李恩民教授简介-汕头大学医学院附属肿瘤医院
酵母单杂交筛选实验中的关键问题
基金项目:国家自然科学基金面上项目(N o.30170428,N o.30370641,N o.30570849);广东省自然科学基金重点项目(N o.37788,N o.05104541);中华人民共和国教育部博士学科科研基金项目(N o.20020560002,N o.20050560003)3通讯作者文章编号:1007-4287(2006)07-0715-03酵母单杂交筛选实验中的关键问题牛永东1,许丽艳23,韩 溟1,3,方王楷1,沈忠英2,李恩民13(1.汕头大学医学院生化与分子生物学教研室,广东汕头515041;2.汕头大学医学院肿瘤病理研究室;3.汕头大学医学院第二附属医院急诊外科)摘要:目的 酵母单杂交系统是研究生物大分子DNA 和蛋白质间相互作用的有效手段之一,酵母单杂交筛库实验是获取可以和诱饵序列相互作用的反式作用因子的关键。
方法 酵母单杂交诱饵质粒pHIS i3NF 转化Y M4271;通过不同浓度32AT 实验,获得酵母单杂交用宿主细胞Y M4271pHIS i3NF4;大规模筛选人食管癌细胞cDNA 文库。
结果 经筛库后续验证实验证实得到阳性克隆。
结论 通过准确确定32AT 的工作浓度,有效地完成了酵母单杂交的大规模筛选人食管癌细胞cDNA 文库的实验。
关键词:酵母单杂交;阳性克隆;cDNA 文库中图分类号:Q93919文献标识码:ASome keys of screening cDNA library with yeast one hybrid system NIU Yong 2dong 1,XU Li 2yan 23,H AN Min 1,3,et al.(De 2partment o f Biochemistry and Molecula Boilogy ,Medical College o f Shantou Univer sity ,Shantou 515041,China )Abstract :Objective Screening the cDNA library is the key of the yeast one hybrid technique.Methods Screening the cDNA library of es ophageal carcinoma cell line SHEEC with the cell strain Y M4271pHIS i3NF4by LiAc/PEG method in large scale ,which is the product of the constructed bait plasmid pHIS i3NF4trans forms Y M4271strain ,Further study were carried on by the 32AT higher in 2hibition test and changed report gene tested test.R esults 30positive clones by 32AT higher inhibition test and restriction endo 2nucle 2ases digested tests.Conclusion The cDNA library of yeast one hybrid system had been screened success fully in large scale by con 2firming the matched concentration of 32AT.K ey w ords :yeast one hybrid ;positive clones ;cDNA library(Chin J Lab Diagn ,2006,10:715) 酵母单杂交系统是近年来发展起来的一种研究生物大分子DNA 和蛋白质间相互作用的高通量技术平台。
脑钠素的基因工程研究
脑钠素的基因工程研究
李恩民;黄革;许丽艳
【期刊名称】《汕头大学学报（自然科学版）》
【年(卷),期】2001(016)001
【摘要】脑钠素是利钠多肽家族成员之一,存在于人体的多种器官组织中.脑钠素具有很强的利钠利尿、舒张血管和降低血压等生理功能,而脑钠素的改变与高血压、心脑血管病和肾病等许多疾病有关.脑钠素具有潜在的药用开发价值和良好的应用前景,其开发通常采用基因工程手段,但至今尚未成功.本文综合评述了脑钠素基因工程研究的历史与现状,全面分析了所存在的问题,并提出了相应的解决问题的方法.【总页数】7页(P84-90)
【作者】李恩民;黄革;许丽艳
【作者单位】汕头大学医学院生物化学与分子生物学教研室,汕头,515031;汕头大学医学院生物化学与分子生物学教研室,汕头,515031;汕头大学医学院生物化学与分子生物学教研室,汕头,515031
【正文语种】中文
【中图分类】Q78
【相关文献】
1.脑钠素及N端脑钠素前体在充血性心力衰竭诊断中的应用价值 [J], 李玉中;王朝晖;王卓
2.脑钠素及脑钠素前体检测在心力衰竭患者中的应用 [J], 李秀娟;王海平;宋志红
3.脑钠素rs198388基因多态性与湖南汉族人群原发性高血压易感性的关联 [J], 陈敏;陈小平;郭亦杰;石瑞正;张国刚
4.脑钠素T381C基因多态性与原发性高血压的相关性 [J], 张辉锋;董平栓;杨旭明;李志娟;马丽雅
5.人脑钠素基因工程菌的发酵条件及产物纯化研究 [J], 刘颖;任运生;邵根泽;温博贵
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肿瘤消融治疗技术评估报告 - 汕头大学医学院附属肿瘤医院
汕头大学医学院附属肿瘤医院汕头大学医学院附属肿瘤医院肿瘤消融治疗技术评估报告我院自开展肿瘤消融治疗技术以来，严格落实《肿瘤消融治疗技术管理规范（2017年版）》，疗效良好，无严重合并症发生。
说明我院具备开展该项目的能力。
按照文件要求，现对我院开展肿瘤消融治疗技术作节段性自我评估。
1.医院层面：（1）我院开展肿瘤消融治疗技术与其功能、任务和技术能力相适应。
（2）我院具有卫生计生行政部门核准登记的与肿瘤消融治疗技术相关的诊疗科目（详见医疗执业许可证）。
（3）开展肿瘤消融治疗技术的治疗床位共有64张，符合相关管理规范治疗床位不少于30张的要求。
（4）我院重症监护室设置符合规范要求，达到Ⅲ级洁净辅助用房标准，目前具有4张病床，有计划再增加4张病床，每病床净使用面积不少于15平方米；有空气层流设施、多功能监护仪和呼吸机等设备，能够开展有创监测项目和有创呼吸机治疗；重症监护室的医师和护士均具有丰富的重症监护经验，经过专业培训并考核合格，能够满足肿瘤消融治疗技术应用专业需要，符合肿瘤消融治疗危重患者救治要求。
（5）为保证患者安全及防范医疗风险，我院有开展肿瘤消融治疗技术的治疗室，符合消毒和无菌操作条件。
（6）我院具有核磁共振（MRI）、计算机X线断层摄影（CT）及超声等设备和医学影像图像管理系统。
具备开展血管介入治疗的相关条件。
（7）目前我院经过省级卫生计生行政部门指定的培训基地关于肿瘤消融治疗技术相关系统培训，具备肿瘤消融治疗技术临床应用能力的本机构在职有4人。
2.从业人员方面：（1）开展肿瘤消融治疗技术的医师均取得《医师执业证书》，并注册在我院，执业范围与应用肿瘤消融治疗技术相关。
（2）有5年以上肿瘤诊疗临床工作经验10人，其中取得副主任医师及以上专业技术职务任职资格者6人。
（3）经过省级卫生计生行政部门指定的培训基地关于肿瘤消融治疗技术相关系统培训，具备肿瘤消融治疗技术临床应用能力的有4人，另有1人正在培训中，尚未取得合格证。
细胞骨架结合蛋白Ezrin和Fascin
5:00 pm-5:30 pm细胞骨架结合蛋白Ezrin 和Fascin 在食管癌中的异常表达与功能及其相关细胞信号转导通路李恩民汕头大学医学院生物化学与分子生物学教研室 目前，作为消化道的一种常见恶性肿瘤——食管癌的发生发展分子机制，有许多方面依然不清楚。
Ezrin 是细胞骨架肌动蛋白微丝与细胞膜之间的一种连接蛋白，而Fascin 则是细胞骨架肌动蛋白微丝之间的一种捆绑蛋白，因此二者均与细胞的形态密切相关，在本文中我们将此二者统称为细胞骨架结合蛋白。
本课题组以往曾研究发现，（1）在永生化食管上皮细胞的恶性转化中，Ezrin 和Fascin 均上调表达；（2）在食管癌组织细胞中，Ezrin 的表达有从细胞膜异常转位到细胞浆的趋势；（3）Fascin 在食管癌组织中显著过表达，而通过RNA 干扰下调Fascin 可使食管癌细胞的增殖和侵袭受到明显抑制。
这些结果表明，Ezrin 和Fascin 均与食管癌相关，但确切的功能与分子作用机制尚有待于深入研究。
基于此，在本文中，我们通过综合运用组织芯片、免疫组化、免疫荧光、cDNA 基因表达谱芯片、Western blotting 、RT-PCR 、RNA 干扰和真核基因表达等系列实验技术手段，深入研究了Ezrin 与Fascin 在食管癌中的表达与功能及其相关细胞信号转导通路。
详见下述：首先，通过组织芯片和免疫组化检测Ezrin 和Fascin 在食管癌组织中的表达情况，结果如下：①进一步证实Ezrin 和Fascin 在食管癌中过表达，并确认异常易位为Ezrin 在食管癌中表达的特征之一；②生存率相关分析结果提示，Ezrin （P =0.021）和Fascin （P =0.005）在食管癌中的过表达均与患者的生存率呈显著负相关关系。
其次，在食管癌细胞系和永生化食管上皮细胞系中分别研究了Ezrin 和Fascin 的功能。
通过RNA 干扰实验发现，降低Ezrin 的表达可使食管癌细胞的增殖、体内成瘤、粘附、细胞移动和侵袭等受到明显抑制。
基础学习实验4-酶谱法检测血清基质金属蛋白酶MMP-2、MMP-9的活性
NGAL的三级结构
由N 端的310螺旋、C 端的α螺旋和中间的和中间的八段反平行的β折叠所构成，这
八段反平行式β折叠构成了一个β折叠桶结构。
此β折叠桶结构一端是开放的，为与配体结合提供了进口；而另一端则被短的N 端 310螺旋所封闭。在β折叠桶底部内侧排列着疏水的芳香族和脂肪族氨基酸残基， 形成了一个疏水核或疏水内部，为结合亲脂性配体提供了位点。
实验设计
1. 查阅相关资料，讨论MMP-2与MMP-9在食管癌各发展阶段的活性检 测能否作为监控癌症发展的一个指标，应该注意什么问题，其临床意 义如何？ 2. 若发现MMP-2与MMP-9在癌症病人中出现异常，谈谈你可能采取的
含有2个锌离子和5个钙离子
右图可见一个小分子化合物位于酶活性中心，并与一个锌离子结合
NGAL能与MMP-9以二硫键的方式结合，能起到保护和调节MMP-9功能的作用，所以NGAL
与肿瘤的侵袭移动有密切的联系。
汕头大学医学院生物化学与分子生物学教研室李恩民教授课题组以转染有pcDNA3 空白质粒 载体的SHEEC 细胞为对照，酶谱法检测结果表明，转染有pcDNA-NGAL (-) 的SHEEC 细胞 分泌的MMP-9 和MMP-2的活性均明显降低；而与此同时，转染有pcDNA-NGAL (＋) 的 SHEEC 细胞分泌的MMP-9 和MMP-2的活性均明显升高。表明通过有义、反义技术使NGAL 基因表达发生改变可以对SHEEC 细胞分泌的MMP-9 和MMP-2 的活性产生明显影响。
（2）明胶酶，包括MMP-2和MMP-9,其作用底物主要是Ⅳ型胶原和明胶，还可降解Ⅶ、
Ⅸ、Ⅹ型胶原,但不能降解间质胶原； （3）间充质溶解素，包括MMP-3、MMP-7、MMP-10和MMP-11，其作用底物主要是
汕头市人民政府关于2017年度汕头市科学技术奖励的决定
汕头市人民政府关于2017年度汕头市科学技术奖励的决定文章属性•【制定机关】汕头市人民政府•【公布日期】2018.02.13•【字号】汕府〔2018〕12号•【施行日期】2018.02.13•【效力等级】地方规范性文件•【时效性】现行有效•【主题分类】科技奖励正文汕头市人民政府关于2017年度汕头市科学技术奖励的决定汕府〔2018〕12号各区县人民政府，市政府各部门、各直属机构：为贯彻落实创新驱动发展战略，促进科技与经济紧密融合，推动我市产业转型升级和发展动能转换，进一步激励企事业单位和广大科技人员进行科技攻关，根据《汕头市科学技术奖励办法》的规定，汕头市人民政府决定授予“印制电路任意互连特种电子化学品关键技术及产业化”等11项成果为汕头市科学技术奖一等奖；授予“数字化控制九层共挤薄膜吹塑机组”等13项成果为汕头市科学技术奖二等奖；授予“基于物联网和随机图像识别的防伪物流管理平台”等21项成果为汕头市科学技术奖三等奖。
希望广大科技工作者以获奖者为榜样，努力弘扬创新发展理念，全面增强自主创新能力，充分发挥创新引领发展的第一动力作用，为我市打造国家创新型城市和区域科技创新中心作出新的贡献。
具体获奖项目如下：一等奖（11项）1.印制电路任意互连特种电子化学品关键技术及产业化主要完成单位：广东光华科技股份有限公司、电子科技大学、广东东硕科技有限公司主要完成者：肖定军、王翀、谭泽、何为、刘彬云、李明、周国云、朱凯、程骄、李卫明、赖志强、黄司平、肖亮、黄永润、席道林2.OGS电容式触摸屏强化化学材料开发及应用主要完成单位：汕头超声显示器技术有限公司、汕头超声显示器（二厂）有限公司、汕头超声显示器有限公司、汕头大学主要完成者：沈奕、张歆、余荣、林钢、朱世健、崔卫星、孙楹煌、陈绍源、曾素花、纪歆和、冯兆昌、陈少冬、金国腾、吕岳敏、黄勇彬3.小型化高通流氧化锌压敏电阻器主要完成单位：汕头高新区松田实业有限公司主要完成者：林榕、谢冬桔、胡勇、黄瑞南、赵明辉4.基于第二代PCIE的高性能彩色多普勒超声诊断系统开发主要完成单位：汕头市超声仪器研究所有限公司主要完成者：李德来、李斌、周桂荣、蔡泽杭、余炎雄、郭境峰、杨金耀、林武平、王海潮、蔡恒辉5.汕头市大气细颗粒物（PM2.5）来源解析及防控措施应用主要完成单位：汕头市环境保护监测站、广东加南环保生物科技有限公司、广东胜霏尔环境科技有限公司、汕头市机动车排气污染管理中心主要完成者：肖亮洪、郭岩、张宇烽、黄育新、郑志强、陈舒迟、占美君、李娟、黄宜耀、杨素霞、吴鉴原、黄文鑫、陈媛、冯凯、潘国飞6.基于机器视觉的铰链精密检验系统主要完成单位：广东澳利坚建筑五金有限公司、广东工业大学主要完成者：陈大川、王桂棠、许小东、吴黎明、郭建林、邓耀华、唐露新、张巧芬、陈永彬、王贤杰、吴佳毅、付泰、张观锦7.河口区对虾生态混养模式研究与推广主要完成单位：汕头市水产技术推广中心站、汕头市海洋与水产研究所、汕头市大发水产养殖有限公司、汕头市大顺实业有限公司主要完成者：赖向生、李春晓、林闻潘、林壮炳、陈树立、陈楷亮、张楚妃、林东斌、陈创佑、林耿中、李业辉、蔡雁群、陈晓鹏、李顺茂、曾向坤8.开发化学交换饱和传递成像技术实现在体pH和代谢成像主要完成单位：汕头大学医学院第二附属医院、韩山师范学院主要完成者：吴仁华、沈智威、戴卓智、肖刚、肖叶玉、曹震、黄得校、耿宽、延根、杨忠现9.上消化道肿瘤诊断和治疗新方法的转化研究主要完成单位：汕头大学医学院主要完成者：张灏、陈于平、董洪梅、林婉、陈蕾、甘进锋、吴晓、黄东阳、张庆英、李冠武、姚志猛、王耿、陈少斌、杜亮、柯秀容10.二甲双胍对消化系统肿瘤的防治研究主要完成单位：汕头大学医学院第一附属医院主要完成者：荆绪斌、蔡先彬、谭晓君、王钦加、胡曦、吴嘉玲、何银娣、陈斌鸣、胡辉、陈冲、周燕娜、彭健伟、程继东、黄杰雄11.NGAL在脑胶质瘤中高表达及其临床意义的系列研究主要完成单位：汕头市中心医院、汕头大学主要完成者：刘明发、许海雄、金涛、徐可、杜光舟、王少洪、李恩民、许丽艳二等奖（13项）12.数字化控制九层共挤薄膜吹塑机组主要完成单位：广东金明精机股份有限公司主要完成人：李子平、李浩、马佳圳、黄虹、王全、关文强、陈昭楷、叶镇波、孙靖寰、林洁波13.铝合金耐火节能窗主要完成单位：广东金刚玻璃科技股份有限公司、苏州金刚防火钢型材系统有限公司主要完成人：庄大建、肖坚伟、廖克生、吴从真、陈增国、XXX华、颜奕凯、林烁14.包装产业有机废气治理与热能回收技术研究及其装备开发主要完成单位：汕头市远东轻化装备有限公司主要完成人：温佳彬、陈伟龙、李拱鹏、孙兆麟、杜考玲、陈耀渠、肖仕强、何二君、孙建伟15.高产量高精度开包机主要完成单位：汕头三辉无纺机械厂有限公司主要完成人：杨长辉、蔡苗、方霓、郑昌平、杨博16.新型营养健康安全潮式烘焙食品关键共性技术研究及其产业化示范主要完成单位：广东荣诚食品有限公司、江南大学、汕头市天悦食品工业技术研究院有限公司主要完成者：郑镇标、林玉惠、何志勇、郑宗真、陈德兆、吴浩聪、徐德水、林少娟、连晓伟、陈洁17.CTS-409电磁超声测厚仪主要完成单位：广东汕头超声电子股份有限公司主要完成者：孙伟成、周少武、章适鸿、王丽苹、杨青兰18.水包油膏霜广谱高分子乳化剂主要完成单位：汕头市大千高新科技研究中心有限公司主要完成者：张磊、杨利超、纪维玉、黄桂珍、詹幼湘、李惠萍、佘燕19.高产晚籼型杂交稻新组合博优691的选育与应用主要完成单位：汕头市农业科学研究所主要完成者：黄广平、王新、许大熊、许徐标、陈列臣、汤昌兴、张绍龙、廖学群、张建林、张泽佳20.中国兰花新品种选育及高效繁育技术研究与应用主要完成单位：广东远东国兰股份有限公司、广东省农业科学院环境园艺研究所主要完成者：杨凤玺、陈少敏、朱根发、郑睦銛、李杰、李冬梅、王真、黄丹、黄锦盛、蚁跃琼21.间充质干细胞转分化为汗腺细胞和汗腺三维培养模型的构建与鉴定主要完成单位：汕头大学医学院第二附属医院、汕头大学医学院主要完成者：李海红、张明君、陈露、李雪雪、陈丽芸、张冰娜、谢思田、林常敏、唐世杰22.内质网应激在腺苷诱导HepG2细胞凋亡中的作用及机制主要完成单位：汕头大学医学院第二附属医院主要完成者：吴灵飞、李国平、蒲泽锦、冯家琳、项梦琦、刘丽璇、郭益添23.探讨高剂量率无均整器模式在复发鼻咽癌放疗中的应用主要完成单位：汕头大学医学院附属肿瘤医院、汕头大学、汕头大学医学院、汕头大学医学院第二附属医院主要完成者：庄名赞、彭逊、黄利生、陈鑑、林志雄、朱的霞、陆佳扬、邱庆春、吴仁华24.超声斑点追踪技术评价心肌生物力学参数与心功能变化系列研究主要完成单位：汕头市中心医院主要完成者：王良玉、洪少杰、王佳玲、周绮平、林树洪、郑可弟、张帆、于瑞芳、黎永谦、黄尧垚三等奖（21项）25.基于物联网和随机图像识别的防伪物流管理平台主要完成单位：广东正迪科技股份有限公司主要完成者：黄国伟、吴永滨、郑喜欢、林泽杭、李锐鑫、黄敬茂、蒋亮辉26.健康与营养食品智能化烹饪电器关键技术的开发与示范主要完成单位：广东天际电器股份有限公司、江南大学、汕头市天悦食品工业技术研究院有限公司主要完成者：吕全彬、林玉惠、陈洁、熊伟丽、陈德兆、何志勇、曾茂茂27.节材型耐腐蚀多功能安全便捷易拉盖主要完成单位：广东英联包装股份有限公司主要完成者：柯丽婉、郭桂强、邱锡辉、黄志超28.安全传统潮式米制品关键共性技术的研究及其产业化示范主要完成单位：广东八记食品股份有限公司、江南大学、汕头市天悦食品工业技术研究院有限公司主要完成者：丁建伟、林玉惠、苏佩霞、何志勇、许毅、陈洁、林妙玲29.海洋环境下在役桥梁使用性能评价与可靠度分析技术研究主要完成单位：汕头公路工程质量监督站、长沙理工大学、汕头市礐石大桥有限公司主要完成者：许锋、杨伟军、朱英耀、彭艺斌、刘曙光、卢明波、荣垂强30.肉制品掺假动物源性成分快速鉴别技术研究主要完成单位：汕头出入境检验检疫局主要完成者：许如苏、周广彪、段建发、魏霜、陈冠武、苏建晖、李辉31.监控技术在智慧社区系统的应用主要完成单位：广东奎创科技发展有限公司、江南大学、汕头市天悦食品工业技术研究院有限公司主要完成者：蔡育勤、杨英亮、熊伟丽、林玉惠、陈树、孙顺远、郑铭帆32.无拉力热分切底封制袋机主要完成单位：汕头市龙华包装机械有限公司主要完成者：谢楠、杨峥雄、张建胜、蔡镇贤、饶新安33.HPLC-ICP-MS联用技术在水产品砷形态分析及本底调查中的应用研究主要完成单位：汕头出入境检验检疫局主要完成者：陆奕娜、张林田、梁希扬、陈建伟、黄学泓、魏建华、陶伟正34.汽车助燃减排节能器主要完成单位：汕头高新区腾力高分子材料科技有限公司主要完成者：洪浩鹏、沈绮瑜、佘汉杰、洪梓峰、赵壮中35.桩基低应变法第一、第二阶共振频率影响因素研究与应用主要完成单位：汕头公路工程质量监督站、合肥工业大学主要完成者：卢明波、刘东甲、荣垂强、许锋、钟伟杰、杨晓峰、程晓东36.生态健康-环境友好型生猪养殖自动化关键技术装备的研究与应用主要完成单位.广东德兴食品股份有限公司、华南农业大学主要完成者：姚辉德、丘初集、余功本、姚志鹏、林威鹏、姚志翔、蒋再学37.波纹巴非蛤海区增养殖技术研究与应用主要完成单位：汕头市海洋与水产研究所、南澳县水产技术推广站、南澳县正发花蛤养殖专业合作社主要完成者：马庆涛、许晓能、林清、柯文得、吴武、杨文君、陈楷亮38.潮汕蕉柑黄龙病发生与防控技术研究主要完成单位：汕头市果树研究中心主要完成者：郑木川、陈桂平、杨惠文、陈德华、洪立纯、庄宇、庄宋浩39.一种Eclipse系统调强放疗计划优化方法的建立及应用主要完成单位：汕头大学医学院附属肿瘤医院、汕头市中心医院、汕头大学医学院第二附属医院主要完成者：陆佳扬、黄宝添、张基永、谢良喜、李梅、吴丽丽、张武哲40.快速测序技术开发及在几种重要致病菌鉴定和同源性分析中的应用研究主要完成单位：汕头出入境检验检疫局、汕头市中心医院、汕头大学医学院、广东出入境检验检疫局主要完成者：蔡颖、周霓、周广彪、陈霖祥、林昆、魏锐、朱俊贤41.中药大黄对于大鼠小肠α-葡萄糖苷酶活性影响的研究主要完成单位：汕头市中医医院主要完成者：陈超、侯凯健、王叙煌、林创坚、吴帮泰42.品管圈活动在手术室无菌物品持续质量改进中的应用研究主要完成单位：汕头市中心医院主要完成者：郑少燕、黄旭华、陈少芸、许伟涛、陈泽梅、李锦茹、吴丹燕43.股前外穿支游离皮瓣修复深度复杂创面的临床研究主要完成单位：汕头市第二人民医院主要完成者：许研然、黄晓涛、冯佳雄、肖哲、孙泽光、杨永熙44.关节立体针法治疗骨性关节炎临床研究主要完成单位：汕头市金平区人民医院、汕头市金平区中医医院主要完成者：洪笃瑞、郑炼生、刘清红、李永龙、黄明镇45.实时三维超声结合高频超声在尿道检查中的应用价值研究主要完成单位：汕头市第二人民医院主要完成者：张逸仲、林建群、李卓华、王乐浩、侯存月、许哲、王佳玲汕头市人民政府2018年2月13日。
广东省精品资源共享课推荐表
广东省精品资源共享课推荐表（本科）课程学校汕头大学（医学院）课程名称生物化学与分子生物学（医学）课程类型□公共基础课□√专业基础课□专业课□其他所属一级学科名称生物学所属二级学科名称生物化学与分子生物学课程负责人李恩民填报日期2013年3月9日广东省教育厅制二○一三年一月填写要求一、以word文档格式如实填写各项。
二、表格文本中外文名词第一次出现时，要写清全称和缩写，再次出现时可以使用缩写。
三、有可能涉密和不宜大范围公开的内容不可作为申报内容填写。
四、课程团队的每个成员都须在“2．课程团队”表格中签字。
五、“8．承诺与责任”需要课程负责人本人签字，课程建设学校盖章。
1．课程负责人情况基本情况原课程负责人李恩民性别男出生年月1963.06 最终学历博士专业技术职务教授学位博士行政职务教研室主任现课程负责人李恩民性别男出生年月1963.06 最终学历博士专业技术职务教授学位博士行政职务教研室主任所在院系汕头大学医学院通信地址（邮编）汕头市新陵路22号（515041）研究方向肿瘤分子生物学负责人更换原因教学情况现课程负责人近三年讲授本课程情况；近五年来讲授的主要课程（含课程名称、课程类别、周学时；学生届数及学生总人数）（不超过五门）；承担的实践性教学任务（含实验、实习、课程设计、毕业设计/论文，学生总人数）；主持的教学研究课题（含课题名称、来源、年限）（不超过五项）；作为第一署名人在国内外公开发行的刊物上发表的教学研究论文（含题目、刊物名称、时间）（不超过五项）；获得的教学表彰/奖励（不超过五项）；主编的省部级及以上规划教材、获奖教材（不超过五项）：1.近三年讲授本课程情况课程名称课程类别周学时届数学生总数生物化学与分子生物学本硕七年制临床医学专业、本硕七年制医学影像专业和本科五年制临床医学专业等三个层次的专业基础课，必修4-8 3 682人生物化学本科四年制护理学专业基础课，必修4-8 2 24人基因克隆硕士研究生专业基础课，选修 6 1 6人高级生物化学硕士研究生专业基础课，必修 6 3 65人高级生物化学与分子生物学博士研究生专业基础课，必修 6 3 18人教学情况续2.近五年来讲授的主要课程课程名称课程类别周学时届数学生总数生物化学与分子生物学本硕七年制临床医学专业、本硕七年制医学影像专业和本科五年制临床医学专业等三个层次的专业基础课，必修4-8 5 1100人生物化学本科四年制护理学专业基础课，必修4-8 4 38人基因克隆硕士研究生专业基础课，选修 6 1 6人高级生物化学硕士研究生专业基础课，必修 6 3 65人高级生物化学与分子生物学博士研究生专业基础课，必修 6 5 33人3.承担的实践性教学任务1）作为教研室主任，负责本教研室承担的生物化学与分子生物学实验课的总体安排，学生人数，每届260－280人，5届，累计学生总人数1300－1400人。
表达产物的SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分离分析鉴定
载体的3' AOX1区与基因组的AOX1基因的末端发生整合重组 表达载体与毕赤酵母基因组发生重组的两种方式： 载体的HIS4区与基因组的HIS4基因的末端发生整合重组
甲醇酵母系统高效表达影响因素
载体稳定性：是整合还是粘附到酵母染色体上 基因剂量：单/多拷贝 甲醇利用表型：Muts(利用甲醇慢型)， Mut+ (利用甲醇快型) mRNA5′端：应尽量避免在UTR区出现AUG和次级结构 AT含量：AT含量越高、越容易出现类似于终止子的结构 表达产物稳定性：分泌表达时，胞外蛋白酶是要影响因素
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电泳开始时氯离子泳动率最大，超过蛋白，因此在后面形成低电导区，而电场强度与低电导区成反比，因而产生较高的电场强度，使蛋白和甘氨酸根离子迅速移动，形成以稳定的界面，使蛋白聚集在移动界面附近，浓缩成一中间层。
A. 为电泳前2层凝胶排列顺序，2层胶中均有快离子，慢离子 B. 显示电泳开始后，蛋白质样品夹在快、慢离子之间被浓缩成极窄的区带。 C. 显示蛋白质样品分离成数个区带。 电泳中离子运动示意图
蛋白质印迹（western blotting）的概念
蛋白质印迹法又称为免疫印迹法，这是一种用抗原抗体的特异性结合来检测固定在固相载体上蛋白质的免疫化学技术方法。
外源基因在毕赤酵母表达系统中高效表达预测的网页服务器
Hale Waihona Puke 在“sequence”方框中输入由目的基因末端100bp及其后面的载体100bp组成的200bp序列片段； 点击底下的“Evaluation”按钮，在“Evaluation”方框中显示预测的结果； 如果结果显示低于0.5，则可点击“Design”这个按钮，则显示根据密码子使用改造后的序列。
电泳的概念和分类
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李恩民教授简介
男，1963年6月22日出生，生化与分子生物学专业博士，汕头大学医学院特聘教授，广东省二级教授，博士研究生导师，博士后合作导师，广东省“千百十人才工程”国家级培养对象，潮汕沿海地区高发肿瘤分子生物学广东省高校重点实验室主任，汕头大学生化与分子生物学专业广东省重点学科负责人，中国生化与分子生物学会医学生化与分子生物学分会理事，全国抗癌协会肿瘤转移专业委员会理事，广东省抗癌协会肿瘤转移专业委员会副主任委员，广东省生化与分子生物学会常务理事，汕头大学生化与分子生物学专业博士点负责人，汕头大学医学院生化与分子生物学教研室主任，汕头大学学术委员会委员，汕头大学医学院学术委员会委员，汕头大学医学院学位委员会委员，汕头市优秀教师，汕头大学医学院教学名师，全国高等医学院校本科长学制国家规划教材《生物化学与分子生物学》编委，全国高等医学院校5年制国家规划教材《生物化学与分子生物学》编委，全国高等医学院校研究生国家规划教材《医学分子生物学》编委，全国高等医学院校创新教材《卫生生物化学》共同主编，全国成人高等医学教育系列教材《生物化学》主编。
长期以来，立足于广东潮汕沿海食管癌高发区，坚持突出地区特色，主要围绕着异常表达的细胞骨架结合蛋白触发食管癌细胞侵袭转移信号循环转导级联放大分子机制开展研究，获得系列研究成果。
主要研究方向，1）食管癌相关基因的结构与功能研究，2）食管癌发生发展分子机制研究，3）食管癌早期诊断、放化疗敏感性与预后预警分子标志物研究。
1998年以来，作为负责人，先后承担国家自然科学基金等科研项目累计12项，主要包括国家NSFC-广东省自然科学基金联合基金重点项目，国家自然科学基金面上项目，以及广东省自然科学基金重点项目等；作为导师，指导博士后/博士研究生/硕士研究生，累计90余人，同时指导本科大学生从事创新科学研究6 0余人；作为通讯或共同通讯作者，在J Biol Chem、J Pathol、Am J Pathol、Am J Gastroenterology、Clin Cancer Res、Carcinogenesis、Int J Cancer、Cancer Prev Res和Biochim Biophys Acta等学术期刊杂志上累计发表SCI研究论文100余篇；作为共同第一作者，在Nature杂志上发表研究论文。
演讲题目：食管癌中Fascin高表达的临床意义与功能及其调控分子机制
内容简介: Fascin是一种重要的细胞骨架结合蛋白，有关“Fascin与肿瘤发生发展”是近年来肿瘤领域的热点研究内容。
汕头大学医学院李恩民教授课题组，立足潮汕食管癌高发区，10余年来一直从事Fascin与食管癌方面的研究，取得了系列研究进展。
本讲座将系统介绍Fascin在食管癌中高表达的临床意义与功能及其调控分子机制。