白腐真菌讨论课ppt课件

实验方法与步骤：
1
真菌生长量的测定
培养基中白腐真菌生长量的测定采用细胞干重法。 菌液分别加入到不同的培养基中培养一定时间，将 培养液经离心过滤后收集，用清水洗涤菌体后用40 目筛网过滤收集菌球，用100 ℃烘干，精确称质量 可得真菌的生长量。
实验方法与步骤：
2
影响因素的研究
取30 mL基础培养基分别加入200 mL的锥形瓶中，用棉塞塞 紧，放到高压灭菌锅中121 ℃下灭菌30 min，冷却，等量 接入5mL白腐真菌菌悬液到每个瓶中，添加各种植物的浸 出液(花生、甘蔗、木材、土豆等)配成的复合培养基、不 同种类及不同浓度的表面活性剂以及不同浓度H2O2，在空 气条件下于30℃、160 r/min恒温恒速摇床中进行振荡培养， 培养相应的时间后过滤收集菌球，观察菌球的形态并测定 菌丝小球的生长量和直径，对于所要考察的每一种情况同 时进行3组平行实验，实验结果取其平均值。
添加铜离子的样品在营养生长阶段木质素降 解速率显著高于未添加对照，快速降解木质素 为后期形态发育提供所需；且至21天时木质素 降解速率显著下降开始原基分化，时间较未添 加对照有所提前；随后添加铜离子样品的木质 素降解速率快速上升，原基开始大量分化并产 生子实体，而此时未添加对照的木质素降解速 率降至最低，开始进入原基分化阶段。
实验方法：分别于第1天、第2天、第3天往装有用液体培 养基养的菌体(注：菌悬液的初始浓度为79 mg/L)中的锥 形瓶中加入不同浓度的H2O2溶液(使其在体系中的浓度 分别为0、50、100、150、200、250、300、350、400、 600 mg/L)，在30 ℃、160 r/min下恒温振荡培养3 d后测 定锥形瓶中菌生长量的变化情况。
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实验结论
Experimental Conclusion
培养基中添加木材、土豆、花生、甘蔗等浸出液能 极大提高白腐真菌的产量，其中木材和甘蔗对白腐真 菌生长的促进作用较好。在白腐真菌培养时加入天然 浸出液，使白腐真菌具有与天然生长条件相似的生长 环境，对白腐真菌的生长具有诱导和促进作用。 加入一定量的过氧化氢在一定条件下能够促进白腐真 菌的生长，但当H2O2浓度大于350 mg/L时，H2O2 对白腐真菌的毒害作用已比较明显。而H2O2对菌体的 生长发挥最大促进作用的浓度是200mg/L。
白腐真菌讨论 课
目录
白腐真菌简述
培养条件对黄孢原毛平革菌生长的影响
铜离子对平菇 BP2 降解木质纤维素的影响 小组分工
白腐真菌
一种能够引起木材白色腐朽的担子菌，因其 特殊的代谢类型及独有的细胞外降解特质，能降 解各种难降解有机污染物。
培养条件对黄孢原毛平革菌生长的影响
研究内容
添加天然物质浸出液对白腐真菌生长的影响
添加不同天然成分对菌的形态及生长量的影响
实验结果表明，在白腐真菌培养
时加入天然浸出液， 对白腐真菌
的生长具有诱导和促进作用。白 腐真菌担子果大多在森林土壤、 腐朽木材上生长，属于高等腐生 真菌，它们需要特定复杂成分的
外源生长因子，特别是有机生长
因子。
不同浓度的过氧化氢对白腐真菌生长的影响
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马铃薯培养基
MgSO4· 7H2O 1.5 g/L KH2PO4 3g/L 硫胺素 8mg/L
葡萄糖 20g/L
马铃薯 培养基
马铃薯 200 g/L
琼脂 18 g/L
天然浸出液的制备
leachate
分别取新鲜的花生(研钵将其捣 碎)、新鲜甘蔗渣、腐朽木材和 土豆各200g用3层纱布包好， 加适量的蒸馏水，放到电炉上 煮沸，保持沸腾20min，取其 液体部分用80目纱网过滤，再 将滤出液用滤纸过滤，取其上 清液，定容到1000 mL。
不同浓度的H2O2对白腐真菌生长的影响
材料与方法
1 菌种
入30 ℃ 培养箱，培养4～5 d，用 接种针剥取适量孢子于无 菌条件下接种于含15 mL马 铃薯固体培养基的培养皿， 32 ℃平板扩增。 6～8 d后 将孢子无菌地转入灭菌马 铃薯液体培养基中，轻振 荡，使充分分散，制备成 乳白色的孢子悬浮液。
黄孢原毛平革菌 使用马铃薯固体培 养基进行扩大培养 生长，每月继代1 次，培养温度设置 为30 ℃。
培养基
酒石酸铵 0.2g/L KH2PO42 g/L CaCl2 0.1 g/L MgSO4 0.25 g/L
相关 基础培养基 利益方
葡萄糖10 g/L
VB 15mg/L
微量元素1 mg/L
用pH4.4的0.2mol/L醋酸-醋酸钠缓冲液调节pH。
铜离子对平菇BP2降解木质纤维素的影响
实验材料 菌 株
糙皮侧耳——平菇BP2
培 养 基
秸秆固体培养基：6.8g 秸 秆粉，0.8g 麸皮20ml 蒸馏 水或不同浓度离子溶液， 高温蒸气 121－125℃灭菌 30min。
实验步骤：
• 将平菇BP2接种到添加了0.5mmol/L铜离子 ，2mmol/L 铜离子，3mmol/L 铜离子的 秸秆固体培养基中，在一定的生长周期中测 定其木质纤维素酶活，木质纤维素降解率和 形态发育情况。