实验一 药理学实验基础知识与基本技能
药理学实验
针对药理学有关知识内容与实验课的要求，拟开设以下几个方面的实验：实验一:药理学实验的基本知识及基本技能训练（4学时）实验目的与要求：通过实验使学生掌握药理实验有关的动物选择、应用、捉拿、给药、采血等基本知识及基本技能的训练。
要点：一、常用动物捉持方法⑴小鼠捉持⑵家兔捉持二、常用动物给药方法⑴小鼠灌胃——；皮下注射——；腹腔注射——；肌肉注射——；尾静脉注射——；⑵家兔灌胃——；耳缘静脉给药——；三、常用动物取血方法⑴小鼠后眼眶静脉丛取血——用拇指和食,中指捏住鼠颈部,利用捏紧的压力,使静脉丛淤血.将一特制硬玻璃管(约长15cm,前端拉成管壁略厚的毛细管),从内眼角插入眼睑和眼球之间,轻轻香眼底方向移动，并略加捻转血即自然顺便玻璃管流出。
⑵眼眶动脉、静脉取血——左手抓住小鼠，拇指和食指尽量将头部皮肤捏紧，使眼球突出，用无钩弯镊将眼摘除，将鼠倒置，血即流出1. 小鼠捉持法以右手捉小鼠尾，将小鼠放于粗糙面上，向后轻拉小鼠尾部，使小鼠固定于粗糙面上。
用左手的拇指、食指和中指捏住小鼠两耳及头部皮肤，无名指、小指和掌心夹住背部皮肤和尾部，使头部朝上，颈部拉直但不宜过紧，以免窒息（见图1—1）。
另一种捉持方法是只用左手，先用食指和拇指抓住小鼠尾巴，后用手掌及小指和无名指夹住其尾部，再以拇指及食指抓住两耳和头部皮肤（见图1—2）。
前者易学，后者便与快速捉拿给药。
图1—1 小鼠的捉拿方法1 图1—2 小鼠的捉拿方法22. 小鼠灌胃以左手捉持小鼠，头部朝上，使其头颈充分拉直。
右手拿起装有灌胃针头的注射器，自口角插入口腔，再从舌面紧沿上腭进入食道（见图1—3）如插入正确，灌胃针头容易进入，如遇阻力，可能插入气管，应退出再插。
灌胃液最多不超过0.1ml。
图1—3小鼠的灌胃法图1—4小鼠的皮下注射法3. 小鼠皮下注射将小鼠至于铁丝网上，左手抓住小鼠，以拇指扣食指捏起背部皮肤，右手持注射器刺入背部皮下注射药液。
（见图1—4）。
实验实训指导书药理学
实验一药理学实验基本知识和技术实验目的：1、掌握基本操作，锻炼动手、动脑能力；2、更好地掌握药理学基本理论知识；3、培养科学思维。
实验内容：一、药理实验的基本目的与要求二、实验动物：1、动物的选择；2、动物的标记与捉拿、固定方法；3、动物的取血方法（尾尖、眼眶静脉丛、摘眼球、断头）；4、动物的给药方法（灌胃、腹腔、皮下、尾静脉）；5、动物的麻醉方法；6、动物的处死方法。
三、实验设计基本原则。
实验步骤：一、药理学实验的基本目的与要求药理学实验课在药理学教学中占有非常重要的地位。
药理学实验课的目的在于通过实验验证药理学的基本理论，加深理解与掌握药理学的基本知识和规律；也是了解获得药理学知识的科学途径。
同时，培养学生独立思考，独立工作，科学思维的能力；培养学生动手操作、分析问题和解决问题的能力；还应培养学生对科学工作的严肃的态度、严格的要求、严密的工作方法及实事求是的工作作风。
为了达到上述目的，要求做到下列事项：1. 实验前：预习实验内容并复习相关理论知识；2. 实验时：（1）实验分小组进行，实验前分工明确，实验时密切配合；（2）确定实验仪器、药品、动物与实验指导相符时，将实验器材妥善安排，正确装置、保管；（3）实验操作按步骤进行，仔细观察实验中出现的现象，实事求是地做好记录；（4）注意爱护动物、节约实验药品；（5）实验过程中保持实验室肃静、清洁。
3. 实验后：⑴各组同学将实验动物处死，实验台擦干净，将实验方盘送回准备室；⑵值日生搞好实验室卫生，将死亡动物送至指定场所；⑶整理实验结果，经分析思考作出结论，按要求写出实验报告，按时交给指导老师。
实验报告的书写1.题目2.目的3.原理4.材料：实验动物，器材，药品5.方法：用自己的语言简单扼要描述出来；6.结果：要求真实、清楚；7.讨论：将实验结果进行比较、分析；实验中有哪些不足之处；结果异常或失败的原因；8.结论：将实验结果进行归纳总结，应带有提示性质。
药理学实验基本技能
药理教研室
实验要求
（一）实验课前 1、仔细阅读实验指导，了解实验目的、要求、 步骤及注意事项。 2、复习相关理论知识，充分理解实验的原理 和意义。 3、预测实验结果，写好预习报告。
（二）实验课中 1、穿白大褂，带学生证领实验器材、药品。 2、分工合作，积极参与实验操作、观察、记 录。 3、节约试剂和药品，爱护实验器材，如出现 故障，及时请示老师。 4、严格控制时间，保证在规定的课时内完成 实验任务。
实验报告的书写
1、实验名称 2、实验目的 3、实验动物 4、实验步骤 5、实验结果 6、讨论、结论
常用实验动物
一、实验动物的定义 实验动物（laboratory animal）是 根据科学研究需要在实验室条件下有 目的、有计划进行人工驯养，繁殖和 科学培育而获得的动物。 如,转基因动物
二、实验用动物 泛指一切用于实验的动物， 这是一个广义的概念，其中 包括要求严格的实验动物， 还包括家畜、野生动物和观 赏动物等。
4.肿瘤研究：具有较高的肿瘤自发率，易研 究癌变机理。如，肝癌、肺癌、白血病。 5.遗传疾病研究：具有自发性遗传疾病，如 白内障、尿崩症、肥胖、高血压等。 6.传染病研究：多种病原体可使大鼠产生与 人相似的疾病，如，慢性支气管炎，病毒 性肝炎，血吸虫病，钩虫病等。
7.口腔医学研究：大鼠牙齿上的 珐琅质蛀损在宏观和微观上同 人的蛀齿相似，可用来研究龋 齿。 8. 环境污染与人类健康的研究： 大鼠对空气污染非常敏感，重 金属污染也可导致大鼠的病理 改变，常作为这方面研究的动 物模型。
(二)生物医学中的应用 1、药物学研究和毒性试验 (1)药物筛选试验:小鼠常用于药物对疾病疗效 筛选试验,如抗肿瘤药物,抗结核药物,抗疟疾 药物等的筛选。 (2)药效及其副作用研究:如： 利用声源性惊厥小鼠来评价抗痉挛药物: 利用小鼠角膜和耳廓反射评价镇定药物。
药理学实验指导
药理学实验指导（供自学助考班用）实验一药理学实验基础知识与常用动物捉拿、给药【目的】1、学习药理学实验基础知识；2、掌握药理学实验常用动物捉拿、给药方法。
【器材】1ml、5ml、20ml注射器，大、小鼠灌胃针头，4号、6号注射针头，250ml烧杯、鼠笼(或铁丝笼)，天平秤、砝码。
【药品】0.9%生理盐水。
【动物】小白鼠、大鼠、家兔。
【内容】一、实验动物的捉拿方法1、蛙和蟾蜍左手握持蛙或蟾蜍，食指和中指夹住左前肢，拇指压住右前肢；右手将双下肢拉直，左手无名指及小指将其压住而固定。
此法用于淋巴囊注射。
毁脑和毁脊髓则用左手食指和中指夹持蛙或蟾蜍的头部，拇指和无名指小指握持双下肢，右手持刺针进行操作。
2、小白鼠可采取双手法和单手法两种形式。
双手法：右手提起鼠尾，放在鼠笼盖或其他粗糙面上，向后方轻拉，小白鼠则将前肢固定于粗糙面上。
此时迅速用左手拇指和食指捏住小白鼠颈背部皮肤，并以小指与手掌尺侧夹持其尾根部，固定于手中。
单手法：小白鼠置于笼盖上，先用左手食指与拇指抓住鼠尾，手掌尺侧及小指夹住尾根部，然后用左手拇指与食指捏住颈部皮肤。
3、大白鼠大白鼠容易激怒咬人，捉持时左手应戴防护手套或用厚布盖住大鼠，先用右手抓住鼠尾，再用左手拇指和食指握住头部，其余手指与手掌握住背部和腹部。
不要用力过大，切勿捏其颈部，以免窒息致死。
4、家兔用左手抓住颈背部皮肤(抓的面积越大，其吃重点越分散)。
将兔提起，以左手托住其臀部，使兔呈坐位。
二、实验动物的给药途径与方法1、小白鼠给药途径与方法灌胃(ig)：左手固定小鼠，右手持灌胃器，灌胃针头自口角进入口腔，紧贴上腭插入食道。
如遇阻力，将灌胃针头抽回重插，以防损伤。
常用灌胃量为0.1～0.2ml/10g。
皮下注射(ih)：可用腹部、背部、腹股沟的皮下，此处皮肤比较松弛，也可由助手协助。
注药量一般为0.1～0.2ml/10g。
肌肉注射(im)：一人抓住小鼠头部皮肤和尾巴，另一人持连4号针头的注射器，将针头刺入后腿外侧肌肉。
药理实验课件1
②确定组数、计算各组剂量： 组数（G）：5-8 组 各组剂量：各组剂量要按等比级数排列，按 下列公式求出公比r:
按公比求各组剂量：D1，D2，D3，D4，D5，
……，Dm
其中D1=Dn=最小剂量，D2=D1·r，D3 =D2·r ，……Dm =D n-1· r ③配制等比稀释溶液：要求各小鼠给药容积 一样，0.1ml/10g∽0.2ml/10g，按下列公式计 算浓度：
⑶ 豚鼠：因其对组胺敏感，并易于致敏，故常被 选用于抗过敏药、平喘药和抗组胺药的实验。也常用 于离体心脏、心房、肠管实验。又因它对结核敏感， 常用于抗结核病药的实验。 ⑷ 家兔：常用于观察研究脑电生理作用，药物对 小肠的作用。由于家兔体温变化敏感，也常用于体温 实验，用于热原检查。 ⑸ 狗：狗是记录血压，呼吸最常用的大动物。还 可利用狗做成胃瘘、肠瘘，以观察药物对胃肠蠕动和 分泌的影响。在进行慢性毒性实验时，也常采用狗。
实验三 药物的协同作用和拮抗作用
［目的］ 观察激动剂与拮抗剂之间的相互作用 ［材料］ 兔子１只，0.05%硫酸阿托品注射液,0.1%盐 酸肾上腺素注液,0.2%硝酸毛果芸香碱注射液
［方法］ １、取兔放于兔固定箱内固定，避免阳光直射 眼睛，用毛剪剪去兔两眼睫毛，然后用瞳孔量 尺测量瞳孔大小，连续三次，取平均值。 ２、在兔左眼滴入０.2%毛果芸香碱3滴，滴药 时用姆指和食指将下眼睑提起,使成囊状,再用 中指压住鼻泪管开口处,防止药液流入鼻泪管而 不起作用，再用右手滴入药液。15分钟后再测 量瞳孔大小，连续三次，取平均值，并进行比 较。
6.动物的处死：大、小鼠通常用颈椎脱臼法 处死。
实验二 不同给药途径对药物作用的影响
一、实验目的 1.观察不同给药途径对同一药物的作用速度、 强度的影响； 2.观察同一药物从不同途径进入机体可产生 不同的作用。 二、实验材料 注射器、针头、小鼠灌胃针头、 烧杯、普通天平、硫酸镁溶液
药理学实验的基础知识
药理学实验的基础知识药理学是研究药物对生物体产生作用的科学，而药理学实验是用来研究、验证药物的药效、毒性和代谢等特性的重要手段。
在进行药理学实验之前，研究人员需要掌握一些基础知识，以确保实验的可靠性和科学性。
药理学实验的分类药理学实验通常可以分为体外实验和体内实验两大类。
体外实验体外实验是在体外环境（如离体器官、细胞培养皿等）中进行的实验，用于研究药物对细胞、基因等的作用机制和生物效应。
体内实验体内实验是在动物模型或人体中进行的实验，用于评价药物的生物活性、毒性和药代动力学特性等。
药理学实验的设计原则进行药理学实验时，必须遵守一些设计原则，以确保实验结果的准确性和可靠性。
1.随机分组：实验对象在实验前应随机分配到不同的实验组，以减少实验结果的偶然性。
2.双盲对照：在动物实验中，研究人员应当实现实验组和对照组的盲法实验，以减少实验结果的主观影响。
3.样本量控制：实验设计时需要合理确定实验组和对照组的样本量，以保证实验结果的统计学意义。
4.质量控制：在进行实验的过程中，需要确保实验操作的标准化和一致性，以减少操作误差。
药理学实验的常用技术在药理学实验中，有许多常用技术可以帮助研究人员获取所需数据和信息，例如：•ELISA检测技术：用于测定细胞因子、蛋白质等分子在样本中的浓度。
•Western blot：检测蛋白质表达水平和结构特征的技术。
•细胞色素释放试验：用于评价药物对细胞毒性的影响。
•动物行为学实验：评估药物对动物运动、认知等行为的影响。
药理学实验的伦理和安全注意事项在进行药理学实验时，研究人员需要遵守相关的伦理规范和安全措施，以保障实验对象的权益和研究人员的安全。
1.动物实验伦理：研究人员应当遵守动物实验的伦理规范，尽量减少动物的痛苦和不必要的死亡。
2.实验室安全：在实验室操作时应当穿戴个人防护装备，确保实验操作的安全。
3.数据保密：研究人员需要确保实验数据的保密性，防止实验数据泄露。
结语药理学实验作为药物研发的重要环节，需要研究人员具备扎实的基础知识和实验技术，以确保实验结果的科学性和可靠性。
药理学实验
药理学实验一药理学实验基础及基本技能训练【实验目的】熟悉注射器、灌胃针头的构造、规格和主要用途。
学会正确使用注射器及灌胃针头；学常用实验动物的捉持和给药方法；学会实验动物给药量的计算。
【实验对象】小白鼠【实验器材】注射器、灌胃针头、鼠笼、棉签。
【实验药品】生理盐水、碘伏。
【实验步骤】1．多媒体示教实验动物的捉持及给药方法：（实验原理1）（1）捉持法用右手提起鼠尾，将其放于粗糙面（如鼠笼）上。
右手向后拉鼠尾，使其固定在粗糙面上。
此时应趁其不备迅速用左手拇指和食指捏住小鼠双耳及头颈部皮肤。
然后，翻转小鼠使其腹部向上平卧于掌心中，用无名指和小指压住鼠尾并固定于手中（2）给药法①灌胃法（ig）：左手捉持小鼠，头部向上，颈部拉直。
右手持配有灌胃针头的注射器，自口角插入口腔，与食管成一直线，然后沿上颚轻轻插入食管，如插入无阻力、小鼠无挣扎、呼吸无异常、口唇无发绀等现象，即可注入药液。
若遇阻力，应退回重插，以免插入气管引起小鼠死亡。
药液量一般为0.1～0.3ml/10g体重，每只不超过0.5ml （图1）。
②腹腔注射法（ip）：左手捉持小鼠，右手持注射器（选用5或6号注射针头），与腹壁呈45°角，自下腹部一侧向头端刺入腹腔。
进针时角度不宜太小，部位不能太高，刺入不能太深，否则会损伤内脏。
药液量一般为0.1～0.2ml/10g体重，每只不超过0.5ml（图2）。
③皮下注射法（sc）：可两人合作，一人用左手捏住小鼠头部皮肤、右手拉住鼠尾固定小鼠；另一人左手捏起小鼠背部皮肤，右手持注射器，将针头刺入背部皮下注入药液。
也可单人操作，按前法捉持小鼠，右手持注射器，针头沿右侧肋缘上穿入皮下，向前推至右前肢腋下部位，推入药液即可。
药液量一般为0.05～0.2ml/10g体重，每只不超过0.3ml。
④肌内注射法（im）：两人合作，一人固定小鼠，另一人将注射器针头刺入小鼠后肢外侧肌肉内注入药液。
药液量每腿不超过0.1ml。
药理学实验基础知识与
实验误差与控制
系统误差
由于实验方法、仪器设备、试剂等因素引起的误差，具有 可重复性和规律性。控制方法包括标准化操作、校准仪器 设备、使用合格试剂等。
随机误差
由于偶然因素引起的误差，具有不可预测性。控制方法包 括增加样本量、多次重复实验等。
过失误差
由于操作失误、记录错误等人为因素引起的误差。控制方 法包括加强实验操作培训、实施严格的质控措施等。
实验动物的捉拿、标记与分组
捉拿与标记
在药理学实验中，通常使用实验动物如小白鼠、大鼠、兔子等。实验人员需要掌 握正确的捉拿技巧，避免对动物造成不必要的应激或损伤。同时，为了便于实验 过程中的管理和记录，需要对动物进行标记，如编号、性别、体重等。
分组
为了比较不同药物或不同处理对实验结果的影响，实验中通常需要将动物随机分 成若干组，每组动物数量应保持一致，并遵循随机化原则。分组时应确保各组动 物在重要变量上均衡可比，以减小误差和偶然因素的影响。
实验数据的统计分析
描述性统计
对实验数据进行整理、分类和描述， 如计算平均值、中位数、标准差等。
推论性统计
根据样本数据推断总体特征，如进行 t检验、方差分析、卡方检验等。
回归分析
研究自变量与因变量之间的数量关系， 揭示影响因变量的因素及其程度。
统计分析软件
使用SPSS、SAS、Excel等统计分析 软件进行数据处理和统计分析，提高 数据处理效率和准确性。
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药理学实验安全与伦理
实验安全防护措施
实验室安全规定
遵守实验室安全规定，确保实验 人员的人身安全。
防护设备
根据实验需要，正确使用防护眼镜、 实验服、手套等防护设备。
化学品管理
了解实验中使用的化学品性质，正 确存储和使用，防止泄漏和误操作。
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17
本次实验报告的书写
1、常用动物的捉拿方法 2、常用动物的给药方法 3、常用动物的编号 4、常用动物的处死方法
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18Biblioteka 谢 谢!精品课件19
药理学实验
实验一 药理学基本知识与基本技能
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1
1、实验动物的选择
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2
小白鼠
特性：繁殖能力强（妊娠期21天，年产6—9胎） 动物体积小，便于捉拿和实验操作 动物性情相对温和 廉价，来源广
适用于：药物筛选 半数致死量测定 药物效价比较 抗感染、抗肿瘤药物 避孕药物
大白鼠
特性：与小白鼠相似 适用于：药物的亚急性或慢性毒性实验
注药量一般为0.1～0.2 ml/10g。
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4 肌肉注射(im) 一人抓住小鼠头部皮肤和尾巴，另一人
持带4号针头注射器将针头刺入后腿外侧肌肉。回抽 无血，即可注射。注射量一般不超过0.1～0.2 ml/ 只。
5 静脉注射(iv) 将小鼠置入固定器，反复用酒精涂擦拭尾部
使血管扩张。自尾部末端几乎平行入，刺入血管注 入药液，如无阻力，表明针头进入静脉。
3 插入深度3cm
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2 腹腔注射(ip)
将小鼠固定后，头朝下，腹部向上，从左 下腹部外侧45°进针，刺入腹腔，此时有落空感， 回抽无回血或无尿液，即可注射。
常用注射量为0.1～0.2 ml/10g 。
3 皮下注射(ih)
可选用颈部、腹部、背部、腹股沟的皮肤， 此处皮肤比较松弛，注射时，用左手拇指和食指轻 轻提起动物的皮肤，右手拿注射器，使针头水平刺 入皮下，回抽无血，缓慢推注。 拔针时，一手捏 住针刺部位，以防药液外渗。
药物抗炎作用的实验 抗高血压药物实验
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4
豚鼠
适用于：平喘药和抗组胺药的实验
抗结核药的研究
皮肤毒力实验
离体心脏及平滑肌实验
研究抗心律失常药物的机理
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5
家兔
适用于：体温实验、热原检查 药物对心脏、呼吸的影响
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6
猫
适用于：血压实验 心血管药物及中枢神经系统药物的研究
犬
适用于：观察药物对心脏泵功能和血流动力学的 影响 心肌细胞电生理研究 降压药及抗休克药的研究 慢性实验研究
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12
（一）、捉拿
双手法：
单手法：
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（二）实验动物常用的给药途径与方法
（主要介绍小白鼠）
经口灌胃 皮下注射 肌肉注射 腹腔注射 静脉注射
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1 经口灌胃（ig)
灌胃量为0.1～0.2
ml/10g
注意事项： 1 手法轻柔，如遇阻力立即抽出，以免损伤或穿 破食道
2 出现较强呼吸困难，呛咳,挣扎,立即停止操 作，可能插入气管
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7
2、性别鉴别
肛门与生殖孔之间的距离： 雌性：距离近,腹部有对称的乳房 雄性：距离远，之间有阴囊
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3、编号
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9
4、处死方法
颈椎脱位法
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5、动 物 基 本 操 作
（小鼠）
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年龄和体重的关系 可用动物体重反映年龄 成年体重18～22 g 幼年小鼠 < 18 g 老年小鼠 > 40 g