葡聚糖凝胶使用说明书
葡聚糖凝胶柱使用及注意事项(包含各种溶剂的溶胀系数)

(1)选择条件:
梯度洗脱在Sephadex使用中并不象在正相柱层析中那么重要。首先你的样品须要能溶解在尽量少量的洗脱剂中。极性在的用甲醇水系统;极性小者一般用不含水的系统。我们实验室常用正己烷二氯甲烷甲醇系统,用了很多年,效果较好。
(2)饱和层析柱:
用洗脱剂将凝胶摇匀,直立柱身,让其自然沉降,此时要防止气泡留在其中。至少半小时打开开关,流出几个柱体种的洗脱剂,目的是使其膨胀在正确比例的洗脱剂中。
Tetrahydrofuran四氢呋喃3.3~3.6
Dioxane二氧杂环已烷3.2~3.5
Acetone丙酮2.4~2.6
Acetonitrile***乙腈2.2~2.4
Carbon tetrachloride四氯化碳1.8~2.2
Benzene苯1.6~2.0
Ethyl acetate乙酸乙酯1.6~1.8
(3)样品处理:用尽量少的洗脱剂溶解样品,常压过滤。
(4)湿法上柱。这也是要有技巧的步骤。
(5)洗脱:控制流速,一般1drop/s以下,可参见厂家的一些参数;必要时更改极性(很多时一个极性就可以将样品洗脱完毕)。
再生以备下次使用。
6分离的技巧,最后说说我的使用心得
(1)流速不可太快,切切不可新急,所谓欲速则不达。
2 Sephadex LH20的原理。
Sephadex LH20的分离原理主要有两方面:以凝胶过滤作用为主,兼具反相分配的作用(在反相溶剂中)。因为凝胶过滤作用,所以大分子的化合物保留弱,先被洗脱下来,小分子的化合物保留强,最后出柱。如果使用反相溶剂洗脱,Sephadex LH20对化合物还起反相分配的作用,所以极性大的化合物保留弱,先被洗脱下来,极性小的化合物保留强,后出柱。如果使用正相溶剂洗脱,这主要靠凝胶过滤作用来分离。
LH-20使用说明书

葡聚糖凝胶LH-20使用说明
适合用于有机溶剂分离嗜脂性分子,可以非常经济的大规模制备各种天然产物,尤其在中药有效成分提取中作为大孔吸附树脂解析物的纯化。
结合凝胶过滤﹑分配色谱及吸附层析于一身,能分离结构相近的分子。
因此使用中要考略几种色谱的作用机制。
最高载量可达250mg样品/ml凝胶﹑极少需要再生﹑使用得当,分离效果可保持不变。
上样量视被分离物的结构性能的差异而定-差异大,可大;差异小,应小。
凝胶过滤的上样量一般为6-8%的床体积,我们建议初次上样量控制在3%的床体积,视分离情况可以逐步增加;柱高的选择也与分离要求相关――难分物质要有一定柱高和流速控制;流动相可参考TLC的条件,正确的流动相可以提高分离度并缩短分离时间。
(见附表“溶剂混溶性”)
流动相的常用溶剂为:
水甲醇丙酮乙酸乙酯二氯甲烷
上述溶剂的极性依次降低,对带有极性的被分离物而言,保留值和分离度依次递增;同理选用的凝胶柱高可依次降低,流速可以增大(或上样量可以增加)。
使用方法:将干粉浸泡于60—70%乙醇中过夜(充分搅拌),洗去可能存在的残留物,抽干然后湿态装柱,动态用一倍柱体积的60—70%乙醇淋洗,再用水洗净乙醇即根据自己选用的流动相体系平衡、上样
LH-20在不同溶剂中的溶胀性能:
溶剂混溶性表。
Sephacryl S-100 HR说明书

丙烯葡聚糖凝胶Sephacryl S-100 HR说明书【用途】:生化研究,只用于科研研究,不用于临床。
【性状】:粉末状【保存】:RT【层析】:合格【发票】:增票/普票【产品价格】:询价(或)【包装规格】:mg、g、ml等规格【运输方面】:现货供应,一般为快递运输,江浙沪隔天到,外地及偏远地方三至五天时间到货。
【储存条件】:避光、干燥阴凉处封闭贮存,严禁与有毒、有害物品混放、混运。
本品为非危险品,可按一般化学品运输,轻搬动轻放,防止日晒、雨淋。
备注:以上描述,仅作参考,并不表示您收到的产品,与此项描述完全相符,产品的出厂标准,请参见质量标准。
丙烯葡聚糖凝胶S-100 HR,Sephacryl S-100 HR说明书/价格,试剂使用须知:(1)请参照相关法规、文献、MSDS等信息,理解并掌握好试剂的特性,再进行安全操作。
(2)通常购买试剂时一定要想到一次性用完。
若估算不足有剩余的话,更加注意其他保管和管理。
(3)万一试剂操作者并非专业技术人员。
必须在专业人士的指导监督下进行操作。
对于使用后的废弃物,不要或者旧的试剂,应按照相关法律法规正当处理。
(4)购买后,请务必确认标签上的注意事项;做好预防颠倒,摔坏的措施和管理体制;在使用前再次确认标签上的注意事项,做好必要的安全对策;对没有标明其危害特性、有害特性的,也要慎重地进行操作;必须带好防护用具,小心翼翼进行操作。
相关知识:保存方法之防挥发:1.油封:氨水,浓盐酸,浓硝酸等易挥发无机液体,在液面上滴10~20滴矿物油,可以防止挥发(不可用植物油)。
2.水封:二硫化碳中加5mL水,便可*保存。
汞上加水,可防汞蒸气进入空气。
汞旁放些硫粉,一但失落,散布硫粉使遗汞消灭于化学反应中。
3.腊封:乙醚、乙醇、甲酸等比水轻的或易溶性挥发液体,以及萘、碘等易挥发固体,紧密瓶塞,瓶口涂腊。
溴除进行原瓶腊封外,应将原瓶置于具有活性炭的塑料筒内,筒口进行腊封。
实验室在保存化学试剂时,一般应遵循如下:密封多数试剂都要密封存放,这是实验室保存试剂的一个重要原则。
葡聚糖凝胶柱的使用方法2

葡聚糖凝胶柱的使用方法:(1) 预处理称取Sephadex G-25(50-100目)约5g ,加入蒸馏水100ml ,置室温下3h 进行溶胀。
(2) 装柱 凝胶层析柱的直径与柱长之比一般为1:15。
柱的底部用装有细玻璃管的橡皮塞塞紧,用洗净的玻璃丝(约200目尼龙布)垫底或购买类似规格的商品柱。
然后将柱垂直安装好,先加入1/3柱体积蒸馏水,接着将溶胀好的凝胶边搅匀边连续装入,使它们在柱内自然沉降。
同时大开下口慢速流出蒸馏水。
装柱后的凝胶必须均匀,不能有气泡或明显条纹。
否则,必须到出重装,装好后,用蒸馏水平衡2-3h 即可加样品分离。
(3) 加样加样前,首先把柱内凝胶上面多余的蒸馏水放出,直到柱内液面与凝胶表面相齐(或留一极薄液层)为止。
然后,由柱的上端加水解液2ml ,注意不要让溶液把凝胶冲松浮起,加完样品后,打开下口缓慢放出液体至液面与凝胶面相齐,再用少量蒸馏水冲洗原来盛样品的容器2-3次,待全部进入层析柱后,即可进行洗脱。
(4) 洗脱与收集洗脱时,用蒸馏水作洗脱剂,并且要连续不断地进行,使凝胶柱上端保持一定的液层,防止凝胶柱表面的液体流干。
本实验洗脱液流出的速度应控制在0.8-1.0ml/min 。
洗脱液的收集采用分管连续顺序收集,每管收集3ml ,共收集10管。
据经验,4或5号管核苷酸浓度最大,可作为层析鉴定的样品液。
但因层析柱长度的差异,管号会有变化,必要时可用紫外检测A260nm ,找出浓度最大的管号。
(5) 凝胶的再生和回收凝胶柱使用一次后,必须反冲疏松一次,平衡后再使用。
若使用数次,就需要再生处理。
用0.1mol/L NaOH-0.5mol/L NaCl 溶液浸泡,然后用蒸馏水洗至中性备用。
若实验完毕,将再生后的凝胶在布氏漏斗上用蒸馏水洗涤抽干,再用95%乙醇洗两次,在60℃烘箱中烘干,回收保存。
实验五. 葡聚糖凝胶层析【实验目的】1.掌握葡聚糖凝胶的特性及凝胶层析的原理。
2.学习葡聚糖凝胶层析的基本操作技术。
葡聚糖凝胶操作方法

【实验目的】1.掌握葡聚糖凝胶的特性及凝胶层析的原理。
2.学习葡聚糖凝胶层析的基本操作技术。
【实验原理】凝胶层析又称分子排阻层析或凝胶过滤,是以被分离物质的分子量差异为基础的一种层析分离技术,这一技术为纯化蛋白质等生物大分子提供了一种非常温和的分离方法。
层析的固定相载体是凝胶颗粒,目前应用较广的是:具有各种孔径范围的葡聚糖凝胶(Sephadex)和琼脂糖凝胶(Sepharose)。
葡聚糖凝胶是由直链的葡聚糖分子和交联剂3—氯1,2—环氧丙烷交联而成的具有多孔网状结构的高分子化合物。
凝胶颗粒中网孔的大小可通过调节葡聚糖和交联剂的比例来控制,交联度越大,网孔结构越紧密;交联度越小,网孔结构就越疏松,网孔的大小决定了被分离物质能够自由出入凝胶内部的分子量范围。
可分离的分子量范围从几百到几十万不等。
葡聚糖凝胶层析,是使待分离物质通过葡聚糖凝胶层析柱,各个组分由于分子量不相同,在凝胶柱上受到的阻滞作用不同,而在层析柱中以不同的速度移动。
分子量大于允许进入凝胶网孔范围的物质完全被凝胶排阻,不能进入凝胶颗粒内部,阻滞作用小,随着溶剂在凝胶颗粒之间流动,因此流程短,而先流出层析柱;分子量小的物质可完全进入凝胶颗粒的网孔内,阻滞作用大,流程延长,而最后从层析柱中流出。
若被分离物的分子量介于完全排阻和完全进入网孔物质的分子量之间,则在两者之间从柱中流出,由此就可以达到分离目的。
本实验以葡聚糖凝胶G—25作为固定相载体,来分离蓝色葡聚糖—2000和溴酚蓝。
蓝色葡聚糖—2000分子量接近2×106,而溴酚蓝分子量为670,二者分子量相差较大,前者完全排阻,而后者则可完全进入凝胶颗粒网孔内,二者通过层析柱的时间不同而分开。
【实验材料】1.实验器材层析柱(1×20cm)附有一小段乳胶管及螺旋夹;洗脱液瓶(带下口的三角瓶,250m1);试管及试管架;量筒10m1;721型分光光度计2.实验试剂(1) Tris—醋酸缓冲液(pH7.0):取0.0lmol/L Tris溶液(含0.1mol/L KCl)900ml,用浓醋酸调pH至7.0,加蒸馏水至1000m1。
葡聚糖凝胶G系列使用说明手册

葡聚糖凝胶使用说明Sephadex Gel Manuals1化学和物理性质葡聚糖凝胶是一种珠状的凝胶,含有大量的羟基,很容易在水中和电解质溶液中溶胀。
G型的葡聚糖凝胶有各种不同的交联度,因此它们的溶胀度和分级分离范围也有所不同。
葡聚糖凝胶的溶胀度基本上不因盐和洗涤剂的存在而受影响。
葡聚糖凝胶有不同的粒度。
超细级的葡聚糖凝胶是用于需要极高分辨率的柱色谱和薄层色谱。
粗级和中级的凝胶用于制备性色谱过程,可在较低的压力下获得较高的流速。
另外,粗级也可用于批量工艺。
1.1化学稳定性葡聚糖凝胶不溶于一切溶剂(除非它被化学降解)。
它在水、盐溶液、碱和弱酸性溶液中都是稳定的,在强酸中凝胶骨架的糖苷键被水解。
长期接触氧化剂将破坏凝胶,因而应避免使用。
1.2物理稳定性葡聚糖凝胶并不熔融,可以在湿态、中性PH进行灭菌。
干态的凝胶加热至120℃以上将开始焦糖化。
葡聚糖凝胶的机械强度取决于交联度。
2产品说明名称分离范围(球蛋白)应用葡聚糖凝胶G-10<700缓冲液交换、脱盐,分离小分子,去除小分子葡聚糖凝胶G-15<1500缓冲液交换、脱盐,分离小分子,去除小分子葡聚糖凝胶G-251000-5000工业上脱盐及交换缓冲液葡聚糖凝胶G-501000-30000多肽分离、脱盐、清洗生物提取液、分子量测定葡聚糖凝胶G-752000-70000蛋白分离纯化、分子量测定、平衡常数测定葡聚糖凝胶G-1002000-120000蛋白分离纯化、分子量测定、平衡常数测定葡聚糖凝胶G-1505000-300000蛋白分离纯化、分子量测定、平衡常数测定葡聚糖凝胶G-2005000-600000蛋白分离纯化、分子量测定、平衡常数测定3使用方法3.1乙醇浸泡在室温下,将干粉浸泡于50-60%乙醇中至少24小时,并不断搅拌以保证凝胶溶胀,用无盐水洗去残存的乙醇滤干。
3.2无盐水浸泡室温下,在无盐水中充分溶胀24小时,间隙搅拌,以保证凝胶的完全溶胀。
葡聚糖凝胶柱的使用方法

葡聚糖凝胶柱的使用方法一、准备工作:1.准备好葡聚糖凝胶柱和所需的缓冲液,如PBS(磷酸盐缓冲液)、TBS(三甲基氨基甲烷缓冲液)等。
2.将葡聚糖凝胶柱放入柱层析设备中,并根据设备的要求进行调整和固定。
3.预冲柱层析设备和葡聚糖凝胶柱,以去除可能的污染和杂质。
二、样品处理:1.将待纯化的生物大分子样品先进行预处理,如去除悬浮物、离心沉淀等。
2.将样品溶液以适当的缓冲液进行稀释,以达到最佳的样品浓度和适合葡聚糖凝胶柱操作的样品体积。
三、样品加载:1.将处理好的样品溶液缓慢地倒入柱顶,让样品从柱顶进入柱内。
避免产生气泡。
2.分子在葡聚糖凝胶柱中会根据分子大小和亲疏水性质的不同而发生分离和吸附。
较大分子会在柱上层析,而较小分子会透过凝胶层均匀流出。
因此,样品会在柱内逐渐被分离和纯化。
四、缓冲液流动:1.样品完成加载后,使用适当的缓冲液进行柱洗涤,以洗掉非特异结合的杂质。
2.缓冲液的选择应根据样品的性质而定,具体的选择和流动条件可以参考相关的文献或经验。
五、洗脱纯化:1.在用于洗脱纯化的缓冲液中,调整适当的条件以实现目标分子的洗脱。
如调整pH值、离子浓度、添加洗脱剂等。
2.根据分子的亲疏水性质,选择适当的缓冲液浓度梯度进行洗脱。
一般来说,较强亲疏水性的分子需要更高浓度的洗脱缓冲液。
六、收集洗脱液:1.将洗脱液通过柱底收集,收集不同时间点或不同分析目的的洗脱液。
2.根据实验需要,将洗脱液分为不同部分进行后续的分析或纯化处理。
七、重复使用:1.柱层析后,葡聚糖凝胶柱可以进行再生,以重复使用。
具体的再生方法可以参考柱层析设备和葡聚糖凝胶柱的说明书。
总结:葡聚糖凝胶柱是一种常用的生物大分子纯化方法,通过分子在柱内的分离和纯化来实现样品纯化的目的。
使用葡聚糖凝胶柱时,需要根据样品的特性和需求进行适当的样品处理、缓冲液选择、洗脱纯化条件的优化等。
如操作规范且配合适当的实验条件,葡聚糖凝胶柱可以快速、高效地纯化和富集生物大分子。
葡聚糖凝胶使用说明

葡聚糖凝胶使用说明1.葡聚糖凝胶的制备2.葡聚糖凝胶的特性-生物相容性好:葡聚糖是一种天然产物,具有良好的生物相容性,不会产生免疫反应。
-可调节性强:葡聚糖凝胶的凝胶特性可以通过改变制备方法、葡聚糖浓度和pH值等条件来调节,以满足不同应用的需要。
-凝胶稳定性好:葡聚糖凝胶具有较好的物理稳定性和化学稳定性,能够在一定条件下保持凝胶状态。
-良好的保水性:葡聚糖凝胶具有良好的保水性能,可用作保湿剂,防止水分的蒸发。
-微生物阻隔性:葡聚糖凝胶的网络结构可以起到一定的微生物阻隔效果,可应用于医疗和食品包装等领域。
3.葡聚糖凝胶的应用3.1医疗应用-创面敷料:葡聚糖凝胶具有良好的吸附性和保湿性能,可用于制备创面敷料,促进伤口愈合。
-药物载体:葡聚糖凝胶的网状结构可以将药物包裹在其中,用于制备药物缓释系统。
-组织工程:葡聚糖凝胶可用作细胞培养的基质材料,用于组织工程的研究和临床应用。
3.2食品应用-增稠剂:葡聚糖凝胶可作为增稠剂添加到食品中,改善食品的口感和质感。
-稳定剂:葡聚糖凝胶具有良好的稳定性,可以作为乳化剂和稳定剂添加到食品中,延长食品的保质期。
-包装材料:葡聚糖凝胶的微生物阻隔性能可以应用于食品包装材料,起到保鲜的作用。
3.3化妆品应用-保湿剂:葡聚糖凝胶可用作化妆品中的保湿剂,增加产品的保湿性能。
-凝胶基质:葡聚糖凝胶可作为凝胶基质,在其中悬浮其他活性成分,提高产品的稳定性和渗透性。
-敏感肌肤护理:葡聚糖凝胶具有良好的生物相容性,可用于敏感肌肤的护理产品中,减少刺激和过敏反应。
3.4农业应用-保水剂:葡聚糖凝胶可用作土壤保水剂,改善土壤的水分状况,提高植物的生长。
-植物保护剂:葡聚糖凝胶可作为植物保护剂的载体,将其包裹在凝胶中,减少化学农药的使用量。
总结:葡聚糖凝胶具有许多优异的特性,广泛应用于医疗、食品、化妆品和农业等领域。
在使用葡聚糖凝胶时,需要根据具体的应用要求选择适当的制备方法和条件,并在应用过程中注意遵守相关的法律法规和安全操作规程,以确保产品的质量和安全性。
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葡聚糖凝胶使用说明书
一、产品名称
产品名称:葡聚糖凝胶
型号:Gel-300
二、适用范围
葡聚糖凝胶适用于生物实验室、化学实验室、制药厂等场所,用于分离、纯化蛋白质、核酸、肽类等生物分子。
三、使用方法
1. 准备葡聚糖凝胶和缓冲液。
根据所需的分离纯化效果,选择合适的缓冲液类型和浓度。
2. 将缓冲液加入玻璃柱或层析柱中,直至填满整个柱子。
3. 加入适量的葡聚糖凝胶,使其均匀分布在柱子的底部。
4. 将样品溶液缓慢地加入柱子中,注意不要过快,以免影响分离效果。
5. 收集洗脱液,并进行分析。
根据分离纯化的目的,可以采用不同的收集方法,如分步收集或集中收集。
6. 在每次使用后,及时清洗和保存凝胶柱,以延长其使用寿命。
四、注意事项
1. 在使用葡聚糖凝胶前,应仔细阅读本说明书并遵守操作规程。
2. 避免直接接触皮肤和眼睛,若不慎接触,应立即用清水冲洗。
3. 使用过程中要避免剧烈震动或晃动,以免影响分离效果。
4. 在使用前应确认所需缓冲液的种类和浓度是否合适,避免浪
费和影响分离效果。
5. 不要使用已经过期或变质的凝胶和缓冲液。
6. 在储存和使用过程中要保持环境干燥,避免潮湿和高温。
7. 使用后要及时清洗和保存凝胶柱,以免被污染和变质。
五、常见问题及解决方案
1. 分离效果不佳:可能是由于凝胶或缓冲液质量问题、操作不当等原因引起的。
解决方法是检查凝胶和缓冲液的质量和浓度是否合适,确认操作规程是否正确。
若问题仍未解决,建议更换新的凝胶柱。
2. 柱子压力过高:可能是由于样品溶液中存在杂质或凝胶柱堵塞等原因引起的。
解决方法是检查样品溶液是否含有杂质,或者对样品进行预处理以去除杂质。
同时检查凝胶柱是否堵塞,若堵塞则进行清洗或更换新的凝胶柱。
3. 柱子漏液:可能是由于接头松动或密封圈损坏等原因引起的。
解决方法是重新拧紧接头或更换新的密封圈。
若问题仍未解决,建议联系售后服务与支持部门寻求帮助。
4. 洗脱液中含有杂质:可能是由于样品溶液中存在杂质或缓冲液不纯等原因引起的。
解决方法是检查样品溶液是否含有杂质,或者对样品进行预处理以去除杂质。
同时检查缓冲液的纯度是否符合要求,若不符合则更换新的缓冲液。
5. 洗脱液颜色异常:可能是由于样品溶液中含有色素或某些物质与缓冲液发生反应等原因引起的。
解决方法是检查样品溶液是否含有色素或其他杂质,或者更换新的缓冲液以避免发生反应。
若问题仍
未解决,建议联系售后服务与支持部门寻求帮助。
六、产品清单
1. 葡聚糖凝胶柱(Gel-300)1个
2. 缓冲液1瓶(500ml)
3. 使用说明书1份
4. 产品清单1份
5. 其他配件(如接头、密封圈等)1套(根据实际需要配备)
七、售后服务与支持
本产品提供一年的免费售后服务与支持。
若在使用过程中遇到任何问题,请及时联系售后服务与支持部门,我们将尽快为您解决问题。
在保修期内,如因产品质量问题导致的问题,我们将免费为您更换或修理;如因人为因素导致的问题,我们将为您提供有偿服务。