第七章 微 生 物 的 生长 繁殖与及其控制
第七章 第二节、微生物代谢与生长
反馈抑制
其它实例：谷氨酸棒杆菌的精氨酸合成
2.分支代谢途径中的反馈抑制：
在分支代谢途径中，反馈抑制的情况较为复杂，为了避免在 一个分支上的产物过多时不致同时影响另一分支上产物的供 应，微生物发展出多种调节方式。主要有： 同功酶的调节， 顺序反馈，协同反馈，积累反馈调节等。
五、微生物的代谢调控
• 微生物代谢过程中的自我调节 • 酶活性的调节 • 酶合成的调节
☆微生物自我调节代谢的方式
1.控制营养物质透过细胞膜进入细胞
如：只有当速效碳源或氮源耗尽时，微生物才合 成迟效碳源或氮源的运输系统与分解该物质的酶 系统。
2.通过酶的定位控制酶与底物的接触 3.控制代谢物流向:
1、有氧呼吸
概念:是以分子氧作为最终电子(或氢)受体的氧化 过程；是最普遍、最重要的生物氧化方式。 途径：EMP,TCA循环 特点：必须指出，在有氧呼吸作用中，底物的氧化 作用不与氧的还原作用直接偶联，而是底物在氧化 过程中释放的电子先通过电子传递链（由各种电子 传递体，如NAD,FAD,辅酶Q和各种细胞色素组成） 最后才传递到氧。
在工业发酵和科研中通常采取一定的措施缩短延滞期：
①通过遗传学方法改变种的遗传特性使迟缓期缩短； ②利用对数生长期的细胞作为“种子”；
③尽量使接种前后所使用的培养基组成不要相差太 大；
④适当扩大接种量等方式缩短迟缓期，克服不良的 影响。
2.对数期
特点：细菌数量呈对数增加；生长速度常数R最大；酶系活跃， 细菌代谢旺盛；群体中的细胞化学组成及形态、生理特征一 致，且细菌的形态、大小、染色性均典型，对外界环境因素 的作用比较敏感。
影响指数期微生物增代时间的因素 菌种；营养成分；营养物的浓度 发酵工业上尽量延长该期，以达到较高的菌体密度； 实验室研究细菌生物学性状和做药敏试验选取用对数期细菌 为佳（多数为8~18h培养的培养物）
微生物生长与控制习题及答案
第七章微生物的生长及其控制习题一、名词解释1．微生物连续培养2．抗微生物剂3．抗生素4．抗代谢物5．微生物的抗药性6．灭菌7．消毒8．生长曲线9.深层液体培养：二、填空题1．一条典型的生长曲线至少可分为、、和4个生长时期。
2．测定微生物的生长量常用的方法有、、和。
而测定微生物数量变化常用的方法有、、和；以生物量为指标来测定微生物生长的方法有、和。
3．获得细菌同步生长的方法主要有（1）和（2），其中（1）中常用的有、和。
4．控制连续培养的方法有和。
5．影响微生物生长的主要因素有、、、和等。
6．对玻璃器皿、金属用具等物品可用或进行灭菌；而对牛奶或其他液态食品一般采用灭菌，其温度为，时间为。
7．通常，细菌最适pH的范围为，酵母菌的最适pH范围为，霉菌的最适pH值范围是。
8．杀灭或抑制微生物的物理因素有、、、、和等。
9．抗生素的作用机制有、、和。
10．抗代谢药物中的磺胺类是由于与相似，从而竞争性地与二氢叶酸合成酶结合，使其不能合成。
三、选择题1．以下哪个特征表示二分裂？（）A、产生子细胞大小不规则B、隔膜形成后染后体才复制C、子细胞含有基本等量的细胞成分D、新细胞的细胞壁都是新合成的。
2．代时为0.5h的细菌由103个增加到109个时需要多长时间？（）A、40hB、20hC、10hD、3h3．如果将处于对数期的细菌移至相同组分的新鲜培养基中，该批培养物将处于哪个生长期？（）A、死亡期B、稳定期C、延迟期D、对数期4．细菌细胞进入稳定期是由于：①细胞已为快速生长作好了准备；②代谢产生的毒性物质发生了积累；③能源已耗尽；④细胞已衰老且衰老细胞停止分裂；⑤在重新开始生长前需要合成新的蛋白质（）。
A、1，4B、2，3C、2，4D、1，55．对生活的微生物进行计数的最准确的方法是（）。
A、比浊法B、显微镜直接计数C、干细胞重量测定D、平板菌落记数6．下列哪咱保存方法全降低食物的水活度？（）A、腌肉B、巴斯德消毒法C、冷藏D、酸泡菜7．连续培养时培养物的生物量是由（）来决定的。
第七章 微生物的生长及其控制 第三节 影响微生物生长的主要因素
重 最低生长温度
要 最适生长温度
指 标
最高生长温度
微生物作为整体来言，其温度的三基点是极其宽的， 堪称“生物世界之最”。
15℃
25~37℃
55℃
对某一具体微生物来说，其生长温度的宽和窄与
它们长期进化过程中所处的生存环境温度有关。
宽温微生物
一些生活在土壤中的芽孢杆菌（15～65℃）； 既可在人体大肠中生活，也可在体外环境中生活 的E. coli （10～47.5℃）；
5. 厌氧菌（anaerobes）
一般厌氧菌
严格厌氧菌（专性厌氧菌，
strict or obligate anaerobes）
特点：
① 分子氧对它们有毒，即使短期接触也会抑制甚至致死； ② 在空气或含10％CO2的空气中，它们在固体或半固体培 养基的表面上不能生长，只有在其深层的无氧或低氧化还 原势的环境下才能生为5类
1. 专性好氧菌（obligate or strict strictaerobe）
必须在较高浓度分子氧（～0.2巴）的条件下才能 生长，它们有完整的呼吸链，以分子氧作为最终氢受体，
含有超氧化物歧化酶（superoxide dismutase ，SOD）和 过氧化氢酶（catalase）。
③ 生命活动所需能量是通过发酵、无氧呼吸、循环光 合磷酸化或甲烷发酵等提供； ④ 细胞内缺乏SOD和细胞色素氧化酶，大多数还缺乏 过氧化氢酶。
常见的厌氧菌：
Clostridium（梭菌属）、 Bacteroides（拟杆菌属）、 Fusobacterium（梭杆菌属）、 Bifidobacterium（双歧杆菌属）、 以及各种光合细菌和产甲烷菌（methanogens）等。
一般的乳酸菌多数是耐氧菌，
微生物7 微生物的生长及其控制
第七章 微生物的生长及其控制
z z z z z z
生长 (growth)：个体体积或重量的变化 繁殖 (reproduction)：个体数量的变化 个体生长→个体繁殖→群体生长 群体生长＝个体生长 ＋ 个体繁殖 生长和繁殖是交替进行的 衡量群体生长的量： 重量、体积、密度、浓度、个体数目等 生理指标：测含氮量、测含碳量、测磷、 DNA、RNA、ATP、呼吸
第一节 微生物生长的测定
测定生长量 测体积 称干（湿）重 比浊法 颜色改变单位 生理指标法：测含氮量 测含碳量 测磷、DNA、RNA、ATP 呼吸
微生物生长的测定
测细胞的个数
¾比例计数法 ¾血球计数法 ¾平板活菌计数法：
菌落形成单位 (cfu, colony forming unit） ¾膜过滤法 ¾稀释摇管法
比浊法
turbidity
血球计数法
z
又被称为Petroff-Hausser counting。
平板活菌计数法
平板活菌计数法的两种策略——涂布 和倾注
膜过滤法——用于较稀溶液的计数 方法
膜过滤法
硝酸纤维素滤膜法是最经典的获得同步生长的方法
由于细胞的个体差异，同步生长往往只能维持2-3随后又逐渐转变为随机生长。
邻苯基苯酚
六氯酚
哈拉腙
十六烷基吡啶氯
氯苯甲烷铵
丙炔内酯Disinfectants and antiseptics。
第七章微生物的生长与环境条件ppt课件
根据公式：G = （t2 - t1 ）/3.3 ·lg (x2 /x1)
t2 - t1 = （4 - 0）× 60 min = 240 min
x2 = 108
x1 = 104
lg(x2 /x1 ) = lg108 ~ lg104 = 8 - 4 = 4
代入上式 G = 240/3.3 × 4 = 240/13.2 = 18 min
二、孢子生长
无性孢子繁殖 孢子的生长包括: 孢子肿胀（外源肿胀，不需营养；内源肿胀，需要营养）; 萌发管形成; 菌丝生长。
有性孢子繁殖 第一阶段是质配（plasmogamy） 第二阶段为核配（karyogamy） 第三阶段是减数分裂（meiosis）
第三节 环境条件对微生物生长的影响
生长是微生物与外界环境因素共同作用的结果。环境条件的 改变，在一定限境条件的某些改 变；当环境条件的变化超过一定极限，则导致微生物的死亡。 研究环境条件与微生物之间的相互关系意义重大。本节将较 多地涉及各种物理、化学因素对微生物生长的抑制与致死的 影响。
用最高稳定期的培养物接种
抑制DNA合成法
利用代谢抑制剂阻碍DNA合成相当一段时间，然后再解除 其抑制，也可达到同步化的目的。试验证明：氨甲蝶呤、 5-氟脱氧尿苷、羟基尿素、胸腺苷、脱氧腺苷和脱氧鸟 苷等，对细胞DNA合成的同步化均有作用。
总之，机械法对细胞正常生理代谢影响很少；而诱导同步分裂 虽然方法多，应用较广，但对正常代谢有时有影响，而且对其 诱导同步化的生化基础了解很少，化学诱导同步化的本质还是 一个尚待研究的问题。
在对数生长期内，细菌数目的增加是按指数级数增加的，即 20 →2 1 →22 →23 ……2n 这里的指数 n 为细菌分裂的次数或者增殖的代数，也就是一 个细菌繁殖n代产生2n 个细菌。 如果在对数期开始时间 t1的菌数为 x1 ，繁殖 n 代后到对数 期后期t2的菌数为 x2，则代时（Generation time，G）（即 每增加一代所需要的时间）应为：
第七章 微生物的生长繁殖
平板划线分离法
稀释倒平板法
单孢子或单细胞分离法
利用选择性培养基分离法
（一）平板划线分离法
用接种环以无菌操作沾取少许待分离的材料，
在无菌平板表面进行平行划线、扇形划线或其
他形式的连续划线，微生物细胞数量将随着划
线次数的增加而减少，并逐步分散开来，如果
划线适宜的话，微生物能一一分散，经培养后，
① 生长速率常数等于零 ② 细胞形态变大或增长 ③ 细胞内RNA尤其是rRNA含量增高， 原生质呈嗜碱性
④ 合成代谢活跃
⑤ 对外界不良条件反应敏感
影响停滞期长短的因素
接种菌龄：接种龄即“种子” 的群体生长年龄，亦即它处在生长曲 线上的哪一个阶段。实验证明，如果以对数期接种龄的“种子”接种， 则子代培养物的停滞期就短。 接种量：接种量的大小明显影响停滞期的长短。（基数大）
待测菌液与等体积血液混匀涂片； 血液中红细胞数已知； 显微镜下观察菌液细胞与红细胞的比例； 计算：
每毫升菌液的含菌数可通过已知红细胞浓度和菌液细胞与红
细胞的比例计算得知。
细胞的自动计数
电子计数器的工作原理是测定小孔中液体的电阻变化，小孔 仅能通过一个细胞，当一个细胞通过这个小孔时，电阻明显 增加，形成一个脉冲，自动记录在电子记录装置上。 该法测定结果较准确，但它只识别颗粒大小，而不能区分是 否为细菌。因此，要求菌悬液中不含任何碎片。
其群体的规模成正相关。
样品中微生物数量多或生长旺盛，这些指标愈明显，因此可
以借助特定的仪器设备来测定相应的指标。
第二节 微生物的生长曲线
一、细菌的生长曲线
将少量菌种接种在适当的液 体培养基中培养，隔一定时 间取样，计算菌数，以菌数 的对数为纵坐标，生长时间 为横坐标作图，所得的曲线 即为细菌的生长曲线。 典型生长曲线 延滞期(适应期)、对数期、稳定期、衰亡期。
《微生物学》题库第七章微生物的生长及其控制
《微生物学》题库第七章微生物的生长及其控制第一部分微生物生长部分一、单项选择题1、菌株的定义应该是（）。
A.具有相似特性的细胞群体B.具有有限的地理分布的微生物群体C.从一单独的细胞衍生出来的细胞群体D.与种（species）一样定义2、微生物的干重一般为其湿重的（）。
A.5%～10%B.20%～25%C.25%以上D.10%～20%3、用于总活菌计数的方法是（）A.浊度计比浊法B.血球板计数法C.平板菌落计数法D.显微镜直接计数法4、下列不属于微生物直接计数法特点的是（）A.必须利用显微镜计数B.可以区分活菌与死菌C.不能区分活菌与死菌D.计数室都是400小格组成5、一个细菌每10分钟繁殖一代，经1小时将会有多少个细菌（）A.64B.32C.9D.16、代时是指（）。
A.从对数期结束到稳定期开始的间隔时间B.培养物从接种到开始生长所需要的时间C.培养物的生长时间D.细胞分裂繁殖一代所需要的时间7、微生物分批培养时，下列符合延迟期的特点是（）。
A.微生物的代谢机能非常不活跃B.菌体体积增大C.菌体体积不变D.菌体体积减小。
8、制备原生质体，选择适宜的菌龄期为（）A.迟缓期B.对数期C.稳定期D.死亡期。
9、下述那个时期细菌群体倍增时间最快（）A.稳定期B.衰亡期C.对数期D.延滞期10、细菌芽孢产生于（）A.对数生长期B.衰亡期C.稳定期前期D.稳定期后期正确答案：D11、处于（）的微生物，死亡数肯定大于新生数。
A.适应期B.对数期C.稳定期D.衰亡期12、指数期细菌的特点是（）A.细胞以指数速度死亡B.细胞准备开始分裂C.细胞以最快速度进行分裂D.细胞死亡数和分裂数相同13、细菌最适生长温度是（）℃A.35-40B.10-20C.20-30D.30-3514、真菌最适生长温度是（）℃A.35-40B.10-20C.20-30D.30-3515、微生物生长繁殖的最高温度是（）。
A.最高生长温度B.最适生长温度C.致死温度D.无法判断16、下面关于微生物最适生长温度判断，正确的是（）A.微生物群体生长繁殖速度最快的温度B.发酵的最适温度C.积累某一代谢产物的最适温度D.无法判断17、将土壤接种在含放射性碳的葡萄糖培养基中，5天后检查，下列那种情况证明土壤中有生命（）。
东华理工大学环境工程微生物学各章思考题
各章思考题第一章绪论1. 用具体事例说明人类与微生物的关系，为什么说微生物既是人类的敌人，更是我们的朋友？2. 为什么微生物能成为生命科学研究的“明星”?3. 为什么说巴斯德和柯赫是微生物学的奠基人?4.微生物有哪些特点？第二章病毒1、解释下列名词：病毒粒子、前噬菌体、溶源性。
病毒粒子:成熟的病毒感染单位，病毒复制的最后阶段，在宿主脂肪体细胞、血细胞和上皮细胞的核内复制，形成多边形和多角形的包含体，裸露或被囊膜包裹前噬菌体:整合在宿主基因组上的温和噬菌体的核酸溶源性:温和噬菌体DNA具有整合入宿主菌染色质DNA中的特性，成为与宿主菌共生的原噬菌体，能随宿主菌的染色质同步复制而传给子代，这种特性称为溶源性。
2、什么是病毒？病毒有哪些不同于其他微生物之处？（作业1）3、简述病毒的主要化学组成及其结构。
4、试用图示说明下列名词之间的关系：病毒粒子、核芯、衣壳、被膜。
（作业2）5、病毒有哪几种对称类型？每种对称类型病毒的形态是什么？试各举一例。
6、试以T系噬菌体为例说明病毒的增殖过程。
7、病毒是一种致病因子，也是一种具有遗传成分特点的因子，病毒的这种特性有什么生物学意义？（作业3）第三章原核微生物1、试根据细菌细胞结构的特点，分析并举例说明为什么它们能在自然界中分布广泛。
2、细菌、粘细菌、放线菌、霉菌、酵母在繁殖方式上各有什么特点？3、根据革兰氏阳性菌和阴性菌的细胞壁结构和化学组成，解释为什么革兰氏染色后G+呈紫色，G-呈红色？4、比较细菌和放线细群体培养特征的异同。
5、以产甲烷菌为例，总古细菌的特点及其与细菌的不同之处。
第四章真核微生物1、微生物由于个体微小一般都是以其群体形式进行研究或利用，这必然就要涉及到对微生物的培养。
能否找到一种培养基，使所有的微生物都能良好地生长？为什么？2、试结合微生物学实验课的内容，谈谈在选择、配制和使用培养基时应注意哪些方面的内容。
你们在实验中是如何做的？有何体会？3、试比较营养物质进入微生物细胞的几种方式的基本特点。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
第七章微生物的生长繁殖及其控制第一节微生物生长繁殖及其测定一、微生物生长繁殖●个体生长：原生质总量增加，个体增大●繁殖：个体数目增加●群体生长：个体生长＋个体繁殖＋代谢产物增多二、纯培养的分离方法●纯培养：在实验条件下从一个细胞繁殖得到纯种群体●分离原理：稀释样品，使各种细胞分开，再培养，使单个细胞生长繁殖成单菌落.挑取单菌落，再在平板上加以3－5次划线纯化。
●稀释混合倒平板法●涂布法●划线法●单细胞挑取法：用显微挑取器●选择培养基分离法●其它分离方法:产孢菌分离：可先加热，杀死营养细胞，再分离病原微生物分离：选取敏感组织细胞数量少样品分离：先富集培养或浓缩样品三、微生物生长的测定（一）测生长量1 直接法：称重量法：离心沉降物干重测体积法：离心沉降物体积2 间接法比浊法：分光光度计，450～650nm波长生理指标法：含氮量；核酸；好氧量等（二）计繁殖数1 直接法：计数板计数法（如血球计数板）2 间接法：平板菌落计数法为活菌计数法把菌液稀释后，取一定量混合倒平板或涂布平板，培养后，每一个活细胞就形成一个菌落，此即菌落形成单位（colony forming unit,cfu）。
根据每皿上cfu数推算出样品含活菌数稀释倒平皿菌落计数法:第二节微生物的生长规律一、同步生长(synchronous growth)使培养基中细菌同时分裂，处于相同的生长阶段叫同步生长。
获得同步生长(synchronous growth)的方法：诱导法：如芽孢诱导萌发、藻类光照控制机械选择法过滤法离心法二、单细胞微生物的典型生长曲线生长曲线（growth curve）:定量描述液体培养基中微生物群体生长规律的曲线单细胞微生物的典型生长曲线：把少量纯种单细胞微生物接种到恒容积的液体培养基中，在适宜条件下培养，以细胞数目的对数对时间作图所得曲线。
根据生长速率不同可分为延滞期、指数生长期、稳定期和衰亡期单细胞微生物典型生长曲线:（一）延滞期(lag phase)1 延滞期特点●净生长等于零或略有下降●菌体粗大●ＲＮＡ含量增加●代谢活力强●对不良条件抵抗能力降低2 延滞期出现原因●适应新环境；需要合成多种酶，尤其是胞外酶；DNA复制●影响延滞期限长短因素接种龄接种量培养基成分4 生产上：缩短延滞期可以缩短生产周期，提高设备利用率。
●接种对数生长期的菌种，采用最适菌龄●加大接种量。
一般10％●用与培养菌种接近的组分的培养基（二）指数期(对数期)(exponential phase)1 特点●活菌数和总菌数接近●酶系活跃，代谢旺盛●生长速率最大，代时（generation time）最短●细胞的化学组成及形态，生理特性比较一致生产上：多利用做该期的细菌种子和科学试验材料2 出现原因●细胞适应了新环境，开始大量分裂●营养充足●pH值EH值等理化条件适宜●有害代谢产物少（三）稳定期(stationary phase)1 稳定期特点●活菌数保持相对稳定，总菌数达最高水平。
●细菌次级代谢物和代谢副产物大量积累●芽孢杆菌这时开始形成芽孢●稳定期中后期是生产收获时期：需要菌体在中期收获；需要发酵产物，尽量延长此期2 出现原因●营养的消耗●营养物比例失调●有害代谢产物积累●pH值、EH值、温度等理化条件变化3 生产上：延长稳定期●补料：补充营养●在线调节pH值、EH值等理化条件●取走产物●以上方法连续在线进行－－－连续培养（四）衰亡期(decline phase/death phase)1 特点●细菌死亡数大于增殖数,活菌数明显减少,群体衰落●细胞出现多形态,大小不等的畸形,变成衰退型●细胞死亡,出现自溶现象2 生产上：避免衰亡期要连续监测发酵情况，最好在稳定期中后期停止发酵，避免进入衰亡期。
一可缩短周期，二可避免细胞溶解物造成产物提取困难三、分批培养（batch culture)和连续培养(continuous culture)（一）分批培养：将微生物置于一定容积的培养基中培养，最后一次收获（二）连续培养：将微生物放在恒定容积的流动系统中培养，连续添加培养基，并以相同速度取走培养物优点：缩短发酵周期；便于自动控制；产物质量均一缺点：菌种易退化；易染杂菌第三节影响微生物生长的主要因素●物理因素：温度、湿度、渗透压、射线、超声波●化学因素：营养条件、O2、pH值、化学药物●生物因素：在混杂群体中受其它微生物影响一、温度●最适生长温度和最适发酵温度往往不一致●低于最低生长温度时停止生长：低温菌种保藏●高于最高耐受温度时死亡：酶失活，高温杀菌根据最适生长温度（optimum growth temperature）分类实验室培养中温微生物常用温度：●细菌：37 ℃●放线菌、酵母菌：28 ℃●霉菌：26 ℃●低温对微生物的影响：酶活力下降，代谢下降，繁殖停止，进入休眠菌种低温保藏：●冷藏：－4℃，冰箱●冻藏：－20 ℃，冰箱●超低温：－80 ℃，超低温冰箱◆－196 ℃，液氮，液氮罐二、pH值●影响酶活性●影响细胞膜透性与稳定性●影响物质溶解度●影响细胞表面电荷分布●最适生长pH值与最适发酵pH值往往不一致●微生物的活动也能改变环境中的pH值●低酸保存食物：酸菜根据氢离子浓度对微生物分类嗜酸微生物嗜碱微生物耐酸及耐碱微生物三、溶解氧（O2）●好氧菌（obligate or strict aerobes）●厌氧菌（anaerobes）●兼性厌氧菌（facultative anaerobes）●微好氧菌（microaerophilic bacteria）●耐氧菌（aerotolerant anaerobes）●微生物与氧的关系第四节有害微生物的控制一、几个概念灭菌（sterilition）：杀死物体上全部微生物的方法消毒(disinfection)：杀死或消除物体上的病原微生物的方法防腐(antisepsis)：用理化方法防止/抑制微生物生长的方法化疗(chemotherapy)：利用对病源菌具有高度毒力而对宿主基本无毒的化学物质来抑制宿主体内病源微生物的生长繁殖二、控制微生物的物理因素(一)高温灭菌●多数细菌，酵母菌和霉菌的营养细胞和病毒在50-65 ºＣ10 min可以致死。
●一般噬菌体65－80 ºＣ致死，●放线菌霉菌的孢子比营养细胞抗热性强，76－80 ºＣ10min可以杀死●细菌芽孢，在121 ºＣ下5－15min才能致死高温灭菌●湿热灭菌(mosist heat sterilization)●干热灭菌(dry heat sterilization)●焚烧灭菌法：常用于废弃物动物尸体等处理●烘烤灭菌法：实验室用干燥箱烘烤金属、玻璃器皿，170℃ 2h1 湿热灭菌(most heat sterilization)该法比干热灭菌效果好，因为蛋白质在有水的情况下容易凝固，如含水50％，蛋白质凝固温度为56ºＣ；含水6％蛋白质凝固温度为160-170ºＣ●煮沸灭菌法（煮沸消毒法）●高压蒸汽灭菌法●间歇灭菌法●巴斯德消毒法：（巴氏消毒法）煮沸灭菌法（煮沸消毒法）：物品在水中煮沸15min，可杀死所有营养细胞和一部分芽孢。
高压蒸汽灭菌(normal autoclving)：●是湿热灭中最好方法，通常在1.05kg/cm2的压力下面（此时温度121ºＣ）处理15－30min。
●要排冷空气，否则会形成假压，虽然压力达到要求，温度却达不到相应高度，而影响灭菌效果（二）紫外线不能穿透2mm的玻璃，常用于空气和表面灭菌杀菌机制：诱导核酸形成胸腺嘧啶二聚体，从而干扰了核酸的复制Ｏ２紫外线０３０２＋｛O｝（三）高渗作用●高盐/高糖保藏食品●等渗溶液对微生物生长有利●细菌处于低渗液中会吸水膨胀乃至破裂●细胞处于高渗液中会脱水引起质壁分离●和蛋白质变性，导致死亡●耐低不耐高（三）干燥●干燥使蛋白质变性、酶活力下降、盐浓度上升，代谢下降甚至细胞死亡●干燥保藏菌种、食品（四）超声波超声波破碎细胞，用于细胞内容物提取二、控制微生物的化学物质(因素)●表面消毒剂●溶液状态●气体状态●化学治疗剂●抗代谢物●抗生素●生物药物素（一）表面消毒剂(surface disinfactant)酸和碱重金属极其盐类有机化合物氧化剂卤素染色剂表面活性剂1 酸和碱微生物细胞中的DNA，RNA，E只有在中性条件下才能体现活性，因此强酸碱具杀菌作用。
医院病房常用乙酸消毒。
2 重金属极其盐类是杀菌剂和防腐剂，作用最强的是Hg,Ag,Cu,作用机理：使蛋白质变性，使酶失活。
（与E的－SH结合。
）0·02－0·2％HgCl2（升汞）溶液对大多数细菌有致死作用。
0·1－1％AgNO3可消毒皮肤另外还有砷，铋、锑的化合物是治疗梅毒的特效药3 有机化合物醇、醛、酚是常用的杀菌剂●杀菌机制●损伤细胞壁●使蛋白质变性（细胞膜，E失活）●抑制脱氢酶，氧化酶活性●甲醛：纯甲醛为气体，37－40％水液为福尔马林●醇是脱水剂和蛋白质变性剂,70％乙醇杀菌效果最好●酚：3－5％的石碳酸溶液几分钟即可致死细菌，甲酚杀菌力最强，煤酚皂液（来苏尔）为甲酚和肥皂的混合液4 氧化剂K2MnO4使菌体蛋白质氧化，使酶失活。
0·1－3％浓度可用于皮肤，果品、餐具、消毒。
H2O2清洗伤口。
5 卤素氯，碘是常用的消毒剂碘杀菌力强，3－7％碘溶于70－83％的乙醇中成碘酒。
氯及氯化物常用于水及食品消毒与水结合放出原子氧（O）用于消毒。
6 染色剂如紫药水为结晶紫的乙醇溶液●干扰菌体氧化还原电位●阻碍芽孢的形成。
7 表面活性剂具有降低表面张力效应的物质叫表面活性剂。
常用的有新吉尔灭，去污剂，肥皂、洗涤剂等。
表面张力降低可抑菌或杀菌（二）抗代谢物(antimetabolite)有些化合物在结构上与生物体所必需的代谢物很相似，以至可以和特定的酶结合，从而阻碍了酶的功能。
干扰代谢的正常代谢。
这些物质称为抗代谢物。
（三）抗生素(antibiotic)是由微生物产生（有的可人工合成）具有抑制或杀死其他微生物作用的有机化合物每种抗生素都有一定的杀菌范围，称为抗菌谱神奇的抗生素●抑制细胞壁的形成：青霉素●干扰蛋白质合成：链霉素、金霉素、土霉素、四环素●抑制核酸复制：增光霉素、丝裂霉素、放线菌素D●影响细胞膜的功能:多粘菌素破坏G-细胞膜；制霉菌素破坏真菌细胞膜（四）生物药物素(biopharmaceutin)具有多种生理活性的比抗生素疗效更为广泛的微生物次生代谢产物●酶抑制剂●免疫调节剂●受体拮抗剂●抗氧化剂附：抗药性(antibiotic resistance)●菌体内产生了钝化●或分解药物的酶●改变细胞膜的透●性而导致抗药性●泵出机制●细胞内被药物作用的部位发生了改变，目前典型的例子是核糖体发生了改变。