阴离子交换柱的使用
阴离子交换整体柱对蛋白质的分离与纯化
阴离子交换整体柱对蛋白质的分离与纯化蛋白质是有机体中微小细胞结构的重要组成部分，它有着复杂的结构，而且受到它们的生物活动和环境因素的影响。
要正确完成蛋白质的分析和研究，就必须完成其分离与纯化。
阴离子交换整体柱被认为是最有效的蛋白质分离与纯化方法之一。
阴离子交换整体柱是一种常用的分离和分离技术，它利用阴离子交换剂作为分离活性体，以微量化合物的阴离子立体结构形式将其结合成细胞外阴离子质粒，这样就可以根据它们的电荷来实现蛋白质的分离与纯化。
阴离子交换整体柱可以用来分离和纯化多种蛋白质。
首先，蛋白质可以根据它们不同的电荷类型分离。
其次，它可以用来分离多种相似的蛋白质，特别是具有相似分子量和电荷的蛋白质，因为它可以从样品中分离出非常纯的单一蛋白质。
最后，阴离子交换整体柱可以用来分离具有复杂结构的蛋白质，如多糖蛋白和蛋白激酶，这样就可以分析它们的活性。
在实际应用中，利用阴离子交换整体柱进行蛋白质分离与纯化的实验流程主要包括以下几个步骤：首先，样品分散；其次，加入膜；然后，利用阴离子交换剂对膜上的样品进行阴离子交换；最后，洗涤、重组。
阴离子交换整体柱技术在蛋白质分离与纯化领域具有重要的应用价值，它不仅可以有效地分离蛋白质，而且可以将某种蛋白质从复杂的样本中分离出来，最终得到高质量和高纯度的蛋白质，这是完成对蛋白质进行分析和研究的关键。
但是，阴离子交换整体柱技术也有一些缺点。
由于部分样品或细胞因素的影响，可能会影响整体柱的结构，使分离的结果受到一定的影响。
同时，某些蛋白质的分离可能会受到抗原的影响，这也是一个不利的因素。
此外，不同的蛋白质对阴离子交换剂的反应也是不同的，这样也可能影响蛋白质的分离结果。
因此，要有效地完成蛋白质分离与纯化，阴离子交换整体柱技术具有重要的应用价值。
但是，在实际应用中，还必须考虑到技术的局限性，并采取相应的措施来解决问题，以确保获得最佳的分离结果。
总之，阴离子交换整体柱技术已成为一种重要的蛋白质分离与纯化方法，其应用价值已获得许多研究者的高度重视，它不仅可以用来分离不同类型的蛋白质，而且可以将具有复杂结构的蛋白质分离出来，最终以高纯度的蛋白质来完成对蛋白质的分析和研究。
氨基阴离子交换固相萃取柱
氨基阴离子交换固相萃取柱1. 简介氨基阴离子交换固相萃取柱是一种常用的分析技术，用于分离、富集和纯化样品中的目标化合物。
它利用氨基功能团与目标化合物之间的相互作用，实现对目标化合物的选择性吸附和洗脱。
2. 原理氨基阴离子交换固相萃取柱的填料通常是具有氨基功能团的聚合物。
这些氨基功能团可以与样品中的阴离子形成静电吸引力或氢键作用，从而使目标化合物被选择性地吸附在柱上。
在样品通过柱时，目标化合物会与填料表面上的氨基功能团发生相互作用，从而被保留在柱上。
其他非目标化合物则会通过洗脱剂将其冲洗出去。
通过改变洗脱剂的条件，可以将目标化合物从柱上洗脱下来。
3. 操作步骤以下是使用氨基阴离子交换固相萃取柱进行样品处理的一般步骤：1.准备样品：将待分析的样品准备好，可以是液体或溶液形式。
2.柱预处理：根据柱的要求，进行柱的预处理。
通常包括用洗脱剂进行柱的平衡和激活。
3.样品加载：将样品通过柱，让目标化合物与填料上的氨基功能团发生相互作用，被吸附在柱上。
4.洗脱非目标化合物：使用洗脱剂冲洗柱，将非目标化合物从柱上洗脱。
5.目标化合物洗脱：通过改变洗脱剂的条件，将目标化合物从柱上洗脱下来。
6.收集样品：收集洗脱得到的样品，用于后续分析或其他处理。
4. 应用领域氨基阴离子交换固相萃取柱在许多领域中得到广泛应用，包括但不限于：•环境监测：用于水体、土壤等环境样品中有机污染物的富集和分离。
•食品安全：用于食品中农药、重金属等有害物质的分离和检测。
•药物分析：用于药物样品中杂质的去除和纯化。
•生物医学研究：用于生物样品中蛋白质、核酸等生物大分子的富集和纯化。
5. 优势和限制氨基阴离子交换固相萃取柱具有以下优势：•选择性强：可以根据目标化合物的性质选择不同类型的氨基阴离子交换柱，实现对目标化合物的高效选择性吸附。
•富集能力强：可以将目标化合物从复杂的样品基质中富集到足够浓度，便于后续分析。
•操作简便：操作步骤相对简单，不需要复杂的仪器设备。
阴离子交换色谱柱安全操作及保养规程
阴离子交换色谱柱安全操作及保养规程阴离子交换色谱柱（Anion Exchange Chromatography Column）是一种常用的色谱分离技术。
在实验中，操作人员需要密切关注柱子的使用情况，以确保实验结果的准确性和人身安全。
本文将介绍阴离子交换色谱柱的基本操作规程和保养维护方法。
一、操作规程1. 准备工作•在进行操作之前，需要将色谱柱和固定装置进行清洁消毒。
•提前准备好所需的阴离子交换色谱树脂并按照要求进行催化活化。
•校准pH和Elution Buffer的浓度。
2. 样品预处理•根据实验要求对样品进行预处理，以提高阴离子交换色谱柱分离效果。
•样品必须保持干燥和无菌状态，以防止杂质和细菌的干扰。
•样品pH值和盐浓度的调整应根据实验要求进行。
3. 样品注入•注入样品之前，必须先将磷酸缓冲液从柱子上进行洗脱。
•样品注入时，流量应控制在柱子最大负荷的1/3以内。
•样品的浓度应根据实验要求进行，一般情况下，其浓度控制在0.2-1.0mg/mL。
4. 洗脱和洗涤•洗脱液的浓度要根据实验需要进一步调节。
一般而言，扰动强度和洗脱浓度成正比。
•在洗涤前，应该先用纯水或缓冲液将杂质洗出。
•洗脱和洗涤过程中，需要测定各阶段的洗脱液pH值，以确定实验关键点。
5. 清洗和储存•在操作结束后，需要对柱子进行清洗，以保证下次使用时能正常使用。
•阴离子交换色谱柱的储存条件需要根据实验方法进行。
一般来说，常温下可储存6-12个月。
二、柱子保养1. 储存和清洗•在使用之后，需要对柱子进行彻底的清洗，并将其储存在干燥通风的环境中。
•没有独立的储存条件时，柱子应储存在关闭的塑料袋内，以保证干燥和无菌状态。
•使用前应先对柱子进行检查，确定是否有磨损或裂纹等损坏状况。
2. 身体安全•在插入阴离子交换色谱柱或更换样品时，要避免接触柱子的端口或开启柱子，以免溶液或样品误飞溅。
•在使用过程中，要避免柱子突然断裂，防止溶液渗漏造成身体伤害。
阴离子交换层析洗脱顺序
阴离子交换层析洗脱是一种非常常见的技术，在生物分离、分析和纯化中有广泛的应用。
它的核心思想是利用阴离子交换层的特殊性质，将目标分子和其他成分分离出来，从
而达到纯化的目的。
阴离子交换层析洗脱的具体操作步骤是：首先在阴离子交换柱中，通过设定不同浓度
的离子交换剂，将留下的阴离子与离子交换剂结合，使其形成离子交换层；然后，将样品
溶剂添加到离子交换层中，采用不同的洗脱条件，将样品中的目标分子和其他成分分离出来；最后，通过不同的洗脱水流，将洗脱出的目标分子和其他成分收集起来。
由于阴离子交换柱具有良好的保留性，因此，阴离子交换层析洗脱技术是非常有效的，可以达到较高的分离效率，从而获得高纯度的分子。
此外，阴离子交换层析洗脱还具有操作简单，使用成本低等优点，目前已成为生物分离、分析和纯化的重要技术手段。
但是，要获得较高纯度的目标分子，需要根据具体样品
的特性来调整阴离子交换层析洗脱的顺序，以及各个步骤的参数，以确保洗脱效率和纯度。
阴离子交换柱的使用
阴离子交换柱使用手册注意Chrompack IonoSpher A色谱柱填充的是改性硅胶材料。
向柱内导入碱性溶剂（pH>6.5）或酸性溶剂（pH<2.5）会溶解硅胶材料导致柱子损坏。
在使用这个柱子之前，你要充分地熟悉这本手册讲述的内容。
1．简介Chrompack IonoSpher A 柱填充硅胶基质的强阴离子交换材料，含有季胺功能团。
特别设计用于使用常规HPLC分析有机和无机阴离子。
2．色谱柱老化在开始分析工作以前，柱子必须经过正确的老化。
一个没有正确老化的柱子可能会带来问题，诸如很差的柱效或者分离情况发生变化等等。
要老化这类柱子，首先要使用甲醇淋洗，然后使用去离子水。
再用你选用的洗脱液进行平衡。
在发货以前，每根柱子都已经测试过并进行了老化。
因此没有必要在第一次使用时用水冲洗）。
3．洗脱液推荐在这类柱上使用的洗脱液要求低电导，或者UV吸收的缓冲液，例如磷酸缓冲液，pH范围从2.5到6.5。
绝对不能使用水杨酸缓冲液，因为水杨酸分解产物会改变固定相的性质。
另外，硝酸铵（1mM）可以改善峰型，而且不会明显影响保留时间，检测或定量结果。
洗脱液在使用以前要脱气，并用0.45微米滤膜过滤，防止发生检测和泵送问题。
一定要在开始使用系统以前检查有否微生物生长，否则你的柱子会堵塞，柱压会升高到无法接受的水平。
4．流量和压力注意：最高压力：不锈钢柱：4500psi；玻璃柱：3000psi增加流速或者降低流速要采取小的间隔变化以防止填充床的扰动。
如果你想更换柱子，，要降低流量至0，等待洗脱液完全流出柱子为止（2分钟）。
拆除柱子而没有等待压力的降低会损坏柱子。
高柱压的产生一般是由于不正确地使用柱子的结果。
使用保护柱（见第6节）会防止污染物沉积在分析柱上。
5．样品准备保持柱子长寿的关键是进样前适当的的样品处理。
你必须防止将疏水性/与流动相极性差别很大的化合物泵入色谱柱，不管是来自流动相还是样品。
特别地，要禁止导入颗粒杂质。
湖北阴离子交换柱工作原理
湖北阴离子交换柱工作原理
湖北阴离子交换柱是一种常用的分离和纯化离子的技术工具，其工作原理如下：
1. 柱填充阴离子交换介质：柱中填充有一种阴离子交换介质，通常是一种具有大量阴离子交换基团的树脂。
这些基团具有亲和性，可以与待分离溶液中的阴离子发生离子交换。
2. 样品加载：待分离的溶液通过柱的顶部或侧面加入，样品溶液中的阴离子与阴离子交换基团发生离子交换反应。
根据样品的性质和需要，可以通过控制样品流速和溶液pH等条件来调
节样品中阴离子与阴离子交换基团的交换程度。
3. 阴离子吸附与洗脱：阴离子交换基团与样品中的阴离子进行离子交换后，被吸附在柱内，不被洗脱出来。
其他未被吸附的样品成分则通过柱底部排出。
为了完全洗脱目标物质，可以使用具有不同离子强度的洗脱缓冲液来冲洗柱子。
4. 目标物质的收集：经过多次洗脱后，目标物质会被逐步洗脱到柱的底部，可以使用收集管或分馏釜等设备来收集目标物质。
收集的目标物质可以进一步进行分析、纯化或其他处理。
总之，湖北阴离子交换柱通过阴离子交换基团与样品中的阴离子发生离子交换反应，实现了对目标物质的分离、纯化和富集。
其工作原理与样品的性质、离子交换基团的特性以及柱的设计等因素密切相关。
阴离子交换柱使用手册
阴离子交换柱使用手册阴离子交换柱使用手册Chrompack HPLC IonoSpher A Columns注意Chrompack IonoSpher A色谱柱填充的是改性硅胶材料。
向柱内导入碱性溶剂(pH>6.5)或酸性溶剂(pH<2.5)会溶解硅胶材料导致柱子损坏。
在使用这个柱子之前，你要充分地熟悉这本手册讲述的内容。
1.简介Chrompack IonoSpher A柱填充硅胶基质的强阴离子交换材料，含有季胺功能团。
特别设计用于使用常规HPLC分析有机和无机阴离子。
2.色谱柱老化在开始分析工作以前，柱子必须经过正确的老化。
一个没有正确老化的柱子可能会带来问题，诸如很差的柱效或者分离情况发生变化等等。
要老化这类柱子，首先要使用甲醇淋洗，然后使用去离子水。
再用你选用的洗脱液进行平衡。
在发货以前，每根柱子都已经测试过并进行了老化。
因此没有必要在第一次使用时用水冲洗）。
3.洗脱'推荐在这类柱上使用的洗脱液要求低电导，或者UV吸收的缓冲液，例如磷酸缓冲液，pH范围从2・5到6・5。
绝对不能使用水杨酸缓冲液，因为水杨酸分解产物会改变固定相的性质。
另外，硝酸鞍（lmM）可以改善峰型，而且不会明显影响保留时间，检测或定量结果。
洗脱液在使用以前要脱气，并用0. 45微米滤膜过滤，防止发生检测和泵送问题。
一定要在开始使用系统以前检查有否微生物生长，否则你的柱子会堵塞，柱压会升高到无法接受的水平。
4.流量和压力注意：最高压力：不锈钢柱：4500psi；玻璃柱:3000psi增加流速或者降低流速要釆取小的间隔变化以 防止填充床的扰动。
如果你想更换柱子”要降低流量至0,等待洗 拆除柱子而没有等待压力的降低会损坏柱子。
高柱压的产生一般是由于不正确地使用柱子的 结果。
使用保护柱（见第6节）会防止污染物沉积在分 析柱上。
5. 样品准备保持柱子长寿的关键是进样前适当的的样品处 理。
你必须防止将疏水性/与流动相极性差别很 大的化合物泵入色谱柱，不管是来自流动相还 是样品。
阴离子交换色谱柱原理
阴离子交换色谱柱原理
阴离子交换色谱柱是一种常用于分离和分析阴离子化合物的色谱柱。
其基本原理是利用柱内填充有带有阴离子交换功能的固定相，通过与待分离样品中的阴离子相互作用，实现不同阴离子之间的分离。
以下是阴离子交换色谱柱的基本原理：
1.固定相：
•阴离子交换色谱柱的固定相通常是一种含有阴离子交换官能团的树脂或凝胶。
这些官能团能够与待分离的阴离子发生静电
吸引作用。
2.吸附和解吸附：
•待分离样品中的阴离子在色谱柱的固定相表面被吸附。
随着流动相的流动，不同阴离子的吸附程度因其与固定相的相互作
用而有所不同。
随后，通过改变流动相条件，如提高盐浓度或调
整pH 值，实现阴离子的解吸附，从而完成分离。
3.排列次序：
•阴离子交换色谱柱会按照阴离子的亲和性进行排列，即对于相同流动相条件下，首先解吸附的是与固定相相互作用较弱的
阴离子，而与固定相相互作用较强的阴离子会在后面依次解吸
附。
4.选择性：
•色谱柱的选择性可以通过调整流动相的条件来改变。
增加盐浓度或调整pH 值等条件变化可以调节阴离子与固定相之间的
相互作用强度，从而实现对不同阴离子的选择性调控。
5.检测方法：
•阴离子交换色谱通常与不同的检测方法结合使用，如电导检测器、折射率检测器或UV-Visible 光谱检测器等，以便对分
离得到的阴离子进行检测和定量。
阴离子交换色谱柱在环境监测、生物化学、食品安全等领域得到广泛应用，能够有效地分离和分析不同阴离子化合物。
阴离子交换柱的原理
阴离子交换柱的原理阴离子交换柱是一种用于离子交换和分离的实验室装置。
它的主要原理是在柱中放置了一定量的阴离子交换树脂，当样品通过这个树脂柱时，它会被分离成不同的离子并被捕获在树脂中。
在这个过程中，阴离子交换柱的化学成分起着非常重要的作用。
阴离子交换柱的树脂化学成分阴离子交换柱中的树脂通常是由含有具有阴离子交换能力的功能基团的高分子糖构成的。
这些功能基团通常是负电荷的，如四乙基铵-碘离子、季铵盐、醋酸树脂等。
这些阴离子交换树脂能够吸附和分离带正电电荷的阳离子，而不被带负电荷的阴离子所吸附。
阴离子交换柱的使用原理使用阴离子交换柱时，样品被加入到柱的顶端，逐渐渗透到树脂层。
在这个过程中，样品中的离子会与树脂中的阴离子交换基团发生化学反应，导致不同离子的分离。
离子和基团之间的反应通常是通过离子扩散的方式完成的，离子通过扩散到基团的表面，与基团发生反应并被捕获。
例如，在分离硫酸根离子和氯离子时，硫酸根会通过扩散到树脂表面与基团反应，而氯离子则会被吸附在树脂内部。
这种分离取决于离子的大小、电荷以及树脂的化学成分。
阴离子交换柱的应用阴离子交换柱广泛应用于分离和提纯有机物和无机物。
它们常用于化学、生物和制药实验室中进行离子层析、蛋白质和酶的纯化。
此外，它们还可以用来分离和确定水中的无机污染物或存在于食品中的各种添加剂。
阴离子交换柱的优势与其他分离和纯化技术相比，阴离子交换柱具有许多优势。
它们可以实现高效的分离和提纯，在分离分子尺寸非常接近时仍然可以实现良好的分离效果，同时还可以量化分离的目标物。
总结阴离子交换柱是一种重要的实验室装置，其原理是利用阴离子交换树脂分离和捕捉离子。
柱内的树脂具有特定的化学成分和电荷特性，可与待分离的离子发生化学反应，从而实现分离和纯化。
阴离子交换柱广泛应用于化学、生物、制药和食品行业，其优势在于高效的分离，良好的分离效果和量化分离的目标物。
阴离子色谱柱的操作 色谱柱操作规程
阴离子色谱柱的操作色谱柱操作规程离子色谱柱管内填有颗粒大小均匀的固定相，一般商品化离子色谱柱填料紧要用5～15μm颗粒的高分子聚合物小球，特定场合下也接受无机氧化物（如硅胶）颗粒；离子色谱柱管内填有颗粒大小均匀的固定相，一般商品化离子色谱柱填料紧要用5～15μm颗粒的高分子聚合物小球，特定场合下也接受无机氧化物（如硅胶）颗粒；目前离子色谱柱所用填料的颗粒紧要为球形，而针对填料表面结构性质（孔隙的大小），填料可以分别微孔型、大孔型和超孔型，随着离子色谱应用于多而杂样品越来越多，对离子色谱柱的交换容量要求也越来越高，超孔型填料也是离子色谱的一个进展趋势。
阴离子色谱柱操作注意事项（1）必需在色谱柱的流路管线完全充分淋洗液后才能将色谱柱连接到色谱仪上。
（2）按色谱柱上标识的流路方向连接色谱柱。
（3）淋洗液中可添加适量的有机溶剂进行改性（低于50%乙腈或甲醇等）。
（4）推举使用温度是35C，建议配备柱温箱使用。
温度与各离子的洗脱时间有确定相关性，温度更改，离子的洗脱时间会有所变化。
（5）开泵后保持流量低于0.5mLUmin，之后渐渐加添流量至工作流量。
（6）含有有机物和杂质的样品，请先对样品进行前处理后再进样分析。
阴离子色谱柱特点阴离子色谱柱是款高容量，高效，疏水性阴离子交换色谱柱。
用于分别大范围价态阴离子，包括多磷酸盐,聚磷酸酯,和其他多价的多而杂试剂如EDTA和NTA。
使用的多磷酸盐，和螯合剂在多而杂样品矩阵。
硫化物确定使用氢氧化钠和废水样品安培检测。
分析使用的六价铬柱后反应和环境介质吸取可见光检测，包括废水铬，饮用水和空气。
独立的无机和有机种饮用水中砷和尿液样本。
高容量，更高辨别率。
需要更长的保留时间，但是分别度更高。
促进良好表征样品中有机酸和阴离子的快速分析。
特别适合分别多而杂样品基质或未表征样品中的有机酸和阴离子。
建议用于一价和二价有机酸。
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阴离子交换柱使用手册
注意
Chrompack IonoSpher A色谱柱填充的是改性硅胶材料。
向柱内导入碱性溶剂（pH>6.5）或酸性溶剂（pH<2.5）会溶解硅胶材料导致柱子损坏。
在使用这个柱子之前，你要充分地熟悉这本手册讲述的内容。
1．简介
Chrompack IonoSpher A 柱填充硅胶基质的强阴离子交换材料，含有季胺功能团。
特别设计用于使用常规HPLC分析有机和无机阴离子。
2．色谱柱老化
在开始分析工作以前，柱子必须经过正确的老化。
一个没有正确老化的柱子可能会带来问题，诸如很差的柱效或者分离情况发生变化等等。
要老化这类柱子，首先要使用甲醇淋洗，然后使用去离子水。
再用你选用的洗脱液进行平衡。
在发货以前，每根柱子都已经测试过并进行了老化。
因此没有必要在第一次使用时用水冲洗）。
3．洗脱液
推荐在这类柱上使用的洗脱液要求低电导，或者UV吸收的缓冲液，
例如磷酸缓冲液，pH范围从2.5到6.5。
绝对不能使用水杨酸缓冲液，因为水杨酸分解产物会改变固定相的性质。
另外，硝酸铵（1mM）可以改善峰型，而且不会明显影响保留时间，检测或定量结果。
洗脱液在使用以前要脱气，并用0.45微米滤膜过滤，防止发生检测和泵送问题。
一定要在开始使用系统以前检查有否微生物生长，否则你的柱子会堵塞，柱压会升高到无法接受的水平。
4．流量和压力
注意：最高压力：不锈钢柱：4500psi；玻璃柱：3000psi
增加流速或者降低流速要采取小的间隔变化以防止填充床的扰动。
如果你想更换柱子，，要降低流量至0，等待洗脱液完全流出柱子为止（2分钟）。
拆除柱子而没有等待压力的降低会损坏柱子。
高柱压的产生一般是由于不正确地使用柱子的结果。
使用保护柱（见第6节）会防止污染物沉积在分析柱上。
5．样品准备
保持柱子长寿的关键是进样前适当的的样品处理。
你必须防止将疏水性/与流动相极性差别很大的化合物泵入色谱柱，不管是来自流动相还是样品。
特别地，要禁止导入颗粒杂质。
这些最终都会造成操作压力的增高而且非常困难或者不可能去除。
6．保护柱
一定要使用保护柱，因为样品和洗脱液污染可能会造成柱压力的增高而且影响选择性。
对于ChromSep 柱我们建议使用ChromSep Anion 交换保护柱。
当柱压增高的或者观察到柱效降低的时候就需要更换保护柱了。
对于常用不锈钢柱，我们建议使用Chromguard Anion exchange High Efficiency（高效）柱(10X3.0mm) 或High Capacity（高容量）柱(50X3.0mm)。
7．进样量和浓度
当样品的洗提强度比洗脱液低（在柱样品预浓缩）的时候，更高的样品量也可以注射。
8．温度
Chrompack IonoSpher A 柱可以在室温环境使用。
为了提高柱子的稳定性，建议不要在40°C以上使用。
9．贮存
在贮存柱子以前，建议先用去离子水，然后用甲醇冲洗。
一定不要在柱子内充满缓冲液或者其他含盐类的洗脱液的情况下贮存色谱柱。
10．检测灵敏度
对于使用邻苯二甲酸缓冲液作为洗脱液的阴离子的检测，以下几种方法可用：
²折光检测
²电导检测
²紫外检测
邻苯二甲酸缓冲液对所有三种检测方法都是特别好的，因为邻苯二甲酸缓冲液具有高的折光性，相对低的电导率和紫外吸收性质。
检测波长取决于要检测的离子。
11．系统峰
当你使用Chrompack IonoSpher A 柱的时候，系统峰可能会出现。
通常一个馏分既溶剂在前面，第二个馏分应当是硫酸盐。
方向（正峰或负峰）取决于样品的pH。
位置取决于流动相的Ph。
较低pH会使系统峰向前移动。
在我们的实验中pH值在3.8-4.3之间最佳。
12．柱效损失的可能原因
1．额外的峰展宽。
要保证管路的长度和内径都保持最小。
2．洗脱的平衡时间不够。
3．不正确的洗脱液pH或洗脱液的离子强度。
4．洗脱液中存在不正确离子。
5．固定相污染。
a.高柱压伴随分辨率降低。
1．颗粒物积聚在烧结物或者填充物床上。
（a）样品来源---过滤或离心
（b）洗脱液来源---过滤洗脱液，封闭洗脱液容器。
（c）系统来源---冲洗整个系统管路和泵；安装在线系统过滤器。
2．蛋白质类物质的积聚
（a）微生物在样品中生长。
3．微生物在洗脱液中生长。
b.正常柱压伴随柱效降低
1．有机污染
（a）样品中有脂肪，油脂，脂质。
固定相的表
面被覆盖。
（b）从样品中带来的不确切的有机物或未正
确制备的洗脱液。
（c）在洗脱液制备完成以后带入洗脱液中的
非特定有机物，例如在运输时从大气中带来。
13.对于纠正污染问题的可能有效的操作
1．准备新鲜的洗脱液
在很多情况下，柱效的丧失可以归结为洗脱液的污染。
所以，要在使用柱子以前准备新鲜的洗脱液，冲洗所有液体管路。
洗脱液应当用0.2到0.4微米的滤膜过滤，在使用以前要脱气。
2．色谱柱再生
要进行色谱柱的再生工作
a．首先使色谱柱反向
b．以0.4ml/min的流速用1M硝酸铵洗脱30ml。
c．以0.4ml/min的流速用40：60 （v：v）的甲醇/水洗脱30ml。
d．以0.4ml/min的流速用异丙醇洗脱30ml。
e．以0.4ml/min的流速用水洗脱30ml。
f．以0.4ml/min的流速用洗脱液洗脱30ml。
g．将柱子转回正常方向。
用洗脱液平衡。
以上内容由美国瓦里安技术中国有限公司北京办事处李华译自Chrompack IonoSpher A 柱随柱附带操作手册。