实验一-药物的定性鉴别-药物分析
药物分析---典型药物的鉴别试验
氧化型
还原型
实验步骤：
• VC的鉴别：
•
取本品约 0.2g ，加水 10mL 溶解后，分成二等份，在一份中
加 AgNO3 0.5mL , 观察沉淀生成颜色；在另一份中加二氯靓酚钠 试液 1－2滴，观察并记录实验现象。
结构：
VA的结构为具有一个共轭多烯醇侧链的环己烯，具有许多立体异构体。 天然VA主要是反式VA，取代基R不同则可以是VA醇或其酯。
理化性质： 溶解性：脂溶性，溶于乙醚、石油醚等有机溶剂中，在乙醇中微溶，在水中
不溶。
不稳定性：易发生氧化、脱氢、脱水、聚合反应《中国药典》 紫外吸收特性：共轭多烯醇的侧链结构 与三氯化锑呈色 ：VA在氯仿溶液中能与三氯化锑作用，产生不稳定的蓝色。
实验步骤：
• VB1的鉴别：
•
取本品约 5mg ，加 NaOH 试液 2.5 mL溶解后，加 K3Fe(CN)6试液 0.5mL 与正
丁醇 5mL ，强力振摇 2分钟，放置使分层，观察上面的醇层荧光颜色；加稀
HCl 使成酸性，而后再加 NaOH 试液使成碱性，观察并记录实验现象。
ห้องสมุดไป่ตู้
•
K3Fe(CN)6试液配制：取 K3Fe(CN)6 1g , 加水 10mL 使溶解，即得。本液应临
典型药物的鉴别试验
-----维生素类典型药物的鉴别
张丽
实验目的
掌握维生素类典型药物的鉴别原理和鉴别方法：
维生素类典型药物：维生素A , B1 , C
熟悉维生素类典型药物的鉴别实验操作中的基本方法和试剂。
VA 鉴别实验原理
实验一-药物的定性鉴别
实验一药物的定性鉴别一、试验目的1掌握三氯化铁呈色反应在药物定性鉴别中的应用2了解并熟悉各种药物的鉴别方法及原理二、实验内容及原理三氯化铁呈色反应重氮－偶合反应磺胺类药水解反应（SD、SMZ）铜盐反应解热镇痛药三氯化铁呈色反应酸水解反应抗生素类药重氮－偶合反应（青霉素G钠）火焰着烧反应1、三氯化铁呈色反应：多数可溶于水或醇的酚类药物（如水杨酸、扑热息痛、氨基比林等）能与三氯化铁离子生成蓝色至兰紫色的络合物，此性质常作为该类物质的鉴别反应。
2、铜盐反应：磺酰氨基上的氢原子具有弱酸性，在碱性条件下可被铜离子取代，生成不同颜色的铜盐沉淀。
3、重氮－偶合反应：具有芳香伯胺的化合物在酸性条件下能与亚硝酸生成重氮化合物，重氮盐在碱性条件下可与β－萘酚生成红色的偶氮化合物。
扑热息痛的重氮－偶合反应磺胺类药物的重氮－偶合反应4 水解反应：在水溶液中，有些化合物（如阿司匹林、青霉素盐类等物质）容易在酸、碱、热等条件下发生水解，生成具有不同颜色的难溶性物质。
阿司匹林的水解反应青霉素钠（钾）的酸水解反应三、药品与器材1、药品：阿司匹林、扑热息痛、磺胺甲恶唑（SMZ）、磺胺嘧啶（SD）、青霉素钠（钾）2、试剂：三氯化铁试液，1％氢氧化钠溶液，硫酸铜试液，稀盐酸，0.1 mol/L 的亚硝酸钠试液，碱性β－萘酚试液，碳酸钠试液，稀硫酸3、器皿：玻璃试管，滴管，酒精灯，试管夹，铂耳，水浴锅四、实验步骤1、三氯化铁成色反应（1）取2支试管，用药匙取少量（约30mg）药品（阿司匹林、扑热息痛）分别加入试管中，加约5ml蒸馏水，振摇溶解后加1－2滴三氯化铁试液，观察溶液颜色（显兰紫色的为扑热息痛）。
（2）取1支试管，取上述少量上述无颜色反应的药品于试管中，加约5ml蒸馏水后于酒精灯上微火煮沸，放冷后加1滴三氯化铁试液，溶液应显蓝色（为阿司匹林）2、铜盐反应：取2支试管，分别加入少量（约0.1g）药品（SD、SMZ），加约3ml 蒸馏水，充分摇匀，缓慢滴加1％氢氧化钠溶液至恰好溶解为止（碱切忌过量），再各加硫酸铜试液1－2滴，则产生不同颜色的铜盐沉淀。
药物的鉴别试验 药物分析
5. X射线粉末衍射法
第5节 色谱鉴别法
利用不同物质在不同色谱条件下，产生各自的特征色谱 行为（比移值或保留时间）进行的鉴别试验。 采用与对照品在相同条件下进行色谱分离，并进行比较， 根据两者保留行为和检测结果是否一致来验证药品的真伪。
• 加硝酸银-黄色沉淀不溶于氨水或硝酸溶液； • 通入Cl2，臵换出I2，三氯甲烷吸收显紫色，使淀粉变蓝。
第3节 化学鉴别试验
2. 其他无机酸根离子
硫酸根： • 酸性下加氯化钡-白色沉淀，沉淀酸中不溶解； • 加醋酸铅→白色沉淀，沉淀在醋酸铵或氢氧化钠中溶解； 硝酸盐： • 硫酸介质中，加入硫酸亚铁，接界面-棕色环（Fe(NO)SO4）； • 加硫酸、铜丝，红棕色蒸气（NO2）; 磷酸盐： • 中性条件下，加硝酸银，生成浅黄色沉淀，溶于氨溶液或稀硝酸； • 和氯化铵镁反应—白色结晶沉淀； • 和钼酸铵试液、硝酸反应—黄色沉淀（溶于氨）
HO CH COOH HO CH COOH
+
Ag(NH3)2OH
2 Ag +
HO C COONH4 HO C COONH4
+ 2NH3 + 2H2O
第3节 化学鉴别试验
三、常见有机酸根的鉴别
3. 苯甲酸盐
①
FeCl3反应
COONa 7 3FeCl3 2OH中性 溶液
COO Fe3(OH)2 OOC
USP采用对照品法
试样制备方法： 压片法、糊法、膜法、溶液法
第4节 光谱鉴别法
特征区 指纹区
第4节 光谱鉴别法
3. 近红外光谱法(Near-Infrared spectrometry)
药物分析药物的鉴别试验
➢ 规定λ和Aλ1/Aλ2 ➢ 经化学处理后，测定其反应产物的吸收光谱 特性。
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例1：布洛芬
【鉴别】 (1) 取本品，加0.4％氢氧化钠溶液 制成每1ml中含0.25mg的溶液，照分光光度 法（附录Ⅳ A）测定，在265nm与273nm的 波长处有最大吸收，在245nm与271nm 的波 长处有最小吸收，在259nm的波长处有一肩 峰。
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2.有机酸盐
水杨酸盐、酒石酸盐、苯甲酸盐、乳酸盐、 枸橼酸盐
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（1）水杨酸盐
① FeCl3反应
COOH
6
OH+FeCl3
弱酸性
COO-
O- Fe 2
Fe
+ 12HCl
3
中性
②加稀HCl，即析出白色沉淀；分离，沉淀溶
于醋酸铵溶液。
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例：水杨酸镁
【鉴别】 (1) …… (2)取本品约0.3g，置洁净 的试管中，加水10ml溶解，加硝酸银试液过 量，即生成白色沉淀，滴加氨试液恰使沉淀溶 解后，将试管置水浴中加热，银即游离并附在 管的内壁成银镜。
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3.芳香第一胺
NH2
重氮化-偶合反应
R
取供试品约5mg，加稀盐酸1ml，必要时缓缓
+NaCl + H2O
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氨苯砜
【鉴别】 (1) 本品显芳香第一胺类的鉴别 反应（附录Ⅲ）。 (2) ……。
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药物分析药物的鉴别实验
折光率测定法：标准曲线法
n5
nx
n4
n3 n2 n1
0
c1c2 c3 c4 cx c5
例1：KCl 溶液，在于 20 ℃时测得其折光率为 1.3564 ，溶剂（水）在 20 ℃的折光率为 1.3330。已知KCl 的折光率因素（ F）为 0.00117 求KCl 溶液的浓度。
优点：多数的药物分子含有特征吸收光谱的基团，可 作为鉴别的依据，可进行简单的定性分析，鉴定共 轭发色团，推断未知物骨架，可进行定量分析及测 定配合物配位比和稳定常数
缺点：不同的有机化合物具有不同的吸收光谱，但吸 收光谱较简单，必须采用多规定参数法提高专属性
示例一、二、三
2、红外光谱鉴别法 红外光谱法是一种专属性很强、应 用较广（固体、液体、气体样品）的鉴别方法。主要用 于组分单一、结构明确的原料药、特别适用于用其他方 法不易区分的同类药物，如磺胺类、甾体激素类和半合 成抗生素类药品。
（四）色谱鉴别法 1、薄层色谱鉴别法
岛津CS-9000 双波长薄层扫描仪
瑞士CAMAG SCANNER 3 薄层扫描仪
1、薄层色谱 将吸收剂或支持剂均匀铺在玻璃板上（或聚酯薄
膜塑料或铝箔上），把要分离分析的样品点在薄层色 谱板上，用溶剂展开，在日光或紫外光下观察所获得 的斑点，从而达到分离、分析、鉴定目的。
解： 1.3564 - 1.3330 C = ————————— =20 （g /ml ，
%） 0.00117
答：KCl 溶液的浓度为 20% 。
方法1：采用同温度溶剂 的折光率来求浓度
例2：在26 ℃测得KI溶液的折光率为 1.3460 。已知： KI的F为0.00131 。求其浓度。
药物鉴别技术—药物的鉴别试验(药物分析课件)
橙黄色到猩红色 沉淀
+NaNO2+2HCl
+NaCl+2H2O
N2+Cl-.
+
+NaOH
+NaCl+2H2O
《中国药典》2005版二部
芳香第一胺反应鉴别的药物
对乙酰氨基酚 盐酸普鲁卡因 艾司唑仑 硝西泮 奥沙西泮 磺胺嘧啶
一般鉴别实验
4． 托烷生物碱类
（硫酸阿托品、氢溴酸山莨菪碱、氢溴酸东莨 菪碱）
（1）鉴别方法：取供试品约10mg，加发烟 硝酸5滴，置水浴上蒸干，即得黄色的残渣， 放冷，加乙醇2-3滴，加固体氢氧化钾一小颗， 即显深紫色。
（2）反应原理：托烷生物碱类均具有莨菪 酸结构，有Vitali反应，显紫色。后马托品具 莨菪醇结构而不具莨菪酸结构，无此反应。
4.托烷生物碱类
此类生物碱中具有莨菪酸结构，有Vitali反应,显紫色。
一般鉴别试验
鉴
依据某一类药物的化学结构或理化
别 性质的特征，通过化学反应来鉴别药
实 验
物的真伪
项
目
一般鉴别试验
无机药物: 根据阴、阳离子（钠盐、钙盐、
硫酸盐、氯化物）的特殊反应,并以药典附
鉴 别
录项下的一般鉴别试验为依据；
实
验
项 有机药物: 多采用典型的官能团反应（芳
目 香第一胺、水杨酸盐）.
一般鉴别试验
（1）鉴别方法：取供试品约50mg，加稀盐酸1ml，必要时
缓缓煮沸使溶，放冷，加亚硝酸钠溶液（0.1mol/L）数滴， 滴加碱性β-萘酚试液数滴，视供试品不同，生成橙黄色到猩 红色沉淀。
（2）反应原理：重氮化-偶合反应
3.芳香第一胺类 稀盐酸
药物的定性鉴别
卡托普利： 卡托普利：
CH3NO RSNO + H2O
COOH
亚硝酰硫醇酯
维生素C 维生素C：
CH2OH H C HO HO O O
烯二醇还原性
OH
实验步骤
1 对乙酰氨基酚 对乙酰氨基酚(1)
10ml 乙醇
过滤
残渣
FeCl3
? (蓝紫色)
硝酸异山梨酯(2) 2 硝酸异山梨酯
实验原理
对乙酰氨基酚： 对乙酰氨基酚：
HO N H O CH3
与Fe3+离子形成深色络合物
硝酸异山梨酯： 硝酸异山梨酯：
CH2 CHONO2 CH O CH CHONO2 CH2
O
NO3- + 3Fe2+ + 4H+ Fe2+ + NO
3Fe3+ + NO + 2H2O
[Fe(NO)]2+
（棕色） 棕色）
现象
解释
思考题
简述本实验中四种药物定性鉴别的基本原理。 简述本实验中四种药物定性鉴别的基本原理。
rsh亚硝酰硫醇酯烯二醇还原性实验步骤对乙酰氨基酚1残渣硝酸异山梨酯2残渣卡托普利2滤液维生素c1滤液黑色10ml乙醇fecl10ml氯仿1mlh4ml乙醇nano过滤过滤过滤过滤项目现象解释对乙酰氨基酚硝酸异山梨酯卡托普利维生素c简述本实验中四种药物定性鉴别的基本原理
药物的定性鉴别
实验目的
了解有机化合物的性质及官能团反应在药物定 性鉴别中的应用
10ml 氯仿
过滤
残渣
1mlH2O+ 2mlH2SO4 3mlFeSO4
？ (两液间呈棕色) 两液间呈
3 卡托普利 卡托普利(2)
藏药制剂分析实验
藏药制剂分析实验.实验一中药制剂的理化定性鉴别一、实验目的通过对几种中成药的理化定性鉴别，掌握中药制剂理化定性鉴别方法和原理。
二、提要利用中药制剂中某些化学成分特有的颜色反应进行鉴别。
三、实验用品（1）器材：研钵、烧杯、漏斗、试管、量瓶、恒温水浴、电炉、紫外分光光度计（2）样品：牛黄解毒片、复方丹参片（均为市售品）（3）试剂均为AR级四、试验步骤1．牛黄解毒片的理化鉴别：主要成分：人工牛黄、雄黄、石膏、大黄、黄芩、桔梗、冰片、甘草。
理化鉴别：取本品6片（包衣者除去包衣），研细，加乙醇10ml，温热10分钟，滤过，滤液作如下反应：①取滤液5ml，加镁粉少量与盐酸0.5ml，加热，即显红色。
②另取滤液4ml，加氢氧化钠试液，即显红色，再加30%过氧化氢溶液，加热，红色不消失，加酸呈酸性，则红色变为黄色。
2．复方丹参片的紫外鉴别：取复方丹参片1片，研细，分次加少量水搅拌，滤过，滤液移至100ml量瓶中，并加水至刻度，取溶液2ml，加水至25ml，用紫外分光光度计，在200~400nm范围内扫描，以水作空白，供试液在283±1nm波长处应有最大吸收。
五、思考题1.牛黄解毒片中大黄、黄芩一般理化鉴别中分别鉴别哪类成分？其变色机理是什么？实验二牛黄解毒片的TLC鉴别一、实验目的1.掌握薄层荧光法的原理与操作。
2.掌握薄层色谱法在中药制剂鉴别中的应用。
二、提要利用标准品、对照药材作为对照进行TLC检识，以鉴别中成药的真伪。
三、实验用品（1）器材：研钵、烧杯、漏斗、试管、量瓶、回流装置、恒温水浴、电炉、紫外灯（365nm）、烘箱（2）对照品：猪去氧胆酸、胆酸。
（3）样品：牛黄解毒片（4）试剂均为AR级四、试验步骤：①薄层板制备：取CMC-Na上清液30ml，置乳钵中，取10g硅胶G，分次加入乳钵中，充分研磨均匀后，分别加到2块备用玻璃板上，轻轻振动玻板，使调好的悬浊液充分涂布整块玻板上，而获得均匀的薄层板，晾干。
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实验一药物的定性鉴别
一、目的要求
通过以下各类药物的化学定性实验，加深和巩固学过的理论知识。
试剂：阿斯匹林片，三氯化铁，碳酸钠，稀硫酸；盐酸异丙嗪片，硫酸，硝酸；维生素C片，硝酸银；维生素E片（或胶囊），硝酸无水乙醇；盐酸土霉素，硫酸
实验所用试液配制：
1.三氯化铁试液：取三氯化铁9g，加水使溶解成100ml即得。
2.碳酸钠试液
3.稀硫酸
4.硝酸银试液
二、实验容
（一）巴比妥类药物的鉴别
苯巴比妥片的鉴别：取本品5片，研细，加无水乙醇10ml，充分振摇，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣做下列反应：
（1）取残渣约50mg，加碳酸钠试液1ml与水10ml，振摇2分钟，滤过，滤液中逐滴加入硝酸银试液，即生成白色沉淀，振摇，沉淀即溶解，继续加过量的硝酸银试液，沉淀不再溶解。
见p266银盐反应（2）取残渣约10mg，加硫酸2滴与亚硝酸钠约50mg，混合，即显橙黄色，随即转为橙红色。
见p271
（二）芳酸与芳胺类药物的鉴别
1、阿司匹林片
（1）取本品的细粉适量（半片约相当于乙酰水酸0.1g），加水10ml，煮沸，放冷，加三氯化铁试液2滴，即显紫堇色。
P202水酸反应（2）取本品的细粉适量（半片约相当于乙酰水酸0.2g），加碳酸钠试液5ml，振摇后，放置5分钟，滤过，滤液煮沸2分钟，放冷，加过量的稀硫酸，即析出白色沉淀，并发出醋酸的臭气。
P204水解反应
2、对氨基水酸钠片
取本品1片，研细，加水10ml溶解后，加稀盐酸2滴是呈酸性，加三氯化铁试液1滴，应显紫红色。
3、苯甲酸（或苯甲酸钠）
取本品约0.1g，加氢氧化钠试液（0.1mol/L）10ml振摇，滤过，滤液中加三氯化铁试液2滴，即发生赭色沉淀（如为钠盐，直接加水10ml 溶解后，再鉴别）。
4、盐酸普鲁卡因注射液 p241重氮化偶合反应
取本品约1ml（半只），加稀盐酸1ml，加亚硝酸1ml，加亚硝酸钠试液（0.1mol/L）数滴，滴加碱性β—萘酚数滴，即呈橙红色沉淀。
5、盐酸去氧肾上腺素注射液 p224与铁盐的反应
取本品适量，加水1ml，加三氯化铁试液1滴，即显紫色。
6、盐酸肾上腺素注射液 p224与铁盐的反应
取本品2ml，加三氯化铁试液1滴，即显翠绿色；再加氨试液1滴，即变为紫色，最后变为紫红色。
（三）苯骈噻嗪类和苯骈二氮卓类
1、盐酸氯丙嗪片p295氧化显色反应
取本品1片，研细，加水5ml，振摇，使盐酸氯苯丙嗪溶解，滤过，取滤液加硝酸5滴，即显红色，渐变淡黄色。
2、盐酸异丙嗪片 p295氧化显色反应
取本品2片，研细，加水10ml，振摇使盐酸异丙嗪溶解，滤过，滤液分成两份，分别做如下反应：
①加硫酸2ml，溶液显樱桃红色，放置后，色渐变深。
②加硝酸1ml，即发生红色沉淀；加热，沉淀即溶解，溶液由红色转变为橙黄色。
3、安定片（地西泮） p283硫酸荧光反应
取本品的细粉适量（约相当于安定10mg），加丙酮10ml，振摇使安定溶解，滤过，滤液蒸干，加硫酸3ml，振摇使溶解，在紫外灯下检视，显黄绿色荧光。
4、氯氮卓片（利眠宁片）
a) 取本品3片，研细，加盐酸（1→2）10ml，缓缓煮沸15分钟，放冷，加亚硝酸钠试液（0.1mol/L）数滴，滴加碱性β—萘酚试液数滴，即呈橙红色沉淀。
P284芳伯胺的反应
b) 取本品1片，研细，加盐酸溶液（9→1000）5ml，加碘化铋钾试液1滴，即发生呈红色沉淀。
P283沉淀反应
（四）维生素类
1、维生素AD胶丸
取本品1粒的容物，加氯仿5ml，加三氯化锑溶液（1→4）1ml，即显蓝色至蓝紫色，放置后，色渐消退。
2、维生素B1片 p359硫色素荧光反应
取本品细粉适量，加水搅拌，滤过，滤液蒸干后，加氢氧化钠试液2.5ml溶解后，加铁氰化钾试液0.5ml与正丁醇5ml，强力振摇2分钟，放置使分层，上面的醇层显强烈的蓝色荧光；加酸使成酸性，荧光即消失；再加碱使成碱性，荧光又显出。
3、维生素C片p363与硝酸银，二氯靛酚钠的反应
取本品的细粉适量（2片约相当与维生素C0.2g），加水研磨后，再加水适量使成10ml，滤过，滤液分成两份做如下反应：
①取滤液5ml，加硝酸银试液0.5ml，即发生银的黑色沉淀。
②取滤液5ml，加二氯靛酚钠试液1～2滴，试液的颜色即消失。
4、维生素E片（或胶囊） p375硝酸反应
取本品2片（粒），研细，加无水乙醇10ml，振摇使维生素E溶解，滤
过，滤液加硝酸2ml，摇匀，在75℃加热约15分钟，溶液显橙红色。
（五）甾体激素类药物
醋酸泼尼松片的鉴别：取本品的细粉适量（1片约相当于醋酸泼尼松0.1），加乙醇2ml使溶解，加10%氢氧化钠溶液2滴与氯化三苯四氮唑试液1ml，溶液即显红色。
（六）抗生素类
1、氨基糖苷类
①取硫酸庆大霉素约5mg（或取其注射液，滴眼液均可），加水1ml 溶解后，加0.1%茚三酮的水饱和正丁醇溶液1ml与吡啶0.5ml，在水浴中加热5分钟，即显蓝紫色。
P426茚三酮反应
②取硫酸卡那霉素1mg（或取其注射液），加水2ml溶解后，加0.2%蒽酮的硫酸溶液4ml，在水浴中加热15分钟，冷却，即显蓝紫色。
P427蒽酮的呈色反应
③取硫酸链霉素约0.5mg，加水4ml溶解后，加氢氧化钠试液2.5ml 与0.1%8—羟基喹啉的乙醇溶液1ml，放冷至约15℃，加次溴酸钠试液3滴，即显橙红色。
P428 坂口反应
④取硫酸链霉素约20mg，加水5ml溶解后，加氢氧化钠试液0.3，置水浴上加热5分钟，加硫酸铁铵溶液【取硫酸铁铵0.1g，加硫酸液（0.5mol/L）5ml使溶解】0.5ml，即显紫红色。
P428麦芽酚反应
2、四环素类 p437显色法
①取盐酸土霉素细粉适量（半片约相当于盐酸土霉素5mg）加热乙醇5ml，浸渍搅拌约5分钟，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加硫酸1ml，
即显深朱红色；再加水0.5ml，溶液变为黄色。
②取盐酸四环素细粉适量（半片约相当于盐酸四环素5mg），加热乙醇5ml，浸渍搅拌约5分钟，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加硫酸1ml，即显深紫色；再加三氯化铁1滴，溶液变为红棕色。
③取盐酸脱氧土霉素片细粉适量（半片约相当于脱氧土霉素
0.5mg），加硫酸2ml，即显黄色。
3、大环酯类
红霉素片鉴别：取本品1片，除去肠衣后，研细。
①取本品细粉5mg，加硫酸2ml，缓缓摇匀，即显红棕色。
②取本品约3mg，加丙酮2ml溶解后，加盐酸2ml即显橙黄色，渐变为紫红色，再加氯仿2ml摇匀，氯仿层显蓝色。
（七）磺胺类药物
复方磺胺甲噁唑片（复方新诺明片、SMZ.CO）鉴别：
a) 取本品1片，研细加水10ml振摇溶解，滤过，滤液加稀盐酸1ml，必要时缓缓煮沸使溶解，放冷，加亚硝酸钠试液（0.1mol/L）数滴，滴加碱性β—萘酚试液数滴，即生成呈红色沉淀。
b) 取本品1片，研细，加稀硫酸10ml，微热使溶解后，放冷，滤过，滤液加碘试液0.5ml，即生成棕褐色沉淀。
三、思考题
请说出上述各项实验的原理。