abcam抗体中文使用说明大全

合集下载

β-Actin抗体-β-Actin内参抗体

β-Actin抗体-β-Actin内参抗体

β-Actin抗体推荐—高效价的Beta-Actin内参抗体Actin即肌动蛋白,是细胞的一种重要骨架蛋白。

Actin大致可分为六种,其中四种是不同肌肉组织特异性的,其余两种广泛分布于各种组织中,包括β-actin和γ-non-muscle actin。

β-actin作为内参是得到了公认的,这是针对大多数组织和细胞来说的,它广泛分布于细胞浆内,表达量非常丰富,其含量占所有细胞总蛋白的50%。

但是在一些少量特殊的情况下,如脂肪组织或细胞内,β-Actin的表达量就很少。

β-actin由375个氨基酸组成,分子量大小为42-43kDa左右。

如何选择合适的β-Actin抗体?内参抗体虽然选择较多,但是也需要遵循一定的原则,并契合实际的应用要求。

首先,我们需要考虑目的蛋白的大小,我们推荐内参要与检测的目的蛋白的分子量最好相差5KD以上,因此你需要根据你目的检测蛋白的分子量来选择合适的内参,由于β-Actin的检测分子量大约在42kD,因此该内参抗体不是很适合用于检测38kD-48kD大小目标蛋白的WB实验中。

另外,虽然β-Actin是最合适的内参抗体之一,但是在某些条件下,一些因素也会导致样品间β-Actin含量的变化。

特别需要注意的是,在脂肪组织里,β-Actin的表达量非常低,不适合作为内参。

很耐用,质量也很稳定,购买后放了一年了,拿出来用效价还是很高,后来买了他们大包装的,直接定制的5ml,很推荐。

——北京工业大学生命科学与生物工程学院一客户另外,我们还需要考虑自己的需要,特别是实验应用上的需要。

一般来说,应用类型越多,在使用过程中的选择余地就越大,而小鼠源的单克隆抗体一般在特异性、稳定性以及效价都要优于多克隆抗体。

另外,抗体的效价也是考察该抗体性价比的重要方面,也即相当于实际应用时的稀释比率。

一个效价高的100μl β-Actin抗体(假如其WB检测的稀释比率是1:5000,最终使用液相当于500ml),要比效价低的1ml的β-Actin抗体(假如WB检测的稀释比率是1:200,最终使用液相当于2ml)性价比更高。

(完整版)★抗肿瘤药物临床应用指导原则全文

(完整版)★抗肿瘤药物临床应用指导原则全文

抗肿瘤药物临床应用指导原则(征求意见稿)目录第一章抗肿瘤药物临床应用的基本原则 (4)一、权衡利弊,最大获益 (4)二、目的明确,治疗有序 (4)三、医患沟通,知情同意 (4)四、治疗适度,规范合理 (5)五、熟知病情,因人而异 (5)六、不良反应,谨慎处理 (5)七、临床试验,积极鼓励 (6)第二章抗肿瘤药物临床应用的管理 (7)一、抗肿瘤药物的管理 (7)(一)分级管理 (7)(二)使用管理 (8)(三)配置管理 (9)(四)人员资质管理 (9)二、落实与督查 (10)第三章各类抗肿瘤药物的适应证和注意事项 (11)一、细胞毒类药物 (11)(一)作用于DNA化学结构的药物 (11)(二)影响核酸合成的药物 (15)(三)作用于核酸转录的药物 (19)(四)作用于DNA复制的拓扑异构酶抑制剂 (20)(五)主要作用于有丝分裂M期干扰微管蛋白合成的药物 (21)(六)其他细胞毒药物 (23)二、激素类药物 (24)(一)芳香化酶抑制剂 (24)(二)雌激素和抗雌激素 (27)(三)雄激素与抗雄激素 (29)(四)孕激素 (31)(五)RH-LH激动剂/拮抗剂 (32)三、肿瘤分子靶向和生物治疗 (33)(一)生物反应调节剂 (33)(二)单克隆抗体 (36)(三)细胞分化诱导剂 (40)(四)细胞凋亡诱导剂 (41)(五)新生血管生成抑制剂 (42)(六)表皮生长因子受体抑制剂 (43)(七)基因治疗 (43)(八)多靶点小分子抑制剂 (44)四、肿瘤治疗辅助药物 (45)(一)造血生长因子 (45)(二)止吐药 (51)(三)镇痛药 (53)(四)抑制破骨细胞药 (55)(五)神经精神用药 (57)第四章各类肿瘤的治疗原则 (61)一、头颈部恶性肿瘤 (61)(一)鼻咽癌 (62)(二)鼻腔和鼻旁窦恶性肿瘤 (62)(三)喉癌 (63)(四)甲状腺癌 (66)二、胸部肿瘤 (67)(一)非小细胞肺癌 (67)(二)小细胞肺癌 (71)(三)胸腺肿瘤 (73)(四)恶性胸膜间皮瘤 (74)三、消化系统肿瘤 (75)(一)食管癌 (75)(二)贲门癌 (77)(三)胃癌 (77)(四)结直肠癌 (79)(五)胆管癌、胆囊癌 (82)(六)胰腺癌 (83)(七)肝癌 (85)四、乳腺癌 (86)(一)复发转移乳腺癌药物治疗 (87)(二)可手术乳腺癌术后抗肿瘤药物治疗 (89)五、泌尿系统、男生殖系统肿瘤 (91)(一)肾上腺肿瘤 (91)(二)肾脏肿瘤 (93)(三)尿路上皮癌 (94)(四)前列腺癌 (97)(五)阴茎肿瘤 (100)(六)睾丸肿瘤 (101)六、妇科肿瘤 (103)(一)宫颈癌 (103)(二)卵巢癌 (105)(三)子宫内膜癌 (108)(四)外阴癌 (110)(五)阴道癌 (112)(六)妊娠滋养细胞肿瘤 (113)七、血液淋巴系统肿瘤 (116)(一)白血病 (116)(二)恶性淋巴瘤 (120)(三)多发性骨髓瘤 (140)八、颅脑肿瘤 (142)(一)胶质瘤 (142)(二)髓母细胞瘤 (145)(三)脑转移瘤 (147)(四)中枢神经系统淋巴瘤 (149)(五)颅内生殖细胞瘤 (151)(六)颈静脉球瘤 (153)(七)垂体腺瘤 (155)九、原发恶性骨与软组织肿瘤 (159)(一)骨肉瘤 (159)(二)尤文氏肉瘤 (164)(三)软组织肉瘤 (166)《抗肿瘤药物临床应用指导原则》编审专家名单 (167)第一章抗肿瘤药物临床应用的基本原则正确合理地应用抗肿瘤药物是提高肿瘤患者生存率和生活质量,降低死亡率、复发率和药物不良反应发生率的重要手段,是肿瘤综合治疗的重要组成部分。

原位杂交蛋白酶abc型的原理_解释说明以及概述

原位杂交蛋白酶abc型的原理_解释说明以及概述

原位杂交蛋白酶abc型的原理解释说明以及概述1. 引言1.1 概述原位杂交蛋白酶ABC型(ATP-binding cassette transporter)是一种广泛存在于生物体细胞内的重要转运系统。

该转运系统通过利用化学能量(ATP)驱动,进行底物的跨膜运输,并在维持细胞内稳态和应对环境变化中扮演着重要角色。

本文将详细介绍原位杂交蛋白酶ABC型的工作原理、其在生物学中的应用以及展望其未来的发展方向。

1.2 文章结构本文共分为5个部分,具体内容包括引言、原位杂交蛋白酶ABC型的原理、解释说明原位杂交蛋白酶ABC型的工作原理、概述其在生物学中的应用以及结论。

下面将逐一介绍每个部分内容。

1.3 目的本文旨在深入了解并全面阐述原位杂交蛋白酶ABC型的工作原理,探讨其在生化研究和疾病诊断治疗等领域中的应用价值,并对该领域未来发展方向做出展望。

通过本文对原位杂交蛋白酶ABC型的全面解析,旨在促进相关学科领域的研究进展,并为实际应用提供科学依据。

以上是“1. 引言”部分的详细内容,对于文章大纲中其他部分的详细内容可以参考指定的目录。

2. 原位杂交蛋白酶abc型的原理2.1 ABC转运系统介绍ABC转运系统是一种广泛存在于生物界的重要蛋白质家族,包括ABC输入通道、ABC输出通道和ABC导致蛋白(ATP结合盒)三个主要部分。

其中,ABC输入通道由多个转录子编码的蛋白质组成,主要功能是将底物从胞外传输到细胞内。

ABC输出通道也由多个蛋白质组成,其作用是将底物从细胞内排出。

ABC导致蛋白是整个系统的“引擎”,通过ATP酶活性提供能量,并驱动底物的转运。

2.2 ABC转运系统的组成与功能ABC转运系统由多个不同类型的蛋白质组成。

每种类型的蛋白质在系统中扮演着特定的角色。

例如,输入通道中主要包括底物结合蛋白和跨膜导管蛋白;输出通道则涵盖了底物排出途径和有助于形成稳定复合体的辅助因子。

这些不同组分之间通过相互作用形成复杂而高效的工作系统。

抗体选择指南,抗体保存指南,抗体使用说明书样本

抗体选择指南,抗体保存指南,抗体使用说明书样本

抗体选择指南抗体保存指南抗体说明书样本一抗体选择指南:检测任何目的靶蛋白都有不止一种抗体可供选择,为缩小抗体的选择范围选中合适的抗体,需要考虑如下几种因素:1. 分析或应用的类型2. 样本蛋白的结构性质3. 样本的种属4. 抗体宿主的种类5. 抗体的标记和检测1分析试验的应用类型一般抗体说明书都列出该抗体经试验验证过适用于何种分析类型,如:可以应用于WB IHC ICC ELASA分析等,如果抗体说明书没有提及的应用类型,并不意味着该抗体不适用于此种分析应用类型,而仅是说明尚未经过此种分析试验验证,如果抗体不适用某些分析试验,则会在抗体说明书上标注出来不适于某分析试验。

2 样本蛋白的结构性质了解样本蛋白的结构性质有助于选择最合适的抗体,至少两方面因素需要考虑(1)..待测样本蛋白的结构域:抗体是由各种不同免疫原免疫宿主而制备得来,其中的免疫原包括:全长蛋白、蛋白片断、多肽、全有机体(如:细菌)或细胞,抗体说明书一般都有免疫原的描述,如果打算检测的是蛋白片断或一种特殊的同型物或蛋白全长的某一区域,则必须选择用含此片段域的免疫原制备出的抗体。

如果打算用FACS流式检测活细胞的表面蛋白,则需要选择含该表面蛋白的胞外域来免疫制备的抗体。

(2)样本的提取或处理过程:某些抗体要求样本经过某些特殊处理,例如:许多抗体只识别还原和变性的、表位已暴露不受二级四级结构阻碍的蛋白样本,另一方面,某些抗体仅识别天然折叠状态的蛋白。

当选择免疫组化的抗体时,应注意某些抗体只识别未固定的冷冻的组织,而另一些抗体则适用于无需抗原修复解交联步聚的甲醛固定石蜡包埋的组织,这些都会在抗体说明书上应用部分标示出来3 样本的物种应选择物种相同或有交叉反应的抗体,抗体可能与不同物种的同种靶蛋白有交叉反应,因其氨基酸序列同源性较高,如果样本的种类未列入抗体说明书上的交叉反应种属表中,并不意味着该抗体不适用于检测该物种的蛋白,而只是表示该物种尚未用此抗体检测验证过,应通过序列比对的方法来预测交叉反应,可应用Expasy 和 NCBI BLAST来进行不同物种蛋白同源性比对。

Abcam抗体产品保存指南

Abcam抗体产品保存指南

Abcam产品保存指南抗体保存得当与否,直接决定了抗体的活性和使用效果!如果抗体保存得当,大部分抗体活性都可以维持数月甚至数年。

本指南以Abcam抗体保存方法为主,同样也可以应用到其他绝大部分公司的抗体产品!请谨记!无论何时请按照说明书推荐的保存条件正确保存抗体!1. 收到抗体后请务必在12000rpm离心1-5分钟后再打开管盖进行分装和保存(如果抗体体积小于50ul,请延长离心时间至5分钟,以保证全部抗体均离心下来)!Abcam的抗体使用非常特殊的储存管,只有在12000rpm离心1-5分钟才能将附着在管壁或盖内的抗体全部离心下来。

即使是在10000rpm离心也会导致离心不完全,导致出现抗体的量不足的现象!2. 对于Abcam大部分抗体,比较合适的保存方式是分装后保存在 -20℃ or-80℃。

o对绝大多数抗体来说,保存在-20℃是完全足够了。

没有任何证据显示保存在-80℃会有更多的好处!o分装可以最大程度的降低反复冻融对抗体活性的损害,同时也降低了由于多次从同一管中吸取抗体造成的污染可能性。

o分装的量以一次实验用完为好,最少不能少于10ul每份。

因为分装体积越小,抗体的浓度越可能会受到蒸发以及管壁吸附的影响o复融后的分装抗体如果一次用不完,将剩余母液保存在4℃,避免再冻起来!o抗体工作液应该当天配制当天用完,在4℃尽量不要超过1天。

o绝对避免将抗体保存在自动除霜冰箱中。

尽量将抗体保存在冰箱里层,而不是门上3. 大部分抗体收到后4℃短暂保存1-2周对抗体活性是没有影响的。

如果抗体很快(1-2周)会使用,推荐在4℃保存,这是为了避免反复冻融对抗体活性的损害。

如果要长期保存则最好是在-20℃ or -80℃。

最关键的一点是要根据说明书推荐的方式来正确的保存抗体!但是,腹水形式的产品请在收到后立即冻起来!因为该类产品含有大量的蛋白酶,长期在4oC保存会导致抗体的降解!4. 大部分抗体的运输条件:一般的运输过程需要1-2周的时间,所以是在4℃的条件下来完成的。

His抗体实验大全

His抗体实验大全

His抗体推荐—Abbkine全系列His标签抗体His标签是由6个组氨酸(His-His-His-His-His-His)组成的短肽,专门设计用于重组蛋白质的吸附纯化。

由于分子量较小,并且较容易分离和纯化,His-tag 融合标签与其他标签相比有很多明显优势, 是目前用于纯化的融合标签中使用最为广泛的一种。

His 抗体可以用于检测和His标签融合表达蛋白的表达、细胞内定位,以及纯化、定性或定量检测His融合表达蛋白等。

然而,目前商品化His-tag的单克隆抗体(mAb)种类不多, 且价格也十分昂贵。

如何选择合适的His标签抗体?我们在选择His抗体时,主要根据自己的需要,特别是实验应用上的需要。

其中需要考虑的因素包括了,His抗体的应用检测类型、His抗体的克隆性及制备来源等。

比如该His抗体是否能用于Western Bloting的检测?是否可以用于免疫荧光IF实验?我是否需要特异性更好的单克隆His标签抗体?我是否需要考虑下是选择小鼠来源的还是兔来源的His抗体?之前有使用SSS(一家著名品牌的His标签抗体,名称隐去)的His标签抗体,一开始还好,过了半年后,就发现产品质量不稳定,做IF实验不行了,后来试用了下Abbkine的,IF结果很漂亮,顺带还买了他们的DyLight荧光二抗——广州南方医科大学一客户一般来说,应用类型越多,在使用过程中的选择余地就越大,而小鼠源的单克隆抗体一般在特异性、稳定性以及效价都要优于多克隆抗体。

另外,抗体的效价也是考察该抗体性价比的重要方面,也即相当于实际应用时的稀释比率。

一个效价高的100μl His 抗体(假如其WB检测的稀释比率是1:5,000,最终使用液相当于500ml),要比效价低的1ml的His抗体(假如WB检测的稀释比率是1:200,最终使用液相当于2ml)性价比更高。

因此在选择抗体的时候,不但需要考虑抗体的量,还需要考虑抗体的效价,即不同应用的建议稀释比率。

Protein A G MagBeads 技术手册说明书

Protein A G MagBeads 技术手册说明书

Protein A/G MagBeads Cat. No. L00277Technical Manual No. TM0249 Version 08212013 Index1.Product Description2. Instruction For Use3.Troubleshooting4. General Information1.Product Description1.1Intended UseGenScript Protein A/G MagBeads are ideal for small‐scale antibody purification and immunoprecipitation (IP) of proteins, protein complexes or other antigens.1.2PrincipleThe sample containing antibody is added to the Protein A/G MagBeads. The antibody will bind to beads during a short incubation. Then the beads‐bound antibody may be eluted from the beads by using a magnetic separation rack, or used for immunoprecipitation (IP). A cross‐linking procedure may be needed before IP to prevent co‐elution of the primary antibody. Magnetic separation eliminates the changes of micro tubes, minimizes the loss of sample and removes excessive steps of traditional centrifugation method.1.3Description of MaterialMaterial SuppliedGenScript Protein A/G MagBeads are super paramagnetic beads of average 40 μm in diameter, covalently coated with recombinant Protein A/G. The beads are supplied as 25% slurry in phosphate buffered saline (PBS), pH 7.4, containing 20% ethanol. The Protein A/G MagBeads have a binding capacity of more than 10 mg Goat IgG per 1 ml settled beads (e.g. 4 ml 25% slurry).Protein A/G is a genetically engineered protein (MW≈43 kDa) that combines the IgG binding sites of both Protein A and Protein G. 6×His‐tag was attached to its N‐terminal to facilitate the purification. The secreted Protein A/G contains four Fc‐binding domains from Protein A and two from Protein G, making it a more universal tool to bind and purify immunoglobulins.Cat. No. L00277 Size: 2 ml.Additional Material RequiredMixing/Rotation DeviceMagnetic Separation RackTest tubes and pipettesBuffers and solutions (see below)Additional Buffers NeededBinding/Wash Buffer: 20 mM Na2HPO4, 0.15 M NaCl, pH 7.0Elution Buffer: 0.1 M glycine, pH 2‐3Neutralization Buffer: 1 M Tris, pH 8.51×SDS Sample Buffer: 62.5 mM Tris‐HCl (pH 6.8 at 25°C), 2% w/v SDS, 10% glycerol, 50 mM DTT,0.01% w/v bromophenol blue2.Instruction For UseThe protocol uses 100 μl Protein A/G MagBeads, this may be scaled up or down accordingly.2.1Preparation of the MagBeadspletely resuspend the beads by shaking or vortexing the vial.2.Transfer 100 μl beads into a clean tube.3.Place the tube on a magnetic separation rack to collect the beads. Remove and discard the supernatant.4.Add 1 ml Binding/Wash Buffer to the tube and invert the tube several times to mix. Use the magnetic separationrack to collect the beads and discard the supernatant. Repeat this step twice.2.2Separation of Target IgG1.Resuspend the beads in 100 μl Binding/Wash Buffer.2.Add the sample containing target IgG to the tube and gently invert the tube to mix.3.Incubate the tube at room temperature with mixing (on a shaker or rotator) for 30 – 60 minutes.e the magnetic separation rack to collect the beads and discard the supernatant. If necessary, keep thesupernatant for analysis.5.Add 1 ml Binding/Wash Buffer to the tube and mix well, use the magnetic separation rack to collect the beads anddiscard the supernatant. Repeat the wash step three more times.6.Proceed to elution of isolated IgG (Section 2.3).2.3Elution of Isolated IgG1.Add 100 μl Elution Buffer to the tube and mix well. Incubate for five minutes at room temperature with occasionalmixing.e the magnetic separation rack to collect the beads and transfer the supernatant that contains the eluted IgG intoa clean tube.3.Repeat Step 1 and 2 twice.4.Add 10 μl of Neutralization Buffer to each 100 μl eluate to neutralize the pH. If needed, perform a buffer exchangeby dialysis or desalting.2.4ImmunoprecipitationBound IgG will be co‐eluted along with the target when using elution methods. If the presence of IgG does not disturb desired detection system, go directly to section 2.4.2 below. For applications where co‐elution of the IgG is not desired, the primary IgG can be cross‐linked to the Protein A/G MagBeads as described in section 2.4.1 below.2.4.1Cross‐linking IgG to the Beads1.Add 1 ml 0.2 M triethanolamine, pH 8.2 to the Protein A/G MagBeads with immobilised IgG. Wash twice using themagnetic separation rack with 0.2 M triethanolamine, pH 8.2 as the washing buffer.2.Resuspend the beads in 1 ml of 20 mM dimetyl pimelimidate dihydrochloride (DMP) in 0.2 M triethanolamine, pH 8.2(5.4 mg DMP/ml buffer). This cross‐linking solution must be prepared freshly.3.Incubate the beads with rotational mixing for 30 minutes at room temperature. Use the magnetic separation rack tocollect the beads and discard the supernatant.4.Resuspend the beads in 1 ml of 50 mM Tris, pH 7.5 to stop the reaction and incubate for 15 minutes at roomtemperature with rotational mixing.e the magnetic separation rack to collect the beads and discard the supernatant.6.Wash the cross‐linked beads three times with 1 ml PBS, pH7.4.2.4.2Binding Antigen to the IgG Cross‐linked Beads1.Add sample containing target antigen to the beads. For a 100 kD protein, use a volume containing approximate 25 µgtarget antigen/ml beads to assure an excess of antigen. If dilution of antigen is necessary, PBS or 0.1 M phosphate buffer (pH 7‐8) can be used as dilution buffer.2.Incubate with tilting and rotation for one hour at room temperature.3.Place the tube on the magnetic separation rack for 2 minutes to collect the IgG‐coated Beads‐target complex. Forviscous samples, double the time on the rack. Discard the supernatant.4.Wash the beads 3 times using 1 ml PBS.2.4.3Elution of Target ProteinA.Denaturing elution1.Place the tube from section2.4.2 on the magnetic separation rack to collect the beads and discard the supernatant.2.Add 100 µl 1XSDS Sample Buffer to the tube and mix well.3.Heat the tube at 100°C for five minutes.e the magnetic separation rack to collect the beads and transfer the supernatant containing desired sample into anew tube.5.Analyze the sample by SDS‐PAGE followed by Western blot analysis.B.Non‐denaturing elution1.Place the tube from section2.4.2 on the magnetic separation rack to collect the beads and discard the supernatant.2.Add 100 µl Elution Buffer to the tube and mix well. Incubate for five minutes at room temperature with occasionalmixing.e the magnetic separation rack to collect the beads and transfer the supernatant into a new tube.4.Repeat Step 2 and 3 twice.5.Add 10 μl Neutralization Buffer to each 100 μl of eluate to neutralize the pH.3.TroubleshootingReview the information below to troubleshoot your experiments using the GenScript Protein A/G MagBeads. Problem Possible Cause SolutionThe beads are difficult toimmobilize using the magneticseparation rack.Too many beads are used.Decrease the volume of MagBeadssuspension.A considerable amount of samplehas been added, but very fewspecific antibody of interest isdetected.The antibody of interest is at verylow concentration.Use a serum‐free medium for cellsupernatant samples.Affinity‐purify the antibody using itsspecific antigen coupled to anaffinity supporting material.The antibody of interest is purified,but it is degraded (as determined byloss of function in downstreamassay).The antibody is sensitive to low‐pHelution buffer.The downstream application issensitive to the neutralized elutionbuffer.Try another elution reagent, such as3.5 M MgCl2, 10 mM phosphate, pH7.2.Desalt or dialyze the eluted sampleinto a suitable buffer.No antibody is detected in anyeluate.The antibody in the sample cannotbind to Protein A/G.Try GenScript Protein A MagBeadsor Protein G MagBeads.4.General Information4.1Storage and StabilityThis product is stable until the expiration date stated on the COA, when stored unopened at 2–8°C. Do not freeze the product. Keep the MagBeads in liquid suspension during storage and all handling steps. Drying will cause loss of binding capacity and result in reduced performance. Resuspend the beads well before use. Be careful to avoid bacterial/fungal contamination.4.2Technical SupportPlease contact GenScript for further technical information (see contact details). Certificate of Analysis/Compliance is available upon request. The latest revision of the package insert/instructions for use is available on .4.3Warning and LimitationsThis product is for research use only. Not intended for any animal or human therapeutic or diagnostic use unless otherwise stated. This product contains 20 % EtOH as a preservative. Flammable liquid and vapor. Flash point 38°C. R‐10 flammable. Material Safety Data Sheet (MSDS) is available at .4.4Related MagBeads ProductsCat. No. Product NameL00273 Protein A MagBeadsL00274 Protein G MagBeadsL00295 Ni‐Charged MagBeadsL00327 Glutathione MagBeadsL00275 Mouse Anti‐His mAb MagBeadsL00336 Mouse Anti‐GST mAb MagBeadsGenScript USA Inc.860 Centennial Ave.,Piscataway, NJ 08854Toll‐Free: 1‐877‐436‐7274Tel: 1‐732‐885‐9188, Fax: 1‐732‐210‐0262Email: *********************Web: 。

Bactobac表达系统中文版说明书

Bactobac表达系统中文版说明书

Bac-to-Bac杆状病毒表达系统试剂盒内容物:Introduction:Overview:Bac-to-Bac杆状病毒表达系统提供快速有效的方式产生重组杆状病毒。

此方式基于让已经转入杆状病的质粒(杆粒)的位点特意转座子的表达框的质粒在Ecoli中扩增。

Bac-to-Bac杆状病毒表达系统要紧包括:*pFastBac捐献质粒的选择,它要能够产生包括目的位点的表达结构,那个目的基因的产生被杆状病毒特意位点启动子操纵。

*一个Ecoli宿主,DH10Bac,包括杆状病毒质粒(杆粒)和辅助质粒,在转染pFastBac 表达结构后能够产生重组杆粒。

*一个操纵表达的质粒,包括Gus和/或CAT基因,以便在感染细胞后产生重组杆状病毒,表达β-葡萄糖酸酐酶和/或氯霉素乙酰转移酶。

Bac-to-Bac表达系统的优势:利用那个系统产生重组杆状病毒较传统的同源重组有以下优势:*与利用同源重组产生重组杆状病毒所需的4-6周相较,分辨纯化重组病毒少于两周*减少了从斑点挑选重组病毒DNA所包括亲缘和非重组病毒的概率*能够快速同时进行大量重组,适合表达功能性研究的蛋白选择pFastBac菌体(Vector):大量的pFastBac菌体都适于进行Bac-to-Bac表达系统。

选择关于你的需要最适合的菌体。

指南用途:指南提供了一个关于Bac-to-Bac表达系统的概述,并对以下提供指导:1、克隆目的基因到pFastBac TM供体质粒的选择2、转化pFastBac TM 结构到最高效的DH10Bac TM产生重组质粒3、转染重组质粒DNA到昆虫细胞产生重组杆状病毒4、扩增滴定(Amplify and titer)杆状病毒株,利用病毒株感染昆虫细胞表达目的重组蛋白重要的:Bac-to-Bac杆状病毒表达系统是用来帮忙你产生重组杆状病毒,在昆虫细胞中进行高水平表达目的基因的系统。

虽然他能够帮忙你很容易的产生杆状病毒表达你的重组蛋白,可是利用这系统更偏向于有杆状病毒生物学和昆虫表达背景的利用者。

  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
相关文档
最新文档