Agilent 1100 HPLC及消耗品简介
Agilent1100series安捷伦高效液相色谱仪操作规程

Agilent1100series安捷伦⾼效液相⾊谱仪操作规程Agilent1100⾼效液相⾊谱仪操作规程1.仪器组成及开机1.1仪器组成:Agilent1100⾼效液相⾊谱系统主要由⼯作站、在线脱⽓机、柱温箱、输液泵、⾃动进样器、检测器等部件组成。
1.2开机:1.2.1接通电源,打开计算机及⼯作站其它各部件开关,约30秒钟后,各部件进⼊待机状态,指⽰灯为黄⾊或⽆⾊。
1.2.2打开HP ChemStations,进⼊Instrument 1 online状态,约30秒钟后,计算机进⼊⼯作站的操作页⾯。
该页⾯主要由以下⼏部分组成:最上⽅为命令栏,依次为File,Run Control,Instrument等;命令栏下⽅为快捷操作图标,由多个样品连续进⾏分析、单个样品进样分析、调⽤⽂件、保存⽂件等;左边为样品信息栏;中部为⼯作站各部件的⼯作流程⽰意图,依次为进样器→输液泵→柱温箱→检测器→数据处理→报告;中下部为动态监测信号;右下部为⾊谱⼯作参数:进样体积、流速、分析停⽌时间、流动相⽐例、柱温、检测波长等。
2.⾊谱条件的设定(⾊谱条件的设定可以通过下列⼏种⽅法实现2.1直接设定在操作页⾯的右下部⼀⾊谱⼯作参数中设定。
将⿏标移移⾄要设定的参数如进样体积、流速、分析停⽌时间、流动相⽐例、柱温、检测波长等,单击⼀下,即可显⽰该参数的设置页⾯,键⼊设定值后,单击“OK”,即完成。
2.2 调⽤已设置好的⽂件在命令栏“Method”下,选择“Load Method”,或直接单击快捷键操作的“Load Method”图标,选定⽂件名,单击“OK”,此时,⼯作站即调⽤所选⽤⽂件中设定的参数。
如欲进⾏修改,则可同2.1项下,在⾊谱⼯作参数中作修改;亦可在命令栏“Method”下,选择“Edit Entire Method”,在每个页⾯中键⼊设定值,单击“OK”。
即完成。
2.3 编辑新⽂件先在命令栏“Method”下,选择“New Method”, 之后再在命令栏“Method”下,选择“Edit Entire Method”,在每个页⾯中键⼊设定值,完成后,Save Method”, 先在命令栏“Method”下选择“Save Method”,给新⽂件命名,单击“OK”。
Agilent 1100高效液相色谱仪操作指导书

1 操作规程1.1开机1.1.1 启动计算机,完成后系统自动运行Bootp Server程序。
打开色谱仪各组件电源,待Bootp Server里显示已联上各组件的信息及各模块自检完成后,双击【Instrument Online】图标启动化学工作站,工作站自动与仪器建立通讯。
1.1.2 打开10%异丙醇溶液控制阀,用针筒抽吸至管路中有液体流出。
调节控制阀松紧,控制流量至流出量约为每分钟5~15滴。
1.1.3 将流动相放入溶剂瓶中,打开Purge 阀,单击【Pump】→【control】,选中on,单击【OK】,启动泵。
再单击【Pump】→【Set up Pump】,设Flow为5ml/min,流动相A调节为100%,其它流路关闭,单击【OK】,则系统开始Purge流动相A。
3min后依次切换管路至B、C、D,确保所需管路均无气泡。
1.1.4 建立新方法时执行“1.2方法的编辑”的操作。
仪器配置无更改,运行已建立的方法则直接进入“1.3方法运行”操作。
1.2 编辑分析方法1.2.1 点击【Method】→【Edit entire method】或【New method】选项,进入方法编缉界面。
在Method Comments 中加入方法的信息如色谱条件、方法的用途等点击【OK】进入下一界面。
1.2.2 泵参数设定:设定流速、流动相比例、梯度/运行时间表、平衡时间等参数。
点击Ok进入下一界面。
1.2.3 柱温箱参数设定:在Temperature下面的方框内输入所需温度,并选中它,点击【more>>】键,选中Same as left使柱温箱的温度左右一致。
点击【OK】进入下一界面。
1.2.4 UV检测器参数设定:在Wavelength下方的空白处输入所需的检测波长,如254nm, 在Peakwidth (Response time)下方点击下拉式三角框,选择合适的响应时间, 如>0.1min(2s),在Timetable 中可以Insert 一行输入随时间切换的波长。
Agilent 1100型HPLC操作指南

Agilent 1100型HPLC操作指南一、实验准备1、样品和流动相过滤(通常过0.2μm滤膜)、超声脱气5min。
2、更换四元泵流动相,泵头清洗溶剂(10%的异丙醇)。
二、启动液相色谱仪1、自上而下依次打开真空脱气机、四元泵、柱温箱(根据需要)、检测器电源,等待系统自检通过,黄灯表示闲置、绿灯表示运行、红灯表示出错。
2、打开电脑,双击电脑桌面的“仪器联机”打开操作安捷伦化学工作站,软件会自动检测到开启的所有硬件设备。
3、更换流动相存储瓶,旋松“排气阀(purge阀)”,将所换的溶剂瓶的流量设至高流速5mL/min,进行清洗和排放气泡,至管线中无气泡时关闭排气阀。
4、使用的流动相中含有缓冲盐时,需打开泵头清洗溶剂,使其逐滴流出,防止缓冲盐在柱子和泵头结晶析出,影响系统压力。
5、安装色谱柱:依次安装在线过滤器、预柱、色谱柱(注意方向,箭头指向检测器)。
设置溶剂比例,1mL/min流速,平衡色谱柱。
三、样品测试及数据分析1、编辑方法。
选择编辑完整方法,依次设定流动相比例和流速、柱温箱温度、检测器扫描波长等参数,保存方法。
2、运行方法,监测基线至稳定走平。
3、手动单针进样:设定样品名、数据文件存储位置,点击运行方法;将手动进样器扳至“Load”上样,上样完扳至“Inject”,工作站开始记录信号。
4、测试完毕,点击桌面的“仪器脱机”打开工作站,进行数据处理,积分,定量分析方法建立、报告输出等。
四、实验结束、关机。
1、实验结束,冲洗系统、色谱柱。
冲洗原则(以反相C18为例):先用90%水,10%乙腈(或其它有机相)冲洗水溶性物质;30min后改为50%水,50%乙腈;再过30min 后,改为100%乙腈,再冲洗30min后结束。
2、实验结束,停止泵,关闭化学工作站,关闭电脑,关闭仪器的四部分电源。
3、卸下色谱柱,清理流动相,将各个抽滤头浸泡在有机相中,整理桌面、地面杂物。
注意事项:1、挥发性有毒有机相(甲醇、乙腈、正己烷等)需尽量包严实。
Agilent 1100series安捷伦高效液相色谱仪操作规程

Agilent1100高效液相色谱仪操作规程1.仪器组成及开机1.1仪器组成:Agilent1100高效液相色谱系统主要由工作站、在线脱气机、柱温箱、输液泵、自动进样器、检测器等部件组成。
1.2开机:1.2.1接通电源,打开计算机及工作站其它各部件开关,约30秒钟后,各部件进入待机状态,指示灯为黄色或无色。
1.2.2打开HP ChemStations,进入Instrument 1 online状态,约30秒钟后,计算机进入工作站的操作页面。
该页面主要由以下几部分组成:最上方为命令栏,依次为File,Run Control,Instrument等;命令栏下方为快捷操作图标,由多个样品连续进行分析、单个样品进样分析、调用文件、保存文件等;左边为样品信息栏;中部为工作站各部件的工作流程示意图,依次为进样器→输液泵→柱温箱→检测器→数据处理→报告;中下部为动态监测信号;右下部为色谱工作参数:进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、柱温、检测波长等。
2.色谱条件的设定(色谱条件的设定可以通过下列几种方法实现2.1直接设定在操作页面的右下部一色谱工作参数中设定。
将鼠标移移至要设定的参数如进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、柱温、检测波长等,单击一下,即可显示该参数的设置页面,键入设定值后,单击“OK”,即完成。
2.2 调用已设置好的文件在命令栏“Method”下,选择“Load Method”,或直接单击快捷键操作的“Load Method”图标,选定文件名,单击“OK”,此时,工作站即调用所选用文件中设定的参数。
如欲进行修改,则可同2.1项下,在色谱工作参数中作修改;亦可在命令栏“Method”下,选择“Edit Entire Method”,在每个页面中键入设定值,单击“OK”。
即完成。
2.3 编辑新文件先在命令栏“Method”下,选择“New Method”, 之后再在命令栏“Method”下,选择“Edit Entire Method”,在每个页面中键入设定值,完成后,Save Method”, 先在命令栏“Method”下选择“Save Method”,给新文件命名,单击“OK”。
高效液相色谱仪Agilent 1100仪器结构和操作

Agilent 1100 型高效液相色谱仪 [美国Agilent公司]一.仪器原理及结构高效液相色谱(简称HPLC)是色谱法中最重要的一个分支。
与气相色谱相比,HPLC的分离模式更为多样化,适用样品范围更广。
它不仅能分离高沸点、强极性和热不稳定的化合物,而且适合于离子性、大分子及具有生物活性的化合物的分离。
据估计,自然界20%的已知化合物能用气相色谱直接分析,而70%以上都可用HPLC分析。
另外,经HPLC 分离后的样品组分很容易收集,故能用于制备分离。
HPLC有多种分离模式,但其仪器结构都基本相同,仪器流程如下:流动相置于储液瓶,由四元泵输入系统,样品用自动进样器从进样阀引入,经色谱柱分离后进入检测器进流动池,吸光度信号经放大后由记录仪记录。
检测器则主要有UV-VIS、二极管阵列、示差折光、荧光、电化学及质谱等。
图3-4为Agilent 1100 HPLC仪器的结构示意图,它主要由下面几部分组成:(1)真空脱气机:高性能脱气,避免了烦琐的操作,可提高仪器的稳定性。
(2)四元输液泵:Agilent 1100泵是采用新的单向结构的活塞泵。
流量设定范围从0.2至10mL·min-1,精度0.1mL·min-1。
该泵可自动监测压缩性补偿值,保持高压条件下的流量准确度。
其压力上限可在0-4×104kPa(0-6000psi)的范围内调节。
(3)自动进样器:样品盘容量100×2mL,样品进样体积为0.1-1500µL。
具有操作简便,准确度高,重现性好的特点。
(4)柱温箱:控温范围:低于室温10℃-80℃,可容纳30cm长的色谱柱,样品在此分离。
根据样品类型和分离模式,可选用各种不同的液相色谱柱。
1. 溶剂柜2. 真空脱气机3. 排液阀4. 四元泵5.自动进样器6. 柱温箱7. 检测器图3-4 Agilent 1100 HPLC仪器结构示意图(5)DAD检测器:波长范围190-950nm,可变狭缝,可进行自动峰检索,利用紫外谱图进行峰确认。
agilent安捷伦液相色谱仪 1100技术参数

agilent安捷伦液相色谱仪 1100技术参数安捷伦(Agilent)液相色谱仪1100是一种高性能液相色谱仪(HPLC),广泛应用于各种分析和研究领域。
本文将详细介绍该仪器的技术参数。
1.型号和配置Agilent 1100液相色谱仪系列包括多个型号和配置,以满足不同用户的需求。
典型配置通常包括进样器、泵浦模块、色谱箱、检测器和数据处理系统。
2.进样器该液相色谱仪配备了自动进样器,可实现自动化样品进样,提高工作效率。
进样器具有样品冷却功能,可以保持样品的稳定性。
3.泵浦模块Agilent 1100使用的泵浦模块具有高压稳定性和流量控制精度,可以实现高效的溶剂输送。
该泵浦模块可实现梯度洗脱,以满足复杂样品分离的需求。
4.色谱箱色谱箱是液相色谱仪的核心部件之一。
Agilent 1100色谱箱具有温度控制功能,可以在恒温环境下进行色谱分离。
该色谱箱具有多个色谱柱位,可支持多种柱剂的使用。
5.检测器该液相色谱仪配备了多种检测器,包括紫外-可见(UV-Vis)检测器、荧光检测器和电化学检测器等。
这些检测器具有高灵敏度和高选择性,可用于定量和定性分析。
6.数据处理系统Agilent 1100液相色谱仪配备了先进的数据处理系统,可实现数据采集、处理和分析。
该系统提供友好的用户界面,便于用户操作和结果解释。
7.技术指标该液相色谱仪具有以下技术指标:-最高工作压力:可达到400 bar,保证高效的溶剂输送。
-流量范围:0.001-10 mL/min,可满足不同分析需求。
-温度范围:可设置在4-80摄氏度之间,保持色谱分离的稳定性。
-波长范围:紫外-可见检测器的波长范围为190-700 nm,适用于不同波长下的分析。
-分辨率:高分辨率,可实现复杂样品的高效分离。
-柱温控制:色谱箱具有柱温控制装置,可提高分离效率和重复性。
-低噪声级:检测器具有低噪声设计,提供准确的检测信号。
总之,Agilent 1100液相色谱仪是一款功能强大、性能稳定的高性能液相色谱仪,适用于各种分析和研究领域。
安捷伦1100液相色谱仪的使用说明书

(五) Agilent 1100 LC维护保养
1 色谱柱长时间不用 存放时 柱内应充满溶剂 两端封死 如ACN适于反相色谱柱 正相 色谱柱用相应的有机相
2 对于手动进样器 当使用缓冲溶液时 要用水冲洗进样口 同时搬动进样阀数次 每次数 毫升
点击Ok进入下一画面
5 柱温箱参数设定: 在”Temperature”下面的方框内输入所需温度,并选中它,点击”more>>” 键,如图所示,选中”Same as left”---使柱温箱的温度左右一致 点击ok进入下一画面
6 VWD检测器参数设定: 在”Wavelength”下方的空白处输入所需的检测波长,如254nm, 在”Peak width (Response time)”下方点击下拉式三角框,选择合适的响应时间, 如>0.1min (2s) 在Timeta ble 中可以 Insert 一行 输入随时间切换的波长 如1min
在 Flow 处输入流量,如1ml/min 在 Solvent B 处输入70.0,(A=100-B) ,也可Insert 一行”Timetable” ,编辑梯度 在 Pressure Limits Max 处输入柱子的最大耐高压 以保护柱子 单击Ok进入下一画面
4 自动进样器参数设定: 选择合适的进样方式, 如图所示 进样体积 1.0ul ,洗瓶位置为6号 “Standard Injection”---- 只能输入进样体积 此方式无洗针功能 Injection with Needle Wash ---- 可以输入进样体积和洗瓶位置 此方式针从样品瓶抽完样品后 会在洗瓶中洗针 U se injector program ---可以点击Edit 键进行进样程序编辑
Agilent 1100系列HPLC在线脱气机 说明书

带有Seal Wash的泵头结构图
3 2
}1
Agilent 四元/二元/单元泵日常维护
如何更换溶剂出口过滤芯
Agilent 四元/二元/单元泵日常维护
严重污染的溶剂出口过滤芯
如何更换活塞杆密封圈
Agilent 1100 系列泵使用须知
Agilent 1100 系列泵的使用须知
当泵头安装有冲洗附件时,由于该附件中也有密封垫,这样就
会增加活塞杆运动时的阻力。所以开泵前一定要用10%异丙醇,
并将其流速调至约20滴/分钟使这溶液流过冲洗装置。
10%异丙醇有助于降低水的表面张力,并有抑菌作用。不要用
其它溶剂代替。
当泵头安装有冲洗附件而不开启10%异丙醇,会使密封垫及活塞
Agilent 1100系列HPLC
Agilent 1100 在线脱气机-在线脱气机 (G1322A/G1379A)
工作原理
何时需要使用Agilent 1100在线脱气机
脱气机的操作
标准脱气机(G1322A)
标准脱气机每个通道体积为12ml,建议排液操作:5ml/min 排6min以上。
微脱气机(G1379A).
2.如何简单判断脱气机腔体或溶剂过滤头是否堵塞?
关闭泵,拧开脱气机出口或比例阀入口管线,此时溶剂会因为重力流出,脱气机或溶剂
。 过滤头堵塞时,溶剂会流出不畅或不流出
Agilent 1100 四元泵 (G1311A)
Agilent 1100 四元泵工作原理
Agilent 1100 泵
Agilent 1100 泵头(Pump Head)结构图
[例] 1 DRAW 5μL(抽取5μL样品) 2 NEEDLE WASH vial 7(洗针到7号瓶) 3 INJECT(进样)
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四元泵
使用2,4,8mm内径的柱子 流量范围从 0.2 到 10 ml/min 应用于研究和常规分析
真空脱气机为标准配置。
Agilent Technologies
2003 LC 色谱柱
溶剂传输系统
往复活塞泵(单向阀)
免费服务电话: 800-8203278
21页
含有过氧化物的色谱级醚必须用氧化铝干燥剂。尤其是使用折光 示差检测器时必须考虑
在有机溶剂中的有机酸溶液。例甲醇中1%乙酸会腐蚀不锈钢 含有强络合剂的溶液。
四氯化碳和异丙醇或THF混合液。
免费服务电话: 800-8203278
Agilent Technologies
2003 LC 色谱柱
Name Acetic Acid Acetone Acetonitrile Benzene Butyl Alcohol Carbon Tetrachloride Chloroform Cyclohexane Cyclopentane Dichloroethane Dichloromethane Dimethylformamide Dimethyl Sulfoxide Dioxan Ethylacetate Ethyl Alcohol Di-Ethylether Heptane Hexane Methyl Alcohol Methylethyl Ketone I-Octane Pentane I-Propyl Alcohol Di-Propylether Tetrachloroethane Tetrahydrofuran Toluene Trichloroethane Water Xylene
2003 LC 色谱柱
20页
Agilent 1100系列泵
单元泵
常规质量控制分析 简单混合物的分析 用于聚合物分析的体积排阻色谱。 半制备工作
二元泵
有两套完整泵头 高压混合,无需脱气 在低流速下要提高操作性能(0.05~5.0ml/min) ,需要真空脱气机 延迟体积 180-480ul (600-900ul with mixer)
免费服务电话: 800-8203278
溶剂的相溶性
16页
Immiscible Miscible
Agilent Technologies
2003 LC 色谱柱
17页
溶剂脱气
目的 排除溶解在流动相中的氧气和氮气
脱气方法
He脱气 回流加热脱气 真空脱气 超声脱气
免费服务电话: 800-8203278
Agilent Technologies
3 活塞杆 密封垫 (反相) P/N 5063-6589
(正相) P/N 0905-1420
4 防磨损护圈
部件号:3150-0577
含:250mL玻璃溶剂瓶, 涂敷有聚四氟乙烯的锥形漏斗底瓶, 锥形 顶部, 1, 000mL烧杯和夹具
聚四氟乙烯滤膜,3150-0509 47mm,10/包,孔径2um
免费服务电话: 800-8203278
Agilent Technologies
2003 LC 色谱柱
14页
溶剂过滤
不干净的溶剂或在溶剂瓶中长菌的溶剂会阻塞溶剂过滤器,降低泵的操作性能 。
遵从下列建议可以提高性能,延长溶剂过滤器的寿命:
使用无菌溶剂瓶避免溶剂长菌。 用滤膜过滤溶剂去除微生物。 每两天更换或过滤溶剂。 避免溶剂瓶直接日照。
玻璃过滤头
1/包装 部件号:5041-2168
3mm聚四氟乙烯筛板 4/包装 部件号:5062-8517
检测器
6页
手执控制器
Agilent Technologies
2003 LC 色谱柱
7页
HPLC连接管线与接头
零死体积接头
PEEK或不锈钢管线或毛细管线构成了LC系统 中的样品流路。 理想的管线:惰性表面,零死体积,紧密无 泄漏的连接。 常见问题:
泄漏或接头松动 压扁或压缩的管线 改变应用
不能使用的接头
可变波长检测器 VWD
免费服务电话: 800-8203278
二极管阵列检测器DAD or
多波长检测器MWD
荧光检测器FLD or
示差检测器RID
Agilent Technologies
2003 LC 色谱柱
堆积配置
优化流路减小死体积 流路自上而下
溶剂柜 脱气机
泵
自动进样器 柱温箱
免费服务电话: 800-8203278
G1312A, G1354A
和Agilent 1100 系列在线真空脱气装
置
(G1322A)
泵的日常维护:
✓更换密封件与活塞 ✓更换聚四氟乙烯滤芯 ✓更换主动入口阀(AIV)上的滤芯 ✓清洗出口球阀 ✓清洗或更换溶剂入口滤芯
免费服务电话: 800-8203278
Agilent Technologies
•定购时的注意事项 管线颜色 +长度 + 接头 = 部件号
免费服务电话: 800-8203278
Agilent Technologies
2003 LC 色谱柱
11页
弹性不锈钢管线
长度 0.12 mm 体积 [mm] 内径 [mL] 105 5021-1820 1.2 150 5021-1821 1.7 200 5065-9935 2.3 280 5021-1822 3.2 400 5021-1823 4.5 600 700 800
Piston Displacement (祃)
0
System Pressure>0
System Pressure=0
100
One Piston Cycle
TIME
w/o compensation with compensation
For internal use only 11
Agilent Technologies
18页
免费服务电话: 800-8203278
Agilent Technologies
2003 LC 色谱柱
19页
准备流动相
流动相应该:
HPLC 级 过滤 (最大0.45 um, 0.2 um最好) 脱气,尤其在低流速时 相溶 注意截止波长/折光指数
免费服务电话: 800-8203278
Agilent Technologies
0.17 mm 内径
5021-1816 5021-1817 5065-9931 5021-1818 5021-1819 5065-9933 5065-9932
体积 [mL] 2.4 3.4 4.6 6.4 9.1 13.6 15.9
0.25 mm 体积 内径 [mL]
5022-6508 13.8
5065-9930 39.3
组分保留弱或无保留,因此先出峰 组分保留强,因此后出峰
免费服务电话: 800-8203278
Agilent Technologies
2003 LC 色谱柱
单元泵
真空脱气机 二元泵
5页
Agilent 1100 HPLC
系统硬件概观
四元泵
手动进样器
自动进样器 (可选标准、控温、微盘) 柱温箱
质谱检测器
2003 LC 色谱柱
溶剂的紫外吸收
Solvent
乙腈 水 环己烷 己烷 甲醇 乙醇 乙醚 二氯甲烷 氯仿 四氯化碳 四氢呋喃 甲苯
UV Cutoff (nm)
190 190 195 200 210 210 220 220 240 265 280 (210) 280
UV 截止波长是吸收等于 1 AU时的波长.
不锈钢滤芯
1/包装 部件号:01018-60025
免费服务电话: 800-8203278
Agilent Technologies
2003 LC 色谱柱
15页
溶剂信息
避免使用下列对不锈钢有腐蚀性的溶剂:
卤化物碱金属溶液和相应的酸溶液。例: 碘化锂, 氯化钾等
高浓度的无机酸例如:硝酸和硫酸。
能够形成卤素自由基或酸的氯化试剂及其混合物。因不锈钢可起 到催化剂的作用
Gold Seal
Sapphire Insert
Ruby Ball
Spring Insert
Agilent Technologies
2003 LC 色谱柱
溶剂传输系统
消除流量脉冲-串联柱塞
单向阀
P
脉冲阻尼器
减少了单向阀用量 需要阻尼器 压缩因子补偿
免费服务电话: 800-8203278
22页
Agilent 1100 Series Pumps: Solvent Compressibility Compensation
1页
Agilent 1100 HPLC及消耗品简介
免费服务电话: 800-8203278
Agilent Technologies
2003 LC 色谱柱
2页
高效液相色谱
(HPLC)
固定相-在色谱柱中保持静止的相:如C18,硅胶 流动相-在流经色谱柱时载运样品通过固定相
混合器 泵
进样口 色谱柱
色谱图
检测器
溶剂
分离-基于在固定相与流动相不同的迁移率
免费服务电话: 800-8203278
Agilent Technologies
2003 LC 色谱柱
液相色谱类型
3页
免费服务电话: 800-8203278
Agilent Technologies
2003 LC 色谱柱
正相 &反相色谱
4页
正相固定相 溶剂强度 反相固定相
免费服务电话: 800-8203278
Agilent Technologies