离子交换柱使用说明
离子交换色谱柱的选择与使用方法
离子交换色谱柱的选择与使用方法离子交换色谱是一种常用的分析技术，广泛应用于生物医学、环境监测、食品安全等领域。
离子交换色谱柱的选择与使用方法对于分析结果的准确性和分离效果的好坏起着至关重要的作用。
下面将从色谱柱的选择、样品前处理和操作注意事项三个方面来论述离子交换色谱柱的选择与使用方法。
一、色谱柱的选择在选择离子交换色谱柱时，需要考虑以下几个因素：柱子的固定相、尺寸和柱容。
固定相是影响色谱分离效果的重要因素之一。
常见的固定相有强阳离子交换剂和强阴离子交换剂。
对于需要分离阳离子的样品，适合选择具有强阴离子交换剂的柱子，反之亦然。
另外，还要考虑离子交换剂的亲和性和选择性，以确保对目标物的分离和检测具有高效性和准确性。
柱子的尺寸和柱容是根据待分离样品的数量和目标物的分离程度来确定的。
对于大样品量或需要高分辨率的分离情况，选择直径较大、长度较长的柱子可以提高分离效果。
而对于样品量较小、目标物之间的分离程度要求不高的情况，可以选择直径较小、长度较短的柱子来节省时间和费用。
二、样品前处理离子交换色谱分析前，样品的前处理非常重要。
一般采用样品的萃取、浓缩和调整pH值等方法来改善分析结果。
对于液态样品，可以采用萃取柱或固相萃取的方法来富集目标物。
常见的富集方法有离子交换富集、聚焦富集和反相富集等。
根据样品的性质和分析要求选择合适的富集方法，能够提高检测灵敏度和减少干扰物的影响。
对于固体样品，需要进行样品的前处理，如颗粒的研磨、样品的溶解和过滤等。
特别是对具有高离子强度的样品，还需要进行离子基质的去除，以提高分析结果的准确性。
此外，样品的pH值也需要进行调节，以使目标物适应离子交换柱的工作条件。
三、操作注意事项在使用离子交换色谱柱时，还需要注意以下几点，以保证分析结果准确可靠。
首先，要注意保持色谱柱的清洁和充分的平衡。
清洗色谱柱的方法有水洗、有机溶剂洗和碱洗等，应根据实际分析需要来选择适当的清洗方法。
平衡色谱柱的目的是为了使色谱柱内的离子交换剂和溶剂达到平衡状态，从而提高柱子的使用寿命和分离效果。
Thermo离子交换色谱柱使用和维护说明-ThermoFisherScientific
Thermo 离子交换色谱柱使用和维护说明首先，感谢您选择性能优越的Thermo色谱柱产品。
为了使您的色谱柱能发挥最大的性能，敬请先阅读以下说明：1、适用类型Thermo离子交换色谱柱包括：BioBasic AX，SCX，Hypersil SAX，Hypersil Gold AX，SAX等。
2、柱体积色谱柱的柱体积可以通过以下公式估算：V=0.68 πr2LV为色谱柱柱体积（mL），r为色谱柱内径（cm），L为色谱柱长度（cm）。
3、色谱柱柱效测试与保存离子交换色谱柱出厂时都经过柱效测试，请参考柱效报告。
在条件允许情况下，请对新色谱柱进行柱效测试。
离子交换色谱柱出厂时均保存在乙醇溶液中（如有不同，以柱效报告为准）。
4、温度所有硅胶基质色谱柱使用温度应低于60℃。
5、样品最好将样品溶解在流动相或极性相近的溶剂中。
如果使用梯度洗脱，则需要将样品溶解在初始流动相或极性相近的溶剂中。
样品溶液不应含有任何颗粒物，最好使用0.5μm或更小粒径的滤膜过滤。
同时建议在色谱系统中使用在线过滤器。
6、流动相所用溶剂通常为水、乙腈、甲醇等，Thermo的离子交换色谱柱可以100%水为流动相，进行盐的梯度洗脱。
流动相中含有机相时，请注意降低盐的浓度，以防止溶剂混合后盐从流动相中析出。
更换流动相时也要注意这一问题，可先用含较高纯水的流动相除盐过渡。
请将流动相的pH值控制在2-8。
缓冲盐浓度在500 mM以下。
所有流动相，最好当日实验当日配制，并使用2μm滤膜过滤。
7、色谱柱安装请小心操作色谱柱。
不要摔、碰色谱柱，这样会损坏色谱柱床，使色谱柱性能下降。
使用合适的连接管路和接头，确保色谱柱连接处死体积降到最低（使用不锈钢接头时需要尤其注意）。
我们建议使用SLIPFREE 接头，此接头与Thermo色谱柱以及其他品牌色谱柱均完美匹配。
8、色谱柱平衡新柱在使用前，请预先用20倍柱体积甲醇/或乙腈冲洗色谱柱，然后以初始流动相（不含盐）冲洗10倍柱体积。
阴离子交换色谱柱安全操作及保养规程
阴离子交换色谱柱安全操作及保养规程阴离子交换色谱柱（Anion Exchange Chromatography Column）是一种常用的色谱分离技术。
在实验中，操作人员需要密切关注柱子的使用情况，以确保实验结果的准确性和人身安全。
本文将介绍阴离子交换色谱柱的基本操作规程和保养维护方法。
一、操作规程1. 准备工作•在进行操作之前，需要将色谱柱和固定装置进行清洁消毒。
•提前准备好所需的阴离子交换色谱树脂并按照要求进行催化活化。
•校准pH和Elution Buffer的浓度。
2. 样品预处理•根据实验要求对样品进行预处理，以提高阴离子交换色谱柱分离效果。
•样品必须保持干燥和无菌状态，以防止杂质和细菌的干扰。
•样品pH值和盐浓度的调整应根据实验要求进行。
3. 样品注入•注入样品之前，必须先将磷酸缓冲液从柱子上进行洗脱。
•样品注入时，流量应控制在柱子最大负荷的1/3以内。
•样品的浓度应根据实验要求进行，一般情况下，其浓度控制在0.2-1.0mg/mL。
4. 洗脱和洗涤•洗脱液的浓度要根据实验需要进一步调节。
一般而言，扰动强度和洗脱浓度成正比。
•在洗涤前，应该先用纯水或缓冲液将杂质洗出。
•洗脱和洗涤过程中，需要测定各阶段的洗脱液pH值，以确定实验关键点。
5. 清洗和储存•在操作结束后，需要对柱子进行清洗，以保证下次使用时能正常使用。
•阴离子交换色谱柱的储存条件需要根据实验方法进行。
一般来说，常温下可储存6-12个月。
二、柱子保养1. 储存和清洗•在使用之后，需要对柱子进行彻底的清洗，并将其储存在干燥通风的环境中。
•没有独立的储存条件时，柱子应储存在关闭的塑料袋内，以保证干燥和无菌状态。
•使用前应先对柱子进行检查，确定是否有磨损或裂纹等损坏状况。
2. 身体安全•在插入阴离子交换色谱柱或更换样品时，要避免接触柱子的端口或开启柱子，以免溶液或样品误飞溅。
•在使用过程中，要避免柱子突然断裂，防止溶液渗漏造成身体伤害。
阴离子交换柱使用手册
阴离子交换柱使用手册阴离子交换柱使用手册Chrompack HPLC IonoSpher A Columns注意Chrompack IonoSpher A色谱柱填充的是改性硅胶材料。
向柱内导入碱性溶剂(pH>6.5)或酸性溶剂(pH<2.5)会溶解硅胶材料导致柱子损坏。
在使用这个柱子之前，你要充分地熟悉这本手册讲述的内容。
1.简介Chrompack IonoSpher A柱填充硅胶基质的强阴离子交换材料，含有季胺功能团。
特别设计用于使用常规HPLC分析有机和无机阴离子。
2.色谱柱老化在开始分析工作以前，柱子必须经过正确的老化。
一个没有正确老化的柱子可能会带来问题，诸如很差的柱效或者分离情况发生变化等等。
要老化这类柱子，首先要使用甲醇淋洗，然后使用去离子水。
再用你选用的洗脱液进行平衡。
在发货以前，每根柱子都已经测试过并进行了老化。
因此没有必要在第一次使用时用水冲洗）。
3.洗脱'推荐在这类柱上使用的洗脱液要求低电导，或者UV吸收的缓冲液，例如磷酸缓冲液，pH范围从2・5到6・5。
绝对不能使用水杨酸缓冲液，因为水杨酸分解产物会改变固定相的性质。
另外，硝酸鞍（lmM）可以改善峰型，而且不会明显影响保留时间，检测或定量结果。
洗脱液在使用以前要脱气，并用0. 45微米滤膜过滤，防止发生检测和泵送问题。
一定要在开始使用系统以前检查有否微生物生长，否则你的柱子会堵塞，柱压会升高到无法接受的水平。
4.流量和压力注意：最高压力：不锈钢柱：4500psi；玻璃柱:3000psi增加流速或者降低流速要釆取小的间隔变化以 防止填充床的扰动。
如果你想更换柱子”要降低流量至0,等待洗 拆除柱子而没有等待压力的降低会损坏柱子。
高柱压的产生一般是由于不正确地使用柱子的 结果。
使用保护柱（见第6节）会防止污染物沉积在分 析柱上。
5. 样品准备保持柱子长寿的关键是进样前适当的的样品处 理。
你必须防止将疏水性/与流动相极性差别很 大的化合物泵入色谱柱，不管是来自流动相还 是样品。
阳离子交换柱
阳离子交换柱什么是阳离子交换柱阳离子交换柱是一种常见的离子交换柱子，它能够去除水中阳离子，使水质变得更加纯净。
在水处理、化学分析、实验室和生产流程中都得到了广泛的应用。
阳离子交换柱由极性阴离子交换基团和非极性多孔基质构成。
在水中，阳离子交换柱会吸附阳离子，与其阳离子交换基团上的阴离子发生离子交换。
通常，碱性和中性化合物会更容易被吸附。
阳离子交换柱在实验室中非常常见，因为它们可以帮助去除水中的离子，使化学试剂更加純淨。
而在工业上，他们可以被用于水处理过程，例如去除硬度物质（例如钙和镁）和为生产肥料和化學制品过程中净化液体。
怎样选择阳离子交换柱阳离子交换柱的选择取决于所需应用的目的。
通常，选择合适的阳离子交换柱是基于需要去除的特定阳离子以及样品中的其他化合物。
选择适当的交换柱将确保最大程度地去除目标阳离子，并保持溶液的化学性。
在选择阳离子交换柱时，需考虑以下因素：•样品的pH：样品的pH可能影响某些硬度物质的离子交换和柱的稳定性。
如果样品很酸或很碱，那么可能需要考虑选择不同的交换柱。
•阳离子浓度：低浓度的阳离子可能需要更特定的柱子进行去除。
高浓度则需选择更大的柱子或使其经历更长时间的运行。
•样品组分：某些物质需要更长的时间或更高的柱子容量去除。
如何使用阳离子交换柱使用阳离子交换柱可分为以下步骤：1.确定样品pH值：使用pH计或试纸是确定样品pH的常见方式。
2.选择合适的柱子：依据所需去除的阳离子，选择合适的柱子。
小体积的样品可使用小柱子，而处理大体积的液体则需使用大体积的柱子。
3.准备柱子：添加适量的离子交换树脂到阳离子交换柱中。
4.将样品通过交换柱：将样品在柱子中通过。
根据样品的化学性质、柱子尺寸和流量的速度选择复流。
5.洗涤交换树脂：通过挤压或在柱中洗涤具有中性溶液的样品，并将离子和杂质从交换柱上清除。
6.获取结果：收集通过柱子后的样品，在搅拌或振摇之后可以测定。
阳离子交换柱的优点阳离子交换柱比其他水处理方法具有以下优点：1.不受温度和压力影响：阳离子交换柱不受制于温度或压力，因此在很多不同的环境条件下都可以使用。
阴离子交换柱使用手册
阴离子交换柱使用手册Chrompack HPLC IonoSpher A Columns注意Chrompack IonoSpher A色谱柱填充的是改性硅胶材料。
向柱内导入碱性溶剂（pH>6.5）或酸性溶剂（pH<2.5）会溶解硅胶材料导致柱子损坏。
在使用这个柱子之前，你要充分地熟悉这本手册讲述的内容。
1．简介Chrompack IonoSpher A 柱填充硅胶基质的强阴离子交换材料，含有季胺功能团。
特别设计用于使用常规HPLC分析有机和无机阴离子。
2．色谱柱老化在开始分析工作以前，柱子必须经过正确的老化。
一个没有正确老化的柱子可能会带来问题，诸如很差的柱效或者分离情况发生变化等等。
要老化这类柱子，首先要使用甲醇淋洗，然后使用去离子水。
再用你选用的洗脱液进行平衡。
在发货以前，每根柱子都已经测试过并进行了老化。
因此没有必要在第一次使用时用水冲洗）。
3．洗脱液推荐在这类柱上使用的洗脱液要求低电导，或者UV吸收的缓冲液，例如磷酸缓冲液，pH范围从2.5到6.5。
绝对不能使用水杨酸缓冲液，因为水杨酸分解产物会改变固定相的性质。
另外，硝酸铵（1mM）可以改善峰型，而且不会明显影响保留时间，检测或定量结果。
洗脱液在使用以前要脱气，并用0.45微米滤膜过滤，防止发生检测和泵送问题。
一定要在开始使用系统以前检查有否微生物生长，否则你的柱子会堵塞，柱压会升高到无法接受的水平。
4．流量和压力注意：最高压力：不锈钢柱：4500psi；玻璃柱：3000psi增加流速或者降低流速要采取小的间隔变化以防止填充床的扰动。
如果你想更换柱子，，要降低流量至0，等待洗脱液完全流出柱子为止（2分钟）。
拆除柱子而没有等待压力的降低会损坏柱子。
高柱压的产生一般是由于不正确地使用柱子的结果。
使用保护柱（见第6节）会防止污染物沉积在分析柱上。
5．样品准备保持柱子长寿的关键是进样前适当的的样品处理。
你必须防止将疏水性/与流动相极性差别很大的化合物泵入色谱柱，不管是来自流动相还是样品。
【精选】实验八 离子交换柱层析
层析柱中先倒入2cm左右的缓冲液——将 洗至中性的树脂用缓冲液冲洗一遍——然后 将树脂倒入到层析柱中——装到离柱口2cm 处——然后剪一小圆形滤纸，垫在树脂上(注 意树脂不要跑到滤纸上面去)
3. 氨基酸的洗脱：
准备64支刻度试管——编号——用移液管取1ml 混合氨基酸——加入柱中——然后马上开始用刻度 试管接洗脱液——每支试管接1ml（注意控制层析 柱的速度，慢一点较好）——同时注意层析柱中缓 冲液的液面不要低于滤纸，注意及时补充缓冲液， 保持液面不变
组数 第一组 第二组 第三组 第四组 第五组 第六组 第七组 第八组
用量 0 ml 8ml 16ml 24ml 32ml 40ml 48ml 56ml 筒接
试管 1～8 9～16 17～24 25～32 33～40 41～48 49～56 57～64 号
如表所示： 用量筒接取本组相应数值的洗脱液后，再用试管接
实验八 离子交换柱 层析分离氨基酸
一 实验原理
各种氨基酸分子的结构不同， 在同一pH时与离子交换树脂的亲 和力有差异，因此可依亲和力从小 到大的顺序被洗脱液洗脱下来，达 到分离的效果。
二 实验步骤
1. 树脂的准备：
将干的树脂用水浸泡一天——然后用 2mol/L的HCl浸泡1h——然后再用2mol/L的 NaOH浸泡1h——然后用水洗至中性(已做好)
4. 测OD值:
收集ห้องสมุดไป่ตู้0支试管后——每支试管中加入1 ml显色 剂——然后在沸水浴中加热15min——冷却——每 支试管加1.5ml 50％乙醇——搅拌均匀——静置 10min——测OD570nm，以第二管为参比管
5. 以洗脱体积为横坐标，以OD值为纵坐标作图。
离子交换柱操作规程
离子交换柱操作规程离子交换柱是一种常用于离子交换色谱和固相提取等实验的分析仪器。
为了确保操作的准确性和安全性，以下是离子交换柱的操作规程。
1. 准备工作：- 检查离子交换柱是否完好无损，确保没有破损或泄漏。
- 根据实验需要，选择合适的离子交换柱，注意柱子的尺寸和容量。
- 检查离子交换柱的连接件，确保连接紧密，无松动或漏气现象。
- 检查进样装置的连接件，确保连接正确，避免样品泄漏或进样不准确。
- 准备好所需的离子交换液和缓冲液，并检查液相槽中的储液器液位。
2. 取样：- 根据实验需要，准备好待分析的样品，并确保样品符合实验要求，如样品浓度、体积等。
- 根据实验要求，将样品进行预处理，如过滤、稀释等。
- 使用合适的容器，将样品放入进样装置中，并确保样品装载正确，避免泄漏或样品损坏。
3. 设置实验参数：- 打开离子交换色谱仪或固相提取仪的电源，并打开仪器的控制界面。
- 根据实验要求，选择合适的实验方法和参数，如流速、温度、梯度等。
- 设置好仪器的运行参数，并确保仪器能够按照设置的参数进行实验。
4. 运行仪器：- 通过控制界面，启动离子交换色谱仪或固相提取仪，开始实验。
- 监控仪器的运行状态，观察柱子是否出现异常现象，如流速变慢、压力异常等。
- 定期检查液相槽中的储液器液位，确保液位充足，避免储液器干涸导致实验中断。
- 根据实验要求，定期检查柱子的背压，当背压超出正常范围时，需及时进行维护和保养。
5. 实验结束：- 实验完成后，关闭离子交换色谱仪或固相提取仪，断开电源。
- 拆下离子交换柱，并进行清洗和保养。
- 清洗离子交换柱时，注意使用正确的洗涤溶液，并按照操作手册进行清洗步骤。
- 清洗完成后，将离子交换柱安装回仪器，并进行储存。
总结：离子交换柱的操作规程包括准备工作、取样、设置实验参数、运行仪器和实验结束。
在操作过程中，需要注意柱子和连接件的状态，确保操作的准确性和安全性。
同时，定期对离子交换柱和仪器进行维护和保养，延长仪器的使用寿命。
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阳离子交换柱使用注意（下）
进样量和浓度
当样品的洗提强度比洗脱液低（在柱样品预浓缩）的时候，更高的样品量也可以注射。
贮存
在贮存柱子以前，建议先用去离子水，然后用甲醇冲洗。
一定不要在柱子内充满缓冲液或者其他含盐类的洗脱液的情况下贮存色谱柱。
检测灵敏度
对于阳离子的检测，建议进行电导率的测定,使用前面提到的低电导洗脱液。
柱效损失的可能原因
1．额外的峰展宽。
要保证管路的长度和内径都保持最小。
2．洗脱的平衡时间不够。
3．不正确的洗脱液pH或洗脱液的离子强度。
4．洗脱液中存在不正确的阴离子。
制备新鲜的洗脱液。
5．固定相污染。
a. 高柱压伴随分辨率降低。
1．颗粒物积聚在烧结物或者填充物床上。
（a）样品来源---过滤或离心
（b）洗脱液来源---过滤洗脱液，封闭洗脱液容器。
（c）系统来源---冲洗整个系统管路和泵；安装在线系统过滤器。
2．蛋白质类物质的积聚
（a）微生物在样品中生长。
（b）微生物在洗脱液中生长。
b. 正常柱压伴随柱效降低
1．有机污染
（a）样品中有脂肪，油脂，脂质。
固定相的表面被覆盖。
（b）从样品中带来的不确切的有机物或未正确制备的洗
脱液。
（c）在洗脱液制备完成以后带入洗脱液中的非特定有机
物，例如在运输时从大气中带来。
对于纠正污染问题的可能有效的操作
1．准备新鲜的洗脱液
在很多情况下，柱效的丧失可以归结为洗脱液的污染。
所以，要在使用柱子以前准备新鲜的洗脱液，冲洗所有液体管路。
洗脱液应当用0.2到0.4微米的滤膜过滤，在使用以前要脱气。
2．色谱柱再生
要进行色谱柱的再生工作
a．首先倒转色谱柱
b．以0.4ml/min的流速用1M硝酸铵洗脱30ml。
c．以0.4ml/min的流速用40：60 （v：v）的甲醇/水洗脱30ml。
d．以0.4ml/min的流速用异丙醇洗脱30ml。
e．以0.4ml/min的流速用水洗脱30ml。
f．以0.4ml/min的流速用洗脱液洗脱30ml。
g．将柱子转回正常方向。
用洗脱液平衡。