的培养基。如葡萄糖铵盐培养基，淀粉 硝酸盐培养基等。
半组合培养基 一类主要以化学试剂配制
同时还加有某种或某些天然成分的培养基。 如马铃薯蔗糖培养基。
第二种以CaCO3作“备用碱”进行调节。 CaCO3（不溶于水又是沉淀性的，在培养基中 分布不均匀）、NaHCO3均可用来调节培养基 的pH。反应是：
b.pH的外源调节: 这是一类按实际需要不断从外界流加酸 或碱液，以调整培养液的方法。
4.经济节约
配制培养基时应尽量利用廉价且易于获得的 原料作为培养基成份,特别是在发酵工业中, 以降低生产成本。 以粗代精，以“野”代“家”，以废代好， 以简代繁，以氮代朊，以纤代糖，以“国” 代“进”。
营养物质的浓度适宜, 营养物质之间的配比 适宜； 高浓度糖类物质、无机盐、重金属离子等不 仅不能维持和促进微生物的生长，反而起到 抑制或杀菌作用。 培养基中各营养物质之间的浓度配比也直接 影响微生物的生长繁殖和（或）代谢产物的 形成和积累，其中碳氮比（C／N）的影响较 大。
真菌需C／N比较高的培养基；（素食） 细菌（动物病原菌）需C／N比较低的培养基；（荤食） 发酵生产谷氨酸时: 碳氮比为4/1时，菌体大量繁殖，谷氨酸积 累少； 碳氮比为3/1时，菌体繁殖受到抑制，谷氨酸产量则大量增 加。 NH3 ＞ CO(NH2)2 ＞ NH4NO3 ＞ (NH4)2CO3 ＞ (NH4)2SO4 含氮量（82％）（46％） （35％） （29.2％） （21％）
2.参阅文献
A.直接经验 B.查阅、分析和利用一切文献资料上的对自 己直接或间接有关的信息
3.精心设计
4.试验比较 例如，先在培养皿琼脂平板上测试某微生物 的营养要求，然后作摇瓶培养（shake culture）试验，再进行台式发酵罐培养试验， 最后才扩大到试验型发酵罐和生产型发酵罐 的规模。
配制培养基的4种方法
1.生态模拟 直接取用这类天然基质（经过灭菌）或模拟这类自 然条件，就可获得一个“初级的”天然培养基来培 养相应的微生物。 例如，用肉汤、鱼汁来培养细菌；用果汁来培养酵 母菌；用润湿的麸皮、米糠培养霉菌；用米饭或面 包来培养根霉；用肥土来培养放线菌；用玉米芯来 培养脉孢菌（Neurosporaspp.）等。
3.理化适宜 指培养基的pH值、渗透压、水活度和氧化还原电势 等物理化学条件较为适宜。 包括：pH、渗透压和水活度、氧化还原电位 (1) pH 各大类微生物都有其生长适宜的pH范围，培养基的 pH必须控制在一定的范围内，以满足不同类型微生 物的生长繁殖或产生代谢产物。
通常培养条件:（初始pH
第二节 培养基
培养基（Medium）是供微生物、植物和动物
组织生长和维持用的人工配制的养料，一般 都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐（包 括微量元素）以及生长素和水等。有的培养 基还含有抗菌素、色素、激素和血清。
保存，一般培养基必须防潮、避光、阴凉处
倒臵保存。对一些需严格灭菌的培养基（如 组织培养基），较长时间的贮存，必须放在 2-6℃的冰箱内。
固体培养基 半固体培养基
物理分类
液体培养基
脱水培养基 ：预制干燥培养基
凝固剂必须具有的特点： a. 不被微生物液化、分解和利用 b. 在微生物生长的范围内保持固体状态 c. 凝固点的温度对微生物无害 d. 不因消毒灭菌的高温处理而破坏 e. 配制方便、价格低廉 f. 透明度好、粘着力强 常用的凝固剂： 琼脂（agar）、明胶（gelatin）、海藻酸 （alginate）、脱乙酰吉兰糖胶（Gelrite）、 多聚醇F127（pluronic polyol F127 ）等。 琼脂是最优良的凝固剂，自1880年开始用于配制微 生物培养基以来，至今经久不衰