第十一章 荧光分析法复习过程
第十一章荧光分析法复习过程
第十一章 荧光分析法、选择题1．荧光分析法是通过测定 ( ) 而达到对物质的定性或定量分析。
A 、激发光 D 、散射光2．下面 ( )分析方法不属于分子发射光谱法。
3．荧光发射光谱含有 ()个发射带。
A 、 1B 、 2C 、 3 4．下列关于荧光光谱的叙述错误的是()A 、 荧光光谱的形状与激发光的波长无关B 、 荧光光谱与激发光谱一般是对称镜像C 、 荧光光谱属于分子的受激发射光谱D 、 荧光激发射光谱与紫外吸收光谱重合 5．下列叙述错误的是()A 、 荧光光谱的最长波长和激发光谱的最长波长相对应B 、 荧光光谱的最短波长和激发光谱的最长波长相对应C 、 荧光光谱的形状与激发光波长无关D 、 荧光波长大于激发光波长6．激发态分子经过振动弛豫回到第一电子激发态的最低振动能级后，经系间窜越转移至激 发三重态， 再经振动弛豫降至三重态的最低振动能级， 然后发出光辐射跃迁至基态的各个振 动能级，这种光辐射称为 ()。
A 、分子荧光B 、分子磷光C 、瑞利散射光D 、拉曼散射光 7．关于振动弛豫，下列叙述中错误的是( )。
A 、振动弛豫只能在同一电子能级内进行B 、振动弛豫属于无辐射跃迁C 、通过振动弛豫可使处于不同电子激发态的分子均返回到第一电子激发态的最低振动 能级D 、振动弛豫是产生 Stokes 位移的原因之一 8．荧光寿命指的是 ( )。
A 、 从激发光开始照射到发射荧光的时间B 、 受激分子从第一电子激发态的最低振动能级返回到基态所需的时间C 、 从除去激发光光源至分子的荧光熄灭所需的时间D 、 除去激发光源后，分子的荧光强度降低到激发时最大荧光强度的 1/e 所需的时间9．关于荧光效率，下面叙述不正确的是()A 、 具有长共轭的 n~ ；跃迁的物质具有较大的荧光效率B 、 分子的刚性和共平面性越大，荧光效率越大C 、 顺式异构体的荧光效率大于反式异构体 学习资料D 、共轭体系上的取代基不同，对荧光效率的影响不同 10．采用下列 ()措施可使物质的荧光效率提高。
第十一章 荧光分析法.ppt2
⑹磷光发射 激发态分子经过系间跨越到达激发三重态 后，并迅速的以振动弛豫到达第一激发三重态 (T1)的最低振动能级上，第一激发三重态分子 的最低振动能级上，第一激发三重态分子 经发射光子返回基态。此过程称为磷光。 经发射光子返回基态。此过程称为磷光。 磷光发射是不同多重态之间的跃迁(T 磷光发射是不同多重态之间的跃迁(T1→ S0) 属于“禁阻”跃迁， 属于“禁阻”跃迁，因此磷光的寿命比荧光要 长 的多，约为10 10s。所以， 的多，约为10-3s～10s。所以，将激发光从磷 光样品移走后，还常可观察到发光现象， 光样品移走后，还常可观察到发光现象，而荧 光发射却观察不到该现象。 光发射却观察不到该现象。
⑸体系间跨越 系间跃迁是不同多重态之间的一种无辐射跃迁 该过程是激发态电子改变其自旋态， 该过程是激发态电子改变其自旋态，是分子的多 重性发生变化的结果。 重性发生变化的结果。 当两种能态的振动能级重叠时， 当两种能态的振动能级重叠时，这种跃迁的几 率增大。 率增大。 S1→T1即是单重态到三重态的跃迁，即较低单 即是单重态到三重态的跃迁， 重态振动能级与较高的三重态振动能级重叠， 重态振动能级与较高的三重态振动能级重叠，这 种跃迁是“禁阻”跃迁。 种跃迁是“禁阻”跃迁。
⒉荧光发射光谱 通过固定激发波长，扫描发射(即荧光测定) 通过固定激发波长，扫描发射(即荧光测定) 波长所获得的荧光强度( 波长所获得的荧光强度(F)—发射波长(λem)的关 发射波长( 系的曲线为荧光发射曲线。 系的曲线为荧光发射曲线。 荧光光谱反映了在相同的激发条件下， 荧光光谱反映了在相同的激发条件下，不同 波长处分子的相对发射强度。 波长处分子的相对发射强度。 荧光光谱可用于荧光物质的鉴别， 荧光光谱可用于荧光物质的鉴别，并作为荧 光测定时选择恰当的测定波长或滤光片。 光测定时选择恰当的测定波长或滤光片。
2014第十一章荧光分析法解析
A. 长共轭结构使得分子的荧光波长向短波方向移动。 B. 分子的刚性越强，荧光强度越小。 C. 给电子取代基可导致荧光增强。 D. 吸电子取代基可导致荧光增强。
Cx
Fx Fs
F0 F0
C s
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第三节 荧光分光光度计和分析新技术
滤光片荧光计 滤光片－单色器荧光计 荧光分光光度计
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一、荧光分光光度计
1. 主要部件
源发光源（氙灯）、激发单色器、样品池、发射单色器、检测系统
荧光分光光度计结构示意图 1.光源
2、4、7、9. 狭缝 3.激发单色器
5.样品池 6.表面吸光物质 8.发射单色器 10.检测器 11.放大器 12.指示器 13.记录器
内部能量转换
当两电子激发态能量相差较小以致其振动能级有重 叠时，受激分子由高电子能级转移致低电子能级的 过程。
（振动失活在同样多重态间进行，如S2* S1*）
5
术语
外部能量转换 激发态分子与溶剂或其它溶质碰撞，以热能的形 式释放能量的过程。
体系间跨越 处于激发态分子的电子发生自旋反转而使分子的 多重性发生变化的过程，如S1* T1*
率即为1/ f。
F t F 0 e Kt F 荧光强度
K 衰减常数
F f F0 / e F0e K f
1 / e e K f
K1 1
K 1 f
F 0 / F t e Kt e t / f ln F 0 t
Ft f
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荧光效率
发射荧光的光子数
f 吸收激发光的光子数
物质的荧光效率在0～1之间，0.1～1时有分析价值。
第十一章 荧光分析方法
在某些情况下，电子在跃迁过程中还伴随着自 旋方向的改变，这时分子的两个电子的自旋方向 相同，自旋量子数都为1／2，总自旋量子数s等 于1，这时分子处于激发三重态(2s+1＝3)。 S0+hν→T1
6
激发单重态与激发三重态的区别：
激发单重态分子是抗磁性分子，激发三重 态分子是顺磁性分子；
激发单重态的平均寿命大约10-8s，激发三 重态的平均寿命大约10-4~1s； 电子由S0→S1，S2等的跃迁较容易，属于允 许跃迁。电子由S0→T1，T2等的跃迁较难发 生，属于禁阻跃迁。
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（二）有机化合物分子结构与荧光的关系
能够发射荧光的物质同时具备两个条件：即有 强的紫外—可见吸收和一定的荧光效率。 1．长共扼结构 绝大多数能产生荧光的物质都含有芳香环或杂 环、因为芳香环和杂环分子具有长共轭的π—π* 跃迁。π电子共轭程度越大，荧光强度(荧光效率) 越大，而荧光波长也长移。
24
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5．散射光
当一束平行单色光照射在液体样
品上时，大部分光线透过溶液，小部分由于光
子与物质分子相碰撞，使光子的运功方向发生
改变而向不同角度散射，这种光称为散射光。
光子和物质分子发生弹性碰撞时，发生能量
的交换，仅仅是光子运动方向发生改变，这种
散射光称为瑞利光。其波长与入射光波长相同。
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光子和物质分子发生非弹性碰撞时．在光子 运动方向发生改变的同时，光子与物质分子发 生能量的交换，光子把部分能量转移给物质分 子或从物质分子获得部分能量，而发射出比入 射光稍长或稍短的光，这种散射光称为拉曼光。 散射光对荧光测定有干扰，尤其是波长比入 射光波长更长的拉曼光。
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② 磷光(phosphorescence)发射：经过体系间跨越 的分子再通过振动弛豫降至激发三重态的最低振动 能级，分子在激发三重态的最低振动能级可以存活 一段时间，然后返回至基态的各个振动能级而发出 光辐射，这种光辐射称为磷光。 T1→S0+hνp 磷光发射时间较长，约10-4-10s。 激发光停止后，磷光可持续一段时间。 电子由S0→T1为禁阻跃迁，需由S1经过体系间跨越 转化为T1。 同一分子的S1→S0 比T1→S0 的能级差大，磷光 的波长比荧光波长长
仪器分析课件12荧光分析法
ex = 356nm em = 404nm
f = 0.36
16
2. 分子的刚性
• 同样具有*跃迁的长共轭分子中，刚性分子 增加了共平面性， 越大， 长移。
f = 0.2
-O
O
COO-
C H2
f = 1.0
-O
O
O
COO- 荧光素钠
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原来不发生荧光的，如：8-羟基喹啉
消除干扰，提高选择性、灵敏度
脉冲激光
样品
干扰 组分
44
3. 同步荧光分析
固定，同时扫描激光光谱和发射光谱 若： = em - ex
Fsp = KcFem Fex 提高灵敏度和选择性
混合物的同步荧光光谱（ =3nm）
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4. 胶束增敏荧光
CH3(CH2)11OSO3-Na+ 非极性疏水基团 极性亲水基团 增加溶解度 增加荧光效率 增加荧光的稳定性
• 荧光分析法的灵敏度高于紫外-可见分光光度法
荧光法
F=Kc
紫外法 A lg T lg I
I0
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二、定量分析方法
1. 工作曲线法
用空白溶液调零 用标准溶液调满刻度
F cx
c1
c2 c3 c4 c5
20 40 60 80 100%
16 32 48 64 80%
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2. 比例法（对比法）
光
强
荧光光谱 横坐标em， 度
纵坐标 发射光强度
400
500
(nm)
8
溶液荧光光谱通常具有如下特征
斯托克斯位移 荧光光谱的形状与激发波长无关 荧光光谱与激发光谱的镜像关系
第十一章荧光分析法.ppt
散射光干扰及消除
散射光：当一束平行光投射在液体试样上，大部分 被吸收或透过，小部分由于光子和物质分子相碰撞， 使光子的运动方向改变，而向不同方向散射形成的 光。
散射光包括瑞利散射光和拉曼光
瑞利散射光：无能量的交换，λ散射≈λ激发
拉曼光： 有能量转移， λ散射> <λ激发
干扰的消除
1）改变激发光的波长；
单色器1
样品池
单色器2
垂直方向
放大 与
记录
检测器
荧光仪特点
与分光光度计的主要差别
① 垂直测量方式, 消除透射光影响 ② 两个单色器，激发和发射，常用光栅
1 光源 A、白炽灯：钨灯、卤钨灯 B、气体放电灯：氢、氙、汞，
常用氙灯（波长： 250-700nm） C、激光光源 2 单色器
闪耀光栅
3 检测器 光电倍增管
5.弱荧光的芳香族化合物也可与荧光试剂作用生成 强荧光衍生物以提高测量灵敏度。
故药物中的胺类、抗菌素、维生素、甾体类均可 用荧光法测定。该法在体内药物定量分析中应用甚 广。
思考题
• 1.荧光和磷光在产生机制上有什么不同？
• 2.何谓荧光量子效率？哪些结构物质有较高荧光效率？
• 3.以下物质中可能有最强荧光的物质是（ ）。
6.（）荧光光谱形状与激发光的波长无关。
7. 荧光光谱的特征？
1. 所谓荧光，即指某些物质经入射光照射后，吸收了入射光的能量，从而辐射 出比入射光( )。
A. 波长长的光线
B. 波长短的光线
C. 能量大的光线
D. 频率高的光线
2. 下列说法正确的是(
)
A 荧光发射波长永远大于激发波长
B 荧光发射波长永远小于激发波长
分析化学第11章--荧光分析法
概述 基本原理 定量分析方法 荧光分析技术及应用
11.1 概述
1.光致发光：物质受到光照射时，除 吸收某种波长的光之外还会发射出比 原来所吸收光的波长更长的光，这种 现象称为光致发光。
2.荧光(fluorescence)：物质分子接受 光子能量被激发后，从激发态的最低 振动能级返回基态时发射出的光。
低一些。 2.荧光的产生 1）激发过程： 基态分子 hv 激发单重态(s1*,s2*)
激发三重态
2）激发态能量传递途径
传递途径
辐射跃迁
无辐射跃迁
荧光 磷光 系间跨越内转换 外转换 振动弛豫
1.无辐射跃迁
a.振动驰豫(vibrational relexation):
处于激发态各振动能级的分子通过 与溶剂分子的碰撞而将部分振动能 量传递给溶剂分子，其电子则返回 到同一电子激发态的最低振动能级 的过程。
2)电子能态的多重性：
M=2S+1
S:总自旋量子数。S＝s1+s2 对于 S=1/2 +(-1/2)=0
M=2S+1=1
对应基线单重态；
对于激发态
s1=1/2,s2=1/2,
S=1/2+1/2=1, M=2×1+1=3 三重态
• 单重态与三重态的区别 1）电子自旋方向不同； 2）激发三重态的能量稍
8-羟基喹啉
8－羟基喹啉镁
弱荧光
强荧光
刚性和共面性增加，可以发射荧光或增 强荧光。
c.位阻效应
NaO3S
N(CH3)2
NaO3S
N(CH3)2
1-二甲氨基萘-7-磺酸钠 f＝0.75
1-二甲氨基萘-8-磺酸钠 f ＝0.03
第十一章荧光分析法PPT学习教案
会计学
1
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荧 光 分 析 法 ：是基 于被测 物质的 荧光谱 线位置 及其强 度进行 的 分 析 方 法 （属于 发射光 谱法） 。 应 用 对 象 ： 一般是 能产生 强荧光 的分子 或某些 特定离 子 本章重点： （ 1） 分 子 荧 光产生 的过程 （2） 荧光与 分子结 构关系 （ 3） 分 子 荧 光定量 方法
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S 为 电 子 自旋 量子数 的代数 和(要 么为0要 么为1 )； S = 0 时 M=1， 此时电 子所处 的能态 为单重 态用符 号S表示 。 S = 1 时 M=3， 此时电 子所处 的能态 为三重 态用符 号T表 示。 平 行 自 旋 比 成对自 旋稳定 (洪特规 则)， 三重态 能级比 相应单 重态能 级低； 大多数 有机分 子的基 态处于 单重态 用S0表 示；
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它只能用来校正溶剂中的荧光物质，适合于不被荧光杂质 沾污的荧光化合物的直接测定。（3）采用试剂空白则更好 一些，由于试剂空白除含溶剂之外，还含有与标准及试样 溶液中相同浓度的各种试剂，因而它可以校正试剂中的杂 质所引起的吸收和发光，可用于间接测定法。（4）但这两 种空白都无法校正原已存在于试样中的基体和沾污物，有 时候可以通过加入某种化合物于试样溶液中，而这种化合 物可特效地猝灭分析物质的荧光，从而获得一种很接近于 真实的空白溶液。如测VB2时用连二亚硫酸钠Na2S2O4
kEC
kP
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2.有机化合物分子结构与荧光关系
（ 1） 跃 迁 类 型：* → 的 荧 光效 率高， 系间跨 越过程 的速率 常数小 ，有利 于荧光 的产生 ； （ 2） 共 轭 效 应：提 高共轭 度有利 于增加 荧光效 率并产 生红移 （ 3） 刚 性 平 面结构 ：可降 低分子 振动， 减少与 溶剂的 相互作 用，故 具有很 强的荧 光。如 荧光素 和酚酞 有相似 结构， 荧光素 有很强 的荧光 ，酚酞 却没有 。 （ 4） 取 代 基 效应： 给电子 基 如 － NH2、 － OH、 － OCH3 使 荧 光 增 强 ，波长 长移； 吸 电 子 基 如 － NO2、 －F、－ Cl 使 荧 光 减 弱 或熄灭 。
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第十一章荧光分析法
一、选择题
1．荧光分析法是通过测定( )而达到对物质的定性或定量分析。
A、激发光
B、磷光
C、发射光
D、散射光
2．下面( )分析方法不属于分子发射光谱法。
A、紫外一可见分光光度法
B、荧光分析法
C、磷光分析法
D、化学发光分析法
3．荧光发射光谱含有( )个发射带。
A、1
B、2
C、3
D、不一定
4．下列关于荧光光谱的叙述错误的是（）
A、荧光光谱的形状与激发光的波长无关
B、荧光光谱与激发光谱一般是对称镜像
C、荧光光谱属于分子的受激发射光谱
D、荧光激发射光谱与紫外吸收光谱重合
5．下列叙述错误的是（）
A、荧光光谱的最长波长和激发光谱的最长波长相对应
B、荧光光谱的最短波长和激发光谱的最长波长相对应
C、荧光光谱的形状与激发光波长无关
D、荧光波长大于激发光波长
6．激发态分子经过振动弛豫回到第一电子激发态的最低振动能级后，经系间窜越转移至激发三重态，再经振动弛豫降至三重态的最低振动能级，然后发出光辐射跃迁至基态的各个振动能级，这种光辐射称为( )。
A、分子荧光
B、分子磷光
C、瑞利散射光
D、拉曼散射光
7．关于振动弛豫，下列叙述中错误的是( )。
A、振动弛豫只能在同一电子能级内进行
B、振动弛豫属于无辐射跃迁
C、通过振动弛豫可使处于不同电子激发态的分子均返回到第一电子激发态的最低振动能级
D、振动弛豫是产生Stokes位移的原因之一
8．荧光寿命指的是( )。
A、从激发光开始照射到发射荧光的时间
B、受激分子从第一电子激发态的最低振动能级返回到基态所需的时间
C、从除去激发光光源至分子的荧光熄灭所需的时间
D、除去激发光源后，分子的荧光强度降低到激发时最大荧光强度的1／e所需的时间9．关于荧光效率，下面叙述不正确的是（）
A、具有长共轭的π→π﹡跃迁的物质具有较大的荧光效率
B、分子的刚性和共平面性越大，荧光效率越大
C、顺式异构体的荧光效率大于反式异构体
D、共轭体系上的取代基不同，对荧光效率的影响不同
10．采用下列( )措施可使物质的荧光效率提高。
A、适当降低溶液浓度
B、降低溶剂极性
C、加入重氮化合物
D、剧烈搅拌
11．下列化合物中，哪种物质的荧光效率最大（）
A、苯
B、联苯
C、萘
D、蒽
12．萘在下列( )溶剂中的荧光强度最强。
A、1一氯丙烷
B、1一溴丙烷
C、1一碘丙烷
D、1，2一二氯丙烷
13．苯胺在( )条件下荧光强度最强。
A、pH=1
B、pH=3
C、pH=10
D、pH=13
14．荧光素钠的乙醇溶液在( )条件下荧光强度最强。
A、0℃
B、-10℃
C、-20℃
D、-30℃
15．一般要在与入射光垂直的方向上观测荧光强度，这是由于( )。
A、只有在与入射光垂直的方向上才有荧光
B、荧光是向各个方向发射的，可减小透射光的影响
C、荧光强度比透射光强度大
D、荧光发射波长比透射光波长长
16．荧光法测定硫酸奎宁时，当激发光波长为320nm时, Raman光波长为360nm；当激发光波长为350nm时，Raman光波长为400nm。
若最大发射波长为448nm，则进行荧光测定时应选择( )。
A、λex=320m，λem=400nm
B、λex=320nm，λem=360nm
C、λex=350nm，λem=448nm
D、λex=320nm，λem=448nm
17．荧光分光光度计常用的光源是( )。
A、空心阴极灯
B、氙灯
C、氘灯
D、硅碳棒
18．用波长为320nm的入射光激发硫酸奎宁的稀硫酸溶液时，将产生320nm的( )。
A、荧光
B、磷光
C、Rayleigh光
D、Raman光
19．激发光波长和强度固定后，荧光强度与荧光波长的关系曲线称为（）
A、吸收曲线
B、激发光谱
C、荧光光谱
D、工作曲线
20．采用激光作为荧光光度计的光源，其优点是（）
A、可以有效消除散射光对荧光测定的干扰
B、可以提高荧光法的选择性
C、可以提高荧光法的灵敏度
D、可以避免荧光熄灭现象的产生
二、填空
1．荧光光谱的特征是--------、---------和-----------。
2.激发态分子经过--------回到第一电子激发态的最低振动能级后，以-----发射光量子跃迁回到基态的任一振动能级，这时所发射的光量子称为荧光。
3．荧光物质的------和--------是鉴定物质的依据，也是定量测定时最灵敏的条件。
4．荧光物质的激发光谱可能含有-----吸收带，但其发射光谱却只含有------吸收带。
5．能够发射荧光的物质应具备的两个条件是：物质分子有强的------和---------。
------、--------
具有较高的荧光效率
三、简答题
1．哪些因素会影响荧光波长及强度?
2．在什么条件下荧光强度和荧光物质的浓度成正比?
3．分子结构与荧光的关系。
4．为什么在室温下溶液很少呈现磷光?在什么条件下才能检测到磷光?
5．为什么荧光分析法的灵敏度高于紫外一可见分光光度法?
6．哪些物质容易发生电子由单线激发态到三线激发态的体系间跨越？
7．荧光和磷光在产生机制上有何不同？
8．如何测定激发光谱和荧光光谱？
四、计算题
1．用荧光法测定复方炔诺酮片中炔雌醇的含量时，取本品20片(每片含炔诺酮应为0．54～0．66mg，含炔雌醇应为31．5～38．5μg)，研细溶于无水乙醇中，稀释至250mL，过滤，取滤液5mL，稀释至lOmL，在激发波长285nm和发射波长307nm处测定荧光强度。
如炔雌醇对照品的乙醇溶液(1．4μg／mL)在同样测定条件下荧光计读数为65，则合格片的荧光计读数应在什么范围?
2．用荧光分析法测定食品中维生素B2的含量：称取2．00g食品，用lOmL氯仿萃取（萃取率100%），取上清液2．00mL，再用氯仿稀释为lOmL。
维生素B2氯仿标准溶液浓度为0．100μg／mL。
测得空白溶液、标准溶液和样品溶液的荧光强度分别为：F O=1．5，F S=69．5，F X=61．5，求该食品中维生素B2的含量。
（μg／g）
参考答案
一、选择题
1．C 2．A 3．A 4．D 5．A 6．B 7．C 8．D 9．C 10．A
11．D 12．D 13．C 14．D 15．B 16．D 17．B 18．C 19．C 20．C
二、填空题
1．荧光发射波长总是大于激发光波长，荧光光谱形状与激发光波长无关，荧光光谱与激发光谱成镜像关系
2．振动弛豫，辐射形式
3．最大激发波长，最大发射波长
4．几个，一个
5．紫外一可见吸收，一定的荧光效率，长共轭分子、刚性平面结构分子
三、简答题
1．影响荧光波长及强度的因素有温度、溶剂、酸度、荧光熄灭剂、散射光。
2．在低浓度时荧光强度和荧光物质的浓度成正比。
3．分子结构与荧光有如下关系：①长共轭分子具有л→л﹡跃迁的较强紫外吸收，л电子共
轭程度越大，荧光强度越大，而荧光波长也长移。
②刚性平面结构分子具有较高的荧光效率，在同样的长共轭分子中，分子的刚性和共平面越大，荧光效率越大，并且荧光波长产生长移。
③共轭体系上的取代基对荧光光谱和荧光强度也有很大影响。
4．由于荧光物质分子与溶剂分子间相互碰撞等因素的影响，处于激发三重态的分子常常通
过无辐射过程失活回到基态，因此在室温下很少呈现磷光，只有通过冷冻或固定化而减少外转换才能检测到磷光。
5．荧光分析法中与浓度相关的参数是荧光物质发射的荧光强度，测量的方式是在入射光的直角方向，即在黑暗背景下检测所发射光的强度信号，因此可采用增强入射光强度或增大检测信号的放大倍数来提高灵敏度。
在分光光度法中与浓度相关的参数是吸光度，而吸光度A=lgI 0/I,如果增大入射光强度，相应也增大了透射光强度，所以其比值不会变化，如果增大检测器的放大倍数，检测到的入射光强度和透射光强度也同时增大，同样不能提高其比值，也就不能达到提高灵敏度的目的。
所以，荧光分析法的灵敏度比紫外分光光度法高。
6．7．8．略
四、计算题
1．解 测定液中炔雌醇的浓度范围在
mL
mL mL g mL mL mL g 105250205.38~105250205.31⨯⨯⨯⨯μμ 即1.26～1.54μg ／mL 之间为合格。
1．4μg ／mL 的对照品溶液的荧光计读数为65
由s
x s x c c F F =，得合格片的荧光计读数应在58．5～71．5之间。
2．解 F s -F O =K·C s ， F x -F 0 = K·C x
将F O =1．5，F S =69．5，F X =61．5，C s =0．100μg ／mL 代入方程中解得 C x =0．088μg ／mL
食品中维生素B 2的含量=C x ×00
.20.1000.20.10⨯μg/g=22μg/g。