血球计数板的构造和使用方法简介
血球计数板的使用通用课件
在数据解读过程中，某些异常值可能被忽 略或误判，这会影响最终结果的准确性。
05
血球计数板的发展趋势与展望
技术创新与改进
自动化技术
通过引入自动化技术，提高血球 计数板的计数效率和准确性，减
少人为误差。
高分辨率成像
采用高分辨率成像技术，使计数 板能够捕捉更细微的结构和细胞
特征。
智能化分析
利用人工智能和机器学习算法， 实现血球计数板的智能化分析，
提高分析效率和准确性。
应用领域的拓展
临床诊断
血球计数板在临床诊断中发挥着重要作用，随着技术的不断改进 ，其在临床上的应用将更加广泛。
生物研究
血球计数板在生物学、免疫学和病理学等领域的研究中也有广泛应 用，未来将有更多相关领域得到拓展。
药物研发
血球计数板在药物研发过程中可用于监测药物对血细胞的影响，为 新药研发提供有力支持。
操作经验不足
新手操作员可能由于经验不足而忽略 某些操作细节，导致计数结果不准确 。
缺乏培训
未接受过血球计数板使用培训的人员 可能不了解正确的操作步骤和注意事 项，导致操作不规范。
忽略操作细节
某些操作员可能过于自信，忽略了一 些看似微不足道的细节，如清洁计数 板或确保镜筒对准等，这些细节都可 能影响计数的准确性。
未来发展方向
1 2 3
标准化与规范化
未来血球计数板的发展需要进一步标准化和规范 化，以确保不同设备之间的可比性和互操作性。
个性化医疗
随着个性化医疗的发展，血球计数板将更加注重 个体差异和特殊需求，为患者提供更加精准的诊 断和治疗方案。
跨界融合
未来血球计数板的发展将与其他医疗设备和技术 进行跨界融合，形成更为完整的医疗解决方案， 提高医疗服务的整体水平。
血球计数板的使用
血球计数板生物实验用具血球计数板是显微镜上的外挂物件,可用来测量细胞,细菌等一些微小物体的长度,还有就是测量数量,如单位体积细胞的数量.血球计数板的构造和使用血球计数板是由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的.玻片中有四条下凹的槽,构成三个平台.中间的平台较宽,其中间又被一短横槽隔为两半,每半边上面,刻有一个方格网.方格网上刻有9个大方格,其中只有中间的一个大方格为计数室,供微生物计数用.这一大方格的长和宽各为1mm,深度为0.1mm,其体积为0.1mm3.计数室通常有两种规格.一种是大方格内分为16中格,每一中格又分为25小格;另一种是大方格内分为25中格,每一中格又分为16小格.但是不管计数室是哪一种构造;它们都有一个共同的特点,即每一大方格都是由16×25=25×16=400个小方格组成,见图.血球计数板的使用以计数酵母菌为例(1)用血球计数板计数酵母菌悬液的酵母菌个数.(2)样品稀释的目的是便于酵母菌悬液的计数,以每小方格内含有4-5个酵母细胞为宜,一般稀释10倍即可.(3)将血球计数板用擦镜纸擦净,在中央的计数室上加盖专用的厚玻片.(4)将稀释后的酵母菌悬液,用吸管吸取一滴置于盖玻片的边缘,使菌液缓缓渗入,多余的菌液用吸水纸吸取,捎待片刻,使酵母菌全部沉降到血球计数室内.(5)计数时,如果使用16格×25格规格的计数室,要按对角线位,取左上,右上,左下,右下4个中格(即100个小格)的酵母菌数.如果规格为25格×16格的计数板,除了取其4个对角方位外,还需再数中央的一个中格(即80个小方格)的酵母菌数.(6)当遇到位于大格线上的酵母菌,一般只计数大方格的上方和右方线上的酵母细胞(或只计数下方和左方线上的酵母细胞).(7)对每个样品计数三次,取其平均值,按下列公式计算每1ml菌液中所含的酵母菌个数.3.计算公式(1)16格×25格的血球计数板计算公式:酵母细胞数/ml=100小格内酵母细胞个数/100×400×104×稀释倍数(2)25格x16格的血球计数板计算公式:酵母细胞数/ml=80小格内酵母细胞个数/80×400×104×稀释倍数4.血球计数板的清洁血球汁数板使用后,用自来水冲洗,切勿用硬物洗刷,洗后自行晾干或用吹风机吹干,或用95%的乙醇,无水乙醇,丙酮等有机溶剂脱水使其干燥.通过镜检观察每小格内是否残留菌体或其他沉淀物.若不干净,则必须重复清洗直到干净为止.实验六微生物的显微直接计数法一、实验目的了解血球计数板的构造、计数原理和计数方法，掌握显微镜下直接计数的技能。
《血球计数板使用》课件
01
02
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计数结果应及时记录并核对， 确保数据的准确性和完整性。
对于异常数据应进行复核或重 新取样，避免误差的积累。
在数据解读时应结合实际情况 进行分析，避免片面或主观的
判断。
对于误差的控制应采取有效的 措施，如采用合适的取样方法
、提高操作技能等。
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血球计数板应用实例
临床应用实例
诊断疾病
《血球计数板使用》PPT课件
目录
• 血球计数板简介 • 血球计数板操作步骤 • 血球计数板使用注意事项 • 血球计数板应用实例 • 血球计数板的发展趋势与展望
01
血球计数板简介
血球计数板的结构
血球计数板由一块载玻片和两个 盖玻片组成，载玻片上刻有方格 ，每个方格分为9个中格，共计
162个小格。
04
稀释样本
将待测样本进行适当稀释，以 便于计数。
染色处理
根据实验要求，对稀释后的样 本进行染色处理。
滴加样本
使用吸管或移液器将染色后的 样本滴加到血球计数板的凹槽
中。
覆盖盖玻片
轻轻覆盖盖玻片，确保没有气 泡产生，然后进行显微镜检查
。
数据分析阶段
显微镜检查
使用显微镜观察血球计 数板，记录各种血细胞
提高医疗效率
降低医疗成本
血球计数板的智能化和自动化将大大 提高医疗效率，减轻医护人员的工作 负担。
血球计数板的优化和普及将降低医疗 成本，减轻患者经济负担，促进医疗 服务的普及和公平。
促进医疗技术创新
血球计数板的发展将推动医疗技术的 不断创新和发展，提高医疗质量和安 全性。
THANK YOU
感谢各位观看
药物研发
计数板的构造和使用上传
血细胞计数板的结构和使用主要内容一.计数板结构◆结构◆区域划分二.计数板使用◆使用◆计数顺序与原则◆质量保证◆评价◆考核方法一、改良Neubauer计数板结构计数板上下各一个计数池1mm1m m计数板结构区域划分二、计数板使用计数顺序与原则计数板使用质量保证1．计数板（1）计数板合格性鉴定鉴定周期：每隔1年，要求计数室的玻面光滑、透明、划线清晰，划线面积准确。
1）盖玻片检查：包括厚度和平整度，要求盖玻片应具有一定的重量，平整、光滑、无裂痕，厚薄均匀一致。
2）计数室深度：高度误差应在±2%（±2μm）以内。
3）计数室划线：每个大方格边长的误差应小于1%。
（2）保证计数板和盖玻片清洁：防止计数板污染，致使充液时产生气泡。
如使用血液充液，计数板和盖玻片使用后应依次用95%（V/V）乙醇、蒸馏水棉球擦拭，最后用清洁纱布手揩净。
（3）加盖玻片：WHO推荐采用推式法，以保证充液的高度为0.10mm。
当盖玻片盖在计数板上时，若两层玻璃之间见到彩色条带（Newton环），说明计数板和盖玻片清洁良好。
2．充液（1）平放计数板。
充液前应适当用力、快速振荡细胞悬液30秒，使其充分混匀，但不能产生过多气泡，以免影响充液和准确计数，也要防止剧烈振荡以免破坏细胞。
（2）一次完成充液，如充液过少、过多、有气泡或出现任何碎片，应拭净计数板及盖玻片后重新操作。
（3）充液后不能移动盖玻片。
3．静置计数板白细胞和红细胞计数一般需沉淀2～3分钟，血小板计数应沉淀10～15分钟，同时需注意保湿。
4．计数（1）如果细胞严重分布不均，应重新充液计数。
如白细胞总数在正常范围内时，各大方格的细胞数不得相差8个以上。
两次重复计数误差：白细胞不超过10%，红细胞不超过5%。
（2）计数原则计数细胞时应遵循计数原则，并注意与非细胞成分相区别。
5．计数误差（1）技术误差（technical error）：由于操作不规范或使用器材不准确造成的误差称为技术误差。
血球计数板
血球计数板 血球计数板是一块特制的厚型载玻片，载玻片上有四个槽构成 三个平台。中间的平台较宽，其中间又被一短横槽分隔成两半， 每个半边上面各刻有一小方格网，每个方格网共分九个大方格， 中央的一大方格作为计数用，称为计数区。计数区的刻度有两种： 一种是计数区分为16个中方格（大方格用三线隔开），而每个中 方格又分成25个小方格；另一种是一个计数区分成25个中方格 （中方格之间用双线分开），而每个中方格又分成16个小方格。 但是不管计数区是哪一种构造，它们都有一个共同特点，即计数 区都由400个小方格组成。 计数区边长为1mm，则计数区的面积 为lmm2，每个小方格的面积为1/400mm2。盖上盖玻片后，计数 区的高度为0.1mm，所以每个计数区的体积为0.1mm3，每个小 方格的体积为1/4000mm3。 使用血球计数板计数时，先要测定每个小方格中微生物的数 量，再换算成每毫升菌液（或每克样品）中微生物细胞1)用血球计数板计数酵母菌悬液的酵母菌个数. (2)样品稀释的目的是便于酵母菌悬液的计数,以每小方格内含有4-5个酵母细胞为 宜,一般稀释10倍即可. (3)将血球计数板用擦镜纸擦净,在中央的计数室上加盖专用的厚玻片. (4)将稀释后的酵母菌悬液,用吸管吸取一滴置于盖玻片的边缘,使菌液缓缓渗入,多 余的菌液用吸水纸吸取,捎待片刻,使酵母菌全部沉降到血球计数室内. (5)计数时,如果使用16格×25格规格的计数室,要按对角线位,取左上,右上,左下, 右下4个中格(即100个小格)的酵母菌数.如果规格为25格×16格的计数板,除了取 其4个对角方位外,还需再数中央的一个中格(即80个小方格)的酵母菌数. (6)当遇到位于大格线上的酵母菌,一般只计数大方格的上方和右方线上的酵母细 胞(或只计数下方和左方线上的酵母细胞). (7)对每个样品计数三次,取其平均值,按下列公式计算每1ml菌液中所含的酵母菌 个数. 计算公式 (1)16格×25格的血球计数板计算公式: 酵母细胞数/ml=100小格内酵母细胞个数/100×400×104×稀释倍数 (2)25格x16格的血球计数板计算公式: 酵母细胞数/ml=80小格内酵母细胞个数/80×400×104×稀释倍数
血球计数板及其使用方法
血球计数板及其使用方法1、血球计数板的构造血球计数板是一种生物学或医学仪器，用以对人体血液中红细胞、白细胞进行显微计数，也常用于一些细菌、真菌、酵母菌等较大细胞或微生物的计数。
血球计数板的形状如图1所示，血球计数板是一块特制的厚载玻片，载玻片上由4个槽构成3个平台。
中间的平台较宽，其中间又被一短横槽分隔成两半，每个半边上面各刻有一方格网，每个方格网共分9个大方格（大方格用三线隔开），中央的一大方格作为计数用，称为计数室，如图2所示。
计数室的规格常有两种:一种叫XXX式（16×25型），是一个计数室分为16个中方格（中方格之间用双线分开），而每个中方格又分成25个小方格;另一种叫汤麦式(25×16型），是一个计数室分成25个中方格，而每个中方格又分成16个小方格。
可是不管计数室是哪种构造，它们都有一个配合特点，即计数室都由400个小方格组成。
计数室的边长常为1mm,则计数室的面积为1mm2，盖上盖玻片后，计数室的高度为0.1mm，所以每个计数室的容积为0.1mm3,每个小方格的边长为0.05mm,每个小方格的容积为边长为0.25mm，每其中方格的容积为长为0.2mm，每其中方格的容积为12、血球计数板的使用方法（以计数酵母菌为例）(1)用血球计数板计数培养液中的酵母菌个数。
(2)样品稀释的目的是便于酵母菌的计数，以每小方格内含有45个酵母菌为好，一般稀释10倍即可。
(3)将血球计数板用擦镜纸擦净，在中央的计数室盖上专用的盖玻片。
(4)将稀释后的培养液，用吸管吸取一滴置于盖玻片的边缘，使菌液缓缓渗人，多余的菌液用吸水纸吸取，稍待片刻使酵母菌全部沉到计数室内。
(5)计数时，如果使用16×25型的计数室，要按对角线位，取左上，左下，右上，右下4个中方格（即100个小方格）的酵母菌个数3如果为25×16型的计数室，除了取其4个对角方位外，还需再数屮央的一个中方格（即80个小方格）的酵母菌个数。
血球计数板
其中，中央大方格用双线分成25个中方格，位于正中及四角5个中方格是红细胞计数区域（图中浅红色区 域），每个中方格用单线划分为16个小方格。四角的4个大方格是白细胞计数区域（图中浅蓝色区域），每个大 方格用单线划分为16个中方格。根椐国际标准局（NBS）规定，大方格每边长度允许误差为±1% 。
说明：上图红色方框代表一个大方格；绿色方框代表一个中方格，两种中方格的面积不一样大；蓝色方框代 表一个小方格。
缺点
缺点
利用血球计数板在显微镜下能直接数出每个小方格中的微生物的个体数目，根据该小格所占的体积，快速地 推算出单位体积的溶液中含有的微生物总数。但若菌悬液中不加可以区分细胞死活的试剂时，计数通常计得的是 活菌体和死菌体的总和（有时还有微小杂物），还有微小杂物也被计算在内，这样得出结果往往偏高，因此此法 适用于体积较大的单细胞微生物的计数 。
谢谢观看
1．避免技术误差，纠正仪器误差
（1）所用器材均应清洁干燥，计数板、血盖片、微量吸管及刻度吸管的规格应符合要求或经过校正。①计 数板的鉴定：要求计数室的台面光滑、透明，划线清晰，计数室划线面积准确。必要时采用严格校正的目镜测微 计测量计数室的边长与底面积，用微米千分尺测量计数室的深度。美国国家标准局（NBS）规定每个大方格边长 的误差应小于1%，即1±0.01mm，深度误差应小于2%，即0.1±0.002mm。若超过上述标准，应弃之不用。②血盖 片应具有一定的重量，平整、光滑、无裂痕，厚薄均匀一致，可使用卡尺多点测量（至少在9个点），不均匀度在 0.002mm之内。必要时采用平面平行仪进行测量与评价，要求呈现密集平行的直线干涉条纹。最简单的评价方法 是将洁净的盖片紧贴于干燥的平面玻璃上，若能吸附一定的时间不脱落，落下时呈弧线形旋转，表示盖片平整、 厚薄均匀。同时，合格的盖片放置在计数室表面后，与支持柱紧密接触的部位可见到彩虹。精选出的盖片与其他 盖片紧密重合后，在掠射光线下观察，如见到完整平行的彩虹条纹表示另一枚盖片质量也符合要求。
关于血球计数板的使用
关于血球计数板的使用一、血球计数板的使用原理显微镜直接计数法是将小量待测样品的悬浮液置于一种特别的具有确定面积和容积的载玻片上（又称计菌器），于显微镜下直接计数，然后推算出含菌数的一种方法。
血球计数板是常用的计菌器之一。
血球计数板是一种专门用于计算较大单细胞微生物的一种仪器，由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的玻片中有四条下凹的槽，构成三个平台。
中间的平台较宽，其中间又被一短横槽隔为两半，每半边上面刻有一个方格网。
方格网上刻有9个大方格，其中只有中间的一个大方格为计数室。
这一大方格的长和宽各为1mm，深度为0.1mm，其容积为0.1mm3，即1mm×1mm×0.1mm方格的计数板；大方格的长和宽各2mm，深度为0.1mm，其容积为0.4mm3，即2mm×2mm×0.1mm方格的计数板。
在血球计数板上，刻有一些符号和数字(见图一)，其含义是：XB-K-25为计数板的型号和规格，表示此计数板分25个中格；0.1mm为盖上盖玻片后计数室的高；1/400mm2表示计数室面积是1mm2，分400个小格，每小格面积是1/400 mm2。
计算公式：每毫升原液中酵母细胞个数／1mL＝每个小方格中酵母细胞平均数×400×10000×稀释倍数二、血球计数板的使用方法步骤使用血球计数板计数时，按照如下的实验步骤进行：1．镜检计数室。
在加样前，先对计数板的计数室进行镜检。
若有污物，则需清洗，吹干后才能进行计数；2．加样品。
将清洁干燥的血球计数板的计数室上加盖专用的盖玻片，用吸管吸取稀释后的酵母菌悬液，滴于盖玻片边缘，让培养液自行缓缓渗入，一次性充满计数室，防止产生气泡，充入细胞悬液的量以不超过计数室台面与盖玻片之间的矩形边缘为宜。
多余培养液可用滤纸吸去；3．计数。
稍待片刻（约5min），待酵母菌细胞全部沉降到计数室底部后，将计数板放在载物台的中央，先在低倍镜下找到计数室所在位置后，再转换高倍镜观察、计数并记录。
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血球计数板的构造和使用方法简介
人教版生物教材(稳态与环境)培养液中酵母菌种群数量的变化的实验中用到了血球计数板,学生对它感到十分陌生,现对其构造和使用方法作简要介绍：
一．血球计数板的构造
血球计数板是由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的.玻片中有四条下凹的槽,构成三个平台。
中间的平台较宽,其中间又被一短横槽隔为两半,每半边上面刻有一个方格网。
方格网上刻有9个大方格（见图C）,其中只有中间的一个大方格为计数室,供微生物计数用。
计数室通常有两种规格.一种是大方格内分为25个中方格（中方格之间用双线分开，见图D），每一中方格又分为16个小方格；另一种是大方格内分为16个中方格,每一中方格又分为25个小方格，但是不管计数室是哪一种构造,它们都有一个共同的特点：即每一大方格都是由16×25=25×16=400个小方格组成（见图D）。
血球计数板的构造
(A．俯视图B．侧视图C．放大后的网格D．放大后的计数室)
1
计数室边长为1mm，面积为l mm2，每个小方格的面积为1/400 mm2。
盖上盖玻片后，计数室的高度为0. 1mm，所以其体积为0.1mm3，每个小方格的体积为
1/4000mm3。
二．血球计数板的使用（以计数酵母菌为例）
(1)视待测菌悬液浓度，加无菌水适当稀释。
样品稀释的目的是便于酵母菌悬液的计数,以每小方格内含有4-5个酵母细胞为宜,一般稀释10倍即可。
(2)将血球计数板用擦镜纸擦净, 在计数室上盖上一块盖玻片。
(3) 将稀释后的酵母菌悬液摇匀，用滴管吸取少许，从计数板中间平台两侧的沟槽内沿盖玻片的下边缘摘入一小滴（不宜过多），让菌悬液利用液体的表面张力充满计数室，勿使气泡产生，并用吸水纸吸去沟槽中流出的多余菌悬液。
也可以将菌悬液直接滴加在计数室上，不要使计数室两边平台沾上菌悬液，以免加盖盖玻片后，造成计数室深度的升高。
然后加盖盖玻片（勿使气泡产生）。
(4)静置片刻,待酵母菌全部沉降到计数室低部，将血球计数板置载物台上夹稳，先在低倍镜下找到计数室后，再转换高倍镜观察并计数。
由于生活细胞的折光率和水的折光率相近，观察时应减弱光照的强度。
(5) 计数时若计数室是由16个中方格组成，按对角线方位，数左上、左下、右上、右下的4个中方格（即100小方格）的菌数。
如果是由25个中方格组成的计数室，除数上述四个中方格外，还需数中央l个中方格（即80个方小格）的菌数（见图D）。
若菌体位于中方格线上,一般只计数中方格的上方和右方线上的酵母细胞（如下图用红圈标出），以减少误差。
计数时应不时调节细准焦螺旋，才能观察到不同深度的菌体。
(6) 每个样品计数应重复3次（每次数值不应相差过大，否则应重新操作），取其平均值,求出每一个小格中细胞平均数，按下列公式计算出每ml菌悬液所含酵母菌细胞数量。
16格×25格的血球计数板计算公式：
酵母细胞数/ml=100小格内酵母细胞个数/100×400×104×稀释倍数
25格×16格的血球计数板计算公式：
酵母细胞数/ml=80小格内酵母细胞个数/80×400×104×稀释倍数
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(7)测数完毕，取下盖玻片，用清水将血球计数板冲洗干净，切勿用硬物洗刷或抹擦，以免损坏网格刻度。
洗净后自行晾干或用吹风机吹干，放入盒内保存。
附：为熟悉血球计数板的构造，便于清楚的观察方格网和计数室，可用棕色水彩笔对其染色，线条染色后呈不透明状，非常容易辨认。
用棕色水彩笔涂布时，用力要轻，以免磨损平台上的线条，涂布后放置2-3分钟，再用擦镜纸轻轻擦去表面上的染料颜色，并反复擦几次，此时只有方格网上的线条被染成棕色，便于观察。
3。