湿法装柱
干法装柱与湿法装柱讲课教案
干法装柱与湿法装柱柱层析和TLC是有机化学工作者必须下苦功夫的两项实验技术。
这两项技术掌握与否，对于提高实验的效率至关重要。
常见的例子是：在柱层析时，由于层析柱中的硅胶填料装得不均匀（没有填严实），使得柱子在淋洗过程中就因为出现太多气泡变花，导致分离效果不好。
更常见的例子是：层析柱虽然装得不错，但是由于淋洗剂选择不恰当，结果导致几十毫克产品，用了几百毫升淋洗剂都还没有完全分离。
分离同样的东西，熟手可能只需要半个小时，而一个层析技术不过关的人可能半天都不能得到纯品。
由此可见，这两项技术掌握与否，对于提高工作效率，减轻工作量，减少有机溶剂的使用，从而对身心健康和环境保护都有明显的作用。
柱层析关键在于柱子是否装好和淋洗剂是否选择恰当。
而淋洗剂的选择则是通过 TLC确定。
这里要指出的一点是：TLC的作用除了跟踪反应进程，检测试剂和原料纯度外，一个重要的用途就是为柱层析选择适当的淋洗剂。
首先谈柱层析：装柱子（添硅胶）时，有两种方法：即湿法装柱和干法装柱，二者各有优劣。
不论干法还是湿法，硅胶（固定相）的上表面一定要平整，并且硅胶（固定相）的高度一般为15cm左右，太短了可能分离效果不好，太长了也会由于扩散或拖尾导致分离效果不好。
湿法装柱是先把硅胶用适当的溶剂拌匀后，再填入柱子中，然后再加压用淋洗剂“走柱子”，本法最大的优点是一般柱子装的比较结实，没有气泡。
干法装柱则是直接往柱子里填入硅胶，然后再轻轻敲打柱子两侧，至硅胶界面不再下降为止，然后再填入硅胶至合适高度，最后再用油泵直接抽，这样就会使得柱子装的很结实。
接着是用淋洗剂“走柱子”，一般淋洗剂是采用TLC分析得到的展开剂的比例再稀释一倍后的溶剂。
通常上面加压，下面再用油泵抽，这样可以加快速度。
干法装柱较方便，但最大的缺陷在于“走柱子”时，由于溶剂和硅胶之间的吸附放热（可以用手摸柱子明显感觉到），容易产生气泡，这一点在使用低沸点的淋洗剂时如乙醚，二氯甲烷更为明显。
湿法装柱有什么注意事项
湿法装柱有什么注意事项湿法装柱是一种重要的分离技术，广泛应用于化工、制药、食品等行业。
在进行湿法装柱过程中，需要注意以下几个方面。
首先，应仔细选择合适的填料。
填料是湿法装柱中最关键的部分，直接关系到分离效果和操作性能。
常见的填料有石英砂、离子交换树脂、活性炭等。
选择填料时需要考虑其耐酸碱性、耐磨性、热传导性等因素，并根据具体的应用需要进行选择。
其次，要注意控制进料速度。
湿法装柱过程中，进料速度会直接影响分离效果。
如果进料速度过快，会导致柱床压降过高，影响操作稳定性；而进料速度过慢，则会延长操作时间。
因此，需要通过实验确定适宜的进料速度，并进行精确控制。
第三，要合理控制流量。
湿法装柱中，流量的控制对于分离效果也非常重要。
一方面，流量过大会导致液体在柱床中的停留时间过短，降低分离效果；另一方面，流量过小则可能造成柱床堵塞。
因此，在操作中需要根据具体情况合理控制流量，确保液体在柱床中的停留时间充足。
第四，要注意保持适当的温度。
温度对于柱床中物质的分离也会产生一定的影响。
在一些特定的分离过程中，适当的升温可以增加分离效果；而在另一些分离过程中，降低温度则可以提高分离效果。
因此，在操作过程中需要根据具体情况调整温度，并进行实验验证。
第五，要注意互相干扰的问题。
在湿法装柱过程中，不同的物质可能会相互干扰，影响分离效果。
为了解决这个问题，可以采取适当的柱床结构设计，如增加多级分离柱、使用不同形状的填料等。
此外，也可以通过改变进料溶液的pH值、添加伴随剂等方式进行处理。
第六，要保证柱床的稳定性。
柱床的稳定性是湿法装柱过程中非常重要的一点。
如果柱床不稳定，会导致填料颗粒的堆积和拌动，从而影响分离效果。
为了保证柱床的稳定性，可以使用适当的填料层高度和柱床直径，增加填料颗粒间的摩擦力。
最后，要做好仪器仪表的校准和维护工作。
湿法装柱过程中，仪器仪表的准确性和稳定性对操作结果有着重要的影响。
因此，在操作前需要对仪器仪表进行校准，并定期进行维护和检修，确保其正常运行。
干法装柱和湿法装柱
干法装柱/湿法装柱2010-03-29 11:18:49| 分类：药物化学| 标签：溶剂硅胶柱子极性 tlc |字号大中小订阅来源：/39351524.html柱层析和TLC是有机化学工作者必须下苦功夫的两项实验技术。
这两项技术掌握与否，对于提高实验的效率至关重要。
常见的例子是：在柱层析时，由于层析柱中的硅胶填料装得不均匀（没有填严实），使得柱子在淋洗过程中就因为出现太多气泡变花，导致分离效果不好。
更常见的例子是：层析柱虽然装得不错，但是由于淋洗剂选择不恰当，结果导致几十毫克产品，用了几百毫升淋洗剂都还没有完全分离。
分离同样的东西，熟手可能只需要半个小时，而一个层析技术不过关的人可能半天都不能得到纯品。
由此可见，这两项技术掌握与否，对于提高工作效率，减轻工作量，减少有机溶剂的使用，从而对身心健康和环境保护都有明显的作用。
柱层析关键在于柱子是否装好和淋洗剂是否选择恰当。
而淋洗剂的选择则是通过TLC确定。
这里要指出的一点是：TLC的作用除了跟踪反应进程，检测试剂和原料纯度外，一个重要的用途就是为柱层析选择适当的淋洗剂。
首先谈柱层析：装柱子（添硅胶）时，有两种方法：即湿法装柱和干法装柱，二者各有优劣。
不论干法还是湿法，硅胶（固定相）的上表面一定要平整，并且硅胶（固定相）的高度一般为15cm左右，太短了可能分离效果不好，太长了也会由于扩散或拖尾导致分离效果不好。
湿法装柱是先把硅胶用适当的溶剂拌匀后，再填入柱子中，然后再加压用淋洗剂“走柱子”，本法最大的优点是一般柱子装的比较结实，没有气泡。
干法装柱则是直接往柱子里填入硅胶，然后再轻轻敲打柱子两侧，至硅胶界面不再下降为止，然后再填入硅胶至合适高度，最后再用油泵直接抽，这样就会使得柱子装的很结实。
接着是用淋洗剂“走柱子”，一般淋洗剂是采用TLC 分析得到的展开剂的比例再稀释一倍后的溶剂。
通常上面加压，下面再用油泵抽，这样可以加快速度。
干法装柱较方便，但最大的缺陷在于“走柱子”时，由于溶剂和硅胶之间的吸附放热（可以用手摸柱子明显感觉到），容易产生气泡，这一点在使用低沸点的淋洗剂时如乙醚，二氯甲烷更为明显。
装柱与上样的方法
湿法装柱是先把硅胶用适当的溶剂拌匀后，再填入柱子中，然后再加压用淋洗剂"走柱子"，本法最大的优点是一般柱子装的比较结实，没有气泡。
干法装柱则是直接往柱子里填入硅胶，然后再轻轻敲打柱子两侧，至硅胶界面不再下降为止，然后再填入硅胶至合适高度，最后再用油泵直接抽，这样就会使得柱子装的很结实。
接着是用淋洗剂"走柱子"，一般淋洗剂是采用TLC分析得到的展开剂的比例再稀释一倍后的溶剂。
通常上面加压，下面再用油泵抽，这样可以加快速度。
干法装柱较方便，但最大的缺陷在于"走柱子"时，由于溶剂和硅胶之间的吸附放热（可以用手摸柱子明显感觉到），容易产生气泡，这一点在使用低沸点的淋洗剂时如乙醚，二氯甲烷更为明显。
虽然产生的气泡在加压的情况下不易察觉，但是，一旦撤去压力，如在上样、加溶剂等操作的时候，气泡就会释放出来，严重时，整个柱子变花，样品不可能平整地通过，当然也就谈不上分离了。
解决的办法是：第一、硅胶一定要天结实；第二、一定要用较多的溶剂"走柱子"，一定要到柱子的下端不再发烫，恢复到室温后再撤去压力。
也有介绍在硅胶的最上层填上一小层石英砂，防止添加溶剂的时候，使得样品层不再整齐。
但我的感觉是如果小心上样，添加溶剂，则没有这个必要。
上样也有干法和湿法之分：干法就是把待分离的样品用少量溶剂溶解后，在加入少量硅胶，拌匀后再旋去溶剂。
如此得到的粉末再小心加到柱子的顶层。
干法上样较麻烦，但可以保证样品层很平整。
湿法上样就是用少量溶剂（最好就是展开剂，如果展开剂的溶解度不好，则可以用一极性较大的溶剂，但必须少量）将样品溶解后，再用胶头滴管转移得到的溶液，沿着层析柱内壁均匀加入。
然后用少量芗洗涤后，再加入。
湿法较方便，熟手一般采用此法.关于TLC和柱层析之我的体会(转)柱层析和TLC是有机化学工作者必须下苦功夫的两项实验技术。
这两项技术掌握与否，对于提高实验的效率至关重要。
湿法装柱实验报告
湿法装柱实验报告引言湿法装柱是一种常用的分离和分析实验技术，广泛应用于化学、生物学和环境科学等领域。
它通过溶液在柱状载体中的流动和相互作用，实现多种物质的分离纯化和测定。
本实验旨在通过湿法装柱实验，熟悉该技术的操作步骤和原理，并掌握柱装填和柱洗脱的基本技巧。
实验步骤1. 准备工作：将色谱柱放置于网板上，用洗净的纯水进行水洗，使柱内的阻力逐渐降低，达到符合要求的柱洗脱效果。
2. 柱装填：取一定质量的固相材料，将其加入色谱柱中。
用手轻轻震动柱子，使固相材料自然下沉，均匀填满柱空。
3. 柱洗脱：用移液管将待测样品缓缓加入色谱柱底部，使其自上而下通过柱床，与固相材料接触发生吸附和洗脱。
根据需要，可以使用不同的洗脱剂和梯度洗脱。
4. 实时监测：在实验过程中，可以通过检测流出液的吸光度或荧光强度变化等指标，实时监测柱洗脱的进程和结果。
5. 结果分析：根据实验数据，可以确定待测物质的保留时间、峰形和峰面积等信息，进而进行分析和定量测定。
实验结果在本次实验中，我们选取了一种常见的混合物进行柱洗脱实验。
根据实时监测和结果分析，我们成功地实现了混合物的分离和纯化。
通过观察得到的色谱图，我们确定了两种成分的保留时间和峰形，并计算出各成分的峰面积比例。
结果讨论湿法装柱是一种常见的分离技术，广泛应用于化学、生物学和环境科学等领域。
本次实验中我们选取了一种混合物进行柱洗脱，成功地实现了成分的分离纯化。
柱洗脱的操作过程中，需要注意以下几点：- 柱装填应均匀填满，确保柱床内固相材料的紧密度和稳定结构。
- 洗脱剂的选择要根据待测物质的性质和实验目的进行合理搭配。
- 实时监测柱洗脱的过程和结果，可以根据结果调整实验条件，达到更好的分离效果。
在结果分析中，我们通过观察色谱图确定了各成分的保留时间和峰形特征。
通过计算峰面积可以反映成分的相对含量。
这些数据对于进一步分析和定量测定成分非常重要。
结论本次实验通过湿法装柱技术成功实现了混合物成分的分离纯化。
湿法装柱操作
湿法装柱操作湿法装柱是一种常用的实验操作方法，用于分离和纯化化合物。
本文将介绍湿法装柱操作的步骤和注意事项。
1. 实验室准备在进行湿法装柱操作前，需要准备以下实验室设备和试剂：- 玻璃柱：选择适当尺寸的玻璃柱，通常为直径1-3厘米，长度10-30厘米。
- 硅胶：根据待分离化合物的性质选择合适的硅胶填料。
- 柱床：用玻璃棉或石英棉填充柱底，以防止填料流失。
- 硅胶层：将适量的硅胶填料均匀地填充到玻璃柱内。
- 洗涤剂：选择适当的洗涤剂，如正己烷、醚类、乙酸乙酯等，用于洗脱目标化合物。
- 试剂：根据实验需求，准备好所需的化合物和溶剂。
2. 柱装填将玻璃柱立在柱床上，将硅胶填料均匀地倒入柱内，用玻璃棉或石英棉轻轻压实柱底，以防止填料流失。
然后，缓缓加入适量的溶剂，使硅胶完全湿润，并排除气泡。
3. 样品加载将待分离的化合物溶解在适当的溶剂中，使其浓度适中。
然后，用吸管将样品缓慢地滴入玻璃柱顶部，避免形成空隙或破坏硅胶层。
4. 洗涤剂选择根据待分离化合物的极性以及目标纯化的要求，选择合适的洗涤剂。
通常情况下，先用非极性洗涤剂进行洗脱，再逐渐增加极性洗涤剂的浓度。
5. 洗脱过程将洗涤剂缓缓地滴入玻璃柱顶部，注意控制滴液速度，避免硅胶层破裂。
洗涤剂通过硅胶层时，不同化合物会按照其极性的不同程度被吸附和保留，从而实现分离。
根据需要，可以重复使用洗涤剂进行多次洗脱。
6. 收集分离物洗脱液通过玻璃柱后，将其中的目标化合物收集起来。
收集的方法可以是分级收集，即将洗脱液分为若干部分，每一部分收集不同极性的化合物。
也可以是连续收集，即将洗脱液全部收集在同一个容器中。
7. 柱清洗和保存在实验结束后，需要将玻璃柱清洗干净并储存起来。
清洗时，可以使用洗涤剂和溶剂反复冲洗玻璃柱，以去除残留的化合物和填料。
清洗干净后，将玻璃柱倒立晾干，并储存在干燥的地方。
湿法装柱操作是一种常见的分离和纯化化合物的方法，通过调整填料和洗涤剂的选择，可以实现对不同极性化合物的有效分离。
装柱
1.装柱装柱前先将色谱柱洗干净，进行干燥，在柱底铺一小块脱脂棉，再铺约0.5cm厚的石英砂（我做实验的时候脱脂棉和石英砂都没铺，柱子底本身是一层白的，直接装的柱子），然后进行装柱。
装柱分为湿法装柱和干法装柱两种（咱们做的是湿法的）。
（1）湿法装柱将吸附剂（氧化铝和硅胶）用洗脱剂中极性最低的洗脱剂调成糊状，在柱内先加入约¾柱高的洗脱剂，再将调好的洗脱剂边敲边倒入柱中，同时，打开下旋活塞，在色谱柱下面放一个干净并且干燥的锥形瓶或烧杯，接收洗脱剂。
当装入的洗脱剂有一定的高度时，洗脱剂下流速度变慢，待所用吸附剂全部装完后，用流下来的洗脱剂转移残留的吸附剂，并将柱内壁残留的吸附剂淋洗下来。
以便色谱柱填充均匀并没有气泡。
柱子填充完后，在吸附剂上端覆盖一层约0.5cm厚的石英砂（这个我也没做，加完柱后，师姐直接让加的样品）。
覆盖石英砂的目的，一是使样品均匀的流入吸附剂表面，二是当加入洗脱剂时，它可以防止洗脱剂表面被破坏。
在整个装柱过程中，柱内洗脱剂的高度始终不能低于吸附剂最上端，否则柱内会出现裂痕和气泡。
（2）干法装柱在色谱柱上端放一个干燥的漏斗，将吸附剂倒入漏斗中，使其成为一细流，连续不断的装入柱中，并轻轻敲打色谱柱柱身，使其填充均匀，再加入洗脱剂湿润。
也可加入3/4的洗脱剂，然后再倒入干的吸附剂。
装好吸附剂后，再在上面加一层约0.5cm的石英砂。
2.样品的加入及色谱柱的展开液体样品可直接加入到色谱柱中，如浓度低，可浓缩后再行上柱（就是把要过的东西弄得浓度大点，再加柱子里）。
固体样品应先用最少量（以溶解为准，溶解了就行）的溶剂溶解后再加入到柱中。
在加入样品时，应先将柱内洗脱剂排至稍低于石英砂表面后停止排液，用滴管沿柱内壁把样品一次加完。
在加入样品时，应注意滴管应尽量向下靠近石英砂表面。
样品加完后，打开下旋活塞，使液体样品进入石英砂后，再加入少量的洗脱剂将壁上的样品洗下来，待这部分液体进入石英砂层后，再加入洗脱剂进行淋洗，直至所有色带被展开。
干法湿法装柱子及TLC制备实验原理实验报告总结
干法湿法装柱子及TLC制备实验原理实验报告总结柱层析和TLC是有机化学工作者必须下苦功夫的两项实验技术。
这两项技术掌握与否，对于提高实验的效率至关重要。
常见的例子是：在柱层析时，由于层析柱中的硅胶填料装得不均匀（没有填严实），使得柱子在淋洗过程中就因为出现太多气泡变花，导致分离效果不好。
更常见的例子是：层析柱虽然装得不错，但是由于淋洗剂选择不恰当，结果导致几十毫克产品，用了几百毫升淋洗剂都还没有完全分离。
分离同样的东西，熟手可能只需要半个小时，而一个层析技术不过关的人可能半天都不能得到纯品。
由此可见，这两项技术掌握与否，对于提高工作效率，减轻工作量，减少有机溶剂的使用，从而对身心健康和环境保护都有明显的作用。
柱层析关键在于柱子是否装好和淋洗剂是否选择恰当。
而淋洗剂的选择则是通过TLC确定。
这里要指出的一点是：TLC的作用除了跟踪反应进程，检测试剂和原料纯度外，一个重要的用途就是为柱层析选择适当的淋洗剂。
首先谈柱层析：装柱子（添硅胶）时，有两种方法：即湿法装柱和干法装柱，二者各有优劣。
不论干法还是湿法，硅胶(固定相)的上表面一定要平整，并且硅胶(固定相)的高度一般为15cm左右，太短了可能分离效果不好，太长了也会由于扩散或拖尾导致分离效果不好。
湿法装柱是先把硅胶用适当的溶剂拌匀后，再填入柱子中，然后再加压用淋洗剂“走柱子”，本法最大的优点是一般柱子装的比较结实，没有气泡。
干法装柱则是直接往柱子里填入硅胶，然后再轻轻敲打柱子两侧，至硅胶界面不再下降为止，然后再填入硅胶至合适高度，最后再用油泵直接抽，这样就会使得柱子装的很结实。
接着是用淋洗剂“走柱子”，一般淋洗剂是采用TLC分析得到的展开剂的比例再稀释一倍后的溶剂。
通常上面加压，下面再用油泵抽，这样可以加快速度。
干法装柱较方便，但最大的缺陷在于“走柱子"时，由于溶剂和硅胶之间的吸附放热（可以用手摸柱子明显感觉到)，容易产生气泡，这一点在使用低沸点的淋洗剂时如乙醚，二氯甲烷更为明显。
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湿法装柱，干法上样-解析
在产品旋蒸时加入1-2勺硅胶粉（看柱子的大小），旋蒸至梨形瓶内的有机相的产物均匀附着在硅胶颗粒上，用小勺将瓶壁上附着的硅胶层刮下来（如果有），粉末保存在此瓶中。
用于后续的干法上样。
装柱：
1.取出柱层析硅胶粉于一250ml的烧杯中，向其中加入适量定好的洗脱剂（即用相同
机型的有机溶剂装柱）用玻璃棒搅拌至均匀。
2.安装好装置后，打开柱子的旋塞，下方放一个三角瓶接着留下来的溶剂。
将调好的
硅胶-洗脱剂溶液倒入柱子中，倒一部分，就在上方接双联球对体系加压，使柱子压实直到硅胶柱的高度到达整柱的约三分之二（期间用吸管吸取柱子下方锥形瓶内的洗脱剂冲洗一下柱子，最后稍微弹一下柱子使硅胶面水平）。
之后继续开着柱子旋塞使硅胶柱上方的洗脱剂液面下降至硅胶面上方2cm，关掉旋塞。
加入中性氧化铝，铺一层氧化铝层约2-3cm,加完后用吸管吸取柱子下方锥形瓶内的洗脱剂冲洗一下柱子，将壁上的中性氧化铝粉末冲下来，稍微弹一下柱子使液面水平。
开旋塞使液面在氧化铝层上方2cm。
关掉旋塞。
3.上干样：将得到的硅胶-样品粉末倒在一张纸上，接着转移到硅胶柱上（此时旋塞关
闭），用吸管吸取柱子下方锥形瓶内的洗脱剂冲洗一下原先存放样品-硅胶粉末的梨形瓶和柱子（此时旋塞关闭），取出一细铁丝在样品层中小心搅拌，不要破坏样品
层下方的中性氧化铝层，将样品层中夹带的空气泡赶出。
打开旋塞，使液面下降至被分离样品面上方2cm，再次加入中性氧化铝，使得样品层上方铺一层氧化铝层（约2-3cm），用吸管吸取柱子下方锥形瓶内的洗脱剂冲洗柱子。
4.硅胶柱上还需接一个增容器，就是上下都有接口的球形玻璃，它的作用是可以加大
量洗脱剂，一段时间不用担心柱子会干。
增容器上还可以连双联球，以对体系加压，调节洗脱的流速。
5.打开旋塞，用三角瓶接流下来的液体，期间应不停点板，看有没有点出现。
6.TIPS：如果需要分离提纯的样品量少，那么洗脱开始后就10ml接一次；如果量多的
话，20ml/30ml换一次瓶一次都行。