生物药物分析知识点总结资料

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生物药物分析期末总结范文

生物药物分析期末总结范文

生物药物分析期末总结范文生物药物分析是现代生物技术的重要组成部分,涉及到药物研发、生产、质量控制等方面。

本文将从生物药物分析的基本原理、常用分析方法、质量控制和挑战等方面进行总结。

一、基本原理生物药物是以生物制剂为基础的药物,包括蛋白质药物、抗体药物、基因工程药物等。

生物药物分析的基本原理是基于这些药物的特性和作用机制,通过各种分析方法对其进行定性定量分析。

1.蛋白质药物分析蛋白质药物通常是通过重组DNA技术等方法制备的,其分析主要涉及到蛋白质表达、纯化、结构和功能等方面的研究。

常用的分析方法包括:基于质谱的蛋白质定量分析、免疫学方法、生物活性检测等。

2.抗体药物分析抗体药物是指基于抗体的药物,广泛应用于肿瘤治疗等领域。

抗体药物的分析方法包括免疫学方法、结构分析、生物活性检测等。

其中,流式细胞术、ELISA、Western blotting等是常用的抗体药物分析方法。

3.基因工程药物分析基因工程药物是指基于基因工程技术制备的药物,主要包括基因疗法、基因工程疫苗等。

基因工程药物的分析方法主要包括基因的表达、载体的转染、基因传递效率的测定等。

二、常用分析方法生物药物分析涉及到多种分析方法,常用的分析方法包括物理化学方法、免疫学方法、分子生物学方法等。

1.物理化学方法物理化学方法主要用于药物的理化性质研究和分析。

其中,红外光谱、紫外-可见光谱、荧光光谱等用于药物的结构表征和纯度检测;高效液相色谱、气相色谱等用于药物成分分离和纯化。

此外,还有核磁共振、电泳、质谱等方法。

2.免疫学方法免疫学方法是生物药物分析中常用的方法之一,包括免疫印迹、酶联免疫吸附实验、荧光免疫测定等。

这些方法主要用于检测药物中的蛋白质、抗体等成分。

3.分子生物学方法分子生物学方法主要用于药物的基因表达、结构和功能研究。

常用的方法包括PCR、RT-PCR、DNA测序、基因克隆等。

这些方法可以用于药物的生物合成、基因表达、突变检测等。

三、质量控制生物药物分析中,质量控制是非常重要的一环。

生物药物分析

生物药物分析

1.什么是生物药物?生物药物是利用生物体、生物组织或组成生物体的各种成分,综合应用多门学科的原理和方法,特别是市采用现代生物技术,进行加工、制造而成的一大类用于预防、治疗以及诊断疾病的药物。

2.药典的主要内容?药典的内容分为凡例、通则、附录和索引四部分3.生物药物分析与检验的基本程序?取样、鉴别、检查、含量测定、写出检查报告4.酶分析法包括两种类型:酶法分析、酶活力测定5.酶活力的测定方法?取样测定法、连续测定法、酶偶联测定法6.酶活力单位:在特定条件下(温度可采用25ºC,pH值诸条件均采用最适条件),1min催化1µmol的底物转化产物的酶量定义为1个酶活力单位,这个单位称为国际单位(IU)。

7.酶活力是指酶催化某一化学反应的能力8.KM值表示酶与底物之间的亲和程度9.KM值大表示亲和程度小,酶的催化活性低10.KM值小表示亲和程度大,酶的催化活性低11.以脱氢酶为指示剂。

用来作为偶联指示剂的酶中应用最广泛的是以NAD或NADP为辅酶的脱氢酶类12.酶偶联反应指示剂分类以脱氢酶为指示剂以脱氢酶以外的酶为指示剂13.14.根据测定原理,酶法分析可分为终点法与反应速度法两大类15.应用终点测定法一般必须满足什么条件?第一、必须有专一地作用该被测物质的酶,并能得到它的制品第二、能够确定使这种酶反应接近进行完全的条件第三、反应中底物的减少、产物的增加、辅酶物质的改变等可借助某种简便的方法进行测定16.免疫分析法特点特异性、可逆性、比例性、反应阶段性、(可展开)17.载体效应初次与再次免疫是,只有使用半抗原结合在同一载体上,才能产生办抗原的再次免疫应答18.单克隆抗体由单个B淋巴细胞经过无性繁殖克隆,形成基因型相同的细胞群,这一细胞群所产生的针对抗原单个表位的均一性的抗体19.酶联免疫吸附分析法采用抗原与抗体的特异反应将待测物与酶连接(关联),然后通过酶与底物产生颜色反应,对受检物质进行定性或定量分析20.酶联反应三种必要试剂(1)固相的抗原或抗体(免疫吸附剂)(2)酶标记的抗原或抗体(标记物)(3)酶作用的底物(显色剂)12.包被目的封闭21.酶联试验中,目前最常用的酶是辣根过氧化物酶,其次是碱性磷酸酶22.ELISA操作步骤1.包被将特异抗体包被在酶标板↑2.封闭:不相关蛋白3.加样品4.加酶标抗体5.显色6.检测23.影响迁移率的因素(1)带电颗粒的性质(2)缓冲液的性质(3)电场强度(4)电渗作用(5)支持介质14.免疫电泳免疫电泳是一种将区带电泳双向免疫扩散相结合的免疫化学分析技术15火箭电泳单向免疫扩散和区带电泳相结合的定量检测技术16.对流免疫电泳原理定向加速度的免疫双向扩散技术17.电渗流作用(1)可一次完成阳离子、阴离子、中性粒子的分离(2)改变点渗流的大小和方向,可改变分离效率和选择性,也是CE与HPLC相比能优化分离的重要因素(3)电渗流的微小变化影响结果的重要性,控制电渗流恒定是CE分析关键所在(4)电渗流在CE中起到像HPLC中泵一样作用18.离子出峰速率正离子》中性分子》负离子19.生物检定生物检定属生物法分析,是利用药物对生物体(整体动物、离体组织、微生物等)的作用以测定其效价或生物活性的一种方法19.质反应当一定剂量的药物注入动物体内后,观察某一反应或反应的某一特定程度出现与否,例如死或不死,惊厥或不惊厥20.量反应药物对生物体所引起的反应随着药物剂量的增加产生的量变可以测量者,称为量反应21.抗生素的微生物检定法稀释法、比浊法、琼脂扩散法(管碟法和打孔法)22.琼脂扩散法定义琼脂扩散法,亦称管碟法,是利用抗生素在琼脂培养基内的扩散作用,采用量反应平行线原理的设计,比较标准品与供试品两者对接种的试验菌产生抑菌圈的大小,以测定供试品效价的一种方法23.琼脂扩散法的原理抑菌圈的形成,两种互动作用,一种是抗生素溶液向培养基内呈球曲状扩散作用,另一种是试验菌的成长作用24.量计量法用标准品,供试品各两个剂量,根据量法宁平行线原理在相同试验条件下,比较标准品和供试品二者对微生物产生的效力。

生物药学知识点总结初中

生物药学知识点总结初中

生物药学知识点总结初中生物药学的重要概念和原理有很多,我将从生物药物的制备与生物利用度、贮存与转运、药物评价、剂型设计等方面进行总结:1.生物药物的制备与生物利用度生物药物的制备是通过生物技术手段在生物体内或外部制备的药物,通常是由质粒、细胞、组织、细胞外液、组织液、动物体等生物体组成。

生物药物主要包括蛋白质类、多肽类、抗体类、核酸类等。

生物药物的制备步骤一般包括:制备目的蛋白、蛋白纯化和结构鉴定、药物载体的构建、遗传转化或基因编辑、选择滤除积累等。

生物药物的生物利用度是指在给药后,药物在体内的吸收、分布、代谢和排泄的过程是否符合预期的药理学要求。

2.贮存与转运生物药物的制备后,需要进行贮存与转运,以保证其稳定性和安全性。

生物药物在制备和转运过程中,容易受到温度、湿度、PH、氧气和光照等因素的影响,因此需要在制备、封装、贮存和转运过程中,采取适当的措施,保证其稳定性和安全性。

3.药物评价药物评价是指通过实验研究和临床试验,评价药物对生物体的作用及其安全性和有效性。

生物药物的评价包括体外评价和体内评价。

体外评价包括生物药物的化学性质、生物性质和药效学评价,包括蛋白质类的表达、纯化和鉴定,抗体类的抗原-抗体反应和生物活性测定等。

体内评价包括动物试验和临床试验。

动物试验包括对动物的干预试验、代谢动力学试验、药效学试验等,临床试验包括药物的安全性和有效性的评价。

4.剂型设计剂型设计是指将生物药物与适宜的辅料配制成所需的制剂形式,以便于给药和提高药物的生物利用度。

生物药物剂型设计的主要内容包括:剂型的选择、药物释放的控制、药物的吸收与分布、剂型的安全性和稳定性。

生物药物剂型的选择应根据药物性质、给药途径及治疗目的等来确定。

剂型的设计应注意药物的释放控制,以便调控药物在体内的释放速度和底片,从而实现治疗的最佳效果。

以上是生物药学的一些知识点总结,涉及了生物药物的制备与生物利用度、贮存与转运、药物评价、剂型设计等方面。

生物药物分析知识点总结

生物药物分析知识点总结

生物药物分析知识点总结1.生物活性分析方法:生物活性分析是衡量药物对生物体的活性以及药物作用机制的重要手段。

常见的生物活性分析方法包括酶活性分析、细胞毒性测定、动物试验等。

2.蛋白质质量分析方法:蛋白质质量分析是研究蛋白质的分子量、构象以及组成的重要手段。

常见的蛋白质质量分析方法包括质谱分析、SDS-等。

3.分离与纯化方法:生物制剂通常具有复杂的成分,需要进行分离和纯化才能进行进一步的分析。

常见的生物分离与纯化方法包括色谱技术(如层析、高效液相色谱等)、电泳技术(如凝胶电泳等)等。

4.基因检测与基因表达分析:基因检测是通过检测DNA中的特定序列来确定基因型,用于诊断疾病、基因治疗等。

基因表达分析是研究基因在细胞或组织中的表达水平以及调控机制的方法。

5.免疫学分析方法:免疫学分析方法是通过检测抗原与抗体的相互作用来进行分析。

常见的免疫学分析方法包括免疫沉淀、ELISA、西方印迹等。

6.稳定性分析:生物药物在储存、运输和使用过程中可能受到温度、湿度、光照等因素的影响而失去活性。

稳定性分析是评价生物药物在不同条件下的稳定性的方法。

7.药物相互作用分析:药物相互作用分析是研究生物药物与其他药物之间的相互作用及其可能产生的影响的方法。

常见的药物相互作用分析方法包括体外药物相互作用实验、药代动力学分析等。

8.药代动力学分析:药代动力学分析是研究药物在体内的吸收、分布、代谢和排泄过程的方法。

常见的药代动力学分析方法包括药物浓度测定、药物代谢动力学参数计算等。

9.毒理学评价:生物药物上市前需要进行毒理学评价,以评估药物的安全性。

常见的毒理学评价方法包括细胞毒性实验、动物实验等。

10.药物质量控制:生物药物的质量控制是保证药物制剂质量稳定的关键。

常见的药物质量控制方法包括药品标准制定、质量检测等。

总之,生物药物分析是研究生物制剂活性成分及其机制的重要方法,在药物研发、质量控制以及临床应用中起着关键作用。

以上所述的知识点是生物药物分析中常见的内容,通过深入学习这些知识点,可以更好地理解和应用生物药物分析技术。

生物药物分析重点完整版

生物药物分析重点完整版

生物药物分析重点完整版生物药物是通过生物技术手段制造的药物,其活性成分是通过生物源来获得的。

与化学合成药物不同,生物药物具有高度的复杂性和多样性,因此对其进行分析至关重要。

下面是生物药物分析的重点内容:1. 蛋白质序列分析:生物药物通常是由蛋白质或多肽组成的,因此确定其氨基酸序列是十分重要的。

这可以通过蛋白质质谱法(Protein Mass Spectrometry)或者核酸测序法(Nucleic Acid Sequencing)来实现。

2.组分分析:生物药物是复杂的混合物,可包含多种不同的成分,例如蛋白质、糖类、脂类等。

对于生物药物的组分分析,可以使用色谱法,如高效液相色谱法(HPLC)或毛细管电泳法(CE)等。

3.纯化与纯度分析:生物药物的纯度对其药效和安全性至关重要。

纯化过程需要将生物药物与所含的杂质进行分离,常用的方法包括亲和层析、离子交换层析和凝胶过滤层析等。

而对于纯度的分析,则可以通过各种色谱方法和电泳分析手段来实现。

4.结构分析:了解生物药物的结构对于评估其功能和作用机制至关重要。

结构分析通常包括二级结构、三级结构和四级结构的测定。

核磁共振(NMR)和X射线晶体学是常用的方法。

5.生物活性分析:生物药物的药效可以通过多种生物活性分析方法进行评估。

这包括细胞培养实验、动物模型和体内药效学实验等。

6.稳定性分析:生物药物往往是不稳定的,并受到多种因素的影响,如温度、光照和pH值等。

稳定性分析可以通过测定样品在不同条件下的变化来评估药物的稳定性。

7.免疫原性分析:生物药物可能会引起免疫反应,导致不良反应。

因此,对于生物药物的免疫原性进行分析十分重要。

这可以通过体内和体外方法,如酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫组化等来实现。

8.品质控制和一致性分析:对于生物药物的品质控制和一致性分析至关重要,以确保其在不同批次和制造过程中的一致性。

这可以通过比较分析、稳定性试验和其他生物学方法来实现。

生物药物分析掌握

生物药物分析掌握

第一章掌握1、生物药物:是利用生物体、生物组织、细胞、体液等,综合应用生物化学、现代生物技术、微生物免疫学和药学等的原理与方法制造的一大类用于预防、诊断、治疗的制品。

2、生物药物的特点:(1)药理学特性(2)在生产、制备中的特殊性(3)检验分析时的特殊性3、生物药物质量检验分析的程序与方法:1、取样2、鉴别试验3、杂质检查4、安全性检查5、含量(效价)测定6、检验报告的书写4、生物药物常用定量分析法(1)酶法(2)电泳法(3)生物检定法(4)理化法第二章掌握1、杂质限量计算及限量检查方法杂质限量:指在不影响药物疗效、稳定性及不发生毒性的前提下,药物中所含杂质的最大允许量。

杂质限量有百分表示(%)和百万分表示(ppm )两种表示方法若用ppm 表示 ①其中V 为对照品体积,C 为对照品浓度,S 为所取供试品量限量检查方法:(1)标准对照法(2)灵敏度法(3)比较法2、毒性试验的内容一种新药或新的制剂,在临床使用前必须经过毒性试验。

一些毒性较大或生产、贮存中易引入毒性物质或分解导致毒性增大的药品制剂,也应进行毒性试验毒性试验包括急性毒性试验、异常毒性试验、长期毒性试验、蓄积毒性试验和特殊毒性试验3、LD5 0的概念及其测定方法的种类LD5 0的概念:测定药物的半数致死量,即半数致死量(50%致死剂量)为引起试验动物半数死亡的药物剂量 常用的有改良寇氏法、简化几率单位法、加权回归法4、掌握蓄积系数的概念和计算蓄积系数:某些药物排泄或代谢速度较慢,重复给药时常出现蓄积毒性蓄积毒性的大小可以用蓄积系数(KC )来表示。

KC 表示分次用药引起动物半数致死的累积总量(LD50C )与一次用药测定的LD50之比。

5、掌握特殊毒性试验的一般程序第二阶段致突变性短期致癌试验动物短期致癌试验哺乳动物培养细胞恶性转化试验基因突变哺乳动物培养细胞基因突变试验果蝇伴性隐性致死试验染色体畸变啮鼠动物显性致死试验精原细胞染色体畸变试验DNA 损伤修复细胞程序外DNA 合成(UDS)试验SOS 显色反应第三阶段动物长期致癌试验第一阶段致突变性生殖毒性微生物回复突变试验(Ames 试验)哺乳动物培养细胞染色体畸变试验啮鼠动物微核试验一般生殖毒性试验动物致畸胎试验围产期毒性实验6、热原检查的原理:热原检查是将一定剂量的供试品,静脉注入家兔体内,在规定时间内,观察家兔体温升高的情况,以判定%100⨯=供试品量允许杂质存在的最大量杂质限量%100⨯⨯=S C V L 610)(⨯⨯=S C V ppm L 5050LD LD K C C =供试品所含热原质的限度是否符合规定的一种方法。

(完整版)生物药物分析重点完整版

(完整版)生物药物分析重点完整版

(完整版)生物药物分析重点完整版第一章绪论1.生物药物分析:是生物工程制药专业设置的一门专业课,是应用微生物学、分子生物学、免疫学、生物化学、有机化学、数学、分析化学、生化工程等学科的理论及其技术成就,检测和研究各种生物药物质量的一门综合性学科。

2.药典:是国家对药物质量标准及其检测方法所做的技术规定,是药物生产、监控、供应、使用及管理部门共同遵循的法令。

3.我国的第一部药典1953年出版,从1963年版开始,中国药典分一、二部,药典内容一般包括凡例、正文、附录、索引四部分,生物药物收载在第三部分。

4. 美国药典—USP英国药典—BP日本药局方—JP英国副药典或英国准药典—BPC国际药典—Ph.Int5.基因工程药物的质量控制规则(暂时未找到)6.生物药物质量的科学管理:(5个)《良好药物实验研究规范》—GLP《良好药品生产规范》—GMP《良好药品供应规范》—GSP《良好药品临床试验规范》—GCP分析工作的质量管理—AQC第二章生物药物的杂质检查1.药物的杂质:(定义)指药物中存在的无治疗作用或影响药物的稳定性和疗效,甚至对人体健康有害的物质。

2.药物中存在的杂质其来源主要有两个:(1)是由生产过程中引入;(2)是贮存过程中受外界条件的影响,引起药物理化性质发生变化而产生。

3.杂质限量:(定义)指药物中所含杂质的最大容许量,它通常不要求准确测定其含量,只要在杂质含量在一定限度内。

4.杂质限量检查法的特点:只需通过与对照液比较即可判断药物中所含杂质量是否符合限量规定,不需测定杂质的准确含量。

5.一般杂质的检查方法在药典附录中加以规定。

一般杂质检查项目有氯化物、硫酸盐、水分、酸、碱、硫化物、硒、氟、氰化物、铁盐、重金属、砷盐、铵盐、易炭化物、干燥失重、炽浊残渣、溶液颜色与澄清度以及有机溶剂残留量等。

氯化物检查法:Cl- ┼Ag+──→AgCl↓原理:药物中微量的氯化物在硝酸酸性条件下与硝酸银反应,生成氯化银的胶体微粒而显白色浑浊,与一定量的标准氯化钠溶液在相同条件下生成的氯化银混浊程度比较,判定供试品中氯化物是否符合限量规定。

生物药学相关知识点总结

生物药学相关知识点总结

生物药学相关知识点总结一、生物药物的定义和分类生物药物是由生物体内分泌的复杂蛋白质、抗体、核酸、细胞等制备而成的药物,它们通过调节体内生物代谢和功能来治疗疾病。

根据其来源和制备方法的不同,生物药物可以分为以下几类:1. 重组蛋白药物:通过基因工程技术,将人类基因和真菌、细菌或哺乳动物细胞中的DNA 相结合,合成所需的蛋白质。

如生长激素、干扰素、免疫球蛋白等。

2. 生物类似物和生物等效药物:是指与已上市的生物药物在临床应用上具有相似疗效和安全性的制剂。

这类药物需要进行临床试验,才能被批准上市。

3. 把人类组织或动物组织分离、纯化及灭活的制剂:如疫苗、血液制品、酶制剂。

4. 基因治疗:是通过直接或间接引人外源基因来治疗某些遗传疾病和疾病的形成。

二、生物药物制备与技术生物药物的制备技术主要包括基因工程技术、克隆技术、蛋白质纯化技术、细胞培养技术等。

其中,基因工程技术是生物药物制备的核心技术,通过对细菌、真菌或哺乳动物细胞进行转染,将外源基因导入细胞内,使其产生所需的蛋白质。

蛋白质纯化技术则是将蛋白质从细胞培养液中分离出来,去除杂质并提高纯度。

细胞培养技术是生物药物制备中的重要环节,通常会选择真菌、细菌或哺乳动物细胞作为生物药物的生产细胞。

通过对细胞培养条件的优化和控制,可以提高生产菌株的产量和纯度。

除了以上技术外,生物药物的制备还涉及到疫苗制备技术、抗体工程技术、基因治疗技术等。

三、生物药物的质量控制生物药物的质量控制是保证生物药物的安全性、有效性和稳定性的重要环节。

生物药物的质量控制主要包括以下几个方面:1. 原料药物的质量控制:原料药物是生物药物制备过程中的重要原材料,其质量直接影响到最终制剂的质量。

因此,对原料药物进行全面的质量控制是非常重要的。

2. 产品的质量控制:包括蛋白质的纯度、活性、稳定性等指标的监测和检测。

3. 生物药物的稳定性研究:生物药物在制剂中的稳定性是一个重要的质量指标,需要进行加速稳定性研究和长期稳定性研究,以确保产品的稳定性和一致性。

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生物药物分析知识点总结题库一1、什么是药物?药物是指用于预防、治疗、诊断人的疾病,有目的地调节人的生理功能并规定有适应证和用法、用量的物质。

2、药物的学科包括哪些?药物分析(pharmacenticalanalysis)、药理学(pharmacology)、药剂学(pharmaceutics)、药物化学(pharmacentical chemistry)3、什么是生物药物?生物药物是利用生物体,生物组织或组成生物体的各种成分,综合应用多门学科的原理和方法,特别是采用现代生物技术,进行加工、制造而形成的一大类用于预防、治疗和诊断的药物。

广义的生物药物包括:(1)从动植物和微生物中直接提取的各种天然生理活性物质;(2)人工合成或半合成的天然物质类似物。

4、生物药物的性质(Properties of biological)(1)结构相近;(2)药理有效;(3)医疗效果好;(4)浓度低,杂质高;(5)大分子稳定;(6)有一定的敏感性(对热、重金属、酸碱和ph变化等敏感)5、药典的定义?药典的简称、版本、三部和内容?(1)定义:记载着各种药品标准和规格的国家法典,是国家管理药品生产与质量的依据,一般由一个国家的卫生行政部门主持编写、实施颁布。

(2)简称:Ch.P(3)版本:1953、1963、1977、1985、1990、1995、2000、2005、2010 (4)三部:中药、化学药、生物制品。

(5)内容:凡例,正文,附录,索引。

6、什么是ADME?各代表什么单词?ADME:药代动力学;A:吸收(absorption);D:分布(distribution);M:代谢(metabolism);E:排泄(excretion)题库二1、标准物质的定义标准物质是一种或多种确定了高稳定度的物理、化学和计量学特性,并经正式批准,可作为标准使用,用来校准测量器具、评价分析方法或给材料赋值的物质或材料。

包括化学成分分析标准物质、物理性质与物理化学特性测量标准物质,工程技术特性测量标准物质。

2、精密度控制图及准确度控制图的上下警告限及上下控制限是怎样定义的?(1)精密控制图,即均值控制图。

以测定结果的平均值X为控制图的中心线,并计算出测量值的标准偏差S,以X ±2S作为上下警告限,用虚线表示;X±3S作为上下控制限绘成。

(上警告限:UWL,下警告限:LWL,上控制限:UCL,下控制限:LCL)(2)准确控制图,也称回收率控制图,向不同浓度的样品中加入不同的已知量的标准物,积累测得的回收率数据,计算百分平均回收率品p及其标准偏差sp,以p±2sp为上下警告限,p±3sp为上下控制限。

3、计量、认证、标准化及质量管理的英文计量:measurement认证:accreditation标准化:standardization质量管理:Quality Management QM4、药物分析论文的发表包括那几个项目?题目、作者姓名和所在单位、摘要、关键词、引言或前言、材料与方法、结果、讨论、小结或结论、参考文献5、分析方法验证的内容包括哪十项?准确度、精密度、专属性、检验限LOD 、定量限LOQ 、线性、范围、耐用性、稳定性、其他考核指标(对免疫分析的特殊考虑、药物代谢物的分析、药物立体异构体的分析、萃取回收率)6、QbD是什么?质量源于设计(quality by design,QbD)定义是:在可靠的科学和质量风险管理基础之上的,预先定义好目标并强调对产品与工艺的理解及工艺控制的一个系统的研究方法。

题库三1、什么是酶法分析?以酶作为分析工具或分析试剂,用以测定样品中用一般化学方法难以检测的物质,这些物质可以是酶的底物,也可以是酶的抑制剂或辅助因子,通常将这类方法称为酶法分析。

2、什么是酶活力测定?以酶作为分析对象,根据需要对样品进行酶含量或活力测定,这类分析方法称为酶活力测定。

3、酶活力单位如何定义?酶活力单位是指在25℃下,以最适的底物浓度,最适的缓冲液离子强度,最适的PH值等条件下,每分钟能转化一个微摩尔底物的酶量作为一个活力单位。

4、酶活力测定的方法有哪些?取样测定法、连续测定法、旋光度法、酶偶联测定法、其他测定方法(电化学测定法、离子选择性电极测定法、放射化学法)5、酶法分析可分为哪两种方法?终点测定法、反应速度法6、一个比色杯中测定苯酮酸、磷酸烯醇式丙酮酸(PEP)和D-2-磷酸甘油酸(D-2-PGA)的定量测定问题D-2-PGA ↔ (条件是:烯醇化酶)PEPPEP+ADP ↔(条件是:丙酮酸激酶)丙酮酸+ATP丙酮酸+NADH+氢离子↔(条件是乳酸脱氢酶)乳酸+NAD+对于丙酮酸、DEP和D-2-PGA共存的混合液,用LDH作用时,由于LDH反应定量向右进行,根据340nm吸收度的减少算出丙酮酸的量,向反应液中加入丙酮酸激酶,使丙酮酸激酶反应与LDH反应成偶联反应,则NADH的减少和PEPD的增加成正比,向该反应液中进一步加入烯醇化酶,使烯醇化酶反应与丙酮酸激酶及LDH偶联,则此时NADH减少与D-2-PGA的量成比例,这样,在一个比色皿中能依次进行丙酮酸、PEP和D-2-PGA的测量。

题库四1、什么是免疫分析法?以特异性抗原-抗体反应为基础的分析方法。

2、免疫原性、抗原特异性、全抗原、半抗原的定义。

免疫原性:指当被注射入适合的动物体内后,能促使动物产生循环性抗体或改变免疫细胞的反应性。

抗原特异性:指具有能与特异性抗体作用的性质。

全抗原:同时具有免疫原性与抗原特异性的物质。

半抗原:只能与特殊抗体作用但不引起机体免疫应答的简单分子。

3、半抗原的选择原则。

○1抗原结构中最好具有芳香结构;○2应考虑抗原-抗体反应的微环境;○3合理的利用分子类似物间的交叉反应。

4、抗体的种类。

常规免疫血清(多克隆抗体)、单克隆抗体。

5、获得抗血清的步骤。

○1免疫原的制备;○2动物免疫;○3试血及效价测定;○4免疫动物血液的采集及抗血清的分离6、抗体纯化的方法。

(1)非专一法(化学方法),提纯或浓缩某一类的免疫球蛋白(2)专一法,利用免疫吸附剂和亲和色谱的方法得到免疫学上专一性的抗体。

7、效价是什么?效价(titer):又叫滴度,指某一物质与一定容量的另一物质反应所需要的量。

8、免疫分析法有哪几种?(1)均相免疫分析体系:放射免疫分析法(RIA)、荧光免疫分析法(FIA,包括:荧光淬灭法、荧光增强法、荧光偏振法、时间分辨荧光免疫分析法等)、克隆酶给予体免疫分析法(2)液-固免疫分析体系:酶联免疫分析法(ELISA)、免疫亲和色谱法、免疫传感技术9、ELISA的英文全称?实验步骤为?(1)ELISA:Enzyme-linkedimmunosorbent assay(2)步骤:包被;洗涤;与特异性抗体反应;与酶联抗体反应;显色与测定10、免疫扩散法的种类?双向扩散、单向扩散、单向简单扩散、简单辐射扩散题库五1、一共介绍了多少种电泳方法?纸电泳法;醋酸纤维素薄膜电泳法;琼脂糖凝胶电泳法;聚丙烯酰胺凝胶电泳法;SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳;高效毛细管电泳法2、什么是毛细管电泳法?英文全称是什么?(1)以弹性石英毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,依据样品中各组分的之间的淌度和分配行为上的差异而实现分离的分析方法。

(2)英文:high performance capillary electrophoresis ,HPCE;题库六1、高效液相色谱仪有哪几部分组成?输液泵;进样器;色谱柱;检测器和数据处理器;2、对于一个色谱图来说,h、W、Wh/2、A、tg、VR都代表什么?h:峰高:指峰最高点到峰底的垂直距离W:峰宽:指峰两侧拐点处所做的两条切线与基线的两个交点间的距离Wh/2:半峰宽:峰高一半时的峰宽A:峰面积:指峰和峰底所包围的峰面积tR:保留时间:指样品通过色谱柱所需要的时间,即从进样开始到柱后出现组分浓度极大值所需要的时间VR:保留体积:指从进样开始到柱后被测组分出现浓度最大值时流出的溶剂的总体积3、提高分离度有几种方式?增加选择性α;增加理论塔板数N;改变容量因子k4、Van Deemter方程是什么?各代表什么样的含义?H=A+B/u+CuA:涡流扩散项;B:分子扩散系数;C:传质阻力系数;u:流动相线速度5、什么是外标法?什么是内标法?各自的优缺点是什么?(1)外标法:分别进一固定量的样品溶液和标准溶液,测得色谱图后,样品溶液的浓度用样品峰和标准峰的直接面积比进行计算样品浓度=样品峰面积/标准品峰面积×标准品浓度优点:方法简单缺点:要求严格控制实验条件,精密度不高(2)内标法:用一已知量的纯物质作为内标物,加至准确称重的样品和标准品进行HPLC测定的方法,即为内标法样品浓度=样品面积比/标准面积比×标准品浓度面积比=样品峰面积/内标峰面积优点:精密度高缺点:操作程序比较麻烦,内标物比较难找题库七1、翻译生色团、助色团、深色位移、浅色位移、增色效应、减色效应。

生色团:chromophore助色团:auxochrome深色位移:bathochromic shift浅色位移:hypsochromic shift增色效应:hyperchromic effect减色效应:hypochromic effect2、R带、K带、E1、E2、B带分别由哪种跃迁形成?吸收位置大概在多少吸收带位置?指的是哪种结构的吸收带?3、例题:对结构紫外吸收的计算。

(答案略)4、什么是隔离效应?什么是加和规律?当一个生色团和助色团直接相连时,两者形成了一个n-π共轭体系,使生色团的吸收发生红移,当两个生色团直接相连时,两者形成更大的共轭体系,出现新的吸收带,如果两个基团之间引入不含杂原子的饱和基团(-CH2-),这种饱和基团阻止了两个基团之间n-π共轭,就说这个饱和基团有隔离效应。

从另一方面,这时的紫外可见吸收光谱就是两个基团单独存在时的吸收之和,即为加和规律。

5、红外光谱法的优点。

简单方便,成本低;分析速度快;具有很高的分辨率;不损伤样品;可实现在线分析和监测;应用范围广;特征性强6、羰基一般在多少波普数处?苯环骨架的伸缩振动区呢?羰基:1760~1690cm-1苯环骨架:1650~1450cm-17、指纹区的范围及官能团的范围?指纹区:1300~650cm-1官能团区:4000~1300cm-18、分析红外图谱写出可能的官能团。

(答案略。

)题库八1、屏蔽常数、化学位移、耦合常数的英文屏蔽常数:shielding constant化学位移:chemical shift耦合常数:coupling constant2、计算烯氢化学位移值的例题3、什么是化学等价?什么是磁等价?化学等价:分子中有一组相同的原子和基团处于相同的化学环境时,称它们为化学等价,化学等价的核具有相同的化学位移。

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