EDTA抗凝剂引起的血小板减少和白细胞增多
EDTA-K2抗凝剂致假性血小板减少的方法
EDTA-K2抗凝剂致假性血小板减少的方法作者：邹小峰来源：《中国社区医师》2018年第25期摘要目的：探讨EDTA-K2抗凝剂致假性血小板减少的方法。
方法：收治肛瘘患者1例，对其血小板检验结果异常进行探讨。
结果：EDTA-K2抗凝标本的血涂片15min时在显微镜下可看见大量的血小聚集现象。
结论：血液检测过程中使用EDTA-K2抗凝剂也会造成血小板假性降低，因此当全自动血液分析仪的血小板计数出现与临床的诊断不相符且严重偏低时，检验人员应该及时并且积极的找出原因。
关键词 EDTA-K2抗凝剂;假性;血小板减少乙二胺四乙酸二钾（EDTA-K2）具有对红、白细胞形态影响极小，并可抑制血小板在体外聚集等优点，目前临床已广泛应用EDTA-K2抗凝剂进行血细胞计数，但会引起血小板不正常的黏附、聚集，从而导致检测出来的血小板结果假性减少，导致对检验结果的错误理解，极易误诊，应引起注意。
资料与方法2017年1月-2018年1月收治肛瘘患者1例，患者，男，36岁。
利用SysmesXS-500i全自动血细胞分析仪做血常规检测时血小板计数结果显示16×109/L，凝血四项正常，无任何临床出血症状，瑞氏染色后镜检发现有血小板聚集现象。
仪器和试剂：sysmexXS-500i全自动血细胞分析仪与相关配套试剂，OLYMPUS-CX31双目显微镜，EDTA-K2抗凝采血管，枸橼酸钠抗凝管，草酸铵稀释液（按照《全国临床检验操作规程》配制），瑞氏-吉姆萨染液。
检测方法：①EDTA-K2抗凝：患者用EDTA-K2一次性采血管抽取静脉血2mL充分混匀后放置15min、30min。
②枸橼酸钠抗凝：同时为患者再用枸橼酸钠负压采血管抽取静脉血2mL（抗凝剂与血液之比1：9），在混匀后放置15min、30min。
③草酸铵稀释末梢血：抽取患者的末梢血20μL加入到0.38mL草酸铵稀释液中，按照《全国临床检验操作规程》来严格操作，混匀后放置15min、30min。
EDTA-K2抗凝剂导致血小板假性减少1例的分析
EDTA-K2抗凝剂导致血小板假性减少1例的分析
刘观斌;田新村
【期刊名称】《国际检验医学杂志》
【年(卷),期】2011(032)014
【摘要】@@ 将EDTA-K2作为血细胞计数的抗凝剂,已在临床应用多年.最近笔者在工作中发现1例由EDTA-K2抗凝剂引起血小板假性减少的典型病例,现介绍如下.rn1 病例资料rn患者,男性,47岁,无既往病史,2011年1月2日因皮肤红色斑疹来院就诊.实验室检查:(1)无肝、脾、淋巴结肿大;(2)血常规:白细胞
(WBC)5.12×109/L、血红蛋白(Hb)150 g/L、血小板(PLT)33×109/L.
【总页数】2页(P1656-1657)
【作者】刘观斌;田新村
【作者单位】山东省滨州市中心医院检验科,251700;山东省滨州市中心医院检验科,251700
【正文语种】中文
【相关文献】
1.EDTA-K2抗凝剂导致血小板假性减少临床特点分析 [J], 康艳;薛雯娟
2.EDTA-K2抗凝剂导致假性血小板减少的原因探讨分析 [J], 朱海燕
3.抗凝剂EDTA-K2导致血小板假性减少原因分析 [J], 朱建奎;张春玲;薛健
4.EDTA-K2抗凝剂导致血小板假性减少的分析 [J], 冀红霞;王俊涛;蒋丹丹
5.EDTA-K2抗凝剂导致血小板假性减少的分析 [J], 冀红霞; 王俊涛; 蒋丹丹
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血常规结果影响因素
影响血常规结果的相关因素 1.抗凝剂 EDTA-K2是血常规中普遍使用的抗凝剂，而这种抗凝剂能加快血小板的凝
集，最终出现血小板假性低下等问题。根据国内外研究显示，EDTA依赖 性假性后小板减少症多数是因为EDTA盐抗凝时会引起血小板互相聚集， 最后出现卫星现象，导致全自动血细胞分析仪无法准确计算出血小板的数 量，因此，临床上需要严格按照医学上规定的血液常规检查标准操作，对 红细胞、白细胞、血小板等诸多标准详细检查。
8
7.标本自身 标本自身的因素也会对血细胞检验的结果造成影响 ,其中血小板计数最容
易受干扰。由于血小板计数的阈值是 2～24fL ,3～20fL 为准确计数阈 值 ,20～24f为血小板计数的漂浮阈值。当小红细胞体积 < 24fL 时 ,计入血 小板 ,使血小板假性增高;巨大血小板和血小板聚集 ,计入红细胞 ,使血小板 计数假性减低。 有核红细胞增多会使白细胞计数假性增高。 淋巴细胞分群中也可能存在体积稍小的嗜碱性粒细胞 ,使淋巴细胞分类计 数假性增多等。
•血常规检验结果影响因素
1
随着社会的发展，人们医疗生活水平的提高，医院的诊断，治疗水平也应 相应提高，但在实际操作阶段，由于人员、设备等方面的因素，患者在接 受诊治时常会出现各种不可预测的错误，这就直接影响到了最后的治疗， 尤其血常规检查是诊治的首要环节，这重要性不言而喻，这就需要在检查 过程中严格控制好检验操作流程。
足，大量伪足快速聚集，
导致部分细胞分析仪检测为淋巴细胞，从而得出白细胞计数偏高和血小板
计数偏低的检验结果。
随着时间的推移，血液自身即会发生凝集，但由于抗凝管中的EDTA-K2对 血小板凝集具有抑制作用，使得血液中的血小板假性聚集现象被消除，细 胞群释放，血小板逐渐恢复正常球状态，伪足随后消失，这时血液样本中 的血小板计数恢复正常值。末梢血静置10min、30min后血小板计量数明 显升高
EDTA依赖性假性血小板减少症
ＥＴ Ｄ Ａ依赖性 假性 血小板 减少 症 （ Ｔ Ｐ 是 一种 发生 于体 ＰＣ ） 外 的、 Ｄ Ａ诱 导的血小 板非稳固性聚集 ， ＥＴ 临床表 现为无 出血现 象的重型假性血小板减少症 …。近年 报道并不 少见 ， 虽然 这种
申志红 ， 宇溪 （ 杨 玉溪市人民医院检验科 ， 玉溪 ６３０） 云南 ５１０
摘要 ： ２ 对 ２例假性血小板减少 症患者的相关资料进行 回顾 性分 析。结果 Ｅ Ｔ Ｄ Ａ抗 凝血 会诱发 血小板 聚集 ， 导致 仪器法 计 数血 小板假性 减少伴 白细胞假性增高 ， 且临床元 出血征及凝血功能检查正 常。
现象发生的几率 很低 （ ．７ 一１ ） ， 却给 临床 治疗 工作 ００％ ％ Ｊ但 带来很 大 困扰 ， 容 易 造 成 误 诊 又 延 误 时 效 性。现 将 ２ 既 ２例 ＰＣ Ｔ Ｐ的临床资料总结 如下。
１ 资料与方法
１１ 病例来源 ．
岁。
收集 ２ ２例 Ｅ Ｔ Ｄ Ａ依赖 性假性血小板减少症患
其他疾病发生的伴随现象。因其出现于其他疾病开始或治疗
注： 与手工法 比较 。 ： Ｏ ０ ・ Ｐ＜ ．５
过程中， 随疾病好转而消失。相关疾病及治疗措施有： 脓毒败 血症、 冠状动脉搭桥术、 使用抗血小板药物的介入治疗、 使用某
种抗生素及 肝硬化等 。（ ） 一种温度 依赖性抗 体所 导致。依 ３为
２２ 白细胞计数 ２ ． ２例 Ｐ ℃ Ｉ Ｐ中 １ ５例进行 白细胞直接稀释计 关于ＰＣ Ｔ Ｐ的产生机 制有 ３种 观点 ：１ 为一种 自身免疫 （）
抗凝剂对血液分析仪白细胞监测影响
抗凝剂对血液分析仪白细胞监测影响目的：探析抗凝剂对血液分析仪白细胞监测的影响。
方法：选取在我院门诊接受体检的30例健康人员EDTA-K2抗凝静脉血作为样本，在样本采集后不同时间段内采用血液分析仪进行白细胞变化观察，同时通过人工计数检验方式对白细胞计数以及血小板容积进行观察分析，以对比研究白细胞形态变化。
结果：血液分析仪监测显示，血液样本采集后马上检查白细胞计数结果为9.6×109/L，保存2小时后检测结果为15.8×109/L，随着检测时间的延长，白细胞计数呈现增高变化；采用人工计数检验中，白细胞计数结果与血液分析仪的即可检测结果基本一致。
结论：EDTA-K2抗凝剂容易引起血液分析仪白细胞计数增加，临床检验时应注意结合检验人员的实际情况，通过其他检测分析方式进行综合分析，以保证临床检验结果的准确可靠。
标签：EDTA-K2抗凝剂；血液分析仪；白细胞；影响血液分析仪作为临床血液检测中最常用的仪器设备，在进行血液检验分析应用中，不仅检测分析速度快，检测结果准确性高，而且检验操作比较方便，具有较为突出的临床应用价值作用和优势[1]。
抗凝剂EDTA作为血细胞分析中常用的一种抗凝剂，在检验分析应用中，由于其对于血细胞形态以及血小板计数的影响非常小，不仅不会对于血细胞检验的数目、体积以及红细胞形态造成影响，而且对血小板聚集还具有一定的抑制作用[2]，因此，应用相对广泛。
下文通过选取我院门诊体检的30例健康人员血液样本，对EDTA-K2抗凝剂在血液分析仪白细胞监测中的作用影响进行分析研究，为临床检验提供参考。
1、一般资料和方法1.1 一般资料选取我院门诊收治的30例接受体检的健康人员血液样本进行分析研究，其中，男性患者17例，女性患者13例，患者年龄在19岁至62间，平均年龄为（37.8±9.7）岁。
所选取人员的血细胞计数结果均在参考值范围内。
1.2 病例排除标准所选取人员的血细胞计数结果均在参考值范围内。
抗凝剂EDTA
摘要：目的：探讨edta-k2抗凝血导致血小板假性减少及纠正措施。
方法：通过对收制的4例患者进行全自动血细胞计数仪检测得出结论。
结果：edta-k2抗凝血检测血小板偏低，涂片血小板聚集；末梢血检测血小板接近实际数值，涂片血小板分布正常。
结论：edta-k2抗凝剂在某种情况下可导致血小板发生聚集，引起血细胞计数仪检测的血小板减少。
关键词：edta-k2；假性；血小板聚集edta-k2具有对红、白细胞形态影响极小,并可抑制血小板在体外的聚集等优点,目前临床已广泛应用乙二胺四乙酸二钾（edta—k2）抗凝剂进行血细胞计数,但引起血小板不正常的黏附、聚集,导致抗凝静脉血血小板结果假性减少,导致对检验结果的错误理解、极易误诊,而且使患者承受不必要的进一步检查,增加了患者的医疗费用及痛苦,应引起同行们的注意。
现将抗凝剂edta-k2导致血小板假性减少的4例病例分析如下。
1 资料与方法1.1 一般资料：临床资料来源于我院近几年中收制的4例患者，临床症状表现为：头晕，无头痛、耳鸣、恶心、呕吐、视物旋转，无心慌、心前区不适，无咳嗽、咯痰、胸闷、气短，无腹泻、腹胀、腹痛，4例患者均未予正规治疗，上述症状加重后，遂来本院就诊。
1.2 治疗方法：全自动血细胞计数仪检测。
机器型号：mek-7222k五分类血细胞分析仪，试剂（溶血剂、稀释液、清洗液）为仪器配套试剂，全血校准液及全血质控物由日本光电工业株式会社提供。
血细胞计数严格按照操作规程进行：edta-k2抗凝血检测血小板及抗凝血涂片显微镜观察血小板分布情况、末梢微量血（20 μl）稀释检测血小板及末梢血涂片显微镜观察血小板分布情况。
2 结果edta-k2抗凝血检测血小板偏低，涂片血小板聚集；末梢血检测血小板接近实际数值，涂片血小板分布正常。
edta-k2抗凝剂在某种情况下可导致血小板发生聚集，引起血细胞计数仪检测的血小板减少。
若临床反馈检验结果与临床不符合时，检验人员应引起高度重视，查找原因，及时避免错误结果，这样有助于提高检验质量，增强责任心。
EDTA依赖假性血小板减少症临床表现、发生机制、怀疑情况及处理措施
EDTA依赖假性血小板减少症临床表现、发生机制、怀疑情况及处理措施EDTA依赖假性血小板减少症乙二胺四乙酸是国际血液学标准化委员会推荐进行全血细胞计数时首选的抗凝剂。
EDTA具有对血液样本中的细胞形态和计数影响非常小等优点，目前在临床广泛使用。
但在少数情况下，EDTA可以引起血小板聚集，在血细胞分析仪上进行检测时，造成血小板计数的假性减低，这种现象被称为EDTA依赖性假性血小板减少。
疾病发生率约为0.09%—0.21%。
EDTA依赖假性血小板减少症的发生机制目前还不明确，普遍认为可能与EDTA诱导血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa复合物中隐藏抗原的暴露或对其进行修饰，导致自身抗体的产生有关。
可以确定发生EDTA依赖假性血小板减少症的原因之一是在EDTA盐作为抗凝剂的前提下，出现的免疫介导的冷抗血小板自身抗体。
EDTA依赖假性血小板减少怀疑情况1、血小板计数<100 X 109 /L。
2、室温下EDTA抗凝的标本发生血小板减少，由其他抗凝剂抗凝的标本或是将标本保存在37摄氏度，能大大削减血小板减少程度。
3、随标本采集到检测时间的延长，血小板计数越来越低。
4、血涂片显示或血球仪提示有血小板聚集。
5、缺乏血小板减少的临床症状和表现，如出血。
处理措施1、仪器法。
重新采样，用肝素抗凝管或枸橼酸盐抗凝管等非EDTA-K2分别抽取静脉血2ml，充分混匀，在10min内完成测定。
2.手工计数法。
采新鲜指血20ul，稀释后由专业检验人员计数两次并取均值。
3、无任何抗凝剂抽血立即上机，血小板结果也是可以供参考。
4、瑞氏染色涂片镜检看血小板的聚集情况再估算其数量。
5、预稀释仪器法:采新鲜指血20ul，加入稀释液120ul，进行1:7稀释后，在1h内用预稀释法进行测定。
6、对这类患者采血之前抗凝剂中添加阿米卡星纠正。
警惕“EDTA依赖性假性血小板减少症”
警惕“EDTA依赖性假性血小板减少症”EDTA即乙二胺四乙酸，是常用血常规检测的抗凝剂已被ICSH 认定,并得到了广泛应用。
我们平时在病房进行全血细胞分析（血常规）检验时，使用的是紫帽真空管。
这种真空管中就装有EDTA盐抗凝剂。
在因不同理由需要检测血常规的人群中，有极少数人，当其抽出的血液放入紫帽真空管中与EDTA接触，大约十几秒后他的血小板就会发生聚集。
当把这管标本放在全自动血液分析仪上检测，就可能出现假性血小板减少，随着这一标本存放时间的延长，所检测出的血小板计数可能会更低。
另外，由于聚集的血小板在体积上与白细胞相近，还可能会被血液分析仪，误当成白细胞计数，造成白细胞计数的假性增高。
这种现象我们称之为EDTA依赖性假性血小板减少症（EDTA- dependent pseudo thrombocytopenia，PTCP）。
如果这种现象没有被及早识别，可能会给临床工作带来很大的困扰，如延误手术，增加不必要的辅助检查，增加患者的身心痛苦与经济负担等等。
令人欣慰的是，近年来，检验科已经“破获”多起EDTA依赖性假性血小板减少症。
那么，如何识别呢？在临床工作中，凡遇到没有出血表现、但血小板计数却明显减少的患者，均可列入可疑对象进行鉴别。
可使用如下方法：1、同时用紫帽真空管与蓝帽真空管（内含有枸橼酸钠抗凝剂，平时用于检测凝血功能）采血复查，可以发现两根采血管的血小板计数的差别，蓝帽真空管中的血标本检测结果，血小板计数在正常范围内，而紫帽真空管中的血标本检测结果，血小板计数低于正常。
2、用手工法重新进行血小板计数或把血涂片进行瑞氏染色后，直接在显微镜下观察血小板分布情况及其是否有血小板凝集现象进行鉴别。
EDTA-K2造成假性血小板减少，分析其原因有以下两点：1、EDTA-K2可使血液发生免疫介导，产生冷抗血小板抗体，使血小板互相发生凝集现象，这种EDTA依赖的冷抗血小板自身抗体还能直接作用于血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa上，同时这种与血小板结合后的自身抗Fc端又可与淋巴细胞或单核细胞膜上Fc 受体结合，出现卫星现象。
EDTA依赖血小板减少结果分析和纠正措施
起 血 小 板 减 少 是 由 于 ＨＩ 感 染 者 体 内产 生 抗 血 小 板 抗 体 ， Ｖ 形 成 免 疫 复 合 物 ， 致 肝 、 等 单 核 吞 噬系 统 对 血 小 板 破 坏 增 多 ， 导 脾 引 起 血 小板 减 少 而 发 病 。ＨＩ 组 Ｐ Ｔ 降 低 ， Ｖ 正 常 可 能 Ｖ Ｌ ＭＰ 是 由 于原 先 被 ＨＩ Ｖ抑 制 的 骨 髓 正 在 处 于 恢 复 期 ， 血 小 板 分 或
２ ０ ２ ． ０ ６： ４
热 、 胆 红 素 血 症 、 度 黄 疸 等 贫 血 症 状 。从 本 文 资 料 发 现 ， 高 轻 正
细 胞 贫 血 是 ＨＩ 感 染 者 并 发 贫 血 的主 要 类 型 。正 细 胞 贫 血 多 Ｖ
由再 生 障 碍 性 贫 血 、 性 失 血 性 贫 血 、 些 溶 血 性 贫 血 引 急 某
国际检验 医学 杂志 ２１ ０１年 ９月第 ３ 卷 第 １ ２ ４期 Ｉｔ ａ ｄＳｐｅ ｂｒ ０１Ｖ １ ２Ｎ ．４ ｎ ＬｂＭｅ ，ｅｔｍ ｅ １ ，ｏ． ，ｏ１ Ｊ ２ ３
胞 和单 核 细 胞 增 高 。ＡＩ Ｓ 患 者 出 现 血 液 系 统 异 常 是 由 于 Ｄ
ＨＩ 侵 入 人 体 后 ， 包 膜 糖 蛋 白 ｇ ｌ ０和 靶 细 胞 （ Ｄ４。 淋 Ｖ 其 ｐ２ Ｃ ’Ｔ
胞 学 、 织 化 学 、 血 性 试 验 检 查 ， 时 明 确 诊 断 ， 取 正 确 治 组 溶 及 采
疗方案 ， 绝院内交叉感染 ， 免 ＡＤ 杜 避 Ｉ Ｓ的 漏诊 及误 诊 。
参 考 文 献
［ ］ 马 爱 琼 ， 岩 ． 科 学 ［ ． 京 ： 民卫 生 出版 社 ，０ １ ６ ８６ ９ １ 李 内 Ｍ］ 北 人 ２ ０ ：０ —０． ［］ 郭鹏翔． ２ 以血 液 系 统 表 现 为 首 发症 状 的艾 滋 病 临 床 分 析 ［］ 贵 阳 Ｊ． 医 学 院 学 报 ，０ ｏ ３ （ ） ５５ ２ １ ，５ ５ ： ３． ［ ］ 谭 琳 ， 坚 ， 瑜 ． Ｖ／ ＤＳ患 者 并 发 贫 血 的 临床 分 析 ［ ． 明 ３ 杨 谢 ＨＩ ＡＩ 刀 昆 医学 院学 报 ，０ ９ ３ （ ） ８—９ ２ ０ ，ｏ ２ ：６８ ．
EDTA依赖性假性血小板减少的结果分析及处理方法的专题报告
关于血细胞分析中EDTA依赖性假性血小板减少的结果分析及处理方法的专题报告随着医学技术的不断发展，血细胞分析即我们常说的血常规检测已经成为医学检验科最基本、最常用的检测项目之一。
全自动血细胞分析仪的普及和使用使血细胞分析更加的快速、准确、便捷，但在实际工作中常有一些异常因素的影响，使结果受到干扰。
下面就平时工作中遇到的EDTA依赖性血小板聚集引起的假性血小板减少所产生的影响和解决办法作一专题报告，望能给大家提供参考。
研究对象：为探讨假性血小板减少的影响因素，选取xxxx.xx-xxxx.xx 期间本科室Symex-xxxx全自动血细胞分析仪检测出血小板偏低，但仪器结果提示存在血小板凝集或异常分布，分析血小板直方图合散点图考虑血小板凝集的标本，提示可能存在血小板假性减少，对这类标本进行涂片染色镜检及血小板手工计数进行复检。
研究方法：血小板计数假性偏低可存在多种因素的影响，包括采血不顺、标本未及时混匀、存在自身血小板抗体等。
首先，检查标本是否合格，抽血试管是否存在错管、标本量不足等问题，排除标本有无凝块。
其次，检查仪器自身是否失控，查看仪器质控结果，发现仪器在控，排除仪器自身原因造成血小板结果波动较大，查看仪器结果提示存在血小板凝集或异常分布，分析血小板直方图考虑血常规凝集，然后进行人工镜检。
取标本进行推片瑞氏染色后镜检，高倍镜下可见片尾及两侧可见血小板成堆成簇聚集，初步估算血小板实际并不少，可判断血细胞分析仪检测结果与镜检不符，人工[1]计数可见境下血小板聚集成堆，血小板检测结果为假性血小板减少，怀疑为EDTA依赖性血小板聚集引起的假性血小板减少。
EDTA依赖性血小板凝集能够引起血小板检测结果假性偏低。
血小板平均体积MPV明显增高，PCT可无明显的异常，血小板分布宽度改变。
当血小板出现不明原因的减低，血小板直方图提示分布异常时，要及时手工涂片染色观察是否有血小板的聚集，还要进行手工计数。
为避免误诊，建议患者重新抽血复查：重新采样，用EDTA和枸橼酸钠抗凝负压管同时采血2mL，混匀后血细胞分析仪10min内完成检测，同时采取患者末梢血20ul稀释后进行计数板计数，取两次计数均值。
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板。
考虑可能是患者药物干扰或者是E DT A依赖性假性血小板减少而引起。
在镜下观察时查到疟原虫2例,而在血细胞分析仪上均未反映出。
在血常规检测中,现代化先进的血细胞分析仪大大提高了工作效率,但在操作中要熟悉其性能,并对异常图形和有报警提示的标本进行人工涂片镜检。
只有两者密切结合才能保证结果的准确性、报告的可靠性,否则容易引起临床误诊和漏诊。
在此呼吁广大检验工作者要重视细胞形态学检验,相应的主管部门也要采取培训、继续教育等形式给检验工作者提供学习细胞形态检验的机会,创造重视形态学检验的氛围。
使血常规检验真正成为快捷又准确的常规检验项目。
参考文献:[1] 卢兴国.应重视和提升传统血液形态学检验诊断水平[J].中华检验医学杂志,2006,(6)29:4812482.[2] 王永才.血液骨髓细胞检验诊断学[M].大连:大连出版社,1995.[3] 邓家栋.临床检验学[M].上海:上海科学技术出版社,2002:6992700.[4] 王久菊.仪器法与手工法计数肝硬化患者白细胞结果比较[J].中国误诊学杂志,2008,8(3):542.(收稿日期:2008203211)E DT A抗凝剂引起的血小板减少和白细胞增多魏 娟1,左 红2(1.石河子大学医学院第一附属医院,新疆石河子832000;2.农十师医院,新疆北屯836000) [关键词]E DT A抗凝剂;影响;血小板减少 [中图分类号]R558+.2 [文献标识码]B [文章编号]167125098(2008)1521948202PL T D ecrea s e and W BC I n crea se ca us ed by ED TA An ticoagulan tW E I Juan1,Z UO Hong2(1.The F irst Affili a ted Hospit a l of M edica l College of Shihezi U ni versity,Shihezi,Xinjiang832000,China;2.The H os pita l of Agricultura l tenth D ivi sio n,B eitui,Xinjiang836000,China) Key wor d s:E DT A anticoagul ant;Effect;P LT decrease 目前临床血液学一般检查最常用的检测仪器是血细胞分析仪,它以检测速度快、精确度高、操作简便的优势为临床提供着有用的实验指标,对疾病的诊断和治疗有重要的意义。
全血细胞分析常用的抗凝剂E DT A对细胞形态和血小板计数影响很小,它不影响细胞数目及体积大小,对红细胞形态影响最小,而且还可以抑制血小板聚集。
根据国际血液学标准化委员会1993年文件建议血细胞计数用E DT A2K2作抗凝剂,用量为E DT A2K222H2O1.5mg/m l～2m g/m l血液。
近年来因EDT A引起血小板聚集发生血小板假性减少并不少见,下面是1例血小板减少患者,经试验分析为E DT A依赖性假性血小板减少(E DT A2PT CT)。
1 资料与方法1.1 临床资料 患者,男,64岁,因肺癌多次入院化疗,此患者在门诊行血常规化验示血小板正常(检测结果距抽血不超过30m i n),入院血球分析示血小板计数明显低于参考值范围。
(检测结果距抽血时间2h)。
1.2 仪器与试剂 深圳迈瑞公司Bc-3000全血细胞分析仪,与仪器配套试剂及质控品。
1.3 材料 E DT A2K2真空静脉采血管,枸橼酸钠(1∶9)真空静脉采血管,草酸铵稀释液,瑞氏染液,盐酸稀释液。
1.4 方法 分别用E DT A2K2、枸橼酸钠抗凝管各采外周静脉血2.0m l,于采血后即刻、0.5h、1h、2h在血细胞分析仪上测定并记录WBC、P LT及M P V,采集患者手指末稍血20μl加0.38m l盐酸及草酸铵稀释液进行手工WBC、P LT计数,并制备血涂片观察血小板数量,形态和分布情况。
2 结果见表1。
表1 不同时间两种抗凝血W BC、PL T及M PV三项参数结果指标即刻EDTA 枸橼酸钠0.5hE DTA 枸橼酸钠1hEDT A 枸橼酸钠2hEDT A 枸橼酸钠WBC(×109/L)9.69.410.59.514.09.515.88.8 P LT(×109/L)26225818825210424348245 M P V(fl)7.87.88.27.88.97.59.07.6 使用EDT A2K2抗凝剂的样本PLT随着时间延长快速下降,M V增大,WB计数增高,使用枸橼酸钠抗凝剂的样本三项参数结果在内稳定,手工计数WB、LT数与仪器上即刻测定的数值相一致,血涂片镜检血小板聚集,随着时间延长血小板聚集越明显。
该患者血凝分析正常,全身皮肤无出血现象,住院后血小板减少属于假性减少,跟样本周转时间长有关。
3 讨论8491实用医技杂志2008年5月第15卷第15期(旬刊) JP MT,May.2008,Vo l.15,No.15(Issued Every Ten Days)P C2h C P目前血液分析仪多采用电阻抗法为原理进行血细胞分类和计数。
根据血细胞相对非导电性质悬浮在电解质溶液中的细胞颗粒在通过计数小孔时可引起电阻的变化为基础,对血细胞进行计数和体积测定,可见它只是以细胞体积大小来进行。
采用E D T A2K2抗凝的样本随着时间延长血小板聚集,分析仪不能计数凝集的血小板,导致本在正常范围的血小板计数很低,当聚集成堆与白细胞体积接近时可被细胞分析仪当作白细胞进行计数,造成此患者血小板假性减少和白细胞假性增多。
涂片显微镜下血小板形态也有所变化,EDT A抗凝血中的血小板形态由圓盘状变为椭形球状,体积增大,使电阻抗法血细胞分析仪脉冲增大,引起M PV增大。
研究资料表明,E DT A依赖性假性血小板减少症是由E D2 T A盐抗凝时可诱导血小板互相聚集,堆积发生卫星现象(血小板围绕在单核细胞或淋巴细胞周围呈现卫星现象)致使全自动血细胞分析仪不能确认血小板而计数偏低[1]。
E DT A抗凝血引起的假性血小板减少可见于正常人,但多数情况下伴发某些疾病如癌症、自身免疫性疾病、传染性单核细胞增多症、肺心病、肝病及一些原因不明的病症[2]。
E DT A依赖性假性血小板减少现象应该受到重视,特别是住院患者的抗凝血样本,在临床工作中,对于出现的单纯血小板减少应结合患者的病情、体征、血凝分析等实验室检查综合分析,首先排除E DT A2PT CT的可能,力求为临床提供最准确的信息。
遇到类似现象,我们可采取相应的措施予以纠正,以获取准确的实验数据。
如采用抽血后立即检测、手工计数血小板及血涂片镜检或采用其他种类抗凝剂来鉴别。
有文献报道,当EDT A依赖性血小板减少时,可用其他抗凝剂作血小板计数,可避免血小板假性减少,如枸椽酸钠或NaF[3]。
参考文献:[1] 宓庆梅,施巍宇,郝婉莹,等.E DTA依赖性血小板减少症1例[J].中华检验杂志,2004,27(10):719.[2] 鲁家才,程正江,姚汝.两种药物对EDT A依赖性血小板聚集的抑制作用[J].临床检验杂志,2004,22:1982199.(收稿日期:2008203208)苦参素联合胸腺肽治疗慢性乙型肝炎前后血清学变化金 芳,吴伯祥,杨学祥(解放军第22医院,青海格尔木816000) [关键词]苦参素;胸腺肽;乙型肝炎 [中图分类号]R512.6+2 [文献标识码]B [文章编号]167125098(2008)1521949202 为了探讨苦参素联合胸腺肽治疗慢性乙型肝炎的疗效,通过我院于2002年至2007年5年应用苦参素联合胸腺肽治疗的28例慢性乙肝患者进行追踪观察,通过患者治疗前后血清学变化情况,发现疗效女性患者优于男性患者,感染病程相对短的优于感染病程比较长的患者,血ALT水平高者优于水平比较低的,同有的资料相符[1]。
1 材料与方法1.1 一般资料 28例患者,男23例,女5例;年龄15岁～38岁;乙肝病史0a～29a之间(有的患者在出现消化道症状时才查体发现)。
血小板≥100×109/L,白细胞≥4×109/L,H B e A g阳性,H B s Ag阳性,丙氨酸氨基转移酶(ALT)(181.5±37.2)U/L,胆红素(TSB)(31.7±6.1)μmol/L,清蛋白≥35g/ L。
半年内未行抗病毒、细胞毒性药物及免疫调节治疗,治疗时嘱患者忌酒、慎用肝脏损害药物。
患者全部符合2000年西安病毒性肝炎防治诊断标准[2]。
1.2 治疗方法 先采用苦参素400m g,肌肉注射1次/d,共4周,后改为苦参素400mg口服。
胸腺肽40mg入壶1次/d,共2周,后改为40m g皮下注射3次/周(胸腺肽为黑龙江飞峡制药有限公司生产)。
共治疗48周,治疗期间复查肝功、肾功、血常规、乙肝五项、2抗原等。
B、2抗原阴转,但B阳性时,可适当延长治疗周。
结果完全应答(显效)6例(21.43%),ALT复常,HBeAg阴转,H B s Ag阴转;部分应答(有效)17例(60.71%),A L T复常, HBeAg阴转,但H B s Ag阳性;无应答(无效)5例(17.86%),未达到上述标准。
持续应答9例(7例病程≤5a,2例病程> 5a),患者停药6个月～12个月仍为显效或有效。
女性3例完全应答,2例为部分应答。
3 讨论苦参素的成分为氧化苦参碱,是从豆科植物苦豆草的种子苦豆子或豆科植物苦参的根种提取的一种生物碱,具有抗炎、抗氧化、抗病毒、保护肝细胞等作用[3];氧化苦参碱可诱导细胞内干扰素等因子产生,从而加强病毒基因产物的降解[4]。
同时苦参素具有调节免疫、升白细胞、消肿和阻断细胞凋亡作用;可以促进肝细胞的再生和修复,降低转氨酶、减轻肝细胞的坏死和炎症,同时可以增强胆汁流速,消退黄疸,抗肝纤维化[5,6],因而可修复肝细胞。
胸腺肽为28个氨基酸组成的多肽,能促进Tc的成熟及产生多种淋巴因子,使干扰素、I L22和I L23分泌增多,抑制CD8+细胞,促进CD4+细胞的成熟,改善CD4+细胞的功能,促进患者免疫功能恢复以清除H BV,胸腺肽还具有减轻肿瘤坏死因子(T NF)的细胞毒作用及提高补体调理素水平,减少内毒素产生的作用。
因而可修复肝细胞,阻断及抑制BV2DN复制,提高苦参素治疗的效果。
两种药联合作用增强了抗病毒的作用。
9491实用医技杂志2008年5月第15卷第15期(旬刊) J P MT,M ay.2008,Vol.15,No.15(Iss ued Every Ten Days)pre s1H e Ag pre s1H s Ag122H A。