问答题整理(带答案)
小学生知识问答题及答案130道

小学生知识问答题及答案130道小学生环保知识问答题1、什么是节能减排?答:节能减排指的是减少能源浪费和降低废气排放。
2、铁锅铝锅不锈钢锅,那种锅炒菜对健康最有益?答:铁锅。
3、家用电器主要有那些污染?答:家庭影音系统音量过高会产生噪声;空调房内空气不流通或温度过低,我们就容易被病毒感染而生病;手机电磁炉和微波炉等可产生电磁辐射。
4、什么是大气?答:是包围在地球周围的一层气体。
5、一氧化碳是有害物质,空气中的一氧化碳百分之多少来自汽车尾气?主要是由于什么原因?答:80%,主要是由于汽油燃烧不完全的原因,越是交通高峰期,汽车跑不起来,走走停停,产生的一氧化碳就越多。
6、如何减少城市的“热岛效应”?答:增加绿色植物的面积。
7、无污染能源主要有什么?答:太阳能海洋能风能地热能水能。
8、据科学家们观测,全球气候在逐渐变暖,造成气候变暖的主要原因是什么?答:人类生产活动所排放超多的二氧化碳。
9、我国人均水资源仅为世界平均水平的多少?答:四分之一。
10、在全国各地发现污染环境行为,向环保部门举报应拨打什么电话?答:12369。
11、南极边缘的冰川为什么脱离南极大陆?答:由于“温室效应”导致全球气候变暖。
12、当今世界人为面临的五大问题什么?答:人口粮食能源资源环境。
13、被称为“活化石”的爬行动物答:扬子鳄。
14、目前我国土地沙化面积每年扩大多少平方公里?答:3000。
15、为减少空气污染和交通拥挤,我们出行时应提倡选取什么交通工具?答:自行车,公共汽车电车地铁等公共交通工具。
16、为什么要拒绝吃野生动物?答:因为吃野生动物一是破坏生态环境,使我国许多野生动物物种濒临灭绝;二是吃野生动物,还容易传染病菌。
17、色彩浓艳的衣服一般什么含量偏高?答:甲醛。
18、青蛙是捕虫能手,一只青蛙每一天大约能吃多少条害虫?答:70条。
19、什么是沙尘暴?答:一种风与沙相互作用的灾害性天气现象。
20、我国缺水城市有多少个?其中严重缺水的城市多少座?答:①400多个;②108座。
小学生智力问答题带答案趣味篇

小学生智力问答题带答案趣味篇小学生智力问答题带答案趣味(一)1.一溜十仨缸,担二八斗糠,缸缸都装满,不许有剩糠。
问:每个缸平均装多少糠?2.鸡狗四十九,一百条腿地上走。
问:多少只鸡?多少只狗?3.一百和尚一百馍,大和尚一个吃仨,小和尚仨吃一个。
问:几个大和尚?几个小和尚?4.黄瓜一担,孩子一院,每人一根黄瓜,一个孩子没有黄瓜,两个孩子一根黄瓜,剩余一根黄瓜。
问:几根黄瓜?几个孩子?5.一百牲口一百瓦,骡驮仨,马驮俩,三个毛驴驮一个瓦。
问:骡、马、驴各多少匹?6.两个老婆去上坟,同哭一个墓中人,一个哭她女儿的女婿,一个哭她女儿的女婿的老丈人。
问:这两个老婆是什么关系?7.他舅你来了,搬个凳子快坐下,咱姐你姐夫,同去看咱妈。
你从那路来,为何没见她?问:主人和来客是什么关系?8.一艘小船,只能承载5个人。
四个警察带着两个坏蛋上船后,船却没有沉。
问:这是什么原因?9.一艘轮船停在港口,水面离甲板的高度只有一米,海水第一个小时上涨0.2米,第二个小时下降0.1米。
第三个小时又上涨0.2米,第四个小时再下降0.1米,以此类推。
问:几个小时水面能和甲板涨平?10.侦察员要到河对岸执行任务,从桥的一头到另一头需用5分钟。
对面桥头敌人的哨兵看的很紧,只要看见桥上有人,就会马上叫他回去,绝对不会让他继续向前走。
侦察员必须利用敌哨兵换岗的间隙走过河去。
而敌哨兵换岗的间隙仅有3分钟。
侦察员不但顺利的过了河,而且圆满完成了任务。
问:侦察员是怎么过去河的?小学生智力问答题带答案趣味(二)1、一个数字,去掉前面一个数字后,是13。
去掉最后一个数字后,是40。
这个数字是什么?2、这一等式很奇怪,0比2大,2比5大,5比0大。
为什么?3、只字加一笔,会是什么字?4、人加一笔,除了大/个,还有什么字?5、桌子上有2、1、6三张卡片,请问摆成一个什么数字可以让43整除?【篇四】答案答对5道题的人是天才,答对4道的是帅才,答对3道的是将才,答对2道的是奇才,答对1道的是人才,1道都想不出来的是(?)才。
小学生知识问答题及答案大全

小学生知识问答题及答案大全1. 什么是水循环?水循环是指地球上水在不断循环的过程中,从海洋、湖泊、河流蒸发成水蒸气,形成云,最后降落为雨、雪或露水的过程。
2. 太阳系中最大的行星是哪个?木星是太阳系中最大的行星,它的体积是其他行星的总和。
3. 什么是生态平衡?生态平衡是指在一个生态系统中,各种生物和非生物因素之间相互作用,维持着一个相对稳定的状态。
4. 人体最大的器官是什么?人体最大的器官是皮肤,它是人体最大的器官,也是最重要的保护屏障。
5. 什么是食物链?食物链是指生物之间通过捕食和被捕食的关系,形成的一种能量传递链条。
6. 地球上最高的山峰是哪座?珠穆朗玛峰是地球上最高的山峰,位于喜马拉雅山脉。
7. 什么是植物的光合作用?植物的光合作用是指植物利用阳光、水和二氧化碳,通过叶绿素的作用,将这些无机物质转化为有机物质的过程。
8. 什么是地球自转和公转?地球自转是指地球围绕自身轴线旋转的运动,公转是指地球围绕太阳运动的运动。
9. 什么是气候?气候是指某一地区长期的天气状况的总和,包括温度、湿度、降水量等因素。
10. 什么是环保?环保是指保护和改善环境,预防环境污染,维护生态平衡的行为和活动。
11. 人体最重要的器官是哪个?人体最重要的器官是心脏,它是人体的泵,负责将血液输送到全身各个部位。
12. 什么是地壳?地壳是地球上最外层的固体壳层,由岩石和土壤组成,是地球上陆地和海洋的基础。
13. 什么是生物多样性?生物多样性是指地球上各种生物的多样性和丰富性,包括动植物的种类、数量和分布。
14. 什么是核能?核能是指从原子核反应中释放出的能量,是一种清洁、高效的能源形式。
15. 什么是地球的自然环境?地球的自然环境是指地球上的自然资源、气候、地形、水文等自然条件的总和。
16. 什么是地球的生命之源?地球的生命之源是水,水是地球上生命存在的基础,也是维持生态平衡的重要因素。
17. 什么是农业?农业是指人类利用土地和自然资源种植和培育农作物、养殖家畜,生产粮食和其他农产品的活动。
七年级生物期末常考122道问答题(答案)

七年级生物问答题(答案版) 1、地球上最大的生态系统是?答:生物圈。
2、生物圈的范围是?答:大气圈下层、岩石圈上层、水圈的全部。
3、生物多样性的内涵是指?答:物种多样、遗传多样、生态系统多样。
4、影响生物生活的因素包括哪些?答:生物因素和非生物因素。
5、非生物因素包括?答:阳光、空气、水分、温度、土壤等。
6、生物共同的特征包括?答:应激性、生长、繁殖、新陈代谢。
7、生命最基本的特征是?答:新陈代谢。
8、没有细胞结构的生物是?答:病毒。
9、构成生物体的基本单位是什么?答:细胞。
10、控制细胞生命活动的结构是什么?答:细胞核。
11、控制细胞内外物质进出细胞的结构是?答:细胞膜。
答:分生、保护、营养、输导4种组织。
13、动物的4种基本组织分别是?答:上皮、肌肉、结缔、神经4种组织、14、植物体的结构层次是?答:细胞一组织一器官一植物体。
15、动物体的结构层次是?答:细胞一组织一器官一系统一动物体。
16、生物个体能由小长大是什么缘故?答:细胞分裂和生长。
17、细胞分裂时最先分裂的是什么?答:细胞核。
18、细胞分裂前后遗传物质染色体的数目相同还是减少?答:相同。
19、显微镜的操作步骤是?答:取镜、安放、对光、放置标本、观察、收放。
20、低倍镜的显像特点是?答:视野亮,看到细胞数目多,体积小、不清晰。
21、光线弱时使用显微镜要用反光镜的哪一面反光?答:凹面。
22、玻片标本的制作步骤是?答:擦片、滴水、取材、展材、盖片、染色。
23、给标本染色是为了更清楚的看到细胞的哪个结构?答:细胞核。
答:根冠、分生区、伸长区、成熟区。
25、植物的芽由哪几部分构成?答:生长点、叶原基、芽原基、芽轴。
26、植物的叶由哪几部分构成?答:表皮、叶肉、叶脉。
27、植物的花由哪几部分构成?答:花蕊、花冠、尊片、花托、花柄。
28、双子叶植物的种子由哪几部分构成?答:种皮和胚。
29、单子叶植物种子结构式?答:种皮果皮、胚乳和胚30、种子中的胚由哪几部分结构叫什么?答:胚芽、胚轴、胚根、子叶31、围成叶片的气孔的结构叫什么?答:保卫细胞32、种子能萌发的内在条件是哪些?答:完整的胚、有生命力、非休眠期。
知识问答题目及答案(100个)

知识问答题目及答案(100个)(实用版)编制人:__________________审核人:__________________审批人:__________________编制单位:__________________编制时间:____年____月____日序言下载提示:该文档是本店铺精心编制而成的,希望大家下载后,能够帮助大家解决实际问题。
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问答题 ( 附答案 )

问答题 ( 附答案 )1. 2 分为什么处在第一激发态的He 原子会出现三重态发射光谱?2. 5 分下列休克尔分子轨道中哪个是归一化的?若不是归一化的,请给出归一化系数。
(原子轨道ϕϕϕ321,,是已归一化的)a. ()ϕϕ21121+=ψ b. ()ϕϕϕ3212241+-=ψ3. 5 分一质量为m 的粒子,在区间[a ,b ]运动,处于状态x ψ1=,试将ψ归一化。
4. 5 分试写出在价键理论中描述 H 2 运动状态的、符合 Pauli 原理的波函数, 并区分其单态和三重态。
5. 5 分对一个运动速率v<<c 的自由粒子,有人作了如下推导 :mv v E v h hp mv 21=====νλ A B C D E结果得出211=的结论。
问错在何处? 说明理由。
6. 5 分电子具有波动性,为什么电子显像管中电子却能正确地进行扫描? (假设显像管中电子的加速电压为1000?V)7. 5 分θθcos 3cos 53-是否是算符)d d sin cos d d (ˆ222θθθθF +-= 的本征函数,若是,本征值是多少?8. 5 分对在边长为L 的三维立方箱中的11个电子,请画出其基态电子排布图,并指出多重态数目。
9. 5 分对在二维方势箱中的9个电子,画出其基态电子排布图。
*. 5 分 (3231)11. 2 分假定ψ1和ψ2是对应于能量E 的简并态波函数,证明ψ=c 1ψ1+ c 2ψ2同样也是对应于能量E 的波函数。
12. 2 分He +中处于x p 2ψ的电子,其角动量在x ,y ,z 方向上的分量是否具有确定值?若有,其值是多少?若没有,其平均值是多少?13. 2 分氢原子中z p 2ψ状态的电子,其角动量在x ,y 方向上的分量是否有确定值?若有,其值是多少?若没有,其平均值是多少?14. 2 分写出中心力场近似下的单电子薛定谔方程。
15. 2 分氢原子2p x 态电子云的角度分布图(Y p x2)2如下,在半径为r 的虚线表示的球面上,有a ,b ,c ,d 四点,指出何处电子出现的概率密度最大?何处电子出现的概率密度最小?(见附图)16. 2 分氢原子p 2ψ状态的R 2(r )-r 图如下,指出在任一给定方向上,图中所标四点,当r 为何处时电子出现概率密度最大,何处最小? (见附图)17. 2 分如果一个电子的状态不用量子数n ,l ,m ,m s 来描述,而用n ,l ,j ,m j 描述,试证明一定n 值的状态数目仍是2n 2个。
'趣味问答题'大全5篇

'趣味问答题'大全5篇'趣味问答题'大全(5篇)智力问答是孩子很喜欢玩的一种游戏,不仅可以给他们带来欢乐,还能锻炼他们的脑部发育。
下面是小编整理的趣味问答题大全,希望能够帮助到大家。
趣味问答题大全(篇1)1、有一头头朝北的牛,它向右转原地转三圈,然后向后转原地转三圈,之后再往右转,这时候它的尾巴朝哪?答案:朝地2、人们甘心情愿买假的东西是什么?答案:假发,假牙3、大象的左耳朵像什么?答案:右耳朵4、幼儿园的小凳子有几条腿?答案:四条腿5、什么动物你打死了它,却流了你的血?答案:蚊子6、早晨醒来,每个人都要去做的第一件事是什么?答案:睁眼7、两个人分五个苹果,怎样分最公平?答案:榨成果汁8、妈妈的弟弟叫什么?答案:舅舅9、有一块天然的黑色的大理石,在九月七号这一天,把它扔到钱塘江里会有什么现象发生?答案:沉到江底10、一只凶猛的饿猫,看到老鼠,为何拔腿就跑?答案:跑去追老鼠11、苹果是什么颜色的?(答案:红色)12、为什么游泳比赛中青蛙输给了狗?答案:青蛙用蛙泳犯规13、在一次监察严密的考试中,有两个学生交了一模一样的考卷。
主考官发现后,却并没有认为他们作弊,这是什么原因?答案:两张考卷交得都是白卷14、哪一颗牙最终长出来?答案:假牙15、大家都不想得到的是什么?答案:得病趣味问答题大全(篇2)1、“新华字典”有多少个字?答案:四个2、一个人从飞机上掉下来,为什么没摔死呢?答案:飞机停在地上3、为什么黑人喜欢吃白色巧克力?答案:害怕咬到自我的手4、什么人心肠最不好。
答案:地胃肠炎的人5、什么车子寸步难行。
答案:风车6、谁说话的声音传得最远?答案:打电话的人7、有个人走独木桥,前面来了一只老虎,后面来了只熊,这个人是怎样过去的?答案:晕过去了8、冬天,宝宝怕冷,到了屋里也不肯脱帽。
可是他见了一个人乖乖地脱下帽,那人是谁?答案:理发师9、把一只鸡和一只鹅同时放在冰箱里,为什么鸡死了鹅没死?答案:企鹅嘛10、用什么能够解开所有的谜?答案:答案11、孔子与孟子有什么区别。
百科问答题大全及答案五篇

百科问答题大全及答案五篇在我们平凡无奇的学生时代,很多人都经常追着老师们要知识点吧,知识点有时候特指教科书上或考试的知识。
下面是小编给大家带来的百科问答题大全及答案五篇,以供大家参考!百科问答题大全及答案篇11、植物什么时候需水最多?————初夏(第1个)2、“智慧之果”是指什么?香蕉3、在我国,一般草莓是什么形状的?叶椭圆形4、中国的国花是哪种?牡丹5、早晨开的花是:牵牛花6、下面哪一个不属于川菜?盐水鸭或西湖醋鱼(2个题目)7、以下哪个是成都著名的小吃?豆浆或烤红苕(2个题目)8、8110以下哪个是成都著名的小吃?烤红苕9、下列哪种说法正确?豆芽的豆比芽营养更丰富10、下面哪一样东西有明目的功效?枸杞子11、下面哪一个不属于湘菜酸辣烂鱿鱼12、下面哪一个不是江苏的风味小吃?嘉兴肉棕13、东汉称面条为什么?煮饼14、九转大肠是属于什么菜系的名菜?鲁菜15、面条经蒸煮或煎炸,脱水干燥,加调味品包装而成的一种方便食品是什么?方便面16、用筷子沿盘边剔面叫什么?剔尖17、汽水在几摄氏度时最好喝?1118、以麻辣辛香调料而闻名的菜系是哪一个?川菜19、“德州扒鸡”是一款比较著名的菜肴,请问其属于哪个菜系?鲁菜20、煮面时,温水时就把面下去,比起用开水煮面,面熟得快还是慢?更快百科问答题大全及答案篇21、什么人每一天靠运气赚钱?答案:煤气工人2、鸡蛋壳有什么用处?答案:包蛋清和蛋黄3、在地上有元钱和一块肉骨头,可是阿明却拣起了肉骨头而没有捡钱,为什么?答案:那里的“阿明”是条狗的名字4、用什么方法立刻能够找到遗失的图钉?答案:光着脚走5、木兰之子,猜食名物一?答案:花生6、什么布剪不断?答案:瀑布7、小张走路从来脚不沾地,这是为什么?答案:因为穿着鞋8、在一个寒冷冬日清晨,有一位西装革履的先生在河里拼命游水,你说这是为什么?答案:他不细心掉进河里了9、下雪天,阿文开了暖气,关上门窗,为什么还感到很冷?答案:他在门外10、一场大雨,忙着栽种的农民纷纷躲避,却仍有一人不走,为什么?答案:稻草人11、刘邦破咸阳。
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1.PCR反应体系包括哪些内容?基本反应过程是什么?内容:模板、引物、TaqDNA聚合酶、原料、Mg2+、缓冲液、双蒸水基本反映过程:变性——退火——延伸——检测DNA变性(90℃-96℃):双链DNA模板在热作用下,氢键断裂,形成单链DNA 退火(60℃-65℃):系统温度降低,引物与DNA模板结合,形成局部双链。
延伸(70℃-75℃):在Taq酶(在72℃左右,活性最佳以dNTP为原料,从引物的3′端开始以从5′→3′端的方向延伸,合成与模板互补的DNA链。
每一循环经过变性、退火和延伸,DNA含量即增加一倍。
检测2.限制性内切酶的活性受什么因素的影响?①DNA分子的纯度②限制酶的浓度③DNA分子的构型④DNA分子的甲基化程度⑤酶切反应的时间与温度⑥缓冲液的选择3.作为基因工程载体的条件是什么?1)具有一个或多个限制酶切点,以供外源基因插入其中;2)具有标记基因,以鉴定重组是否进入受体细胞;3)能自我复制,否则可能导致重组丢失;4)对受体细胞无害;5)大小应适合,以便提取和在体外进行操作,太大不便操作.4.基因工程诞生的理论基础是什么?、20世纪中三个基础理论的重大突破,是基因工程的诞生的理论基础.1、DNA是遗传物质的证明.2、DNA双螺旋结构和中心法则的确立.3、遗传密码的破译.技术上的三大发明*(3酶2体)1.限制性核酸内切酶的发现与DNA切割2.DNA连接酶的发现与DNA片段的连接3.载体的研究与应用5.构建载体的一般过程是什么?A目的基因的分析1.开放阅读框分析2.酶切位点分析B载体的选择与分析1.多克隆位点分析2.标记基因分析3.启动子及其他筛选标记分析C连接体系与连接时间的确定6.大肠杆菌作为基因工程受体菌的优点与缺点?优点:大肠杆菌培养方便、操作简单、成本低廉,基础生物学、分子生物学等方面背景知识清楚。
并且大肠杆菌已经发展成为一种安全的基因工程试验体系,易于批量生产。
缺点:在通常情况下,细菌的RNA聚合酶不能识别真核的启动子;细菌不具有对真核基因的蛋白进行修饰的机制,导致真核基因表达出的蛋白无法表现活性;外源真核基因表达的蛋白往往被细菌当作异己给降解掉7.如何有效提高外源基因的表达效率?提高外源基因表达效率的途径有很多,可以归纳如下:⑴提高启动子强度。
⑵缩短启动子同克隆基因间距离。
⑶高效的翻译起始序列。
⑷高效的转录终止区。
⑸提高质粒拷贝数及稳定性。
⑹用以下方法提高翻译水平:①调整SD序列与AUG间的距离;②用点突变的方法改变某些碱基;③增加mRNA的稳定性的。
⑺减轻细胞的代谢负荷:①诱导表达;②表达载体的诱导复制。
⑻提高表达蛋白的稳定性,防止其降:①克隆一段原核序列,表达融合蛋白;②采用某种突变菌株;③表达分泌蛋白质。
8.RACE技术原理与方法RACE是基于PCR技术基础上由已知的一段cDNA片段,利用锚式PCR,快速扩增cDNA末端从而获得已知mRNA内一段小序列与3‘或5’的cDNA序列技术。
9.3’RACE技术原理与方法利用mRNA的3' 末端的poly(A)尾巴作为一个引物结合位点,以连有SMART 寡核苷酸序列通用接头引物的Oligo(dT)30MN作为锁定引物反转录合成标准第一链cDNA。
然后用一个基因特异引物GSP1(gene specific primer,GSP)作为上游引物,用一个含有部分接头序列的通用引物UPM(universal primer,UPM)作为下游引物,以cDNA第一链为模板,进行PCR循环,把目的基因3' 末端的DNA片段扩增出来。
10.5’RACE技术原理与方法先利用mRNA的3'末端的poly(A)尾巴作为一个引物结合位点,以Oligo(dT)30MN作为锁定引物在反转录酶MMLV作用下,反转录合成标准第一链cDNA。
利用该反转录酶具有的末端转移酶活性,在反转录达到第一链的5' 末端时自动加上3-5个(dC)残基,退火后(dC)残基与含有SMART寡核苷酸序列Oligo(dG)通用接头引物配对后,转换为以SMART序列为模板继续延伸而连上通用接头(见下图)。
然后用一个含有部分接头序列的通用引物UPM (universal primer,UPM)作为上游引物,用一个基因特异引物2(GSP 2 genespecific primer,GSP)作为下游引物,以SMART第一链cDNA为模板,进行PCR循环,把目的基因5'末端的cDNA片段扩增出来。
11. 理想质粒载体的必备条件①能在宿主细胞中进行独立和稳定的自我复制②具有合适的限制性酶切位点③具有合适的选择标记基因1.有较小的分子质量与较高的拷贝数2.具有两种以上的选择标记基因3.缺失MOB基因(不懂)4.插入外源基因的重组质粒较易导入宿主细胞进行自我复制和表达12.核酸操作的基本技术有哪些?①核酸的提取与纯化②核酸的检测与保存③核酸的凝胶电泳④核酸的分子杂交13.合成cDNA第二链的主要策略有哪些?①自身引导合成法②置换合成法③PCR合成法④RT-PCR⑤cDNA与载体连接14.PCR技术主要应用在哪些领域?①核酸基础研究②基因测序③检测基因表达④转基因检测⑤研究未知DNA片段15.真核基因在大肠杆菌中表达存在哪些障碍?①真核基因缺乏SD序列不能直接在大肠杆菌内部翻译②细菌的RNA聚合酶不能识别真核的启动子;细菌不具有对真核基因的蛋白进行修饰的机制,导致真核基因表达出的蛋白无法表现活性③外源真核基因表达的蛋白往往被细菌当作异己给降解掉16.限制性核酸内切酶的命名原则?一般是以微生物属名的第一个字母和种名的前两个字母组成,第四个字母表示菌株(品系)17.影响DNA连接酶催化连接反应的因素有哪些?①DNA分子的纯度②DNA分子的构型③DNA分子的甲基化程度④酶切反应的时间与温度⑤缓冲液的选择18.什么是Klenow酶?有哪些活性?在基因工程中有何作用?Klenow 酶KlenowFragment,又称Klenow片段,是大肠杆菌聚合酶I的大片断。
保留了DNA聚合酶I的5'→3'聚合酶活性和3'→5'外切酶活性,但缺少完整的Klenow酶的5'→3'外切酶活性。
由于其失去了降解5’端引物的活性,所以在基因工程中更有用1.修复反应,制备平末端2.制备3’标记探针19.若已知某基因的功能及其相应的蛋白质核苷酸序列,可通过哪些办法克隆该基因?可以通过合成核苷酸探针或设计简并PCR引物从cDNA文库中筛选。
或利用相应抗体从cDNA文库中克隆20.YAC载体有什么样的功能性序列?为什么在克隆大片段时,YAC具有优越性?YAC带有天然染色体所有的功能元件,包括一个着丝粒,一个DNA复制起点,两个端粒。
YAC能容纳长达几百KB的外源DNA。
大片段的插入更有可能包含完整的基因,增大染色体的步移距离,减少所需克隆数目21.什么是western印迹,其与southern印迹又何不同?Western印迹是将蛋白质经电泳分离后从凝胶中转移到固相支持物上,然后用特异的抗体进行检测。
他与southern的不同在于探针性质的不同,在western中使用的探针为抗体(蛋白质)22.什么是蓝白斑筛选法?蓝白斑筛选是一种基因工程常用的细菌重组子的筛选方法。
野生型大肠杆菌(E.Coli)产生的β-半乳糖苷酶可以将无色化合物X-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)切割成半乳糖和深蓝色的物质5-溴-4-靛蓝。
5-溴-4-靛蓝可使整个菌落产生蓝色变化。
突变型大肠杆菌缺少完整的β-半乳糖苷酶,在含有互补片段质粒作用下,可形成完整的β-半乳糖苷酶,插入外源基因的质粒则破坏了半乳糖苷酶的编码,从而通过颜色变化筛选重组子。
这种方法是根据组织化学的原理来筛选重组体。
主要是在λ载体的非必要区段插入一个自带有大肠杆菌β半乳糖苷酶的基因片段,携带有LAC基因片段的λ载体转入宿主后·,在含有X-gal平板上形成浅蓝色噬菌斑。
外源基因插入LAC 后,丧失分解Xgal的能力,形成白色噬菌斑。
便于筛选23.粘性末端链接法的不足①载体易自身环化②难插入特定基因③大片段DNA重组率低④同一种限制酶产生的黏性末端不易定向克隆24.什么是同聚物加尾连接法?有哪些优缺点?同聚物加尾法是利用末端转移酶在载体及外源双链DNA的3’端加上一段寡聚核苷酸,制成人工黏粒末端,DNA与载体间要加上互补的dT优点①不易自身环化②链接效率高,因为是互补的黏性末端任何一种方法制备的DNA都可用此法连接缺点①繁琐②尾巴影响基因表达25.重粗DNA技术有哪些基本步骤?①获得目的基因②与克隆载体连接③转化④对转化子筛选与鉴定⑤培养或的产物26.获得目的基因常用的方法有哪些?①从基因文库中提取②PCR技术③人工合成27.常用的抗生素标记有哪些?氨苄青霉素抗性基因ampr 四环素抗性基因tetr 氯霉素抗性基因cmr 卡那霉素和新霉素抗性基因kanr28.琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳的异同点?DNA电泳常用的支持介质有琼脂糖凝胶和聚丙烯酰胺凝胶.琼脂糖凝胶的凝胶孔径大,适合大分子DNA电泳和需要快速简单分析的DNA电泳,电泳方式一般采用水平潜水电泳。
优点是快速简单,但分辨率不是很高,对于差异较小的 DNA片段难以分辨。
聚丙烯酰胺凝胶电泳适宜分离鉴定低分子量蛋白质、小于1Kb的DNA片段和DNA序列分析.其装载的样品量大,回收DNA纯度高.长度仅相差0.2%(即500bp中的1bp)的核苷酸分子即能分离.一般说来,分离鉴定小于1000个核苷酸的核酸片段可用聚丙烯酰胺电泳,分离鉴定0.1-50kb的DNA片段可用恒场常规琼脂糖电泳,而分离鉴定大于50kb的DNA片段则需采用脉冲场琼脂糖电泳。
29.构建cDNA文库的一般步骤①mRNA的分离纯化②cDNA的合成③cDNA与载体连接④噬菌体颗粒包装及导入宿主细胞中繁殖30.DNA双脱氧链终止测序法的基本步骤原理:双脱氧的核苷酸是人造的分子,这种分子糖环的2’和3'碳上都没有了羟基基团,而在天然分子中糖环的3'碳上有一个羟基。
在DNA复制过程中,新掺入的碱基按碱基互补配对原则是天然三磷酸核苷酸,用它的5'-α-P同生长链的前一个核苷酸的3'羟基连接。
但是,若进入的核苷酸是双脱氧的,则由于3'没有羟基而影响下一个磷酸二酯键的形成,导致DNA复制终止。
方法:将待测序的单链DNA的模板、引物、四种单脱氧碱基和DNA聚合酶分成四管,在四管反应系统中分别按比例引入四种双脱氧碱基,只要双脱氧碱基掺入链端,该链就停止延长,链端掺入单脱氧碱基的片段可继续延长。