医疗器械生物相容性概述
医疗器械的生物学评价
医疗器械的生物学评价医疗器械的生物学评价是指对医疗器械使用过程中对人体组织的影响进行综合评估的过程。
生物学评价是保障医疗器械质量和安全性的重要环节，在医疗器械监管中起着至关重要的作用。
本文将围绕医疗器械的生物学评价展开，包括评价的要素、方法和应用。
一、医疗器械生物学评价的要素医疗器械的生物学评价主要包括对其生物相容性、毒性和致敏性的评价。
生物相容性是指医疗器械与人体组织相互作用时所引发的生物学反应程度，包括细胞毒性、组织刺激等。
毒性评价是对医疗器械可能产生的有害物质、剂量和暴露时间对人体组织产生的损伤进行评估。
致敏性评价是指医疗器械可能引发的过敏反应和过敏原的评估。
二、医疗器械生物学评价的方法1. 体外试验法：通过对医疗器械与细胞、组织相互作用的体外试验，评估其生物相容性。
常用的方法包括细胞毒性试验、组织刺激试验、染毒试验等。
这些试验能够定量评估医疗器械与人体组织的相互作用程度，为进一步的评价提供重要的参考依据。
2. 动物试验法：通过在动物体内进行试验，评估医疗器械对机体的影响。
常用的动物试验包括急性毒性试验、慢性毒性试验等。
这些试验能够模拟真实情况下医疗器械对人体组织的影响，评估其潜在的生物安全性。
3. 临床观察法：通过对医疗器械在临床应用中的观察和统计，评估其安全性和有效性。
临床观察法是生物学评价的最后一道防线，能够反映医疗器械在真实使用环境中的实际效果。
临床观察法的结果是医疗器械是否能够获得市场准入的重要依据。
三、医疗器械生物学评价的应用医疗器械的生物学评价在医疗器械监管和临床应用中具有广泛的应用价值。
1. 医疗器械注册和审批：医疗器械的生物学评价是医疗器械注册和审批的重要依据。
相关部门会要求医疗器械生产企业提供生物学评价的报告以证明其安全性和有效性。
2. 医疗器械监管：生物学评价作为医疗器械监管的重要内容，能够帮助监管部门及时发现和处理医疗器械的安全问题，保障患者的生命和健康。
3. 病患选择：在一些特殊情况下，如免疫功能低下的患者、儿童和孕妇等，生物学评价可以帮助医生选择合适的医疗器械，减少患者的风险。
医疗器械生物相容性概述
医疗器械生物相容性概述医疗器械生物相容性是指医疗器械与人体组织或体液接触时，不引起明显的局部或全身的生物反应，并保证其安全可靠的性能和功能。
它是医疗器械安全性的一个重要方面，也是医疗器械设计和开发过程中必须考虑的关键问题之一医疗器械生物相容性主要与器械的材料特性和使用环境有关。
医疗器械的材料通常具有良好的机械性能、化学稳定性和耐久性，同时也需要具备良好的生物相容性。
生物相容性可以通过多种方法进行评价，如体外试验、动物试验和临床试验等，从而确保医疗器械在人体内无不良反应，不会引起组织刺激、炎症、出血、感染等不良后果。
生物相容性评价主要包括体外试验和体内试验两个方面。
体外试验主要通过将材料与模拟人体体液接触，观察材料与体液的相互作用。
体内试验则将材料植入动物体内，观察其在体内的相容性和安全性。
这些试验可以评价材料的局部刺激性、细胞毒性、致敏性、血栓形成、感染性等。
在医疗器械设计和开发过程中，需要从材料选择、制备工艺到最终产品的使用环境等方面全面考虑生物相容性。
首先，材料选择要考虑材料的生物相容性和机械性能等方面的要求，要选择符合要求的生物相容性良好的材料。
其次，制备工艺要保证产品的生物相容性，例如，要避免材料表面的污染、残留物和加工助剂等对生物相容性的影响。
最后，产品的使用环境也是影响生物相容性的重要因素，要确保产品在使用时不发生疼痛、感染、出血等不良反应。
医疗器械的生物相容性是一个综合性和复杂性的问题，它涉及到材料科学、生物学、医学等多个学科的知识。
对于医疗器械生产厂商来说，要确保产品的生物相容性，需要进行全面而细致的生物相容性评价和测试。
同时，也需要不断提高材料的生物相容性和制备工艺，以满足不断发展和更新的医疗器械需求。
医疗器械生物相容性的研究和应用具有重要的意义。
它不仅可以保证医疗器械的安全可靠性，还可以提高患者的治疗效果和生活质量。
同时，也为医疗器械产业的可持续发展提供了技术支持和保障。
因此，加强医疗器械生物相容性的研究和应用，对于推动医疗器械产业的创新和发展具有重要的意义。
医疗器械生物相容性评价标准
医疗器械生物相容性评价标准引言医疗器械生物相容性评价是指通过一系列实验和评估，评价医疗器械与生物体相互作用的能力和潜在风险。
该评价的结果对于确保医疗器械的安全性和有效性至关重要。
本文档旨在提供医疗器械生物相容性评价的标准和规范，以便医疗器械生产企业和相关研究机构能够遵循，确保医疗器械的生物相容性评价工作符合要求。
范围本文档适用于医疗器械生物相容性评价的各个环节，包括但不限于生物材料选择、实验设计、样品制备、生物相容性实验、数据分析和评估报告等。
生物材料选择在进行医疗器械生物相容性评价之前，应根据器械的用途选择适当的生物材料。
生物材料的选择应考虑其安全性、功能性、机械性能等因素，并符合相应的国家和行业标准。
实验设计生物相容性评价的实验设计应合理、可行，并符合相关法规和标准的要求。
实验设计应明确实验对象、实验方法、实验参数和实验周期等重要信息，以确保评价结果的可靠性和可重复性。
样品制备样品制备过程应严格控制，以确保样品的一致性和可比性。
样品制备前应清洗和消毒，并确保不会对评价结果产生干扰或造成误差。
生物相容性实验根据具体的医疗器械类型和使用环境，选择合适的生物相容性实验方法进行评价。
常用的生物相容性实验方法包括细胞毒性实验、皮肤刺激实验、局部组织反应实验、全身毒性实验等。
实验过程中应记录实验条件、观察结果和实验数据，并及时采取相应的措施处理异常情况。
数据分析和评估报告生物相容性评价的数据应进行系统的分析和评估，以便评估器械与生物体相互作用的潜在风险。
评估报告应包括实验目的、方法、结果和结论，并对可能存在的问题和风险进行分析和建议。
结论医疗器械生物相容性评价是确保医疗器械安全性和有效性的重要环节。
本文档提供了一套医疗器械生物相容性评价的标准和规范，希望对医疗器械生产企业和相关研究机构提供帮助，促进医疗器械的研发和应用。
本文档共计801字。
希望对您有所帮助！。
医疗器械生物相容性评价要求
医疗器械生物相容性评价要求医疗器械生物相容性评价是指对医疗器械与生物体接触时产生的生物学反应进行评估的过程。
其目的是确定医疗器械对人体组织或体液的接触是否安全，以及对生物体是否产生不良影响。
根据国际标准和法规，医疗器械生物相容性评价需要满足以下几个主要要求。
首先，医疗器械生物相容性评价需要进行全面的物理化学分析。
这包括对医疗器械的材料成分、制造工艺、表面处理和可能存在的污染物进行详细分析。
物理化学测试可以确定医疗器械是否包含有害物质，例如重金属、残留溶剂或有害物质，以及是否存在器械破碎与粉尘脱落等情况。
其次，医疗器械生物相容性评价需要进行细胞毒性测试。
细胞毒性测试是评估器械对人体细胞的直接影响的重要手段。
通过将医疗器械与不同类型的细胞（如小鼠纤维母细胞、人类纤维母细胞、人类白细胞等）接触，观察和记录细胞的形态、增殖能力和细胞膜完整性等指标的变化来评估其细胞毒性。
第三，医疗器械生物相容性评价需要进行体外致敏测试。
致敏反应通常是指人体免疫系统对特定物质产生过敏反应。
通过接触医疗器械与免疫系统相关的细胞或体外免疫学试验系统，评估器械的致敏潜力。
这些测试可以确定医疗器械是否会导致过敏反应，并对不同类型的免疫细胞或物质产生变化。
第四，医疗器械生物相容性评价需要进行皮肤刺激测试。
皮肤刺激测试是评估外体与皮肤接触后对皮肤的直接影响的重要手段。
通过将医疗器械与动物或人体的皮肤接触，观察和记录皮肤的变化，如红肿、瘙痒、水泡等，来评估医疗器械对皮肤是否刺激。
最后，医疗器械生物相容性评价需要进行体内植入试验。
体内植入试验是评估医疗器械对人体组织和器官的影响的最重要手段。
通过将医疗器械植入动物体内，观察和记录植入部位的组织反应、炎症或纤维化等指标的变化来评估其影响。
除了以上主要要求外，医疗器械生物相容性评价还需要考虑其他因素，如器械的持久性、局部和全身反应等。
此外，医疗器械的生物相容性评价需要根据不同种类的器械和其应用领域的要求进行具体设计和开展。
医疗器械技术评估的生物相容性与毒理学评价
医疗器械技术评估的生物相容性与毒理学评价医疗器械的技术评估对于确保其安全性和有效性至关重要。
其中，生物相容性和毒理学评价是评估医疗器械使用过程中的重要环节。
本文将以技术评估的角度，介绍医疗器械生物相容性与毒理学评价的相关内容。
一、生物相容性评价生物相容性评价是评估医疗器械与人体组织或生物系统之间相互作用的过程。
它能够揭示出医疗器械对人体的生物相容性及可能引发的不良反应，为医疗器械的研发和使用提供重要依据。
1. 生物相容性试验生物相容性试验是通过体外或动物实验的方法，对医疗器械的生物相容性进行评价。
常用的试验包括细胞毒性试验、局部组织刺激试验、皮肤过敏试验等。
通过这些试验可以评估医疗器械与人体组织的相互作用情况，发现潜在的生物相容性问题。
2. 生物相容性评价指标生物相容性评价指标主要包括细胞毒性、致敏性、局部刺激性、体内毒理性等。
细胞毒性是评估医疗器械对人体细胞的毒性作用；致敏性是评估医疗器械对人体引发过敏反应的能力；局部刺激性是评估医疗器械对人体局部组织的刺激作用；体内毒理性是评估医疗器械在体内引发的毒性反应。
3. 生物相容性评价标准生物相容性评价标准是根据国家、国际相关标准制定的，如美国FDA的生物相容性评价标准，欧洲药典和ISO标准等。
它们规范了医疗器械生物相容性评价的方法和指标，确保医疗器械的生物相容性符合国际要求，保障患者的安全。
二、毒理学评价毒理学评价是通过对医疗器械成分或材料进行毒理学实验，评估医疗器械对人体的潜在毒性。
毒理学评价有助于揭示医疗器械可能引发的毒性反应，为医疗器械的设计和选择提供依据。
1. 毒理学试验毒理学试验包括急性毒性试验、亚慢性和慢性毒性试验、基因毒性试验等。
急性毒性试验用于评估医疗器械对人体的一次性毒性效应；亚慢性和慢性毒性试验用于评估医疗器械长期使用所引发的潜在毒性效应；基因毒性试验用于评估医疗器械对遗传物质的损伤程度。
2. 毒理学评价指标毒理学评价指标包括急性毒性指标、亚慢性和慢性毒性指标、基因毒性指标等。
生物相容性
生物相容性生物相容性是指生物体或人工材料与生物体之间相互作用的程度。
在医疗领域，生物相容性是用于评估材料与人体组织相互作用的重要指标。
合适的生物相容性在医疗器械、生物医学材料和组织工程等领域的应用中起到了至关重要的作用。
生物相容性的重要性在医疗器械和生物医学材料的设计与开发中，生物相容性的评估是非常必要的。
生物相容性评估可以帮助科学家和工程师判断材料是否会引起不良反应，如炎症、免疫反应、血栓形成等。
如果材料的生物相容性不佳，可能会导致患者的健康风险和治疗效果的下降。
同时，优异的生物相容性对于人工器官、组织工程和再生医学的发展也至关重要。
通过合适的材料选择和设计，可以使人工器官和组织工程产品具有更好的相容性，从而提高其成功率和效果。
生物相容性评估方法生物相容性评估通常通过体内、体外和计算模拟等不同手段进行。
下面是一些常用的生物相容性评估方法：细胞培养细胞培养是一种体外评估生物相容性的方法，在实验室中对材料与细胞进行共培养。
这种方法可以通过观察细胞的形态、增殖和代谢等指标来评估材料对细胞的影响。
常用的细胞培养包括完整细胞培养、微型组织工程和三维细胞培养等。
动物实验动物实验被广泛用于评估材料的生物相容性。
通过将材料植入动物体内，观察其对动物组织和器官的影响。
常见的动物实验包括小鼠、大鼠和猪等试验动物。
动物实验的结果可以提供更接近真实情况的生物相容性评估。
体外测试体外测试是一种通过在体外环境中模拟生物体内环境来评估材料的生物相容性。
通常使用血液、体液和细胞培养液等模拟液体，将材料暴露在其中，观察其对液体的相容性和相互作用。
体外测试可以帮助科学家预测材料在体内的相容性表现。
计算模拟计算模拟是一种通过数学模型和计算机模拟来评估材料的生物相容性。
通过建立材料与生物体组织的相互作用模型，预测材料与生物体之间的相容性。
计算模拟可以提供更快速、经济和可重复的生物相容性评估方法。
影响生物相容性的因素生物相容性受到多种因素的影响，包括材料的化学性质、物理性质以及表面特性等。
医疗器械生物相容性评价要求
医疗器械生物相容性评价要求引言医疗器械的生物相容性评价是确保器械与人体组织和生物体相容的重要步骤。
它对于确保器械的质量、安全性和效能至关重要。
本文旨在介绍医疗器械生物相容性评价的要求，包括评价标准、实验方法和技术要求。
评价标准医疗器械生物相容性评价的标准通常依据ISO 10993系列标准来制定。
ISO 10993系列标准包含了一系列评价项目和方法，用于评估医疗器械与人体之间的相互作用。
根据ISO 10993标准，器械的生物相容性评价需要考虑以下几个方面：1.毒性评价：评估器械对生物体的毒性作用，包括急性毒性、亚慢性和慢性毒性。
2.局部刺激和过敏原评价：评估器械对组织的刺激性和过敏原性。
3.整体系统毒性评价：评估器械在全身水平上对生物体的影响。
4.免疫学评价：评估器械对免疫系统的影响。
5.遗传学评价：评估器械对遗传物质的影响。
6.感染性评价：评估器械的感染风险。
7.其他特殊评价：根据器械的特殊属性，可能需要进行其他特殊评价。
实验方法为了评估医疗器械的生物相容性，需要进行一系列实验。
常用的实验方法包括但不限于以下几种：1.细胞毒性实验：通过培养细胞与器械接触，观察细胞生长、代谢和形态等指标的变化，以评估器械对细胞的毒性作用。
2.刺激性实验：将器械接触到动物体表面或者注射到动物体内，观察皮肤炎症、红肿、溃疡等指标的变化，以评价器械对组织的刺激性。
3.过敏原实验：通过接触器械，观察动物是否产生过敏反应，如皮肤红疹、瘙痒等。
4.免疫学实验：通过调节免疫系统的指标，评估器械对免疫系统的影响。
5.感染性实验：通过培养器械与微生物接触，观察细菌、真菌等的生长情况，以评估器械的感染风险。
技术要求医疗器械生物相容性评价需要遵循严格的技术要求，以确保结果的准确性和可靠性。
以下是一些常见的技术要求：1.实验室条件：评价实验需要在符合相关规范的实验室条件下进行，包括温度、湿度、洁净度等要求。
2.试剂选择：选择符合相关标准的试剂，避免对实验结果的影响。
生物相容性聚合物在医疗器械中的应用
生物相容性聚合物在医疗器械中的应用在现代医疗领域，医疗器械的发展日新月异，为人类的健康和疾病治疗带来了巨大的帮助。
而生物相容性聚合物作为一种重要的材料，在医疗器械中发挥着不可或缺的作用。
首先，我们来了解一下什么是生物相容性聚合物。
简单来说，生物相容性聚合物是指那些在与生物体接触时，不会引起明显的不良反应，如毒性、免疫反应、炎症等，同时能够与生物体组织和细胞良好相互作用的聚合物材料。
在医疗器械中，生物相容性聚合物的应用十分广泛。
其中，一个常见的应用领域是心血管器械。
例如，用于制造人工心脏瓣膜的聚合物材料，需要具备良好的血液相容性，以减少血栓的形成。
聚碳酸酯、聚氨酯等聚合物在这方面表现出色，它们能够承受血液流动带来的压力和摩擦力，同时不易引起血液凝固和炎症反应。
在骨科领域，生物相容性聚合物也有着重要的地位。
人工关节的制造常常会用到聚乙烯等聚合物材料。
这些材料具有一定的强度和耐磨性，能够在长期使用中为患者提供稳定的支撑和运动功能。
此外，一些可降解的聚合物，如聚乳酸和聚乙醇酸，也被用于骨折固定的螺钉和板，它们在骨折愈合后可以逐渐被人体吸收，避免了二次手术取出的痛苦。
在眼科领域，生物相容性聚合物同样不可或缺。
隐形眼镜就是一个典型的例子，其通常由硅氧烷水凝胶等聚合物制成。
这种材料能够提供良好的透氧性，让眼睛能够正常呼吸，同时具有舒适的佩戴感，减少对眼角膜的损伤。
另外，生物相容性聚合物在药物输送系统中也发挥着重要作用。
通过将药物包裹在聚合物微球或纳米粒中，可以实现药物的缓慢释放，提高药物的疗效并减少副作用。
例如，聚乳酸羟基乙酸共聚物（PLGA）常用于制备药物缓释微球，能够根据设计的释放曲线，在体内持续释放药物，达到长期治疗的效果。
不仅如此，生物相容性聚合物还在组织工程领域展现出了巨大的潜力。
科学家们正在研究利用聚合物支架来引导细胞生长和组织再生。
这些支架可以为细胞提供附着和生长的环境，促进受损组织的修复和重建。
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体外哺乳动物细胞染色体畸变试验
方法：
细胞复苏、培养； 受试物处理； 加入秋水仙素，使细胞停止于分裂中期； 收获细胞，滴片 空气干燥，染色
包括代谢活化和非代谢活化条件 在处理后6和24小时收获细胞 代谢活化条件下，受试物处理时间为3小时
处理条件：
体外哺乳动物细胞染色体畸变试验
第3部分 遗传毒性、致癌性和生殖毒性试验
哺乳动物细胞诱裂性试验（体外哺乳动物细胞染 色体畸变试验）
在加入和不加入代谢活化系统的条件下，使培养的哺乳动 物细胞暴露于受试物中。用中期分裂相阻断剂（如秋水仙 素或秋水仙胺）处理，使细胞停止在中期分裂相，随后收 获细胞，制片，染色，分析染色体畸变。
体外哺乳动物细胞染色体畸变试验
组氨酸需求 紫外线损伤修复缺陷 脂多糖屏障丢失（rfa）
R因子（抗氨苄青霉素、抗四环素） 自发回变
AMES实验
平板掺入法
预培养法
AMES实验
结果观察和判断：
掺入法：以直接计数培养基上长出回变菌落数的多少而定， 如在背景生长良好条件下，受试回变菌落数增加一倍以上， 并有剂量反应关系或至少某一测试点有可重复的并有统计 学意义的阳性反应，即可认为该受试物为诱变阳性。 点试法的判定：如在受试物点样纸片周围长出较多密集的 回变菌落与空白对照相比有明显区别者，可初步判定该受 试物为阳性，但应该用掺入法试验来确证。
开始 是否直接或间 接接触？ 是 获得材料的识别 信息并应考虑化 学表征（ISO 10993-18） 是
医疗器械生物学评价流程
否
GB/T 16886.1 不适用
材料是否与市 场上器械所用 材料相同？ 否
是
器械是否 有相同的 化学组成？ 否
是
制造和 灭菌是 否相同？ 否
是
与人体 接触是 否相同？ 否
啮齿动物微核试验
剂量设置：
阴性对照组/溶剂对照组；
受试物至少三个剂量组； 阳性对照组；
试验方法
给药－临床拟用途径；
细菌基因突变试验 哺乳动物细胞基因突变试验 哺乳动物细胞诱裂性试验
啮齿动物微核试验 啮齿动物骨髓中期分析 哺乳动物肝细胞程序外DNA合成试验 所有体外试验结果均为阴性，为避免对动物的过度使用，通常不再 论证并不宜再进行动物遗传毒性试验。 若全部体外试验的结果均为阳性，则应进行体内诱变性试验，否则 推定该化合物为诱变物。
测试系统： 中国地鼠卵巢（CHO）细胞株；中国地鼠肺（CHL）细胞株； 人外周血淋巴细胞
剂量设置 阴性对照组/溶剂对照组；阳性对照组；受试物至少三个剂量组； 最高浓度的选择：决定最高浓度的因素是细胞毒性、受试物在试 验系统中的溶解度以及pH或渗透分子浓度(osmolality)的改变。 最高浓度应能明显降低细胞覆盖程度、细胞计数或有丝分裂指数 （均应大于50%）。 对于那些相对无细胞毒性的化合物，最高浓度应是5μl/mL， 5mg/mL或0.01mol/L。 对于相对不溶解的物质，当浓度低于不溶解浓度时仍无毒性，则 最高剂量应是：当处理期结束时，在最终培养液中溶解度限值以 上的一个浓度。
优点：既能检测点突变，也能够检测出大的染色体损伤 缺点：自发突变率高，需要定期清除自发突变。
小鼠淋巴瘤细胞试验（MLA）
Cells
细胞集落形成率 , 即平板效率 ( Plating Efficiency, P E ) 的相 对存活率( Relative Survival, RS) 作为细胞毒性指标 。
是
是否有风险评定所 需充分的论证和/ 或临床相关数据 （化学和生物学）？
是
是否材料中所有 化学物的充分的 毒理学数据？ 否
是
这些数据 是否适用 于化学混 合物？ 否
是
这些数据 是否与接 触记录和 途径相关？ 否
是
否
根据材料的化学性 质和接触类别和时 间对器械进一步评 价
生物学实验的选 择（附录A）
试验和（或）豁 免建议试验的论 证
方法：
平板掺入法（标准试验法） 预培养法（提高测试灵敏度） 点试法（预试验）
AMES实验-菌株特性鉴定
菌株
TA 1535 TA 1537
组/色氨 酸突变
G46 C3076
缺失 修复
urvBurvB-
LPS
rfarfa-
VIT
biobio-
质粒
-----
可检测的 突变类型
碱基置换 移码
TA97
小鼠淋巴瘤细胞试验（MLA）
结果评判
阳性对照参考值 其一，阳性对照组总诱导率
IMF至少≥300×10-6，其中小
试验结果的判定
克隆IMF至少120×10-6
其二，小克隆IMF至少 ≥150×10-6 满足上述标准之一，并且阳 性对照相对总生长率（RTG） ≥10%
• 各处理组的MF值呈浓度 依赖性升高，判定为阳性； • MF值 ≥阴性对照值+126， 判定为阳性。（微孔法中 的GEF=99+27=126）
AMES实验
测试系统：细菌
鼠伤寒沙门氏菌：组氨酸营养缺陷型 埃希氏大肠杆菌：色氨酸营养缺陷型
浓度设置：
阴性对照组/溶剂对照组；阳性对照组；受试物至少五个剂量组； 决定受试物最高剂量的标准是对细菌的毒性及其溶解度。 对原料而言：一般最高剂量组可为5mg/皿。 对产品而言：
有杀菌作用，最高剂量可为最低抑菌浓度， 无杀菌作用的受试物，最高剂量可为原液，最低剂量 为0.1μg/皿。
标准分类
医疗器材生物学评估架构与原则
第1部分：评价与试验
材料特性与实质对等
第7部分：环氧乙烷灭菌残留量 第9部分：潜在降解产物的定性和定量框架 第13部分：聚合物医疗器械的降解产物的定性与定量 第14部分：陶瓷降解产物的定性与定量 第15部分：金属与合金降解产物的定性与定量 第17部分：可沥滤物允许限量的建立 第18部分：材料的化学特性 第19部分：材料的物理化学、形态学和地形学特点
Chemical treatment (3h or 24h)
Expcubation (12d)
Plating for TFTr
Plating for PE2
Incubation (12d)
Colony counting and calculation
TA 98 TA 100 TA 102 WP2uvrA
D6610
D3052 G46 G428 tryp E
urvBurvBurvBurvB+ uvrA-
rfarfarfarfa-
biobiobiobio-
pKM101
pKM101 pKM101 pKM101 pKM101
移码
移码 碱基置换 碱基置换 碱基置换
小鼠淋巴瘤细胞试验（MLA）
突变集落 在TK基因突变试验中，经过TFT选择后长出的抗性细胞集落（即 tk-/突变体）可分为两种类型，即大集落（λ集落）和小集落（σ集落）。 微孔平板法：大集落≥微孔直径的1/4
小集落＜微孔直径的1/4
软琼脂平皿法：大集落直径≥0.6mm 小集落直径＜0.6mm
进行毒理学风险 评定（附录B）
生物学评价完成
生 物 学 评 价 试 验 的 选 择
第3部分 遗传毒性、致癌性和生殖毒性试验
遗传毒性试验：采用哺乳动物或非哺乳动的细胞培养或其他技术， 测定由器械、材料和/或其浸提液引起的基因突变、染色体结构和 数量的改变，以及DNA或基因的其他毒性。 体外遗传试验：
采用大鼠或小鼠（6～10周） 分析骨髓中嗜多染红细胞中的微核，嗜多染红细胞是红细胞成熟的一 个阶段，主核已排出，容易观察微核
微核是染色单体或染色体的无着丝粒断片，或因纺锤体受损而丢失的整 个染色体，在细胞分裂后期，仍然遗留在细胞质中，末期之后，单独形 成一个或几个规则的次核，被包含在子细胞的细胞质内。
体内遗传试验
注意：
第3部分 遗传毒性、致癌性和生殖毒性试验
细菌基因突变试验（AMES实验 his-→his+ ）
鼠伤寒沙门氏菌的组氨酸营养缺陷型（his-）菌株，在 含微量组氨酸的培养基中，除极少数自发回复突变的 细胞外，一般只能分裂几次，形成在显微镜下才能见 到的微菌落。受诱变剂作用后，大量细胞发生回复突 变，自行合成组氨酸，发育成肉眼可见的菌落。 某些化学物质需经代谢活化才有致变作用，在测试系 统中加入哺乳动物微粒体酶（S9），可弥补体外试验 缺乏代谢活化系统之不足。 鉴于化学物质的致突变作用与致癌作用之间密切相关， 故此法现广泛应用于致癌物的筛选。
第3部分 遗传毒性、致癌性和生殖毒性试验
哺乳动物细胞基因突变试验（小鼠淋巴瘤细胞试验 MLA tk + →tk - ）
MLA是以抗药性的出现作为观察突变指标 , 其小鼠淋巴瘤 细胞株( L5178Y tk+/--3.7.2C)的tk基因产物为胸苷激酶(TK) 。 该酶催化胸苷的磷酸化反应 , 生成胸苷单磷酸(TMP) , 进一 步生成 DNA复制所必须的胸苷三磷酸 。 如果存在三氟胸苷(TFT) 等嘧啶类似物 , 则产生异常的 TMP , 而异常TMP 的存在将导致细胞死亡 。 如在被检物存在下 , 细胞对TFT发生抗药性 , 则说明 tk 基因 发生突变 。试验细胞株的 tk+/-基因位于 11 号常染色体上 , 为杂合子基因 , 这样只需一侧的 tk + →tk -即能对嘧啶类似 物产生抗性 。
医疗器械生物相容性
苏州市食品药品检验所 药理室 陈莉