病原微生物标本的临床规范化采集、分离和鉴定
临床微生物标本规范化采集和送检
注意事项
✓ 虽粪便含有多种杂菌，但应尽量采用 无菌容器。
✓ 为提高检出率，要采集新鲜粪便作培 养，且应挑取其脓血、 粘液部分。
四、痰及上呼吸道标本的采集
采集痰标本作细菌培养，或涂 片后经特殊染色以检查细菌、真 菌或抗酸杆菌等，以助诊断；从 咽部及扁桃体采取分泌物作细菌 培养或病毒分离
痰及上呼吸道标本
尿液标本
➢ 采集时间： 一般原则 通常应采集晨起第一次尿 液送检。原则上应选择在抗菌药物应 用之前采集尿液。
尿液标本的采集时间
A. 结核分枝杆菌感染 留取晨尿或24小时 尿的沉渣部分10-15ml作涂片检查，若为 培养，患者应停药1-2天后再采样，以提 高阳性率
B. 沙门菌、钩端螺旋体感染 感染后2周左 右采集
采集方法
➢ 自然排便采集法 自然排便后，挑取其脓血、 粘液部分2-3g，液状粪便取絮状物2-3ml， 盛于灭菌容器内或保存液中送检
➢ 直肠拭子方法 如不易获得粪便时，或排 泄困难的患者及婴儿，可用直肠拭子采取， 即以无菌棉拭子用生理盐水湿润后，插入肛 门内4-5cm（幼儿2-3cm）轻轻转动取出， 插入无菌试管内送检。
标本采集--保留导管
• 经由导管抽取5-10ml血液， 进行血培养；
• 再由静脉端抽血进行另外 一套血培养。
标本采集--决定拔除导管 • 从2个独立的外周静脉部 位，无菌采集2套血培养， 同时无菌操作取出导管并 剪下5cm导管末梢送实验 室培养。
血培养标本采集与送检要求--4
2. 未留置深静脉导管者： （1）怀疑血流感染时，从2个不同的外周静脉穿刺部位无
➢ ④尽可能采集更多的液体，至少1ml
手术切口分泌物标本采集
➢ 1、涂片：常规检查+革兰染色 ➢ 先用无菌生理盐水擦拭切口2遍，再用含生
临床微生物样本采集规范
临床微生物样本采集规范临床微生物样本采集规范1. 范围和目的本规范合用于临床微生物样本的采集、处理和管理，旨在保证样本采集的质量和规范性，确保临床微生物诊断结果的准确性和可靠性。
2. 术语和定义（1）微生物：指包括细菌、真菌、病毒、支原体、立克次体、螺旋体等在内的弱小生物体。
（2）临床样本：指从患者体内采集的各种生物标本，如血液、口腔、鼻咽部、骨髓、尿液、痰液、脑脊液等。
（3）采集容器：指用于采集临床样本的容器，如血液采集管、尿样瓶、培养皿等。
（4）采集套装：指一次完整的样本采集过程中所需的所有采集工具和材料。
3. 采集前准备（1）确定采集部位、时间和采集方式，注意患者的生命体征和病情变化。
（2）准备好所需的采集套装和采集容器，在样本采集前做好标签，并核对患者信息。
（3）认真阅读所有相关规范和实验室要求，确保样本采集符合要求。
4. 采集操作步骤（1）根据采集部位和样本类型选择合适的采集套装。
（2）采集前应让患者了解采集的目的和过程，并获得其允许。
（3）采集前要检查采集部位，患者的身体状态和生命体征，确保采集过程安全和无痛苦。
（4）采血时应注意采血量、采血速率、采血部位、采血方式等。
（5）尿样采集时应注意尿样的采集量、采集时间、采集方式、保护好样本的完整性和纯度。
（6）痰液采集时应注意痰液的颜色、黏度、量和纯度，选择合适的采集器具和采集方式。
（7）脑脊液采集时应注意采集部位、采集方式、采集量、采血顺序和样本处理标准等。
（8）其他临床样本采集时，应根据具体要求和操作规范，选择合适的采集方法和器具。
5. 样本运输和储存（1）在采集后，立即将样本放入相应的采集容器中，尽快送至实验室进行处理。
（2）若无法即将处理样本，应按要求在采集容器中注明采集时间和采集者信息，并存储在规定温度下，以便后续处理。
（3）运输过程中应遵循规范，确保样本不泄漏、不污染，并尽快送至目的地。
（4）储存过程中应保持样本的纯度和完整性，控制储存温度，在保质期内使用。
临床微生物标本规范化采集和送检中国专家共识
临床微生物标本规范化采集和送检中国专家共识牵头专家：胡必杰、倪语星、马小军、肖永红编写专家（按首字母拼音排序）：蔡绍曦、陈佰义、褚云卓、高晓东、顾兵、黄勋、李光辉、李卫光、刘思远、刘运喜、陆群、卢晓阳、吕媛、孙自镛、索瑶、汤灵玲、王辉、王明贵、王选锭、吴安华、徐英春、颜青、俞云松、战榕、张卫红、宗志勇中华预防医学会医院感染控制分会2017年1月目录总则 (3)第一节：血培养标本 (5)第二节：呼吸道标本 (8)第三节：尿液标本 (13)第四节：其它无菌体液标本 (15)第五节：胃肠道标本： (20)第六节：生殖道标本 (24)第七节：皮肤、软组织标本 (27)总则感染性疾病的正确诊治需要以正确的病原学检测作为指导，而正确的病原学检测其前提是采集和送检合格标本。
因此，必须规范微生物标本的采集和运送，避免因标本的不合格，产生错误的病原学检测结果而误导临床治疗。
一、微生物标本采集的基本原则1.在抗菌药物使用前采集标本。
临床疑似感染的患者，必须先采集微生物标本送检，再使用抗菌药物进行治疗。
2.无菌部位的标本更具有临床价值，有菌部位采集的标本需要清除正常菌群和定植细菌才有意义。
应尽量送检无菌部位的标本，尤其是血培养。
有菌部位标本应避免“正常菌群导致标本的污染”。
人体很多部位，如下呼吸道（痰液标本）、鼻窦、皮肤伤口等处的正常菌群极易污染标本。
因此，从这些部位采集标本，要尽可能降低这些部位正常菌群或定植细菌对标本污染的可能性。
有菌部位的标本不是最理想的微生物标本。
3.标本的标签和申请单信息要完整。
对于每一份标本，实验室都需要了解该患者和标本的详细信息以及医生的送检目的。
事实上，实验室对于标本所做的所有分析，都必须基于这些信息。
申请单的内容应包括：1）患者信息：姓名、性别、年龄、患者唯一编码（如住院号）等；2）申请科室或病区、申请医生；3）标本信息：标本类型、采集日期及时间、采集部位、采集方法；4）临床诊断；5）检测目的，尤其是一些特殊检测项目；6）是否已使用抗菌药物。
临床微生物标本的规范采集和送检
采血套数
➢ CLSI M47-A：每位患者采集2~3套血培养（40~60ml） ➢ 1套：一个穿刺点，通常为1个需氧+1个厌氧 ➢ 成人瓶：8~10ml；儿童瓶： 1~3ml；婴幼儿：<总血量 1% ➢ 明显地提高阳性率 ➢ 判断是否污染 ➢ 指南强调：初期诊断时不允许只采集一套血培养
➢ 如果采血量不足，应优先将血液注入需氧瓶，剩余血液注 入厌氧瓶，因为大部分需氧菌、兼性厌氧菌、酵母菌可以 在需氧瓶中生长
采血量是影响血培养阳性率的独立相关因素
采血量与检出率
% Relative Yield
100
80
60
40
20
0 5
15
25
35
45
55
血培养物每增加m一l 毫升，
成年人菌血症微生物的检出率增加3％
临床微生物标本的规范采集和送检
检验二科 刘 玲
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临床标本微生物检验流程
标本质量
临床信息？ 标本质量？
标本采集
标本检验
临床意义？ 结合临床症状、体征、影像、 其它检查等
检验报告
报告解读
采集部位 采集方法 送检要求
涂片镜检 培养鉴定 药敏试验
涂片报告 培养报告 药敏报告
诊断 治疗 评估
如何提高微生物检验的诊疗价值？
所以要最先采集血培养标本。 污染率的指标是 < 3%
（100份标本里只能有不到3个标本出现污染）
采血前质量保证：培养瓶消毒
选定采血点后，先对培养瓶进行消毒
弃去培养瓶金属盖 75%酒精消毒血培养瓶橡皮塞,待干60秒
颠倒混匀标本与肉汤，以避免血液凝集。
（儿童采血量少，更应注意颠倒混匀）
临床微生物标本采集规范
（四）注意事项
在腹泻发病的正确时间收集标本，病人应尽量在急 性期（3d）内和用药前采集标本，以提高检出率。
大便标本中含有很多杂菌，粪便标本的采集须注意
防止外界脏物污染，尽量采用无菌容器。
为提高阳性检出率，要采集新鲜标本，立即送检。
五、 生殖道标本采集规范
（一）送检指征
1. 男性泌尿系统表现
（三）注意事项
1. 痰标本不能及时送检者，可暂存4℃冰箱。室温 下耽搁数小时，定植于口咽部的非致病菌过度生 长而肺炎链球菌、葡萄球菌和流感嗜血杆菌检出 率则明显降低。 2. 在临床上咳痰仍是诊断肺部感染最常用的标本， 但咳痰也最易被口咽部正常菌群污染。
3.由于口腔和咽部存在大量的革兰阳性和革兰阴性厌
4.采血量 要求： 成年患者推荐的采血量为每套不少于10ml，每 瓶不少于5ml。 婴幼儿患者推荐的采血量为每瓶不少于2ml。 说明：血标本采集的量是影响检出率的最重要的因素。 成人血培养采血量在2~30ml之间，病原菌检出率与 采血量成正比例增长。每增加1ml的血液，病原菌 的检出率增加3.2%。儿童患者因为血液中病原菌浓 度较高，血培养量无需等同于成人。对血液病患者 或者血容量相对较低的患者建议使用儿童瓶来减少 血液的采集量增加病原菌的检出率。
（一）尿培养标本送检指征
1. 有典型的尿路感染症状；
2. 有肉眼脓尿或血尿； 3. 尿常规检查白细胞或亚硝酸盐阳性； 4. 有不明原因的发热，无其他局部症状； 5. 留置导尿管的患者出现发热； 6. 膀胱排空功能受损； 7. 泌尿系统疾病手术前； 8. 有尿路感染症状者，前次培养结果阴性或抗菌治 疗48h后仍持续发热。 9. 抗生素停药后，感染症状再次出现。
临床微生物学检验标本的采集
答：不同类型的微生物对保存温度的要求不同。一般来说，细菌、真菌等可在4℃或-20℃冰箱中保存数天至数周；病毒等则需要 使用-80℃超低温冰箱进行长期保存。在选择保存温度时，应根据具体微生物类型和实验要求进行选择。
问题解答与经验分享
如何确保标本运输安全？
答：在运输前应仔细检查容器是否密封良好，并使用足够的吸收材料包裹容器以防意外泄漏。同时，在运 输过程中应确保标本处于适当的低温环境中，并标识清晰以便实验室准确接收和处理。
结果分析
考虑患者为败血症，革兰氏阴性杆菌为致病菌。结合患者临床表现和 实验室检查结果，制定相应的治疗方案。
案例二：尿路感染诊断思路探讨
1 2
病例介绍 患者女性，60岁，因尿频、尿急、尿痛就诊。查 体显示尿道口红肿，有脓性分泌物。
实验室检查 尿常规结果显示白细胞增多，细菌培养阳性。
3
诊断思路
根据患者临床表现和实验室检查结果，初步诊断 为尿路感染。进一步进行细菌鉴定和药敏试验， 以指导临床治疗。
保存时间 不同类型的微生物标本保存时间不同，应根据具体要求进 行保存。一般来说，细菌、真菌等可保存数天至数周，病 毒等则需要长期保存。
标本运输注意事项
保持低温
在运输过程中，应确保标本处于适当的低温环境中，以防止微生 物死亡或变异。
防止泄漏
运输前应检查容器是否密封良好，防止标本泄漏。同时，应使用 足够的吸收材料包裹容器，以防意外泄漏。
为临床诊断和治疗提供准确、可靠 的微生物学依据，指导合理用药。
微生物学检验目的
01
02
03
确定病原体种类
通过检验标本中的微生物， 明确病原体种类，为针对 性治疗提供依据。
评估病情严重程度
2024版年度临床微生物标本采集规范总结
优化采集方法和工具
根据不同类型的标本和采集需求， 选择合适的采集方法和工具，确 保采集到足够的标本量。
规范标本运输和保存
制定详细的标本运输和保存规范， 包括温度、光照等环境条件的控 制，确保标本在运输和保存过程 中保持质量稳定。
2024/2/2
31
未来发展趋势预测
2024/2/2
自动化和智能化技术应用 随着科技的不断发展，自动化和智能化技术将在临床微生 物标本采集中得到更广泛的应用，提高采集效率和准确性。
节。
2024/2/2
关键控制点分析
对标本采集过程中的关键控制点进 行了深入剖析，如无菌操作技术、 标本采集时机、采集量等因素对标 本质量的影响。
成功经验总结
总结了在实际操作过程中取得的成 功经验，如合理选用采集工具、正 确保存和运输标本等。
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存在问题及原因分析
标本污染问题
分析了标本污染的主要原因，包括采集过程中未严格执行无菌操作、 采集容器不洁净等。
2024/2/2
重症患者样本
对于重症患者，其样本也 应优先处理，以便医生及 时了解患者病情。
特殊项目样本
对于某些特殊项目，如细 菌培养、药敏试验等，也 应优先处理，以缩短检验 周期。
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及时反馈问题并改进工作流程
反馈问题
分析原因
在接收和处理过程中发现的问题，应及时反 馈给相关科室和人员。
对反馈的问题进行分析，找出问题产生的原 因。
临床微生物标本采集规范总结
2024/2/2
1
目 录
2024/2/2
• 标本采集重要性 • 标本采集前准备 • 不同类型标本采集方法 • 标本采集过程中质量控制措施 • 实验室接收和处理流程优化建议 • 总结反思与未来展望
临床微生物标本规范化采集和送检
临床微生物标本规范化采集和送检临床微生物标本规范化采集和送检是确保实验室检测结果准确性和可靠性的关键步骤。
在临床诊断和治疗过程中，微生物标本的采集和送检必须严格按照规范进行，以保证检测结果的科学性和临床应用的有效性。
本文将对临床微生物标本规范化采集和送检的相关问题进行详细讨论。
一、微生物标本的采集1. 采集工具采集微生物标本时，应使用无菌采集工具，如无菌棉签、无菌注射器、无菌拭子等。
采集工具应一次性使用，避免交叉感染。
2. 采集方法（1）棉签采集法：适用于采集分泌物、排泄物等标本。
将无菌棉签蘸取适量标本，轻轻涂抹于无菌培养基表面，注意避免棉签与培养基接触过紧，以免污染。
（2）拭子采集法：适用于采集皮肤、黏膜等表面标本。
将无菌拭子轻轻擦拭采集部位，将拭子置于无菌培养基中，轻轻按压使标本附着于培养基表面。
（3）注射器采集法：适用于采集深部组织、关节液等标本。
将无菌注射器刺入采集部位，抽取适量标本后，将注射器置于无菌培养基中，拔出活塞使标本流出。
3. 采集注意事项（1）严格遵守无菌操作原则，防止标本污染。
（2）采集标本时，应尽量减少对标本的挤压，避免细胞破裂、毒素释放等现象。
（3）采集标本后，应尽快送检，避免长时间存放导致病原体死亡或变异。
二、微生物标本的送检1. 送检时间微生物标本采集后，应尽快送检，一般不超过2小时。
如无法及时送检，应将标本置于4℃冷藏保存，并在24小时内送检。
2. 送检途径微生物标本应采用专用运送容器，避免与其他物品接触。
标本运送过程中，应注意保持容器密封，防止标本污染。
3. 标本接收实验室接收微生物标本时，应详细核对标本信息，包括患者姓名、性别、年龄、采集部位、采集时间等。
如发现标本不符合要求，应立即与临床工作人员沟通，重新采集标本。
4. 标本处理实验室接收标本后，应按照实验室规程进行对标本的处理，包括开盖、分区、接种、培养等。
在处理过程中，严格遵守无菌操作原则，防止标本污染。
病原微生物标本的临床规范化采集、分离和鉴定
痰标本的采集以晨痰为准，此时患者痰量较多且 含菌量也多。
标本采集后1～2 h内必须立即进行实验室处理， 室温下延搁2 h：肺炎链球菌、流感嗜血杆菌 铜绿假单胞菌
对于普通细菌性肺炎，痰标本送检每天1次， 连续2～3d。不建议24 h内多次采集痰标本送 检，除非痰液外观性状出现改变。
报告
普通痰培养存在的问题
► 时效性：一般需48～72小时，而重症肺炎需要及早 针对性治疗
► 在CAP只有30%±病人可获得有意义的痰培养结果 ► 采集标本前应用抗菌药物，将降低苛养菌的阳性率 ► 在很多情况下难以排除细菌定植或污染 ► 常规培养一般分离不到厌氧菌
与病理检查相似的微生物标本留取
经气管穿刺吸引（transtracheal aspiration,TTA） 经胸壁针刺吸引（transthoracic needle aspiration, TNA） 经支气管镜采样
病原微生物生化鉴定
各种细菌所具有的酶系统不尽相同，对营养基质的分解能力也不一样，代谢产物存在差别。
4天后马铃薯葡萄糖琼脂平板培养
血平板及巧克力平板
显微镜下乳酚棉兰染色
皮肤活检病理
皮肤病理显 示皮损处的 (PAS)阳性酵 母样细胞,有 一个细长的 萌芽状态。
皮损处培养
沙堡培养基 25℃培养结果 ：
采血量：成人采血量是5～10 ml/瓶，儿童1～5 ml/瓶。
血培养-标本的运送和保存
•血培养采集后必须马上送检，在室温中不得 超过2小时，不得放入冰箱冷冻；冷藏？ •血培养可在一天24小时内的任何时间采集。
最有价值的细菌学检测标本
血液 脑脊液 胆汁 胸腹水 关节液 其他无菌体液（尿）或分泌液
临床微生物标本采集与送检规范(试行)
临床微生物标本采集与送检规范(试行)临床微生物标本采集与送检是临床实验室诊断质量保证中的关键环节，影响着感染样本中致病菌的分离培养的阳性率和医院感染病原体监控。
正确的微生物标本送检和检验方法对于合理选用抗菌药物、降低耐药菌的产生、提高感染的治愈率以及预测和及时发现医院感染的暴发流行等都具有十分重要的意义。
因此，希望临床各科能按照本操作规范采样送检。
在医院感染标本的采集和运送中，应遵循以下原则：1.发现医院感染应及时采集微生物标本作病原学检查，我院总的医院微生物标本送检率应不低于40％。
2.尽量在抗菌药物使用前采集标本。
3.采集标本时应严格执行无菌操作，减少或避免机体正常菌群及其他杂菌污染。
4.采集标本后应立即送至实验室，床旁接种可提高病原菌检出率。
5.以棉拭子采集的标本如咽拭子、肛拭子或伤口拭子，应立即送检。
6.盛标本须经灭菌处理，但不得使用消毒剂。
7.送检标本应注明来源和检验目的，使实验室能正确选用相应的培养基和适宜的培养环境，必要时应注明选用何种抗菌药物。
常见的医院感染标本送检方法包括：1.血液与骨髓：通常采血部位为肘静脉，但疑似细菌性心内膜炎时，以肘动脉或股动脉采血为宜。
采血前应严格消毒，每次采血量应控制在一定范围内，采血后应立即送至实验室。
2.尿液：采集中段尿时，女性应先冲洗外阴部及尿道口，男性须翻转包皮冲洗，采集前应用消毒液消毒尿道口。
灭菌纱布擦干后收集标本。
以上是临床微生物标本采集与送检的一些基本规范和方法，希望医务人员能够严格按照操作规范执行，以提高微生物检测的准确性和有效性，为临床诊断和治疗提供更加可靠的依据。
导尿管导尿采样是减少污染的有效方法。
对于留置导尿者，可以用碘酒消毒尿道口处的导尿管壁，用空针细针头斜穿管壁抽吸尿液。
或消毒后解开接口，弃去导尿管前段尿液，留无污染的膀胱内尿液数毫升送检。
不可从集尿袋的下端管口留取标本。
对于尿厌氧菌培养、婴幼儿中段尿采集困难或培养结果与病情不符的情况，可以经耻骨上皮肤穿刺采集无污染的膀胱内尿液。
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新鲜标本 用抗菌药物之前/<72h 确定采集时间、部位和种类 注明来源和检验目的 置于无菌容器，不能接触抑制细菌生长物质
血培养-采集时机
• 急性高热，在10分钟内在不同部位分别各采集1套血培 养，共2套； • 非急性高热疾病，在24小时内，由不同的部位抽取2-3 套的标本；
• 可疑细菌性心内膜炎时，在1～2 h内采集3份血标本， 如果24 h后阴性 ,再采集3份以上的血标本； • 不明原因发热，如隐性脓肿 ,伤寒热和波浪热，可由不 同的部位抽取2-3套的标本，每套间隔≧1小时，当培养24至 48小时后，若为阴性培养，应再送2-3套。
采血量：成人采血量是5～10 ml/瓶，儿童1～5 ml/瓶。
血培养-标本的运送和保存
•血培养采集后必须马上送检，在室温中不得 超过2小时，不得放入冰箱冷冻；冷藏？ •血培养可在一天24小时内的任何时间采集。
最有价值的细菌学检测标本
血液 脑脊液 胆汁 胸腹水 关节液 其他无菌体液（尿）或分泌液
注意事项：
采用专用拭子
拭子应避免触及舌、口 腔黏膜和唾液。
采集标本前数小时不可 用消毒药物漱口或接触 病灶局部。
鼻拭子
将1根聚丙烯纤维头的 塑料杆拭子轻轻插入鼻 道内鼻腭处，停留片刻 后缓慢转动退出。
取另1根聚丙烯纤维头 的塑料杆拭子以同样的 方法采集另一侧鼻孔。
两根拭子可浸入同一含 2ml转运液的管中，尾 部弃去，旋紧管盖。
鼻咽吸取液的收集
1. 将吸液管与真空泵相连 2. 将软管与上腭平行插入鼻孔 3. 使用真空泵 4. 缓慢的移出同时轻轻旋转 5. 使用同一个管子采集另一鼻孔的液体 6. 收集的液体用3ml VTM 冲洗出，放入
采样管中
痰标本
用湿牙刷 (勿用牙膏)轻刷口腔黏膜 、舌头和牙 龈，再用清水或凉开水漱 口，戴假牙者取出假牙 后漱口，以除去口腔内大量杂菌，用力咳出肺深 部的痰液，直接吐入无菌、清洁、干燥、不渗漏 及不吸水的广口带盖的容器中，标本量应 >1ml。
病原微生物标本的临床规范化 采集、分离和鉴定
准确的病原学诊断 针对性病原学治疗
正确的微生物标本采集和运送， 是准确的病原学诊断的前提！
社区呼吸道感染 致病菌监测
院内呼吸道感染 致病菌监测
肺炎链球菌 流感嗜血杆菌 卡他莫拉菌 金葡菌
金黄色葡萄球菌 铜绿假单胞菌 鲍曼不动杆菌
肺炎克雷伯菌
肺炎克雷伯杆菌
报告
普通痰培养存在的问题
► 时效性：一般需48～72小时，而重症肺炎需要及早 针对性治疗
► 在CAP只有30%±病人可获得有意义的痰培养结果 ► 采集标本前应用抗菌药物，将降低苛养菌的阳性率 ► 在很多情况下难以排除细菌定植或污染 ► 常规培养一般分离不到厌氧菌
与病理检查相似的微生物标本留取
经气管穿刺吸引（transtracheal aspiration,TTA） 经胸壁针刺吸引（transthoracic needle aspiration, TNA） 经支气管镜采样
怀疑分枝杆菌感染者，应连续收集3d清晨痰液 送检。
深部真菌 ？
24 h内1份；脓性 2ml
唾液
带血痰
脓痰
粘液样痰
痰液 操作流程 痰液
肉眼观察
培养前处理
涂片检查
羊血琼脂平板
巧克力平板
伊红亚甲蓝/中国蓝 或 麦康凯琼脂
CO2环境需氧培养
35℃ 18-24h 观察菌落和涂片染色镜检
鉴定试验
药敏试验
血培养-采集方法
•采血前准备：穿工作服、戴口罩、洗手或用速干手消毒液按 六步洗手法擦手
•皮肤消毒
a)用安尔碘（或其它本院批准的消毒液）消毒穿刺点皮 肤30秒以上，从穿刺点向外以10cm直径画圈进行消毒；
b)对碘过敏的病人，用75％酒精消毒，消毒60秒，待穿 刺部位酒精挥发干燥后穿刺采血；
•血培养瓶消毒：用75%酒精消毒血培养瓶橡胶皮塞子，作用 60s以上，在血液注入血培养瓶之前，用无菌纱布或棉签清除 橡皮塞子表面剩余的酒精。
种类繁多复杂！
肺炎支原体 肺炎衣原体 嗜肺军团菌
大肠埃希菌 嗜麦芽窄食单胞菌
3
新的抗菌药物不断涌现，但感染 性疾病的发病率和病死率仍然居高不 下。
细菌耐药性不断增强—ET/TT
ESBL 肠杆菌科细菌 MDR 铜绿假单胞菌 MDR 鲍曼不动杆菌
MRSA
VRE
标本采集与运送
标本采集对细菌培养
结果的影响
咳痰困难者可用 3％ ～10％的无菌盐水25ml雾 化吸入，使痰液易于排出。
痰标本的采集以晨痰为准，此时患者痰量较多且 含菌量也多。
标本采集后1～2 h内必须立即进行实验室处理， 室温下延搁2 h：肺炎链球菌、流感嗜血杆菌 铜绿假单胞菌
对于普通细菌性肺炎，痰标本送检每天1次， 连续2～3d。不建议24 h内多次采集痰标本送 检，除非痰液外观性状出现改变。
下呼吸道标本
痰标本
• 自然咳痰、诱导痰
经支气管镜采集
• 肺泡灌洗液、保护性毛刷等
气管和人工气道吸出物
咽拭子
患者清水漱口后，由检查者 将其舌外拉，用棉拭子将咽 后壁或悬雍垂的后侧反复擦 拭数次
化脓性扁桃体炎、口腔念珠 菌病时，直接用棉拭子在病 灶部位擦拭
插入运送培养基中立即送检， 防止干燥
60%以上实验误差发生在分析前
标本质量评估－痰涂片 Garbage in！！
痰涂片的判定
分类
WBC/LF
鳞状上皮细胞/LF
5
பைடு நூலகம்
>25
<10
4
>25
10-25
3
>25
>25
2
10-25
>25
1
<10
>25
分类中1～3类不做培养，要求重新留取标本；
4、5类为合格标本；
上呼吸道标本
咽后壁拭子 鼻拭子 鼻咽吸取液
采集量
时机
次数
方法
标本采集与运送
标本运送对细菌培养 结果的影响
➢ 运送时间 ➢ 运送方法
采集何种标本
PE：左、右大腿多处注射点、多发溃疡、有显著捻发音
最有价值的细菌学检测标本
血液 脑脊液 胆汁 胸腹水 关节液 其他无菌体液（尿）或分泌液
微生物标本采集原则
➢ 基本原则：采集标本注意无菌操作 ➢ 避免杂菌污染