无精症的全基因组关联研究进展
无精子症患者基因检测分析
ei
n
Ｇ
j
quenc
f
e
r
t
i
l
i
t
l．Me
t
hods:
Pe
r
i
r
a
lb
l
oodo
f２０pa
t
i
en
t
swi
t
ha
z
oo
spe
rmi
awa
sc
o
l
l
e
c
t
ed,andDNA wa
sex
t
r
a
c
t
ed
ygenepoo
phe
f
r
omt
he
i
rpe
r
i
r
a
lb
l
ood．DNAl
i
b
r
a
r
i
e
swe
r
ec
r
eh
i
r
e
s
s
i
oni
nt
e
s
t
i
cu
l
a
r
ghexp
t
i
s
sue．And６gene
si
nc
l
ud
i
ngSYCE３,EFCAB６,DDX４,KDM５D,RGS２２,and MTL５c
ou
l
dber
e
l
a
t
edt
ospe
rma
t
o
Ｇ
s
i
sd
i
s
o
r
de
无精症的原因探讨及研究进展
5. 造成 本研究结果的原因可能是精子冻融过程本身就是自 然筛选优质精子的过程，能耐受低温保存的精子多数 是顶体膜功能稳定，代谢旺盛，活力强，DNA完整性好 的优质精子。本研究显示无论新鲜的附睾精子还是 冷 冻的附睾精子行ICSI受精发育成胚胎，其胚胎在体 外培养过程中通过自我修复功能形成优质胚胎，移植 后取 得了相似的临床结局本研究建议如果患者有冷冻 保存的附睾精子，取卵日当天首先使用冻存的附睾精 子行 ICSI，如解冻后无可用精子，再重新穿刺附睾使 用新鲜精子。
目前，精浆生化指标和性激素是男性不育症常用的检测项目,而精浆生化指标联 合性激素检测在无精子症不同病理分型中的相关研究较少。
性激素及睾丸体积检测 采用电化学发 光法 检测患者 FSH、LH 和 T 水 平,FSH 参考值为 1.5 ~ 1 2.4 IU/L,LH 参考值为 1.7 ~8.6 IU/L,T 参考值 为 249~8 3 6 ng/dL。
无精症的探讨
汇报人：
目录
1 无精症定义和分类 2 参考文献及分析 3 讨论
PART 01
无精症定义和分类
符合《人类精液检查 与处理实验室手册》 (第 5 版)
无精子症的诊断标准：射出的精液 经离心沉 淀后显微镜检查,连续 3 次均未发现精子,需排除不 射精或 逆行射精情况。
排除标准:外伤史、器质性病 变及 遗传病史。
精子在附睾中逐步获得了运动和受精能力，其中 附睾管腔液微环境对精子的ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ熟和 储存起到十分重要的作用。但在多种致病因素对附睾内环境影响下，易导致精子的成 熟障碍及双侧输精管道梗阻，如射精管堵塞或先天性双侧输精管梗阻导致精子无法 通过阴道射出达到自然怀孕。
无精症动物模型的研究进展
轻度少精症 、中度少 精症 和重 度少 精症。按照精子 的密度 ，三 注射 技术 的不 断进 步 ， 目前 已经能够较好地改善少 、弱 精症 患
者 的 指标 分 别 是 １０×１０９／Ｉ ～２０×１０ＶＬ、５× １０９／Ｌ～１０× 者 的不孕不育情况 ．较好地满足了患者 的生育要求
１０ Ｌ和 ＜５×１０９／Ｌ。在禁欲 ２～７ ｄ的条件下 ，Ａ级精 子 （具
· １４２２·
· 综 述 ·
临京医学工程 ２０１８年１０月第２５卷第１０期
无精症动物模型的研究进展
刘 雷
（蚌埠 医学院第一附属医院 生殖 医学 中心 ，安徽 蚌埠 ２３３０３０）
【摘 要】 无精症 、少精症 以及弱精 症是 导致 男性 生殖障碍的重要原 因。构建稳 定可靠的 实验动物模型 ，对研 究疾病的发生机 制和 治疗方法有重要的意义。 目前 ，常 用于构建无精症动物模型的方法 包括 电离辐射 法、化 疗药物注射 法 、激素注射 法、热效应 法等 。但各种方 法的构建效果存在 一定差异 。因此 ，本文就 目前无精症 动物模 型构建的方法和现状进行综述 ，以期为 未来的研 究
包 括精子 生 成 、发育 和运 输异 常 。精 子异 常包括 无精 症 （ａ． 过提 高精 子质量和活力 的非特异性治疗 ；此外还有通 过酶制剂
ｚｏｏｓｐｅｒｍｉａ）、 弱 精 症 （ａｓｔｈｎｏｓｐｅｒｍｉａ） 和 少 精 症 （ｏｌｉｇｏａｓ— 和抗 氧化 药物治疗 方法 ：随着技术的创新和进步 ，还发 展了手
ｔｈｅｎｏｓｐｅｒｍｉａ），是 因男性导致不孕不育最主要的原因。
术 治疗 和辅 助生殖 技术 ，甚 至基 因治疗等 方法 。虽然 方法 很
无精症 是指 ３次精液 检查 均无精子 Ⅲ。少精症是指 在禁 欲 多 ，但各种 治疗 手段的临床效果却存在一定的差异 。伴 随着体
精子发生障碍的遗传学研究进展
Hereditas (Beijing) 2021年5月, 43(5): 473―486 收稿日期: 2020-12-17; 修回日期: 2021-03-16基金项目:国家重点研发计划项目(编号：2016YFA0503300)[supported by the National Key R&D Program of China (No. 2016YFA0503300)]作者简介: 张星雨，在读本科生，专业方向：预防医学。
E-mail:********************.cn 通讯作者:胡志斌，教授，研究方向：生殖医学。
E-mail:******************.cn DOI: 10.16288/j.yczz.20-343 网络出版时间: 2021/4/8 10:42:52URI: https:///kcms/detail/11.1913.R.20210407.1424.004.html综 述精子发生障碍的遗传学研究进展张星雨，祝天喻，张清荣，郭雪江，王铖，靳光付，胡志斌南京医科大学生殖医学国家重点实验室，南京 211166摘要: 育龄人群中约15%的夫妻被不孕不育困扰，其中男方因素导致的不孕不育约占50%。
男性不育通常由精子发生障碍导致，呈现为少、弱、畸形精子症，最严重的是无精子症。
本文以精子发生障碍为主线，重点综述了非梗阻性无精子症和畸形精子症的遗传学病因研究。
近年来，随着高通量芯片和测序技术的快速发展，无精子症和畸形精子症的遗传学因素得以深入的揭示与解析。
围绕无精子症，全基因组关联研究与高通量测序研究揭示了一批非梗阻性无精子症的风险位点和致病基因；围绕畸形精子症，全外显子测序等研究鉴定了一系列致病基因，极大地丰富了精子鞭毛多发性形态异常等精子畸形的遗传学病因。
大量致病基因的发现，促进了男性不育病理机制的阐明。
全面而深入地了解精子发生障碍中的遗传因素，对男性不育的诊断、临床治疗和遗传咨询具有重要的意义。
特发性无精子症少精子症患者分子遗传学及血清学的研究进展
90分钟练琴时间分配参考
作为一名学习钢琴的学生，每天的练琴时间是非常重要的。
在这90分钟的练琴时间中，如何分配时间才能让自己的练琴效果最大化呢？下面给大家提供一些参考。
1. 热身（10分钟）
在正式开始练琴前，我们需要进行一些简单的热身动作，来放松身体和手指。
可以进行一些简单的手指按摩、揉捏和伸展运动，同时可以演奏一些简单的乐曲来调整状态。
2. 基本练习（30分钟）
基本练习是学习钢琴的基础，可以提高手指的灵活度和技巧水平。
在这30分钟中，可以练习琴键按下和手指跳跃的技巧，同时还可以进行一些音阶和琶音的练习。
3. 曲目练习（40分钟）
曲目练习是学习钢琴的重点，也是我们想要达到的目标。
在这40分钟中，我们可以选择一两首自己喜欢的曲目来进行练习。
可以先练习曲目的节奏、速度和强弱，然后逐渐加入细节和感情表达。
4. 总结和放松（10分钟）
在练琴结束前，我们需要对今天的练琴过程进行总结和反思。
可以
回顾自己的练琴成果和不足之处，为下一次的练琴作出调整和计划。
最后，可以进行一些简单的放松动作，来缓解身体和手指的疲劳。
总结
以上是90分钟练琴时间分配的参考，当然每个人的情况都不一样，需要根据自己的实际情况进行调整。
但是无论如何，我们都需要坚持每天的练琴，不断提高自己的技能和水平。
只有这样，我们才能在钢琴演奏中找到属于自己的乐趣和成就感。
Wnt信号通路与男性不育相关性的研究进展
Wnt信号通路与男性不育相关性的研究进展傅文婷;江惠华;钟兴明;周冰燚;刘晓阳;刘兴章【摘要】Wnt信号通路是一种高度保守的信号通路,它在多种人体发育进程及维持成人组织稳态中起着根本性的作用.经典的Wnt信号通路与细胞的发育分化密切相关.Wnt信号通路在维持雄性哺乳动物精子形态与功能正常中发挥了重要作用,该通路异常与男性不育和睾丸癌有关.本文综述了Wnt信号通路在男性生殖系统中的作用及其与男性不育的关系等方面的最新进展,以进一步了解Wnt信号通路的作用机制,为男性不育的治疗提供参考.【期刊名称】《中国医药导报》【年(卷),期】2019(016)004【总页数】3页(P72-74)【关键词】Wnt信号通路;男性生殖;男性不育;精子形态【作者】傅文婷;江惠华;钟兴明;周冰燚;刘晓阳;刘兴章【作者单位】广东省计划生育科学技术研究所男性生殖与遗传重点实验室,广东广州510600;广东省计划生育科学技术研究所男性生殖与遗传重点实验室,广东广州510600;广东省计划生育科学技术研究所男性生殖与遗传重点实验室,广东广州510600;广东省计划生育科学技术研究所男性生殖与遗传重点实验室,广东广州510600;广东省计划生育科学技术研究所男性生殖与遗传重点实验室,广东广州510600;广东省计划生育科学技术研究所男性生殖与遗传重点实验室,广东广州510600【正文语种】中文【中图分类】R698.2据世界卫生组织（WHO）调查，全球有10%~15%育龄夫妇不育，其中50%与男性有关[1-2]。
无精症是男性不育症的主要病因之一，占男性不育的10%~15%[3]。
临床上常根据有无输精管道梗阻将无精症分为两种，即梗阻性无精症和非梗阻性无精症；其中，非梗阻性无精症患者占整体的60%[4]。
男性非阻塞性无精症主要病因是睾丸生精障碍，即不能产生精子或只产生极少量的精子，导致精子不能到达卵母细胞和/或正常穿透。
非梗阻性无精症病因不明，这给临床诊疗带来了很大的困难，且目前尚缺乏根本、有效的预防和治疗手段[5]。
815 例少精无精症患者在不育中的细胞遗传学分析
表 ３ ８１５ 例无精症和少精症患者的染色体核型及 Ｙ 染色体 ＡＺＦ 微缺失检测结果
临床表现 染色体核型
Ｙ 染色体 ＡＺＦ 异常染色体
检测结果
例数
无精症 ４７，ＸＸＹ
３１
４７，ＸＹ，ｉｎｖ（９） （ ｐ１１；ｐ１３）
６
４６，Ｘ，ｉｎｖ（ ｐ１１；ｑ１１）
ＤＯＩ：１０畅３８７７ ／ｃｍａ．ｊ．ｉｓｓｎ．１６７４唱０７８５．２０１２．１１．０５０ 作者单位： ６５０２１４ 昆明金域医学检验所实验诊断部遗传室 通讯作者： 张建明，Ｅｍａｉｌ：ｌａｂｚｊｍ＠ｋｉｎｇｍｅｄ．ｃｏｍ．ｃｎ
制备方法对染色体进行核型分析，Ｇ 显带分析计数 ２０ 个中期分 裂象，分析 ５ 个细胞核型，对异常核型增加分析倍数，根据枟人类 细胞遗传学国际命名体制枠 描述染色体异常核型。
试剂准备（ 试剂准备区） （ ｒｅａｇｅｎｔ ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ ）：根据检测数 量 Ｙ ＝ｎ 份待检样本数 ＋１ 份阳性对照 ＋１ 份阴性对照，从试剂 盒中取出 ＰＣＲ 反应液管 Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ各 Ｙ 管，取出正常男性 ＤＮＡ，均置于室温融化，５０００ ｒ ／ｍｉｎ 离心 ２ ｓ，在管盖上做好标记。
【摘要】 目的 通过对 ５８４ 例无精症、２３１ 例少精症患者进行细胞遗传学检查分析，探讨无精症少精症 与染色体异常的关系及分析研究染色体异常在男性不育中的诊断意义。 方法 外周血染色体常规制备方法 对染色体进行核型分析，并采用聚合酶链反应对 ３ 例 Ｙ 染色体结构异常患者的 ＡＺＦＡＢＣＤ 区（ ａｚｏｏｓｐｅｒｍｉａ ｆａｃ唱 ｔｏｒ，ＡＺＦ）进行检测。 结果 ５８４ 例无精症患者中检出异常核型 ８７ 例（１４畅９０％），主要涉及染色体异常（ 数目 异常和结构异常）和染色体异态（Ｙ 染色体异态 ９ 号 １ 号染色体臂间倒位）；２３１ 例严重少精症患者中检出异 常核型 １９ 例（８畅２３％），涉及染色体异常和染色体多态性。 对 ３ 例 Ｙ 染色体结构异常者的 ＡＺＦＡＢＣＤ 区检测， ＡＺＦ 微 缺 失 ３ 例 分 别 为 ＡＺＦＣ （ ＳＹ２３９ ＳＹ２５５ ＳＹ２４ ＳＹ２５４ ） ＋ＡＺＦＤ （ ＳＹ１５２ ）； ＡＺＦＤ （ ＳＹ１５２ ）； ＡＺＦＡ （ ＳＹ８４ ＳＹ８６）。 结论 男性少精症无精症原因很多且复杂，而染色体异常是影响男性少精及无精的重要因素，因此 对男性不育症患者进行细胞遗传学检查是必要的。
基因芯片技术在COX10等无精症患者相关基因的分析
基因芯片技术在COX10等无精症患者相关基因的分析邵 晨,杨 波,王 禾,汪 涌,高晓康,秦卫军,陈宝琦,邵国兴(第四军医大学西京医院泌尿外科,陕西西安 710032)摘要:目的 运用基因芯片技术获取正常生育者睾丸组织与无精症患者睾丸组织中差异表达的基因,并对结果进行生物信息学分析。
方法 分别抽提正常生育者与无精症患者睾丸组织中mRNA 制备探针,应用基因芯片技术观察二者表达谱差异情况,并对其中明显下调的COX10基因进行生物信息学分析。
结果 通过人基因芯片筛选,获得120条与无精症相关的基因,其中明显下调的基因COX10与人类精子调控关系密切。
结论 基因芯片筛选正常生育者与无精症患者睾丸组织差异表达基因具有样品用量少,高敏感性,快速高效等特性,可用于筛选和研究无精症相关基因。
关键词:基因芯片;无精症;差异表达;生物信息学中图分类号:R698.2 文献标识码:A 文章编码:167128259(2003)0420345203The study on the aspermia 2related genes by genechipsand bioinformatics analysis of COX 10geneShao Chen ,Yang Po ,Wang He ,Wang Y ong ,G ao Xiaokang ,Qin Weijun ,Chen Boqi ,Shao Guoxing (Department of Urology ,Xijing Hospital ,the Fourth Military Medical University ,Xi ’an 710032,China )ABSTRACT :Objective To study t he diff erential gene exp ression p rofiles between t he nor mal and asp er miahuman testises by genechips and analyze t he biological inf or mation of CO X 10,a distinct dow n exp ressed gene .Methods We ext racted m RNA f rom bot h t he nor mal and asp er mia testises and p roduced p robes t o detect t hediff erential gene exp ression p rofiles by genechips ,t hen analyzed CO X 10genes by bibliograp hic ret rieval on t he Inter net .Re sults O ne hundred and twent y diff erentially exp ressed genes related t o asp er mia were f ound .Adistinct dow n 2exp ressed gene CO X 10was confir med t o be related t o asp er mia by bibliograp hic ret rieval .Conclusion Screening t he diff erential gene exp ression p rofiles between t he nor mal and asp er mia human testises bygenechips is f ast and eff ective ,and needs less swatch t han nor mal technique .It can be used in t he study of asp er mia 2related genes and f urt her research .KE Y WOR DS :genechip ;asp er mia ;diff erential exp ression ;biological inf or matics收稿日期:2003201228 修回日期:2003204215基金项目:陕西省人口与计划生育科研课题(No.陕计生2200122).作者简介:邵晨(19692),男(汉族),博士,讲师,主治医师. 1995年第一篇基因表达谱芯片文章发表以来,基因芯片技术已广泛应用于基因功能的研究。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
无精症的全基因组关联研究进展文献检索①中国生物医学文献数据库（CBM）②中国知网（CNKI）1.((主题=中英文扩展(无精子症) 或者主题=中英文扩展(全基因组关联研究))) (精确匹配)找到 3,126 条结果2.((主题=中英文扩展(无精子症) 并且主题=中英文扩展(全基因组关联研究))) (精确匹配)找到0条结果③维普资讯（VIP）共同检索没有发现相关文献④Embase⑤Ovid MEDLINE⑥PUBMED综述正文摘要：无精症是一种复杂的多因素疾病，其发生发展是遗传因素与生活方式环境因素共同作用的结果，且存在着遗传异质性。
全基因组关联分析(genome wide association study，GWAS)已成为了现阶段研究复杂疾病与基因关系比较有效和方便的一种方法，为无精症遗传机制的研究提供了新的途径。
本文主要介绍了近年来全基因组关联研究对无精症研究领域的一些重要发现，并总结了全基因组关联研究在这方面存在的一些问题。
Abstract:Azoospermia is a complex multifactorial disease，which is the result of the combined effects of genetic and environmental factors.Besides, there is obvious genetic heterogeneity.Genome wide association study (GWAS) has become an effective and convenient method for the study of complex diseases and gene, providing a new approach to study the genetic mechanism of azoospermia.This paper mainly introduces some important findings in genome wide association study on azoospermia, and summarizes some problems associated with genome wide association study.目前世界范围内约有10%-15%的育龄夫妇患有不孕不育症，其中男方因素约占50%[1]。
由遗传缺陷包括基因突变和染色体异常所引起的精子发生障碍估计占男性不育因素的30%[2]。
长期以来，Y染色体一直是男性不育遗传因素的重点研究对象，并取得了很多重要的研究成果，尤其是证实了Y染色体长臂1区1带（Yq11）处存在着与精子发生直接相关的多基因家族，称无精症因子（azoospermia factor, AZF）[3]，AZF区微缺失可导致男性不育[4]。
男性不育患者中，相当大的一部分患者为无精症。
无精症是一种复杂的多因素疾病，其发生发展是遗传因素与生活方式环境因素共同作用的结果，且存在着遗传异质性。
近年来，随着人类基因计划和基因组单倍体图谱计划的完成，通过应用基因组中数以百万计的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism，SNP)为标记进行病例-对照关联分析，从而确定疾病相关基因、易感区域或疾病的标记物，从而探究复杂疾病遗传机制的方法[5]，全基因组关联分析(genome wide association study，GWAS)已成为了现阶段研究复杂疾病与基因关系比较有效和方便的一种方法[6]，从2006年起，已经陆续报道了糖尿病、乳腺癌、前列腺癌、精神分裂症等几十种疾病的关联分析结果，确定了一系列疾病的易感位点[7,8,9]。
采用全基因组关联分析在全基因组范围内筛查与疾病关联的SNP，已发现了一些与无精症相关联的易感位点和区域，这有助于无精症遗传机制的研究。
本文就近几年来无精症的全基因组关联研究进展作一综述。
2009年，尤他大学医学院Aston团队发表了第一篇和无精症、严重少精症有关的GWAS文章[10]。
该项目选取来自北欧血统的40例非梗阻性无精症患者、52例严重少精症患者（<5×106\ml）和80例具有正常生精能力的正常人（>20×106\ml）为研究对象，通过微阵列技术进行基因分型，筛选超过370,000个SNP位点，发现了21个与无精症或少精症相关的SNP位点。
2010年，根据这次的GWAS结果和其他被报道的相关SNPs，该团队通过Illumina BeadXpress 平台，在来自中欧血统的80例非梗阻性无精症患者、141例严重少精症患者（<5×106\ml）、63例中等少精症患者（5-10×106\ml）和158例具有正常生精能力的正常人（>20×106\ml）中对172个SNPs开展了一次扩大性的后续研究[11]。
然而，只有数个SNPs在这次研究中和无精症或少精症的相关性得到确证。
这两次的研究利用GWAS方法为探索男性不育的遗传病因开启了重要的第一步，但是其实验结果的可靠性都被其样本量不足和种族差异性所限制，还应该在更大并且不同种族的人群中重复该实验。
2011年，南京医科大学胡志斌教授团队在Nature Genetics上发表了一篇在中国人群中和非梗阻性无精症相关的GWAS文章[12]。
该研究分三个阶段进行，研究人员在第一阶段（GWAS阶段）的研究中选取1,000例无精症病人和1,703例对照，采用了AffymetrixGenome-Wide Human SNP Array 6.0芯片进行对906,703 SNPs进行分析，在此阶段中，以全基因组统计学P ≤ 1.0 × 10−7的标准选择了32个与无精症相关的SNPs。
在第二阶段（确认实验I）的研究中，针对第一阶段筛选出的32个SNP位点在981例无精症病人和1,657例对照中进行了重复验证，确认了4个和无精症相关的位点。
在最后一个研究阶段（确认实验II）中，在766例无精症患者和1,995例对照中针对第二阶段验证出来的4个SNP 进行再次的重复验证，然而SIRP A-SIRPG rs6080550并没有超过统计学临界值。
最终得到PRMT6 rs12097821, PEX10 rs2477686和SOX5 rs10842262这三个位点和无精症相关。
2012年，山东大学医学院陈子江教授团队通过GWAS研究发现了HLA区域上两个遗传位点与无精症相关[13]。
此研究也是分为三个阶段：在第一阶段（GWAS 阶段）中，选取的样本包括来自山东省的802例无精症患者和来自山东省和上海市的1,863 例对照，通过HumanOmniExpressBeadChip和AffymetrixGenome-Wide Human SNP Array 6.0两种技术进行基因分型从而发现了和无精症相关的37个SNPs。
在第二阶段的研究中，在来自华北八个省市（山东、黑龙江、吉林、辽宁、河北、河南、天津和北京）的818例无精症病人和1,755例对照中对GWAS 阶段发现37个的SNPs进行重复和确认。
第三阶段中，选取了来自华南和中部5个省市（江苏、安徽、上海、湖北和广西）的606例无精症病人和958例对照为研究对象，针对第二阶段中确认的4个SNPs开展进一步的重复确认。
第二、三阶段实验的基因分型皆采用SequenomiPLEX平台。
经过三个阶段后，发现HLA-DRA rs3129878和C6orf10 and BTNL2rs498422这两个SNPs和非梗阻性无精症的风险性在P值上最显著相关。
此外，2012年，芝加哥大学Carole Ober研究团队另辟蹊径，通过家庭人口数和出生率两个参数来反映生育能力，开展了与这两项相关的GWAS研究[14]。
在此研究中，采用了GeneChip 500K Mapping Array 、GenomeWide Human SNP Array 5.0和Genome-Wide HumanSNP Array 6.0三种方法对250,000常见SNPs进行基因分型。
选择了269例来自禁止避孕和拥有较大家庭人口的Hutterite已婚男士进行GWAS实验，并在123个不同种族的芝加哥人群中进行验证实验，研究结果提示41个SNPs和家庭人口数或出生率相关，其中四个SNPs（PSAT1rs7867029、EPSTI1rs12870438、USP8rs7174015和UBD rs724078）被证实和精子浓度或精子总数有关系。
多个和生精障碍相关的GWAS文章发表后，数个研究团队对GWAS结果在不同的人群中进行一系列验证重复实验。
日本团队分别对胡志斌教授团队和陈子江教授团队发表的GWAS结果在日本人群中做了进一步的验证实验[15,16]，在这四个位点（rs12097821 、rs2477686 、rs10842262 和rs6080550 ）上并没有得到与GWAS 一致性的结果，反而是这HLA上两个位点（rs3129878和rs498422）在日本人口中得到阳性结果。
国内上海交通大学医学院对PRMT6、PEX10和SOX5这三个位点也进行了一次重复验证实验，然而该研究结果只支持SOX5rs10842262与无精症的相关性[17]。
此外，南京医科大学的团队在GWAS研究结果的基础上又陆续开展了多项关于无精症或少精症的研究，对生精障碍的遗传病因有了更加深入的研究和认识。
2013年，为了在基因组水平上对GWAS研究得出的和无精症相关的五个基因（PRMT6、PEX10、SOX5、SIRP A和SIRPG）有进一步的了解，研究人员对基因的编码区和蛋白功能区域进行了二代测序，从而鉴别出和无精症相关的罕见、低频和常见的基因变异，然后在大样本人群中进行重复验证[18]，他们进行了一个两阶段实验，分别是由96例无精症患者和96个健康男性组成的基因外显子深度测序和由522 例无精症患者和484 健康男性组成的重复验证试验，实验结果表明SIRP A和SIRPG蛋白编码区的突变和无精症风险性相关。
考虑到PRMT6、PEX10、SOX5、SIRP A和SIRPG这五个基因和无精症相关，那是否和少精症有关联呢？于是他们在中国汉人中也进行了一个两阶段的研究[19]，在96例少精症患者和96例健康对照中对五个基因进行二代测序从而寻找和少精症相关的遗传位点，在688例少精症病人和496例对照中对第一阶段发现的位点进行重复确认实验，最终SIRP A rs3197744 和SOX5rs11046992被证实和少精症易感性有关系。