细胞数的测定(血球计数板的使用方法)
血球计数板的计数方法
血球计数板的计数方法血球计数板是一种常见的实验室设备，用于进行血液细胞计数。
本文将详细介绍血球计数板的计数方法，包括准备工作、样本处理、装载计数板、显微镜观察和计算结果等方面。
一、准备工作1.清洁：将血球计数板从存放位置取出，用酒精或去离子水擦拭干净，确保无灰尘和污垢。
2.检查：检查血球计数板是否完好无损，如有破损或变形应及时更换。
3.校准：使用前应进行校准，确保读数准确可靠。
二、样本处理1.采集样本：从受试者的静脉或指尖采集适量的血液样本，并将其加入到已经预先混合好的抗凝剂中。
2.混匀：轻轻摇动管子使其充分混匀，避免产生气泡。
3.稀释：将适量的稀释液加入到混合好的样本中。
通常情况下，白细胞需要进行稀释，而红细胞不需要稀释。
具体稀释倍数应根据实际情况而定。
三、装载计数板1.取出计数板：将血球计数板取出，放在干净的台面上，注意不要碰到玻璃面。
2.装载样本：使用移液器或吸管将稀释好的样本加入到计数板的样本槽中。
注意不要加过多，以免溢出。
3.震荡：轻轻震动计数板，使其充分混合。
四、显微镜观察1.调节显微镜：将显微镜调整到适当的倍率，并调节焦距，以便观察细胞。
2.观察细胞：在计数板上找到一个适当的视野，并开始观察细胞。
对于白细胞和红细胞，应分别选择不同的区域进行观察。
3.计数细胞：使用目镜和标尺，在每个小方格内逐一计数细胞。
对于白细胞和红细胞，应分别进行计数，并记录下来。
五、计算结果1.白细胞计算：根据已经记录下来的白细胞数量和稀释倍数，按照公式进行计算得出白细胞计数结果。
2.红细胞计算：根据已经记录下来的红细胞数量和稀释倍数，按照公式进行计算得出红细胞计数结果。
3.血红蛋白计算：根据已经记录下来的红细胞数量和血红蛋白浓度，按照公式进行计算得出血红蛋白计数结果。
4.其他指标计算：根据实验需要，可以进一步计算其他指标，如平均红细胞体积、平均血红蛋白含量等。
六、注意事项1.避免使用过期或损坏的血球计数板。
2.样本必须充分混匀，以确保稀释均匀。
细胞计数方法细胞计数板法
细胞计数方法——-－-—细胞计数板法实验原理:当待测细胞悬液中细胞均匀分布时,通过测定一定体积悬液中得细胞得数目,即可换算出每毫升细胞悬液中细胞得细胞数目。
具体操作:１. 将计数板及盖片擦拭干净,并将盖片盖在计数板。
２、将细胞悬液吸出少许,滴加在盖片边缘,使悬液充满盖片与计数板之间,静置３miｎ,注意盖片下不要有气泡,也不能让悬液流入旁边槽中。
3。
计算板四大格细胞总数,压线细胞只计左侧与上方得。
然后按公式计算:细胞数/ｍL=四大格细胞总数/4×1０个／ml(注:当细胞很多时,可在四个格中选一定数目较平均得小格,由于每大格中有１6个小格,然后计左侧与上方得细胞数,求出每小格得细胞数,取平均值m,m×1６即每个格得平均值。
所以,细胞密度=m×1６×10个／ml)说明:公式中除以4,因为计数了４个大格得细胞数。
公式中乘以10因为计数板中每一个大格得体积为:１。
0mm(长)×1.0mm(宽)×０。
１mm(高)=0.1mm 而1ml=1０00ul＝１0０0ｍm (注意:镜下偶见有两个以上细胞组成得细胞团,应按单个细胞计算,若细胞团10%以上,说明分散不好,需重新制备细胞悬液。
)=========＝===============＝==＝=＝=＝＝===＝=＝＝====＝==细胞计数板得使用一、血球计数板-基本构造血球计数板就是一块特制得厚型载玻片,载玻片上有四个槽构成三个平台。
中间得平台较宽,其中间又被一短横槽分隔成两半,每个半边上面各刻有一小方格网,每个方格网共分九个大格,中央得一大格作为计数用,称为计数区。
计数区得刻度有两种:一种就是计数区分为１６个大方格(大方格用三线隔开),而每个大方格又分成２5个小方格;另一种就是一个计数区分成２5个大方格(大方格之间用双线分开),而每个大方格又分成1６个小方格。
但就是不管计数区就是哪一种构造,它们都有一个共同特点,即计数区都由400个小方格组成、计数区边长为１ｍｍ,则计数区得面积为1mm２,每个小方格得面积为1/400mm2。
血球计数板的使用方法
血球计数板的使用方法血球计数板是临床检验中常用的一种实验工具，用于进行血液细胞计数。
它能够帮助医生了解患者的血液状况，对于疾病的诊断和治疗起着重要的作用。
在使用血球计数板时，我们需要按照一定的步骤和方法进行操作，下面将详细介绍血球计数板的使用方法。
首先，准备工作。
在进行血球计数板的使用前，需要准备好所需的仪器和试剂，包括血球计数板、显微镜、计数用液等。
同时，要确保仪器的清洁和完好，避免因为仪器问题导致实验结果的不准确。
第二步，取样。
在进行血球计数前，需要从患者的静脉血中抽取一定量的血液样本。
在抽取血样时，要注意使用无菌注射器和采血针，避免引入外部细菌或其他污染物质。
第三步，稀释。
将取得的血液样本进行稀释处理，使其浓度适合于在血球计数板上进行观察和计数。
通常情况下，我们会采用一定比例的稀释液将血液样本稀释，以便于在显微镜下观察到合适数量的血细胞。
第四步，填充血球计数板。
将稀释后的血液样本填充到血球计数板的计数室中。
填充时要注意不要使得计数室过满或者过少，以免影响后续的观察和计数。
第五步，观察计数。
将填充好的血球计数板放置在显微镜下，以适当的放大倍数观察血细胞的数量和形态。
在观察过程中，要仔细观察每一个计数室，并记录下其中的红细胞、白细胞和血小板的数量。
第六步，计数。
根据观察到的血细胞数量，进行相应的计数。
通常情况下，我们会选择几个计数室进行计数，并取其平均值作为最终的计数结果。
在计数过程中，要注意避免重复计数或者漏计，保证结果的准确性。
最后，记录结果。
将观察和计数的结果记录在实验记录表中，并进行相应的数据处理和分析。
在记录结果时，要注意标明样本的来源和处理方法，以便于后续的结果验证和分析。
总之，血球计数板的使用方法包括准备工作、取样、稀释、填充、观察计数、计数和记录结果等步骤。
在进行实验时，要严格按照操作规程进行，确保实验结果的准确性和可靠性。
希望以上介绍能够帮助大家正确使用血球计数板，提高实验效率和结果质量。
血球计数板的计数方法
血球计数板的计数方法血球计数板是临床实验室中常用的一种计数工具，用于进行血细胞计数。
正确的计数方法对于获得准确的结果至关重要。
下面将介绍血球计数板的计数方法。
首先，准备工作。
在进行血球计数之前，需要准备好所需的实验器材和试剂。
包括血球计数板、显微镜、计数用盖玻片、血细胞计数液等。
确保实验器材的清洁和完整，以免影响计数结果。
其次，取样。
取适量的血液样品，使用吸管或注射器将血液滴在计数板的计数室中。
注意避免气泡的产生，以确保计数的准确性。
然后，计数。
将计数板放置在显微镜上，调节镜头至适当倍数。
在计数室的九个小方格中，选择几个进行计数。
根据所选小方格的面积和深度，计算出所选小方格的体积。
然后在显微镜下观察所选小方格中的血细胞数量，并进行计数。
接着，计算。
根据所选小方格的体积和计数结果，计算出每升血液中的血细胞数量。
通常情况下，计数板上的每个小方格代表的体积是已知的，根据这一体积和计数结果，可以得出血细胞的浓度。
最后，记录。
将计数结果准确记录下来，包括所选小方格的数量、计数板的倍数、计数室的体积等信息。
这些记录对于结果的准确性和可复现性具有重要意义。
在进行血球计数板的计数方法时，需要注意以下几点，首先，要保持耐心和细心，避免因匆忙而导致计数错误。
其次，要进行多次计数，并取平均值，以提高结果的准确性。
最后，要严格按照操作规程进行，避免操作失误。
总之，血球计数板的计数方法是临床实验室中常用的一种技术。
正确的计数方法能够确保结果的准确性，对于临床诊断和治疗具有重要意义。
希望本文介绍的计数方法能够对相关人员有所帮助，提高血球计数的准确性和可靠性。
细胞数的测定(血球计数板的使用方法)
细胞数的测定一、目的与要求了解血球计数板计数的原理，学会测定细胞总数方法。
二、原理用血球计数板在显微镜下直接计数是一种常用的微生物计数方法。
血球计数板是一块特制的厚载玻片，其上由四条槽构成三个平台，中间较宽的平台又被一短横槽隔成两半，每一边的平台上各刻有一个方格网，每个方格网共分为9个大方格，中间的大方格即为计数室。
计数室的刻度一般有两种规格，一种是一个大方格分成16个中方格，每个中方格又分成25个小格（即16x25），另一种是一个大方格分成25个中方格，每个中方格又分为16个小方格（即25×16），但无论是哪一种规格的计数板，每一个大方格中的小方格都是400个，每一个大方格边长为1 mm，则每一个大方格的面积为1 mm2，盖上盖玻片后，盖玻片与载玻片之间的高度为0.1mm，所以计数室的容积为0.1 mm3三、血球计数板的使用方法（一）菌悬液的制备为便于计数，对样品进行适当稀释，稀释程度以每小格内含5～10个酵母为宜，可采用10倍系列稀释法。
（二）加菌悬液样品将清洁干燥的血球计数板盖上盖玻片，再用无菌的毛细滴管将摇匀的菌悬液由盖玻片边缘滴一小滴，让菌液沿缝隙靠毛细渗透作用自动进入计数室，用吸水纸吸去多余水液。
由盖玻片边缘或槽内加入计数板来回推压盖玻片，使其紧贴在计数板上，计数室内不能有气泡。
静置5-10分钟。
（三）显微镜计数在低倍镜下找到小方格网后更换高倍镜观察计数，上下调动细螺旋，以便看到小室内不同深度的菌体。
位于分格线上的菌体，只数两条边上的，其余两边不计数。
如数上线就不数下线，数左边线就不数右边线。
当芽孢菌体达到母细胞大小的二分之一时，可记作两个细胞。
（四）计数时若使用刻度为25×16（大格）的计数板，则数四角的4个大格（即100小格）内的菌数。
如用刻度为16×25（大格）的计数板，除数四角的4个大格外，还需数中央1个大格的菌数（即80小格）。
每小格中菌数以5-10个为宜，如菌液过浓可适当稀释。
细胞计数方法细胞计数板法
细胞计数方法------细胞计数板法实验原理：当待测细胞悬液中细胞均匀分布时，通过测定一定体积悬液中的细胞的数目，即可换算出每毫升细胞悬液中细胞的细胞数目。
具体操作：1. 将计数板及盖片擦拭干净，并将盖片盖在计数板。
2. 将细胞悬液吸出少许，滴加在盖片边缘，使悬液充满盖片和计数板之间，静置3min，注意盖片下不要有气泡，也不能让悬液流入旁边槽中。
3. 计算板四大格细胞总数，压线细胞只计左侧和上方的。
然后按公式计算：细胞数/mL=四大格细胞总数/4×104个/ml(注：当细胞很多时，可在四个格中选一定数目较平均的小格，由于每大格中有16个小格，然后计左侧和上方的细胞数，求出每小格的细胞数，取平均值m，m ×16即每个格的平均值。
所以，细胞密度=m×16×104个/ml)说明：公式中除以4，因为计数了4个大格的细胞数。
公式中乘以104因为计数板中每一个大格的体积为：1.0mm（长）×1.0mm（宽）×0.1mm（高）=0.1mm3而1ml=1000ul=1000mm3（注意：镜下偶见有两个以上细胞组成的细胞团，应按单个细胞计算，若细胞团10%以上，说明分散不好，需重新制备细胞悬液。
）================================================细胞计数板的使用一、血球计数板-基本构造血球计数板是一块特制的厚型载玻片，载玻片上有四个槽构成三个平台。
中间的平台较宽，其中间又被一短横槽分隔成两半，每个半边上面各刻有一小方格网，每个方格网共分九个大格，中央的一大格作为计数用，称为计数区。
计数区的刻度有两种：一种是计数区分为16个大方格（大方格用三线隔开），而每个大方格又分成25个小方格；另一种是一个计数区分成25个大方格（大方格之间用双线分开），而每个大方格又分成16个小方格。
但是不管计数区是哪一种构造，它们都有一个共同特点，即计数区都由400个小方格组成。
细胞计数方法------细胞计数板法
细胞计数方法------细胞计数板法实验原理：当待测细胞悬液中细胞均匀分布时，通过测定一定体积悬液中的细胞的数目，即可换算出每毫升细胞悬液中细胞的细胞数目。
具体操作：1. 将计数板及盖片擦拭干净，并将盖片盖在计数板。
2. 将细胞悬液吸出少许，滴加在盖片边缘，使悬液充满盖片和计数板之间，静置3min，注意盖片下不要有气泡，也不能让悬液流入旁边槽中。
3. 计算板四大格细胞总数，压线细胞只计左侧和上方的。
然后按公式计算：细胞数/mL=四大格细胞总数/4×104个/ml(注：当细胞很多时，可在四个格中选一定数目较平均的小格，由于每大格中有16个小格，然后计左侧和上方的细胞数，求出每小格的细胞数，取平均值m，m ×16即每个格的平均值。
所以，细胞密度=m×16×104个/ml)说明：公式中除以4，因为计数了4个大格的细胞数。
公式中乘以104因为计数板中每一个大格的体积为：1.0mm（长）×1.0mm（宽）×0.1mm（高）=0.1mm3而 1ml=1000ul=1000mm3（注意：镜下偶见有两个以上细胞组成的细胞团，应按单个细胞计算，若细胞团10%以上，说明分散不好，需重新制备细胞悬液。
）================================================细胞计数板的使用一、血球计数板-基本构造血球计数板是一块特制的厚型载玻片，载玻片上有四个槽构成三个平台。
中间的平台较宽，其中间又被一短横槽分隔成两半，每个半边上面各刻有一小方格网，每个方格网共分九个大格，中央的一大格作为计数用，称为计数区。
计数区的刻度有两种：一种是计数区分为16个大方格（大方格用三线隔开），而每个大方格又分成25个小方格；另一种是一个计数区分成25个大方格（大方格之间用双线分开），而每个大方格又分成16个小方格。
但是不管计数区是哪一种构造，它们都有一个共同特点，即计数区都由400个小方格组成。
细胞计数方法-细胞计数板法
细胞计数方法--—--—细胞计数板法实验原理：当待测细胞悬液中细胞均匀分布时，通过测定一定体积悬液中得细胞得数目,即可换算出每毫升细胞悬液中细胞得细胞数目。
具体操作:1、将计数板及盖片擦拭干净,并将盖片盖在计数板．2、将细胞悬液吸出少许,滴加在盖片边缘,使悬液充满盖片与计数板之间,静置3min,注意盖片下不要有气泡，也不能让悬液流入旁边槽中。
3、计算板四大格细胞总数,压线细胞只计左侧与上方得。
然后按公式计算:细胞数/mL=四大格细胞总数/4×１0个/ml（注：当细胞很多时,可在四个格中选一定数目较平均得小格,由于每大格中有16个小格,然后计左侧与上方得细胞数,求出每小格得细胞数，取平均值m,ｍ×16即每个格得平均值。
所以,细胞密度=m×１6×10个/mｌ)说明:公式中除以4,因为计数了4个大格得细胞数。
公式中乘以10因为计数板中每一个大格得体积为：1、0mm(长）×1、0mｍ(宽）×0、1mｍ(高)=0、1mm 而1ml＝1000ｕl=1０００ｍm(注意:镜下偶见有两个以上细胞组成得细胞团,应按单个细胞计算,若细胞团10%以上,说明分散不好,需重新制备细胞悬液。
)========＝==＝＝=====＝===＝=＝＝＝=====＝======＝====＝===细胞计数板得使用一、血球计数板-基本构造血球计数板就是一块特制得厚型载玻片,载玻片上有四个槽构成三个平台。
中间得平台较宽,其中间又被一短横槽分隔成两半,每个半边上面各刻有一小方格网,每个方格网共分九个大格,中央得一大格作为计数用,称为计数区.计数区得刻度有两种：一种就是计数区分为16个大方格（大方格用三线隔开）,而每个大方格又分成2５个小方格;另一种就是一个计数区分成25个大方格(大方格之间用双线分开),而每个大方格又分成16个小方格。
但就是不管计数区就是哪一种构造,它们都有一个共同特点，即计数区都由400个小方格组成。
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、目的与要求了解血球计数板计数的原理，学会测定细胞总数方法。
二、原理
用血球计数板在显微镜下直接计数是一种常用的微生物计数方法。
血球计数板是一块特制的厚载玻
片，其上由四条槽构
成三个平台，中间较宽的平台又被一短横槽隔成两半，每一边的平台上各刻有一个方格网，每个方格网共分为9个大方格，中间的大方格即为计数室。
计数室的刻度一般有两种规格，一种是一个大方格分成16个中方格，每个中方格又分成25个小格（即16x25），另一种是一个大方格分成25个中方格，每个中方格又分为16个小方格（即25X 16），但无论是哪一种规格的计数板，每一个大方格中的小方格都是400个，每一个大方格边长为 1 mm则每一个大方格的面积为 1 mm2，盖上盖玻片后，盖玻片
与载玻片之间的高度为0.1mm,所以计数室的容积为0.1 mm3
实磴圈-石血球计弦板杓构jfi
三、血球计数板的使用方法
（一）菌悬液的制备为便于计数，对样品进行适当稀释，稀释程度以每小格内含5〜10个酵母为
宜，可采用10倍系列稀释法。
（二）加菌悬液样品将清洁干燥的血球计数板盖上盖玻片，再用无菌的毛细滴管将摇匀的菌悬液由盖玻片边缘滴一小滴，让菌液沿缝隙靠毛细渗透作用自动进入计数室，用吸水纸吸去多余水液。
由盖玻
片边缘或槽内加入计数板来回推压盖玻片，使其紧贴在计数板上，计数室内不能有气泡。
静置5-10分钟。
（三）显微镜计数在低倍镜下找到小方格网后更换高倍镜观察计数，上下调动细螺旋，以便看到小室内不同深度的菌体。
位于分格线上的菌体，只数两条边上的，其余两边不计数。
如数上线就不数下线，数左边线就不数右边线。
当芽抱菌体达到母细胞大小的二分之一时，可记作两个细胞。
（四）计数时若使用刻度为25X 16 （大格）的计数板，则数四角的4个大格（即100小格）内的菌数。
如用刻
细胞数的测定
D申決甌裕牧我
度为16X 25 （大格）的计数板，除数四角的4个大格外，还需数中央1个大格的菌数（即80 小格）。
每小格中菌数以5-10个为宜，如菌液过浓可适当稀释。
（五）每个样品重复计数2-3次，取其平均值，按下式计算样品中的菌数。
（六）计数完毕，将计数板在水龙头下冲洗干净，切勿用硬物洗刷，洗完后自行晾干或用电吹风吹干。
计数时，如果使用16X 25的计数板，要按对角线方位取左上、左下、右上、右下上述4个中格进行计数（即计数100个小格中的细胞数），如果使用25X 16规格的计数板，则除了计数上述4个中格外，还要计数中央的1个中格，即计数80个小格中的细胞数，分别按下述公式计算出细胞数。
（1）16X 25格的血球计数板计算公式：
1mL细胞数= ---------------- X 400 X 104X稀释倍数
（2）25 X 16格的血球计数板计算公式：
1mL细胞数= ------------------------ X 400X 104X稀释倍数
四，材料与仪器
菌悬液，显微镜，血球计数板，载玻片，盖玻片，接种环，吕氏美蓝
五、实验报告。