异柠檬酸脱氢酶
《异柠檬酸脱氢酶》课件
应用领域
• 医学研究领域：异柠檬酸脱氢酶在疾病诊断和治疗中的应用具有潜力。 • 农业领域：应用异柠檬酸脱氢酶技术改良作物，提高农作物的产量和
抗逆性。 • 食品工业：异柠檬酸脱氢酶用于食品加工过程，改善食品的质地和口感。
研究的前景和挑战
1
前景
随着科学技术的不断进步，我们可以进一步研究异柠檬酸脱氢酶的结构和功能， 以及其在疾病治疗和农业领域的应用。
异柠檬酸脱氢酶的功能
异柠檬酸脱氢酶参与柠檬酸循 环和细胞呼吸过程，提供细胞 所需的能量。
催化机制
异柠檬酸脱氢酶通过与底物结 合，将底物中的氢原子移动到 辅助酶上，最后转移到氧分子 上，完成反应。
生物学中的重要性
异柠檬酸脱氢酶在细胞呼吸过程中起着至关重要的作用。它帮助维持能量平 衡，支持生命体的正常功能，并参与多种生物学过程，如有氧代谢和能量供 应。
它的作用是什么？
异柠檬酸脱氢酶在细胞内 调节能量代谢，通过催化 氧化反应，将异柠檬酸转 化为柠檬酸，并释放出所 需的能量。
为什么异柠檬酸脱氢 酶重要？
异柠檬酸脱氢酶是细胞呼 吸过程中的关键酶之一， 对维持能量平衡和生物体 的正常功能具有重要作用。
结构和功能
异柠檬酸脱氢酶的结构
异柠檬酸脱氢酶由多个蛋白质 亚基组成，它们相互配合形成 稳定的三维结构。
2
挑战
研究异柠檬酸脱氢酶的挑战包括复杂的实验条件、酶的稳定性和高成本的酶制备。
3
创新
有创新的技术和方法的引入，可以克服挑战，推动异柠檬酸脱氢酶领域的发展。
总结与展望
在本课件中，我们学习了异柠檬酸脱氢酶的定义、作用、结构和功能，以及 其在生物学中的重要性和应用领域。同时，我们也了解到了研究该酶所面临 的挑战和前景。希望本次分享对您有所启发，谢谢！
细菌异柠檬酸脱氢酶活性比色法定量检测试剂盒产品说明书
细菌异柠檬酸脱氢酶活性比色法定量检测试剂盒产品说明书（中文版）主要用途细菌异柠檬酸脱氢酶（ISOCITRATE DEHYDROGENASE）活性比色法定量检测试剂是一种旨在通过反应系统中氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷磷酸酸（NADP）还原后峰值的变化，即采用比色法来测定细菌裂解样品中酶活性的权威而经典的技术方法。
该技术经过精心研制、成功实验证明的。
其适合于各种细菌细胞裂解悬液样品异柠檬酸脱氢酶的活性检测。
产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定。
技术背景异柠檬酸脱氢酶（isocitrate dehydrogenase；IDH；EC1.1.1.42）是三羧酸循环（citric acid cycle）或克雷布斯循环（Krehes cycle）中的酶之一，存在于所有生物体内。
细菌异柠檬酸脱氢酶有2种同工酶：同源双体，40至45Kd分子量；单体，80至100Kd分子量。
在细菌体内，氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷磷酸（oxidizedβ-Nicotinamide adenine dinucleotide –phosphate；NADP）依赖性异柠檬酸脱氢酶获得辅酶NADP和辅助因子锰或镁离子（Mn）的推动，脱去底物异柠檬酸的氢和二氧化碳（氧化性脱羧基作用），转化为α-酮戊二酸（α-ketoglutarate），同时生成还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷磷酸（reduced β-Nicotinamide adenine dinucleotide –phosphate；NADPH）。
一旦磷酸化或在乙酸环境中，以及有限的葡萄糖条件下，异柠檬酸脱氢酶则失活，从而控制三羧酸循环和乙醛酸旁路（glyoxylate bypass）之间碳的流动。
基于异柠檬酸脱氢酶的NADP依赖性，和作用后所产生的NADPH，通过分光光度仪的峰值变化（340nm 波长），来定量分析异柠檬酸脱氢酶的活性。
异柠檬酸脱氢酶反应系统为：产品内容裂解液（Reagent A）毫升活性液（Reagent B）微升缓冲液（Reagent C）毫升反应液（Reagent D）毫升底物液（Reagent E）毫升阴性液（Reagent F）毫升产品说明书1份保存方式保存活性液（Reagent B）、缓冲液（Reagent C）、反应液（Reagent D）和底物液（Reagent E）在－20℃冰箱里；其余的保存在4℃冰箱里；反应液（Reagent D）和底物液（Reagent E）避免光照；有效保证6月用户自备1.5毫升离心管：用于样品保存的容器15毫升锥形离心管：用于样品操作的容器超声仪：用于裂解细菌细胞（微型）台式离心机：用于样品制备比色皿或96孔板：用于比色的容器分光光度仪或酶标仪：用于比色分析实验步骤实验开始前，将－20℃冰箱里的试剂盒中的活性液（Reagent B）置入冰槽里融化。
异柠檬酸脱氢酶在植物抗氧化胁迫中的作用
异柠檬酸脱氢酶在植物抗氧化胁迫中的作用郝兆丰;袁进成;刘颖慧【摘要】异柠檬酸脱氢酶( ICDH)是连接C-N代谢酶的关键,它催化三羧酸循环(TCA)中的异柠檬酸氧化脱羧形成α-酮戊二酸的可逆反应.ICDH的另一个重要功能是产生细胞质中的NADPH,NADPH在细胞中无处不在,介导许多氧化还原反应,并影响到几乎所有的代谢途径,涉及植物体内的活性氧( ROS)的生产和消耗,因此是传递胁迫信号的中转站.综述异柠檬酸脱氢酶在植物抗氧化胁迫中的作用,便于更好地理解ICDH在氧化胁迫中的信号传递和化学反应中所起的作用,为抗逆分子育种服务.【期刊名称】《生物技术通报》【年(卷),期】2012(000)006【总页数】4页(P32-35)【关键词】异柠檬酸脱氢酶;氧化胁迫;NADPH;活性氧【作者】郝兆丰;袁进成;刘颖慧【作者单位】河北北方学院,张家口075000;河北北方学院,张家口075000;河北北方学院,张家口075000【正文语种】中文植物在自然界中常常受到诸多不利环境因素的影响，在逆境下植物自身会产生复杂的生物学响应来感知逆境胁迫信号，然后通过信号转导来调节细胞内抗逆相关蛋白的表达，进而调整自身的状态来适应不利环境。
研究植物抗胁迫相关蛋白的理化性质及生物学功能，认识抗胁迫蛋白的作用机理，筛选重要的抗性相关蛋白，对认识植物的抗逆机理以及指导植物抗胁迫品种的选择和培育等都有重要的意义［1］。
异柠檬酸脱氢酶（isocitrate dehydrogenase，ICDH）是植物中的一个较重要的酶，是三羧酸循环中比较重要的和有调控意义的限速酶。
该酶的结构和定位，以及在TCA循环中的作用已有较多的研究报道。
但是，近期越来越多的研究发现，它在应答多种逆境胁迫中起重要作用，由此也引发了人们对其在抗氧化胁迫反应作用的高度重视。
C-N循环在植物的生长和发育中起重要的作用，在植物中，无机氮的同化开始于从C新陈代谢产生的碳化合物，而异柠檬酸脱氢酶是连接C-N代谢关键的酶，它催化异柠檬酸氧化脱羧形成α-酮戊二酸（2-OG）的可逆反应。
索莱宝（Solarbio）线粒体异柠檬酸脱氢酶（ICDHm）活性检测试剂盒说明书
线粒体异柠檬酸脱氢酶（ICDHm ）活性检测试剂盒说明书微量法货号: BC2165规格: 100T/48S 产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称规格保存条件提取液一液体60 mL×1瓶4℃保存提取液二液体600 μL×2支-20℃保存提取液三液体40 mL×1瓶4℃保存试剂一粉剂×1瓶4℃保存试剂二粉剂×1瓶常温保存试剂三液体10 mL×1瓶4℃保存试剂四粉剂×2支-20℃保存试剂五液体5 mL×1瓶常温保存试剂六液体15 mL×1瓶常温保存标准品粉剂×1支4℃保存溶液的配制：1、提取液二：易挥发试剂，用完后盖紧盖儿后及时放回-20℃保存；2、试剂一：临用前加入5 mL 试剂三，充分溶解待用；3、试剂二：临用前加入5 mL 试剂三，充分溶解待用；4、试剂四：临用前加入0.375 mL 双蒸水，充分溶解待用；5、标准品：10 mg α-酮戊二酸。
临用前加入684 μL 蒸馏水，配成100 μmol/m L 标准液；6、工作液的配制：临用前根据用量将试剂一、试剂二按1:1比例混合，现配现用。
产品说明：线粒体异柠檬酸脱氢酶（isocitrate dehydrogenase ，ICDHm ），广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞的线粒体中，与线粒体基因表达及线粒体其他的功能有关。
异柠檬酸脱氢酶在生物体内有两种存在形式，以NAD 为辅酶的NAD-依赖型异柠檬酸脱氢酶，和以NADP 为辅酶的NADP-依赖型异柠檬酸脱氢酶。
异柠檬酸脱氢酶的主要功能，是在体内三羧酸循环中，催化异柠檬酸生成α-酮戊二酸，将NAD 还原成NADH ，通过测定α-酮戊二酸的生成量，可以计算出线粒体异柠檬酸脱氢酶活力高低。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
分形维数对高级别胶质瘤异柠檬酸脱氢酶-1基因突变状态和Ki-67指数的评估价值
2021年版WHO 中枢神经系统肿瘤分类将高级别胶质瘤（high grade gliomas ，HGG ）定义为异柠檬酸脱氢酶-1（isocitrate dehydrogenase -1，IDH -1）基因突变型Ⅳ级星形细胞瘤和IDH -1野生型胶质母细胞瘤，是一种高度恶性的脑肿瘤［1］，是具有遗传不稳定性和高度浸润性细胞的异质群体，患者常预后不良，死亡率高，中位生存期仅12个月［2］。
IDH -1基因突变被认为在神经胶质瘤发生中起重要作用，与IDH -1野生型相比，IDH -1突变型患者预后更好且生存期更长；因此，IDH -1状态可作为临床预后评估指标［3-4］。
Ki -67指数可评估肿瘤的增殖能力和恶性程度，已广DOI ：10.3969/j.issn.1672-0512.2024.02.001［基金项目］ 国家自然科学基金面上项目（82071872）。
［通信作者］ 周俊林，Email ：******************.cn 。
分形维数对高级别胶质瘤异柠檬酸脱氢酶-1基因突变状态和Ki-67指数的评估价值席华泽，周俊林兰州大学第二医院放射科/甘肃省医学影像重点实验室/医学影像人工智能甘肃省国际科技合作基地，甘肃 兰州 730000［摘要］ 目的：探讨分形维数（FD ）评估高级别胶质瘤（HGG ）异柠檬酸脱氢酶-1（IDH -1）基因突变状态和肿瘤细胞的增殖活跃程度的价值。
方法：收集经病理证实为HGG 并测定IDH -1突变状态和Ki -67指数的患者75例，其中，IDH -1野生型52例，IDH -1突变型23例。
术前在T 1WI 、T 2WI 、DWI 图像最大层面及其上下2个层面上自动勾画肿瘤边界及瘤周水肿范围，测定外边缘FD 值，取3个层面的平均值为测定值。
比较IDH -1突变型和野生型组间FD 值的差异；使用ROC 曲线分析不同FD 值对评估IDH -1突变的效能；使用logistic 回归分析评估FD 是否为IDH -1突变的独立危险因素；使用Pearson 相关分析评估不同FD 值与Ki -67指数之间的关系。
胶质瘤异柠檬酸脱氢酶-1基因型诊断进展
胶质瘤异柠檬酸脱氢酶-1基因型诊断进展胶质瘤是最常见的中枢神经系统肿瘤，约占颅脑肿瘤的50%-60%，在WHOⅡ-Ⅲ级胶质瘤（包括星形细胞瘤和少突胶质细胞瘤）的共同检测中，异柠檬酸脱氢酶-1（IDH1）突变率在70%以上。
在胶质母细胞瘤患者中，IDH1突变在继发性肿瘤中的发生率为70%-80%，而在原发性肿瘤中发生率较低，仅不到10%。
WHOI级毛细胞型星形细胞瘤中没有检测到任何IDH1突变，间接提示这些肿瘤可能通过不同的机制发展而来。
最近的基因组研究表明IDH1基因突变胶质瘤显示出更好的临床预后。
突变的IDH1诱导2-羟基戊二酸（2-HG）异常积累从而影响表观遗传学和肿瘤发生。
IDH1突变意味着胶质瘤的不同治疗策略。
因此，临床上识别IDH1突变对胶质瘤的治疗具有重要意义。
笔者就胶质瘤IDH1基因型诊断研究进展予以综述。
1.DNA测序、免疫组化目前突变检测多采用对聚合酶链反应（PCR）产物进行DNA测序直接检测，或采用特异性等位基因探针进行定量PCR，可以检测出很大比例的突变。
免疫组化染色和测序技术已广泛应用于术后IDH1突变的检测。
Agarwal等研究了免疫组化及测序检测的50个胶质瘤标本冷冻组织中IDH1突变（第4外显子密码子132）的一致性。
免疫组化使用IDH1-R132H突变特异性抗体（DIA-H09），发现两种方法有88%的一致性。
免疫组化检测到30个IDH1-R132H突变，测序检测到24个IDH1-R132H突变。
免疫组化是一种更好的方法，在6个不同的结果中，重复测序3个样本没有检测到任何突变，另外3个样本有R132L突变。
相比之下，免疫组化检测的突变样本中，约45%的肿瘤细胞不同部位的免疫染色存在差异。
2.磁共振波谱成像（MRS）IDH1/2突变的肿瘤细胞会积累IDH突变代谢产物2-HG，术前无创检测2-HG提示肿瘤的IDH1/2突变，有助于制定手术计划。
因此，MRS被认为是一种有价值的技术，有研究表明MRS能够检出2-HG的存在，但是研究所使用的技术并不能在临床中常规应用。
软骨肿瘤异柠檬酸脱氢酶基因突变的研究进展
Chin J Bone Joint Surg，Feb.2021，Vol.14，No.2《中华骨与关节外科杂志》2021年2月第14卷第2期软骨肿瘤异柠檬酸脱氢酶基因突变的研究进展王睿峰郭卫*（北京大学人民医院骨肿瘤科，北京100044）【摘要】软骨肿瘤是常见的原发性骨肿瘤，根据频发或特异的驱动基因变异可以对软骨肿瘤进行分子分型，从而更精准地指导临床诊疗。
异柠檬酸脱氢酶（IDH）是一类代谢酶家族，广泛参与糖代谢、氨基酸代谢和脂类代谢过程。
IDH1/IDH2突变后的代谢产物能够导致基因过甲基化和组蛋白修饰改变，进而诱发肿瘤。
既往研究显示，良性和恶性软骨肿瘤中均存在一定比例的IDH1/IDH2突变，突变率约为51.4%，其中最常见的突变类型是IDH1R132C，其他常见突变包括IDH1R132G、IDH1R132H、IDH2R172G等。
目前，IDH1/IDH2突变与软骨肿瘤预后之间的关系仍有待进一步研究。
IDH突变靶向治疗可能是软骨肉瘤的新型治疗方法，多个IDH1/IDH2突变抑制剂正在进行Ⅰ/Ⅱ期临床试验中。
本文旨在介绍近年来IDH基因突变与软骨肿瘤间关系的研究进展。
【关键词】软骨肿瘤；异柠檬酸脱氢酶；基因突变；靶向治疗Research progress of isocitrate dehydrogenase(IDH)genetic mutations in cartilage tumorsWANG Ruifeng,GUO Wei*(Musculoskeletal Tumor Center,Peking University People's Hospital,Beijing100044,China)【Abstract】Cartilage tumor is a kind of common primary bone tumor.Cartilage tumors can be classified in molecular level ac⁃cording to frequent or recurrent mutations in driver genes,which can expedite development of the diagnostic and therapeutic strategies.Isocitrate dehydrogenase(IDH)is a metabolic enzyme family extensively involved in glucose,amino acid and lipid metabolism.Mutated IDH1/IDH2can lead to gene hypermethylation and histone modification,which can further lead to onco⁃genesis.Recent researches indicated that mutation rates of IDH1/IDH2in benign and malignant cartilage tumors were51.4%.Most common mutation was IDH1R132C,followed by IDH1R132G、IDH1R132H、IDH2R172G.The relationship between cartilage tumors and IDH1/IDH2genetic mutations requires further investigation.IDH mutations targeted therapy may be a new treatment for chondrosarcoma.Several IDH1/IDH2mutation inhibitors are in phase I/II clinical trials.The purpose of this article is to report the research progress of the relationship between IDH genetic mutations and cartilage tumors.【Key words】Cartilage Tumors;Isocitrate Dehydrogenase;Genetic Mutation;Targeted Therapy细胞的恶性转化是基因突变、表观遗传学改变、转录后异常等一系列事件所引起的复杂而多层次的过程。
idh异柠檬酸脱氢酶
IDH（异柠檬酸脱氢酶）是一类存在于多种生物体内的酶，它们在细胞的代谢过程中扮演着重要角色，尤其是在三羧酸循环（TCA循环，又称克雷布斯循环）中。
IDH有三种亚型：IDH1、IDH2和IDH3，它们分别位于细胞质、线粒体和线粒体中。
IDH的主要功能是催化异柠檬酸（isocitrate）转化为α-酮戊二酸（α-ketoglutarate，α-KG），并在此过程中还原NADP+至NADPH。
这个反应对于维持细胞内的氧化还原平衡以及合成脂肪酸、胆固醇和核酸等生物大分子是必不可少的。
在某些病理状态下，如急性髓细胞性白血病（AML）和某些脑肿瘤中，IDH的基因可能发生突变，导致酶的催化活性改变。
突变的IDH酶失去正常的催化功能，不能有效地将异柠檬酸转化为α-KG，反而获得了一种异常的催化活性，能够将α-KG还原成2-羟基戊二酸（2-hydroxyglutarate，2-HG）。
2-HG是一种致癌代谢物，能够抑制α-KG依赖性的多种酶，包括某些去甲基化酶和组蛋白修饰酶，从而导致表观遗传调控的改变和肿瘤的形成。
针对IDH突变的靶向治疗策略已经开发出来，例如IDH1抑制剂ivosidenib（商品名TIBSOVO）和IDH2抑制剂enasidenib（商品名IDHIFA）。
这些药物能够选择性抑制突变的IDH酶活性，减少2-HG的产生，恢复正常的细胞代谢和抑制肿瘤生长。
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异柠檬酸脱氢酶
生物科学101 陈伟
学号：201001220231
摘要：异柠檬酸脱氢酶在三羧酸循环中将异柠檬酸转化为α-酮戊二酸。
对生物
的生物体的能量代谢、生物合成以及抗氧化胁迫起重要作用.
关键词：异柠檬酸脱氢酶，三羧酸循环，限速酶
一、简介
异柠檬酸脱氢酶(isocit rate dehydrogenase , IDH) 在三羧酸( TCA) 循环中催化异柠檬酸生成α-酮戊二酸, 将NAD+ 或NADP + 还原成NADH 或NADPH. 根据空间结构特点, NADP-依赖性IDH 可分为同源二聚体IDH 和单体IDH , 它们对生物体的能量代谢、生物合成以及抗氧化胁迫起重要作用. 当碳源贫乏时, NADP-依赖性IDH 的可逆磷酸化对TCA 循环和乙醛酸旁路碳通量(carbon flux) 的分配起关键性调控作用. 因此目前IDH 是研究蛋白质的结构与功能关系、酶的催化与调节机制、蛋白质功能进化的最好模型之一.
异柠檬酸脱氢酶在生物体内有两种形式，即以NAD为电子受体的NAD-依赖型异柠檬酸脱氢酶和以NADP为电子受体的NADP-依赖型异柠檬酸脱氢酶广泛存在于真核生物各个细胞器（如叶绿体、线粒体、过氧化物酶体以及胞质）和原核细胞中，并表现出高活性，但它是一个小分子蛋白，不具有别构酶的性质，没有明显的调节作用，在真核生物中主要不是用于产能，而是在其它代谢中发挥作用。
NAD-IDH 则普遍被认为仅仅存在于真核生物线粒体中，但由于在嗜酸硫细菌中也发现了NAD-IDH，因此它的分布也变得非常广泛。
真核生物中的NAD-IDH 主要参与三羧酸循环，被认为是三羧酸循环的限速酶，负责催化异柠檬酸氧化脱羧成α-酮戊二酸，并将氧化型NAD还原成NADH.尽管真核生物NAD-IDH 是一个线粒体酶，但其基因却存在于细胞核染色体上，因此它是一个核编码的线粒体酶N2O。
由于三羧酸循环在能量代谢中的重要作用，近年来国内外对其开展了大量深入的研究，包括酶的结构、酶学性质、基因克隆、蛋白的组装与转运、功能等各个方面，使人们对NAD-IDH 有了更多新的了解。
二、性质
①现已从多种生物中分离纯化了NAD-IDH 酶，并分析了酶的动力学性质，认为NAD-IDH 是一个别构酶，与异柠檬酸的关系呈S形曲线，而与NAD的关系则呈双曲线；NADH是竞争性抑制剂，NADPH 是非竞争性抑制剂，Mg2+、Mn2+都是激活剂。
尽管不同来源的NAD-IDH 普遍表现这些酶学性质，但通过对真菌、高等动植物以及人NAD-IDH 的研究，发现影响酶活性的因素在不同物种中存在非常明显的差异，使NAD-IDH 的酶学性质变得非常复杂。
哺乳动物的NAD-IDH 能够被钙离子激活，而在无脊椎动物、植物、酵母中不存在这种现象；研究者推测在哺乳动物NAD-IDH
的每个四聚体上可能有一个钙离子结合位点，但是将哺乳动物NAD-IDH 亚基的序列与酵母进行序列同源性比较后，并没有发现明显不同，也没有发现哺乳动物NAD-IDH 与其它钙结合蛋白存在明显的相似性，因此钙离子对哺乳动物NAD-IDH 活性影响的分子机理并不很清楚。
②腺苷酸等因子对酶活的影响也有很大差别。
在酵母中，AMP、ADP 是NAD-IDH 的激活剂；但在豌豆中，AMP、ADP、ATP对酶活都没有任何正的或负的影响；在马铃薯中，AMP、ADP、ATP对酶活反而表现出一定程度的抑制作用；在哺乳
动物中，这个酶受ADP、ATP 浓度比的调控。
③Huang等发现Fe2+对猪NAD-IDH的酶活性产生影响，并在体外亲和切断亚基片段。
在有氧与抗坏血酸存在的情况下，Fe2+能与猪NAD-IDHα亚基特异性结合，导致α亚基被切割成两个肽段而使酶完全失活；而且发现这种亲和切断仅仅发生在有活性的NAD-IDH上，如果用浓度为6mol/l的尿素使酶变性，Fe2+将不再把酶切割成两个片段，因此认为这种特异性切断与酶的结构有关。
实验也发现这种亲和切断受Mn2+保护，但不受NAD、NADP等保护，因此认为是由于Mn2+与Fe2+竞争同一位点所致。
在有异柠檬酸和氧存在的情况下，会促进Fe2+引起酶失活，但不会导致酶的亲和切断，表明在异柠檬酸存在下Fe2+离子导致失活另有原因，研究者认为可能是由于半胱氨酸氧化所致。
三、结构
真菌、细菌、高等动植物以及人NAD-IDH,的酶学性质表现明显差异，原因是其亚基组成在不同物种中也有很大差异。
现已从真菌、细菌、植物、动物等多个物种中实现了编码NAD-IDH基因的全长cDNA克隆，并在各物种间、同一物种各亚基间以及同一物种不同品种间进行了序列同源性比较。
四、功能与应用
随着NAD-IDH酶学结构、性质和基因克隆方面研究的深入，在生物学功能方面也开展了大量的研究，认为NAD-IDH是一个多功能酶，参与以下生物代谢途径。
I三羧酸循环中的限速酶
在真核生物中，NAD-IDH是三羧酸循环中的重要限速酶，催化异柠檬酸氧化脱羧成α-酮戊二酸并生成NADH等,在实验中发现缺失NAD-IDH活性的酵母菌株不能利用乙酸为碳源，而且在乳酸或者甘油为碳源的培养基上，生长速度也比野生型的慢很多，这个生长表型说明NAD-IDH确实在三羧酸循环中起着重要的作用。
三羧酸循环作为能量代谢的重要途径，对生物体的生命活动起着重要的作用，能够提供远比糖酵解大得多的能量；而且不仅仅是糖代谢的重要途径，也是脂质、蛋白质和核酸代谢最终氧化成二氧化碳和水的重要途径。
由于NAD-IDH是三羧酸循环的限速酶，因此NAD-IDH的活性对生物体的整个生命代谢都有很大影响。
II在氮代谢中的作用
烟草NAD-IDH的研究表明，NAD-IDH可能在氮代谢中起着重要作用。
Lancien 等发现烟草经短期的氮饥饿后重新补给氮源时，编码NAD-IDH 基因的转录水平提高了，但是并没有发现表达的蛋白量出现增多，推测转录水平的提高可能是由于NAD-IDH催化异柠檬酸生成α-酮戊二酸，而α-酮戊二酸与谷氨酸合成有关；也
有可能是由于氮源的吸收需要三羧酸循环来提供能量。
然而在衣藻中的研究并没有发现NAD-IDH 对氮代谢存在明显影响。
III与线粒体基因的表达及线粒体的其它功能有关
由于在有些酵母中发现某些线粒体基因mRNA的5'-UTR能与NAD-IDH结合，因此推测这种结合可能在调节线粒体基因的翻译中起着重要作用。
Jong等用脉冲追踪标记蛋白的方法发现这种结合确实导致了线粒体基因翻译产物增加2-3倍，但是这些新合成的蛋白与野生型蛋白相比较更不稳定，降解速度提高了2-3倍，因此研究者认为NAD-IDH与线粒体基因mRNA结合后可能导致线粒体基因mRNA 进行了不正确的翻译。
五、结语
IDH 家族蛋白结构保守、功能多元, 在新陈代谢中起重要调控作用, 因此它们是蛋白质功能演化、线粒体起源、细胞凋亡以及药物开发等研究的最佳模型之一. 目前对该酶的认识已比较深入,但依然有很多未解之谜, 如真核生物IDH 的调节方式、植物IDH 的空间结构、IDH 与细胞凋亡的关系等. 对异柠檬酸脱氢酶结构与功能的全面解读, 将为IDH 在TCA 循环和乙醛酸旁路的起源与进化中的作用提供重要依据.
目前在NAD-IDH研究方面已经取得了很大进展。
从已有的成果来看，已经肯定了NAD-IDH 是三羧酸循环中的一个重要限速酶，而且也发现了NAD-IDH 还可能参与生物体其它生命活动，如线粒体基因的表达、氮的代谢等。
由于线粒体是真核生物重要的细胞器，因此其结构与功能的阐明对于线粒体的发生、线粒体的生命功能、生物能量代谢等领域的研究具有重要帮助作用。
但在NAD-IDH 很多领域研究仍很不深入，如植物NAD-IDH 的酶学结构、相关功能的分子机理等。
随着生物技术的发展，对NAD-IDH 的结构与功能必将有更深入的了解，将使人们清楚地了解NAD-IDH 是否参与植物的重要生命现象———细胞质雄性不育，进而为阐明细胞质雄性不育分子机理提供重要基础.
六、参考文献
1、陈海,陈喜文,陈德富 NAD-依赖型异柠檬酸脱氢酶的结构和功能研究进展
（南开大学生物化学与分子生物学系，天津300071）
2、朱国萍,黄恩启,赵军 NADP-异柠檬酸脱氢酶的结构与功能(安徽师范大学生物大分子进化重点实验室, 安徽芜湖241000)
3、李晓军，董亮，郭继强，赵淑娟,赵长新不同代数啤酒酵母对胞内代谢关键酶活性的影响（辽宁省发酵工程重点实验室，大连工业大学生物与食品工程学院，辽宁大连116034）
4、李志君,史锋,廖祥儒酿酒酵母线粒体NADH-激酶功能相关表型研究( 1. 食品科学与技术国家重点实验室, 江南大学, 江苏无锡214122; 2. 江南大学工业生物技术教育部重点实验室, 江苏无锡214122)
5、王冬群, 李太武, 苏秀榕三种蛏不同组织同工酶的比较分析( 宁波大学生命科学
与生物工程学院, 浙江宁波315211)
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