荧光显微镜 倒置荧光显微镜
倒置相差显微镜及荧光显微镜的使用
倒置相差显微镜及荧光显微镜的使用摘要：倒置相差显微镜是相差显微镜与倒置显微镜的结合，能够在倒置的情况下观察到普通显微镜所不能清楚的观察的活细胞和未经染色的生物标本，在细胞培养、显微操作技术等方面有了广泛的应用。
荧光显微镜利用物质激发产生的微弱的荧光形成明亮的观察图像，在生物学以及医学的许多领域已经成为一种不可替代的观察和测试手段，能够精确的对生物标本中的特定组分、微量荧光染料进行分析研究。
关键词：倒置相差显微镜、荧光显微镜、使用1.倒置相差显微镜及荧光显微镜的工作原理1.1倒置相差显微镜的工作原理在显微镜下镜检时，视场中的样品只有在反射光的波长（颜色）和振幅（亮度）与周围介质有变化时，方能窥见被检样品。
活的样品多为无色透明，照明光线通过这种物体时，透过或反射光的波长和振幅都不发生改变，所以用普通光学显微镜难以辨清活体的结构。
必须借助于固定和染色等理化方法，使样品和背景的反射或透射光在波长和振幅上发生变化，即在颜色和亮度上有所差异，以供识别。
相差方法应用于生物学上的主要价值，在于它能对透明的活体进行直接观察，无需采用使细胞致死的固定和染色的方法。
染色合活体以有害的影响，甚至失真。
由此，才使相差法显得异常重要。
1.2 荧光显微镜的工作原理荧光显微镜是利用一个高发光效率的点光源，经过滤色系统发出一定波长的光(如紫外光365nm或紫蓝光420nm)作为激发光，激发检测标本内的荧光物质发射出各种不同颜色的荧光后，通过物镜和目镜系统的放大以观察标本的荧光图像的光学显微镜，是医学检验中的重要仪器之一。
2.倒置相差显微镜及荧光显微镜的结构2.1 倒置相差显微镜的结构倒置相差显微镜是相差显微镜与倒置显微镜的结合，即具有倒置显微镜的倒置观察方式与同相差显微镜相一致的成像原理。
倒置相差显微镜的照明系统位于镜体上方，而物镜和目镜则位于下部。
这样在集光器和载物台之间有较大的工作距离，可以放置培养皿、细胞培养瓶等容器，辅助以相差的光学系统，可以很方便地对培养中的细胞进行观察。
leica dmi8倒置荧光显微镜工作原理
leica dmi8倒置荧光显微镜工作原理
Leica DMI8倒置荧光显微镜工作原理基于倒置的光路径设计，通过逆向放大观察样品。
具体工作原理如下：
1. 光源：Leica DMI8倒置荧光显微镜通常采用激光或者弧光
灯作为光源。
光线通过光源进入显微镜系统。
2. 激发光源与滤光片：激发光源产生的光通过滤光片进行过滤。
滤光片选择能够激发样品荧光的波长，而过滤其他多余的光线。
3. 物镜：经过滤光片后的光线进入物镜。
物镜有不同的倍数，可以放大样品。
光在物镜中被聚焦，形成一个局部的高强度光点。
4. 分光镜：经过物镜后的光线进入分光镜。
分光镜表面涂有特殊的薄膜，将激发光和荧光信号分开。
激发光线被反射到目镜或相机，荧光信号则透过分光镜射向样品。
5. 样品：样品通常是放置在一个液体培养皿或者玻璃底片上。
荧光染料标记的生物标本或者细胞，会在激发光的作用下发出荧光信号。
6. 荧光信号：样品中的荧光染料吸收激发光子，高能激发光子的能量会导致荧光染料的电子跃迁到一个高能态，当电子回到基态时，会释放出激光波长较长的荧光信号。
7. 探测荧光信号：荧光信号通过目镜或者相机进行观察和记录。
荧光信号的特点可以提供有关样品的信息，如位置、结构和代谢活性等。
通过上述步骤，Leica DMI8倒置荧光显微镜能够通过荧光信
号对样品进行观察和分析。
倒置荧光显微镜使用方法(一)
倒置荧光显微镜使用方法(一)倒置荧光显微镜使用方法简介倒置荧光显微镜是一种常用于细胞、组织等生物样品观察的显微镜。
其特点是将物镜和光源的位置倒置，使得观察样品更加方便。
下面将介绍几种常见的倒置荧光显微镜使用方法。
方法一：样品准备1.在无菌条件下，将生物样品移植到培养皿或载玻片中。
2.样品可以是活细胞，也可以是固定的组织切片等。
3.如果需要染色，可以根据实验需求选择适当的荧光染料。
方法二：显微镜设置1.将倒置显微镜放在实验台上，并确保显微镜的稳定性。
2.打开显微镜电源，待显微镜系统启动后进行下一步操作。
3.调整光源，使得荧光光源均匀而明亮。
4.根据实验需求选择适当的滤光片，用于选择荧光发射波长。
方法三：样品装载1.将培养皿或载玻片放置在显微镜的样品台上。
2.使用目镜观察样品并调整焦距，确保样品清晰可见。
3.根据样品大小和形状进行显微镜调焦，以获得最佳的观察效果。
4.确保样品和显微镜的镜头之间没有空气或污染物，以避免影响观察结果。
方法四：荧光观察1.使用目镜观察样品后，可以使用显微镜的荧光通道进行观察。
2.打开荧光激发光源，调整光强度适当，避免过度曝光或低信号。
3.使用适当的荧光滤光片，选择要观察的荧光波长范围。
4.使用气体扩散器或其他方法降低样品温度，以减少荧光褪色和光损伤。
方法五：图像处理与分析1.使用相机或图像采集系统，记录荧光显微镜观察的图像。
2.可以使用图像处理软件进行曝光、对比度、亮度等调整，以优化图像质量。
3.利用图像分析软件进行细胞大小、数量、定量荧光信号等参数的测量和分析。
方法六：清洁与维护1.每次使用完成后，及时关闭荧光光源和显微镜电源。
2.用干净的纸巾或棉签轻轻擦拭显微镜的镜头和其他表面。
3.定期检查显微镜的各个部件，如镜头、滤光片、光源等，若有问题及时修理或更换。
以上是倒置荧光显微镜的使用方法，希望对您的实验有所帮助。
请根据实际需求进行调整和适配，并注意实验的安全性和准确性。
正置倒置荧光显微镜原理及操作步骤
正置倒置荧光显微镜原理及操作步骤
荧光显微镜是一种特殊的显微镜，它利用荧光现象来观察样品。
它的原理和操作步骤如下：
原理：
1. 荧光显微镜使用紫外光激发样品中的荧光物质，使其发射可见光。
2. 样品中的荧光物质吸收紫外光后，其中的电子被激发到高能级，随后返回基态时会放出能量，即发射荧光。
3. 荧光显微镜通过滤光片选择性地过滤激发光和荧光，从而增强对荧光信号的观察。
操作步骤：
1. 准备样品：确保样品中含有发射荧光的物质。
如果需要观察细胞或组织样品，可以使用荧光染料或标记物来标记目标结构或生物分子。
2. 打开荧光显微镜：打开显微镜电源，并将荧光灯打开。
调节荧光灯的亮度适合观察。
3. 安装样品：将样品放置在显微镜的载物台上，并用固定装置固定样品。
确保样品与目标物镜的工作距离适当。
4. 调节目标物镜：使用低倍或中倍物镜来定位样品，然后切换到高倍或油浸物镜以获得更高的放大倍率。
调节焦距和聚焦，使样品清晰可见。
5. 选择滤光片：根据所使用的荧光染料或标记物的特性，选
择合适的滤光片来过滤激发光和荧光信号。
这可以增强观察的对比度和清晰度。
6. 观察和记录：通过目镜或连接电脑的摄像头观察样品。
可以使用不同的荧光通道来观察多个标记物质。
记录所观察到的图像或视频。
需要注意的是，操作荧光显微镜需要具备一定的实验室技巧和基础知识，以确保正确的操作和解释观察到的结果。
荧光显微镜_倒置荧光显微镜
2.物镜3.总放大倍数4.聚光镜：特长工作距离聚光镜（带相衬装置）：工作距离75mm；5.大台面载物台：移动范围: 75mm×50mm；6.带限位和调节松紧装置的同轴粗微动调焦系统；微动手轮格值为: 0.002mm；7.瞳距调节范围：53mm~75mm；8.照明系统:A.透射照明光源12V30W卤素灯（亮度可调）；B.落射荧光光源100W超高压直流汞灯；9. 电源电压：110V（60Hz）或230V（50Hz）10.激发滤色片组：紫外光(UV)：激发光谱区域：330-400nm；可见荧光起始光谱：425nm.紫光(V)：激发光谱区域：395-415nm；可见荧光起始光谱：455nm.蓝光(B)：激发光谱区域：420-485nm；可见荧光起始光谱：515nm.绿光(G)：激发光谱区域：460-550nm；可见荧光起始光谱：590nm.二、显微镜结构图一1.倒置灯箱2.汞灯灯箱3.移动机构4.纵向移动手轮5.横向移动手轮6.电源开关7调节松紧手轮8移动机构固紧螺钉9.载物台10.目镜11.挡板图二12.滤色片座13.三目头14.主体15粗动调焦手轮16.微动调焦手轮17.亮度旋钮18.激发滤色片组19.物镜20.汞灯灯箱固紧螺钉21.集光镜22.左右对中旋钮23上下对中旋钮24.相衬装置显微镜的安装图三1.物镜2.汞灯电源箱3.汞灯灯箱4.倒置灯箱5.相衬聚光镜组6.挡板7.三目头8.目镜四、显微镜观察操作按照图3所示安装所需组件，检查仪器工作电压是否与本地区的电网电压一致时，便可把电源插头插入电源插座。
Ⅰ．倒置观察的操作步骤1. 将电源开关9拨向“I”一边，接通电源（图1）。
2. 将激发滤色片组27拉出（图2）3. 将标本放在载物台13上，10×物镜转入工作位置，对标本调焦。
4. 调节瞳距和视度。
5. 调节聚光镜的位置、亮度调节旋钮10和孔径光栏调节转环39，以达到满意的照明状态。
倒置荧光显微镜使用方法
倒置荧光显微镜使用方法1. 简介倒置荧光显微镜是一种特殊的显微镜，与传统显微镜不同的是，它将物镜和光源进行了倒置。
这种设计使得倒置荧光显微镜非常适合观察生物样品、细胞培养和活体成像等应用。
在本文中，我们将全面介绍倒置荧光显微镜的使用方法，包括准备工作、样品处理、操作步骤以及注意事项。
希望能够帮助读者更好地理解和运用倒置荧光显微镜。
2. 准备工作在开始使用倒置荧光显微镜之前，需要进行一些准备工作。
2.1 检查设备首先要确保倒置荧光显微镜的各个部件都处于正常工作状态。
检查目标物镜、滤光片、滤波器和荧光探针等配件是否齐全，并检查是否有任何损坏或污染。
2.2 清洁工作台清洁工作台是进行样品处理和操作的地方，必须保持干净整洁。
使用无菌纸巾和适当的清洁剂擦拭工作台面，确保没有灰尘或杂质。
2.3 准备试样根据实验需求，准备好需要观察的生物样品。
根据不同的实验目的，可以是细胞培养物、组织切片或者荧光标记的分子。
3. 样品处理在观察样品之前，可能需要进行一些样品处理步骤。
3.1 固定和染色对于细胞培养物或组织切片，通常需要先进行固定和染色。
固定可以保持样品的形态结构，染色可以使特定结构或分子可见。
选择合适的固定剂（如甲醛）将样品固定，并根据实验要求选择合适的荧光染料进行染色。
注意避免使用与荧光显微镜滤波器不匹配的染料。
3.2 荧光标记如果需要观察特定分子或结构，可以使用荧光探针对其进行标记。
选择合适的探针并按照说明书进行标记步骤。
4. 操作步骤在准备好样品后，可以开始使用倒置荧光显微镜进行观察。
4.1 打开显微镜将倒置荧光显微镜放置在稳定的台面上，并插入电源线。
打开电源开关，等待一段时间，直到显微镜完全启动。
4.2 调整镜头调整目标物镜和眼镜的位置，使其与视野对齐。
使用焦距调节旋钮或者移动台面，使样品处于焦点位置。
4.3 切换光源和滤光片根据实验需要，选择合适的光源和滤光片。
通常情况下，荧光显微镜使用紫外线或蓝绿光作为激发光源，并通过滤光片选择特定波长的荧光发射信号。
荧光显微镜技术参数
荧光显微镜技术参数一、倒置荧光显微镜（用于常规细胞培养观察、支原体荧光染色等实验）用途：可观察细胞培养及荧光标记的观察，用于研究工作。
技术参数：1、光学系统：UIS2无限远校正光学系统。
2、调焦机构：通过物镜转盘的上下移动进行调焦（载物台高度固定）；备有聚焦机构同轴粗、微调旋钮，旋钮扭矩可调，由滚柱机构导向；总行程量为从比载物台面高1mm的焦点起算向上7mm、向下2mm；粗调行程每一圈为≥39.6mm，微调行程每一圈为≤0.2mm。
*3、照明系统：新型LED长寿命照明系统，使用寿命≥20000小时。
4、聚光镜：可拆装的超长工作距离聚光镜（数值孔径为0.3，工作距离为72mm）。
5、物镜转盘：固定式4孔物镜转换器*6、物镜齐焦距离≤45mm*7、物镜：万能平场半复消色差相差物镜：4x(数值孔径0.13，工作距离17mm)万能平场半复消色差相差物镜：10x(数值孔径0.3，工作距离10mm)长工作距离平场半复消色差相差物镜：20x(数值孔径0.45，工作距离6.6-7.8mm)40x(数值孔径0.6，工作距离3.0-4.2mm)*8、载物台：高硬度陶瓷表面机械载物台，备有右手用低位置同轴X、Y向传动旋钮，200mm （长）×252（宽）mm,无需更换适配器，适用多种细胞培养板，培养瓶，96孔板等，载物台拥有x/y刻度，可实现孔板定位操作。
*9、观察镜筒：宽视野三目观察筒，镜筒倾角为45°，瞳距可在48-75mm范围内进行调节，屈光度可调节，视场数为22，分光比为观察100%：0%；0%：100%；*10、目镜：10X，带眼罩，视场数≥22；*11、ipc相差系统：无需调节相差环即可实现10X-20X的相差观察，方便实验操作*12、激发块转盘≥3孔，无需拆卸可更换激发块,内置光闸,防水设计;?13、荧光照明器:直型荧光照明臂;带视场光阑。
14、荧光光源:100 W APO 等级汞灯光源?15、激发块:荧光激发块的干涉膜采用了新型UW 超宽谱带多层镀膜技术,激发带宽(BP)以及荧光带宽(BA)比传统谱线缩短了6nm, 独特的光吸收涂层可吸收99%以上的杂散光,信噪比更进一步得到提高。
倒置荧光显微镜的原理
倒置荧光显微镜的原理倒置荧光显微镜是一种常用于生物学研究的显微镜，其原理是利用荧光物质对特定波长的光进行吸收后发出的荧光信号来观察样品。
相对于传统的正立显微镜，倒置荧光显微镜具有更大的工作距离和深度，适用于观察厚度较大的样品或三维细胞培养。
倒置荧光显微镜的构造与正立显微镜有所不同。
它的光学系由凹透镜、凹透镜、过渡镜和目镜组成。
样品被放置在显微镜的下方，光线通过凹透镜透射到样品上方，然后由目镜观察。
这种布局使得样品可以直接放置在培养皿、培养瓶或光学盖玻片上，方便地观察细胞培养、组织切片和活体显微镜的实验等。
倒置荧光显微镜的关键原理是荧光物质的激发和发射。
荧光物质是一类在特定波长的激发光下吸收能量并向高能级跃迁，然后通过非辐射跃迁的方式释放出低能级的光子的化合物。
荧光物质通常具有特定的激发波长和特征的发射光谱。
这种特性使得荧光物质可以被用来标记特定的生物分子或结构，并通过显微镜观察。
在倒置荧光显微镜中，激发光从灯源通过滤光片和凸透镜聚焦到样品上方。
被标记的样品经过适当的处理后，荧光物质会吸收激发光并发出发射光。
这些发射光通过物镜的凹透镜透射后经过过渡镜，再从目镜观察。
过渡镜的作用是将发射光和激发光进行分离，以避免激发光进入目镜。
同时，通过选择合适的滤光片，只有发射光可以通过，从而进一步加强图像的对比度和清晰度。
倒置荧光显微镜还具有荧光激发区域广、检测极限低、对光线入射角不敏感等优点。
由于光线入射于样品下方，所以样品的厚度对观察结果的影响较小。
这也使得倒置荧光显微镜特别适合观察厚度较大的样品，如多层细胞、培养组织和活体标本。
此外，倒置荧光显微镜还广泛应用于细胞培养、细胞动力学研究、组织工程和生物物理学等领域。
总之，倒置荧光显微镜利用荧光物质的激发和发射原理来观察特定标记的样品。
通过合适的激发光源、滤光片和过渡镜，可以将发射光和激发光进行分离，从而获得清晰的荧光显微图片。
倒置荧光显微镜具有工作距离长、适用于厚度较大的样品以及对光线入射角不敏感等特点，是生物学研究中常用的显微镜。
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手册导读请您在使用仪器前务必仔细阅读本手册。
特别提示：在操作前，务必把仪器左侧粗微动内侧的限位圈松开。
用途：LWD300-38LFT型倒置荧光显微镜是由倒置显微镜和落射荧光显微镜组成。
倒置显微镜具有在培养瓶或培养皿内进行显微观察的特点；落射荧光显微适用于荧光显微术。
仪器配有长工作距离平场消色差物镜、大视野目镜、双目观察，还配有特长或长工作距离聚光镜、同时配有相衬装置及相衬物镜，可以观察不经染色的透明活体；落射荧光显微镜采用落射光激发，荧光图象清晰。
该仪器特别适用于对活体细胞和组织、流质、沉淀物等进行显微研究，是生物学，细胞学，肿瘤学，遗传学，免疫学等研究工作的理想仪器。
可供科研、高校、医疗、防疫和农牧等部门使用一、规格1.目镜2.物镜3.总放大倍数4.聚光镜：特长工作距离聚光镜（带相衬装置）：工作距离75mm；5.大台面载物台：移动范围: 75mm×50mm；6.带限位和调节松紧装置的同轴粗微动调焦系统；微动手轮格值为: 0.002mm；7.瞳距调节范围：53mm~75mm；8.照明系统:A.透射照明光源12V30W卤素灯（亮度可调）；B.落射荧光光源100W超高压直流汞灯；9. 电源电压：110V（60Hz）或230V（50Hz）10.激发滤色片组：紫外光(UV)：激发光谱区域：330-400nm；可见荧光起始光谱：425nm.紫光(V)：激发光谱区域：395-415nm；可见荧光起始光谱：455nm.蓝光(B)：激发光谱区域：420-485nm；可见荧光起始光谱：515nm.绿光(G)：激发光谱区域：460-550nm；可见荧光起始光谱：590nm.11.防霉。
二、显微镜结构图一1.倒置灯箱2.汞灯灯箱3.移动机构4.纵向移动手轮5.横向移动手轮6.电源开关7调节松紧手轮8移动机构固紧螺钉9.载物台10.目镜11.挡板图二12.滤色片座13.三目头14.主体15粗动调焦手轮16.微动调焦手轮17.亮度旋钮18.激发滤色片组19.物镜20.汞灯灯箱固紧螺钉21.集光镜22.左右对中旋钮23上下对中旋钮24.相衬装置显微镜的安装图三1.物镜2.汞灯电源箱3.汞灯灯箱4.倒置灯箱5.相衬聚光镜组6.挡板7.三目头8.目镜四、显微镜观察操作按照图3所示安装所需组件，检查仪器工作电压是否与本地区的电网电压一致时，便可把电源插头插入电源插座。
Ⅰ．倒置观察的操作步骤1. 将电源开关9拨向“I”一边，接通电源（图1）。
2. 将激发滤色片组27拉出（图2）3. 将标本放在载物台13上，10×物镜转入工作位置，对标本调焦。
4. 调节瞳距和视度。
5. 调节聚光镜的位置、亮度调节旋钮10和孔径光栏调节转环39，以达到满意的照明状态。
（图1、2）6. 转换不同倍率物镜时，需用微动调焦手轮26稍作调节。
（图2）具体操作如下 1. 瞳距的调节把标本放在载物台上，用物镜对标本调焦，如图4所示调节双头的间距至双眼能观察到左右两视场合成一个视场。
2. 视度的调节把标本放在载物台上，将40X 物镜转入工作位置，先用右眼在右镜筒观察，旋转粗/微动调焦手轮，将标本像调清晰，然后用左眼在左镜筒观察，不转动粗/微动调焦手轮，转动视度调节圈1，使标本像清晰。
(图4) 3. 粗微动调节本机配备同轴同导轨的粗微动调焦机构，调节松紧手轮4为粗动调焦手轮3调校松紧时使用，以防产生物镜下滑或调节粗动手轮的使用舒适度。
同时还带有限位装置，限位固紧手柄1只要在已调整好的高度上旋紧定位，便可防止物镜和标本相撞及调焦的快速定位。
2为微动调焦手轮。
（图5） 4. 载物台载物台移动机构1可直接放置培养皿，还可安装培养皿载物板5或6，可用于各种培养皿和切片的观察。
纵向移动手轮3和横向移动手轮4同轴，纵/横向调节使用方便；当使用较大的培养皿时，可拧松移动机构固紧螺钉2，卸下移动机构1。
（图6）5. 三目头把三目头的观察/摄影推杆1推入观察位置时，可用于双目观察。
在三目头接头2上可装上摄影装置或CCD ，此时，要把观察/摄影推杆1拉开。
（图7）图四图五 图六图七6. 透射照明器调整旋转聚光镜升降手轮2，使特长工作距离聚光镜移到刻线处，在滤色片座20上放一张白纸（图1、2），调节集光镜调节手柄4，使灯丝清晰成象在白纸上，旋松灯座固紧螺钉2，移动灯座调节手柄1，如灯丝像不在通光孔的中间，可适当拨动灯泡，使灯丝像在通光孔的中间（如小图所示）。
旋紧灯座固紧螺钉2，使灯泡位置固定。
(图8)7. 长或特长工作距离相衬聚光镜的调节(选购)将10×物镜转入工作位置，用10×目镜观察，转动粗/微动调焦手轮25和26，使标本成象清晰，转动视场光栏调节转环19，使视场光栏关小，旋转聚光镜升降手轮2，使视场光栏清晰成象，然后用聚光镜调节螺钉37使视场光栏调至目镜视场中心，旋转视场光栏调节转环19，使视场光栏比目镜视场光栏稍大即可使用。
(图1、2) 8. 聚光镜孔径光栏调节旋转孔径光栏调节转环39，使其与物镜的数值孔径相匹配，以获得衬度好的图象和满意的照明。
（图2）9. 电源开关与亮度调节将电源开关9按向“Ⅰ”一边，接通电源，调节亮度旋钮10，使两眼能舒适地观察标本的像。
（图1）注意：尽量不要使亮度旋钮长时间处在最亮位置，以免降低灯泡使用寿命。
10. 超长工作距离聚光镜（选购）使用超长工作距离聚光镜时，旋松聚光镜固紧螺钉4，取出特长工作距离聚光镜，装入超长工作距离聚光镜，固紧聚光镜固紧螺钉4，旋转聚光镜升降手轮2，使聚光镜的光斑在标本上聚焦成亮点。
（图1） 11. 相衬装置A. 按步骤7的方法调整聚光镜。
B. 将需要的环形光栏板转入工作位置，旋转孔径光栏调节转环39，使孔径光栏开至最大。
(图2)C. 将对应倍数的相衬物镜转入工作位置。
D. 取出一只目镜，把对中望远镜插入目镜管，调节对中望 图八注意：每个相衬物镜进行相衬观察都要进行环形光栏对中校正。
12. 灯泡的更换 灯泡的更换如图8所示。
A. 关上电源开关，拔出电源线插头。
B. 更换灯泡时，松开灯座固紧螺钉2和灯座调节手柄1，将整个灯座3 拔出。
C. 取下旧灯泡，换上新灯泡。
D. 灯泡的调节，需重复”四、显微镜观察操作第6点”进行调节。
13． 保险丝的更换（图11）拨出电源插头2，取下保险丝座1，换上新的保险丝，插入保险丝座和电源线(图11)。
保险丝的规格为：φ5，0.5A 14. 当使用较高的培养器皿时，松开限位螺钉3，可以把聚光镜升降座38从光路中拨开。
（图1、2）Ⅱ． 荧光观察的操作步骤1. 打开汞灯电源箱电源开关，（按向“ON ”）指示灯“LIGHT ”表明汞灯打开了。
(图12)2. 将所需激发滤色片组27插入（图2）3. 把一张白纸放在载物台上，转换器不装物镜，调节集光镜手柄2使汞灯电弧清晰成像在白纸上(图13)。
4. 转动灯箱的上下对中钮3和左右对中钮4，使汞灯电弧成像 在通光孔中心（图13）5. 把10X 物镜转入光路，使视场光栏关小，用10X 目镜观察，旋转粗微动手轮，使视场光栏成像，然后用调校螺钉使视场光栏成像在视场中心，转动视场光栏手柄使视场光栏比目镜光栏稍大即可使用。
（图13） 图十图十一图十二图十三6. 荧光显微镜汞灯的更换 (图14) A. 关上电源，拨去插头。
B. 拧松灯箱固定螺钉1和移走侧板2。
C. 拧松两边的固紧螺钉3，取下汞灯4。
D. 用酒精清洗新汞灯，清除其表 面的污迹。
E. 装上新汞灯，让汞灯中心对正 固定螺钉5，固紧螺钉3。
F. 把侧板2装上并旋紧灯箱固紧 螺钉1。
荧光观察的注意事项：1. 当打开电源后，汞灯至少需要15分钟才能够稳定工作。
2. 当关闭汞灯后至少要冷却10分钟，汞灯才能够重新点燃。
3. 可将拉板1上的挡板拉入光路，防止标本经常受到照射，影响观察结果。
（图13）4. 也可将拉板1上的磨砂玻璃拉入光路，以减弱汞灯亮度。
5. 荧光观察时需关闭透射光源。
五、仪器维护1. 擦拭镜头可用沾酒精/乙醚混合液或二甲苯的镜头纸或脱脂棉。
2. 擦拭涂漆表面，可用纱布除去灰尘。
若有油渍污垢，用纱布沾少许汽油去除， 不能用有机溶剂（例如：酒精、乙醚和其它稀释剂）擦拭涂漆表面和塑料部件。
3. 显微镜是精密光学仪器，各零部件切勿随便拆卸，以免损害其操作效能和精度。
如有故障应送专业维修部门或我厂进行维修。
4. 仪器不使用时，用有机玻璃或聚乙烯罩子罩上，并存放于干燥且没有霉菌滋生的地方。
物镜和目镜最好放在有干燥剂的密闭容器中。
图十四六、常见故障的排除方法。