免疫学检验总结表格
医学检验免疫学检验归纳总结
医学检验免疫学检验归纳总结三大免疫结合反应直接凝集反应玻片凝集反应试管凝集反应间接凝集反应间接血凝试验胶乳凝集试验凝集反应P47 明胶凝集试验自身细胞凝集试验抗球蛋白试验直接coombs试验（RBC膜上的不完全抗原）间接coombs试验（血清中的游离抗原）液体内沉淀试验絮状沉淀试验抗原稀释法抗体稀释法方针滴定法免疫浊度测定沉淀反应凝胶内沉淀试验单向扩散试验双向扩散试验免疫电泳技术对流免疫电泳 CIEP火箭免疫电泳RIE免疫电泳IEP免疫固定电泳交叉免疫电泳三大标记技术一、放射免疫：放射免疫：免疫放射：二、荧光免疫技术P81 荧时间分辨荧光免疫测定（方法）双抗体夹心法光免固相抗体竞争法疫分固相抗原竞争法析类型荧光偏振免疫测定测定荧光酶免疫测定（方法）双抗体夹心法双抗原夹心法固相抗原竞争法三、酶免疫技术 P95 酶免疫技术分类均相酶免疫测定EMIT克隆酶测定分析异相酶免疫测定异相液相酶免疫测定固相酶免疫测定酶联免疫吸附试验ELISA （方法）Ab 双抗体夹心法双位点一步法竞争法Ag 间接法双抗体夹心法竞争法捕获法其他标记技术化学发光免疫分析技术 CLIA 直接化学发光免疫分析CLIAP109类型化学发光酶免疫分析CLEIA电化学发光免疫分析ECLIA 生物素，亲和素放大技术固相膜免疫测定免疫试验IFA免疫层析试验 ICA膜免疫测定的种类斑点酶免疫吸附试验 DOT-ELISE酶联免疫斑点试验 ELISPOT免疫印迹法 IBT/EITB放射免疫浊度试验 RIPA免疫细胞1、分离方法外周血单个核细胞分离 PBMCP161淋巴细胞分离贴壁粘附法吸附柱滤过法磁铁吸引法Percoll分离液法T细胞和B 细胞的分离 E花环沉降法尼龙毛柱分离法T细胞亚群分离亲和板结合分离法磁性微球分离法荧光激法细胞分离仪分离法2、免疫细胞表面标志的检测方法抗体致敏细胞花环法P174 免疫细胞化学法免疫荧光法FCM3、功能检测 T 细胞增殖试验方法形态学P178 3H-TdR掺入法淋巴细胞 T细胞 MTT比色法CFSE（活细胞染料）T细胞分泌功能检测T细胞介导的细胞毒性试验体内试验B细胞：B细胞增殖试验、溶血空斑实验、ELISPOT、体内试验NK细胞：..........。
临床免疫试验总结
临床免疫常用实验操作步骤
临床免疫常用实验注意事项
备注：1.红细胞破裂后释放的血红蛋白中含有血红素集团，其具有过氧化物的活性，如标本中血红蛋白浓度较高，则容易在温育过程中吸附于固相，从而与后面的IRP底物反应显色，造成假阳性（在HBeAb和HBcAb测定时，由于采用的方法不同，而造成假阴性结果）。
2.类风湿因子是一种抗变性IgG的自身抗体，可作为固相抗体和酶标抗体（均为IgG）之间的桥接抗原，而产生假阳性（佃8«人6和HBcAb测定时，由于采用的方法不同，而造成假阴性结果）。
3.TRUST实验干扰反应：①本实验系非特异性血清学过筛试验，阴性结果不能排除梅毒感染，阳性结果需作进一步梅毒螺旋体抗体特异性试验，结合临床综合分析；②血浆标本抗凝应充分，以避免纤维蛋白引起的假阳性；③待测血清须新鲜，无污染，否则可能出现假阳性或假阴性结果；④由于所用抗原是类脂抗原，故特异性差，生物学假阳性可见于多种疾病，如麻风、结核、红斑狼疮、类风湿性关节炎、猩红热等。
HBV五项血清指标物联合检测的临床意义
常见模式HBsAg抗-HBs HBeAg抗-HBe抗-HBc临床意义1+一+一+急性或慢性乙型肝炎，高传染性
2+一一一+急性、慢性乙型肝炎或慢性HBsAg携带者
3+++急性乙肝趋向恢复或慢性乙肝，弱传染性
4一+一一+急性HBV感染康复期或有既往病史，目前保持免疫力
5++乙肝恢复期，弱传染性
6一一一一+急性HBV感染“窗口期”或既往曾感染过乙肝，有流行病学意义7+疫苗接种后或HBV感染后康复
8一+一++急性乙肝康复期，开始产生免疫力
9非乙肝感染
HBV五项血清指标物可能组合祥表。
医院免疫检验报告单
医院免疫检验报告单检测单位：XXX医院检测科室：免疫检验科报告日期：XXXX年XX月XX日尊敬的患者：您好！感谢您选择XXX医院进行免疫检验。
根据您的检测样本，我们已完成相关检测，并为您提供本次免疫检验的报告单。
报告编号：XXXXX患者姓名：XXX年龄：XX岁性别：XX一、免疫检验项目：1.总IgE水平检测：检测结果：XX IU/ml结果评价：您的总IgE水平为XX IU/ml，属于正常范围内。
总IgE是指机体本身产生的IgE抗体的总量，正常范围在XXX IU/ml。
2.特异性IgE检测：特异性IgE是对特定抗原产生的IgE抗体，针对不同的抗原进行检测，可以帮助判断您对一些过敏原的敏感性。
-对XXX过敏原的特异性IgE检测：检测结果：阳性/阴性结果评价：阳性表示您对XXX过敏原存在过敏反应的可能性较高，我们建议您进一步了解相关过敏原并采取相应的防护和治疗措施。
-对XXX过敏原的特异性IgE检测：检测结果：阳性/阴性结果评价：阳性表示您对XXX过敏原存在过敏反应的可能性较高，我们建议您进一步了解相关过敏原并采取相应的防护和治疗措施。
总结：根据本次免疫检验结果，您的总IgE水平在正常范围内，但特异性IgE检测中可能存在对一些过敏原的过敏反应，需要进一步了解具体的过敏原并采取相应的预防和治疗措施。
二、检测建议：1.如果您对特定过敏原的特异性IgE检测结果为阳性，请尽量避免接触该过敏原，以预防过敏反应的发生。
2.如果您有过敏症状或疑似过敏病史，请及时就诊，接受相关的过敏性疾病检查和治疗。
3.如果您对一些过敏原的特异性IgE检测结果不确定或阴性，但仍有相关过敏症状出现，请及时就诊，我们的医生将根据您的具体情况进行综合判断和诊疗。
三、注意事项：2.免疫检验结果可能受到多种因素的影响，如检验时间、个体差异等，请综合考虑其他临床病史和检查结果。
此致敬礼！XXX医院免疫检验科。
免疫学检验总结表格
IgE
单体分子、含量最少、特异性过敏和寄生虫感染中有意义
抗原抗体反应原理
结合力、亲和力与亲合力
抗原抗体反应特点
①特异性；②比例问题：等价带、前带、后带；③可逆性
影响因素
反应物
抗原
理化性质、抗原表位等
抗体
来源：R型血清和H型血清
特异性与亲和力
反应条件
电解质、酸碱度、温度、比例
利用生物发光物质标记Ag或Ab
微粒子化学发光免疫分析
顺磁性微粒子为载体、用ALP标记；以AMPPD作为发光剂
电化学发光免疫分析
三联吡啶钌是电化学发光免疫分析用的发光剂；检测广泛；持续时间长；信号强；灵敏度高等
第三部分：具体物质的检测
免疫细胞的检测
细胞分离法
外周血WBC的分离
自然沉降法和高分子聚合物沉降法
基因芯片
超敏反应及其检验
超敏类型
Ⅰ型
①发作快、消退快；有明显的个体和遗传倾向；不引起严重的组织细胞损伤；主要由于IgE的产生和介导②过敏性休克、呼吸道过敏、消化道过敏、皮肤过敏
Ⅱ型
①细胞溶解型或细胞毒型；有IgG和IgM等其他介导，然后再补体和吞噬细胞的作用下引起细胞溶解或组织损伤②输血反应；新生儿溶血反应；自身免疫溶血性贫血；肺-肾炎综合征；药物过敏引起的血细胞减少；甲状腺功能亢进
双位点一步法
双抗夹心时，待测样品和酶标物一起加入
间接法
检测抗体最常用
竞争法
既可测抗原，又可测抗体；参考管和待测管对照观察
5.荧光免疫技术(F)
*阳性细胞数量和荧光强度可以作为定量或半定量指标
常用荧光物质
异硫氰酸荧光素(FITC)
免疫学总结图
免疫学总结图多能肝细胞(CD34+、CD117+、lin-)EPO 红细胞红母细胞髓样细胞淋巴样干细胞TPO血小板巨核细胞髓系干细胞前体B细胞( ) 前体T细胞()粒单核祖细胞双阴性T细胞前B2细胞γβ (CD3Low，CD4-,CD8-) (pre-BCR受体) Mo-Mø Baso Eo Mas PMN DC NK B1 NKT Τ Th17分别于血包括血广泛主要分主要主要分布主要通过分布于分布分布于液与组织液中的分布布于外分布于骨髓、分布分泌血液，于血皮肤、呼液中，占Mo和于全周血和于胸肝脏和胸于肠IL-17固占血液液、组吸道和血液白细组织器身组脾脏腔、腹腺中道、呼刺激白细胞织液，消化管胞总数的官中的织脏腔和吸道Ep、总数占白的结缔60%-70% Mø，占器肠壁及泌En、0%-1% 细胞组织内血液白固有尿生Fb和有总数细胞总层中，殖道Mø的数的在个等粘等分0.5% 3%-8% 体发膜和泌多- 3% 育过皮下种细免程中组织胞因出现子、早(胚趋化胎因子疫期)，和募具有集中自我性粒更新细系能力胞，并诱胞内含胞内胞内含表面表达表达未成表面标B1的表面标其导局分泌型含分分泌型IgG、FcPRR熟DC志:TCR、BCR志:TCR部炎嗜碱性泌型嗜碱性受体和补(主要高表mIg、缺乏CD56+、缺乏统症反颗粒，嗜酸颗粒，能体C3b受包括达CD56+、多样TCR-CD3多样应; 内含有性颗合成白体，以吞MR、PRR、CD16+; 性，主复合受性，可肝素、粒，内三烯;表噬细菌为SR、调理要识体，识别直接组胺、含有达主; TLR)性受细胞杀别某CD1分子识别嗜酸性组胺PRR、过调理性体、细伤机制:些细所提呈的某些粒细胞酶(抗敏毒素、受体胞因(1)穿菌表磷脂和糖完整趋化因组C3a/C5a(主要子受孔素/颗面共脂类抗的多H17子等，胺)、受体和包括补体，而粒酶途有的原，不受肽抗参与细胞基芳基高亲和体受低表径(2)多糖，MHC分原，可了炎质内含硫酸力IgE 体，达Fas/Fasl抗原，子限制识别症反有白三酯酶Fc受体 IgGFcMHC-途径(3)和某的抗应，烯 (抗受体)、?/?TNF-α些变原有:感染白三细胞因类分/TNFR-1性的HSP，性疾烯)、子受体子，其途径(4)自身CD1病以阳离摄取、ADCC途抗原分子及自子蛋加工、径识别身免白(抗处理的脂疫性寄生抗原类抗疾病虫) 能力原某的发强，而些病生，提呈毒蛋在固抗原白，细有免激发菌裂疫中免疫解产发挥应答物中重要能力的磷作用弱;成酸化熟DC抗原则相反可被趋具有在机体具有很强具有很主要NK无需在机发挥的生是皮化因子趋化抗肿瘤、的趋化作强的清功能抗原，预体早物学效肤黏募集，作用抗感染用与吞噬楚、杀是摄先致敏，期抗应:细胞膜局是参与和一和免疫功能，局伤病原取、加在机体感染毒作用，部参Ι型超定的调节中部感染时体的功工、处抗肿瘤，与维增强免疫与早敏反应吞噬、发挥重能迅速穿能;参理和早期抗持自反应，分期抗的重要杀菌要作用;过VE，与和促提呈病毒或稳中泌多种趋感染效应细能力，可引发进入感染进炎症抗原，胞内寄具有化因子参免疫胞。
医学免疫学实验报告
医学免疫学实验报告免疫学实验报告引言：免疫学是研究人体免疫系统的科学，通过实验研究可以更好地了解免疫系统的功能和应对机制。
本次实验旨在探究免疫系统对外来抗原的应答过程，并评估免疫细胞的活性和效能。
实验材料与方法：1. 实验动物：使用小鼠作为实验对象，因其免疫系统与人类相似度较高。
2. 抗原制备：选择一种常见的抗原，如牛血清白蛋白（BSA），通过纯化和浓缩得到高纯度的抗原溶液。
3. 免疫程序：将小鼠随机分为实验组和对照组，实验组注射抗原溶液，对照组注射生理盐水。
观察并记录两组小鼠的免疫应答情况。
4. 免疫指标测定：采集小鼠血液样本，使用酶联免疫吸附试验（ELISA）等技术测定血清中特定免疫球蛋白（如IgG、IgM）的水平。
实验结果与讨论：1. 免疫应答：实验组小鼠在注射抗原后，免疫系统迅速启动，产生针对抗原的特异性免疫应答。
对照组小鼠未注射抗原，免疫系统无明显应答。
2. 抗原特异性免疫球蛋白：ELISA结果显示，实验组小鼠血清中特定抗原特异性免疫球蛋白（如IgG）的水平显著升高，而对照组无明显变化。
这表明实验组小鼠的免疫系统成功识别并产生了针对抗原的免疫应答。
3. 免疫细胞活性：通过流式细胞术等技术，观察并比较实验组和对照组小鼠免疫细胞的活性。
实验结果显示，实验组小鼠的免疫细胞活性较高，表明其免疫系统对抗原的识别和攻击能力增强。
4. 免疫记忆效应：在实验组小鼠中，注射抗原后，免疫系统形成了对抗原的记忆效应。
再次注射相同抗原时，免疫应答更为迅速和强烈。
而对照组小鼠未形成明显的免疫记忆效应。
结论：本次实验结果表明，免疫系统对外来抗原具有高度的特异性和记忆性。
免疫细胞的活性和效能在免疫应答中起到关键作用。
这些实验数据为进一步研究免疫系统的功能和应对机制提供了重要依据。
展望：在未来的研究中，可以进一步探究免疫系统对不同类型抗原的应答差异，以及免疫细胞的分化和调控机制。
此外，可以结合其他技术手段，如基因工程和单细胞测序，深入研究免疫系统的细节和复杂性。
医学检验 免疫学检验 归纳总结
三大免疫结合反应直接凝集反应玻片凝集反应试管凝集反应间接凝集反应间接血凝试验胶乳凝集试验凝集反应P47 明胶凝集试验自身细胞凝集试验抗球蛋白试验直接coombs试验（RBC膜上的不完全抗原）间接coombs试验（血清中的游离抗原）液体内沉淀试验絮状沉淀试验抗原稀释法抗体稀释法免疫浊度测定沉淀反应凝胶内沉淀试验单向扩散试验双向扩散试验免疫电泳技术对流免疫电泳CIEP火箭免疫电泳RIE免疫电泳IEP免疫固定电泳交叉免疫电泳三大标记技术一、放射免疫：放射免疫：—二、荧光免疫技术P81 荧时间分辨荧光免疫测定（方法）双抗体夹心法光免固相抗体竞争法疫分固相抗原竞争法析类型荧光偏振免疫测定测定荧光酶免疫测定（方法）双抗体夹心法双抗原夹心法固相抗原竞争法三、酶免疫技术P95 酶免疫技术分类均相酶免疫测定EMIT克隆酶测定分析异相酶免疫测定异相液相酶免疫测定固相酶免疫测定酶联免疫吸附试验ELISA （方法）Ab双位点一步法Ag 间接法双抗体夹心法竞争法捕获法其他标记技术化学发光免疫分析技术CLIA 直接化学发光免疫分析CLIAP109类型化学发光酶免疫分析CLEIA电化学发光免疫分析ECLIA生物素，亲和素放大技术固相膜免疫测定免疫试验IFA免疫层析试验ICA膜免疫测定的种类斑点酶免疫吸附试验DOT-ELISE—酶联免疫斑点试验ELISPOT免疫印迹法IBT/EITB放射免疫浊度试验RIPA免疫细胞1、分离方法外周血单个核细胞分离PBMCP161淋巴细胞分离贴壁粘附法吸附柱滤过法磁铁吸引法Percoll分离液法T细胞和B 细胞的分离E花环沉降法尼龙毛柱分离法T细胞亚群分离亲和板结合分离法磁性微球分离法荧光激法细胞分离仪分离法2、免疫细胞表面标志的检测方法抗体致敏细胞花环法P174 免疫细胞化学法免疫荧光法FCM3、功能检测T 细胞增殖试验方法形态学P178 3H-TdR掺入法淋巴细胞T细胞MTT比色法CFSE（活细胞染料）T细胞分泌功能检测T细胞介导的细胞毒性试验体内试验B细胞：B细胞增殖试验、溶血空斑实验、ELISPOT、体内试验NK细胞：..........吞噬细胞...............。
免疫学检验总结表格
用于分离密度相近大小不同；常用介质为蔗糖、甘油；离心分离的物质密度一定要大于密度梯度介质的最大密度；有共沉
等密度梯度
分离大小相同密度不同的物质；介质常用铯盐；铯盐对铝有腐蚀，防止溅出；不会有共沉
沉淀分离
盐析法
原理：盐的存在减弱了蛋白分子周围的水化膜，导致蛋白发生聚集而沉降
有机溶剂沉淀
优：分辨率高、溶剂易除；缺：有毒、可能会是蛋白失活
补体结合免疫荧光
结合激活补体；荧光素标记抗补体的抗体；
双标记染色
标记不同抗体检测同一样品
流式荧光免疫技术
定量分析或纯化；流式细胞仪与荧光免疫结合
6.放射免疫技术(R)
*精确测定各种微量物质
放射免疫分析()
原理：标记抗原(可以为半抗原)*和非标记抗原对特异性抗体(一定量)的竞争结合反应
四甲基异硫氰酸罗丹明()
紫红色粉末，激发后有橙红色荧光；猝灭速度慢
藻蛋白类
藻红蛋白(此类最常用)、藻青蛋白、别藻青蛋白；多呈现橙色或红色物质
荧光显微技术
光源
短波光；波长连续或不连续；
滤板
隔热滤板、激发滤板、吸收滤板；
光路
透射光或落射光
分类
直接染色法
荧光标记抗原(抗体)直接检测抗体(抗原)
间接染色法
酶联免疫+荧光标记
双位点一步法
双抗夹心时，待测样品和酶标物一起加入
间接法
检测抗体最常用
竞争法
既可测抗原，又可测抗体；参考管和待测管对照观察
5.荧光免疫技术(F)
*阳性细胞数量和荧光强度可以作为定量或半定量指标
常用荧光物质
异硫氰酸荧光素()
最常用、最广泛；黄色或橙黄色粉末；激发后发出黄绿色
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沉淀分离
盐析法
原理：盐的存在减弱了蛋白分子周围的水化膜，导致蛋白发生聚集而沉降
有机溶剂沉淀
优：分辨率高、溶剂易除；缺：有毒、可能会是蛋白失活
非离子聚合物沉淀
常用聚乙二醇
离子交换层析
凝胶层析
常用凝胶：葡聚糖凝胶、琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶、Superdex
利用生物发光物质标记Ag或Ab
微粒子化学发光免疫分析
顺磁性微粒子为载体、用ALP标记；以AMPPD作为发光剂
电化学发光免疫分析
三联吡啶钌是电化学发光免疫分析用的发光剂；检测广泛；持续时间长；信号强；灵敏度高等
第三部分：具体物质的检测
免疫细胞的检测
细胞分离法
外周血WBC的分离
自然沉降法和高分子聚合物沉降法
抗体的制备
多克隆抗体制备
使用免疫原免疫动物获得抗体、又叫抗血清；
弗氏完全佐剂（CFA，石蜡油+羊毛脂+卡介苗）和弗氏不完全佐剂（IFA，石蜡油+羊毛脂）
大致过程：获取、鉴定、纯化、保存
单克隆抗体（McAb）制备
原理：杂交瘤技术等
亲本细胞的选择与融合：无菌取脾
HAT培养基的选择作用
阳性克隆选择与克隆化
血清学分型
微量淋巴细胞毒试验：原理、阳阴性
细胞学分型
双向混合淋巴细胞培养；单向混合淋巴细胞培养
基因分型
限制性片段长度多态性-聚合酶链反应PCR-RFLP
特异性寡核苷酸探针-聚合酶链反应PCR-SSOP
序列特异性引物-聚合酶链反应PCR-SSP
单链构象特异性-聚合酶链反应PCR-SSCP
基于基因测序的HLA分型ＳＢＴ
第一部分：基本理论
抗原抗体反应
抗原
抗原的两种特性：免疫原性、免疫反应性
共同抗原、交叉反应、异嗜性抗原、超抗原等
抗原的分类依据性能：完全抗原、不完全抗原
依据抗体产生是否要T cell刺激：胸腺依赖性抗原（TD-Ag）、胸腺非依赖性抗原（TI-Ag）
丝裂原
刀豆蛋白A（ConA）
T细胞有丝分裂原
植物凝集素
亲和层析
利用欲分离物质和它们的特异性配体间具有特异性亲和力
电泳
有支持体
纸电泳
醋酸纤维薄膜
薄层电泳（薄膜或薄板）
非凝胶性支持体区带电泳（淀粉、纤维素粉、硅胶等）
凝胶支持体区带电泳（淀粉液、聚丙烯酰胺凝胶）
无支持体
Tiselius移界电泳
显微电泳
等点聚焦电泳
等速电泳
密度梯度电泳
聚丙烯酰胺凝胶电泳与SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳区别
荧光标记抗原(抗体)直接检测抗体(抗原)
间接染色法
酶联免疫+荧光标记
补体结合免疫荧光
Ag,Ab结合激活补体；荧光素标记抗补体的抗体；
双标记染色
标记不同抗体检测同一样品
流式荧光免疫技术
定量分析或纯化；流式细胞仪与荧光免疫结合
6.放射免疫技术(R)
*精确测定各种微量物质
放射免疫分析(RIA)
原理：标记抗原(可以为半抗原)Ab*和非标记抗原Ab对特异性抗体Ag(一定量)的竞争结合反应
橘红色粉末；激发后为橘红色荧光
四甲基异硫氰酸罗丹明(TRITC)
紫红色粉末，激发后有橙红色荧光；猝灭速度慢
藻蛋白类
藻红蛋白PE(此类最常用)、藻青蛋白PC、别藻青蛋白APC；多呈现橙色或红色物质
荧光显微技术
光源
短波光；波长连续或不连续；
滤板
隔热滤板、激发滤板、吸收滤板；
光路
透射光或落射光
分类
直接染色法
免疫电泳
对流免疫CIEP
双扩+电泳；Ag向正极泳动、Ab向负极泳动
火箭电泳
单扩+电泳；定量
免疫电泳
先蛋白区带电泳、再双扩
免疫浊度测定（定量）
透射浊度测定、散射浊度测定
免疫速率抑制浊度测定
用一定量的已知半抗原-载体与限量特异性抗体反应，测定生成的半抗原-载体-抗体所造成的散色速率
2.凝集反应
①颗粒性抗原或带有可溶性抗原的载体
第二部分：免疫检验技术
1.沉淀反应
①可溶性抗原；②多克隆抗体更适合；③R型血清首选
液相沉淀试验
环状沉淀试验：定性
絮状沉淀试验
抗体稀释法、棋盘格法（找出Ag、Ab最佳比例）
凝胶沉淀试验
单向扩散试验
定量试验；两个曲线
双向免疫扩散试验(定性)
沉淀线数目：抗原或抗体不纯；沉淀线弯向分子量大的；沉淀线靠近浓度低的；可以测定效价(半定量)
不直接参与化学发光反应；三联吡啶钌
具体技术
化学发光免疫分析(CLIA)
以化学发光物质(如吖啶酯)直接标记Ag或Ab，发生免疫反应后，直接引发化学发光进行检测
化学发光酶免疫技术(CLEIA)
采用催化某一发光反应的酶标记Ag或Ab，形成酶标记抗原-抗体化合物；加入了催化发光的酶，使发光速度加快
生物发光免疫分析(BLIA)
制备单克隆抗体：在小鼠腹腔诱生出肿瘤并产生含McAb的腹水
鉴定、保存、应用
基因工程抗体的制备
抗原抗体的纯化
离心分离
差速离心
粗分离；会有共沉；分离分子量相差大的物质；动力学方法
密度梯度离心
用于分离密度相近大小不同；常用介质为蔗糖、甘油；离心分离的物质密度一定要大于密度梯度介质的最大密度；有共沉
等密度梯度
化学发光
常温下，伴随化学反应过程所产生的光的发射现象
发光标记物
直接参与发光反应的标记物
标记物本身就是化学发光中的能量转移载体，发光底物；如鲁米诺类、吖啶酯类、苯酚类
以催化反应或能量传递参与发光的酶标记物
即作催化剂，又参与化学发光反应
HRP对鲁米诺和H2O2起催化作用
ALP
以能量传递参与氧化反应的非酶标记物
自身红细胞凝集试验
主要试剂为抗人O型红细胞MCAb，可以与各型RBC结合却不引起凝集；样本为全血
特点是排除由于红细胞凝集可能引起的假阳性
3.补体试验
系统：①缓冲液PBS②补体③SRBC④溶血素
补体测定试验
血清总补体活性(CH50)测定
活化经典途径；为么要50%溶血作为终点测定；意义
旁路活化途径(AP-H50)测定
双位点一步法
双抗夹心时，待测样品和酶标物一起加入
间接法
检测抗体最常用
竞争法
既可测抗原，又可测抗体；参考管和待测管对照观察
5.荧光免疫技术(F)
*阳性细胞数量和荧光强度可以作为定量或半定量指标
常用荧光物质
异硫氰酸荧光素(FITC)
最常用、最广泛；黄色或橙黄色粉末；激发后发出黄绿色
四乙基罗丹明(RB200)
Ⅲ型
①抗原抗体(IgM、IgG或IgA)形成免疫复合物IC并沉积于全身多处②实验性局部过敏；人类局部ICD；血清病；急性免疫复合物性肾小球；系统性红斑狼疮；类风湿性关节炎
Ⅳ型
①由T细胞与抗原作用后，引起单个核细胞侵润；迟发型，属于细胞免疫应答②传染性迟发型超敏反应(结核病、病毒和某些真菌感染)；接触性皮炎
外周血单个核细胞分离
密度梯度离心法；
淋巴细胞分离
玻璃器皿吸附；媳妇过滤；磁铁吸引
淋巴细胞亚群的分离纯化
E玫瑰花结分离：T细胞能结合SRBC结合
尼龙分离：T细胞表面绒毛短少，B则多长、易吸附在在尼龙毛上
亲和板结合法：单抗与不同亚群的淋巴细胞结合在板上不易被洗掉
流式细胞仪分选法
磁性激活细胞分离器分离法：用于T细胞亚群分离
T细胞有丝分裂原
美洲商陆丝裂原
T细胞和B细胞有丝分裂原
脂多糖（LPS）
B细胞有丝分裂原
葡萄球菌A蛋白（SPA）
B细胞有丝分裂原
抗体
结构与功能：略
IgG
单体分子、血清和细胞外液中含量最高
IgM
五聚体、分子量最大、不能透过胎盘、宫内感染指标
IgA
有两种类型（血清型和分泌型）、对新生儿早期抗感染十分重要
IgD
单体分子、膜结合型IgD是Bcell分化成熟的标志
IgE
单体分子、含量最少、特异性过敏和寄生虫感染中有意义
抗原抗体反应原理
结合力、亲和力与亲合力
抗原抗体反应特点
①特异性；②比例问题：等价带、前带、后带；③可逆性
影响因素
反应物
抗原
理化性质、抗原表位等
抗体
来源：R型血清和H型血清
特异性与亲和力
反应条件
电解质、酸碱度、温度、比例
细胞因子抗病毒活性的检测方法
趋化活性得到测定
免疫学测定
ELISA
双抗体夹心法
竞争法
Western印迹
单个细胞分泌细胞因子的测定
反向反向溶血空斑实验RHPA
酶联免疫斑点试验ELISPOT
细胞内细胞因子的测定
分子生物学方法
Southern印迹
Northern印迹
RT-PCR
基因芯片
人类白细胞抗原分型检测技术
基因芯片
超敏反应及其检验
超敏类型
Ⅰ型
①发作快、消退快；有明显的个体和遗传倾向；不引起严重的组织细胞损伤；主要由于IgE的产生和介导②过敏性休克、呼吸道过敏、消化道过敏、皮肤过敏
Ⅱ型
①细胞溶解型或细胞毒型；有IgG和IgM等其他介导，然后再补体和吞噬细胞的作用下引起细胞溶解或组织损伤②输血反应；新生儿溶血反应；自身免疫溶血性贫血；肺-肾炎综合征；药物过敏引起的血细胞减少；甲状腺功能亢进
计数仪
γ射(131I,125I)线用晶体闪烁计数仪