1.3.3 功能化纳米探针在生物传感器、细胞分析中的应用
《2024年DNA功能化纳米探针的设计及在miRNA检测中的应用》范文

《DNA功能化纳米探针的设计及在miRNA检测中的应用》篇一一、引言随着纳米科技的飞速发展,DNA功能化纳米探针因其独特的生物相容性和高灵敏度,在生物医学领域中得到了广泛的应用。
特别是在miRNA(微小RNA)检测方面,DNA功能化纳米探针的精准性和高效性使其成为研究的热点。
本文将探讨DNA功能化纳米探针的设计原理、制备方法及其在miRNA检测中的应用。
二、DNA功能化纳米探针的设计原理1. 纳米材料选择:DNA功能化纳米探针通常以纳米金、量子点、碳纳米管等作为载体,这些材料具有优异的物理化学性质和生物相容性。
2. DNA分子修饰:通过化学或生物合成方法,将特定的DNA序列修饰在纳米材料表面,形成DNA功能化纳米探针。
这些DNA序列通常是与目标miRNA互补的。
3. 信号放大技术:通过引入酶促反应、滚环扩增等信号放大技术,提高检测的灵敏度和特异性。
三、DNA功能化纳米探针的制备方法1. 表面修饰法:通过化学或生物合成方法,将DNA分子修饰在纳米材料表面,形成稳定的结合。
2. 杂交法:先制备出与目标miRNA互补的DNA单链,再与纳米材料表面的DNA序列进行杂交,形成稳定的复合物。
3. 纳米组装法:利用DNA分子的自组装特性,将多个纳米材料组装在一起,形成多功能的DNA功能化纳米探针。
四、DNA功能化纳米探针在miRNA检测中的应用1. 诊断疾病:miRNA在多种疾病中具有诊断价值,通过检测特定miRNA的表达水平,可以辅助疾病的诊断和治疗。
DNA功能化纳米探针的高灵敏度和特异性使其成为miRNA检测的理想工具。
2. 监测治疗效果:通过对治疗前后miRNA表达水平的检测,可以评估治疗效果和预测疾病复发风险。
3. 药物研发:DNA功能化纳米探针可用于筛选药物对miRNA表达的影响,为新药研发提供有力支持。
五、实验研究及结果分析1. 实验设计:选择特定miRNA作为研究对象,设计并制备出相应的DNA功能化纳米探针。
纳米探针的制备及在生物检测中的应用

纳米探针的制备及在生物检测中的应用纳米探针是一种非常小的纳米技术产品,这种产品由纳米粒子、分子探针、高科技设备等构成,可以用于生物检测、能源开发、环境保护等领域。
其中,在生物检测领域,纳米探针展现了出色的潜力和应用前景。
本文将围绕纳米探针的制备及其在生物检测中的应用展开讨论。
一、纳米探针的制备工艺1. 材料的选择制备纳米探针时,需要先选择合适的材料,这些材料应该具有较强的生物相容性和稳定性,同时还要具备制备成本较低和易于制备等特点。
目前常用的纳米材料包括金属纳米粒子、半导体纳米材料、碳纳米管等。
其中,金属纳米粒子具有较强的表面增强拉曼效应,可以用于荧光探针的制备和生物标记物的检测。
2. 制备方法根据不同的纳米材料特性,纳米探针的制备方法也有所不同。
以金属纳米粒子为例,目前主要有两种制备方法,即生物还原法和化学还原法。
前者方法将金盐还原为金属纳米颗粒,反应通常由还原剂和有机成分驱动;后者方法则是将金属离子氧化还原反应还原成金属,反应通常由还原剂和表面活性剂驱动。
二、纳米探针在生物检测中的应用1. 生物标记物检测生物标记物是反映生命状态的重要指标,如血糖、血压、心率等。
纳米探针可以用于血糖检测、癌症标记检测、细胞标记检测等多个方面,其检测灵敏度高、准确性高、快速响应等特点让其在生物医学领域得到广泛应用。
2. 细胞成像细胞成像是一种显示细胞形态、病变程度、细胞分子水平等特征的技术。
纳米探针可以与分子探针结合,形成分子成像探针,用于观察细胞内分子水平的生物过程。
此外,纳米探针还可以用于细胞荧光成像监测某些疾病。
3. 基因诊断基因诊断是临床医学领域中的关键技术之一,可以对遗传病进行早期诊断,以便及时采取相应的治疗措施。
纳米探针可以通过结合DNA、RNA和蛋白质等如发光标记方法来进行基因检测。
结语总之,随着纳米技术的发展,纳米探针在生物检测领域的应用前景正在逐渐展现。
未来,随着技术的不断完善,纳米探针将会在生物医学领域得到广泛的应用,为医学科学尽一份力。
纳米荧光探针在生物检测中的应用

纳米荧光探针在生物检测中的应用随着现代医学科技的不断进步,越来越多的生物检测方法被开发出来,使得人们能够更加准确地了解自身身体状态,并及时发现各种疾病。
其中,纳米荧光探针在生物检测中的应用越来越受到人们的关注。
纳米荧光探针是一种非常小的纳米颗粒,其大小在2至100纳米之间,可以在生物组织中轻易穿过细胞的壁膜,具有很好的生物相容性和生物响应性。
纳米荧光探针作为一种新型的生物材料,在生物检测领域中有着广泛的应用。
一、纳米荧光探针在生物药物研究中的应用纳米荧光探针在生物药物研究中有着非常广泛的应用。
目前,许多科学家利用纳米荧光探针来研究生物分子,如蛋白质和核酸,以及生物化学反应和药物吸附。
这些纳米荧光探针可以将分子物质的活性、浓度和位置等信息传递出来,从而实现对生物分子的确切测定和跟踪。
例如,利用这种技术,可以追踪某些疾病的发生和发展过程,测定疾病标记物的含量和分布,从而提高诊断和治疗的准确性和效果。
此外,在新药研究中,也可以利用纳米荧光探针来检测药物的吸附和药效等变化,从而提高新药的疗效和安全性。
二、纳米荧光探针在癌症检测中的应用纳米荧光探针在癌症检测中也有着广泛的应用。
因为癌细胞在某些基因表达和代谢方面与正常细胞有所不同,因此可以利用纳米荧光探针来检测这些区别,并提高癌症的早期诊断和治疗效果。
例如,科学家可以将纳米荧光探针注入患者的血液中,让其自然游走到癌细胞的位置,然后通过纳米荧光探针发出的光信号来诊断癌症。
此外,纳米荧光探针还可以用于检测肿瘤大小、形状和类型等,为癌症治疗提供更加精准和高效的方法。
三、纳米荧光探针在食品安全检测中的应用除此之外,纳米荧光探针还可以用于食品安全检测。
在现代社会,食品安全已经成为人们最为关注和焦虑的话题之一。
而这种新型的生物探针提供了检测食品中添加物、重金属污染和细菌等有害物质的高效和准确方法。
例如,科学家可以利用纳米荧光探针来检测乳制品中的脂肪含量、农产品中的残留农药和污染物等。
纳米传感器在生物医学中的应用研究

纳米传感器在生物医学中的应用研究随着科技的不断发展,纳米技术越来越引起人们的关注。
作为纳米技术的重要应用领域之一,纳米传感技术受到了广泛的关注和支持。
纳米传感器是一种特殊的传感器,由于其具有高灵敏度、高选择性和高稳定性等优点,使得其广泛应用于医学、环境监测、食品安全监管等多个领域。
在生物医学领域,纳米传感器同样具有很大的应用前景。
一、纳米传感器在医学检测中的应用1.1 器官功能检测纳米传感器可以被嵌入体内,对器官功能进行监测。
如心肌病变、肝脏疾病,都可以通过纳米传感器进行检测。
这种技术的发展,可以使医生在做出最终的诊断和治疗的时候,更加准确和快捷。
1.2 细胞和分子检测标准的检测方法可能需要使用大量的药物和试剂,而纳米传感器可以仅仅使用微量的元素就可以实现细胞和分子的检测。
如,癌症的早期检测,可以使用纳米传感器进行,由于其高灵敏度,可以在细胞和分子层级上进行检测,提升癌症检测的精准性。
二、纳米传感器在药物分子的开发中的应用在新药物的开发和研究过程中,纳米传感器也扮演着重要的角色。
如,可以使用纳米传感器来检测药物分子的有效浓度,以及药物对细胞和器官的影响。
与传统的药物开发研究不同,使用纳米传感器可以将实验的成本、时间、复杂度降低,同时提升研究结果的准确性。
三、纳米传感器在病毒检测中的应用病毒检测是医学中非常重要的环节,其结果直接关系到人类的健康和生命安全。
传统的病毒检测方法需要长时间等待结果的出现,而面对一些较为致命的病毒疫情,时间的耗费可能是无法容忍的。
使用纳米传感器进行病毒检测,可以大大缩减检测结果出现的时间,提升病情的处理速度。
四、纳米传感器在疾病治疗中的应用纳米传感器同样可以在疾病治疗过程中发挥作用。
如,可以使用纳米传感器载体带入药物分子,将药物分子送达到病灶部位,以提升药物的敏感性,同时降低药物给身体带来的负面影响。
五、纳米传感技术应用的发展前景纳米传感技术具有非常广泛的应用前景。
随着科技的不断进步,更加高效和精准的纳米传感器将不断涌现,应用领域也将不断拓展。
纳米技术在生物传感器中的应用

纳米技术在生物传感器中的应用在当今科技飞速发展的时代,纳米技术已经成为了众多领域的研究热点,其中生物传感器领域也不例外。
纳米技术的引入为生物传感器的性能提升和应用拓展带来了前所未有的机遇。
纳米技术,简单来说,就是在纳米尺度(1 100 纳米)上对物质进行研究和操作的技术。
在这个极小的尺度下,物质会展现出与宏观状态下截然不同的物理、化学和生物学特性。
而生物传感器,则是一种能够对生物分子、细胞、组织等生物物质进行检测和分析的装置。
纳米技术在生物传感器中的应用,首先体现在其能够显著提高传感器的灵敏度。
传统的生物传感器在检测低浓度的生物标志物时,往往面临着准确性和可靠性不足的问题。
而纳米材料,如纳米金颗粒、碳纳米管等,具有巨大的比表面积和优异的电学、光学性能,能够极大地增加生物分子的吸附量和反应活性位点,从而显著提高检测信号的强度。
例如,基于纳米金颗粒的免疫传感器,可以实现对癌症标志物的超灵敏检测,检测限甚至可以达到飞摩尔(femtomolar)级别。
其次,纳米技术有助于提高生物传感器的选择性。
生物体系非常复杂,存在着大量相似的生物分子。
如何准确地检测特定的目标分子,一直是生物传感器面临的挑战之一。
通过对纳米材料进行表面修饰,使其能够特异性地识别和结合目标分子,可以有效地排除干扰物质的影响,提高传感器的选择性。
比如,利用功能化的碳纳米管,可以实现对特定 DNA 序列的高选择性检测。
再者,纳米技术为生物传感器的微型化和集成化提供了可能。
随着医疗技术的不断进步,对便携式、即时检测(Pointofcare Testing,POCT)设备的需求日益增长。
纳米材料的小尺寸和良好的加工性能,使得可以在微小的芯片上集成多个传感器单元,实现对多种生物指标的同时检测。
这种微型化和集成化的生物传感器不仅体积小、便于携带,而且能够快速给出检测结果,为疾病的早期诊断和实时监测提供了有力的工具。
此外,纳米技术还可以改善生物传感器的稳定性和重复性。
纳米探针技术的研究及其在生物医学领域中的应用

纳米探针技术的研究及其在生物医学领域中的应用近年来,随着科技的不断发展,纳米探针技术作为一种新型的探测技术被广泛应用于生物医学领域,成为了研究生物分子和细胞等微观世界的有力工具。
一、纳米探针技术的研究纳米探针技术是一种使用纳米材料制成的探针,在微观尺度上对生物分子和细胞进行探测和成像。
该技术主要包括纳米颗粒探针、量子点探针、碳纳米管探针等多种形式,具有高灵敏度、高分辨率、高特异性等特点。
纳米探针技术的发展离不开纳米材料的研究,目前主要的纳米材料包括金属纳米材料、半导体量子点、碳基纳米材料等。
这些纳米材料具有很强的光学、电学和磁学性质,能够在生物分子和细胞内部进行探测和成像。
同时,纳米探针技术中的识别分子也是研究的重点之一,可根据目标分子的性质和功能设计合适的识别分子,从而实现对目标分子的高效识别和检测。
二、纳米探针技术在生物医学领域中的应用由于其特有的优势,纳米探针技术在生物医学领域中具有广泛的应用前景。
以下介绍其中几个方面。
1、癌症诊断纳米探针技术可用于癌症治疗前的诊断,通过标记癌症相关的生物分子或细胞,实现对癌细胞的高效定位和成像。
例如,量子点探针可用于单个癌细胞的成像,提高癌细胞的识别和分析的准确性。
2、药物输送纳米探针技术可用于药物的定向输送,改善药物的作用和副作用。
将药物载体与纳米颗粒探针结合,通过识别分子准确定位病变细胞区域,提高药物的作用效果。
3、生物分子识别纳米探针技术可用于生物分子的识别和检测。
将识别分子固定在纳米探针表面,与目标分子形成稳定的化学结合,实现对目标分子的检测。
例如,利用纳米探针技术可检测出肝炎病毒等危害人类健康的病毒。
三、纳米探针技术面临的挑战尽管纳米探针技术在生物医学领域中应用广泛,但它还面临许多挑战。
例如,由于其小的尺寸和高的表面能,纳米材料容易在生物体内聚集和产生副作用,对人体健康造成潜在的风险。
此外,纳米探针技术与目前临床实践的局限性相比,仍然需要进一步完善。
功能性纳米材料在生物传感器中的应用研究

功能性纳米材料在生物传感器中的应用研究引言:随着科学技术的发展,纳米技术在各个领域的应用日益广泛。
其中,功能性纳米材料在生物传感器领域中的应用逐渐受到关注。
功能性纳米材料具有超小的尺寸和独特的物理、化学特性,使其成为生物传感器的理想材料。
本文将介绍功能性纳米材料在生物传感器中的应用,并讨论其在生物医学、环境监测和食品安全等领域的潜在应用。
一、功能性纳米材料的种类功能性纳米材料包括纳米颗粒、纳米管、纳米线、纳米片等。
它们可以根据不同的性质和形状被应用于生物传感器中。
例如,金属纳米颗粒具有良好的光学性质和电化学性质,可以用于生物分析和荧光标记;碳纳米管具有良好的导电性和生物相容性,可用于电化学传感器;纳米线可以用于传统电化学传感器的增强灵敏度等。
二、功能性纳米材料在生物传感器中的应用1. 生物分析和诊断功能性纳米材料在生物传感器中的应用为生物分析和诊断提供了新的方法和手段。
例如,功能性纳米颗粒可以用于DNA、RNA和蛋白质的检测。
通过与特定的生物分子结合,功能性纳米颗粒可以在传感器中产生特定的信号,并用于检测目标分子的存在和浓度。
此外,功能性纳米材料还可以用于生物标记和细胞成像,为疾病的早期诊断提供了可能。
2. 生物传感器的灵敏度和选择性的提高纳米材料的独特特性使其能够提高生物传感器的灵敏度和选择性。
功能性纳米材料可以通过表面改性、功能化等方法,与生物分子相互作用,从而增强传感器对目标分子的检测能力。
此外,纳米材料还可以通过增加传感器的表面积和导电性,提高传感器的灵敏度和响应速度,使其能够快速准确地检测微量的生物分子。
3. 生物传感器的稳定性和耐久性的提高功能性纳米材料还可以提高生物传感器的稳定性和耐久性。
传统的生物传感器通常容易受到环境条件的影响,而功能性纳米材料可以通过增强传感器的稳定性和抗干扰能力,使其能够在复杂的生物样品中稳定工作。
此外,纳米材料还可以提高传感器的耐久性,延长传感器的使用寿命。
纳米生物传感器及其在生物检测中的应用

纳米生物传感器及其在生物检测中的应用随着科技的发展和人们对健康关注度的不断提高,生物检测技术越来越受到关注。
在这方面,纳米生物传感器成为研究的热点之一,具有广泛的应用前景,因为它可以迅速、准确地检测生物分子,为人类的健康提供更多的保障。
本文将介绍纳米生物传感器的定义、原理、分类以及其在多个领域的应用。
一、纳米生物传感器的定义纳米生物传感器是一种以纳米技术为基础制备的生物传感器,可以用于检测最小的化学、生物分子水平,而且比常规传感器更灵敏和快速。
其结构将纳米粒子或纳米结构与生物识别元素(如抗体、DNA等)集成在一起,通过识别目标生物分子的特定特征,对其进行检测和监测。
二、纳米生物传感器的原理纳米生物传感器是通过识别目标生物分子与生物识别元素之间的特异性相互作用来实现检测的。
使用合适的探针(例如金纳米颗粒或石墨烯∕量子点等)可以实现高度灵敏的信号放大,并进一步提高生物识别的特异性。
三、纳米生物传感器的分类纳米生物传感器可以按其作为信号转换器电子、光学和机械的方式进行分类,也可以通过它们所检测的生物分子类型进行分类。
根据信号转换的方式来分类:1. 电子型纳米生物传感器:电容、场效应晶体管(FET)、生物燃料电池、电化学传感器等。
2. 光学型纳米生物传感器:荧光探针、表面等离子体共振传感器(SPR)、色谱、光子晶体等。
3. 机械型纳米生物传感器:纳米机械臂、纳米力传感器、压电谐振等。
根据其检测分子的不同,纳米生物传感器可以分为:1. DNA序列传感器:检测通过核酸反应产生的DNA或RNA片段。
2. 蛋白质传感器:用来检测特定蛋白质,通常涉及到免疫反应。
3. 细胞传感器:用来检测细胞生长和活性,例如细胞阵列芯片和微观荧光显微镜。
四、纳米生物传感器的应用领域纳米生物传感器的应用涵盖了许多领域,其中包括临床医学、生命科学、环保、食品安全等。
下面是一些纳米生物传感器的应用情况:1. 肿瘤检测纳米生物传感器在早期癌症检测中有着很大的应用前景。
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功能化纳米探针在生物传感器、细胞分析中的应用
1 功能化纳米探针在生物传感器中的应用
伴随着纳米技术的迅速发展,各种各样的组成、尺寸、大小、维度及形状的纳米材料被可控的修饰上不同的生物分子,用于发展特殊性质的纳米探针。
生物传感方法己经成为发展速度较快的方法,由于其具有灵敏度高、响应速度快、和操作简易等特点。
传感的原理基本上都是通过将纳米探针,的识别单元与待测物质结合过程转变为产生的光学、电化学、Roman 等信号的变化。
一些生物小分子如半胱胺酸、谷胱甘肽等在可逆氧化还原、细胞的解毒及代谢中起到了重要的作用,多巴胺等神经递质是人中枢神经系统中不可缺少的环节,AP肽与阿尔茨海默病(AD)密切相关,这些小分子的检测有利于一些疾病的早期诊断和监控。
1.1 荧光纳米探针用于蛋白质的分析
一般都是利用功能化的荧光纳米材枓与另一种生物分子修饰的有机物或者纳米材料先通过能量转移使荧光猝灭,当目标物引入时,由于和修饰的生物分子更强的作用力,使得猝灭的部分离开荧光性的纳米材料表面,纳米材料的荧光性质发生改变检测到目标蛋白。
这种方法己经具有普适性,应用在蛋白或者其他生物大分子的分析检测中。
1.2 对核酸的分析检测
发展核酸传感器两个基本的目标是要求所构建的传感器具有高的灵敏度,而且具有高的特异性。
性能优良的核酸传感器要能够在低浓度的情况下对核酸进行检测,并具有区别单个碱基错配的能力。
在选择性方面,分子信标和肽核酸(PNA)具有很强的优势。
相对于线性分子探针,分子倍标杂交存在一个动力学竞争过程,具有更好的选择性和区别单个碱基错配能力。
为了实现高灵敏的检测,引入新的信号放大技术尤为重要。
纳米材料由于大的比表面积,可以提供更多的生物分子识别位点;并且可以通过改变尺寸、形状、组成而改变其物理化学性质;同时稳定性高具有较好的生物相容性、结合生物分子的能力等特点。
伴随着纳米技术的迅速发展,各种各样的组成、尺寸、大小、维度及形状的纳米材料被可控的修饰上不同的生物分子,用于发展特殊性质的纳米探针,进行信号放大。
金纳米颗粒(AuNPs)是最常见的用于核酸传感分析中的载体,因为它可以很方便的通过巯基或氨基官能团与核酸或蛋白质等大分子进行功能化后得到生物相容性好的纳米复合物探针。
利用DNA碱基互补配对原则,可控性地在空间上组装纳米金,AuNPs-DNA复合物体系对DNA检测是近二十几年来发展起来的一种简便、快速的传感方法。
Mirkin课题组在1996年首次报道了DNA修饰纳米金(DNA-AuNPs)这种新型的生物纳
米结构以来,DNA-AuNPs生物纳米探针,被广泛的用于一系列超灵敏的DNA检测。
纳米金表面修饰的厚厚的DNA层,不仅由于协调作用能够实现高选择性检测体系的设计,而且可以用于放人检测信号。
生物条形码技术是Mirkin课题组基于DNA-AuNPs纳米探针发展的一种超灵敏检测生物分子的策略,检测灵敏度可以和PCR相媲美。
在AuNPs上功能化两种不同的DNA探针,分别用于检测靶标分子和结合磁珠。
杂交后,利用磁珠从溶液中将结合了靶标分子的AuNPs分离出来,AuNPs上的DNA片段溶出后通过扫描比色法进行检测,检测限达500 zM,即在30μL溶液中能检测到10个拷贝的DNA段。
1.3 荧光纳米探针检测多组分miRNA
近些年來,在基因工程上具有重要作用的miRNA的检测引起了广泛的关注。
miRNA可以作为一种肿瘤标记物,或者药物治疗的靶标,或利用其抑制蛋白翻译功能,直接抑制肿瘤基因的表达,在生物医学中有广阔的应用前景。
在光学生物传感器中,荧光成为主流的检测手段。
Ju等介绍一种基于量子点和氧化石墨烯(GO)的荧光共振能量转移的快速、灵敏和选择性地检测多组分miRNA的检测方案。
该方案利用GO的距离相关的荧光猝灭能力,并结合等温链替代聚合酶反应,提高检测方法的灵敏度。
当目标miRNA不存在时,由于引物(P)和探针分子P2或P3形成双链的Tm低导致其稳定性低,将不能引发等温链荇代聚合酶反应。
由于GO具有强焚光猝灭作用,且单链DNA与GO存在强相互作用,所以使标E有荧光染料的单链DNA P2、P3表现出很弱的背景荧光。
当存在特异性目标序列(T1)时,对应的探针DNA P1识别T1后,由于临位碱基堆积和形成稳定的双螺旋结构,使P1和P的Tm升高几度,这样就可以引发等温链替代聚合酶反应。
当四种核苷酸(dNTPs)和DNA聚合酶存在时,等温链替代聚合酶反应将会产生大量的DNA-miRNA杂交双链。
由于DNA-miRNA杂交双链和GO的作用力较弱,所以将会观察到P1的强荧光发射。
高信噪比和基于等温链替代聚合酶反应的目标放大使本方案具有高灵敏度,而GO的超大比表面积可以同时猝灭标记有不同染料的多种DNA探针的荧光,使本方案可以作为同一溶液中的不同目标miRNA的分析。
1.4 电化学方法检测miRNA
电化学方法简单灵敏,可对核苷酸的杂交反应进行实时检测,故电化学方法在检测miRNA方向具有广泛的应用。
Zhang等人构建了寡核苷酸包裹银纳米簇(AgNCs)作为有效的电化学信标,构建了一种对miRNA检测的简单、灵敏、选择性的无标记电化学生物传感器。
设计的功能性寡核苷酸片段通过杂交结合目标片段,原位合成AgNCs,它对H2O2表现了高效的催化活性。
随后修饰在金电极表曲的带有目标片段识别序列的分子信标与目标片段杂交后,
将含有寡核苷酸包裹的AgNCs引入电极表面。
AgNCs对H2O2的高效催化能力构成/灵敏、无标记的电化学miRNA生物传感器,而信标固有的选择件赋予生物传感器良好的特异件。
1.5 SERS对核酸肿瘤标志物的检测
表面增强拉曼散射(SERS)近年来在生物和化学传感方面的应爪较为活跃。
相比于荧光分析、电化学分析和酶联免疫分析,SERS具有以下优势:有效避免光致褪色、背景低、有效增强分子的拉曼强度,灵敏度髙。
因此SERS有望实现对核酸肿瘤标志物的高灵敏度高选择性的检测。
Driskell等人构建了一个通过SERS实现对miRNA检测的生物传感器。
它应用SERS光谱实现了对miRNA近乎实时的检测(10 s),而且具有非常好的选择性,这项技术可以用于实时检测肿瘤患者不同时期miRNA的表达情况,为目标基因分析和临床生物医药应用提供了潜在的平台。
1.6 SPR检测技术
表面等离子体共振(SPR)通过检测表面等离子体的变化对界面上物质的变化进行检测,SPR传感技术是一项新兴的生物化学检测技术,与传统的生化分析方法相比,SPR传感技术具有无需标记、实时检测、无损伤检测等优点。
Zhang等人以生物素化硫醇DNA分子信标为探针,链霉亲和素功能化金纳米棒为增强表面等离子体共振的信号标记物,设计一种简便灵敏的生物传感器用于miRNA的检测,在最适条件下,该方法的检测极限(LOD)降至0.045pM。
2 功能化纳米探针在细胞分析中的应用
利用纳米材料的较小体积和可控性,可以在纳米尺度和分子水平上实现细胞以及细胞内生命活动的研究,目前已被用于细胞内生物分子的检测,肿瘤细胞成像和治疗等领域。
细胞内的生物分子与细胞的正常代谢密切相关,近年来国内外研宄者们对于细胞内金属离子、重要的蛋白酶以及核酸分子进行了一系列的研究工作。
Lu课题组发展了一种新型的基于DNA 酶的金属离子传感器,将UO22+特异性的DNA酶链与AuNPs联,DNA酶链上分别修饰荧光基团Cy3和猝灭基团。
在没有目标物存在时,荧光染料被粹灭剂和AuNPs同时猝灭;当UO22+存在时,DNA酶切断荧光标记的底物从而释放出Cy3,Cy3的荧光恢复。
该方法能实现对细胞里的UO22+成像和检测。
细胞表面或者细胞内有很多蛋白酶与肿瘤细胞的持续分裂或者凋亡密切相关,因此蛋白酶的检测对癌症的早期发现、监测和治疗有重大意义。
Ju课题组设计了一种带缺口的分子信标功能化的AuNPs探针,用于原位检测细胞内的端粒酶活性。
端粒酶是-种由RNA和蛋白质组成的核糖核蛋白复合物,是一种逆“转录酶”,在大部分肿瘤细胞中髙表达。
该探针以
AuNPs为载体,负载特殊设计的分子信标(MB),MB上修饰荧光分子Cy5。
由于荧光共振能量转移,Cy5的荧光被AuNPs猝灭。
探针进入细胞后,在细胞质内端粒酶的作用下,使MB 环被打开,导致Cy5离开AuNPs表面,将恢复荧光。
该AuNPs探针稳定性高,可对细胞内端粒酶活性进行定量检测。
miRNA的胞内检测,在基因治疗及基因药物的开发等方面有着重要的意义。
Ju等构建了叶酸功能化的具有荧光特征的纳米颗粒,通过在纳米颗粒上结合不同的基因探针,实现对富含叶酸受体(FR)肿瘤细胞的特异性识别、转染、示踪及对胞内miRNA的抑制和检测。
功能化的SnO2探针以二硫键形式结合上不同的基因探针后,能够特异性地识别富含FR的肿瘤细胞并进行高效的转染。
转染进胞内的纳米颗粒,双硫键断裂,连接的探针被有效释放出来,抑制miRNA的表达或对miRNA进行定量检测。