倒置荧光显微镜CCD成像系统
倒置荧光显微镜操作说明
显微镜及数码成像系统操作简要第一部分观察方法步骤1、明场观察方法步骤2、相差观察方法步骤3、荧光观察方法步骤第二部分使用IPP拍摄图像流程(相差观察、荧光观察) 第三部分使用BX2-BSW拍摄图像流程(明场观察)1、明场观察方法步骤步骤 涉及部件主开关拨到“I ”准备工作：柯勒照明光轴中心调节第一次观察须完成此调试，完成后不需要再调节，直至装卸过部件后，使用过程中请不要扭动聚光镜中心调节旋钮。
① 聚光镜升高到最高位置 聚光镜高度升降旋钮 ② 用10X 物镜聚焦至清晰③ 视场光阑打至最小 视场光阑 ④ 逐步下降聚光镜，使视场中出现清晰正多边形图像 聚光镜升降旋钮 ⑤ 调节聚光镜中心调节旋钮，使正多边形移至视场中心 聚光镜中心调节旋钮 ⑥ 逐步打开视场光阑，使正多边形与视场边缘内切 视场光阑 ⑦ 稍加大视场光阑，使它的图象刚好与视场外切即可 视场光阑步骤 涉及部件I ” 载物台、标本夹3、荧光观察方法步骤准备工作：高压汞灯对中（第一次观察时调整，以后观察时不需调整，除非更换汞灯）步骤 涉及部件主开关拨到“I ” CD+或CD-钮主开关拨到“I ”ND 片插槽 /孔径光阑准备工作：高压汞灯对中（第一次观察时调整，以后观察时不需调整，除非更换汞灯）调整完成后，请不要触动对中部件，如汞灯对中旋钮，视场光阑对中钮等。
，待弧载物台荧光激发块选择按钮载物台控制手柄 物镜选择钮 手动调焦调节瞳间距 观察筒 调节屈光度 屈光度调节环物镜转盘视场光阑杆使两斑点最清晰 汞灯透镜聚焦调节旋钮 使两斑点重合（先水平后重合） 汞灯中心调节旋钮物镜选择按钮视场光阑杆调节视场亮度均匀一致 集光透镜聚焦旋钮（亮度最大）视场光阑拉出至最小调整正多边形至视野中央 视场光阑中心调节钮第二部分 使用IPP 拍摄图像流程1. 在桌面点击以下图标打开IPP 。
2. 在菜单栏中，（采集）Acquire 菜单下点击（视频/数字图像采集）Video/DigitalCapture ，或点击工具栏中，即出现控制CCD 拍照的对话框。
倒置荧光显微镜技术参数
倒置荧光显微镜技术参数倒置荧光显微镜技术参数（参考）1、▲用途：用于观察体外培养的哺乳动物细胞形态。
2、▲整套显微镜具有明场、相差、（绿色、红色/紫外）荧光观察方法和制冷彩色CCD成像及分析系统。
3、采用无限远光学校正系统，齐焦距离45mm。
4、光路采用“U”设计，保证多功能的扩展。
5、采用“双层光路”设计高稳定性镜架，左摄影端口分光比100：0/50；50/0：100。
6、同轴粗微调焦机构钮动距离≥10mm。
7、▲双目观察筒，单边带屈光度设节。
8、宽视场目镜10X，（其中一个带屈光度调节）。
9、▲机械载物台样品固定架配有微型板（如六孔板）固定夹、培养皿固定夹。
载物台拥有特制的定位系统，当使用权用载物台定位系统后可以从载台上取下35mm培养皿，将其放入培养箱里培养，当需要观察时再放回载物台上位置与前次观察的位置不变。
10、聚光镜数值孔径≥0.55。
11、物镜转换器具有简单防水结构设计和带编码功能，孔数≥6孔。
带DIC模块插孔。
12、透射光配12V 100W长寿命卤素灯光源。
13、▲配有长工作距离半复消色差相差物镜4X N.A≥0.13, WD ≥17mm10X N.A≥0.3, WD≥ 10mm。
20X,NA ≥0.45, WD≥ 6.6-7.8, 玻片厚度校正范围0-2mm。
40X,NA ≥0.6, WD≥ 3.0-4.2玻片厚度校正范围0-2mm。
14、▲荧光块切换转盘≥8孔。
15、荧光激发块UV、B、G。
16、荧光光源系统：配复消色差汞灯灯室,≥100W汞灯光源；具有荧光光强调节功能，采用多段减光控制(如10%、20%、30%、50%、100%)；具有消除背景荧光的技术。
17、摄影接口如0.63X B型，保证图像传输快速、稳定。
18、显微专业成像CCD（高分辨率彩色CCD芯片）详细要求如下，供参考：a、制冷：半导体制冷，至少低于室温10℃，制冷可控。
b、图像传感器大小：2/3英寸。
c、扫描方法：逐行扫描。
倒置荧光显微镜操作说明
显微镜及数码成像系统操作简要第一部分观察方法步骤1、明场观察方法步骤2、相差观察方法步骤3、荧光观察方法步骤第二部分使用IPP拍摄图像流程(相差观察、荧光观察) 第三部分使用BX2-BSW拍摄图像流程(明场观察)1、明场观察方法步骤步骤 涉及部件主开关拨到“I ”准备工作：柯勒照明光轴中心调节第一次观察须完成此调试，完成后不需要再调节，直至装卸过部件后，使用过程中请不要扭动聚光镜中心调节旋钮。
① 聚光镜升高到最高位置 聚光镜高度升降旋钮 ② 用10X 物镜聚焦至清晰③ 视场光阑打至最小 视场光阑 ④ 逐步下降聚光镜，使视场中出现清晰正多边形图像 聚光镜升降旋钮 ⑤ 调节聚光镜中心调节旋钮，使正多边形移至视场中心 聚光镜中心调节旋钮 ⑥ 逐步打开视场光阑，使正多边形与视场边缘内切 视场光阑 ⑦ 稍加大视场光阑，使它的图象刚好与视场外切即可 视场光阑步骤 涉及部件I ” 载物台、标本夹3、荧光观察方法步骤准备工作：高压汞灯对中（第一次观察时调整，以后观察时不需调整，除非更换汞灯）步骤 涉及部件主开关拨到“I ” CD+或CD-钮主开关拨到“I ”ND 片插槽 /孔径光阑准备工作：高压汞灯对中（第一次观察时调整，以后观察时不需调整，除非更换汞灯）调整完成后，请不要触动对中部件，如汞灯对中旋钮，视场光阑对中钮等。
，待弧载物台荧光激发块选择按钮载物台控制手柄 物镜选择钮 手动调焦调节瞳间距 观察筒 调节屈光度 屈光度调节环物镜转盘视场光阑杆使两斑点最清晰 汞灯透镜聚焦调节旋钮 使两斑点重合（先水平后重合） 汞灯中心调节旋钮物镜选择按钮视场光阑杆调节视场亮度均匀一致 集光透镜聚焦旋钮（亮度最大）视场光阑拉出至最小调整正多边形至视野中央 视场光阑中心调节钮第二部分 使用IPP 拍摄图像流程1. 在桌面点击以下图标打开IPP 。
2. 在菜单栏中，（采集）Acquire 菜单下点击（视频/数字图像采集）Video/DigitalCapture ，或点击工具栏中，即出现控制CCD 拍照的对话框。
倒置荧光显微镜操作说明
显微镜及数码成像系统操作简要第一部分观察方法步骤1、明场观察方法步骤2、相差观察方法步骤3、荧光观察方法步骤第二部分使用IPP拍摄图像流程(相差观察、荧光观察)第三部分使用BX2-BSW拍摄图像流程(明场观察)第一部分观察方法步骤1、明场观察方法步骤步骤涉及部件打开电源开关主开关拨到“I”选择目镜观察光路三目观察筒选择杆拨至最内聚光镜选择明场（BF）聚光镜选择钮相差移出光路放入标本于载物台载物台、标本夹选择合适物镜进入光路物镜选择钮开始观察调节瞳间距观察筒瞳间距调节调节屈光度目镜屈光度调节环寻找标本载物台控制手柄手动调焦调节光照亮度图像采集准备工作：柯勒照明光轴中心调节第一次观察须完成此调试，完成后不需要再调节，直至装卸过部件后，使用过程中请不要扭动聚光镜中心调节旋钮。
1 聚光镜升高到最高位置聚光镜高度升降旋钮2 用10X物镜聚焦至清晰3 视场光阑打至最小视场光阑4 逐步下降聚光镜，使视场中出现清晰正多边形图像聚光镜升降旋钮5 调节聚光镜中心调节旋钮，使正多边形移至视场中心聚光镜中心调节旋钮6 逐步打开视场光阑，使正多边形与视场边缘内切视场光阑7 稍加大视场光阑，使它的图象刚好与视场外切即可视场光阑2、相差（PH）观察方法步骤步骤涉及部件打开电源开关主开关拨到“I”选择目镜观察光路三目观察筒选择杆拨至最内放入标本于载物台载物台、标本夹选择合适物镜进入光路物镜选择钮选择与物镜匹配的相差环进入光路聚光镜选择钮PH1对应10X物镜、PH1对应20X物镜、PH2对应40X物镜开始观察调节瞳间距观察筒瞳间距调节调节屈光度目镜屈光度调节环寻找标本载物台控制手柄手动调节调节光照亮度图像采集3、荧光观察方法步骤准备工作：高压汞灯对中（第一次观察时调整，以后观察时不需调整，除非更换汞灯）步骤涉及部件打开电源开关主开关拨到“I”选择目镜观察光路三目观察筒选择杆拨至最内聚光镜选择明场（BF）聚光镜选择CD+或CD-钮相差环移出光路放入标本于载物台载物台、标本夹选择合适物镜进入光路物镜选择钮标本定位调节瞳间距观察筒瞳间距调节调节屈光度目镜屈光度调节环寻找标本载物台控制手柄手动调焦卤素灯电源调至最暗机身架光强调节按钮打开汞灯电源供电器主开关拨到“I”选择合适的荧光激发块打开光闸开始观察选择合适的物镜物镜选择按钮选用合适的ND滤色片荧光反射照明器上ND片插槽调节汞灯透镜聚焦旋钮使视场亮度均一汞灯透镜聚焦旋钮调节视场光阑和孔径光阑改善反差视场光阑/孔径光阑图像采集准备工作：高压汞灯对中（第一次观察时调整，以后观察时不需调整，除非更换汞灯）调整完成后，请不要触动对中部件，如汞灯对中旋钮，视场光阑对中钮等。
倒置荧光显微镜操作说明
显微镜及数码成像系统操作简要第一部分观察方法步骤1、明场观察方法步骤2、相差观察方法步骤3、荧光观察方法步骤第二部分使用IPP拍摄图像流程(相差观察、荧光观察) 第三部分使用BX2-BSW拍摄图像流程(明场观察)1、明场观察方法步骤步骤 涉及部件主开关拨到“I ”准备工作：柯勒照明光轴中心调节第一次观察须完成此调试，完成后不需要再调节，直至装卸过部件后，使用过程中请不要扭动聚光镜中心调节旋钮。
① 聚光镜升高到最高位置 聚光镜高度升降旋钮 ② 用10X 物镜聚焦至清晰③ 视场光阑打至最小 视场光阑 ④ 逐步下降聚光镜，使视场中出现清晰正多边形图像 聚光镜升降旋钮 ⑤ 调节聚光镜中心调节旋钮，使正多边形移至视场中心 聚光镜中心调节旋钮 ⑥ 逐步打开视场光阑，使正多边形与视场边缘内切 视场光阑 ⑦ 稍加大视场光阑，使它的图象刚好与视场外切即可 视场光阑步骤 涉及部件I ” 载物台、标本夹3、荧光观察方法步骤准备工作：高压汞灯对中（第一次观察时调整，以后观察时不需调整，除非更换汞灯）步骤 涉及部件主开关拨到“I ” CD+或CD-钮主开关拨到“I ”ND 片插槽 /孔径光阑准备工作：高压汞灯对中（第一次观察时调整，以后观察时不需调整，除非更换汞灯）调整完成后，请不要触动对中部件，如汞灯对中旋钮，视场光阑对中钮等。
，待弧载物台荧光激发块选择按钮载物台控制手柄 物镜选择钮 手动调焦调节瞳间距 观察筒 调节屈光度 屈光度调节环物镜转盘视场光阑杆使两斑点最清晰 汞灯透镜聚焦调节旋钮 使两斑点重合（先水平后重合） 汞灯中心调节旋钮物镜选择按钮视场光阑杆调节视场亮度均匀一致 集光透镜聚焦旋钮（亮度最大）视场光阑拉出至最小调整正多边形至视野中央 视场光阑中心调节钮第二部分 使用IPP 拍摄图像流程1. 在桌面点击以下图标打开IPP 。
2. 在菜单栏中，（采集）Acquire 菜单下点击（视频/数字图像采集）Video/DigitalCapture ，或点击工具栏中，即出现控制CCD 拍照的对话框。
1、研究级全自动倒置荧光显微镜系统明场、荧光、微分干涉
1、研究级全自动倒置荧光显微镜系统明场、荧光、微分干涉观察方式#1.1光学系统≥50 mm齐焦距，无限远校正光学系统, 消杂光光学系统。
1.2主机内置高清数码CCD相机可通过APP网络远程实时监控显微镜及观察样本状态，电动控制Z轴，电动物镜转盘，电动荧光滤色镜转盘，电动切转观察方式，电动微分干涉模块，电动对焦系统，数码CCD接口（宽视场直径：25mm）。
控制台可以显示所切换的物镜信息、荧光激发块信息和Z轴精度位置等显微镜状态。
#1.3双层光路系统，内置完整光路中间变倍：1X/1.5X/2X；具有左侧和右侧两个视频输出接口；1.4 观察镜筒瞳距可在50-76mm范围内进行调节，视场直径为22mm，双目视度可调，双目倾角25度, 四功能转盘（勃特兰透镜校正）；目镜筒底座：专业目镜筒底座。
1.5 目镜高眼点目镜，10×，宽视场直径：22mm。
*1.6聚焦机构电动物镜转换器的升降运动，行程（电动）向上≥7.5mm、向下≥2.5mm，电动脉冲马达，精度：≤0.01um，最大速度：≥2.5mm/sec，物镜升降行程≥10mm；电动下降及粗调重新对焦机构，带粗/微调切换装置，备有上限调节, 防撞机构。
不同倍数物镜，具有样品齐焦和倍数记忆功能。
1.7照明系统高性能LED节能环保长寿命冷光源（无需频繁更换灯泡），照明寿命≥50000小时，带智能色温管理模块，可自动根据使用物镜光强情况，保证色温一致；在高放大倍率下在图像边缘-边缘均可以获得明亮均匀的图像；所有放大倍率下均可获得相同的色温，保证图像背景颜色不变，视场可变光阑可调。
1.8载物台电脑控制XYZ高精度扫描载物台，移动速度：≥150mm/秒；步进精度：Z轴≤25 nm， XY轴≤10nm#，绝对精度：≤8um. ；电动XY行程: ≥110mm X 75mm（X-Y 运动），最小调节精度：≤10nm可以实现X-Y轴≤120nm，Z轴≤150nm的高分辨率。
倒置荧光显微镜技术参数.doc
倒置荧光显微镜技术参数数量：1台/套技术参数：1 研究级倒置荧光相差显微镜1.1 显微镜镜体新型双层结构镜体1.1.1 物镜转换器：6孔编码型物镜转换器，带防水槽设计1.1.2 聚焦机构：备有聚焦机构同轴粗、微调旋钮（最小微调刻度单位：1μm），行程10mm，粗调旋钮扭矩可调，备有上限调节1.1.4 光学系统：UIS2无限远校正光学系统1.2 透射光照明装置100W卤素灯透射光照明装置，视场可变光阑可调，带聚光镜高度限位器，外置电源供应器1.3 观察镜筒：双目观察筒，瞳距可在50-76mm范围内进行调节，视场直径为221.4 载物台：行程为114 × 75mm，载物台限位机构，方便标本重定位。
可选配适合多种器皿的适配器。
1.5 聚光镜：长工作距离聚光镜：5孔转盘，孔径光阑可调，N.A.0.55 W.D.27mm1.6 相衬滑座：相衬环板：4×、10×、20×、40x1.7 物镜1.7.1 万能平场半复消色差相差物镜4X（N.A.0.13, W.D.17mm）1.7.2 平场半复消色差相差物镜10X（N.A.0.3, W.D.10mm）1.7.3 长工作距离平场半复消色差相差物镜20X（N.A.0.45, W.D. 6.6-7.8）1.7.4 长工作距离万能平场半复消色差相差物镜40X（N.A.0.6, W.D.3.0- 4.2mm cc0-2）1.8 目镜：高眼点目镜，10×，视场直径：221.9 反射荧光系统1.9.1 荧光照明装置：备有视场可变光阑，滤光片插板1.9.2 荧光滤色镜盒：备有可装入8个滤色镜立体镜套的转盘式编码型滤色镜盒，内装光闸1.9.3 荧光激发块：紫外（U）、蓝色（B）、绿色（G）1.9.4 光源：长寿命荧光光源 130W,2000小时，5档光强可调节。
2.高分辨率成像分析系统(双CCD芯片)2.1. 彩色CCD2.1.1 像素：1260万像素（分辨率：4080 X 3072）2.1.2 芯片尺寸：2/3英寸2.1.3 制冷温度：-10℃2.1. 4 测光模式：100%/30%/1%/0.1%2.1.5 拍摄速度：4080*3072≤4s，1360*1024≤0.3s2.2. 黑白CCD2.2.1 像素：145万像素（分辨率：1360 X 1024）2.2.2 芯片尺寸：2/3英寸2.2.3 制冷温度：-10℃2.2.4 满井电子容量：16000e-(Gain 0.5x)2.2.5 读出噪声：7e-2.2.6 暗噪声：0.4 e-/pixel/s(TA=25degree C)3．成像分析软件3.1、和显微镜及CCD 系统为同一生产厂家3.2、视图：多通道图像叠加、多图像并排比较、动态图像回放、多维图像并列显示3.3、图像获取：单幅图像采集、动态图像采集、时间序列图像获取，白平衡、黑平衡设置，超级荧光模式。
倒置荧光显微镜操作说明
显微镜及数码成像系统操作简要第一部分观察方法步骤1、明场观察方法步骤2、相差观察方法步骤3、荧光观察方法步骤) (使用IPP第二部分拍摄图像流程相差观察、荧光观察) 明场观察(拍摄图像流程第三部分BX2-BSW使用观察方法步骤第一部分 1、明场观察方法步骤涉及部件步骤”主开关拨到“I打开电源开关三目观察筒选择杆拨至最内选择目镜观察光路聚光镜选择钮聚光镜选择明场（BF）相差移出光路载物台、标本夹放入标本于载物台物镜选择钮选择合适物镜进入光路开始观调节瞳间观察筒瞳间距调节调节屈光目镜屈光度调节环寻找标载物台控制手柄手动调调节光照亮图像采准备工作：柯勒照明光轴中心调节第一次观察须完成此调试，完成后不需要再调节，直至装卸过部件后，使用过程中请不要扭动聚光镜中心调节旋钮。
①聚光镜升高到最高位置聚光镜高度升降旋钮②用10X物镜聚焦至清晰③视场光阑打至最小视场光阑④逐步下降聚光镜，使视场中出现清晰正多边形图像聚光镜升降旋钮⑤调节聚光镜中心调节旋钮，使正多边形移至视场中心聚光镜中心调节旋钮⑥逐步打开视场光阑，使正多边形与视场边缘内切视场光阑⑦稍加大视场光阑，使它的图象刚好与视场外切即可视场光阑2、相差（PH）观察方法步骤步骤涉及部件主开关拨到“I”打开电源开关选择目镜观察光路三目观察筒选择杆拨至最内载物台、标本夹放入标本于载物台物镜选择钮选择合适物镜进入光路选择与物镜匹配的相差环聚光镜选择钮进入光路PH对10物镜PH对20物镜PH对40物开始观调节瞳间观察筒瞳间距调调节屈光目镜屈光度调节寻找标载物台控制手手动调调节光照亮图像采3、荧光观察方法步骤准备工作：高压汞灯对中（第一次观察时调整，以后观察时不需调整，除非更换汞灯）步骤涉及部件主开关拨到“I”打开电源开关选择目镜观察光路三目观察筒选择杆拨至最内聚光镜选择明场（BF）聚光镜选择CD+或CD-钮相差环移出光路载物台、标本夹放入标本于载物台物镜选择钮选择合适物镜进入光路标本定位调节瞳间距观察筒瞳间距调节调节屈光度目镜屈光度调节环寻找标本载物台控制手柄手动调焦卤素灯电源调至最暗机身架光强调节按钮打开汞灯电源供电器主开关拨到“I”选择合适的荧光激发块打开光开始观选择合适的物物镜选择按钮选用合适N滤色荧光反射照明器上ND片插槽调节汞灯透镜聚焦旋钮使视场亮度均汞灯透镜聚焦旋钮调节视场光阑和孔径光阑改善反视场光阑/孔径光阑图像采准备工作：高压汞灯对中（第一次观察时调整，以后观察时不需调整，除非更换汞灯）调整完成后，请不要触动对中部件，如汞灯对中旋钮，视场光阑对中钮等。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
中国医科大学实验技术中心
主要实验仪器及相关技术
倒置荧光显微镜CCD 成像系统仪 器
名 称 Inverted Fluorescence
Microscope with Digital CCD
Imaging System
型 号 IX71/DP70
生 产 厂 OLYMPUS
国 别 日本
所在科室 实验技术中心三部 综合楼10F
负 责 人
赵蕾 薛晓霞 联系电话 23256666转5104，5100
起用日期 2002.09
主要技术指标及配置：
IX71倒置荧光显微镜
调焦：粗调/微调机制，最小微调刻度1µm ，一圈100µm
三目镜筒，目镜：10×/FN22.0；通用长工作距离聚光镜NA0.55 WD27mm ； 配置DIC 相差（10×、20×、40×）、相差（4×、10×、20×、40×、60×）装置 物镜： 4×、10×、20×、40×、60×，适于荧光、DIC 相差、相差观察
透射光照明：12V100W 卤素灯，带TTL 触发控制、光标指示
落射荧光：IX-RFA/U-LH100HGAPO 100W 汞灯；装有视场光阑调节机制
激发/发射滤光片组件：UV （U-MWU2, BP330-385）、IB(U-MWIB2 BP460-490,BA515IF)、IG(U-MWIG2 BP520-550,BA580IF)、BV(U-MWBV2 BP400-440, BA455)、IY(U-MWIY2 BP545-580, BA610IF)、IB GFP/FITC(U-MWIBA/GFP BP460-490, BA510-550)； 需用BV 、IY 激发/发射滤光片组件的实验者要提前说明，以便进行实验配置。
DP70数字CCD 成像
2/3”彩色CCD ，有效像素：1.5MP ，经像素转移技术为4080×3072（12.5MP 像素） 最大图像采集速度：3fps （36bit ，最高分辨率），图像预览：1360×1024，15fps
测光/曝光方式：30％平均测光，1％、0.1%点测光；自动、手动和自动超级荧光(SFL)曝光时间控制：1/44,000秒～60秒
灵敏度：相当于胶片ISO200～ISO1600，分档可选；BINNING ：最高4×4 动态范围：36-bit ，文件存储格式48-bit
Peltier 半导体制冷：低于环境温度10℃
图像采集分析软件：图像融合、加校准标尺、测量，序列图像记录和回放、基本的图像处理功能等。
图像还可在荧光图像工作站做反卷积去模糊等处理。
可连接35mm 胶片自动显微照像装置（30％平均测光，1％、0.1%点测光；自动、手动和自动超级荧光SFL)。
主要技术功能及适用领域：
1. 细胞静态或动态荧光观察、图像采集；DIC 相差观察、图像采集。
2. 其它在培养器皿内荧光标本或需倒置观察的有关标本的观察、图像采集。
申请实验技术有关事项及自备条件：
1.提前4个工作时预约；使用60×物镜、DIC 观察和35mm 自动显微照像要事先说明。
2.自带纱布或纸，观察前，要擦拭净培养器皿表面水迹。
3.完成实验后，带走样品，不得随意丢弃，并清理实验台面。