2019_2020学年高中生物第1部分微生物的利用第1课时大肠杆菌的培养和分离学案浙科版选修1
第1课时大肠杆菌的培养和分离[学习目标] 1.进行大肠杆菌的扩增，利用液体培养基进行细菌培养的操作。
2.进行大肠杆菌的分离，用固体平面培养基进行细菌的划线培养。
3.说明大肠杆菌培养的条件和实验原理。
一、微生物培养的基本条件1.微生物(1)概念：结构简单、形体微小的单细胞、多细胞或没有细胞结构的低等生物。
(2)用途：许多种抗生素来源于放线菌和霉菌；酒由酵母发酵产生；腐乳由红曲霉和毛霉发酵制成；微生物能用于治理环境污染，在新能源领域也将发挥巨大作用。
2.培养基(1)概念：培养基是微生物生存的环境和营养物质。
(2)分类：培养基按物理性质常可分为固体培养基和液体培养基，一般都含有水、碳源、氮源和无机盐四类营养物质，另外还需满足微生物生长对pH、特殊营养物质和氧气的要求。
通常细菌培养基要用蛋白胨和酵母提取物来配制，还要加入一定量的氯化钠以维持一定的渗透压；霉菌培养基一般用无机物配制或添加蔗糖的豆芽汁即可。
(3)酸碱性：细菌通常要求在中性偏碱的环境中生长，霉菌要求在中性偏酸的环境中生长；因此，在制备培养基时需调节培养基的酸碱度。
特别提醒有关培养微生物所需营养的三点提醒(1)不同微生物对营养的需求不同，所以培养不同的微生物所需要的营养可能不同。
(2)对异养微生物来说，含C、H、O、N的有机物既是碳源又是氮源、能源。
(3)培养微生物时营养物质要协调。
营养物质过少不能满足微生物的营养需要，过多对微生物的生长有抑制作用。
3.灭菌操作(1)常见灭菌方法①对于培养皿、试管、三角瓶、镊子等常采用高压蒸汽灭菌法灭菌。
②对于不能加热灭菌的化合物，如尿素等，只能用G6玻璃砂漏斗过滤，但玻璃砂漏斗使用前也要在121℃下用纸包好灭菌。
③实验操作过程中，一般采用灼烧的方法对接种环进行灭菌。
(2)高压蒸汽灭菌操作的要求①灭菌前各种用品均需用牛皮纸或报纸包好，在121℃下灭菌15min，实验过程中所需的棉花不能用脱脂棉，因为其易吸水，吸水后容易引起污染。
②如培养基中有葡萄糖，为防止其分解碳化，要用500_g/cm2压力(90℃以上)灭菌30min。
归纳总结1.培养基的类型2.无菌操作，既包括各种器皿必须是无菌的，也包括各种培养基必须是无菌的，同时还要求在接种时，不能带有其他杂菌，所以在实验过程中，应时刻保持这种无菌意识。
例1(2018·浙江学军中学月考)下列关于培养基的说法，不正确的是( )A.培养基配制的原则一是目的要明确，二是营养要协调、三是pH要适宜B.配制培养基时还要考虑微生物对特殊营养物质的要求，否则微生物可能不能生长或生长极差C.固体培养基中加入少量水即可制成液体培养基D.选择培养基是允许特定种类微生物生长，但抑制或阻止其他微生物生长的培养基答案 C解析培养基配制的原则一是目的要明确，弄清培养基的所属类型，二是营养要协调，符合目的微生物的生长需求，三是pH要适宜，A正确；有的微生物对营养物质具有特殊的要求，配制培养基时还要考虑微生物对特殊营养物质的要求，否则微生物可能不能生长或生长极差，B正确；固体培养基中去除凝固剂(如琼脂、明胶等)即可制成液体培养基，C错误；选择培养基是指在微生物学中，允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，目的是从众多微生物中分离所需要的微生物，D正确。
例2(2019·温州高二检测)下列关于灭菌的叙述，正确的是( )A.用于细菌等微生物培养的培养基都必须用高压蒸汽灭菌锅灭菌B.锥形瓶、培养皿、移液管等器具的高压蒸汽灭菌时间一般为15min(121℃条件下)C.超净工作台或接种箱用紫外灯灭菌30min即可D.灭菌后的培养基、器具就已经达到了完全无菌答案 B解析培养基通常可以进行高压蒸汽灭菌，若培养基中有碳酸氢钠、尿素等高温易分解的成分，就不能用此方法，A项错误；超净工作台或接种箱用紫外灯灭菌30min，同时还需打开过滤风，C项错误；灭菌后的培养基、器具不一定达到了完全无菌，而且要防止二次污染，D 项错误。
方法技巧三种常用灭菌方法的比较二、细菌的培养与分离1.细菌的分离方法(1)划线分离法：通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作。
由于划线过程中，接种环上的菌液逐渐减少，因此划线最后部分的细菌间距离加大，经过培养可获得单菌落。
(2)涂布分离方法：用此法分离时，需要先将培养的菌液稀释，通常稀释10－5～10－7倍。
取0.1mL稀释度不同的菌液，加在培养皿的固体培养基上，用玻璃刮刀涂布在培养基平面上，然后进行培养。
通常以每个培养皿中有20个以内的单菌落最为合适。
(3)两种分离法的比较：划线分离法，方法简单；涂布分离法，单菌落更易分开，但操作复杂些。
2.大肠杆菌的培养和分离(1)实验内容：将大肠杆菌扩大培养和划线分离，即用LB液体培养基扩大培养大肠杆菌，培养后再在LB固体平面培养基上划线进行分离，随后培养基上就会形成一个个单独的菌落。
(2)实验步骤归纳总结1.划线分离法的操作步骤2.涂布分离法的操作步骤(1)操作图示(2)相关说明①将分别盛有9mL水的6支试管灭菌，并按101～106的顺序编号。
②用移液管吸取1mL培养的菌液，注入101倍稀释的试管中。
用手指轻压移液管上的橡皮头，吹吸3次，使菌液与水充分混匀。
③从101倍稀释的试管中吸取1mL稀释液，注入102倍稀释的试管中，重复②步的混匀操作。
依次类推，直到完成最后一支试管的稀释。
例3(2018·浙江效实中学期中)如图表示利用划线分离法分离和纯化大肠杆菌的部分操作步骤，下列相关叙述正确的是( )A.步骤①倒平板操作时，只需要在超净台中不需要在酒精灯火焰旁进行B.步骤②③使用的工具是接种环，接种前需在明火上烧红后冷却C.步骤④恒温培养箱培养后的结果说明整个过程中蘸取菌液4次D.该方法使单菌落更容易分开，但操作复杂些答案 B解析即使在超净台中，步骤①倒平板操作时，也需要在酒精灯火焰旁进行，A错误；步骤②③中接种环都需要进行灼烧灭菌，即在火焰上灼烧，待冷却后才可以蘸取菌液进行平板划线，B正确；划线分离法中只蘸取菌液1次，C错误；平板划线法操作简单方便，但是单菌落不易分离，D错误。
例4(2018·嘉兴高二检测)图甲、图乙是微生物接种常用的两种方法，请回答相关问题：(1)图甲是利用__________法进行微生物接种，图乙是利用______________法进行微生物接种。
(2)这两种方法所用的接种工具分别是______________和__________；在接种过程中对这两种接种工具进行灭菌和消毒的方法依次是______________和酒精消毒。
(3)下图是采用上述接种方法接种后培养的效果图解，其接种方法是________(填“图甲”或“图乙”)。
(4)下列关于微生物培养和分离的叙述不正确的是________。
A.利用图乙所示接种法可以分离微生物但不能对微生物进行计数B.接种时连续划线的目的是将聚集的菌种逐步稀释获得单菌落C.利用图甲所示接种法接种过程中，每次划线前后都要对接种环进行灭菌D.图乙所示接种法中使用的接种工具须保存在70%的酒精中答案(1)划线分离涂布分离(2)接种环玻璃刮刀灼烧灭菌(3)图乙(4)A解析(1)分析图示可知，图甲为用划线分离法进行微生物接种，图乙是利用涂布分离法进行微生物接种。
(2)前者利用的工具是接种环，后者利用的工具是玻璃刮刀。
对于接种环而言，灭菌的操作方法是灼烧，玻璃刮刀通常浸泡在70%酒精中消毒。
(3)题图中，菌落均匀分布，分离效果较好，是涂布分离法操作的结果。
(4)采用涂布分离法，可以通过培养基表面的菌落数，对微生物进行计数，但采用该方法计数通常比实际菌落数偏低，A项错误。
方法技巧划线分离法与涂布分离法的比较1.判断正误：(1)纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有划线分离法和涂布分离法( )(2)在琼脂固体培养基上长出的单个菌落含有多种细菌( )(3)单菌落的分离是消除杂菌污染的通用方法，也是用于筛选高表达量菌株最简便的方法之一( )(4)接种环在每次转移菌种之前都需要进行高压蒸汽灭菌，以杀灭接种环上的杂菌( )(5)根据微生物对营养物质的需求，配制相应的培养基，如“细菌喜荤，霉菌喜素”，经高压蒸汽灭菌之后还要调节pH( )(6)有些化合物不能加热，如尿素等需采用玻璃砂漏斗进行过滤灭菌，常用的有G5或G6玻璃砂漏斗( )(7)培养微生物的培养基分装到培养皿后进行灭菌( )答案(1)√(2)×(3)√(4)×(5)×(6)×(7)×2.(2019·西湖区高二检测)金黄色葡萄球菌有很强的致病力，常引起骨髓炎等，还可能引起食物中毒。
下列有关接种金黄色葡萄球菌的实验叙述错误的是( )A.将灼烧的接种环伸入试管内，先接触长菌多的部位B.取下棉塞后要将试管口灼烧灭菌C.对接种环进行灼烧处理D.接种后还要将试管口灭菌加塞答案 A解析接种环伸入试管后应先接触未长菌的部位，待接种环冷却后再接触长菌多的部位。
3.(2018·浙江效实中学检测)在分离、纯化大肠杆菌实验中，划线接种(甲)、培养结果(乙)如图所示。
有关叙述错误的是( )A.接种前应对培养基进行高压蒸汽灭菌B.连续划线的目的是获得单个细菌形成的菌落C.接种过程中至少需要对接种环灼烧5次D.甲中a区域为划线的起始位置答案 D解析培养基一般用高压蒸汽灭菌法灭菌，A项正确；菌液经过连续划线，菌液中的菌体越来越少，最后容易形成单菌落，B项正确；在每次划线前后都要对接种环进行灭菌，因此按照图中划线顺序(d→c→b→a)，整个划线过程中至少需要对接种环灼烧5次，C项正确；每次划线的菌种来自上一区域的末端，因此划线的起始区域菌落多，由图乙可知，甲中d区域菌落多，为划线的起始位置，D项错误。
4.下列关于微生物的培养和分离的叙述中，不正确的是( )A.细菌能在液体培养基中以二分裂方式迅速扩增B.噬菌体或大肠杆菌可在蛋白胨培养基中增殖C.灭菌的目的是消灭与培养菌竞争的杂菌D.涂布分离法分散细菌得到单菌落的效果更好答案 B解析噬菌体属于病毒，营寄生生活，不能在蛋白胨培养基中增殖。
5.大肠杆菌是生存在人体肠道中的正常菌群，每克粪便中大约含有109个，且能够与致病菌混杂生长。
如果食品和饮用水中出现大肠杆菌，就意味着食物可能被粪便污染而带上致病菌，因而常将大肠杆菌的数量作为食品卫生的检测指标之一。
请据此回答下列问题：(1)测定街边出售的奶茶中大肠杆菌的数目，常用涂布分离法。
该方法首先配制LB________培养基，进行高压蒸汽灭菌后冷却至60℃，在____________旁倒在培养皿中形成平板；对奶茶样品进行一定倍数的稀释，取0.1mL奶茶稀释液，加在培养皿的固体培养基上，用__________涂布在培养基平面上，然后进行培养；观察统计培养皿中________数目；该数据比实际数值要________(填“高”或“低”)，原因是_______________________________________________________________________________________________________。
微生物的培养技术及应用(第1课时 微生物的基本培养技术)高二生物(人教版2019选择性必修3)
活动2 明确消毒的原理和方法
在新冠肺炎疫情期间，人们对环境和食品安全的重视程度空前提高。请观看疫情期间，护士在离开病区后进行自我清洁的视频，以及普通人对食物、快递的外包装和电梯的墙壁等外表面、空气进行消毒的视频。思考以下问题：
1.对食物、快递的外包装和电梯的墙壁等外表面、空气进行消毒分别用什么方法？
1.培养物、纯培养物与纯培养的概念
项目
概念
培养物
接种于培养基内，在合适条件下形成的含特定种类微生物的群体
纯培养物
由⑫__________繁殖所获得的微生物群体
纯培养
获得纯培养物的过程
2.过程制备培养基（配制培养基→⑬______→倒平板）→⑭______→分离→培养。
单一个体
灭菌
接种
3.酵母菌的纯培养
归纳总结
营养物质
定义
作用
主要来源
氮源
凡能提供氮元素的物质
合成蛋白质、核酸以及含氮的代谢产物
无机氮源： 、 、铵盐等；有机氮源：尿素、蛋白胨等
生长因子
生长必不可少的微量有机物
是酶和核酸的组成成分
维生素、氨基酸、碱基等
续表
营养物质
定义
作用
主要来源
水
—
是良好的溶剂，参与化学反应
培养基、空气、代谢产物
纯培养的原理
由⑮__________繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物，获得⑯__________的过程就是纯培养
纯培养方法
⑰____________和稀释涂布平板法
纯培养过程
制备培养基
⑱____________→灭菌→⑲________
接种和分离酵母菌
用⑳__________法在固体培养基表面接种酵母菌
第1章 第2节 第1课时 微生物的基本培养技术 讲义【新教材】人教版(2019)高中生物选择性必修3
第2节微生物的培养技术及应用第1课时微生物的基本培养技术课标内容要求核心素养对接1.阐明在发酵工程中灭菌是获得纯净的微生物培养物的前提。
2．阐明无菌技术是在操作过程中，保持无菌物品与无菌区域不被微生物污染的技术。
3．概述平板划线法和稀释涂布平板法是实验室进行微生物分离和纯化的常用方法。
1.科学思维：根据微生物的代谢类型分析培养基的组成。
2．科学探究：讨论并掌握无菌技术的实验操作方法；讨论并掌握微生物的纯培养的方法。
一、培养基的配制1．培养基人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。
2．培养基的种类3．培养基的营养组成各种培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐等营养物质，此外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及O2的需求。
二、无菌技术1．获得纯净的微生物培养物的关键：防止杂菌污染。
2．消毒和灭菌(1)对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒。
(2)将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。
(3)为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。
(4)实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品接触。
三、微生物的纯培养1．纯培养：在微生物学中，将接种于培养基内，在合适条件下形成的含特定种类微生物的群体称为培养物。
由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物，获得纯培养物的过程就是纯培养。
2．微生物纯培养的步骤：微生物的纯培养包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养等步骤。
3．酵母菌的纯培养(1)菌落：分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体。
(2)获得单菌落的方法：平板划线法和稀释涂布平板法。
判断对错(正确的打“√”，错误的打“×”)1．液体培养基含有水，而固体培养基不含水。
(×)提示：液体培养基和固体培养基都含有水，它们的区别为是否含有凝固剂。
2．获得纯净微生物培养物的关键是防止杂菌污染。
【2019-2020】高中生物第一部分微生物的利用第1课时大肠杆菌的培养和分离同步备课教学案浙科版选修1
教学资料参考范本【2019-2020】高中生物第一部分微生物的利用第1课时大肠杆菌的培养和分离同步备课教学案浙科版选修1撰写人：__________________部门：__________________时间：__________________考试要求一、微生物培养的基本条件1.微生物基础知识(1)微生物的特点：结构简单，形体微小。
通常要用光学显微镜或电子显微镜才能看到，有的甚至没有细胞结构。
体内一般不含叶绿素，不能进行光合作用。
(2)细菌的外形与大小 ①外形分类②大小：单细胞不分枝的原核微生物，细胞微小而透明。
通常用适当染料染色后，再显微镜观察。
(3)细菌的繁殖：细菌以分裂的方式繁殖，分裂速度很快，约20分钟分裂一次。
(4)菌落①概念：单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定形态结构的子细胞群体，叫做菌落。
(如图)②作用：细菌的菌落特征因种而异，菌落是鉴定菌种的重要依据。
2.培养基的种类(1)按物理性质分类(2)按培养基的用途分类3.无菌技术(1)含义：无菌技术不仅能防止实验室的培养物被其他外来微生物污染，保持微生物的纯培养，而且在分离、转接时亦能防止其他微生物污染。
(2)无菌操作①对实验空间、操作台可用紫外线或酒精消毒，操作者的手用酒精消毒。
②实验用的培养器皿和培养基一般用高压蒸汽灭菌法灭菌，接种环用灼烧方法灭菌。
③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。
④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。
1.结合所学知识，完成下图横线上大肠杆菌的结构名称，然后思考：(1)大肠杆菌与酵母菌相比，在结构上最主要的区别是什么？答案大肠杆菌是原核生物，与酵母菌相比，最主要的区别是没有由核被膜包被的细胞核。
(2)大肠杆菌是革兰氏阴性、兼性厌氧的肠道杆菌，在肠道中一般对人无害，但也有一些菌株对人体是有害的，可以侵袭肠黏膜并产生毒素。
但是，任何大肠杆菌如果进入人的泌尿系统，都会对人体产生危害。
2019-2020学年高中生物 第1部分 微生物的利用 第1课时 大肠杆菌的培养和分离学案 浙科版选修1
第1课时大肠杆菌的培养和分离[学习目标] 1.进行大肠杆菌的扩增，利用液体培养基进行细菌培养的操作。
2.进行大肠杆菌的分离，用固体平面培养基进行细菌的划线培养。
3.说明大肠杆菌培养的条件和实验原理。
一、微生物培养的基本条件1.微生物(1)概念：结构简单、形体微小的单细胞、多细胞或没有细胞结构的低等生物。
(2)用途：许多种抗生素来源于放线菌和霉菌；酒由酵母发酵产生；腐乳由红曲霉和毛霉发酵制成；微生物能用于治理环境污染，在新能源领域也将发挥巨大作用。
2.培养基(1)概念：培养基是微生物生存的环境和营养物质。
(2)分类：培养基按物理性质常可分为固体培养基和液体培养基，一般都含有水、碳源、氮源和无机盐四类营养物质，另外还需满足微生物生长对pH、特殊营养物质和氧气的要求。
通常细菌培养基要用蛋白胨和酵母提取物来配制，还要加入一定量的氯化钠以维持一定的渗透压；霉菌培养基一般用无机物配制或添加蔗糖的豆芽汁即可。
(3)酸碱性：细菌通常要求在中性偏碱的环境中生长，霉菌要求在中性偏酸的环境中生长；因此，在制备培养基时需调节培养基的酸碱度。
特别提醒有关培养微生物所需营养的三点提醒(1)不同微生物对营养的需求不同，所以培养不同的微生物所需要的营养可能不同。
(2)对异养微生物来说，含C、H、O、N的有机物既是碳源又是氮源、能源。
(3)培养微生物时营养物质要协调。
营养物质过少不能满足微生物的营养需要，过多对微生物的生长有抑制作用。
3.灭菌操作(1)常见灭菌方法①对于培养皿、试管、三角瓶、镊子等常采用高压蒸汽灭菌法灭菌。
②对于不能加热灭菌的化合物，如尿素等，只能用G6玻璃砂漏斗过滤，但玻璃砂漏斗使用前也要在121℃下用纸包好灭菌。
③实验操作过程中，一般采用灼烧的方法对接种环进行灭菌。
(2)高压蒸汽灭菌操作的要求①灭菌前各种用品均需用牛皮纸或报纸包好，在121℃下灭菌15min，实验过程中所需的棉花不能用脱脂棉，因为其易吸水，吸水后容易引起污染。
浙科版高二生物选修1_《大肠杆菌的培养和分离》教案
实验1 大肠杆菌的培养和分离【学习目标】1.进行大肠杆菌的扩增，利用液体培养基进行细菌培养的操作。
2.进行大肠杆菌的分离，用固体平面培养基进行细菌的化纤培养。
3.说明大肠杆菌培养的条件和操作要求的原理。
【教学重点】大肠杆菌的划线分离；大肠杆菌的无菌操作和灭菌技术；大肠杆菌的特点及实验室应注意的安全事项。
【教学难点】大肠杆菌的划线分离；大肠杆菌实验的无菌操作技术及实验室安全事项的解读。
【实验教材分析】本节内容选自浙科版生物选修1第1部分实验1大肠杆菌的分离和培养。
本次课程主要包括了本次实验的目的、大肠杆菌的特点、无菌操作和灭菌的方法、仪器设备和实验材料、实验步骤等内容。
在前一节介绍了实验室规则和生物技术概况的基础上，进行具体的实验操作。
并且经过生物必修三册书本的学习，学生已经掌握了一定的细菌的相关知识，并对一些特殊细菌的筛选和鉴别有了一定的了解。
故本次实验教学既是对学生前面学的理论知识的深化，同时也为学生将要学到的分离以尿素为氮源的微生物等内容奠定了比较重要的基础。
因此，本节课起着承前启后的重要作用。
【学情分析】本节课的教授对象是选了选修1这门课的高二学生，在实验前，学生已经学习过了革兰氏阳性菌与阴性菌的相关知识，本次实验主要是学生在掌握细菌的相关知识后学习大肠杆菌的分离与鉴定，很好地实现了将所学知识与实践相联系，易引起学生的兴趣，学生的积极性较高，从而有利于实验教学的展开。
但学生对于实验原理、实验方法和实验技术等方面还不熟悉，需要教师对此进行详细的讲解，在讲解过程中注意运用适宜的教学方法，引导学生将所学知识运用到具体的实验实践中。
同时，教师需严格要求学生在操作上符合实验室规范，将实验操作过程中的注意事项对学生进行逐一说明，保证实验的有序性与安全性。
【实验教学过程】（一）创设情境，导入新知【教师活动】教师展示饮用水净化、消毒灭菌、检测、出品的简略过程，抛出在检测这一过程中主要是以某一微生物作为指标来进行检测，从而引出本次实验的材料—大肠杆菌（展示图片）。
浙科版高中生物选修一 第一部分 实验1 大肠杆菌的培养和分离(共15张PPT)精品课件
回忆有关细胞的元素组成、分子 组成的知识，想一想微生物应该生活 在什么环境中呢？
1.平板划线法或稀释涂布平板法纯化大肠杆菌 要求：
（1）每四人一组，每组均需完成两种方法； （2）组内成员可任选一种分离方法。 2.培养 将培养皿倒置放在培养箱内，于36℃培养 24h。
课题1 大肠杆菌的培养与分离
思考： 1.为什么培养皿在培养箱内要倒置呢？ 2.菌落是种群吗？
作业： 1.对比实验，说出自己操作过程中的
3.用途：★ ★ ★ ①选择培养基：缺某种物质或多加某种物质 ②鉴别培养基：加指示剂或化学药品
月桂基硫酸盐 胰蛋白胨肉汤
（LST）
配置培养基：
溶化（溶解）
分装
倒平板：
倒平板：
接种：
接种针灼烧灭菌
平板划线
大肠杆菌的纯化方法：
稀释涂布平板法
平板划线法
大肠杆菌的分离纯化
——结晶紫中性红胆盐琼脂
不足； 2.简述实验操作注意事项； 3.通过实验注意事项完善实验设计。
每个人都会有自己的特长。一个人做某些事会比其他事做的更好。但许多人从未找到最适合自己的事情，其根本原因往往是他们没有进 果你对一切都随遇而安，那总是会有一天你会后悔莫及的。心，只有一颗，不要装的太多。人，只有一生，不要追逐的太累。心灵的愉 有；简单的快乐，来自心态的知足。家，很平淡，只要每天都能看见亲人的笑脸，就是幸福的展现。爱，很简单，只要每天都会彼此挂 暖。幸福并不缥缈，在于心的感受。爱并不遥远，在于两心知的默契。人与人之间，尊重是相互的，心与心相交，尊重是必须的，尊重 体现在做人做事，尊重，是一个人的人品尊重，让人与人走近。人无所舍，必无所成。心无所依，必无所获。自己的路只有自己去走， 去度。能抓住希望的只有自己，能放弃自己的也只有自己。能怨恨嫉妒的是自己，能智慧温暖的还是自己。心中有岸，才会有渡口，心 安然。每个人都会有自己的想法、做法、活法。理念不同，做法不同，活法就不同，我们没必要去干涉别人，影响别人，甚至攻击别人 不会报复；他不好，不去打击，不去鄙视。人人都有自尊，人人都有苦衷，生活中没有谁，不希望自己活得更好，走得更顺。学会理解 一个优秀的人，都有一段苦逼的时光。或许是因为一份学业，一份工作，一段爱情，离开了爸爸妈妈，去了一座别的城市。当你倦了厌 母正在为你打拼，这就是你必须坚强的理由。不管发生什么，记住不是只有你一个人在努力不要轻易放弃。一个人在外面，很不容易， 强！每一个闪光的人，都在不为人知的地方默默努力。穿越孤独，战胜恐惧，完善自己。可以流泪，可以休憩，可以抱怨，但绝不放弃 圆缺，都会途经，也都将过去。内心的宁静，是最有力量的修行。佛说，人的痛苦，源于追求了错误的东西。常常，我们苦苦的追逐， 殊不知，有些不甘放下的，往往不是值得争取的，有些苦苦追逐的，往往不是生命需要的。我们要做的是让心静下来，心静下来才知道 什么，让心静下来，静观自在。人，要么像辣椒一样有脾气。要么像白菜一样有层次。要么像莲藕一样有心眼。可我做不到！我就像一 拐弯抹角，一就是一，二就是二。虽然这样的性格吃不开，容易得罪人，但我还是喜欢这样的自己，不虚伪，不算计别人，喜欢做真实 人有傻福。人的善良一定要有底线，大度要讲原则，道德讲底线。你不发脾气，别人就以为你没脾气，你不争取，别人就会占尽你的便 机，也不要活得太单纯。不要别人跟你说几句好听的，你就不管不顾地对人家好，到头来辜负了自己的一片好意。生活是自己的，你的 乐，都得靠自己去感受，去捕捉。改变别人是事倍功半，改变自己是事半功倍。相信自己，美好的生活从改变自己开始！自信，是走向 胜困难的利剑，是达向理想彼岸的舟楫。有了它，就迈出了成功的第一步；有了它，就走上了义无反顾的追求路。诚信是人最美丽的外 的鲜花。人有见识，就不轻易发怒。宽恕人的过失，便是自己的荣耀。青春赚的钱，难赚回青春；生命赚的钱，难买回生命；幸福换来 爱情索取的钱，难索回爱情；时间挣来的钱，难挣回时间。即使用一生得到全世界的钱，全世界的钱也买不回你的一生，请记住金钱不 的时候要休息，该放松的时候要放松，快乐生活才是最给力的。人这一辈子，不可能事事如人意，遇到困难和烦心的事情；要学会自己 快乐的心境和乐观的心态。前行路上，遇见烦恼的时候，不妨学说三句话，第一句话：“算了吧”；第二句话：“不要紧”；第三句话 的”。没有过不去的事情，只有过不去的心情；心若晴朗，人生便没有雨天。别人拥有的，不必羡慕；只要努力，时间都会给你。总想 者必赢。令狐冲说：“有些事情本身我们无法控制，只好控制自己。”考前两个月就是冲刺。养兵千日，用兵一时更快、更高、更强。 的母亲是失败，成功的父亲是汗水面对目标，信心百倍，人生能有几次搏？面对成绩，心胸豁达，条条大陆通罗马。如果敌人让你生气 胜他的把握，如果朋友让你生气，那说明你仍然在意他的友情高考试卷是一把刻度不均匀的尺子：对于你自己来说，难题的分值不一定 平线留给世界的就只能是背影 。没有平日的失败，就没有最终的成功。重要的是分析失败原因并吸取教训。能冲刷一切的除了眼泪，就 推移感情，时间越长，冲突越淡，仿佛不断稀释的茶。不怕考不上，就怕不敢考。积一时之跬步，臻千里之遥程在冷峻的雪山上很多朝 学习与坐禅相似，须有一颗恒心。时间太瘦，指缝太宽调节好兴奋期，学习一浪高一浪名列前茅是银，日新月异是金怨言是上天得至人 是人类祷告中最真诚的部分不必每分钟都学习，但求学习中每分钟都有收获人非要经历一番不同平时的劫难才能脱胎换骨，成为真正能 须咬牙厉志，蓄其气而长其志，切不可恭然自馁也生活比电影狠多了，从来不给弱者安排大逆转的情节。即使赚得了全世界，却失去了 义呢？不要把时间、财力和劳动，浪费在空洞多余的话语上。永远以用心乐观的心态去拓展自我和身外的世界。人的一生，有许多事情 慢慢回味的，过去的就莫要追悔，一切向前看吧 任何打击都不足以成为你堕落的借口，即使你改变不了这个世界，你却依然可以改变自 路永远走下去。不肯下一点功夫，永远不会明白自己从何而来，又将立足于何处。. 凡事不要想得太复杂，手握的太紧，东西会碎，手 路，走的人多了，也便成了路。通过云端的道路，只亲吻攀登者的足迹。不是每个人都适合与你白头偕老。有的人是拿来成长的，有的 有的人是拿来一辈子怀念的。闪光的未必都是金子，而沉默的也不一定就是石头。世界上那些最轻易的事情中，拖延时间最不费力。每 为了让远方变得更近一些。你多学一样本事，就少说一句求人的话。我们是如何一步步落后于别人的，自己心里特别清楚，无非是从生 开始的。人在千里，家在心里；家在千里，人在心里。只有创造，才是真正的享受，只有拚搏，才是充实的生活。 世上真正厉害的 不 牌，而是哪怕你拿到的是一副差牌，也能赢得胜利！别抱怨生活的无聊生活嘛，就是无聊中自己找些乐子。我可以被打败但我不允许自 聪明人之所以没有成功，缺少的不是智慧，而是那种为成功而拼搏的干劲 成功不是将来才有的，而是从决定去做的那一刻起，持续累 怀，让是一种修养，退、让则是一种智慧。所谓天才，只不过是把别人喝咖啡的功夫都用在工作上了。善于利用零星时间的人，才会做 现实会告诉你 不努力就会被生活踩死，无需找什么借口，一无所有 就是拼的理由。靠山山会倒，靠水水会流，靠自己永远不 精诚所至 坎坎坷坷，跌跌撞撞那是在所难免。但是，不论跌了多少次，你都要坚强地再次站起来。任何时候，无论你面临着生命的何等困惑，抑 无论道路如何的艰难，无论希望变得如何渺茫，请你不要绝望，再试一次，成功一定属于你一个家庭没有书，就好像一间房子没有窗户 和快乐看作是生活目的的本身。手指有长有短，知识有高有低。学无前后，达者为师。任何不能打倒你的，将会使你更加坚强。如果你
2019-2020学年高中生物人教版选修1配套习题：专题2 课题1 微生物的实验室培养
③接种可疑菌后,在温度为 35 ℃的环境中培养 24 h,液体培养基变浑浊,原因是
。对照组试管中应加入 ,与实验组同时培养 6 h 后,若实验组液体
培养基的浑浊度比对照组 (填“高”或“低”),则可确定疑似患者被炭疽杆菌感染;反之,
则排除。
④对排除的疑似患者及易感人群,可接种炭疽杆菌疫苗,刺激机体产生相应抗体。与产生抗体
3.下列有关微生物培养的叙述,正确的是( ) A.培养基一般都含水、碳源、氮源和无机盐 B.涂布接种时,涂布器应在干热灭菌箱中灭菌冷却后再使用 C.纯化培养时,培养皿应倒置放在恒温培养箱内的摇床上培养 D.观察菌落时,应将培养皿盖拿掉后在显微镜下进行观察计数 解析:涂布接种时,涂布器应在酒精灯火焰引燃灭菌,冷却后再使用;用液体培养基培养微生物时, 应放在摇床上,培养皿中的是固体培养基,应倒置放在恒温培养箱内培养;菌落肉眼可见,不需要 借助于显微镜。 答案:A
的原因是
。
解析:实验室中能耐高温的、需要保持干燥的物品,如玻璃器皿和金属用具等,可用干热灭菌的
方法灭菌。对于一些不耐高温的液体,如牛奶,需采用巴氏消毒法和高温瞬时消毒法消毒,这种
消毒方法的优点是可以杀死牛奶中的微生物,并且牛奶中的营养成分基本不被破坏。自来水通
常用氯气消毒,氯气与水反应生成次氯酸和氯化氢,次氯酸具有强氧化性,能杀死自来水中的微
6.防止杂菌入侵,获得纯净的培养物,是研究和应用微生物的前提。下列叙述错误的是( )
A.实验室里可以用紫外线或化学药物进行消毒 B.接种环、接种针等金属用具,直接在酒精灯火焰的内焰部位灼烧灭菌 C.在实验室中,切不可吃东西、喝水,离开实验室时一定要洗手,以防止被微生物感染 D.使用后的培养基丢弃前一定要进行灭菌处理,以免污染环境 解析:接种环等金属用具应放在酒精灯火焰的充分燃烧层即外焰处灼烧灭菌。 答案:B
实验1,大肠杆菌的培养和分离
实验1,大肠杆菌的培养和分离篇一：实验1 大肠杆菌的培养和分离实验教学提纲实验1 大肠杆菌的培养和分离教学提纲实验目的1. 进行大肠杆菌的扩增，利用液体培养基进行细菌培养的操作。
2. 进行大肠杆菌的分离，用固体培养基进行细菌的划线培养。
3. 说明大肠杆菌的培养条件和操作要求的原理。
实验材料1. 配制LB液体培养基，蛋白胨0.5g，酵母提取液0.25g，氯化钠0.5g，加水50mL溶解。
2. 配制LB固体培养基，蛋白胨0.5g，酵母提取液0.25g，氯化钠0.5g，琼脂1g，加水50mL溶解（配制LB固体培养基是用来倒平板和倒试管斜面）。
实验步骤1. 培养基灭菌。
在两个150mL的三角瓶中分别装入50mL LB液体培养基和50mL LB 固体培养基（刚配好，尚未凝固），加上封口膜(一种塑料薄膜，中间有小孔的滤膜。
既可以通气，又不使细菌进入。
)。
将培养皿用牛皮纸包好，放入高压灭菌锅中，1kg压力灭菌15min（有压力时开始计时）。
同时将需要灭菌使用的培养皿、试管、三角瓶等和所用器械（接种环、镊子等）等一块灭菌。
2. 倒平板，倒斜面。
灭菌后。
待高压锅压力与大气压相同时，打开锅盖，将有培养基的三角瓶、试管、培养皿等放在灭菌后的超净工作台上。
超净工作台操作：打超净工作台的紫外灯（注意：打开紫外灯后人必须离开），持续30min，关闭紫外灯，打开过滤风和白炽灯。
将有培养基的三角瓶和培养皿放在灭菌后的超净工作台上后，点燃酒精灯，用镊子夹出酒精棉球擦拭桌面，并用酒精棉球擦手。
待固体培养基冷却到60℃时（手放上还有些热的时候），在酒精灯火焰旁，以右手无名指及小指夹持含有固体培养基的三角瓶的封口膜，右手其他三个手指拿着三角瓶；左手拿着培养皿，并打开上盖的一边，将三角瓶的培养基约10～20mL倒入1 个培养皿中。
倒入后立即置于水平位置上，轻轻摇晃，使培养基铺满培养皿底，待凝，使之形成平面。
倒斜面（试管内空白斜面），用玻璃漏斗倒入试管内，每试管2mL。
2018高中生物第一部分微生物的利用11大肠杆菌的培养和分离(1)素材浙科版1
生物技术实践第一部分微生物的利用一、课标内容：进行微生物的分离和培养二、教学要求本部分“实验2：分离以尿素为氮源的微生物”与“实验3：观察土壤中能水解纤维素的微生物”不作要求，只要求学生做1个实验，即“实验1：大肠杆菌的培养和分离”。
实验1 大肠杆菌的培养和分离三、教学建议1.课时建议（共计9课时）2.实验建议在大肠杆菌的培养和分离的实验中，要特别强调无菌操作，这是进行微生物实验中必备的操作要求，也是本模块多数实验的基本要求，应该让学生形成无菌操作的行为习惯。
无菌操作，既包括各种器皿必须是无菌的，也包括各种培养基也必须是无菌的，同时还要求在接种时，不能带有其它杂菌，所以在实验过程中，应时刻让学生保持这种无菌意识。
在菌落和菌种种类的辩认时，要教会学生能大致区分细菌、放线菌与酵母菌菌落，有些用肉眼不能判断的菌落也可借助显微镜进行观察推断。
第二部分酶的应用一、课标内容1.研究酶的存在和简单制作方法2.尝试利用酶活力测定的一般原理和方法。
3.探讨酶在食品制造和洗涤等方面的应用。
4.尝试制备和应用固相化酶二、教学要求实验5 加酶洗衣粉的使用条件和效果三、教学建议2.实验建议（1）在“果汁中的果胶和果胶酶”实验中，教材所用的果实是苹果或山楂，教师也可根据当地情况及时令选择适宜的水果，如葡萄、杨梅或樱桃等，最好能与当时、当地的丰产水果吻合。
（2）在“加酶洗衣粉的使用条件和效果”实验中，由于市售的加酶洗衣粉品牌不同，厂家不同，所含酶的种类与含量也不同，教师选购时，可选多种品牌，让学生在实验前先分析洗衣粉袋上的说明再决定使用的类型。
也可让学生结合一些洗衣粉的电视广告，通过实验验证，培养学生的鉴别与批判能力。
棉布上的污渍必须要放置1天以上。
污渍的类型如果由学生自己制作与确定，更好。
（3）在“α－淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测”实验中，“酶的固定化”最好不要由教师代做，应让学生自己制作，让学生直接观察与感受固定前后石英砂的变化。
高中生物第1部分微生物的利用实验1大肠杆菌的培养和分离教案浙科版选修1
实验1 大肠杆菌的培养和分离一、大肠杆菌1．大肠杆菌是革兰氏阴性、兼性厌氧的肠道杆菌。
2．在肠道中，大肠杆菌一般对人无害，但也有一些菌株可以侵袭肠黏膜并产生毒素，任何大肠杆菌如果进入人的泌尿系统，都会对人体产生危害。
3．大肠杆菌是基因工程技术中被广泛采用的工具。
二、实验内容1．本实验的内容是将大肠杆菌扩大培养和划线分离。
分离后，一个菌体便会形成一个菌落，这是消除污染杂菌的通用方法，也是用于筛选高表达量菌株的最简便方法之一。
2．本实验用LB液体培养基(通用的细菌培养基)扩大培养大肠杆菌。
培养后再在LB固体平面培养基上划线进行分离，随后培养基上便会形成一个个单独的菌落。
三、细菌的培养和分离1．细菌以分裂的方式繁殖，分裂速度很快，约20分钟分裂一次。
人们在培养细菌时，一般用接种环转移带菌的培养物。
接种时，先将接种环在明火上烧红后冷却，再操作。
2．细菌的分离(1)划线分离法：在液体培养基中，只要接种后培养8 h，每毫升培养基中就有几亿个细菌。
可用接种环蘸菌液在含有固体培养基的培养皿平板上划线，在划线过程中接种环上的菌液逐渐减少，因此，划线到最后，可使细菌间的距离加大。
在固体培养基培养10～20 h后，可由一个细菌产生单菌落，菌落不会重叠。
如果再将每个菌落分别接种至含有固体培养基的试管斜面上，在斜面上划线，则每个斜面的菌群就是由一个细菌产生的后代。
这种方法也可用于分离细菌，将污染的杂菌除去。
接种环在取菌种前和划线前都要灼烧、而后都要冷却、操作完毕后又要灼烧的原因是什么？【提示】取菌种前灼烧接种环的目的是消灭接种环上的微生物；除第一次划线外，其余划线前都要灼烧接种环的目的是消灭接种环上残留菌种；取菌种和划线前都要求接种环冷却后进行，目的是防止高温杀死菌种；最后灼烧接种环的目的是防止细菌污染环境和操作者。
(2)涂布分离法：先将培养的菌液稀释，通常稀释10－5～10－7倍，然后取0.1 mL不同稀释度的稀释菌液加在培养皿的固体培养基上，用玻璃刮刀涂布在培养基平面上进行培养，在适当的稀释度下，可产生相互分开的菌落。