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药理学实验讲义

药理学实验讲义南方医科大学药学院2010-7目录实验一实验动物操作的基本机能 (2)实验二不同给药途径对药物作用的影响 (4)实验三全血水杨酸二室模型药物代谢动力学参数测定 (5)实验四肝肾功能对药物作用的影响 (6)实验五药物镇痛实验 (7)实验六巴比妥类药物的抗惊厥作用 (9)实验七利多卡因对抗氯化钡引起的心律失常实验 (13)实验八有机磷酸酯类中毒及解救 (14)附录1 药理学实验基本要求 (19)附录2 药理学在新药研究中的应用 (22)实验一、实验动物操作的基本机能一、目的:学习实验动物编号、捉持、给药、采血等基本操作方法。
二、实验材料(一)动物:小白鼠10只,雌雄各半,体重18g ~ 22g。
家兔1只,雌雄均可。
(二)器材:1 ml注射器,5 ml注射器,针头,灌胃针头,大烧杯,天平。
三、方法1. 性别鉴别小鼠的性别鉴别通常以肛门与生殖孔之间的距离来判断,距离近者为雌性,距离远者为雄性。
家兔可以从生殖器分辨其性别。
2. 编号可根据情况和习惯而定,符合清晰易辨、简便耐久的要求即可。
例如小鼠,右前肢皮肤外侧涂色标记为1号,腹部右外侧皮肤涂色标记为2号,右后肢皮肤外侧涂色标记为3号,头部皮肤涂色标记为4号,背部正中皮肤标记为5号,尾巴根部标记为6号,7、8、9号在左侧同1、2、3号,第10号不色。
3.捉持右手提起鼠尾,放在粗糙物(如鼠笼)上面,轻轻向后拉其尾,此时小鼠前肢抓住粗糙面不动;用左手的拇指和食指捏住其头部皮肤和双耳;其余三指和掌心夹住其背部皮肤及尾部。
这样小鼠便可被完全固定在手中。
4. 给药(1)小鼠的给药方法①灌胃(po):将小鼠固定后,右手持装有灌胃针头的注射器,自口角处插入口腔,沿上腭插入食道。
如遇阻力,可将灌胃针头抽出再另插,以免穿破食道或误入气管,造成动物死亡。
灌注量一般为0.1~0.2ml/10g,不超过0.5ml/只。
②肌内注射(im):两人合作,注射部位多选后腿上部外侧。
中药药理学实验讲义

中药药理学实验讲义 Document number:WTWYT-WYWY-BTGTT-YTTYU-2018GT中药药理学实验讲义成都中医药大学药学院药理2005,12中药药理学实验讲义主编曾南主审沈映君编委曾南王平徐世军谢宇环王张杨旋熊静悦杨莉娟童妍周桢昊李佳川第一章中药药理实验基本知识一、中药药理实验报告基本要求1.实验前应仔细阅读实验指导,做到心中有数。
结合实验内容,复习有理论知识。
科研实验还应查阅有关文献资料,吸取他人经验。
实验中应认真、仔细、耐心地观察所出现的各种现象,实事求是记录,切忌夹杂主观因素。
应坚持一丝不苟,严谨的科学作风,决不允许抄袭别人的实验结果写报告。
2.教学实验往往每次是取一种动物,一种方法写实验报告。
科研实验则应事先设计好实验动物数,随机分组。
新药研制还应设空白与已知药物对照组。
科研实验要说明的某一个作用,至少设2~3个以上计量组,要两种以上的实验方法等。
3.实验条件应详细、明确,如仪器型号、试剂的浓度、中药的品种、复方的组成、提取方法、浓度和剂量、给药途径、动物的来源、品种、体重、年龄、性别、如何分组等都应写出。
4.实验方法可简明扼要地叙述,但关键环节必须写清楚。
科研报告还可以引用文献上的方法,以节省文字。
5.实验结果应根据实验获得的数据进行整理,对一个教学实验小组或全实验室的数据进行整理、归纳、分析和对比,尽量总结出各种图表,进行统计学处理。
6.讨论部分包括实验结果的分析、思考题的探讨、实验设计、实验方法及实验中出现异常现象的分析、认识、体会和建议等。
讨论应注意结合中医药理论。
科研报告还可对比前人的实验进行分析,阐明从本实验获得的新发现或尚存在问题。
7.实验结束应及时地整理和总结实验结果,写出报告。
实验报告内容应包括实验名称、目的、原理、材料(包括仪器、药品、动物)、方法、结果、讨论及结论。
科研实验报告还应有前言,说明课题来源及本实验要解决的问题;报告后应附有参考文献。
(完整word版)中药药理学实验讲义

中药药理学实验讲义成都中医药大学药学院药理2005,12中药药理学实验讲义主编曾南主审沈映君编委曾南王平徐世军谢宇环王张杨旋熊静悦杨莉娟童妍周桢昊李佳川第一章中药药理实验基本知识一、中药药理实验报告基本要求1。
实验前应仔细阅读实验指导,做到心中有数。
结合实验内容,复习有理论知识.科研实验还应查阅有关文献资料,吸取他人经验。
实验中应认真、仔细、耐心地观察所出现的各种现象,实事求是记录,切忌夹杂主观因素。
应坚持一丝不苟,严谨的科学作风,决不允许抄袭别人的实验结果写报告.2.教学实验往往每次是取一种动物,一种方法写实验报告。
科研实验则应事先设计好实验动物数,随机分组.新药研制还应设空白与已知药物对照组。
科研实验要说明的某一个作用,至少设2~3个以上计量组,要两种以上的实验方法等。
3。
实验条件应详细、明确,如仪器型号、试剂的浓度、中药的品种、复方的组成、提取方法、浓度和剂量、给药途径、动物的来源、品种、体重、年龄、性别、如何分组等都应写出。
4.实验方法可简明扼要地叙述,但关键环节必须写清楚。
科研报告还可以引用文献上的方法,以节省文字。
5。
实验结果应根据实验获得的数据进行整理,对一个教学实验小组或全实验室的数据进行整理、归纳、分析和对比,尽量总结出各种图表,进行统计学处理.6。
讨论部分包括实验结果的分析、思考题的探讨、实验设计、实验方法及实验中出现异常现象的分析、认识、体会和建议等.讨论应注意结合中医药理论。
科研报告还可对比前人的实验进行分析,阐明从本实验获得的新发现或尚存在问题。
7.实验结束应及时地整理和总结实验结果,写出报告。
实验报告内容应包括实验名称、目的、原理、材料(包括仪器、药品、动物)、方法、结果、讨论及结论。
科研实验报告还应有前言,说明课题来源及本实验要解决的问题;报告后应附有参考文献。
二、中药药理实验样品注意事项在进行单味中药或复方中药药理实验时,由于中药不同于西药,多数不是单一化学成分,而是多种成分的综合作用或多种中药的综合作用.因此,在有效成分不明确的情况下,制备药理实验用的中药样品,应注意多种因素的干扰,影响实验结果。
《药理学实验》课件

实验结果
分析药物对炎症反应的抑制作用,探 究药物作用机制,为临床用药提供依 据。
04
药理学实验的最新进展
高通量药物筛选技术
高通量药物筛选技术是一种高效、自动化的药物筛选方法,通过同时测试大量化合 物来发现具有潜在治疗作用的候选药物。
该技术利用高灵敏度检测系统和自动化设备,在短时间内对大量化合物进行筛选, 大大提高了药物发现的效率。
实验结果
分析药物对中枢神经系统的抑 制作用,探究药物作用机制,
为临床用药提供依据。
利尿药的实验研究
总结词
通过观察利尿药对动物排尿量和电解质 平衡的影响,评估药物的利尿效果和安
全性。
实验方法
给动物不同剂量的药物,收集尿液并 检测尿量、尿电解质等指标,评估利
尿效果。
实验动物
常用大鼠作为实验对象,观察药物对 动物排尿量、尿电解质成分及肾功能 的影响。
实验操作的安全规范
01
实验前的安全评估
对实验过程进行安全评估,识别 潜在的安全风险和隐患,并采取 相应的预防措施。
02
03
个人防护措施
危险品管理
实验人员应穿戴适当的防护服、 护目镜、手套等个人防护用品, 以降低意外伤害的风险。
对危险品进行严格管理,确保储 存、使用和处理过程的安全可控 。
实验废弃物的处理与环保要求
给பைடு நூலகம்方法
根据实验要求和药品性质,选择适当的给药途径和方法,如灌胃、注射、口服等 ,确保药物能够有效地进入动物体内。
实验数据的记录与处理
数据记录
在实验过程中,及时、准确记录各项实验数据,包括动物体 重、给药剂量、反应情况等,确保数据的完整性和准确性。
数据处理
对实验数据进行整理、统计和分析,运用适当的统计学方法 ,得出科学、可靠的结论,为进一步的药理学研究提供依据 。
药理学精讲讲义(打印版仅24页12页)

绪言一、药理学性质和任务药理学:研究药物与机体(包括病原体)相互作用的规律和机制;连接药学和医学、基础医学和临床医学的桥梁。
任务:阐明药物有何作用、作用如何产生、药物在体内变化规律分类:药物效应动力学(药效学)、药物代谢动力学(药动学)临床前药理学(研究对象为动物)、临床药理学(研究对象为人)二、药理学发展发展起步较早,尤其指传统医学。
三、学习方法1、基本概念、基本理论、作用机制2、掌握代表性药物,熟悉同类药物,并能比较异同。
3、临床常用新药药物代谢动力学第一节药物的体内过程一、药物跨膜转运(一)被动转运从高浓度的一侧向低浓度的一侧扩散转运的过程。
多数药物属于被动转运。
分子量小、脂溶性大、极性小、非解离型的药易通过生物膜转运,反之难跨膜转运。
特点:不需要载体,不消耗能量,无饱和现象,无竞争性抑制1.简单扩散药物在体液中解离,以离子型和分子型同时存在。
药物常以未解离的分子型通过细胞膜,离子不易通过细胞膜。
药物解离度取决于取决于pKa和介质pH。
弱酸性药物易在胃中吸收;弱碱性药物易在小肠内吸收;完全离子化药物吸收不完全2.滤过:分子粒径小于膜孔,不带电荷(二)载体介导的转运1.主动转运:是一种逆浓度(或电位)差的转运。
与正常代谢物相似的药物,如5-氟尿嘧啶、甲基多巴等特点:需要载体,消耗能量,有饱和现象和竞争性抑制。
2.易化扩散:如葡萄糖的吸收特点:需要载体,不消耗能量,顺浓度梯度。
3.膜泡运输:内吞、外排二、药物的吸收定义:药物经血管外给药从给药部位进入血液循环的转运过程。
生物利用度――――影响吸收的因素:药物性质、给药途径剂型、机体状况(一)胃肠道给药1.口服:最常用的给药途径,安全方便,经济。
小肠是主要吸收部位。
缺点:吸收缓慢,影响因素多。
影响因素较多:溶解度、pH、首关消除。
首过消除:药物进入体循环之前,首先在胃肠道或肝脏被灭活,进入体循环量减少。
不宜口服:①刺激性大或首过消除;②病人昏迷不能吞咽;③不易吸收或易破坏;④必须注射才能达到疗效。
(整理)《药理学》实验讲义.

(整理)《药理学》实验讲义.《药理学》实验讲义实验一药理学实验的基本知识和基本技术一、目的1. 掌握基本操作,锻炼动手、动脑能力;2. 更好地掌握药理学基本理论知识;3. 培养科学思维二、基本要求1. 实验前:预习实验内容并复习相关理论知识;2. 实验时⑴实验器材要妥善保管;⑵实验操作按步骤进行,仔细观察实验中出现的现象,实事求是地做好记录;⑶注意节约实验药品;⑷维持良好的课堂纪律。
3. 实验后⑴各组同学将实验动物处死,实验台擦干净,将实验方盘送回准备室;⑵值日生搞好实验室卫生,将死亡动物送至指定场所;⑶书写实验报告。
三、实验报告的书写1. 题目2. 目的3. 原理4. 材料:实验动物,器材,药品5. 方法:用自己的语言简单扼要描述出来;6. 结果:要求真实、清楚;7. 讨论:将实验结果进行比较、分析;实验中有哪些不足之处;结果异常或失败的原因;8. 结论:将实验结果进行归纳总结,应带有提示性质。
四、药理学实验实验设计原则1.随机原则按照机遇均等的原则进行分组。
其目的是使一切干扰因素造成的实验误差减少,而不受实验者主观因素或其他偏性误差的影响。
2.对照原则空白对照(指在不加任何处理的条件下进行观察对照);阴性对照也称假处理对照(给予生理盐水或不含药物的溶媒);阳性对照也称标准对照(指以已知经典药物在标准条件下与实验药进行对照)。
3.重复原则能在类似的条件下,把实验结果重复出来,才能算是可靠的实验,重复实验除增加可靠性外,也可以了解实验变异情况。
五、实验动物1. 动物的选择(1)小白鼠:适用于需大量动物的实验,如某些药物的筛选,半数致死量的测定。
也较适用于避孕药实验、抗炎镇痛药实验、中枢神经系统药实验、抗肿瘤药及抗衰老药实验等。
(2)大白鼠:比较适用于抗炎药物实验,血压测定、利胆、利尿药实验,也可用于进行亚急性和慢性毒性实验。
(3)豚鼠:因其对组胺敏感,并易于致敏,故常被选用于抗过敏药、平喘药和抗组胺药的实验。
(整理)药理实验课讲义(药学专业)

药理学实验须知一、明确药理实验的目的要求药理学实验课是药理学教学的一个重要组成部分。
它的目的任务一方面是验证理论,巩固并加强对理论知识的理解;另一方面是通过实验掌握研究药物作用的基本操作方法和技能,培养对科学工作严肃的态度,严肃的方法和严格的要求,培养根据客观实际分析问题和解决问题的能力,为今后进行科学研究,打下初步基础,以便为实现中西医药结合作出贡献。
药理实验包括进行实验操作(有些部分可进行病例讨论)、整理实验结果写出实验报告等环节。
为了提高实验效果,实验前应作好预习,明确本次实验目的、方法步骤和原理,做到心中有数,避免实验中出现忙乱和差错。
实验过程中要在教师指导下加强培养独力操作能力,克服对教师的依赖性。
通过实验操作要求在生理生化实验的基础上掌握固定动物和各种给药方法,掌握剂量换算和麻醉方法,学会观察记录主要生理生化指标,掌握注射器、天平、磅秤、二导生理记录仪、药理生理多用仪及描记装置等用法,掌握离体心脏、肠管、子宫和在体动物血压、呼吸及各系统药物的主要实验方法。
二、作好实验结果的处理药理实验结果有生理记录仪等记录的曲线、测量资料(如血压、心率、瞳孔大小、睡眠时间等测量的数据)和计数资料(如动物死活数、阴性和阳性反应数等数据)等几种。
要如实地准确地对观察到的数据及时加以记录,决不可想当然地用主要观想象或书本理论代替实验观察到的客观事实。
实验完毕对结果分别加以整理。
记录曲线要加以剪裁。
注明动物性别、体重、日期、实验题目、给药剂量等。
计数资料和测量资料应酌情列表或画图以便比较,使结果一目了解。
三、写好实验报告写实验报告是培养文字表达能力和概括综合分析问题能力的重要训练方法。
每次实验后要求用统—实验报告本写好报告,交负责教师评阅。
在实验报告中要求列出实验题目、实验方法和实验结果。
有时要对实验结果产生的原理或对实验结果异常的原因略加讨论。
讨论不可离开实验结果去抄书。
实验指导所列思考题或讨论题是为加深对实验的理解,如果与实验结果无关,不必写入实验报告。
药理学实验讲解

鼠号
给药方法
麻醉开始时间
麻醉维持时间 麻醉深度
[讨论] 为什么会有不同的结果?
肝、肾功能对药物作用的影响
[实验目的] 观察肝功能、肾功能损伤后对药物作用的影响。 [实验材料] 小鼠、四氯化碳、氯化汞、戊巴比妥钠、硫酸链
霉素 [实验方法] 1、肝功能对药物作用的影响
取体重近似正常的小鼠及损坏肝脏的小鼠(实验前24 小时皮下注射四氯化碳0.1ml/10g),分别腹腔注0.2%戊 巴比妥钠0.1ml/10g,记录并比较两组小鼠麻醉持续时间有 何差别?
翻正反射情况,然后用0.3%戊巴比妥钠溶液0.1ml/10g的量以不同途径给药,甲鼠灌 胃,乙鼠皮下注射,丙鼠腹腔注射。观察小白鼠用药后的反应及活动情况,以翻正 反射消失时作为麻醉开始指标。记录麻醉开始时间(从给药至翻正反射消失的时 间),麻醉维持时间(即从翻正反射消失至翻正反射恢复的时间),麻醉深度有何 不同(用镊子夹其后肢看其反应)。 [记录]
(自幽门至回盲部)的全长,计算每只小鼠炭末的移动距离占小肠全长百分率,比较3组
动物的活动状况和胃肠炭末推进率有何不同。
炭末推进率计算公式:
炭末的移动距离(cm)
小肠推进率 =
×100%
小肠全长(cm)
[记录]
鼠号 体重(g) 药物及剂量 给药途径 动物反应 炭末推进率(%)
A
B
C
二、灌胃、皮下注射、腹腔注射戊巴比妥钠的效应比较 取体重相近的小白鼠3只,称其体重分别放入钟罩内,观察它们的正常活动及
实验方法
• 2、肾功能对药物作用的影响 取正常小白鼠和肾功能已被破坏的小白鼠(实验前
24小时腹腔注射0.1%氯化高氯化汞 )各2只,称其体重, 分别腹腔注射3%的硫酸链霉素 0.15ml/10g,观察小鼠的 活动情况,比较两只小鼠有何不同?
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2014《药理学》实验讲义《药理学》实验讲义实验一药理学实验的基本知识和基本技术一、目的1. 掌握基本操作,锻炼动手、动脑能力;2. 更好地掌握药理学基本理论知识;3. 培养科学思维二、基本要求1. 实验前:预习实验内容并复习相关理论知识;2. 实验时⑴实验器材要妥善保管;⑵实验操作按步骤进行,仔细观察实验中出现的现象,实事求是地做好记录;⑶注意节约实验药品;⑷维持良好的课堂纪律。
3. 实验后⑴各组同学将实验动物处死,实验台擦干净,将实验方盘送回准备室;⑵值日生搞好实验室卫生,将死亡动物送至指定场所;⑶书写实验报告。
三、实验报告的书写1. 题目2. 目的3. 原理4. 材料:实验动物,器材,药品5. 方法:用自己的语言简单扼要描述出来;6. 结果:要求真实、清楚;7. 讨论:将实验结果进行比较、分析;实验中有哪些不足之处;结果异常或失败的原因;8. 结论:将实验结果进行归纳总结,应带有提示性质。
四、药理学实验实验设计原则1.随机原则按照机遇均等的原则进行分组。
其目的是使一切干扰因素造成的实验误差减少,而不受实验者主观因素或其他偏性误差的影响。
2.对照原则空白对照(指在不加任何处理的条件下进行观察对照);阴性对照也称假处理对照(给予生理盐水或不含药物的溶媒);阳性对照也称标准对照(指以已知经典药物在标准条件下与实验药进行对照)。
3.重复原则能在类似的条件下,把实验结果重复出来,才能算是可靠的实验,重复实验除增加可靠性外,也可以了解实验变异情况。
五、实验动物1. 动物的选择(1)小白鼠:适用于需大量动物的实验,如某些药物的筛选,半数致死量的测定。
也较适用于避孕药实验、抗炎镇痛药实验、中枢神经系统药实验、抗肿瘤药及抗衰老药实验等。
(2)大白鼠:比较适用于抗炎药物实验,血压测定、利胆、利尿药实验,也可用于进行亚急性和慢性毒性实验。
(3)豚鼠:因其对组胺敏感,并易于致敏,故常被选用于抗过敏药、平喘药和抗组胺药的实验。
也常用于离体心脏、心房、肠管实验。
又因它对结核敏感,常用于抗结核病药的实验。
(4)家兔:常用于观察研究脑电生理作用,药物对小肠的作用。
由于家兔体温变化敏感,也常用于体温实验,用于热原检查。
(5)狗:狗是记录血压,呼吸最常用的大动物。
还可利用狗做成胃瘘、肠瘘,以观察药物对胃肠蠕动和分泌的影响。
在进行慢性毒性实验时,也常采用狗。
2. 实验动物的编号狗、兔等较大的动物可用特制的铝质号码牌固定在颈部或耳上。
大鼠、小鼠如为白色可用黄色苦味酸在不同的体表标志上标记。
3. 动物固定及给药(1)小鼠捉拿小鼠性情较温顺,一般不会咬人,比较容易抓取固定。
通常用右手提起小鼠尾巴将其放在鼠笼盖或其它粗糙表面上,在小鼠向前挣扎爬行时,用左手拇指和食指捏住其双耳及颈部皮肤,将小鼠置于左手掌心、无名指和小指夹其背部皮肤和尾部,即可将小鼠完全固定。
在一些特殊的实验中,如进行尾静脉注射时,可使用特殊的固定装置进行固定,如尾静脉注射架或专用小鼠固定筒。
如要进行手术或心脏采血应先行麻醉再操作,如进行解剖实验则必须先行无痛处死后再进行。
(2)小鼠灌胃用左手固定鼠,右手持灌胃器,将灌胃针从鼠的口腔插入,压迫鼠的头部,使口腔与食道成一直线,将灌胃针沿咽后壁慢慢插入食道,可感到轻微的阻力,此时可略改变一下灌胃针方向,以刺激引起吞咽动作,顺势将药液注入。
一般灌胃针插入小鼠深度为3~4cm,大鼠或豚鼠为4~6cm。
常用灌胃量小鼠为0.2~1ml,大鼠1~4ml,豚鼠1~5ml。
(3)小鼠腹腔注射先将动物固定,腹部用酒精棉球擦试消毒,然后在左或右侧腹部将针头刺入皮下,沿皮下向前推进约0.5 厘米,再使针头与皮肤呈45 度角方向穿过腹肌刺入腹腔,此时有落空感,回抽无肠液、尿液后,缓缓推入药液。
此法大小鼠用的较多。
(4)皮下注射注射时用左手拇指及食指轻轻捏起皮肤,右手持注射器将针头刺入,固定后即可进行注射。
一般小鼠在背部或前肢腋下,大鼠在背部或侧下腹部;豚鼠在后大腿内侧、背部等脂肪少的部位;兔在背部或耳根部注射;蛙可在脊背部淋巴囊注射;狗多在大腿外侧注射,拔针时,轻按针孔片刻,防药液逸(5)家兔捉拿右手握住兔颈背部皮肤轻轻提起,再以左手托起其臂部,使兔呈坐位姿势。
(6)家兔耳缘静脉注射采用外耳缘静脉,因其表浅易固定。
注射部位除毛,用75%的酒精消毒,手指轻弹兔耳,使静脉充盈,左手食指和中指夹住静脉的近心端,拇指绷紧静脉的远心端,无名指及小指垫在下面,右手持注射器,尽量从静脉的远端刺入血管,移动拇指于针头上以固定,放开食、中指,将药液注入,然后拔出针头,用手压迫针眼片刻以止血。
实验二影响药物效应的因素(给药途径) [目的] 观察药物从不同途径引入机体可能产生不同的作用;观察不同给药途径对药物作用速度、强度的影响。
[原理]①肌肉注射或静脉注射对中枢神经系统抑制、解痉。
镁离子抑制运动神经末梢对乙酰胆碱的释放,阻断神经和肌肉传导,使骨骼肌松弛,故能有效地预防和控制抽搐(子痫),但是注射过量镁离子会镁因会与钙发生拮抗作用导致乙酰胆碱与钙离子的偶联作用减弱,使心肌细胞兴奋性减弱,从而脑供血不足,而死亡;②口服难以吸收,使肠腔内渗透压升高,大量水分使肠道扩张,使肠壁感受器受到刺激,导致腹泻;[器械] 1ml注射器2支,小白鼠胃管一支,。
[药物]饱和硫酸镁溶液(饱和度为1000ml,水中溶解440g 硫酸镁)。
[动物]小白鼠2只。
[方法]取体重大小相似的小白鼠两只,称好体重,按下面两种途径给药,观察并记录。
①按每10g体重0.2ml作肌肉注射饱和硫酸镁,②用同样剂量灌胃。
[结果] 记录: 将实验结果填入下表。
[思考题]同一种药物以不同途径给药时为什么会影响药物效应?实验三药物的镇痛作用一、目的:了解热板法的实验原理,观察阿司匹林的镇痛作用。
二、原理:小鼠的足底无毛,皮肤裸露,在温度55±0.5℃的金属板上产生疼痛反应,表现为舔后足,踢后腿等现象。
镇痛药可提高痛阈,推迟小鼠疼痛出现时间。
三、材料:雌性小鼠2只、热板仪、0.4%乙酰水杨酸溶液、生理盐水、四、方法:1.准备工作调定热板仪温度使之恒定于55±0.5ºC。
2.小鼠的选择及正常痛阈的测定取小鼠数只,依次热板仪上,按“开始”键记录时间。
自放入热板仪至出现舔后足所需的时间(秒)作为该鼠的痛阈值。
凡在30秒内不舔足或逃避者弃置不用。
取筛选合格的小鼠3只,各鼠编号后重复测其正常痛阈值一次,将所测两次正常痛阈平均值作为该鼠给药前痛阈值。
3.给药及给药后痛阈值测定各组的动物注射下列药品0.1ml/kg,并记录给药时间。
一只用0.4%乙酰水杨酸溶液(400mg/kg);另一只,用生理盐水。
给药后10min、30min后各测小鼠痛阈值1次。
60秒仍无反应,应将小鼠取出,痛阈值以60秒计。
4.实验完毕后,收集全实验室数据按下列公式计算不同时间的各鼠痛阈提高百分率:痛阈提高百分率(%)= 给药后平均痛阈值–给药前平均痛阈值×100%给药前平均痛阈值5.以时间(min)为横坐标,痛阈提高百分率为纵坐标,绘制各组的时-效曲线。
【注意事项】⒈本实验应选用雌性小鼠,雄性小鼠遇热时阴囊松弛下垂,与热板接触影响实验结果。
⒉室温应控制在13±18℃,此温度小鼠对痛反应较稳定。
⒊正常痛阈≥30s、≤10s以及喜跳跃的小鼠均应弃用。
⒋测痛阈时若60s仍无反应,应立即取出小鼠,以免烫伤足趾,且痛阈按60s 计。
实验四药物对小鼠自发活动的影响一、目的:观察药物对小鼠自发活动的影响,以分析药物作用表现为兴奋作用还是抑制作用。
二、原理:自发活动是正常动物的生理特征。
自发活动的多少往往能反映中枢兴奋或抑制作用状态。
镇静催眠药均可明显减少小鼠的自发活动。
小鼠自发活动减少的程度与镇静催眠药作用强度成正比。
三、材料:小鼠2 只小鼠自主活动记录仪、注射器(1ml×2)、天平、4%水合氯醛溶液。
四、方法:取小鼠2只,称体重,分别进行腹腔注射,对照组一只注射生理盐水,另一只注射4%水合氯醛溶液10ml/kg 。
给药30min后将各组小鼠分别放人自主活动箱中,每隔5min记录1次各组小鼠活动数。
连续观察到20min比较给药组与对照组小鼠活动数,用公式计算各给药组小鼠20min累计自发活动抑制率:对照组小鼠自发活动数-给药组小鼠自发活动数自发活动抑制率=×100%对照组小鼠自发活动数【注意事项】⒈小鼠应尽量选取活泼者,同性。
⒉实验前禁食禁水24h。
⒊实验最好在20℃以上室温下进行,室温过低常影响小白鼠活动。
⒋实验最好在上午做,以为小鼠的活动通常在中午及下午减少。
实验五药物半数致死量(LD50)的测定一、实验目的和原理掌握药物半数致死量(LD50)的测定方法;掌握简化机率单位法的计算方法;了解急性毒性实验的相关内容及新药安全性评价的内容。
药物的急性毒性常以LD50来表示,即能够引起试验动物—半死亡的剂量。
在实验设计合理并严格掌握实验技术的条件下,药物致死量的对数大多在半数致死量的上下形成常态分布。
通过计算可求出LD50。
本实验了解药物(以水合氯醛为例)引起一半动物死亡的药物剂量(median lethal dose, LD50)的测定方法和计算过程。
二、实验方法(一)探索剂量范围取小鼠9~12只,以3只为一组,分成3~4组,包括组距较大的一系列剂量,按组分别灌胃水合氯醛溶液,观察出现的症状并记录死亡数,找出引起0及100%死亡率剂量的所在范围,此即上下限剂量Dm及 Dn)。
(二)确定组数并计算各组剂量1. 确定组数(G):可根据适宜的组距确定组数,一般用5~8个剂量组,按等比级数增减。
2. 计算各组剂量:在找出Dm、Dn和确定组数后,可按下列公式求出公比r (r = lg-1[(lgDm-lgDn)/(G-l)],再按公比计算各组剂量D1~Dm,其中D1=Dn=最小剂量。
3. 配制等比稀释药液系列,使每只小鼠给药容量相等,一般为0.l ~0.25 ml/10 g体重。
(三)进行正式实验在预实验所获得的0%和100%致死量范围内,选用几个剂量,尽可能使半数组的死亡率都在50%以上,另半数组的死亡率都在50%以下。
各组动物的只数应相等或相差无几,每组10只左右,动物的体重和性别要均匀分配。
完成动物分组和剂量计算后,按组腹腔注射给药。
最好先从中剂量组开始,以便能从最初几组动物接受药物后的反应来判断两端的剂量是否合适,否则可随时进行调整。
(四)统计实验结果给药后经一定时间,清点各组的死亡小鼠数。
用改良寇氏法计算药物的LD50。
公式为LD50=lg-1[lgDm–lgr(∑P–0.5)]四、实验结果要点:实验日期、检品的批号、规格、厂名、理化性状、溶液的浓度、实验时室温、小鼠的性别、体重、给药途径、剂量(药物的绝对量与溶液的容时量)、给药时间、中毒症状、死亡时间、死亡率和LD50的计算过程。