转基因动物流程
人教版高中生物选修三流程图
人教版高中生物选修三流程图work Information Technology Company.2020YEAR选修三流程图一、基因工程流程图1、转基因植物的培育流程：2、转基因动物的培育流程：1、基因工程的操作工具有：。
2、基因工程的操作流程是：（1）；（2）；（3）；（4）。
其中核心步骤是：。
3、获取目的基因的方法有：；为了获得更多的目的基因，可以用技术使目的基因在生物体外大量扩增。
4、构建基因表达载体需要的工具酶有；构建基因表达载体的目的是：。
5、将目的基因导入植物细胞常用的方法是；导入动物细胞的常用的方法是。
一般选用受精卵作为目的基因的受体细胞，原因是。
6、基因表达载体的组成：。
其中启动子的作用是；标记基因的作用是。
7、检测目的基因是否成功表达的方法是：（1）分子水平的检测：用放射性同位素标记的 片段做探针进行分子杂交，检测目的基因是否成功转录出mRNA 或用 技术检测目的基因是否翻译出相应的蛋白质。
（2）个体水平的检测： 。
二、蛋白质工程流程图：1、 工程是蛋白质工程的基础，从本质上看蛋白质工程是通过改造 ， 从而达到改造 的目的。
三、植物组织培养流程图：1、植物组织培养的理论依据是： 。
2、植物细胞表现出全能性的条件： 。
3、植物组织培养的核心技术： 。
4、愈伤组织的结构特点是： 。
5、植物组织培养的培养基中除各种营养物质外，还需要添加 ，目的是 。
同时在培养过程中，除必要的温度、光照和氧气等外界条件外，操作过程中还必须保证 。
6、植物组织培养技术有哪些应用？（写出三种）7、若要制作人工种子，应进行到哪一阶段？。
若用紫杉细胞生产治疗癌症的紫杉醇，应进行到哪一阶段？。
四、植物体细胞杂交流程图： 1、如何去除细胞壁？2、诱导原生质体融合常用的方法有 。
植物细胞杂交的原理是： 。
3、植物原生质体融合完成的标志是 。
4、由杂种细胞培养成杂种植株的技术是： 。
5、植物体细胞杂交培育新品种的优点是 。
转基因小鼠制备方法
转基因小鼠制备方法一、引言转基因小鼠是指通过基因工程技术将外源基因导入小鼠基因组中，使其表达或缺乏特定基因，从而研究基因功能、疾病模型等方面的动物模型。
转基因小鼠制备方法是实现转基因小鼠研究的重要步骤之一，本文将详细介绍转基因小鼠制备的一般步骤和常用技术。
二、转基因小鼠制备的一般步骤1. 选择目标基因和载体转基因小鼠制备的第一步是选择目标基因和适当的载体。
目标基因可以是外源基因、特定基因的突变体或基因敲除。
载体通常是带有选择标记（如抗生素抗性基因）和目标基因的质粒。
2. DNA构建在DNA构建过程中，首先需要将目标基因和选择标记基因插入到载体的适当位点上。
这可以通过限制性内切酶切割和连接、PCR扩增等方法实现。
构建完成后，需要进行酶切鉴定和测序确认。
3. 体外培养胚胎干细胞（ES细胞）转基因小鼠制备中常用的方法是利用ES细胞技术。
首先，从小鼠胚胎中获得内源性干细胞（ES细胞），并进行体外培养。
然后，将构建好的转基因载体导入ES细胞中，通过抗生素筛选获得带有目标基因的转基因ES细胞克隆。
4. 转基因小鼠制备转基因ES细胞的制备完成后，可以进行转基因小鼠的制备。
这一步骤通常有两种方法：内源性重组和外源性重组。
内源性重组是将转基因ES细胞注射到小鼠早期胚胎中，使其整合到小鼠的生殖细胞中，从而获得转基因小鼠。
外源性重组是将转基因ES细胞直接注射到小鼠的细胞团中，形成转基因胚胎，再将转基因胚胎移植到雌性小鼠子宫中，使其发育成为转基因小鼠。
5. 转基因小鼠鉴定转基因小鼠制备完成后，需要对其进行鉴定。
通常采用PCR、Southern blotting、Western blotting等分子生物学方法，检测转基因小鼠是否成功表达目标基因。
三、常用技术1. CRISPR/Cas9技术CRISPR/Cas9是一种新兴的基因编辑技术，可以实现高效、精确地对基因组进行编辑。
通过CRISPR/Cas9技术，可以直接在小鼠胚胎中进行基因编辑，从而制备转基因小鼠。
利用基因编辑技术制备转基因动物的步骤详解
利用基因编辑技术制备转基因动物的步骤详解基因编辑技术是一种革命性的生物技术，可以针对动植物基因组进行精确的改造和编辑。
利用基因编辑技术制备转基因动物的过程可以分为以下几个步骤。
第一步：选择基因编辑工具基因编辑技术最常用的工具是CRISPR-Cas9系统。
CRISPR是一种天然存在于细菌中的防御机制，通过引入Cas9蛋白和合适的RNA序列，可以将Cas9蛋白导向到特定的目标位点上，由Cas9蛋白的核酸切割活性引发基因组的突变。
第二步：设计目标位点在制备转基因动物之前，需要确定需要编辑的目标基因和位点。
目标基因是指需要进行改造的基因，而目标位点是指基因组中需要敲除、替换或插入外源DNA 的具体位置。
通过分析目标基因的功能和调控机制，可以确定最合适的目标位点。
第三步：合成或构建基因编辑工具一旦确定了目标位点，就需要合成或构建基因编辑工具。
对于CRISPR-Cas9系统来说，需要合成目标位点特异性的RNA序列（sgRNA）并制备Cas9蛋白。
sgRNA的设计应考虑到其与目标位点的特异性配对，以及Cas9蛋白与sgRNA形成稳定复合物的效率。
第四步：基因编辑载体构建将基因编辑工具导入目标细胞需要利用载体进行传递。
载体是一种能够稳定地携带和传递基因编辑工具的DNA分子。
可以利用分子克隆技术构建适合目标细胞和目标基因编辑的载体。
第五步：转染或注射基因编辑载体将构建好的基因编辑载体转染或注射至目标细胞或受精卵。
其中转染是将载体通过化学物质或物理手段导入目标细胞，而注射则是直接将载体注入受精卵的质量或染色体。
第六步：筛选和验证编辑结果将转染或注射后的细胞或胚胎进行培养或转植至合适的宿主动物体内，随后通过对细胞或胚胎的分析，筛选出已经发生基因编辑的个体。
常用的筛选方法包括PCR、测序、蛋白质分析等。
第七步：繁殖和鉴定转基因动物成功筛选出发生基因编辑的个体后，需要进行进一步繁殖和鉴定。
通过鉴定转基因动物是否将所需编辑传递给其后代，可以确定基因编辑是否遗传稳定。
转基因技术的主要操作流程
转基因技术的主要操作流程
内容:
转基因技术的主要操作流程通常包括以下几个步骤:
1. 选择目的基因。
根据转基因的目的,从供体中选择想要的目的基因,这通常是编码某种有用蛋白质的基因。
2. 构建载体。
将选定的目的基因插入到载体分子中,例如质粒或病毒载体。
载体可以帮助目的基因进入目标生物的细胞。
3. 将重组载体导入宿主细胞。
使用微注射、电穿孔、基因枪等方法,将含有目的基因的重组载体导入目标生物的细胞中。
4. 筛选转基因细胞。
通过抗性筛选、荧光筛选等方法,从导入重组载体的细胞中筛选出真正导入了目的基因的转基因细胞。
5. 转基因细胞培养。
对转基因细胞进行培养、繁殖,获得足够数量的转基因细胞。
6. 转基因植株再生。
通过组织培养等手段,从转基因细胞中再生出完整的转基因植株。
7. 鉴定转基因植株。
通过、杂交等手段对转基因植株进行鉴定。
8. 转基因植株评价。
对转基因植株的表型进行评价,确定是否达到了转基因的预期目的。
这就是转基因技术的主要操作流程。
不同的转基因目的和对象,具体操作可能会有所调整。
转基因动物操作流程
转基因动物操作流程一、目的基因的获取。
咱得先有想要转进动物体内的基因呀。
这就像找一颗神奇的种子，要种到动物这个“小花园”里。
这个基因可以从好多地方来呢。
有时候是从其他生物身上发现了特别厉害的基因，比如说，有的植物能抗虫，那这个抗虫基因如果转到动物身上，说不定能让动物也有新本事。
获取这个基因的方法也不少，可以用基因文库筛选，就像在一个装满基因的大仓库里找宝藏一样，或者用PCR技术，这就像是用一个特别的复印机，把我们想要的基因复制出来。
二、基因表达载体的构建。
有了目的基因，还得给它造个“小房子”，也就是构建基因表达载体。
这个载体就像是一个小飞船，能带着目的基因准确地到达动物细胞里。
在这个载体里，除了目的基因，还有启动子和终止子这些重要的部件。
启动子就像是小飞船的发动机启动按钮，它能告诉细胞什么时候开始让目的基因发挥作用。
终止子呢，就像是刹车，告诉细胞什么时候这个基因的工作该停止了。
而且这个载体里还可能会有标记基因，这就像是小飞船上的信号灯，方便我们之后去识别哪些细胞成功地接纳了这个带有目的基因的载体。
三、受体细胞的选择。
接下来就是要选一个合适的“家”来接纳这个带着目的基因的载体啦，也就是受体细胞。
对于转基因动物来说，最常用的受体细胞就是受精卵。
受精卵就像是一个充满无限可能的小魔法球，它还没有开始分化，就像一张白纸，有很大的潜力。
把我们构建好的基因表达载体转进受精卵里，就像给这个小魔法球注入了新的魔法力量，然后这个受精卵就有可能发育成一个带有新基因的动物。
四、基因导入受体细胞。
那怎么把基因表达载体弄进受体细胞呢？这里有好几种办法呢。
比如说显微注射法，这就像是用一根超级超级细的针，把基因表达载体直接注射到受精卵里面，这可是个技术活，就像在给小蚂蚁打针一样精细。
还有病毒介导法，利用病毒这个小“快递员”，让它把基因表达载体送到细胞里面，不过这个小“快递员”有时候也会调皮捣蛋，可能会带来一些其他的小麻烦。
五、胚胎移植。
转基因技术——动植物转基因方法ppt(共22张PPT)
【DAWN_ZX】
•优点:不依赖组织培养人工再生植株，技术简单，
不需要装备精良的实验室，常规育种工作者易于掌握
。
转基因
技术
【DAWN_ZX】
动物转基因方法
原核显微注射法 胚胎干细胞介导法
逆转录病毒载体法 精子介导的基因转移
核移植转基因法
体细胞核移植法
线粒体介导法
转基因
技术
【DAWN_ZX】
动物转基因方法
原核显微注射法（最常用）
【启动子】是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因
转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质。 【终止子】也是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的尾端。
【DAWN_ZX】
转基因技术的步骤
STEP3：将目的基因导入受体细胞
（1）导入植物细胞一般用农杆菌转化法，也可 用基因枪法或花粉管通道法。 （2）导入动物细胞一般用显微注射法。 （3）导入微生物细胞一般用感受态细胞吸收DNA 分子的方法。
转基因
技术
【DAWN_ZX】
转基因技术的步骤
STEP4：目的基因的检测和表达
1.检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因
。
方法：采用DNA分子杂交技术。 2.检测目的基因是否转录出了mRNA。
方法：采用用标记的目的基因作探针与 mRNA杂交。 3.最后检测目的基因是否翻译成蛋白质。
方法：从转基因生物中提取蛋白质，用相应的抗体进行 抗原－抗体杂交。 4. 进行个体生物学水平的鉴定。
•根癌农杆菌和发根农杆菌中细胞中分别含有Ti质粒和Ri质粒，其上有 一段T-DNA，农杆菌通过侵染植物伤口进入细胞后，可将T-DNA插入 到植物基因组中。因此，农杆菌是一种天然的植物遗传转化体系。人们将目 的基因插入到经过改造的T-DNA区，借助农杆菌的感染实现外源基因 向植物细胞的转移与整合，然后通过细胞和组织培养技术，再生出转 基因植株。 •近年来，农杆菌介导转化在一些单子叶植物（尤其是水稻）中得到了广 泛应用。
修改转基因动物
正负筛选示意图
正选择
如果发生正确的同源重组而整合，那么
HSV-tk就不会整合到基因组，只有转入基 因及neor基因整合进去。 用G418来筛选转染细胞，没有整合neor基 因的细胞将全部死亡， 整合了外源基因的细胞可以存活下来，这 就是正选择。
负选择
质粒载体pUC19：
大小2686bp， 带有pRB322的复制 起始点， 一个氨苄青霉素抗性 基因 一个大肠杆菌乳糖操 纵子β-半乳糖苷酶基 因（lacZ’）的调节基 因片段， 一个调节lacZ’基因表 达的阻遏蛋白的基因 lacⅠ， 多个单克隆位点。
λ噬菌体载体
由质粒和噬菌体的粘性末端构建而成，具有质粒载 体和噬菌体二者的优点。 λ噬菌体载体的容量受到一定的限制，最大插入片段不能 超过23kb。 1978年Colli s和Hohn发展了新载体——粘粒（即柯斯质 粒），其基因组由以下几部分构成： 质粒复制起始位点， 1个或多个限制性内切酶位点， 抗药性标记和带有粘性末端的DNA片段。 粘粒载体大小为4～6kb，而插入片段为29～45kb，可克 隆携带40kb大小的DNA片段，在大肠杆菌中复制保存， 适用于作基因簇和大基因克隆。
DNA微注射法
超常排卵： 供体雌鼠 注射 怀孕母马的血清 48h再注射人的绒 毛膜促性腺激素 使其母马超量排卵 处理的雌鼠一次可 以产生大约35个卵细胞（而正常的雌鼠只能产生5～10个卵细胞） 注射： 雌鼠交配后杀死 小心从输卵管中取出受精卵 将外源基 因注射进受精卵中。 DNA微注射要在精前核时期注射才能有效。 移植：将25～40个受精卵用显微外科手术移植到假孕雌鼠的子宫内 制造雌鼠假孕 让它与切除了输精管的不育雄鼠交配（缺乏精 子所以雌鼠卵细胞无法受精） 培养：将受精卵移入代孕母鼠子宫中，大约3周以后，接受过注射的 受精卵发育生长成为幼鼠，由代孕母鼠产下。 检测：提取DNA进行Southern杂交或PCR检测，或通过与另一只鼠 杂交来确定转入基因是否在其生殖系中。 筛选：对子代进行杂交产生纯合转基因鼠。
转基因克隆动物的流程
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转基因动物流程
转基因动物是通过基因工程技术对动物基因进行修改和调整，以达到特定目的的一种操作。
转基因动物流程可以分为以下几个步骤：1. 设定目标：在转基因动物的研究中，首先需要确定目标，即希望通过基因工程技术实现什么样的改变。
这可以是增加动物的抗病能力、提高农作物的产量或改善动物的生长性能等。
2. 基因选择：根据设定的目标，研究人员需要选择合适的基因。
这些基因可以来自于同一物种的其他个体，也可以来自于不同物种。
选择基因时需要考虑基因的功能和效果，以及与转基因动物所需的特性是否相符。
3. 基因克隆：在确定了目标基因后，研究人员需要进行基因的克隆。
这一步骤涉及到将目标基因从提供者中提取出来，并进行扩增和纯化，以获得足够的基因材料。
4. 转基因技术：转基因技术是将目标基因导入动物体内的关键步骤。
常用的转基因技术包括基因枪法、细胞核移植和胚胎干细胞技术等。
通过这些技术，研究人员可以将克隆好的基因导入到动物的基因组中，并使其在动物体内表达。
5. 繁殖和筛选：经过转基因技术处理的动物需要进行繁殖和筛选，以获得所需的转基因个体。
这一步骤通常需要通过交配或体外受精等方式，将转基因个体繁殖出来。
同时，研究人员还需要通过PCR、
Southern blot等技术对转基因个体进行筛选和鉴定。
6. 分析和评估：完成转基因动物繁殖后，研究人员需要对其进行分析和评估。
这包括对转基因动物的基因表达水平、生理特性和遗传稳定性等进行评估，以确保转基因动物达到预期目标。
7. 应用和研究：转基因动物的应用和研究十分广泛。
它们可以用于药物研发、疾病模型的建立、农作物改良等领域。
通过对转基因动物的研究和应用，我们可以更好地理解基因的功能和调控机制，为人类的生活和健康提供更多的可能性。
转基因动物的制备流程可以概括为设定目标、基因选择、基因克隆、转基因技术、繁殖和筛选、分析和评估以及应用和研究等步骤。
通过这些步骤，研究人员可以通过基因工程技术对动物基因进行修改和调整，为人类社会的发展和进步提供有力支持。