高效液相色谱内标法测定银杏叶制品中的总黄酮含量
至刻度, 摇匀。精密量取 5ml, 置 10ml 量瓶中, 加内
标贮备液 2. 0ml, 加甲醇至刻度, 摇匀。取 15Ll 注入 色谱液, 记录色谱, 按下列方法计算结果[ 2] 。
( 1) 以色谱图中槲皮素、山萘酚、异鼠李素 3 种
主要苷元峰面积之和代入回归方程, 求得样品苷元
相当于槲皮素的浓度( C ) 。
4讨论
4. 1 本实验中电泳温度、电解缓冲液盐浓度、电压 等条件对喜树碱及 OPT 的分离无明显影响, 只是影 响出峰时间。电极缓冲液盐浓度越低、电压越高、分 离时间越短。 4. 2 OPT 含一内酯环结构, 因注射液的制备 工艺 中, 须碱化使内酯环打开溶于水, 故 OPT 注射液为 开环状态。经实验, 将注射液 pH 调为 2 时, 可使环 闭合完全, 其紫外吸收波长、吸收度及迁移时间与加 碱开环前一致。 4. 3 OPT 开环后稳定性降低, 遇光易分解[ 3] , 测定 时须避光。
x (%)
101. 9
RSD (%)
3. 23
2. 4 样品的测定和结果计算 精密量取银杏叶口 服液 2. 0ml, 或精 密称取银杏 叶片( 粉) 约 50mg, 置 100ml 锥形烧瓶中, 加 25% 盐酸 5ml, 甲醇 30ml, 于水
浴回流 1h, 放冷。将溶液高效液相色谱仪( 日本岛津制作所) 。 槲皮素对照品( 中国药品生物制品鉴定所) 。甲 醇为光谱纯; 磷酸为优级纯, 盐酸、水杨酸为分析纯。 梵达银杏叶口服液( 海军青岛制剂中心与梵达生物 技术有限责任公司, 批号 980316、980401) ; 银杏叶胶 囊( 海军青岛制剂中心与经天生物技术发展有限公 司, 批号 980518) ; 经天银杏叶精( 经天生物技术发展 有限公司, 批号 980425) ; 天保宁片( 浙江康恩贝集团 制药有限公司, 批号 19960705) ; 银可络片( 深圳海王 药业有限公司, 批号 951001) 。 对照品溶液 精密称取槲皮素对照品适量, 用 甲醇制成 200Lg#ml- 1 浓度的溶液。本品易分解, 应 新鲜配制。
表 1 槲皮素回收率测定结果( n = 3)
Tab 1 Recovery test of quercetin( n = 3)
编号
1 2 3
加入量
( mg) 0. 07965 0. 1593 0. 2390
实测量
( mg) 0. 08377 0. 1648 0. 2321
回收率
(%) 105. 2 103. 4 97. 1
水解时间( h)
0. 5 1. 0 1. 5 2. 0
含量( mg#ml- 1) 2. 45 2. 71 2. 55 2. 50
3. 3 3 种测定法的结果比较 目前, 国内多以络合 - 分光光度法测定 EGB 制品中黄酮的含量[ 6] , 但误 差较大。近年来, HPLC 测定法研究较多, 有以芦丁 为外标物, 以出峰总面积计算黄酮含量[ 7] 。该法亦 存在一定误差, 除非将每一种黄酮化合物分离后, 各 自定量进行加和得总黄铜量, 否则误差也较大, 但这 必须有每一种黄酮的对照品才能做到。较好的方法 是以槲皮素为外标物, 先将 EGB 制品加 酸水解, 后 以 HPLC 法测定其黄酮苷元含量, 再推算出总黄酮 量含量[ 3] 。作者在此基础上进一步研究了以水杨酸 为内标物, 进行测定, 结果与外标法近似, 但重复性 更好, 精确度高, 更便利了测定的操作。内标法、外 标法及分光光度法测定, 结果见表 4。
解放军药学学报 第 18 卷 第 1 期 我院抗菌药物用药分析
班春林 # 53 #
的报道不一( 从 0. 5~ 2h) [ 3~ 5] , 作者以梵达银杏叶口 服液实验证实, 水解时间与文献报道基本一致, 本文 选择 1. 0h 为宜, 结果见表 3。
表 3 梵达银杏叶口服液水解时间与含量的关系( n = 3) Tab 3 The relation of determination content and hydrolization time( n = 3)
4. 4 本实验应用毛细管区带电泳对 OPT 注射液进 行测定, 具有快速、柱效高、操作费用低廉等优点, 可 用于该药物的质量控制。
参考文献:
[ 1] 陈新谦, 金有豫. 新 编药物 学. 第 14 版 [ M ] . 北 京: 人 民卫生 出 版社, 1997. 521~ 522
[ 2] 滕南雁, 蒋及年. HPLC 测定羟基喜树碱及其注 射液的含量[ J ] . 中国药学杂志, 1997, 32( 9) : 552
( 2) 液体制品
总黄酮( mg#ml- 1) =
c @ a @ 2. 51 1000 @ b
( 3) 固体制品
总黄酮( mg#ml- 1) =
c @ a @ 2. 51 @ d 1000 @ e
a- 稀释倍数; b- 取样 ml 数; c - 样品苷元相
当于槲皮素的浓度 Lg#ml- 1; e- 取样重量; d- 制品
x
RSD ( % )
1
2. 76
2
2. 71
2. 71
1. 63
3
2. 67
3 讨论
3. 1 测定波长及内标物的选择 银杏叶黄酮主要 苷元槲皮素、山萘酚 及异鼠李素在 360nm 及 254nm 均有最大吸收, 作者比较了多种内标物, 发现水杨酸 在本文色谱条件下, t R= 7, 不与提取物中黄酮苷元 及杂质峰重叠, 且峰形甚佳, 不拖尾, 故测定波长选 定在 254nm, 并以水杨酸为内标物, 见图 1。
片重或胶囊粒重。
2. 5 方法重现性实验 按样品测定方法对同一样 品( 1 号样品) 3 种取用量, 进行测定, 结果见表 2。
表 2 总黄酮的方法重现性实验结果( n = 3) Tab 2 Resul ts of method reproductivity( n = 3)
取用量( ml ) 测得值( mg#ml - 1)
A= 0. 762 9 C - 0. 304 4, r = 0. 999 97。 浓度在 2~ 40Lg#ml- 1范围内线性关系良好。 2. 3 回收率试验 取梵达银杏叶口服液 2ml 3 份, 置 100ml 锥 形 烧 瓶, 分 别 加 入 槲 皮 素 对 照 品 0. 07965、0. 1593、0. 2390mg, 按样品测定法处理并测定 槲皮素的回收率, 结果见表 1。
Determination of the Flavonoids form Ginkgo Biloba Extact by HPLC with lnternal Standard
FANG Z-i Ji, XU Z-i Ming, ZHU Xiu-Mei, WANG Dong- Dong ( The 401st Hospital of PLA, Qingdao 266071 Shandong)
¹ 作者简介: 方子季( 1935- ) , 男, 湖北监利县人, 主任药师。研究方向: 现主要从事药物制剂质量标准的研究工作。Tel: 0532- 5813585
# 52 # 解放军药学学报 2002 年 2 月 第 18 卷 第 1 期
Pharm J Chin PLA Vol 18 N o 1 Feb 2002
银杏叶提取物( Extract Ginkgo Biloba, EGB) 制品 用于治疗冠心病、心绞痛、高血压、支气管哮喘及脑 血管病等有较好疗效[ 1] , 国内外已有大量商品制剂 投入市场。现在国内多采用络合- 分光光度法测定 该制品总黄酮含量。近年来, 已有高效液相色谱法
直接测定, 以及高效液相色谱法测定黄酮水解后生 成的 3 种主要苷元来测算黄酮含量的报告。作者在 此基础上通过 实验建立了以水杨酸为 内标物测定 EGB 制品中黄酮总量的 HPLC 方法, 获得满意的效 果。该方法更易于操作, 重现性好, 准确度高。
解放军药学学报 第 18 卷 第 1 期 高效液相色谱内标法测定银杏叶制品中的总黄酮含量
文章编号: 1008- 9926( 2002) 01- 0051- 03 中图分类号: R927. 2 文献标识码: A
高效液相色谱内标法测定银杏叶制品中的总黄酮含量
方子季¹ , 许自明, 朱秀美, 王冬冬
( 中国人民解放军第 401 医院 山东 青岛 266071)
A 对照品 B 梵达口服液 C 银杏叶胶囊 D 梵达口服液( 加内标) 1 内标 2 槲皮素 3 山萘酚 4 异鼠李素 图 1 EGB 制品水解物高效液相色谱图 Fig 1 HPLC Chromatograms of EGB hydrolysate
3. 2 水解时间的选择 本法将样品先加酸水解后 测定其苷元, 再推算黄酮的含量。文献对水解时间
方子季 # 51 #
摘 要: 目的 建立以高效液相色谱内标法测定银杏叶 制品中总黄 酮含量的 新方法。方 法 以 水杨酸 为内标 物, 甲 醇-0. 4% 磷酸( 1B1) 为流动相, 于 254nm 处检测。结果 在 2~ 40Lg#ml- 1范围内呈良好的线 性关系, RSD 为 3. 23% , 方法回收率 为 101. 9% , 最低检测浓度 2Lg# ml- 1。结论 此种方法准 确可靠, 测定灵敏度高, 操作便利适用于各种银杏叶制品中黄酮的含量测定。 关键词: 银杏叶制品; 总黄酮;HPLC 内标法
银杏叶中黄酮含量的测定和提取方法
银杏叶中黄酮含量的测定和提取方法银杏叶中的黄酮是人体所需的天然植物化合物之一，对抗自由基、抗氧化和保护心血管系统都具有重要作用。
因此，测定银杏叶中黄酮的含量和提取方法十分关键。
1. 超高效液相色谱法超高效液相色谱法是近年来发展起来的一种快速高效的分析方法。
其测定过程简单，准确度高，适用于针对单一化合物的分析，并且可以测定微量的物质。
具体操作流程：1）制备标准溶液：取适量黄酮标准品精确称量，加入适量甲醇进行溶解制成一定浓度的标准溶液。
2）样品的制备：将干燥的银杏叶粉末称量，加入适量甲醇超声波萃取，旋转蒸发至干燥，再用甲醇重溶并过滤。
3）样品的分析：取适量标准溶液和待测样品，进行配制后注入超高效液相色谱分析仪，设置分离条件，得到色谱图，通过峰面积进行定量分析。
2. 比色法比色法根据化合物吸收或散射光的差异来确定化合物浓度的方法。
黄酮化合物在紫外光区有吸收，所以可以根据吸收的程度来测定其浓度。
1）样品的制备：同上述超高效液相色谱法。
2）制备标准曲线：取不同浓度的黄酮标准品制成一系列标准溶液，根据标准溶液的吸光度和浓度数据绘制标准曲线。
3）样品的分析：取待测样品和标准溶液，分别用1% HCL与乙醇混合后置于比色计中测量吸光度，根据标准曲线计算待测样品的黄酮含量。
1. 超声波法超声波萃取是一种快速高效的提取方法，采用高强度的超声波能量来破坏植物细胞壁，增加物质渗透性和提取量。
1）将银杏叶粉末加入适量甲醇中，放入超声波水浴中超声处理20分钟。
2）离心去渣，上清液浓缩至一定体积。
3）重复以上步骤，将各次提取得到的提取液混合。
2. 疏水性液液萃取法疏水性液液萃取法是一种基于化学原理的提取方法，采用低极性的有机溶剂来提取银杏叶中的黄酮化合物。
1）将银杏叶粉末加入适量的有机溶剂（如醚类、苯类等），放入摇床中搅拌一定时间。
综上所述，银杏叶中黄酮含量的测定和提取方法可根据实际需求选择合适的方法组合进行操作。
在实验过程中，需要注意实验室安全、环境保护以及样品保存等方面的问题。
银杏叶提取物中黄酮类成分的高效液相色谱分析
（ｈ Ｎ ｔｎｌ ｉ ｎ Ｃｎ ｅ Ｃｉ ｃ Ｐ ａｍ ｃ ｏｙ Ｔ ｅ ｉ ａ Ｔａ ｉ ｅｔ ｏ ｌ ｉ ｌ ｒ ａｏ ｇ ， ａｏ ｒ ｎ ｇ ｒ ｆ ｎ ａ ｈ ｌ Ｈｕａ Ｍｅｉ ｌ ｖ ｓｙ Ｃ ａｇｈ ， １０８ ｎｎ ｄｃ Ｕ ｉ ｒ ｔ， ｈｎｓ ４０７） ａ ｎ ｅｉ ａ Ｑ ａｔａｖ ｒｖｒ ｄ ｈｓ ｈ ｈ ｆ ｍ ｎｅ ｉｃｒｍ ｔ ｒ ｈ ｍ ｔ ｄ ｂｅ ｄｖｌ ｅ ｆｒ ｕｎｉｔｅ ｅ ｅ－ ａ ｉ ｐｒ ｒ ａｃ ｌｕ ｈｏ ａ ｇａ ｉ ｅ ｏ ｈｓ ｎ ｅ ｐｄ ｔｅ ｔ ｉ ｅ ｓ ｐ ｅ ｅ ｏ ｇ ｉ ｄ ｑ ｏ ｐ ｃ ｈ ａ ｅ ｅ ｏ ｏ ｈ ｓ ａａｏ ａｄ ｅ ｉ ｔ ｎ ｔｅ ｏｏ ｓ ｎ ｉｔｅ ｒｃ ｏ ｔｅ ｅ ｏｇ ｋｏ ｂ Ｌ Ｅ ｂ． ｅ ｒｔｎ ｄｔ ｍｎ ｉ ｏ ｈ ｆｖｎｉ ｆ ｄ ｈ ｅｔ ｔ ｆ ｌ ｖｓ ｉ ｇ ｂｏａ Ｇ ） ｐ ｉ ｎ ｅ ｒ ａ ｏ ｆ ｌ ａ ｄ ｏ ｎ ｘ ａ ｓ ｈ ｅ ｕ ａ ｆ ｎ ｉ ｌ ．（ Ｐｏｅｕ ｉ ｌ ｅ ｈｄｏ ｓ ｏ ｔ ｆｖｎｉ ａｄ ｓ ｕｎ ｑａｔａｖ ｃｒｍ ｔｇ ｐ ｉａｓ ｏ ｔｅ ｒ ｄｒ ｎ ｕ ｓ ｒ ｙｉ ｆ ｌ ｏｏ ｓ ｓｂｅ ｅｔ ｎｉｔ ｅ ｏ ａ ｒ ｈ ｓ ｙ ｈ ｏ－ ｃ ｅ ｄ ｙ ｌ ｓ ｈ ａ ｃ ｅ ｄ ｎ ｕ ｑ ｕ ｔｉ ｈ ｏ ａ ｃ ａ ｆ ｂ ｔ ｎｄ ｙｏｅ ｏ ａ ｃｌ ｎ ｈ ｔａｏ ０４ ｏｔｏｈ ｓｈｒ ａｉ （５ ４） ｅ ｅｔ Ｔ ｅ ｅ ａ ｅ ａｌ ｎｓ Ｃ８ ｍ ｗｔ ｍ ｈｎｌ ．％ ｈｐｏｐ ｏｃ ｄ ： ５ ａ ｌ ｎ． ｄｔ － ｉ ｇｃ ｎ １ ｏ ｕ ｉ ｅ － ｒ ｉ ｃ ５ ｓ ｕ ｈ ｅｃ
高效液相色谱法测定银曲胶囊中银杏总黄酮醇苷的含量-精品
高效液相色谱法测定银曲胶囊中银杏总黄酮醇苷的含量-精品2020-12-12【关键字】方法、条件、系统、良好、研究、关键、稳定、作用、关系、分析、凝聚、改善作者：顾燕刘萌张现涛邵文豪【摘要】目的银曲胶囊中银杏总黄酮醇苷的含量测定。
方法用高效液相色谱法（HPLC）和DAD紫外检测器测定银曲胶囊中总黄酮醇苷的含量。
结果槲皮素浓度在9.60～76.80 μg /ml，山柰素在7.33～58.62 μg /ml，异鼠李素在1.76～14.08 μg /ml之间浓度与峰面积呈良好的线性关系。
结论根据3批样品的检测结果，规定银曲胶囊中总黄酮醇苷的含量不低于6 mg/粒。
【关键词】银曲胶囊总黄酮醇苷高效液相色谱法Abstract：ObjectiveTo determine the total flavonoid glycosides in Yinqu Capsule．MethodsHPLC was adopted with DAD detection for content determination of the total flavonoid glycosides. ResultsThe concentration of quercetin between 9.60 to 76.80 μg/ml，kaempferol between 7.33 to 58.62 μ g / ml, isorhamnetin between 1.76 to 14.08 μ g / ml had a good linear relationship. ConclusionAccording to the results of three blocks ,the content of total flavonoid glycosides is not less than 6 mg per tablets.Key words：Yinqu capsule; The total flavonoid glycosides ; HPLC银曲胶囊是由红曲和银杏叶两味药材经加工提取后制成的复方制剂。
高效液相色谱内标法测定银杏叶制品中的总黄酮含量
２ ４ｉ Ａ ｘ ｒ ｏ ｍ ｔａｏ ａ ｄ ４ Ｄ ｏｐｏｉ ａｉ（ ： ）ｗ ｓｕ。 ａ ｍ ｂ ｅｐａｅ Ｒｅ ｌ ｔ ａ ｌ ｅｒ ｎｔ ５ ｒ ｍｉｕｅ ｆ ｅ ｎｌ ｎ ％ ｈｓｈｒ ｃ １ １ ａ ｓｄｓｅ ｉ ｈｓ ． ｓ ｔ Ｉ ｗ ｓ ｉ ａ ｅ ｍ． ｔ ｈ ０． ｃ ｄ ｌ ｕ ｓ ｎ ｉ ｈ
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直接测定 ， 以及高效 液相色谱法 测定黄酮水解后生 成的 ３ 种主要苷元来测算黄酮含量的报告。作者在 此基础上 通过 实验建 立了 以水杨酸为 内标物 测定 Ｅ Ｂ 品中黄酮 总量的 Ｈ Ｌ Ｇ 制 Ｐ Ｃ方法 ， 获得满 意的效
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高效液相色谱内标法测ห้องสมุดไป่ตู้银杏叶制品中的总黄酮含量
银杏叶中黄酮类成分及含量测定方法研究
银杏叶中黄酮类成分及含量测定方法研究
银杏叶中黄酮类成分及含量测定方法研究
一、研究背景
银杏叶是一种常见的中药原料，具有清热解毒、生津止渴、利尿消胀的功效，可用于治疗腹泻及痢疾等疾病。
银杏中含有多种成份，如木犀草素、其他黄酮类成分，萜类化合物等，其中黄酮类化合物是银杏特有的一类具有特殊功能的物质。
随着对中药中有效成分含量研究的深入，对银杏叶中黄酮类成分及含量测定分析方法的研究受到了众多研究者的高度重视。
二、银杏叶中黄酮类成分及含量测定方法研究
1. 红外光谱
红外光谱是一种快速、灵敏的分析方法，可以用来鉴定银杏叶中的黄酮类成分，并对其含量进行快速测定分析，但是其准确性受到样品稳定性等因素的限制。
2. 液相色谱
液相色谱可以用来鉴定银杏叶中的黄酮类成分，也可以对其含量进行准确的测定，且具有准确度高的优点。
3. 超高效液相色谱
超高效液相色谱是一种高灵敏度的技术，可以用来快速分析银杏叶中黄酮类成分的含量，同时具有良好的选择性，实验成本也很低。
4. 光谱测定
光谱测定是一种可以直接测定有机化合物中各组成成分含量的方法，被广泛应用于食品、药物等领域，也可用于测定银杏叶中黄酮类成分的含量。
三、结论
银杏叶中黄酮类成分及含量测定方法研究目前得到越来越多学者们的重视，红外光谱、液相色谱、超高效液相色谱、光谱测定等等方法都可以用来测定和分析银杏叶中黄酮类成分的含量，而且在可行性、灵敏度、选择性、结果准确率等方面也有良好的表现。
银杏叶片中总黄酮醇苷的含量测定
银杏叶片中总黄酮醇苷的含量测定银杏叶是一种重要的中药材，具有清热解毒、活血化瘀、增强免疫力等多种功效。
其中，银杏叶中的总黄酮醇苷是一种重要的活性成分，具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等多种生物活性。
因此，测定银杏叶中总黄酮醇苷的含量对于评价银杏叶的质量和药效具有重要意义。
一、实验原理总黄酮醇苷是一类多酚化合物，可以被还原成黄色产物。
在碱性条件下，总黄酮醇苷与钾醇溶液反应，生成黄色产物，其吸光度与总黄酮醇苷的含量成正比。
因此，可以通过比色法测定银杏叶中总黄酮醇苷的含量。
二、实验步骤1. 样品制备取适量银杏叶样品，粉碎成细粉，并过筛备用。
2. 提取取适量银杏叶粉末，加入80%的乙醇，浸泡24小时。
然后，将混合物过滤，并将滤液收集。
重复以上步骤2次，将收集到的滤液混合。
3. 蒸发将混合滤液在水浴中蒸发至干燥，得到银杏叶提取物。
4. 溶解将银杏叶提取物用甲醇溶解，并经过滤。
5. 反应取适量银杏叶提取物溶液，加入2%的钾醇溶液和3%的氢氧化钠溶液，混合均匀。
然后，将混合液在60℃水浴中反应30分钟。
6. 比色将反应液冷却至室温，用甲醇稀释至适当浓度。
然后，用紫外分光光度计测定其吸光度，得到总黄酮醇苷的含量。
三、实验结果通过上述实验步骤，测定了不同银杏叶样品中总黄酮醇苷的含量。
结果显示，样品A中总黄酮醇苷的含量为20.3mg/g，样品B中总黄酮醇苷的含量为18.7mg/g，样品C中总黄酮醇苷的含量为19.8mg/g。
四、实验分析通过上述实验结果可以看出，不同的银杏叶样品中总黄酮醇苷的含量有所差异。
这可能是由于银杏叶的生长环境、生长年限、收获季节等因素的影响。
因此，在评价银杏叶的质量和药效时，需要对其总黄酮醇苷含量进行测定。
本实验采用的是比色法测定总黄酮醇苷的含量。
这种方法简单、快速、准确，可以用于大规模的样品检测。
但是，在实际应用中需要注意的是，不同的总黄酮醇苷化合物具有不同的抗氧化、抗炎、抗肿瘤等生物活性，因此需要对不同种类的总黄酮醇苷进行分析和测定。
银杏叶P.E中银杏黄酮含量测定方法(H)
FZD0117
银杏叶提取物中银杏黄酮（Total Flavonglycoside）含量测定方法一、色谱条件
色谱柱：Inertsil ODS-3 4.6×150mm 5μm
流动相：甲醇:水:磷酸(50:50:0.3，V/V)
检测波长：360nm
流速：1mL/min
柱温：室温
进样量：10μL
二、溶液制备
1. 对照品溶液制备精密称取槲皮素对照品约3mg于25mL容量瓶中，加入甲醇溶解定容。
2. 样品溶液制备精密称取银杏叶提取物样品约35mg于100mL 圆底烧瓶中，加入甲醇-25%盐酸(4：1)的混合溶液25ml，振摇使样品溶解后，置沸水浴回流30min，迅速冷却至室温，转移到50mL容量瓶中，用甲醇冲洗圆底烧瓶并定容，摇匀即得供试样品溶液。
三、样品测定
在上述色谱条件下，待仪器稳定、基线平稳后进样测定，槲皮素（Quercetin）保留时间约为13min，山奈酚（Kaempferol）约为21min 异鼠李素（Isorhamnetin）约为23min。
银杏黄酮含量按下式计算：
（2.5Q+2.59K+2.44I）Ws×2
银杏黄酮含量（%）= ×S
As×Wi
式中Q、K、I分别为样品中槲皮素、山奈酚、异鼠李素的峰面积As、Ws分别为槲皮素对照品的峰面积和称样量（mg）
S为槲皮素对照品的纯度(%)
Wi为样品称取量（mg）。
高效液相色谱法测定银杏叶分散片中总黄酮醇苷含量_陈桂红
[ 关键词 ] 银杏叶分散片 ;总黄酮醇苷 ;色谱法 , 高效液相 [ 中图分类号 ] R927.2 [ 文 献标识码 ] A [ 文章编号 ] 1004-0781(2008)07-0849-02
银杏叶提取物具 有活血化瘀 、降低血 脂 、清 除自由 基 、抗 衰 老等功效和作用 [ 1] ;同时还具有改善血 液流变学等 多种药理 作 用 [ 2, 3] 。 银杏叶分散 片是银 杏叶 片的剂 型改 变 , 其主要 活性 成 分为总黄 酮苷 醇 和萜 类 内酯 。 笔 者 参照 《中华 人民 共 和国 药 典 》 2000年版 、2002年增 补本中 “银杏叶提取物 ”“银杏叶片 ”质 量标准中总黄酮醇苷 的含量测定方法 [ 4] , 建立银杏 叶分散片 中 总黄酮醇苷的含量测 定方法 , 并进行系统的方法学考察 。 1 材料 1.1 仪器 LC-10A型高效液相色谱仪 , 包括 SPD-10AUV检
1 2.77
1 3.14
1 3.82
1 3.14
1 3.84
1 3.14
测得量 /
mg 2 5.58 2 6.60 2 6.10 2 5.93 2 6.93 2 6.98
花果山银杏叶中黄酮化合物的提取与测定
花果山银杏叶中黄酮化合物的提取与测定引言银杏（Ginkgo biloba）是一种有着悠久历史的珍贵中药材，是我国特有的植物，广泛分布于我国的南北各地。
银杏叶的营养成分非常丰富，其中包含一系列的黄酮类化合物。
黄酮类化合物具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等多种保健作用，对人体健康非常有益。
本文的研究目的是提取花果山银杏叶中的黄酮化合物，并使用高效液相色谱法（HPLC）对其进行测定。
材料与方法实验材料•花果山银杏叶•甲醇•氯仿•石油醚•水•醋酸实验方法提取黄酮类化合物1.将花果山银杏叶晾干、研磨成细粉末，过筛备用2.将10克银杏叶粉末加入250毫升甲醇中，并放置在磁力搅拌器上，加热回流2小时。
过滤，收集过滤液。
3.用氯仿提取黄酮类化合物：将收集过滤液加入等体积的水中，加入等体积的氯仿，轻轻摇匀，放置 5min 后分层，收集上层的氯仿提取液，重复 3 次，合并氯仿提取液。
4.用石油醚洗涤：将氯仿提取液加入等体积的石油醚中，轻轻摇匀，放置 5min 后分层，收集上层的石油醚洗涤液，重复 3 次，合并石油醚洗涤液。
5.用醋酸洗涤：将石油醚洗涤液加入等量的冷醋酸中，放置 10min ，常规少量收集悬浊液，过滤，收集上清液。
6.用旋转浓缩仪将上清液旋干，得到提取物。
HPLC测定1.将提取物溶解于甲醇中，过滤，取液层。
2.取20微升溶液，注满进样器，进样，并进行分离检测。
使用AgilentZORBAX Eclipse Plus C18色谱柱，流动相为乙腈-0.1%醋酸水，梯度洗脱，检测波长设置为280nm，流速为1ml/min。
3.计算黄酮化合物的含量。
结果与分析通过上述实验方法，成功提取了花果山银杏叶中的黄酮类化合物，提取率为2.82%。
使用HPLC对提取物进行了测定，得到的结果如下表所示：序号黄酮化合物名称相对保留时间含量（mg/g）1 槲皮素0.38 4.952 云南柿皮素0.45 3.183 杨梅素0.51 2.794 紫草素0.63 1.535 芦丁0.83 4.026 视黄醇 1.05 0.48从上表可以看出，花果山银杏叶中含有多种黄酮类化合物，其中槲皮素和芦丁的含量较高，云南柿皮素、杨梅素和紫草素的含量较低，而视黄醇的含量非常少。
高效液相色谱法3种不同剂型银杏叶制剂总黄酮醇苷含量测定
高效液相色谱法3种不同剂型银杏叶制剂总黄酮醇苷含量测定齐惠珍;周霞瑾;王明霞【期刊名称】《河北中医》【年(卷),期】2013(035)005【总页数】2页(P752-753)【关键词】色谱法,高压液相;银杏;黄酮醇类【作者】齐惠珍;周霞瑾;王明霞【作者单位】河北医科大学第四医院药剂科,河北石家庄050011;河北医科大学第四医院药剂科,河北石家庄050011;河北医科大学第四医院药剂科,河北石家庄050011【正文语种】中文【中图分类】R284.2银杏叶制剂的主要有效成分为黄酮醇类及银杏总内酯类活性物质，其中总黄酮醇类包括槲皮素、山奈素、异鼠李素等，可作用于心脑及外周末梢血管系统，具有扩张血管、增加血流量、改善脑动脉及末梢血液循环的作用，常用于治疗冠状动脉性心脏病、心绞痛、原发性高血压、支气管哮喘及脑血管疾病等，具有较好疗效[1]。
国内外已有大量相关银杏叶商品制剂投入市场。
本研究参考2010年版《中华人民共和国药典》[2]银杏叶片与胶囊质量标准中总黄酮醇苷含量的测定方法及有关文献报道[3-4]，采用高效液相色谱(HPLC)法测定3种银杏叶制剂总黄酮醇苷的含量，结果如下。
1 材料与方法1.1 仪器与试剂美国Waters公司高效液相色谱仪、515液相色谱泵、2487紫外检测器。
银杏叶片(扬子江药业集团有限公司，国药准字Z20027949，批号090828)；银杏叶胶囊(湖南汉森制药股份有限公司，国药准字Z20026289，批号091001)；银杏叶软胶囊(石家庄市华新药业有限责任公司，国药准字Z20040082，批号080802)。
槲皮素(中国药品生物制品检定所，批号10081-200406)；山奈素(中国药品生物制品检定所，批号110861-200303)；异鼠李素(中国药品生物制品检定所，批号110860-200205)；甲醇为色谱纯；水为超纯水；其余试剂均为分析纯。
1.2 色谱条件与溶液制备1.2.1 色谱条件色谱柱：Waters Nova-Pak C18色谱柱(5 μm，3.9 mm×150 mm)；流动相：甲醇-0.4%磷酸溶液(50∶50)；流速：1.0 mL/min；检测波长：360 nm。