血细胞计数板的构造和使用方法简介
血细胞计数板相关知识及练习
血细胞计数板一、血细胞计数板的构造血细胞计数板被用以对人体内红、白血细胞进行显微计数之用，也常用于计算一些细菌、真菌、酵母等微生物的数量，是一种常见的生物学工具。
血细胞计数板是由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的。
玻片中有四条下凹的槽,构成三个平台。
中间的平台较宽,其中间又被一短横槽隔为两半,每半边上面,刻有一个方格网。
方格网上刻有9个大方格,其中只有中间的一个大方格为计数室,供微生物计数用。
这一大方格的长和宽各为1mm,深度为0.1mm,其体积为0.1mm3。
计数室通常有两种规格.一种是大方格内分为16中格,每一中格又分为25小格；另一种是大方格内分为25中格,每一中格又分为16小格。
但是不管计数室是哪一种构造，它们都有一个共同的特点,即每一大方格都是由16×25=25×16=400个小方格组成,见图：血细胞计数板（25格×16格）二、血细胞计数板的使用以计数酵母菌为例1.使用(1)用血细胞计数板计数酵母菌悬液的酵母菌个数。
(2)样品稀释的目的是便于酵母菌悬液的计数,以每小方格内含有4-5个酵母细胞为宜,一般稀释10倍即可。
(3)将血细胞计数板用擦镜纸擦净,在中央的计数室上加盖专用的厚玻片。
(4)将稀释后的酵母菌悬液,用吸管吸取一滴置于盖玻片的边缘,使菌液缓缓渗入,多余的菌液用吸水纸吸取,捎待片刻,使酵母菌全部沉降到血细胞计数室内。
(5)计数时,如果使用16格×25格规格的计数室,要按对角线位,取左上,右上,左下,右下4个中格(即100个小格)的酵母菌数.如果规格为25格×16格的计数板,除了取其4个对角方位外,还需再数中央的一个中格(即80个小方格)的酵母菌数。
(6)当遇到位于大格线上的酵母菌,一般只计数大方格的上方和右方线上的酵母细胞(或只计数下方和左方线上的酵母细胞) 。
(7)对每个样品计数三次,取其平均值,按下列公式计算每1ml菌液中所含的酵母菌个数。
血球计数板的使用
血球计数板生物实验用具血球计数板是显微镜上的外挂物件,可用来测量细胞,细菌等一些微小物体的长度,还有就是测量数量,如单位体积细胞的数量.血球计数板的构造和使用血球计数板是由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的.玻片中有四条下凹的槽,构成三个平台.中间的平台较宽,其中间又被一短横槽隔为两半,每半边上面,刻有一个方格网.方格网上刻有9个大方格,其中只有中间的一个大方格为计数室,供微生物计数用.这一大方格的长和宽各为1mm,深度为0.1mm,其体积为0.1mm3.计数室通常有两种规格.一种是大方格内分为16中格,每一中格又分为25小格;另一种是大方格内分为25中格,每一中格又分为16小格.但是不管计数室是哪一种构造;它们都有一个共同的特点,即每一大方格都是由16×25=25×16=400个小方格组成,见图.血球计数板的使用以计数酵母菌为例(1)用血球计数板计数酵母菌悬液的酵母菌个数.(2)样品稀释的目的是便于酵母菌悬液的计数,以每小方格内含有4-5个酵母细胞为宜,一般稀释10倍即可.(3)将血球计数板用擦镜纸擦净,在中央的计数室上加盖专用的厚玻片.(4)将稀释后的酵母菌悬液,用吸管吸取一滴置于盖玻片的边缘,使菌液缓缓渗入,多余的菌液用吸水纸吸取,捎待片刻,使酵母菌全部沉降到血球计数室内.(5)计数时,如果使用16格×25格规格的计数室,要按对角线位,取左上,右上,左下,右下4个中格(即100个小格)的酵母菌数.如果规格为25格×16格的计数板,除了取其4个对角方位外,还需再数中央的一个中格(即80个小方格)的酵母菌数.(6)当遇到位于大格线上的酵母菌,一般只计数大方格的上方和右方线上的酵母细胞(或只计数下方和左方线上的酵母细胞).(7)对每个样品计数三次,取其平均值,按下列公式计算每1ml菌液中所含的酵母菌个数.3.计算公式(1)16格×25格的血球计数板计算公式:酵母细胞数/ml=100小格内酵母细胞个数/100×400×104×稀释倍数(2)25格x16格的血球计数板计算公式:酵母细胞数/ml=80小格内酵母细胞个数/80×400×104×稀释倍数4.血球计数板的清洁血球汁数板使用后,用自来水冲洗,切勿用硬物洗刷,洗后自行晾干或用吹风机吹干,或用95%的乙醇,无水乙醇,丙酮等有机溶剂脱水使其干燥.通过镜检观察每小格内是否残留菌体或其他沉淀物.若不干净,则必须重复清洗直到干净为止.实验六微生物的显微直接计数法一、实验目的了解血球计数板的构造、计数原理和计数方法，掌握显微镜下直接计数的技能。
血细胞计数板的构造和使用方法简介(必3)
血细胞计数板的构造和使用方法一、血细胞计数板的构造血细胞计数板是由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的。
玻片中有四条下凹的槽，构成三个平台；中间的平台较宽，其中间又被一短横槽隔为两半，每半边上面刻有一个方格网（见图B ——侧视图、图A ——俯视图；1.计数板 2.盖玻片 3.计数室）。
方格网上刻有9个大方格（见图C 、E ），其中只有中间的一个大方格为计数室，供微生物（细胞）计数用。
计数室通常有两种规格：一种是25×16型，即大方格内分为25个中方格（中方格之间用双线分开，见图C 、D ），每一中方格又分为16个小方格；另一种是16×25型，即大方格内分为16个中方格（见图E ），每一中方格又分为25个小方格。
但是不管计数室是哪一种构造，它们都有一个共同的特点：即每一大方格都是由25×16=16×25=400个小方格组成（见图D ）。
计数室边长为1mm （或2mm ），面积为l mm 2（或4 mm 2），盖上盖玻片后，计数室的深度为0.1mm ，所以计数室的容积为0.1mm 3（或0.4 mm 3）。
（图A ——俯视图：XB-K-25为计数板的型号和规格，表示此计数板分25个中格；0.1mm 为盖上盖玻片后计数室的深度；1/400mm 2表示计数室面积是1mm 2，分400个小格，每小格面积是1/400 mm 2）。
C D E二、血细胞计数板的使用（以计数酵母菌为例）(1)视待测菌悬液浓度，加无菌水适当稀释。
样品稀释的目的是便于酵母菌悬液的计数，以每小方格内含有4—5个酵母细胞为宜。
(2)将血细胞计数板用擦镜纸擦净，在计数室上盖上一块专用的盖玻片。
(3)将稀释后的酵母菌悬液摇匀，用吸管吸取少许，从计数板中间平台两侧的沟槽内沿盖玻片的下边缘摘入一小滴（不宜过多），让菌悬液利用液体的表面张力充满计数室，勿使气泡产生，并用吸水纸吸去沟槽中流出的多余菌悬液。
(4)静置片刻，待酵母菌全部沉降到计数室低部，将血细胞计数板置载物台上夹稳，先在低倍镜下找到计数室后，再转换高倍镜观察并计数。
细胞计数板的使用方法
血球计数板-基本构造血球计数板是一块特制的厚型载玻片，载玻片上有四个槽构成三个平台。
中间的平台较宽，其中间又被一短横槽分隔成两半，每个半边上面各刻有一小方格网，每个方格网共分九个大格，中央的一大格作为计数用，称为计数区。
计数区的刻度有两种：一种是计数区分为16个大方格（大方格用三线隔开），而每个大方格又分成25个小方格；另一种是一个计数区分成25个大方格（大方格之间用双线分开），而每个大方格又分成16个小方格。
但是不管计数区是哪一种构造，它们都有一个共同特点，即计数区都由400个小方格组成。
计数区边长为1mm，则计数区的面积为1mm2，每个小方格的面积为1/400mm2。
盖上盖玻片后，计数区的高度为0.1mm，所以每个计数区的体积为0.1mm3，每个小方格的体积为1/4000mm3。
使用细胞计数板计数时，先要测定每个小方格中微生物的数量，再换算成每毫升菌液（或每克样品）中微生物细胞的数量。
细胞计数板-使用方法1．视待测菌悬液浓度，加无菌水适当稀释（斜面一般稀释100倍？），以每小格的菌数可数为度。
2．取洁净的细胞计数板一块，在计数区上盖上一块盖玻片。
3．将菌悬液摇匀，用滴管吸取少许，从计数板中间平台两侧的沟槽内沿盖玻片的下边缘滴入一小滴（不宜过多），让菌悬液利用液体的表面张力充满计数区，勿使气泡产生，并用吸水纸吸去沟槽中流出的多余菌悬液。
也可以将菌悬液直接滴加在计数区上（不要使计数区两边平台沾上菌悬液，以免加盖盖玻片后，造成计数区深度的升高），然后加盖盖玻片（勿使产生气泡）。
4．静置片刻，使细胞沉降到计数板上，不再随液体漂移。
将细胞计数板放置于显微镜的载物台上夹稳，先在低倍镜下找到计数区后，再转换高倍镜观察并计数。
血细胞计数板计数法
血细胞计数板计数法(总2页)
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血球计数板的构造和使用
一、简介
血球计数板是由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的.玻片中有四条下凹的槽,构成三个平台.中间的平台较宽,其中间又被一短横槽隔为两半,每半边上面,刻有一个方格网.方格网上刻有9个大方格,其中只有中间的一个大方格为计数室,供微生物计数用.这一大方格的长和宽各为1mm,深度为,其体积为.。
计数室通常有两种规格.一种是大方格内分为16中格,每一中格又分为25小格;另一种是大方格内分为25中格,每一中格又分为16小格.但是不管计数室是哪一种构造;它们都有一个共同的特点,即每一大方格都是由
16×25=25×16=400个小方格组成,见图。
二、计数室两种规格
1．16×25型的计数板将计数室放大，可见它含16中格，一般取四角：1、4、13、16四个中方格（100个小方格）计数。
细胞个数／1mL＝100个小方格细胞总数/ 100 ×400×10000×稀释倍数
2．25×16型的计数板中央大方格以双线等分成25个中方格，每个中方格又分成16个小方格，供细胞计数用（见图三）。
一般计数
四个角和中央的五个中方格（80个小方格）的细胞数。
细胞个数／1mL＝80个小方格细胞总数/ 80×400×10000×稀释倍
数
期的样液稀释后再计数。
血球计数板的使用方法
血球计数板的使用方法血球计数板是临床实验室中常用的一种设备，用于进行血细胞计数和形态观察。
正确的使用方法对于获得准确的结果至关重要。
下面将详细介绍血球计数板的使用方法。
首先，准备工作。
在进行血球计数之前，需要准备好所需的工具和试剂，包括血球计数板、显微镜、横纹管、生理盐水、乙醇等。
确保这些工具和试剂都是清洁的，并且没有污染。
接下来，进行样本制备。
首先，将一滴血液加入到横纹管中，然后用生理盐水进行稀释，直到样本达到合适的稀释倍数。
将稀释后的样本加入到血球计数板的计数室中，确保填满计数室的每一个小格。
然后，进行计数和观察。
将血球计数板放置在显微镜上，调整倍数和焦距，观察计数室中的血细胞。
使用显微镜的目镜和物镜进行细胞计数和形态观察，记录所观察到的细胞数量和形态特征。
最后，进行数据分析和结果记录。
根据观察到的细胞数量和形态特征，进行数据分析，计算出各种血细胞的数量比例。
将结果记录在实验记录表中，并进行结果的验证和复核。
在使用血球计数板的过程中，需要注意以下几点。
首先，确保血球计数板和显微镜的清洁和干燥，避免污染和误差。
其次，稀释样本时要注意控制稀释倍数，以确保观察到合适数量的细胞。
最后，进行计数和观察时，要认真细致，避免遗漏或重复计数。
血球计数板的使用方法并不复杂，但需要严格按照操作规程进行，以确保结果的准确性和可靠性。
正确的使用方法不仅可以提高实验效率，还可以避免误差和污染，保证实验结果的科学性和可信度。
希望以上介绍对于血球计数板的正确使用有所帮助。
细胞计数板的使用方法
血球计数板-基本构造血球计数板是一块特制的厚型载玻片，载玻片上有四个槽构成三个平台。
中间的平台较宽，其中间又被一短横槽分隔成两半，每个半边上面各刻有一小方格网，每个方格网共分九个大格，中央的一大格作为计数用，称为计数区。
计数区的刻度有两种：一种是计数区分为16个大方格（大方格用三线隔开），而每个大方格又分成25个小方格；另一种是一个计数区分成25个大方格（大方格之间用双线分开），而每个大方格又分成16个小方格。
但是不管计数区是哪一种构造，它们都有一个共同特点，即计数区都由400个小方格组成。
计数区边长为1mm，则计数区的面积为1mm2，每个小方格的面积为1/400mm2。
盖上盖玻片后，计数区的高度为0.1mm，所以每个计数区的体积为0.1mm3，每个小方格的体积为1/4000mm3。
使用细胞计数板计数时，先要测定每个小方格中微生物的数量，再换算成每毫升菌液（或每克样品）中微生物细胞的数量。
细胞计数板-使用方法1．视待测菌悬液浓度，加无菌水适当稀释（斜面一般稀释100倍），以每小格的菌数可数为度。
2．取洁净的细胞计数板一块，在计数区上盖上一块盖玻片。
3．将菌悬液摇匀，用滴管吸取少许，从计数板中间平台两侧的沟槽沿盖玻片的下边缘滴入一小滴（不宜过多），让菌悬液利用液体的表面力充满计数区，勿使气泡产生，并用吸水纸吸去沟槽中流出的多余菌悬液。
也可以将菌悬液直接滴加在计数区上（不要使计数区两边平台沾上菌悬液，以免加盖盖玻片后，造成计数区深度的升高），然后加盖盖玻片（勿使产生气泡）。
4．静置片刻，使细胞沉降到计数板上，不再随液体漂移。
将细胞计数板放置于显微镜的载物台上夹稳，先在低倍镜下找到计数区后，再转换高倍镜观察并计数。
由于生活细胞的折光率和水的折光率相近，观察时应减弱光照的强度。
5．计数时若计数区是由16个大方格组成，按对角线方位，数左上、左下、右上、右下的4个大方格（即100小格）的菌数。
如果是25个大方格组成的计数区，除数上述四个大方格外，还需数中央1个大方格的菌数（即80个小格）。
血球计数板的使用方法
血球计数板的使用方法
血球计数板是一种用于测量血液中各种血球数量的实验室工具。
下面是使用血球计数板的一般步骤：
1. 准备工作：
- 清洁血球计数板：使用酒精或其他适当的清洁剂将血球计
数板彻底清洁，并确保完全干燥。
- 准备血液样本：采集血液样本，并将其置于抽血管中。
2. 充填血液样本：
- 将橡胶管连接至抽血管的一端，并将另一端放入含有适当
稀释液（例如乙醇，盐水等）的试管中。
- 轻轻压抽血管，让血液与稀释液混合，确保样本适当稀释。
3. 填充计数室：
- 将计数室的一角放入混合好的血液样本液中。
- 逐渐放松手指，使液体自然充满整个计数室。
4. 观察计数室：
- 使用显微镜，在10倍或40倍放大倍数下观察计数室的血
球图像。
- 记录计数室内的血球数量。
5. 计算血球数量：
- 将计数室中各种血球的数量进行计算和统计。
- 根据计数室内的面积和深度，计算总血球数量。
- 可以使用计数室所覆盖的血球数量与已知的面积，以得出
总血球数量的近似值。
6. 清洗和储存：
- 使用适当的清洁剂彻底清洗计数室，确保无血液残留。
- 将计数室储存在干燥，洁净的地方，以防止污染和损坏。
请注意，使用血球计数板可能需要一定的实验室训练和技巧，以确保准确性和可靠性。
在进行血液分析时，应遵循实验室的操作指南和安全规定。
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血细胞计数板的构造和使用方法简介
【摘要】人民教育出版社高中生物教材必修3《稳态与环境》中“探究培养液中酵母菌种群数量的变化”实验用到血细胞计数板（血球计数板），教材中没有介绍其构造和用法，学生对此感到很生疏。
本文简要介绍血细胞计数板的构造和使用方法。
【关键词】血细胞计数板的构造计数方法使用方法
人民教育出版社高中生物教材必修3《稳态与环境》中“探究培养液中酵母菌种群数量的变化”实验用到血细胞计数板（血球计数板），教材中没有介绍其构造和用法，学生对此感到很生疏。
下面简要介绍血细胞计数板的构造和使用方法。
1.血细胞计数板的构造
血细胞计数板(血球计数板)是显微镜上的外挂物件，可用来测量细胞、细菌等一些微小物体的长度，测量单位体积细胞的数量等。
血细胞计数板是由一块比普通玻片大而厚的特制玻璃片制成的，它的两边有两个凸起部分，中间有四条槽沟构成三个平台，中央的平台较宽，而且被一短槽隔成两半，每个半边上各刻有一个方格网，每个方格网共有九大格，中央的大格就是计数室、中央的平台比两边稍低，加盖盖玻片后，中央平台要比两边平台低0.1mm,也就是盖上盖玻片后计数室深度为0.1mm.。
（见图A、B、C、D）
1.1 计数室的规格有两种，一种是由25中格组成，每个中格又分为16个小格（共25×16＝400小格）（见图E）；另一种是由16中格组成，每个中格又分成25个小格（共16×25＝400小格）(见图F)。
可见，尽管计数室有两种规格，但是，不管计数室是哪一种构造，它们都有一个共同的特点，即每一大方格都是16×25=25×16=400个小方格组成。
1.2 计数室的大小有两种，一种是边长为1mm,则计数室面积为1mm2,每个小格面积为〖SX(〗1〖〗400〖SX)〗mm 2 ，盖上盖玻片后，计数室的高度为0.1mm。
所以，一个计数室的体积为0.1mm3，每个小方格的体积为〖SX(〗1〖〗4000〖SX)〗mm 3 ；另一种是边长为2mm，则计数室的面积为4mm2，每个小格面积为〖SX(〗1〖〗100〖SX)〗mm2，盖上盖玻片后计数室的高度为0.1mm，所以，一个计数室的体积为0.4mm3，每个小方格的体积为〖SX(〗1〖〗1000〖SX)〗mm3。
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2.计数方法
2.1 25×16计数室：显微镜下数左上、右上、左下、右下和中央共五个中格，即5×16＝80个小方格的细菌数，若这80个小方格细菌数为A(对每个样品计数三次,取其平均值)。
①若计数室的边长为1mm,则每毫升菌液的含菌量计算公式为〖SX(〗A〖〗80〖SX)〗×400×10×1000=50000A（若菌液被稀释，还要乘以
稀释倍数）；②若计数室的边长为2mm，则每毫升菌液的含菌量计算公式为〖SX(〗A〖〗80〖SX)〗×400×2.5×1000=12500A （若菌液被稀释，还要乘以稀释倍数）。
2.2 16×25计数室：显微镜下数左上、右上、左下、右下共四个中格，即4×25＝100个小方格的细菌数，若这100个小方格的细菌数为B(对每个样品计数三次,取其平均值)。
①若计数室边长为1mm,则每毫升菌液的含菌量计算公式为〖SX(〗B〖〗100〖SX)〗×400×10×1000=4000B （若菌液被稀释，还要乘以稀释倍数）。
②若计数室的边长为2mm，则每毫升菌液的含菌量计算公式为〖SX(〗B〖〗100〖SX)〗×400×2.5×1000=10000B （若菌液被稀释，还要乘以稀释倍数）。
3.使用方法（以酵母菌为例）
3.1 取血细胞计数板，盖上盖玻片，将加入酵母菌的试管摇匀后，用滴管吸取少许菌液，从计数板中间平台两侧的沟槽内沿盖玻片的边缘滴入一小滴，菌液会沿着沟槽扩散，充满计数区，然后用吸水纸吸去多余的菌悬液。
3.2 静置数分钟，待全部菌体细胞沉降到载玻片表面再置于显微镜下观察，先用低倍镜观察，找到计数板刻度后，换高倍镜计数，将结果记录下来，作为原始数据使用，取下盖玻片，用水将计数板浸泡、冲洗干净（切勿用硬物洗刷或擦抹，以免损坏网格刻度），待自然晾干，放入盒内保存。
3.3 每个样品计数通常应重复三次以上，取平均值，求出每个小方格中的酵母菌平均数，按以上计数方法计算。
3.4 由于菌液处于不同的空间位置，要在不同的焦距下才能看到，故观察时必须不断调节细准焦螺旋，才能找到全部菌体，以免误差，对于压线的菌体，采取计上不计下，计左不计右的计算方法，以减少误差，若酵母菌已出芽，只要芽体达到母体的〖SX(〗1〖〗2〖SX)〗，即可单独计为一个个体。
3.5 由于酵母菌是单细胞生物，细胞体积很小，不易观察，在观察显微镜时，要注意对视野的明暗进行选择，太明或太暗都不好，如果样品密度很大，为了计数准确，常常需将待测样品稀释成不同浓度的菌液后再进行计数，一般每一小格内酵母菌数目平均在10个以上的，通常应该稀释，稀释倍数以每小格5～6个菌体为宜。
3.6 取液过程中，为了防止污染，一定要用无菌滴管或无菌移液器，稀释时尽量取少一些，稀释后的溶液不能放回原液。
4.血球计数板的清洁
血球汁数板使用后，用自来水冲洗,切勿用硬物洗刷,洗后自行晾干或用吹风机吹干，或用95%的乙醇,无水乙醇,丙酮等有机溶剂脱水使其干燥.通过镜检观察每小格内是否残留菌体或其他沉淀物。
若不干净，则必须重复清洗直到干净为止。
举例：在用血细胞计数板（1mm×1mm）刻度为25中格×16小格，装入液体后液体高度为0.1mm,经过计数计算，求得每个小格中的平均酵母菌数为A个，且已知稀释倍数为B，则1mL培养液中的酵母菌数为〖CD#4〗个？（答案
4AB×106）。
参考文献
［1］《高中生物新课程探究实验指导》，教育部教学仪器研究所，凯普生物科技有限公司编著.人民教育出版社,2007年2月第1版.。