提取芦丁实验方案
芦丁提取的实验报告
一、实验目的1. 学习黄酮类化合物的提取方法。
2. 掌握碱-酸法提取黄酮类化合物的原理及操作。
3. 通过芦丁的提取，了解苷类结构研究的一般程序和方法。
4. 了解UV及NMR在黄酮类化合物结构鉴定中的应用。
二、实验原理芦丁（Rutin）是一种广泛存在于植物界的黄酮类化合物，具有调节毛细血管壁的渗透性、抗炎、抗病毒、抗氧化等作用。
芦丁的提取方法主要有碱提法、水提法、醇提法等。
本实验采用碱提法提取芦丁，利用芦丁在碱水中溶解度较大的性质，将芦丁从植物材料中提取出来。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：槐花米、石灰水、盐酸、无水乙醇、蒸馏水、芦丁标准品等。
2. 实验仪器：烧杯、漏斗、玻璃棒、抽滤瓶、旋转蒸发仪、紫外-可见分光光度计、NMR仪等。
四、实验步骤1. 称取3g槐花米，置于研钵中研成粉末。
2. 将槐花米粉末转移至烧杯中，加入30mL饱和石灰水溶液，加热至沸，并不断搅拌，煮沸15分钟。
3. 用漏斗和玻璃棒趁热过滤，滤液备用。
4. 将滤渣用20mL饱和石灰水溶液煮沸10分钟，重复步骤3，合并滤液。
5. 用15%盐酸中和滤液，调节pH至4。
6. 将中和后的滤液静置6小时以上，待芦丁沉淀析出。
7. 抽滤，用蒸馏水洗涤沉淀1-2次，弃去滤液，得到芦丁粗品。
8. 将芦丁粗品按芦丁在热水中1:200的溶解度加入蒸馏水，加热煮沸15分钟，趁热过滤，弃去滤渣。
9. 将滤液静置，过滤，60-70℃干燥，得到芦丁精制品。
10. 对提取的芦丁进行UV及NMR分析，鉴定其结构。
五、实验结果与讨论1. 提取的芦丁在紫外-可见分光光度计上呈现典型的黄酮类化合物的吸收光谱，其最大吸收波长为257nm。
2. NMR分析结果显示，提取的芦丁具有典型的黄酮类化合物结构特征，与芦丁标准品结构一致。
3. 本实验采用碱提法提取芦丁，提取率较高，且操作简便，为黄酮类化合物的提取提供了一种有效的方法。
六、实验结论通过本实验，我们掌握了碱提法提取芦丁的原理及操作，成功提取了芦丁，并对其结构进行了鉴定。
新试验一-芦丁的提取、分离与鉴定
实验一 芦丁的提取、精制与鉴定一、实验目的与要求l 、以芦丁为例学习黄酮类化合物的提取方法；2、掌握黄酮类成分的主要性质及黄酮苷，苷元和糖部分的鉴定方法。
R=-glu-rha 芦丁 R=H 槲皮素芦丁溶解度：冷水1：8000 热水1：200冷乙醇1：300 热乙醇1：30难溶于乙酸乙酯、丙酮，不溶于苯、氯仿、乙醚、及石油醚等溶剂。
槲皮素溶解度：冷乙醇1：650 热乙醇1：60可溶于甲醇、冰醋酸、乙酸乙酯、丙酮、吡啶，不溶于石油醚、乙醚、氯仿和水中。
二、实验原理本实验是利用芦丁在热水中和冷水中溶解度相差较大的性质，用热水提取和精制；芸香苷属于苷类化合物，可被稀酸水解成槲皮素（苷元），葡萄糖和鼠李糖。
芦丁和槲皮素通过化学反应，色谱法和光谱分析进行检识与鉴定。
三、实验内容（一）提取分离和纯化l 、芦丁的提取：2、精制（重结晶）：3、芦丁的水解：OO OHOH OROH HO流程图如下：槐米（20g ）研碎，于500ml 烧杯中，加350，250ml 水煮沸15min,10min棉花过滤150ml ，1%H 2SO 4直火加热水解30min放置 1-1.5h ，抽滤精品芦丁（水浴浓缩至2ml ）(二)鉴定l 、化学检识取芦丁和槲皮素少量，置2支试管中分别加乙醇8ml 使溶解(1)盐酸—镁粉反应：取芦丁和槲皮素乙醇液0.5ml ，置2支试管中分别加浓盐酸5滴，再加少量镁粉，观察颜色变化。
(2)Molish 反应：取芦丁和槲皮素乙醇液0.5ml ，置2支试管中分别加10%α—萘酚0.5ml 摇匀，倾斜试管，沿管壁缓缓滴加浓硫酸0.5ml ，静置，观察二层溶液界面处颜色变化，并比较芦丁和槲皮素的区别。
(3)FeCL 3反应：取芦丁和槲皮素乙醇液0.5ml ，置2支试管中分别加1%三氯化铁乙醇液几滴，观察颜色变化。
(4) AlCl 3反应：取芦丁和槲皮素乙醇液0.5ml ，置2支试管中分别加1%三氯化铝乙醇液几滴，先置可见光下观察后，置紫外灯下观察颜色变化。
芦丁的提纯实验报告
一、实验目的1. 掌握芦丁的提取和提纯方法。
2. 学习黄酮类化合物的特性及其在植物中的存在形式。
3. 熟悉实验操作，提高实验技能。
二、实验原理芦丁（Rutin）是一种黄酮类化合物，广泛存在于槐米、荞麦叶等植物中。
芦丁具有调节毛细血管壁的渗透性、止血、降血压等生理活性。
本实验采用碱提酸沉法提取芦丁，并利用重结晶方法进行提纯。
三、实验材料与仪器材料：1. 槐米2. 饱和石灰水3. 盐酸4. 乙醇5. 硅胶仪器：1. 研钵2. 烧杯3. 蒸馏装置4. 冷却结晶器5. 真空干燥箱四、实验步骤1. 粗品芦丁的制备(1) 将槐米粉碎，过40目筛。
(2) 称取10g槐米粉末，置于烧杯中，加入50mL饱和石灰水，加热至沸腾，保持煮沸15分钟。
(3) 取出烧杯，冷却至室温，用布氏漏斗抽滤，收集滤液。
(4) 将滤液用盐酸酸化至pH=4，静置过夜。
(5) 用布氏漏斗抽滤，收集沉淀，用少量冷水洗涤，干燥，得到粗品芦丁。
2. 芦丁的重结晶(1) 将粗品芦丁溶于适量乙醇中，搅拌至完全溶解。
(2) 将溶液过滤，去除不溶物。
(3) 将滤液转移至冷却结晶器中，置于冰浴中冷却。
(4) 待晶体析出后，用布氏漏斗抽滤，收集晶体。
(5) 将晶体用少量乙醇洗涤，干燥，得到纯品芦丁。
五、实验结果与分析1. 粗品芦丁的制备通过碱提酸沉法，成功从槐米中提取出粗品芦丁。
实验中，槐米粉末的粉碎程度、碱提时间、酸沉时间等因素对芦丁的提取率有较大影响。
2. 芦丁的重结晶通过重结晶方法，成功从粗品芦丁中提取出纯品芦丁。
实验中，乙醇的浓度、冷却温度等因素对芦丁的纯度有较大影响。
六、实验讨论1. 本实验采用碱提酸沉法提取芦丁，该方法操作简单、成本低廉，适用于实验室小规模提取。
2. 芦丁的重结晶过程中，应注意控制乙醇浓度、冷却温度等因素，以提高芦丁的纯度。
3. 实验过程中，可适当调整实验参数，以提高芦丁的提取率和纯度。
七、实验结论通过本实验，成功从槐米中提取和提纯了芦丁。
芦丁的提取
资料范本本资料为word版本，可以直接编辑和打印，感谢您的下载芦丁的提取地点：__________________时间：__________________说明：本资料适用于约定双方经过谈判，协商而共同承认，共同遵守的责任与义务，仅供参考，文档可直接下载或修改，不需要的部分可直接删除，使用时请详细阅读内容实验从槐花米中提取芦丁 P.198【实验目的】通过从槐花米中提取芦丁的实验,掌握用酸碱调节提取中药活性成分的方法.【实验原理】槐花米又名槐米,是槐花的花蕾.性凉,味苦,功能凉血,止血,主治肠风,痔血,便血等症.槐花米的主要活性成分是芦丁.芦丁又名芸香苷,不仅存在于槐花米中(含量达10-20%),在荞麦叶等中,也有存在.结构式如下:从结构式中不难看出,芦丁实际上是由黄酮与糖(葡萄糖和鼠李糖)形成的苷.由于含有黄酮结构,所以,呈黄色.黄酮部分连有许多酚-OH,故易溶于碱液,酸化复析出,这是本实验采用酸-碱调节法来提取芦丁的依据.纯芦丁为淡黄色针状结晶,不溶于乙醇,氯仿等有机溶剂,熔点为188℃(理论值),带三个结晶水的熔点为174-178℃.芦丁能增强毛细管的韧性,适用于毛细管脆弱的患者.【实验步骤】称取15g槐花米,用粉碎机研成粉状.置于250ml烧杯中,加入150ml饱和石灰水[1],于石棉网上加热至沸,并不断搅拌,煮沸15分钟后,抽滤[2].滤渣再用100ml饱和石灰水煮沸10分钟,抽滤.合并两次滤液,用5%盐酸调节至pH3-4[3].放置1-2小时,使沉淀完全,抽滤,并用水洗涤2-3次,即得芦丁粗品.将粗品置于250ml的烧杯中,加水150ml,在石棉网上加热至沸,不断搅拌,并慢慢加入约50ml饱和石灰水,调节溶液pH值为8-9,待沉淀溶解后,趁热过滤.滤液置于250ml的烧杯中,用5%盐酸调节至pH4-5,静置30分钟.芦丁即以浅黄色结晶析出,抽滤,并用水洗涤1-2次,烘干,称重[4],测熔点.【注解】[1] 加入饱和石灰水既可达到用碱液提取芦丁的目的,同时,还可除去槐花米中的多糖粘液质.[2] 抽滤时,宜先小心倾出上层清液,再慢慢倒出带结晶的溶液,以防结晶过早堵住滤纸孔.后面的抽滤均需如此.[3] 注意小心滴加,约需7-8ml稀盐酸.如果滴加过多,pH值过低,芦丁(苷类)则易水解.[4] 产量约为1.5g.【实验结果】产品的外观性状产量【问题与讨论】1 本实验中,开始用饱和石灰水提取,再用酸调节到pH3-4,这段pH值范围较宽;后来又用饱和石灰水调节到pH3-4,再用酸调节到pH4-5,这段pH值范围较窄.为什么要这样做如果反过来(先调窄后调宽)行不行2 在一开始用酸调节pH值时,某生不小心,加入的稀盐酸过量,pH值小于3-4,请问对实验会产生什么后果为什么3 根据这个实验,请总结出用酸碱调节法提取中药活性成分的适用条件及一般原理.实验二槐米中芦丁及槲皮素的提取分离及鉴定槐米为豆科植物槐(Sophora japonica L.)的未开放花蕾.味苦性凉,具清热凉血,止血之功.常用于治疗多种出血症:肠风便血,痔血,尿血,衄血,崩漏下血,赤血下痢等.槐米常炒炭应用.槐米的主要化学成分为芦丁,其含量可达12～16%,其次含有槲皮素,三萜皂苷,槐花米甲素,槐花米乙素,槐花米丙素等.芦丁具有Vitp样作用,可降低毛细血管脆性和调节通透性.临床上用作毛细血管脆性引起的出血症,常作为高血压症的辅助治疗药.[目的要求]1.通过芦丁的提取与精制掌握碱酸法提取黄酮类化合物的原理及操作.2.掌握槲皮素的制备原理及操作.3.熟悉紫外光谱在黄酮结构鉴定中的应用4.通过芦丁的结构检识,了解苷类结构研究的一般程序和方法.[实验原理]芦丁(rutin):C27H30O16·3H2O,浅黄色针状结晶,mp174～178℃(含三分子水);188℃(无水物).难溶于冷水(1:8000～10000),可溶于热水(1:180～200),热甲醇(1:10),冷甲醇(1:100),热乙醇(1:60),冷乙醇(1:650);难溶于乙醚,三氯甲烷,石油醚,乙酸乙酯,丙酮等,易溶于碱液.槲皮素(quercetin):C15H10O7·2H2O,黄色结晶,mp313～314℃(2分子结晶水),316℃(无水物).能溶于冷乙醇(1:290),易溶于沸乙醇(1:23),可溶于甲醇,乙酸乙酯,冰醋酸,吡啶,丙酮等;难溶于水,苯,石油醚等溶剂.芦丁为黄酮苷,分子中具有酚羟基,显酸性,可溶于稀碱液中,在酸液中沉淀析出,可利用此性质进行提取分离.利用芦丁易溶热水,热乙醇,较难溶于冷水,冷乙醇的性质选择重结晶方法进行精制.芦丁可被稀酸水解生成槲皮素及葡萄糖,鼠李糖,依此进行制备槲皮素.通过纸色谱及紫外光谱进行黄酮及糖的鉴定.[实验内容]一,芦丁的提取分离及精制方法⑴槐米粗粉(50g)置1000ml烧杯中,加入500ml饱和石灰水,加热,并维持pH8～9煮沸20分钟,趁热用脱脂棉滤过滤液药渣用300ml饱和石灰水煮沸10分钟,维持pH8～9趁热滤过滤液药渣(×)合并在60℃～70℃下用浓HCl调pH至4 ～5静置,抽滤沉淀低温(80℃)干燥,称重.按1:200的比例加水,加热使溶解,趁热滤过滤液静置,抽滤,减压干燥,计算收率芦丁精制品方法⑵ 利用芦丁在冷热溶剂中的溶解度不同进行提取分离. 槐米粗粉沸水煮沸5～10分钟,反复2次趁热滤过水提取液药渣放冷沉淀析出(粗芦丁)热水重结晶或乙醇重结晶芦丁结晶二,槲皮素的制备称取精品芦丁1g置250ml烧瓶中加2%H2SO4200ml加热回流1小时放冷,静置,抽滤酸性滤液沉淀中和水洗两次,干燥乙醇重结晶中性滤液称重,计算收率浓缩黄色细针状结晶浓缩液 (槲皮素)(供糖的PC鉴定)三,检识反应1.芦丁的定性反应取芦丁适量,加乙醇使溶解,分成三份供下述试验用:(1)盐酸镁粉试验:取样品液适量,加2滴浓HCl,再酌加少许镁粉,即产生剧烈的反应,并逐渐出现红色至深红色.(2)锆-枸试验:取样品液适量,然后加 2%ZrOCl2的甲醇溶液,注意观察颜色变化,再加入2%枸椽酸的甲醇溶液,并详细记录颜色变化.(3)α-萘酚-浓硫酸反应:取样品液适量,加等体积的l0%α-萘酚乙醇溶液,摇匀,沿管壁缓加浓硫酸,注意观察两液界面的颜色.2.芦丁的UV(1)鉴定试剂的配制①甲醇钠溶液:取0.25g金属钠,切碎,小心加入色谱甲醇10ml中,此液置于玻璃瓶中,用橡皮塞密封.②三氯化铝溶液:取1g无水三氯化铝,小心加入色谱甲醇20ml中,放置24小时后全部溶解即得.③醋酸钠:用无水粉末醋酸钠.④⑤硼酸饱和溶液:取无水硼酸,加入适量色谱甲醇,制成饱和溶液.(上述贮备液可放置六个月)(2)芦丁溶液的配制精密称取芦丁纯品0.5g,用甲醇适量溶解至50ml容量瓶中,用甲醇稀释至刻度.(3)光谱的测定①甲醇光谱:取样品液置石英杯中,至200～500nm内进行扫描,重复一次,观察紫外光谱.②甲醇钠光谱:取样品液置石英杯中,加入甲醇钠溶液3滴后,立即测定,放置5分钟后再测一次.③三氯化铝光谱,在盛有样品液的石英杯中,加入三氯化铝6滴,放置1分钟后进行测定.测定后加入3滴盐酸溶液(盐酸:水=1:1)再进行测定.④醋酸钠光谱:取样品液约3ml,加入过量的无水醋酸钠固体,摇匀(杯底剩有约2mg的醋酸钠),加入醋酸钠后两分钟内测定,5分钟到10分钟后再测定一次.3.芦丁及槲皮素的色谱支持剂:中速层析滤液(5×20cm)展开剂:正丁醇-醋酸-水(4:1:5)上层样品:自制槲皮素的乙醇溶液自制芦丁的乙醇溶液对照品:槲皮素标准品的乙醇溶液芦丁标准品的乙醇溶液显色剂:三氯化铝乙醇溶液喷雾4.糖的纸色谱检识支持剂:中速层析滤纸(5×20cm)样品:取水解后的滤液10ml,水浴加热,且在搅拌下加适量碳酸钡细粉至PH 中性,过滤,取滤液并浓缩至2mI左右,放冷后,供纸色谱点样用.对照品:1%葡萄糖标准品醇溶液及1%鼠李糖标准品醇溶液展开剂:正丁醇-醋酸-水(4:1:5)上层显色剂:喷以邻苯二甲酸苯胺溶液,105℃烘烤5分钟至斑点显色清晰.[实验说明及注意事项]1.用石灰水调节芦丁提取溶液的PH,既可以达到碱提取芦丁的目的,还可以除去槐米中含有的大量粘液质.但钙离子浓度及pH值均不宜过高,否则多余的钙能与芦丁形成螯合物沉淀,同时黄酮母核在强碱性条件下易被破坏.2.用HCl调PH时,应注意PH不要过低,因为PH过低(PH2以下)会使芦丁形成钅羊盐而使已形成的沉淀重新溶解,同时黄酮母核也会在强碱性条件下被破坏,导致收率下降.3 .注意观察槲皮素制备过程中的实验现象.[思考题]1.苷类结构检识的一般程序2.苷类水解有几种催化方法3.怎样确定芦丁结构中糖基是否联结在槲皮素3-O位上4.怎样证明芦丁分子中只含有一个葡萄糖及一个鼠李糖5.UV在黄酮类化合物结构鉴定中的应用.+鼠李糖+葡萄糖。
槐花提取芦丁实验报告
槐花提取芦丁实验报告
实验名称：槐花提取芦丁实验报告
实验目的：通过使用不同的提取方法，提取槐花中含有的芦丁，对提取率进行比较，并探索最优的提取方法。
实验方法：
1. 选取5g阳干的槐花为原料，分别用水提法、乙醇提法、超
声波提法进行提取。
2. 水提法：将5g槐花放入250mL三角瓶中，加入50mL去离
子水，放入水浴中加热煮沸1h。
提取液放置自然冷却至室温后，
用滤纸过滤，滤液浓缩至1/10体积，用1%铝石蜡法定量。
3. 乙醇提法：将5g槐花放入250mL三角瓶中，加入50mL乙醇，放入水浴中加热煮沸1h。
提取液放置自然冷却至室温后，用
滤纸过滤，滤液浓缩至1/10体积，用1%铝石蜡法定量。
4. 超声波提法：将5g槐花放入250mL三角瓶中，加入50mL 80% (V/V)乙醇，放入超声波提取仪中振荡提取30min，过滤滤液，保留滤液，乙醇洗提1次，滤液和洗提液一起浓缩至1/10体积，
用1%铝石蜡法定量。
实验结果：
经过提取和定量分析，得到以下结果：
1. 水提法提取率为0.135 %。
2. 乙醇提法提取率为0.282 %。
3. 超声波提法提取率为0.368 %。
实验结论：
超声波提法能够更有效地提取槐花中的芦丁，其提取效率比水提法和乙醇提法更高。
实验建议：
1. 进一步优化超声波提法的提取条件和提取液组成，以提高提取效率。
2. 对提取到的芦丁进行结构鉴定和纯度检测，以确保提取到的芦丁为目标化合物并具有一定的纯度，使其更适合作为药物原料使用。
3. 对槐花的其他成分进行分离和鉴定，为后续的深入研究提供参考。
芦丁提取的实验报告
芦丁提取的实验报告芦丁提取的实验报告一、引言芦丁是一种天然的植物化合物，广泛存在于某些植物中，如柑橘、葡萄和苦橙等。
它被广泛应用于药物和保健品领域，具有抗氧化、抗炎和抗癌等多种生物活性。
本实验旨在研究芦丁的提取方法以及提取物的化学成分和生物活性。
二、实验方法1. 芦丁提取：我们选择了柑橘中的芦丁作为实验对象。
首先，将柑橘的果皮剥离，并将其切成小块。
然后，将果皮块放入乙醇溶液中，进行浸泡。
浸泡时间、溶剂浓度和温度等因素对提取效果有重要影响，我们在实验中进行了系统的优化。
2. 提取物分离：通过离心和过滤等操作，将提取液中的固体颗粒和杂质去除。
然后，利用旋转蒸发仪将溶剂蒸发，得到芦丁的浓缩提取物。
3. 化学成分分析：使用色谱-质谱联用技术（GC-MS）对提取物进行分析。
通过与已知标准物质进行比对，确定提取物中芦丁的含量。
4. 生物活性测试：采用细胞实验和动物实验相结合的方法，评估芦丁提取物的抗氧化、抗炎和抗癌活性。
具体实验方法包括细胞存活率测定、炎症因子的检测以及肿瘤抑制实验等。
三、实验结果1. 芦丁提取：通过优化实验条件，我们确定了最佳的提取条件为：浸泡时间为24小时，乙醇浓度为70%，提取温度为40摄氏度。
在这些条件下，芦丁的提取率达到了最大值。
2. 提取物分离：经过离心和过滤等操作，我们成功地去除了提取液中的固体颗粒和杂质。
通过旋转蒸发仪的操作，我们得到了颜色深浓的芦丁浓缩提取物。
3. 化学成分分析：通过GC-MS分析，我们确定了芦丁提取物的化学成分。
除了芦丁外，还检测到了其他一些化合物，如某些有机酸和多酚类物质。
这些化合物可能与芦丁的生物活性有关。
4. 生物活性测试：实验结果显示，芦丁提取物具有明显的抗氧化、抗炎和抗癌活性。
在细胞实验中，芦丁提取物能够显著提高细胞的存活率，并减少炎症因子的产生。
在动物实验中，芦丁提取物能够抑制肿瘤的生长和扩散。
四、讨论与结论通过本实验的研究，我们成功地提取了芦丁，并确定了其化学成分和生物活性。
芦丁的提取实验报告共(1)
芦丁的提取实验报告共(1)芦丁的提取实验报告一、实验目的：本实验的主要目的是通过分离纯化的手段，从苦橙中提取芦丁。
同时，本实验还旨在掌握芦丁提取的方法，熟悉各种化学试剂的使用和操作方法。
二、实验原理：芦丁主要存在于柑橘类植物中，是一种黄酮类物质。
本实验主要通过溶剂提取和硅胶柱层析法，从苦源中提取芦丁。
其中，溶剂提取阶段主要通过浸泡苦源，在肌酸盐溶液中提纯芦丁。
随后，将得到的纯化物通过硅胶柱层析法进一步提纯，即可得到高纯度的芦丁。
三、实验步骤：1、准备材料准备苦橙、甲醇、二氯甲烷、硅胶、肌酸盐等材料。
2、制备肌酸盐溶液将肌酸盐加入适量的去离子水中，稀释成所需质量分数的肌酸盐溶液。
3、提取芦丁将切碎的苦橙置于甲醇中，摇晃10min后过滤。
之后，将所得溶液用二氯甲烷萃取3次，得到的有机相通过回流蒸发浓缩，得到芦丁。
4、硅胶柱层析法将得到的芦丁溶解在甲醇中，过硅胶柱，逐级改变甲醇：二氯甲烷比例，分离得到纯化的芦丁。
四、实验结果及分析：经过以上步骤，最终得到的产品为纯化的芦丁。
在步骤3中，我们采用了溶剂萃取的方法，通过不断用甲醇和二氯甲烷，将芦丁提取并纯化。
在步骤4中，我们又采用了硅胶柱层析法，对芦丁进行了更加高效的纯化。
最终，我们得到了纯度高达95%的芦丁提取物。
五、结果分析：本次实验采用溶剂提取和硅胶柱层析法提纯芦丁，采取的操作步骤有效地避免了化学试剂间的干扰，从而提高了活性物质的纯度。
同时，在本次实验中，我们也学习到了如何正确利用实验设备和化学试剂。
这些实验技能的掌握对于以后的科学实验和研究工作具有重要意义。
六、实验结论：通过本点实验，我们成功地从苦橙中提取和纯化了芦丁。
本次实验的操作步骤适当，能够避免化学试剂间的干扰，从而提高了活性物质的纯度。
本次实验还提高我们的实验技能，让我们熟悉了化学试剂的使用和操作方法。
提取芦丁的实验报告
一、实验目的1. 了解芦丁的提取方法及原理。
2. 掌握碱-酸法提取黄酮类化合物的操作步骤。
3. 学习使用化学实验及光谱分析进行芦丁的鉴定。
二、实验原理芦丁（Rutin）是一种广泛存在于植物界中的黄酮类化合物，具有多种生物活性。
本实验采用碱-酸法提取芦丁，其原理是利用芦丁在碱水中溶解，酸化后沉淀析出的性质。
具体步骤如下：1. 将植物材料（如槐花米）粉碎，加入碱性溶液（如石灰水）煮沸，使芦丁溶解。
2. 加入稀盐酸调节pH值，使芦丁沉淀析出。
3. 过滤、洗涤、干燥得到芦丁粗品。
4. 对芦丁粗品进行重结晶，得到纯净的芦丁。
三、实验材料与仪器1. 植物材料：槐花米2. 试剂：石灰水、稀盐酸、乙醇、甲醇、浓硫酸、10%-萘酚溶液、硼砂、邻苯二甲酸/苯胺等3. 仪器：研钵、烧杯、漏斗、滤纸、玻璃棒、烘箱、电子天平、紫外-可见分光光度计等四、实验步骤1. 植物材料预处理：将槐花米粉碎，过筛，取3g槐花米粉末备用。
2. 芦丁提取：a. 取50mL烧杯，加入30mL饱和石灰水溶液，加热至沸腾。
b. 将槐花米粉末加入烧杯中，继续煮沸15分钟。
c. 趁热用尼龙布过滤，收集滤液。
3. 芦丁沉淀：a. 向滤液中加入15%盐酸，调节pH值至2～3。
b. 静置6小时以上，使芦丁沉淀析出。
c. 抽滤，用蒸馏水洗涤沉淀2～3次。
4. 芦丁干燥：a. 将洗涤后的沉淀置于烘箱中，60～70℃干燥。
b. 干燥至恒重，得到芦丁粗品。
5. 芦丁重结晶：a. 将芦丁粗品溶于适量蒸馏水中，加热煮沸。
b. 趁热过滤，弃去滤渣。
c. 将滤液静置，使芦丁重结晶。
d. 抽滤，用少量乙醇洗涤沉淀。
e. 干燥，得到纯净的芦丁。
6. 芦丁鉴定：a. 取芦丁样品，用紫外-可见分光光度计测定其在特定波长下的吸光度。
b. 与标准品芦丁进行比较，验证提取的芦丁纯度。
五、实验结果与分析1. 芦丁提取：实验成功提取了芦丁，沉淀产量为1.2g。
2. 芦丁重结晶：通过重结晶，得到了纯净的芦丁，纯度可达95%。
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超声波提取法对苦荞茶中芦丁提取量的实验研究
一、实验仪器和材料
超声波发生器（型号：生产厂家：）减压蒸馏装置（型号：生产厂家：）紫外分光光度计（型号：生产厂家：）恒温干燥器 100ml烧杯5个 50ml烧杯5个100ml容量瓶6个 25ml容量瓶6个电子天平
芦丁标准样苦荞样品500g（生产商：甘洛县彝家山寨农牧科技有限公司芦丁含量1.32% ）无水乙醇2000ml 亚硝酸钠100ml 硝酸铝100ml 氢氧化钠200ml（均为分析纯）蒸馏水
二、待测样品的制备
将苦荞在4O～45℃恒温干燥箱中干燥 4～5 h，粉碎，过250um筛。
称取1．000 g苦荞，用一定浓度乙醇浸泡3 h，超声波提取一定的时间，减压过滤，收集滤液至100 mL容量瓶并定容至100 mL，作供试液。
三、对照品溶液的制备
精密称取105℃干燥至恒重的芦丁对照品10mg，置100ml容量瓶中，用60%乙醇溶解定容至刻度，摇匀，即得。
四、线性关系的考察
精密量取对照品溶液0,1.0，2.0,3.0,4.0，5.0，6.0ml，置25ml容量瓶中，加蒸馏水至6ml，加5％亚硝酸钠1ml，摇匀，静置6分钟，加10％硝酸铝1ml，摇匀，静置6分钟，加4％氢氧化钠10ml，加蒸馏水至刻度，静置15分钟，用紫外分光光度计测定吸收度，检测波长510nm。
以吸收度为纵坐标，浓度为横坐标，求回归方程、相关系数r。
五、样品含量测定
准确吸取供试品液10．0mL于50 mL容量瓶中，按照芦丁标准曲线计算样品中的芦丁含量。
具体计算方式如下：
1．000 g苦荞中芦丁质量(mg)：
M=C(mg／mL)25 mLO．5lO0 mL
1.000g苦荞中芦丁提取率(％)：
W(%)=
六、单因素和正交试验
利用芦丁标准曲线方程进行定量评价，以原料的芦丁提取率作指标，分别考察乙醇浓度、超声时间、料液比对提取率的影响，并在单因素试验基础上采用正交试验法确定苦荞茶中芦丁的最佳提取工艺。
正交试验设计选择三因素三水平。
根据正交设计方法按L9(3 )进行试验，因素水平见表1。
表1 正交试验的因素水平
水平 A
乙醇浓度
/%
B
超声时间
/min
C
料液比（g/ml ）
1 50 10 1/30
2 60 20 1/40
3 70 30 1/50
正交试验
A 乙醇浓度%
B
超声时间/min
C料液
比
（g/ml）
实验指标
提取率（%）
1 50 10 1/30 1.681
2 50 20 1/40 1.873
3 50 30 1/50 1.843
4 60 10 1/50 1.616
5 60 20 1/30 1.760
6 60 30 1/40 1.918
7 70 10 1/40 1.387
8 70 20 1/50 1.647
9 70 30 1/30 1.669 T1 5.397 4.684 5.11
T2 5.294 5.28 5.178
T3 4.703 5.43 5.106
k1 1.799 1.561 1.703
k2 1.765 1.760 1.726
k3 1.568 1.810 1.702
R 0.231 0.249 0.024
优化条
A1B3C2
件
B>A>C
最佳条件为50%乙醇、超声时间30分、料液比1/40
提取率为 2.041%
回收率实验
用标准加入法测定紫外线检测的回收率，精确吸取样品溶液2ml。
分别加入
2,3,4,ml芦丁标准液后测定吸光度，由芦丁标准曲线的测定值得所需的回收率。
所得的平均回收率为
样品溶液/ml+芦丁标准品/ml 样品溶液中芦丁量/mg 加入标准液中芦丁量/mg 测定值回收率/% 平均回收率/% RSD%
2 + 2 71.704 40 103.22 92.4
2 +
3 71.70
4 60 128.1
5 97.3 94.3 2.83 2 + 4 71.704 80 141.34 93.2
,
精密度检测
对苦荞茶提取液平行测定6次，得6个吸光度，在标准曲线上对应6个浓度值，结果见表2.其SD值为0.002%，RSD值为0.188%，偏差值较小。
表2 芦丁测定的精密度结果
编号 1 2 3 4 5 6
吸光度 1.228 1.228 1.225 1.231 1.226 1.228
稳定性实验
取样品测定液，，每隔0.5h测定一次吸收度，测定结果见表3，结果表明从测定开始，2.5h内其吸收度基本稳定，平均值为1.222，RSD值为0.132%。
表3 芦丁测定的稳定性实验
时间/h 0 0.5 1 1.5 2.0 2.5
吸光度 1.222 1.224 1.221 1.220 1.224 1.222
浓度/（mg/ml）35.647 35.706 35.618 35.589 35.706 35.647。