2017届高三生物二轮复习专题八 现代生物科技专题
高三生物复习专题八现代生物科技专题
专题九现代生物科技专题本专题内容本专题内容包括《选修三现代生物科技专题》全册，包括五个专题：专题1基因工程、专题2细胞工程、专题3胚胎工程、专题4生物技术的安全性和伦理问题、专题5生态工程等。
一高考预测现代生物技术作为当前科学研究中发展最快、最前沿的科学，其许多科技进展，一直都是社会关注的热点，也是高考热点。
本专题一方面与各必修专题内容关系密切，另一方面与工农业生产、医药卫生、环境保护、人类生活关系密切。
有关本专题内容的试题一般具有新颖性、综合性、基础性的特点。
二考点归纳突破1．基因工程的基本技术第一步：获得符合人类意愿的基因，即获得。
目前采用的分离、合成目的基因的方法主要有：分子杂交法：采用加碱或加热的方法使DNA变成单链，而后加入有放射性标记的RNA，让DNA在特定的条件下，结合成DNA和RNA的杂交分子，再用酶制备出足够数量双链DNA分子，进而获得目的基因。
反转录酶法：先分离出特定mRNA，再用反转录酶做催化剂，以RNA为模板合成所需要DNA目的基因。
合成法：如果已知目的基因的碱基排列顺序，可用酶法或化学法，直接合成目的基因。
第二步：把目的基因接到某种上，常用的有能够和细菌共生的、（病毒）等。
第三、四步：通过运载体把目的基因带入某生物体内，并使它得到表达。
目的基因的表达是指目的基因进入受体细胞后能准确地转录和翻译。
目的基因能否表达是基因工程是否成功的关键。
2. 细胞工程技术（1）细胞融合技术细胞融合技术是指把两个细胞（可以是种细胞，也可以是种细胞）在的作用下，融合成一个细胞的技术。
应用细胞融合技术进行细胞杂交，能够克服的缺陷，对培育新品种具有广阔的应用前景。
（2）细胞核移植技术细胞核移植技术是将细胞核和细胞质用某种方法拆开，然后再把分离的细胞核和胞质体重新组合成一个新细胞。
把从细胞中分离出来的染色体或基因转入另一个细胞中，赋予重建的细胞以某种新的功能，（3）细胞培养技术细胞培养技术是将生物体内的某一组织分散成单个细胞，接种在人工配制的适于细胞生长发育的培养基上，然后在适当的无菌的生长条件下(如一定的光照、温度或pH值等)进行培养，使细胞能够生长和不断增殖的技术。
2017年高考生物二轮复习专题十二现代生物科技专题课件
③引物的适温延伸：DNA模板——引物结合物在 TaqDNA聚合酶的作用下，以dNTP为反应原料，靶 序列为模板，按碱基互补配对与半保留复制原理，合 成一条与模板DNA链互补的新链。这种新DNA链又 可成为下次循环的模板，重复循环变性——复性—— 延伸三步骤，每完成一个循环需2～4分钟，2～3小时 就能将待扩增目的基因扩增放大几百万倍。
3．借助基本步骤流程图、过程示意图，帮助学 生简明形象地理解和记忆相应的知识，突破重点和难 点。 4．运用比较法，澄清认识误区。有助于使基本 概念、原理清晰化，突出专有名词和术语的合理使 ，DNA分子杂交技 术与分子杂交技术，限制性核酸内切酶与DNA连接 酶、DNA聚合酶。
二、备考建议 1．构建完整的知识体系。首先明确本模块的知 识体系，建立模块内容的整体认识，如基因工程与胚 胎工程、蛋白质工程、组织培养等知识间的联系；其 次，构建本专题与必修之间的联系。 2．通过专题知识框架，掌握基本概念和基本原 理，如通过基因工程的知识框架掌握基因工程、基因 、部分基因、限制酶的基本概念。
【注意】 1．cDNA只含某种生物的部分基因，相当于 地方图书馆 其基因中含有启动子和内含子。
2．PCR的基本原理 PCR技术的基本原理：该技术是在模板DNA、 引物和四种脱氧核糖核苷酸存在下，依赖于DNA聚 合酶的酶促合成反应。DNA聚合酶以单链DNA为模 板，借助一小段双链DNA来启动合成，通过一个或 两个人工合成的少数核苷酸引物与单链DNA模板中 的一段互补序列结合，形成部分双链。在适宜的温度 和环境下，DNA聚合酶将脱氧核苷酸加到引物3′－ OH末端，并以此为起始点，沿着模板磷酸到五碳糖 (5′－3′)的方向延伸，合成一条新的DNA互补链。
2017高考生物二轮复习课件：专题八 现代生物科技专题 第1部分 专题8 精品
备考策 略
栏目导 航
热点题型突破 热点题源预测
对点规范演练
逐题对点特训
热点题型突破
题型一 基因工程及转基因技术的安全性
• 命题规律 • 高考对该热点的考查形式主要是非选择题， 主要命题方向有： • ①考查基因工程的基本操作工具和操作步骤。 • ②结合基因工程考查转基因技术的安全性。
• 方法点拨 • (1)区分一个至多个限制酶切点与每种酶一个 切点 • ①一个至多个限制酶切点：作为运载体必须 具有1个至多个限制酶切点，以便与外源基因 连接。 • ②每种酶一个切点：每种酶的切点最好只有 一个。因为某种限制酶只能识别单一切点， 若载体上有一个至多个该酶的切点，则切割 后可能会丢失某些片段。
•突破点拨
• 流程图分析法： • (1)流程图显示基因工程的四个基本步骤，即 ________、________、________和________。 农杆菌的细胞质 能运输目的基因到受体 • (2)关于Ti质粒：存在： ________________ ， 细胞内 作用：________________________ ________。 磷酸二酯键 使DNA变成两个或 • (3)关于限制酶断裂的化学键： ___________ ， 结果： ______________________ 多个 DNA片段 ________________。
• (5)近几年转基因生物进入我们的生活。下列 关于转基因生物安全性的叙述中，错误的是 B ( ) • A．我国已经对转基因食品和转基因农产品 强制实施了产品标识制度 • B．国际上大多数国家都在转基因食品标签 上警示性注明可能的危害 • C．开展风险评估、预警跟踪和风险管理是 保障转基因生物安全的前提 • D．目前对转基因生物安全性的争论主要集 中在食用安全性和环境安全性上
名师导学高考生物二轮复习课件专题小综合现代生物科技专题(八)
6．(10 分)以下为植物体细胞杂交技术流程图，其 中甲和乙分别表示两种二倍体植物细胞，基因型分别 为 Aa 和 Bb。据图分析回答：
纤维素酶和果胶酶 (1) ①过程所使用的物质是 _____________________ 。 将若干 a 和 b 等量混合后转移到培养基上培养，再经 3 种(只考虑两两 过②和③，c 细胞的基因型可能有____ 四 倍体细胞。 融合)，属于______
【解析】设计引物时应当与表达载体两端的序列 进行互补配对，A 错误；PCR 法扩增目的基因只需要 知道基因两端的序列设计合适的引物即可，而不必知 道其全部序列，B 正确；PCR 中应用耐高温的 DNA 聚合酶，C 错误；根据目的基因的编码产物选择合适 的受体细胞，以有利于基因的表达，D 正确，因此答 案为 BD。
2． (2013 江苏卷)下列关于转基因生物安全性的叙 述中，错误的是( B ) A．我国已经对转基因食品和转基因农产品强制 实施了产品标识制度 B．国际上大多数国家都在转基因食品标签上警 示性注明可能的危害 C．开展风险评估、预警跟踪和风险管理是保障 转基因生物安全的前提 D．目前对转基因生物安全性的争论主要集中在 食用安全性和环境安全性上 【解析】转基因生物是否存在安全问题，尚在争论 之中，国家为了维护消费者对转基因产品的选择权和知 情权， 一般会加贴标注， 但不会警示性注明可能的危害， B 错误。
(2) 采 用 化 学 法 进 行 过 程 ② 时 ， 一 般 是 用 ______________ 作为诱导剂。植物体细胞杂交与自然状 聚乙二醇 况下有性生殖细胞的结合相比，前者的主要优势是 ________________________ 克服远缘杂交不亲和障碍 。 (3)④过程中，细胞的全能性会 ________( 增大或减 增大 小)，⑤过程中，与芽、根的分化相关的主要植物激素是 生长素和细胞分裂素 __________________________ 。 (4)和动物细胞培养相比， ④过程所需培养基中不需 动物血清 要添加的物质主要是______________ 。 (5)获得杂种植株后， 若要利用基因工程技术导入抗 限制性核酸内 除草剂基因，需要用到的工具酶主要有______________ 切酶和DNA连接酶 ____________________ 。在基因导入时，最好把该基因 导入到植物的叶绿体或线粒体基因组中，这样做的好处 是____________________________ 防止因花粉传播造成基因污染 。
高三生物二轮复习专题整合高频突破专题八现代生物科技专题8.17胚胎工程、生态工程获奖课件名师公开课
命题点一 命题点二
命题点一胚胎工程 1.胚胎工程各技术间关系图
-2-
整合提升 题型突破 题组训练
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命题点一 命题点二
2.早期胚胎发育过程的分析
-3-
整合提升 题型突破 题组训练
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命题点一 命题点二
3.胚胎工程的操作流程 (1)试管动物技术的流程(见下图)
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-9-Βιβλιοθήκη 命题点一 命题点二整合提升 题型突破 题组训练
1.(2017广西桂林模拟)下图表示转基因牛的培育过程。请据图回答 问题。
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(1)在正常的生殖过程中判断卵子是否受精的标志
是
。
(2)采集来的卵母细胞一般要培养到
(时期),才能和获能的精子受精。
命题点一 命题点二
性原理 部分之和
生物数量不超 过环境承载力, 可避免系统的 失衡和破坏
统一协调各种 关系,保障系统 的平衡与稳定
改善和优化系 统的结构以改 善功能 使系统保持很 高的生产力
太湖富营养化 问题、过度放牧 等
林业建设中自 然系统与社会、 经济系统的关 系问题
桑基鱼塘
珊瑚礁、藻类和 珊瑚虫的关系
-16-
-10-
整合提升 题型突破 题组训练
(3)流程A和B分别指
和
。A过程应保证发育到
阶
段,才能进行B操作。方法C常用
。
(4)为同时获得多个完全相同的子代个体,可在进行B操作之前进
行
。
(5)在A中可以获得大量胚胎干细胞,其在功能上具有发育
的
。
答案 (1)在卵黄膜和透明带的间隙可以观察到两个极体 (2)减数 第二次分裂中期 (3)早期胚胎培养(动物组织培养) 胚胎移植 囊胚(桑椹胚) 显微注射法 (4)胚胎分割 (5)全能性
2017届高考生物(通用版)二轮特训：专题8现代生物科技专题含解析
第一部分专题八1．(2017·东北三校一模)抗冻蛋白是一类抑制冰晶生长的蛋白质，能降低水溶液的冰点,从而导致水溶液的熔点和冰点出现差值，这个温度差称为热滞值。
昆虫抗冻蛋白的热滞值最高，为3～6℃，鱼的热滞值为0。
7～1.5℃，因此，昆虫抗冻蛋白在实际应用上具有更大的潜力.为了扩展一些植物的生存范围,科学家利用昆虫抗冻蛋白(AFPS）的异源表达，现已成功地提高了烟草的抗冻能力。
请分析回答相关问题：（1)基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建,这一过程需要的酶是限制酶和DNA连接酶.将AFPS基因导入烟草细胞中，常用农杆菌转化法，这是因为烟草属于双（填“单”或“双”)子叶植物，当植物体受到损伤时，伤口处的细胞会分泌大量的酚类化合物,此操作过程中使用的运载体是Ti质粒。
（2)若检测AFPS基因是否整合到烟草的染色体上,一般采用DNA分子杂交技术，若检测是否产生抗冻蛋白，一般采用抗原-抗体杂交方法检测杂交带；还可以从个体生物学水平进行抗冻鉴定。
（3)生产上可将上述转基因烟草大范围种植，提高了农民的经济收入,从生态工程角度分析,主要体现了整体性原理。
解析：(1）基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建，该过程需要限制酶和DNA连接酶.烟草属于双子叶植物，常用农杆菌转化法将目的基因导入。
(2）检测目的基因是否整合到染色体上常用DNA分子杂交技术,而检测是否表达出蛋白质产物，常用抗原－抗体杂交技术，也可在个体水平进行抗冻鉴定。
（3)该转基因烟草的推广主要体现了整体性原理。
2．（2017·咸阳二模）根据下列有关胚胎工程的示意图，分析回答:（1）为使A羊超数排卵，向其注射促性腺激素，选择MⅡ中期的卵母细胞进行体外受精；体外受精前要对B细胞进行获能处理，常用的是化学诱导法.（2）将早期胚胎注入D羊子宫内的技术叫胚胎移植，D羊被称为受体（填“供体”或“受体”);为使D羊的生理状况更适合完成该技术操作，要对D羊进行同期发情处理以提高成功率。
高考生物二轮复习 专题八 现代生物科技专题讲义-人教版高三全册生物试题
专题八现代生物科技专题第Ⅰ课时基因工程与克隆技术考点一基因工程1．基因工程的基本工具(填空)2．基因工程的基本操作程序(填空)(1)目的基因的获取途径：方法具体操作直接分离从自然界已有的物种中分离，如从基因文库中获取已知核苷酸序列的较小基因，直接利用DNA 合成仪用化学方法合成，不需要模板以mRNA 为模板，在逆转录酶作用下人工合成 ①原理：DNA 复制；②条件：模板DNA 、引物、脱氧核苷酸、热稳定的DNA 聚合酶 ③过程⎩⎪⎪⎨⎪⎪⎧变性：90～95 ℃，DNA 解旋↓复性：55～60 ℃，引物与单链DNA 结合↓延伸：70～75 ℃，在热稳定的DNA聚合酶作用下合成子链 (2)基因表达载体的构建——重组质粒的构建： ①表达载体的组成：目的基因＋启动子＋终止子＋标记基因＋复制原点。
②启动子和终止子：启动子是RNA 聚合酶结合位点，启动转录；终止子是终止转录的位点。
(3)将目的基因导入受体细胞： (4)目的基因的检测与鉴定：①导入检测：DNA 分子杂交技术(使用DNA 探针)。
②表达检测⎩⎪⎨⎪⎧ 转录检测：分子杂交技术检测mRNA 翻译检测：用相应的抗体进行抗原—抗体杂交③个体生物学水平鉴定：如对转基因作物进行抗虫或抗病等接种实验。
3．蛋白质工程(填空)(1)启动子和终止密码子均在胰岛素基因的转录中起作用(2015·重庆卷，T6D)(×)(2)携带链霉素抗性基因受体菌的筛选必须通过分子检测(2014·天津卷，T4A)(×)(3)从某海洋动物中获得一基因，其表达产物为一种抗菌性和溶血性均较强的多肽P1。
目前在P1的基础上研发抗菌性强但溶血性弱的多肽药物，首先要做的是依据P1氨基酸序列设计多条模拟肽(√)(4)重组质粒与探针能进行分子杂交是因为DNA分子脱氧核糖和磷酸交替连接(×)(5)每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点(√)1．为增加油菜种子的含油量，研究人员尝试将从陆地棉基因库中获取的酶D基因与位于拟南芥叶绿体膜上的转运肽基因相连，导入油菜细胞并获得转基因油菜品种。
2017届高考生物二轮复习专题辅导与训练第一部分专题整合篇专题十二现代生物科技专题课件
④碱基对间 _______ 的氢键 _________
形成单链
作用结果
形成黏性末
端或平末端
DNA分子
DNA分子
DNA分子
2.从“基因表达”层面理解基因表达载体的必需元件
(1)表达载体的组成：目的基因＋启动子＋终止子＋标 记基因＋复制原点。 (2)启动子和终止子：启动子是RNA聚合酶结合位点， 启动转录；终止子是终止转录的位点。插入的目的基因 只是结构基因部分，其表达需要调控序列，因而用作载 体的质粒的插入部位前需要有启动子，后需要有终止子。
(Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，Tetr表示四环素抗性 基因 ) 。有人将此质粒载体用 BamH Ⅰ酶切后，与用 BamH Ⅰ酶切获得的目的基因混合，加入DNA连接酶 进行连接反应，用得到的混合物直接转化大肠杆菌。 结果大肠杆菌有的未被转化，有的被转化。被转化大 肠杆菌有三种，分别是含有环状目的基因、含有质粒 载体、含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌。
专题十二
现代生物科技专题
思维导图·宏观把握
考纲内容 1.基因工程的诞生；蛋白质工程 2.基因工程的原理和技术(含PCR)；基因工程的应用 3.植物的组织培养；细胞融合与单克隆抗体 4.动物的细胞培养与体细胞克隆 5.动物胚胎发育的基本过程与胚胎工程的理论基础；胚 胎干细胞的移植 6.胚胎工程的应用 7.转基因生物的安全性；生物武器对人类的威胁；生物 技术中的伦理问题 8.简述生态工程的原理；生态工程的实例
粒的大肠杆菌单菌落，还需使用含有 __________ 的固
体培养基。
(3)基因工程中，某些噬菌体经改造后可以作为载体，
其DNA复制所需的原料来自于__________。 [ 思路探究 ] 先分析辨别图示质粒的组成和类型，再
高考生物二轮、三轮复习课件 专题八第一讲
回归命题本源 1.植物组织培养过程原理—— 细胞的全能性 。 2.植物体细胞杂交需要用 酶解法 去除细胞壁(纤维素酶、果胶 酶)，动物组织分散成单个细胞需用 胰蛋白酶 处理。 3.植物组织培养的培养基中添加蔗糖的目的有两个：一是提供
营养 ，二是调节 渗透压 。
4.植物体细胞杂交的过程，实质上是不同植物体细胞的 原生质体 融合的过程，打破了 生殖 限的，并且动物细胞有 止分裂。 6.传代培养中遗传物质发生改变、有不死性的细胞具有 癌 细胞的特 性。 7.动物细胞培养中，细胞的增殖方式为 有丝 分裂，培养出来的多 数细胞基因型 相同 (相同、不同)。 隔离的限制。 5.动物细胞培养分为 原代 培养和
(3)过程①可采用的操作方法是________(填字母代号)。
(4)过程②采用的生物技术是______________。 (5)对早期胚胎进行切割，经过程②可获得多个新个体。这利 用了细胞的________性。 (6)为检测人乳铁蛋白是否成功表达， 可采用________(填字母 代号)技术。 A.核酸分子杂交 C.抗原－抗体杂交 B.基因序列分析 D.PCR
二、细胞工程
重温高考经典
2.下列有关细胞工程的叙述中，正确的是 ( ) ①培养基中添加蔗糖的目的是提供营养和调节渗透压 (2008· 江苏，20A) ②去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均 需酶处理 过程 远缘杂种 (2008· 全国Ⅰ，5B) (2009· 全国Ⅰ，4B) (2009· 全国Ⅰ，4A) ③不同种植物原生质体融合的过程属于植物体细胞杂交 ④利用植物体细胞杂交技术可克服生殖隔离的限制，培育
④用限制性核酸内切酶可以切割烟草花叶病毒的核酸 (2010· 浙江，2A) ⑤将人的干扰素基因重组到质粒后导入大肠杆菌，获得能产 生人干扰素的菌株 到细菌 DNA 上，属于基因工程 (2010· 大纲全国Ⅱ，5B) (2010· 大纲全国Ⅱ，5D) (2010· 江苏，18B) ⑧动物的生长激素基因转入植物后不能表达(2010· 江苏，18C) ⑨限制性核酸内切酶和 DNA 连接酶是两类常用的工具酶 (2009· 浙江，3B) ⑥自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其 DNA 整合 ⑦转抗虫基因的植物，不会导致昆虫群体抗性基因频率增加
生物专题生物工程
启动子
去核的卵母细胞
【解析】（1）因为Ⅳ2的染色体组成可能是XHXH，也可能是XHXhY，所以不能确定，Ⅲ4的基因型为XHY，所以后代女性中没有患病个体。 （2）由图可知第一条带是显性，第二条带是隐性，所以Ⅲ3基因型为XHXh，图解如下： 在III3形成卵细胞过程中的减数第二次分裂后期，带有基因H的姐妹染色单体移向细胞的同一极，形成XHXH卵细胞，XHXH卵细胞与正常精子结合形成XHXHY受精卵。
XHXh
图解如下：
在Ⅲ3形成卵细胞过程中的减数第二次分裂后期，带有基因H的姐妹染色单体移向细胞同一极，形成XHXH的细胞，XHXH卵细胞及正常精子结合形成XHXHY受精卵
（3）现III3再次怀孕，产前诊断显示胎儿（IV3）细胞的染色体为46，XY；F8基因的PCR检测结果如图2所示。由此建议III3 。
【2012安徽31】（24分）甲型血友病是由X染色体上的隐性基因导致的遗传病（H对h为显性）。图1中两个家系都有血友病发病史，Ⅲ2和Ⅲ3婚后生下一个性染色体组成是XXY的非血友病儿子（IV2），家系中的其他成员性染色体组成均正常。
（1）根据图1， （填“能”或“不能”）确定IV2两条X染色体的来源；III4及正常女子结婚，推断其女儿患血友病的概率是 。
专题八：选修（生物工程）
【2009安徽4】2008年诺贝尔化学奖授予了“发现和发展了水母绿色荧光蛋白”的三位科学家。将绿色荧光蛋白基因的片段与目的基因连接起来组成一个融合基因，再将该融合基因转入真核生物细胞内，表达出的蛋白质就会带有绿色荧光。绿色荧光蛋白在该研究中的主要作用是( ) A．追踪目的基因在细胞内的复制过程 B．追踪目的基因插入到染色体上的位置 C. 追踪目的基因编码的蛋白质在细胞内的分布 D．追踪目的基因编码的蛋白质的空间结构。
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专题八现代生物科技专题第16讲基因工程和细胞工程[考纲热度]1.基因工程的诞生Ⅰ(5年2考)2.基因工程的原理及技术Ⅱ(5年15考)3．基因工程的应用Ⅱ(5年10考)4.蛋白质工程Ⅰ(5年7考)5．植物的组织培养Ⅱ(5年9考)6.动物细胞培养与核移植技术Ⅰ(5年6考)7．动物细胞融合与单克隆抗体Ⅱ(5年8考)[诊断知识盲点]1．切割质粒的限制性核酸内切酶均能特异性地识别6个核苷酸序列。
(×)2．载体质粒通常采用抗生素合成基因作为筛选标记基因。
(×)3．抗虫基因即使成功地插入到植物细胞染色体上也未必能正常表达。
(√)4．设计扩增目的基因的引物时不必考虑表达载体的序列。
(×)5．用PCR方法扩增目的基因时不必知道基因的全部序列。
(√)6．PCR体系中一定要添加从受体细胞中提取的DNA聚合酶。
(×)7．外源DNA必须位于重组质粒的启动子和终止子之间才能进行复制。
(×)8．每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点。
(√)9．蛋白质工程可以合成自然界中不存在的蛋白质。
(√)10．将ada(腺苷酸脱氨酶基因)通过质粒pET28b导入大肠杆菌并成功表达腺苷酸脱氨酶。
每个限制性核酸内切酶识别位点至少插入一个ada。
(×)11．限制性核酸内切酶、DNA连接酶和质粒是基因工程中常用的三种工具酶。
(×) 12．E·coli DNA连接酶既可连接平末端，又可连接黏性末端。
(×)13．目的基因导入双子叶植物一般采用农杆菌转化法。
(√)14．为培育抗除草剂的作物新品种，导入抗除草剂基因时只能以受精卵为受体。
(×) 15．检测目的基因是否导入受体细胞可用抗原—抗体杂交技术。
(×)16．蛋白质工程的目的是改造或合成人类需要的蛋白质。
(√)17．蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作，定向改变分子的结构。
(×) 18．由大肠杆菌工程菌获得人的干扰素后可直接应用。
(×)19．在愈伤组织培养中加入细胞融合的诱导剂，可获得染色体加倍的细胞。
(×)20．经植物组织培养得到的胚状体用人工薄膜包装后可得到人工种子。
(√)21．在诱导离体菊花茎段形成幼苗的过程中，不会发生细胞的增殖和分化。
(×)22．培养草莓脱毒苗所采用的主要技术是细胞杂交。
(×)23．棉花根尖细胞经诱导形成幼苗能体现细胞全能性。
(√)24．植物的每个细胞在植物体内和体外都能表现出细胞的全能性。
(×)25．愈伤组织是外植体脱分化和再分化后形成的。
(×)26．再生出细胞壁是植物体细胞原生质体融合成功的标志。
(√)27．在25℃的实验条件下可顺利完成大鼠神经细胞的培养。
(×)28．动物细胞培养和植物组织培养过程中都要用到胰蛋白酶。
(×)29．动物细胞培养可用于检测有毒物质，茎尖培养可用于植物脱除病毒。
(√)30．体细胞杂交技术可用于克隆动物和制备单克隆抗体。
(×)31．动物细胞培养技术可用于转基因动物的培育。
(√)32．培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞。
(×)33．克隆培养法培养过程中多数细胞的基因型会发生改变。
(×)34．二倍体细胞的传代培养次数通常是无限的。
(×)35．动物细胞核移植的受体细胞必须是卵细胞。
(×)36．克隆动物的性状与供体动物完全相同。
(×)[构建知识网络]> > > > > > > > > > > > > > > > > > > > > > > > > >考点一基因工程[高考领航]1．(2016·高考全国乙卷)某一质粒载体如图所示，外源DNA插入到Amp r或Tet r中会导致相应的基因失活(Amp r表示氨苄青霉素抗性基因，Tet r表示四环素抗性基因)。
有人将此质粒载体用Bam H Ⅰ酶切后，与用Bam H Ⅰ酶切获得的目的基因混合，加入DNA连接酶进行连接反应，用得到的混合物直接转化大肠杆菌。
结果大肠杆菌有的未被转化，有的被转化。
被转化的大肠杆菌有三种，分别是含有环状目的基因、含有质粒载体、含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌。
回答下列问题：(1)质粒载体作为基因工程的工具，应具备的基本条件有________(答出两点即可)，而作为基因表达载体，除满足上述基本条件外，还需具有启动子和终止子。
(2)如果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选，在上述四种大肠杆菌细胞中，未被转化的和仅含环状目的基因的细胞是不能区分的，其原因是____________________________；并且________和________的细胞也是不能区分的，其原因是________。
在上述筛选的基础上，若要筛选含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌单菌落，还需使用含有________的固体培养基。
(3)基因工程中，某些噬菌体经改造后可以作为载体，其DNA复制所需的原料来自于________。
解析：(1)质粒作为载体，应具备的基本条件有：有一个至多个限制酶切割位点，供外源DNA片段(基因)插入其中；在受体细胞中能自我复制，或能整合到染色体DNA上，随染色体DNA进行同步复制；有特殊的标记基因，供重组DNA的鉴定和选择等等。
(2)在培养基中加入氨苄青霉素进行筛选，其中未被转化的大肠杆菌和仅含环状目的基因的大肠杆菌，因不含氨苄青霉素抗性基因而都不能在此培养基上存活，二者不能区分。
含有质粒载体的大肠杆菌和含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌中都含有氨苄青霉素抗性基因，都能在此培养基上存活，二者也不能区分。
若要将含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌进一步筛选出来，还需要使用含有四环素的固体培养基。
(3)某些噬菌体经改造后作为载体，导入受体细胞后，其DNA复制所需的原料来自于受体细胞。
答案：(1)能自我复制、具有标记基因(答出两点即可)(2)二者均不含有氨苄青霉素抗性基因，在该培养基上均不生长含有质粒载体含有插入了目的基因的重组质粒(或答含有重组质粒)二者均含有氨苄青霉素抗性基因，在该培养基上均能生长四环素(3)受体细胞2．(2016·高考全国丙卷)图(a)中的三个DNA片段上依次表示出了E co R Ⅰ、B am H Ⅰ和S au3AⅠ三种限制性内切酶的识别序列与切割位点，图(b)为某种表达载体的示意图(载体上的E co R Ⅰ、S au3A Ⅰ的切点是唯一的)。
根据基因工程的有关知识，回答下列问题：(1)经B am H Ⅰ酶切后得到的目的基因可以与上述表达载体被________酶切后的产物连接，理由是_____________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。
(2)若某人利用图(b)所示的表达载体获得了甲、乙、丙三种含有目的基因的重组子，如图(c)所示。
这三种重组子中，不能在宿主细胞中表达目的基因产物的有________，不能表达的原因是____________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。
(3)DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有________和________，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是________。
解析：(1)由题图可知，Bam H Ⅰ和Sau3A Ⅰ两种限制性内切酶的共同识别序列是——GA TC——，二者切割可以形成相同的黏性末端，因此经Bam H Ⅰ酶切得到的目的基因——CTAG——可以与图(b)所示表达载体被Sau3AⅠ酶切后的产物连接。
(2)在基因表达载体中，启动子应位于目的基因的首端，终止子应位于目的基因的尾端，这样基因才能顺利地转录，再完成翻译过程，即顺利表达。
图中甲所示的目的基因插入在启动子的上游，丙所示目的基因插入在终止子的下游，二者的目的基因均不能被转录，因此目的基因不能表达。
(3)常见的DNA连接酶有E.coli DNA连接酶和T4DNA连接酶，其中T4DNA连接酶既能连接黏性末端又能连接平末端。
答案：(1)Sau3AⅠ两种酶切割后产生的片段具有相同的黏性末端(2)甲和丙甲中目的基因插入在启动子的上游，丙中目的基因插入在终止子的下游，二者的目的基因均不能被转录(3)E.coli DNA连接酶T4DNA连接酶T4DNA连接酶3．(2015·高考全国卷Ⅰ)HIV属于逆转录病毒，是艾滋病的病原体。
回答下列问题：(1)用基因工程方法制备HIV的某蛋白(目的蛋白)时，可先提取HIV中的________，以其作为模板，在______的作用下合成________，获取该目的蛋白的基因，构建重组表达载体，随后导入受体细胞。
(2)从受体细胞中分离纯化出目的蛋白，该蛋白作为抗原注入机体后，刺激机体产生的可与此蛋白结合的相应分泌蛋白是________，该分泌蛋白可用于检测受试者血清中的HIV，检测的原理是________________________。
(3)已知某种菌导致的肺炎在健康人群中罕见，但是在艾滋病患者中却多发。
引起这种现象的根本原因是HIV主要感染和破坏了患者的部分________细胞，降低了患者免疫系统的防卫功能。
(4)人的免疫系统有________癌细胞的功能。
艾滋病患者由于免疫功能缺陷，易发生恶性肿瘤。
解析：(1)HIV的遗传物质是RNA，所以要想获得相应的目的基因，应以HIV的RNA 为模板，在逆转录酶的作用下合成cDNA(或DNA)。
(2)目的蛋白注入机体后相当于抗原。
在抗原的刺激下，机体进行体液免疫，由浆细胞产生相应抗体(分泌蛋白)，由于该抗体能与目的蛋白(抗原)发生特异性结合，所以可通过抗体检测出有无目的蛋白，从而确定体内有无HIV。
(3)HIV主要攻击人体的T(或T淋巴)细胞，从而降低机体免疫系统的防卫功能。
(4)癌细胞在机体中属于抗原，人体的免疫系统能够监控和清除癌细胞。
答案：(1)RNA逆转录酶cDNA(或DNA)(2)抗体抗原抗体特异性结合(3)T(或T 淋巴)(4)监控和清除4．(2015·高考全国卷Ⅱ)已知生物体内有一种蛋白质(P)，该蛋白质是一种转运蛋白，由305个氨基酸组成。