无菌实验室操作规程
无菌实验室操作规程
无菌实验室操作规程一、引言无菌实验室是进行微生物学研究的重要场所，为了保证实验结果的准确性和可靠性，必须严格遵守一系列的操作规程。
本文将详细介绍无菌实验室的操作规程，包括实验环境准备、实验员个人卫生要求、无菌操作流程、实验室设备的使用和维护等内容。
二、实验环境准备1. 实验室空间要求：无菌实验室应具备良好的通风系统，确保空气流通，并配备紫外线灯，以杀灭空气中的微生物。
2. 实验台面准备：实验台面应进行彻底清洁，使用酒精或消毒液擦拭，并覆盖无菌工作垫，以防止细菌污染。
3. 环境温度和湿度：实验室内的温度应保持在适宜的范围内，通常为20-25摄氏度，湿度应保持在40%-60%之间。
三、实验员个人卫生要求1. 穿戴实验服：进入无菌实验室前，实验员必须穿戴干净的实验服，并戴上帽子和口罩，以防止头发和口腔中的微生物进入实验环境。
2. 洗手和消毒：实验员进入实验室前必须彻底洗手，并使用消毒液进行手部消毒。
在实验过程中，如有需要，应随时进行手部消毒。
3. 禁止进食和吸烟：无菌实验室内严禁进食和吸烟，以免将细菌和烟尘带入实验环境。
四、无菌操作流程1. 准备工作：实验员应将所需的实验器具进行无菌处理，如高温煅烧、紫外线照射或化学消毒等。
同时，将所需培养基、试剂和标本等准备齐全。
2. 环境消毒：使用消毒液对实验台面、操作器具和空气进行消毒处理，确保实验环境的无菌状态。
3. 无菌操作：实验员在实验台面上进行无菌操作时，应注意以下几点：- 快速而轻柔地打开和关闭培养皿或试管盖，以减少细菌进入的机会。
- 使用灯光照射操作区域，以提高无菌操作的可见性。
- 避免将手或其他物体靠近操作区域，以防止微生物的飞溅和污染。
- 使用无菌的工具进行移植和接种操作，避免直接接触培养基和标本。
- 操作完毕后，及时关闭培养皿或试管，并进行适当的标记，以便后续观察和分析。
五、实验室设备的使用和维护1. 培养箱和培养皿：使用培养箱时，应注意温度和湿度的调节，避免过高或过低的温度对微生物生长产生影响。
无菌实验室操作规程
无菌实验室操作规程一、引言无菌实验室是进行微生物学研究和生物制剂生产等工作的重要场所，为了保证实验结果的准确性和生物制品的质量安全，必须严格遵守无菌实验室操作规程。
本文档旨在规范无菌实验室的操作流程，确保实验室的无菌环境和操作的安全性。
二、实验室准备1. 实验室入口处设置洗手池，并配备洗手液、干燥纸巾和无菌手套等必要设备。
2. 实验室内应保持整洁，定期进行消毒和清洁工作，确保无菌环境的稳定性。
3. 实验室内的工作台面和仪器设备应定期进行消毒，并配备必要的无菌操作用具。
三、人员要求1. 所有进入无菌实验室的人员必须经过严格的培训，并取得相应的操作资质证书。
2. 进入实验室前，必须穿戴干净的实验服，并佩戴无菌手套、口罩和防护眼镜等个人防护装备。
3. 每位操作人员在进入实验室之前，应进行彻底的手部消毒，并确保双手干燥。
四、实验操作1. 打开实验室门前，先用70%乙醇擦拭门把手，再进行手部消毒。
2. 进入实验室后，将实验所需的材料和试剂按照无菌操作规程准备好，并放置在无菌工作台上。
3. 在无菌工作台上进行实验操作时，必须先进行表面消毒，使用70%乙醇擦拭工作台面和所需的实验器具。
4. 取出所需的培养基或者试剂时，应使用无菌的移液器或者无菌的试剂瓶盖，并将其放置在无菌工作台上，避免接触外界环境。
5. 在进行培养物接种时，必须先进行表面消毒，使用70%乙醇擦拭培养皿或者培养瓶的外壁，并进行无菌操作。
6. 实验操作过程中，应尽量减少对无菌工作台的开启频率，避免空气污染。
7. 操作结束后，将使用过的实验器具进行消毒处理，并彻底清洁无菌工作台。
五、废弃物处理1. 所有废弃物必须按照规定的分类进行处理，避免交叉污染。
2. 废弃的培养皿、培养瓶等含有生物危（wei）险物质的实验器具必须经过高温高压灭菌处理后，方可进行处置。
3. 废弃物的采集容器应密封，并定期进行清理和消毒。
六、实验室消毒1. 实验室应定期进行彻底的消毒工作，包括工作台面、设备、地面等。
无菌实验室操作规程
无菌实验室操作规程一、引言无菌实验室是进行微生物学研究和实验的重要场所，为保证实验的准确性和可靠性，需要严格遵守一系列操作规程。
本文将详细介绍无菌实验室的操作规程，包括实验室的准备工作、操作流程、无菌技术要点等内容。
二、实验室准备工作1. 实验室环境准备无菌实验室应位于洁净、通风良好的区域，远离污染源。
实验室内的空气质量应符合相关标准，如PM2.5浓度不超过X微克/立方米。
2. 实验室设备准备确保实验室内的设备完好无损，并经过定期的维护和检修。
实验室必备设备包括培养箱、无菌工作台、高压灭菌器等。
设备的使用应符合相关操作手册的要求。
3. 实验室耗材准备准备所需的无菌培养基、培养皿、试管、移液器等耗材，并确保其无菌状态。
耗材的选用应符合实验要求，并遵循相关的质量标准。
三、操作流程1. 穿戴防护装备进入无菌实验室前，必须穿戴干净的实验服，并戴上帽子、口罩、手套和鞋套等防护装备。
确保防护装备的完整性和无菌状态。
2. 洗手消毒进入无菌实验室后，首先进行洗手消毒。
使用符合要求的洗手液彻底清洁双手，然后用75%酒精消毒双手，确保双手的无菌状态。
3. 灭菌操作台在灭菌操作台上进行无菌操作。
操作台的表面应进行彻底清洁，并用高压灭菌器进行灭菌处理。
灭菌后，操作台应保持封闭状态，以防止空气污染。
4. 培养基制备根据实验要求，准备所需的无菌培养基。
首先将培养基粉末加入适量的蒸馏水中，搅拌均匀后，倒入无菌培养皿中。
培养皿密封后，放入高压灭菌器中进行灭菌处理。
5. 无菌操作进行无菌操作前，需要先进行热消毒。
将所需的实验器具放入高压灭菌器中进行灭菌处理，确保器具的无菌状态。
然后在灭菌操作台上进行无菌操作，注意避免操作过程中的空气污染。
6. 培养基接种将需要接种的微生物菌株取出，通过无菌技术将其接种到无菌培养基上。
接种过程中需要注意操作的轻柔和快速，以避免菌株的污染。
7. 培养基培养接种完毕后，将培养皿密封并放入培养箱中进行培养。
无菌实验室操作规程
无菌实验室操作规程标题：无菌实验室操作规程引言概述：无菌实验室是进行微生物实验和细胞培养的重要场所，为保证实验结果的准确性和可靠性，操作规程十分关键。
本文将详细介绍无菌实验室的操作规程，包括实验室准备、操作流程、设备消毒、个人防护和废物处理等方面。
一、实验室准备1.1 清洁实验室环境：无菌实验室应保持干净整洁，定期清洁地面、台面和设备，避免灰尘和细菌污染。
1.2 检查实验室设备：在进行实验前，要检查实验室设备是否正常运转，确保无菌实验室的各项设备都处于良好状态。
1.3 准备所需材料：提前准备好所需的培养基、试剂和实验用具，确保实验进行顺利。
二、操作流程2.1 洗手消毒：进入无菌实验室前，必须先进行手部消毒，避免将细菌带入实验室。
2.2 穿戴个人防护用具：穿戴实验服、手套、口罩和护目镜等个人防护用具，避免污染实验样品。
2.3 严格按照实验操作规程进行：在进行实验时，要按照操作规程的要求进行，避免操作失误导致实验失败。
三、设备消毒3.1 消毒实验台面：在进行实验前，要将实验台面用75%乙醇或其他消毒液擦拭消毒，避免细菌污染。
3.2 消毒实验用具：使用完实验用具后，要及时用高温或消毒液进行消毒，确保下次使用时无菌。
3.3 定期消毒实验室设备：定期对实验室设备进行消毒，保持实验室的无菌状态。
四、个人防护4.1 穿戴个人防护用具：在进行实验时，必须穿戴好实验服、手套、口罩和护目镜，避免接触细菌。
4.2 避免交叉污染：在实验过程中，要避免将实验用具和试剂带到其他实验室，避免交叉污染。
4.3 定期进行健康检查：实验人员要定期进行健康检查，确保身体健康，避免将疾病传播到实验室。
五、废物处理5.1 分装废物：在进行实验后，要将废物分类分装，避免混合造成交叉感染。
5.2 定期清理实验室废物：实验室废物要定期清理，避免细菌滋生和传播。
5.3 合理处理废物：将实验室废物交由专业机构处理，避免对环境和人体造成危害。
结论：无菌实验室操作规程十分重要，只有严格遵守规程，才能确保实验结果的准确性和可靠性。
无菌实验室操作规程
无菌实验室操作规程一、引言无菌实验室是进行微生物学实验和生物制剂研究的重要场所，为保证实验的准确性和可靠性，必须严格遵守操作规程。
本文将详细介绍无菌实验室的操作规范，包括实验室准备、操作流程、消毒措施和安全注意事项等。
二、实验室准备1. 实验室环境要求无菌实验室应设在干燥、通风良好的地方，温度控制在20-25摄氏度，相对湿度控制在50-60%。
2. 实验室设备和试剂准备（1）准备所需的实验设备，包括培养箱、培养皿、离心机、显微镜等。
（2）准备所需的试剂和培养基，确保其质量符合要求，并按照使用说明正确保存。
三、操作流程1. 个人防护（1）进入实验室前，必须穿戴干净的实验服、手套和口罩，确保个人卫生。
（2）操作过程中，避免触碰面部、眼睛和其他暴露部位，以防止交叉污染。
2. 实验台面消毒（1）每次实验前，用75%乙醇对实验台面进行彻底擦拭消毒。
（2）实验结束后，同样使用75%乙醇对实验台面进行消毒处理。
3. 培养物传递（1）使用无菌技术传递培养物时，必须在无菌实验室的无菌工作台上进行。
（2）在传递培养物之前，先将培养皿或者试管中的盖子取下，然后将传递工具在火焰中消毒，再取出所需的培养物。
4. 培养基制备（1）准备培养基前，要先将使用的培养皿或者试管用高温高压灭菌器进行灭菌处理。
（2）制备培养基时，必须按照配方准确称量试剂，并使用无菌技术进行操作。
5. 显微镜操作（1）使用显微镜前，要先将镜片用无菌棉球蘸取75%乙醇擦拭消毒。
（2）观察完毕后，将显微镜镜片再次进行消毒处理。
四、消毒措施1. 实验室常规消毒（1）每天实验结束后，对实验室内的地面、工作台、设备等进行消毒处理。
（2）使用消毒剂时，要按照说明书的要求正确配制和使用。
2. 垃圾处理（1）实验过程中产生的废弃物，如培养皿、试管等，必须放入专用的生物废弃物容器中。
（2）生物废弃物容器应定期进行高温高压灭菌处理，确保无菌处理。
五、安全注意事项1. 实验室操作时，要注意避免剧烈晃动和碰撞实验设备，以免造成设备损坏或者人身伤害。
无菌实验室操作规程
无菌实验室操作规程一、引言无菌实验室是进行微生物学研究和生物制品生产的重要场所，为了确保实验结果的准确性和生物制品的质量安全，必须严格遵守无菌实验室操作规程。
本文旨在规范无菌实验室的操作流程，保证实验室内的无菌环境和操作的无菌性。
二、实验室准备1. 实验室内应保持清洁，定期进行消毒和清扫工作，确保无菌环境的维持。
2. 实验室内的工作台面、器具和培养基等物品要经过高温高压灭菌处理，确保无菌性。
3. 操作人员应穿戴干净的实验服，戴上手套、口罩和帽子，进入实验室前要进行手部消毒。
三、实验操作1. 打开实验室门前，先进行手部消毒，然后戴上手套。
2. 在无菌工作台上进行操作，工作台表面需经过高温高压灭菌处理。
3. 操作人员应将所需的培养基和试剂准备好，确保其无菌性。
4. 打开培养基瓶盖时，应使用酒精灯或者酒精棉球消毒瓶口。
5. 使用无菌吸管或者无菌移液器进行各种液体的转移，避免污染。
6. 操作结束后，将使用过的培养皿和试剂瓶等物品进行高温高压灭菌处理。
四、无菌操作技巧1. 操作人员应熟练掌握无菌操作技巧，避免污染实验样品。
2. 在操作过程中，要保持手部和操作区域的干燥，避免水滴带入实验样品中。
3. 使用吸管或者移液器时，要注意避免吸入空气，以防细菌污染。
4. 操作过程中要避免与无菌区域外的物品接触，防止污染。
五、实验室清洁和消毒1. 每天结束实验后，要对实验室进行清洁和消毒，包括工作台面、仪器设备和地面等。
2. 清洁和消毒时要使用无菌的清洁剂和消毒剂，确保消毒效果。
3. 定期对实验室进行彻底的清洁和消毒，包括墙壁、天花板和通风设备等。
六、实验室废弃物处理1. 实验室内产生的废弃物要分类采集，包括培养皿、试剂瓶、吸管等。
2. 废弃物要放入专用的废弃物容器中，并进行高温高压灭菌处理。
3. 废弃物处理后，要及时清理废弃物容器，确保实验室的清洁和无菌环境。
七、实验室安全注意事项1. 操作人员应遵守实验室的安全规定，不得擅自离开实验室或者私自带入物品。
无菌操作规程
无菌操作规程无菌操作是在医疗、实验室等领域中进行的一种重要操作。
它的目的是保持环境的无菌状态，防止外界的污染，保证实验结果的可靠性。
本文将介绍无菌操作的一般规程和注意事项，以期帮助读者正确地进行无菌操作。
一、准备工作在进行无菌操作前，需要进行一系列的准备工作。
首先，要确保操作的场所清洁整齐，并保持室温适宜。
其次，要准备好所需的无菌器械和培养基等物品，并对其进行必要的消毒。
再次，要对自己进行全面的消毒，包括洗手、穿戴无菌衣物和戴上无菌手套等。
二、无菌操作步骤1. 打开试验台：在无菌试验台上进行操作时，首先应按照操作规程打开试验台，确保室内的无菌环境。
2. 洗手消毒：在进行无菌操作前，必须进行彻底的洗手消毒。
先用流动水洗手，然后使用无菌洗手液进行洗手，并用流动水彻底冲洗干净。
最后，用无菌酒精进行手部消毒。
3. 穿戴无菌衣物：完成洗手消毒后，接下来要穿戴无菌衣物。
无菌衣物包括无菌帽、无菌口罩、无菌手套和无菌鞋套等。
穿戴时要注意不要碰触到其他物品，以免引入污染源。
4. 开始操作：在穿戴好无菌衣物后，可以开始进行无菌操作了。
操作前要将所需的器械和试剂置于无菌台上，避免污染。
5. 使用无菌器械：在进行无菌操作时，务必使用无菌器械。
无菌器械是经过高温高压灭菌处理的，可以保证其无菌状态。
使用时要注意不要碰触其他非无菌物品，同时注意不要使器械碰撞，以免影响无菌性。
6. 注意无菌培养基的使用：无菌培养基是进行微生物培养的基础，使用前要检查培养基是否有变色、变质等情况，同时要注意不要碰触到其他物品，以免引入污染。
7. 触摸操作：在触摸培养基或其他无菌物品时，要注意手部的无菌性。
当需要触摸无菌物品时，要用无菌手套轻柔地触摸，避免使用指尖接触，以免杂菌附着。
8. 包装无菌物品：当需要将培养基或其他无菌物品包装时，要使用专门的无菌包装袋或容器，并在包装过程中保持手部的无菌性。
三、注意事项1. 避免大面积的污染：在进行无菌操作时，要避免大面积的污染，尽可能将无菌区域与非无菌区域分隔开来，防止跨区域传播。
无菌操作的操作规程
无菌操作的操作规程无菌操作是指在无微生物污染的条件下进行操作的一系列措施，以保证操作的物体或环境不会被微生物污染。
无菌操作广泛应用于医疗、实验室、制药等领域，以确保对人体健康和实验结果的准确性和可靠性。
以下是无菌操作的操作规程。
一、准备工作1.操作人员应进行全身消毒，包括彻底洗手和穿戴无菌工作服、手套、口罩和帽子等，并确保消毒措施完全干燥。
2.工作区域应进行彻底的清洁和消毒，包括平台、仪器、容器等。
二、消毒操作1.操作人员应将所需器具、材料和培养基等放入无菌操作区域。
2.将要进行消毒操作的仪器或器皿，用高温蒸汽或过氧化氢等消毒方法进行处理，确保杀灭细菌和病毒。
3.将培养基放入高效过滤器中，用压缩空气将其过滤到无菌操作区域，并确保其无菌性。
三、无菌工作台操作1.在无菌工作台上进行操作时，应关闭所有室外门窗，以防止空气中的微生物进入工作区域。
2.在无菌工作台上，每个操作点应使用单次使用的无菌消毒棉球擦拭工作区域，并取出所需的试剂、样品和培养基等。
3.操作人员应始终保持手与工作区域保持一定的距离，以避免手接触到工作平台引入微生物。
四、操作过程1.操作人员应随时保持双手在无菌状态下，并避免手的直接接触操作物体。
2.在取样或移液的过程中，应避免尖头接触容器壁或其他物体，以防止微生物的交叉污染。
3.在操作过程中，应尽量减少对培养基或其它试剂的暴露时间，以防止细菌或其他微生物的污染。
4.使用完毕的器具和材料应及时丢弃或进行适当的消毒处理，以避免再次污染。
5.在操作过程中，应密切注意操作物体周围的环境条件，如温度、湿度和通风等，以确保操作的无菌性。
五、操作后处理1.操作结束后，应将无菌工作台以及操作区域进行彻底清洁和消毒，将使用过的培养基、试剂和材料及时清除，以避免交叉感染。
2.彻底清洁和消毒操作人员穿戴的工作服、手套和帽子等，以防止微生物残留。
3.所有使用过的无菌器具和材料，应先经过适当的消毒处理，然后再进行丢弃或回收。
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无菌实验室操作规程
为无菌实验室的操作，无菌实验室的保护提供一个标准化规程，保证实验室操作顺利进行，保证实验结果的准确性。
无菌实验室操作程序很重要，安徽人和净化为您提供。
操作程序
1、微生物检验的准备工作
1.2操作前的准备:
1.2.1无菌实验室使用前必须打开无菌实验室的紫外灯辐照灭菌30分钟以上，并且同时打开超净台进行吹风。
以保证无菌实验室的洁净度符合要求。
1.2.2微生物检验玻璃仪器的清洗
1.2.2.1按技术要求将各种玻璃仪器进行清洗，可用瓶刷或海绵沾上肥皂或洗衣粉或去污粉等洗涤剂刷洗，然后用自来水充分冲洗干净。
热的肥皂水去污能力更强，可有效地洗去器皿上的油污。
洗衣粉和去污粉较难冲洗干净而常在器壁上附有一层微小粒子，故要用水多次甚至10次以上充分冲洗，或可用稀盐酸摇洗一次，再用水冲洗，然后倒置于磁盘或木架上，在室内晾干，放烘箱烘干。
1.2.2.2玻璃器皿经洗涤后，若内壁的水是均匀分布成一薄层，表示油垢完全洗净，若挂有水珠，则还需用洗涤液浸泡数小时，然后再用自来水充分冲洗。
1.2.2.3装有固体培养基的器皿应先将其弃去，然后洗涤。
带菌的器皿在洗涤前先浸在2％煤酚皂溶液（来苏尔）或0.25％新洁尔灭消毒液内24小时或煮沸半小时，再用上法洗涤。
带病原菌的培养物最好先行高压蒸汽灭菌，然后将培养物倒去，再进行洗涤。
1.2.2.4盛放一般培养基用的器皿经上法洗涤后，即可使用，若需精确配制化学药品，或做科研用的精确实验，要求自来水冲洗干净后，再用蒸馏水淋洗三次，晾干或烘干后备用。
1.2.2.5准备好所用的各种试剂，做好普通营养琼脂或其他选择的培养基。
1.3消毒、灭菌
微生物检验用器材及场所必须进行灭菌或消毒处理，不同的对象采用不同的处理方法。
1.3.1．高压蒸汽灭菌:工作服、口罩、稀释液等，置高压杀菌锅内，一般采用121℃灭菌半小时，当然不同的培养基有不同的要求，应分别处理
1.3.2．火焰灭菌：接种针、接种环等可直接火焰灭菌
1.3.3．高温干燥灭菌：各种玻璃器皿、注射器、吸管等，置于燥箱中160℃灭菌2小时。
1.3.4．一般消毒:无菌实验室内的凳、工作台、试管架、天平、待检物容器或包装均无法
进行灭菌，必须用其他方法进行消毒处理，采用2%石炭酸或来苏儿水溶液擦拭消毒，工作人员的手也用此法进行消毒。
1.3.5．空气的消毒：开启紫外灯照射30―60分钟即可。
2、培养基的配制、验证及存储
培养基制备的质量将直接影响微生物生长。
由于各种微生物对其营养要求不完全相同，培养目的的不同，各种培养基制备要求如下。
2.1．根据培养基配方的成分按量称取，然后溶于蒸馏水中，在使用前对应用的试剂药品应进行质量检验。
2.2．PH测定及调节：PH测定要在培养基冷至室温时进行，因在热或冷的情况下，其PH 有一定差异，当测定好时，按计算量加进碱或酸混匀后，应再测试一次。
培养基PH值一定要正确，否则会影响微生物的生长或影响结果的观察。
但需留意因高压灭菌可影响一些培养基的PH降低或升高，故不宜灭菌压力过高或次数太多，以免影响培养基的质量，指示剂、往氧胆酸钠、琼脂等一般在调完PH后再加进。
2.3．培养基需保持澄清，便于观察细菌的生长情况，培养基加热煮沸后，可用脱脂棉花或绒布过滤，以除往沉淀物，必要时可用鸡蛋白澄清处理，所用琼脂条要预先洗净晾干后使用，避免因琼脂含杂质而影响透明度。
2.4．培养基的灭菌既要达到完全灭菌目的，又要留意不因加热而降低其营养价值，一般121℃15min即可，如为含有不耐高热物质的培养基如糖类、血清、明胶等，则应采用低温灭菌或间歇法灭菌，一些不能加热的试剂如亚碲酸钾、卵黄、TTC、抗菌素等，待基础琼脂高压灭菌后凉至50℃左右再加进。
2.5．每批培养基制备好后，应做无菌生长试验及所检菌株生长试验。
假如是生化培养基，使用标准菌株接种培养，观察生化反应结果，应呈正常反应，培养基不应贮存过久，必要时可置4℃冰箱存放。
2.6．目前各种干燥培养基较多，每批需用标准菌株进行生长试验或生化反应观察，各种培养基用相应菌株生长试验良好后方可应用，新购进的或存放过久的干燥培养基，在配制时也应测PH，使用时需根据产品说明书用量和方法进行。
2.7．每批制备的培养基所用化学试剂、灭菌情况及菌株生长试验结果、制作职员等应做好记录，以备查询。
3、样品的采集：接到第一检查站通知后，提前30分钟到达生产现场，双方确认生产品种、下辊时间后相互签字后，检验员用75%酒精棉球擦手两次，用灭菌刀取样，放到事先灭好菌的纸袋中，带回放入无菌实验室中待检，并做好标识。
4、样品的微生物检验
4.1化验员进入无菌实验室前，必须用肥皂或消毒液洗手消毒，然后在缓冲间更换专用工作服，鞋，帽子，口罩和手套(或用75%的乙醇再次擦拭双手)，方可进入无菌实验室进行操作。
4.2供试品在检查前，应保持外包装完整，不得开启，以防污染。
检查前，用70％的酒精棉球消毒外表面。
4.3检查酒精等内酒精体积是否在2/3处，不足时先加好无水酒精，擦干净洒在瓶外的酒精方可点燃酒精灯。
4.4用75%的后酒精再次擦拭消毒双手，用镊子取出酒精棉球点燃，在待检样瓶口和稀释水瓶口处环绕几圈对瓶口灭菌。
4.5纸样的预处理：用无菌剪剪开信封，无菌镊子取出样品，用同样的方法将样品剪成5mm×5mm左右的方块，放在天平台上的灭菌纸上，称取样品无菌操作将样品置于灭菌生理盐水中，摇动10分钟，使纸样充分湿润，完全浸泡在无菌生理盐水中，注意不可用力过猛，小心样液溅出。
4.5如果样品所含细菌较多需稀释时，应以无菌方法吸取1ml样液注入盛有9ml灭菌生理盐水中，吸上来在轻吹下去往复2-3次混匀成1:10稀释液，吸取1:10稀释液1ml注入盛有9ml 灭菌生理盐水中混匀成1：0:1稀释液，如此递增西施一次，必须更换一支灭菌吸管。
4.6打开培养皿灭菌桶，取出所需的培养的培养皿并在培养皿上做好标识。
4.7吸取液体样品前，灭菌吸管在使用前下端需通过火焰灭菌（再火焰上来回灼烧三次以上）稍冷再用。
4.7移取样品前应充分混匀，再用灭菌吸管吸取1ml注入做好标识的培养皿中。
4.8每个培养皿中倒入冷却至约45℃的培养基15-20ml，立即平摇培养皿，时代测样品能够均匀分散于培养基中。
4.9样品检验过程中所用方法、出现的现象和结果等均要用文字做好纪录，以作为对结果分析、判定的依据，记录要求具体、清楚、真实、客观、不得涂改和伪造。
4.10工作完毕，将酒精灯帽扣上，两手应用肥皂或洗手液洗净，必要时先用2%消毒液消
毒，然后用水冲洗。
如果菌也洒在桌面或地面上，应立即用5%石碳酸溶液或3%的来苏尔倾覆在被污染处至少30分钟，再做处理。
5、培养
培养基冷却后，翻转培养基，使培养皿底在下面，放入37℃培养箱中培养。
6、样品的留存：
纸样做好标识留存48小时以上，已备待查。
检验完毕的培养基放在冰箱中留存48小时以上以备待查。
7、无菌检验出现异常数据时：
站长在日常巡视时，发现异常时及时对生产盐水、培养基，操作空白进行排查，立即组织复测，当检验员发现菌落异常时，立即汇报给站长，进行排查，组织复检。
8、废弃物处置
8.1处置程序
8.1.1检验后的废气物必须随时清除，并及时送到指定地点加以处理。
检验后的废弃样品，若对环境无害，可做为垃圾处置。
8.1.2液体废物一般可加漂白粉进行氯化消毒处理。
固体可燃性废物分类收集、处理、一律及时焚烧。
固体非可燃性废物分类收集，可加漂白粉进行氯化消毒处理。
满足消毒条件后作最终处置。
8.1.3.若经过物理、化学方法处理后能转化为无害的或达到排放标准的有害废弃物，在经过妥善处理后，克排放处理。
8.1.4一次性使用的制品如手套、帽子、工作物、口罩等使用后放入污物袋内集中烧毁。
8.1.5. 应有盛装废弃物的容器，最好是防碎裂的，里面盛装适宜的消毒液，消毒液使用时新鲜配制。
把消毒液及废弃物倒入一个容器里以备高压灭菌。
盛装废弃物的罐子在再次
使用前应高压并洗净。
可重复利用的玻璃器材如玻片、吸管、玻瓶等可以用1000-3000mg/L 有效氯溶液浸泡2-6h.然后清洗重新使用，或者废弃。
8.1.6. 用来盛放的容器应用消毒液浸泡；严格与感染性生物材料区分，防止二者混放；过期的生物性试剂应废弃，禁止使用。
盛标本的玻璃、塑料、搪瓷容器可煮沸15min.或者用1000mg/L有效氯漂白粉澄清液浸泡2-6h，消毒后用洗涤剂及流水刷洗、沥干；用于微生物培养的，用压力蒸汽灭菌后使用。
8.1.7. 微生物检验接种培养过的琼脂平板应压力灭菌30min，趁热将琼脂倒弃处理。
8.2处置规定
8.2.1、检验过程中产生的任何污染材料未经消毒不能拿出实验室。
8.2.2、液体废弃物必须收集在防漏、未破的容器内，经高浓度化学消毒剂处理。
8.2.3、对剩余标本、接触过的培养基、菌种等丢弃前均须适当消毒。
8.2.4、对于任何有污染的锐器如针头、注射器、玻璃等在处理前不要用手接触。
安徽人和净化。