植物组培复习资料

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植物组织培养考试复习题植物组织培养绪论P1第一章植物组织培养的基本原理P3第二章植物组织培养的基本原理P6第三章植物器官和组织培养P口第四章胚胎培养及离体授粉P16第五章花药和花粉培养P20第六章植物细胞培养P24第八章原生质体培养P27第九章植物离体繁殖P30第十章无病毒苗木培育P33植物组织培养基本操作P351绪论植物组织培养的概念植物组织培养是在无菌和人工控制的环境条件下,利用适当的培养基,对离体的植物器官、由于培养的植物材料已脱离母体,乂称为植物离体培养(Plant culture in vitro)o 广义:对植物的器官、组织、细胞及原生质体进行离体培养技术植物组织培养狭义:对植物的组织(分生组织、表皮组织、薄壁组织等)及培养产生的愈伤组织进行离体培养。

1.无菌:使培养器皿、器械、培养基和培养材料等处于无真菌、细菌、病毒等微生物的状态,以保证培养材料在培养器1111中正常生长和发育。

2.人工控制的环境条件:对光照、温度、湿度、气体等条件进行人工控制,以满足植物培养材料在离体条件下的正常生长和发育。

3.外植体:由活体(in vivo)植物体上提取下來的,接种在培养基上的无菌细胞、组织、器官等。

(植物组织培养中,使用的各种器官、组织和细胞统称为外植体。

)4.愈伤组织:外植体因受伤或在离体培养时,其未分化的细胞和已分化的细胞进行活跃的分裂增殖而形成的一种无特定结构和功能的组织。

(在人工培养基上由外植体上形成的一团无序生长状态的薄壁细胞。

)植物组织培养的特点植物组织培养的主要特点是采用微生物学的实验手段来操作植物离体的器官、组织和细胞。

具体特点表现在:1)组织培养的整个过程都是在无菌条件下进行的,外植体、培养基、接种环境都须经过无菌处理。

2)组织培养在多数情况下是利用成分完全确定的人工培养基进行的, 除少数特殊情况(进行营养缺陷型突变细胞的筛选)夕卜,素、微量元素、有机物和植物激素,培养基的PH和渗透压也是人为设定的。

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1.植物组织培养按培养对象分为______ 、 _______ 、________ 、 ________ 、________ 等几种类型。

2.一个己停止分裂的成熟细胞转变为分生状态,并形成耒分化的愈伤组织的现象称为n tv3.不同的灭菌剂其灭菌的机理一般不一样,次氯酸钙和次氯酸钠都是利用分解产生 _________ 来杀菌的;升汞是靠 ________ 来达到灭菌日的。

4.去除植物病毒的主耍方法是 _____ 和_______ 两种方法,当把二者结合起來脱毒效果最好5.在通过微茎尖培养脱毒时,外植体的大小应以成苗率和脱毒率综合确定,一般以 __________ mm、带 ________ 个叶原基为好。

6.White培养基________ 浓度低,适合生根培养。

7.一个已停止分裂的成熟细胞转变为_________ 状态,并形成_________ 的现象称为“脱分化”。

8.BA/NAA的高低决定了外植体的发育方向,比值低时促进 ________ 的生长,这时_________ 占主导地位;比值高促进_________ 的生长,这时 _________ 占主导地位。

9.进行植物组织培养最基本的前提条件是 _____ 。

1、植物组织培养的理论基础是植物细胞全能性。

2、组织培养实验室必要的设备有超净工作台、高压灭菌器、空调机、夭平、显微镜、蒸饱水发生器等。

3、糖在植物组织培养中是不可缺少的,它不但作为离体组织赖以生长的碳源,而且还能维持培养菇渗透压4、培养基灭菌一般在-108 kPa的压力下,锅内温度达121 °C ,维持20-30 min o5、在离体叶培养中,6・BA和KT利于芽的形成:24D利于愈伤纟FI织的形成6、在离体叶组织脱分化和再分化培养屮,茎和芽的分化主要有4个途径:方•接产生不泄芽、由愈伤组织产工不定芽、胚状体形成、形成球状体或小鳞茎等途径。

7、目前培育无病毒苗最广泛和最重要的一个途径是茎尖培养脱毒。

植物组织培养复习提纲有答案

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植物组织培养复习提纲(仅供参考,关键在于全面复习掌握!)一、主要专业术语细胞全能性:在多细胞生物中每个体细胞的细胞核具有个体发育的全部基因,只要条件许可,都可发育成完整的个体。

脱分化:已经分化的植物器官、组织或细胞,当受到创伤或进行离体(也受到创伤)培养时,已停止分裂的细胞,又重新恢复分裂,细胞改变原有的分化状态,失去原有结构和功能,成为具有未分化特性的细胞。

愈伤组织:指切取植物体的一部分,置于含有生长素和细胞分裂素的培养液中培养,诱导产生的无定形的组织团块。

人工种子:指植物离体培养中产生的胚状体(包括体细胞胚和性细胞胚),包裹在含有养分和具有保护功能的物质中,并在适宜条件下能够发芽出苗的颗粒体。

植物快速繁殖:采取培养基配制,材料灭菌,无菌培养,幼苗转移到苗床,成苗转至大田栽种五步走的繁殖培养方式。

单倍体:体细胞中含有本物种配子染色体数(1n)的个体二倍体:体细胞中含有两个染色体组的生物个体胚乳培养:将胚乳从母体上分离出来,放在无菌的人工环境条件下使其进一步生长发育形成幼苗的技术。

连续培养:连续培养又叫开放培养,是相对分批培养或密闭培养而言的。

是采用有效的措施让微生物在某特定的环境中保持旺盛生长状态的培养方法。

胚状体:离体培养条件下,没有经过受精过程,但是经过了胚胎发育过程所形成的胚状类似物看护培养:将亲本愈伤组织或高密度的悬浮细胞同低密度细胞一起培养,以促进低密度细胞生长、分裂的培养方法。

植物种质保存:在适宜环境条件下贮存种质基因载体,使蔬菜种质保持生命力和遗传性的技术。

二、主要知识点1、植物组织培养成功的关键是什么?1.无毒无菌的环境2.生长素或生长素类似物3.通常用固体培养基(琼脂)4.先进行植物组织或器官的脱分化5.长出根来后要保证根呼吸所需氧气2、植物外植体的表面消毒剂种类1、漂白粉(1%~10%的滤液)2、次氯酸钠溶液(0.5%~10%)3、氯化汞(0.1%~1%)4、酒精(70%~75%)5、过氧化氢(3%~10%)6、新洁尔灭等。

植物组织培养复习重点

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组培复习材料一、名词解释1、培养基:是离体植物(外植体)赖以生长、分化的基础,是根据植物的需求,人工配制的含有各种营养成分的营养液。

2、液体培养:把细胞或生物体的一部分,置于液体培养基中使其发育,并不断振荡,使之均匀地在悬浊液中进行培养的一种方法。

3、种子培养:是成熟种子和发育不全的未成熟种子的无菌培养。

4、叶培养:从母体植株上将叶组织(包括叶原基在内)切下,放在无菌的人工条件下使其生长发育形成植株的技术。

5、热处理脱毒:在一定范围内,用高温处理可部分或完全钝化植物组织中的某些病毒而不伤害或很少伤害植物本身的脱毒方法。

6、花药培养:是把花粉发育到一定阶段的花药接种到培养基上,来改变花粉的发育程序,使其分裂形成细胞团,进而分化成杯状体,然后再生植株,或形成愈伤组织,由愈伤组织再分化成植株。

7、连续培养:是利用特别的培养容器进行大规模细胞培养的一种培养方式。

(培养过程中,不断注入新鲜培养基,排掉等体积用过的培养基,或者抽取悬浮培养物,使培养物的营养物质得到不断补充,从而保持其恒定体积的培养。

——8、分批培养:指把细胞分散在一定容积的培养基中进行培养,建立单细胞培养物的培养方式。

(细胞生长在固定体积的培养基中,当主要营养物质耗尽时,细胞的分裂和生长即停止。

)二、简答题1、MS培养基特点。

答:MS培养基是Murashige和Skoog于1962年为烟草细胞培养设计的,其特点是无机盐和离子浓度较高,是较稳定的离子平衡溶液,具有高含量的氮、钾,尤其是硝酸盐用量大,还有一定数量的铵盐,其养分的数量和比例合适,不需要添加更多的有机附加物,就能满足植物组织对矿质营养的要求,加速愈伤组织和培养物的生长,当培养物就不转移时仍可维持其生存。

目前应用最广泛。

2、植物组培生产特点。

答:①和传统的生产方式相比,具有不占耕地、生产不受季节限制而且能够整年连续进行、不受灾害性天气和病虫害影响的特点;②具有人为可控性,可采用更适合于植物生长的“培养基”代替土壤提供养分和生长调节物质;③具有很高的生产效率。

植物组织培养复习资料

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植物组织培养复习资料一、名词解释。

(每个3分,共24分)1、植物组织培养:在无菌和人工控制的环境条件下,利用适当的培养基,对离体的植物器官、组织、细胞及原生质体进行培养,使其再生细胞或发育成完整植株的技术。

又称植物离体培养。

2、细胞的全能性:指植物体的任何一个有完整细胞核的活细胞都具有该植物的全套遗传基因和产生完整植株的潜在能力。

3、脱分化:离体培养条件下生长的器官、组织、细胞,经过细胞分裂或不分裂而恢复分生状态,形成无组织结构的细胞团或愈伤组织或成为未分化细胞特性的细胞过程。

4、外植体:从活体植物上切取下来,用以进行离体培养的那部分组织或器官。

5、单细胞培养:对分离的到的单个细胞进行培养,诱导其分裂增殖,形成细胞团,再通过细胞分化形成芽、根等器官或胚状体,直至长成完整植株的技术。

6、胚状体:亦称体细胞胚。

指在组培过程中,由植物体细胞所形成的类似于合子胚的结构。

它具有根、茎结构,能够一次性形成再生植株。

7、平板培养:是将悬浮培养的细胞接种到未固化的薄层培养基中,使其与培养基充分配合,再倒入培养皿中进行培养的方法。

8、人工种子:指植物离体培养中产生的胚状体或不定芽,被包裹在含有养分和保护功能的人工胚乳和人工种皮中,从而形成能发芽出苗的颗粒状。

9、次生代谢产物:指植物生长发育正常运行的非必需的小分子有机化合物,其产生和分布通常有种属、器官、组织以及生长发育时期的特异性。

10、再分化:细胞经过脱分化形成的愈伤组织再次分化,进行器官形成,产丛生芽或胚状体,形成完整植株的过程。

11、无病毒苗:指不含该种植物主要危害病毒的苗木。

二、不定项选择1、培养室里的湿度一般保持在____C_____.A 30~40%;B 50~60%;C 70~80%;D 80~90%2. 下列不属于生长素类的植物激素是____A D____。

A Kt;B IAA;C NAA;D ZT3. 影响培养基凝固程度因素有_______A B C D__.A 琼脂的质量好坏;B 高压灭菌的时间;C 高压灭菌的温度;D 培养基的PH4. 活性炭在组织培养中的作用有_______ABC_。

植物组织培养期末复习资料

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植物组织培养期末复习资料一、名词解释1.植物组织培养:是指在无菌和人工控制的环境条件下,利用适当的培养基,对离体的植物器官、组织、细胞及原生质体进行培养,使其再生细胞或完整植株的技术。

又称为植物离体培养、微型培养、试管培养。

2.愈伤组织:是指外植体因受伤或在离体培养时,其未分化的细胞和已分化的细胞进行活跃的分裂增殖而形成的一种无特定结构和功能的组织。

3.细胞全能性:指植物的每一个具有完整细胞核的活细胞,具有该植株的全部遗传信息,在一定条件下发育成完整植株的潜在能力。

4.胚状体:指在植物组织培养过程中,由细胞诱导分化形成的胚状结构,其功能类似于合子胚,可进一步再生成一个完整植株。

5.器官离体培养:是指对植物某一器官的全部或部分或器官原基进行离体培养的技术。

6.胚胎培养:指对植物的胚、子房、胚珠和胚乳进行离体培养,使其发育成完整植株的技术。

7.花药培养:是将花粉发育至一定阶段的花药接种到人工培养基上进行培养,以形成花粉胚或愈伤组织进而分化成植株的技术。

8.花粉培养:是将花粉从花药中分离出来进行离体培养的过程。

9.细胞培养:是指对植物器官或愈伤组织上分离出的单细胞(或小细胞团)进行培养,形成单细胞无性系或再生植株的技术。

10.原生质体培养:在人工控制条件下,将原生质体进行培养,使其形成完整植株的技术11.原生质体融合:也称体细胞杂交,指通过物理化学方法使原生质体融合,经培养获得具有双亲全部或部分遗传物质的后代的方法12.植板率:已形成细胞团的百分数(即每100个铺在平板上的细胞中有多少个能长出细胞团)13.脱分化〔dedifferentiation〕:指在离体培养条件下,已分化的细胞、组织和器官在人工诱导条件下,失去原来的结构和功能而恢复分生能力,回复到分生组织状态的过程。

(掌握)14.再分化(redifferentiation):指在离体培养条件下,经脱分化的组织或细胞在一定的培养条件下可转变为各种不同的细胞类型,形成完整植株的过程。

组培复习资料

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植物组织培养复习资料(开卷考试)第一章导论【本章知识点】1.组织培养的含义2.组织培养的理论基础(细胞全能性)3.植物组织培养的类型及特点4.植物组培在农业生产上的应用一.组织培养的含义:用无菌的方法使植物离体器官、组织和细胞在人为提供的条件下生长和发育的所有的培养技术的总称,也称为离体培养或试管培养。

二、植物组培的理论基础1、植物细胞全能性:植物体的每一个具有完整细胞核的细胞都具有该物种全部的遗传物质,在一定条件下具有发育成完整植物体的潜在能力。

2、细胞分化:导致细胞形成不同结构、引起功能改变或者潜在发育方式改变的过程。

3、脱分化:将以分化的不分裂的静止细胞放在培养基上培养,细胞重新进入分裂状态。

一个成熟的细胞转化为分生状态的过程成为脱分化。

(形成愈伤组织)4、再分化:经脱分化形成的愈伤组织在一定培养条件下可转化为不同的细胞类型,形成完整植株的过程。

5、外植体:由活体植物上切去下来的,用于植物组织培养的各种接种材料。

包括各种器官、组织、细胞和原生质体等。

6、愈伤组织:外植体离体培养下经脱分化产生的无特定结构和功能的薄壁细胞。

三、组织培养的类型及特点【类型】1.按培养材料分:愈伤组织培养、器官培养、细胞培养、原生质体培养等2.按培养器官分:叶培养、跟培养、花药培养等3.按培养成分分:固体培养、液体培养(也叫液体震荡培养)4.按是否有需要光分:光培养、暗培养5.按培养方法分:平板培养、微室培养、悬浮培养等6.按培养过程分:初代培养(外植体的最初培养)、继代培养(培养物在培养基上生长一段时间以后由于营养物枯竭,水分散失及代谢产物的积累,必须转移到新鲜的培养基上培养,这种反复多次移植的组织培养称为继代培养)【特点】1.培养条件人为可控2.培养生长周期短,繁殖效率高3.管理方便,便于工厂化生产和自动化控制四、植物组培在农业生产上的应用1.用于种苗的快速无性繁殖2.用于种苗的脱毒(EG马铃薯)3. 用于某些植物的远缘杂交4.用于突变育种5.用于单配体育种6.种质保存7.基因工程8.植物性药物和生物制品的生产第二章植物组培实验室的构建和基本操作技术【本章知识点】 1.植物组培实验室结构设计及主要实验设备2.常用培养基MS 、B5、White 、N6、KM-8P 等3.母液的配制方法4.培养基成分及其配制、分装和高压灭菌过程5.有关灭菌、接种、培养、驯化和移栽的相关技术6.接种的无菌操作程序要点7.试管苗的特点及其不能成活的原因8.试管苗的驯化和移栽应注意的问题一、植物组培实验室构建和主要实验设备【实验室构建】【仪器设备与用具】1、 仪器设备与器皿用具:超净工作台、空调、除湿机或加湿机、恒温培养箱、高压灭菌锅、冰箱、天平、显微镜、水浴锅、摇床与转床、蒸馏水发生器、酸度计、离心机等2、 各类玻璃器皿:培养器皿(试管、三角瓶、培养皿、圆形培养瓶或果酱瓶等)分注器、离心管、刻度移液管、细菌过滤器、实验器皿(量筒、烧杯、容量瓶、试剂瓶、塑料瓶、酒精灯等)3、 器械用具:镊子、尖头镊子、枪形镊子、剪刀、解剖刀、接种针、钻孔器等。

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1、植物组织培养:在无菌条件下,对植物组织,器官,细胞原生质体等离体活材料进行培养促使其生长发育,并再生成完整植株的过程。

2、外植体:植物组织培养过程中从活体植株上切去下来的用于离体培养的一切材料。

(如器官、组织、细胞、原生质体、种子等)3、愈伤组织:在离体培养的条件下,经过植物细胞脱分化和不断增殖所形成的无特定结构的细胞团或组织。

4、玻璃化现象:在组织培养过程中,培养物叶片或嫩梢呈透明或半透明的水渍状现象。

5、脱分化:一个成熟细胞转化为分生状态并形成为分化的愈伤组织的现象6、再分化:指脱分化形成的愈伤组织细胞在十一的培养条件下,又分化为胚状体,或直接分化出根和芽等器官形成完整植株的过程。

7、细胞的全能性:植物体的每一个生活细胞都具备母体的全套基因,在一定条件下可以发育成完整植株的能力。

8、人工种子:指通过组织培养技术,将植物的体细胞诱导在形态上和生理上均与合子胚相似的体细胞胚,然后将它包埋于有一定营养成分和保护功能的介质中,组成便于播种的类似种子的单位9、植物离体培养:利用植物细胞的全能性,在无菌和人工控制的环境条件下,利用适当的培养基,对离体的植物器官、组织、细胞及原生质体进行培养,使其再生细胞或完整植株的技术。

10、种子败育:是指由于植物自身的原因导致植物胚胎在发育过程中的任何一个阶段死亡或者即使幼胚发育为成熟种子胚、但在常规条件也不能萌发的现象。

11、双极性:表示具有双向极性电平的脉冲信号激素分类:生长素类细胞分裂素赤霉素脱落酸水杨酸植物组织培养{组织培养、器官培养?胚胎培养?细胞培养、原生质体培养}—--次生代谢物的生产、种植创新和品种选育、植物的快速繁殖、无病毒苗木的培育、人工种子的生产、种质资源的离体保存植物组织培养的大致过程是:在无菌条件下,将植物器官或组织(如芽、茎尖、根尖或花药)的一部分切下来,用纤维素酶与果胶酶处理用以去掉细胞壁,使之露出原生质体,然后放在适当的人工培养基上进行培养,这些器官或组织就会进行细胞分裂,形成新的组织。

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1、愈伤组织:原指植物在受伤之后于伤口表面形成的一团薄壁细胞,在组培中则指人工培养基上由外植体长出来的一团无序生长的薄壁细胞。

2、植物细胞全能性:任何具有完整细胞核的植物细胞,都拥有形成一个完整植珠所必须的全部遗传信息和发育成完整植株的能力。

3、胚状体:是指在组织培养中起源于一个非合子细胞,经过胚胎发生和胚胎发育过程形成的具有双极性的胚状结构。

4、体细胞杂交:完全不经过有性过程,只通过体细胞融合制造杂种的方法称为体细胞杂交。

快速繁殖(微繁殖):用组织培养的方法,使植物的部分器官、组织迅速扩大培养,并移到温室或农田繁殖出大量幼苗的繁殖方法。

6、再分化:愈伤组织形成不定芽或不定根或胚状体。

7、原生质体融合(体细胞杂交):就是使分离下来的不同亲本的原生质体,在离体条件下通过诱导发生的质膜融合进而细胞核融合,像性细胞受精作用那样互相融合成一体的现象。

8、脱毒苗:是指不含该种植物的主要危害病毒,即经检测主要病毒在植物内的存在表现阴性反应的苗木。

9、愈伤组织培养:是指将母体植株上的外植体,接种到无菌的培养基上,进行愈伤组织诱导、生长和发育的一门技术。

10、外植体:在植物组织培养过程中,由植物体上切取的根、茎、叶、花、果、种子等器官以及各种组织、细胞或原生质体等统称为外植体。

11、热处理脱毒:利用病毒和植物细胞对高温忍耐性不同,选择适当的高温处理染病植株,使植株体内的病毒部分或全部失活,而植株本身仍然存活。

12、平板培养法:是把单细胞悬浮液与融化的琼脂培养基均匀混合,平铺一薄层在培养基底上的培养方法。

13、消毒:指杀死、消除或充分抑制部分微生物,使之不再发生危害作用。

14、玻璃化现象:在长期的离体培养繁殖时,有些试管苗的嫩茎、叶片呈现半透明水渍状,这种现象称为玻璃化。

15、初代培养基:是指用来第一次接种外植体的培养基。

16、脱分化:一个已停止分裂的成熟细胞转变为分生状态,并形成未分化的愈伤组织的现象。

17、液体培养:指在进行培养时,培养基中不加琼脂等凝固剂,一般需要通过振荡等方法解决培养基的通气情况。

18、细胞全能性:一个细胞能产生一个完整植株的固有能力,或植物细胞具有全部的遗传信息,不论是性细胞还是体细胞,在特定环境下,能进行表达而产生一个独立完整的个体。

19、初代培养:又称外植体培养,由植物器官上取下的外植体培养的过程。

20、继代培养:是使再生根的试管苗形成根系,获得完整植株的过程。

21、移栽培养:又叫驯化培养,是将得到的完整植株向温室和大田的土壤进行移植的过程。

22、驯化:提高试管苗对外界环境的适应能力。

23、单倍体育种:即利用植物组织培养技术(如花药离体培养等)诱导产生单倍体植株,再通过某种手段使染色体组加倍(如秋水仙素处理)从而使植物恢复正常染色体数。

24、液体悬浮培养:细胞在培养液中呈悬浮状态生长与增殖的培养技术。

25、花药培养:将成熟或未成熟的花药从母体植株上取下,放在无菌的条件下,使其进一步生长、发育成单倍体细胞或植株的技术。

26、植物组织培养:植物的组织培养广义又叫离体培养,指从植物体分离出符合需要的组织.器官或细胞,原生质体等,通过无菌操作,在人工控制条件下进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。

狭义是指组培指用植物各部分组织,如形成层.薄壁组织.叶肉组织.胚乳等进行培养获得再生植株,也指在培养过程中从各器官上产生愈伤组织的培养,愈伤组织再经过再分化形成再生植物。

27、细胞融合:是在自发或人工诱导下,两个不同基因型的细胞或原生质体融合形成一个杂种细胞37对称融合:父母均未处理,对后代贡献一样。

38不对称融合:父母本在后代中贡献不同,射线处理,化学处理IOA(不影响核的分裂而影响细胞质分裂)39胞质杂种:利用原生质体融合技术,使两种不同来源的核外遗传成分(细胞器)与一个特定的核基因组结合在一起,就形成胞质杂种。

40体细胞杂种和胞质杂种的鉴定方法:形态学,细胞学,分子遗传学。

13人工种子:是指利用细胞的全能性将离体培养所产生的体细胞或具有发育成完整植株能力的分生组织包裹在一层含有营养物质并具有保护功能的外膜内形成在适宜条件下能够发育成完整植株的小颗粒。

14培养基的渗透压;离体培养中培养基渗透压是影响植物细胞脱分化、再分化的重要因素。

培养基渗透压是由培养基中各种物质的总浓度决定的。

培养细胞是通过细胞渗透来吸取营养的,当培养材料和培养基之间处于等渗时,或培养材料的渗透压略低于培养基渗透压时,培养材料才可能汲取养分和水分。

15灭菌:是指用物理或化学的方法,杀死物体表面和孔隙内的一切微生物或生物体,即把所有生命的物质全部杀死。

16褐变:是指外植体在培养中体内的多酚氧化酶被激活,使细胞里的酚类物质氧化成棕褐色的醌类物质,有时使整个培养基变褐,从而抑制其他酶的活性,影响材料的培养。

17、纸桥培养:将培养基中放入滤纸,再将材料置于滤纸上进行培养称为纸桥培养。

18、微尖嫁接:指在人工培养基上培养实生砧木,嫁接无病毒茎尖以培养脱毒苗的技术。

主要程序:无菌砧木培养—茎尖准备—嫁接—嫁接苗培养—移栽。

19 植物细胞全能性:一个生活的植物细胞,只要有完整的膜系统和细胞核,它就会有一整套发育成一个完整植株的遗传基础,在适当的条件下可以通过分裂、分化再生成一个完整的植株。

20 器官培养:植物的根、茎、叶、花器(包括花药、子房)和幼小果实的无菌培养。

21原生质的融合概念:从同一个种或不同种分离得到的原生质体在适当的条件下融合得到细胞核物质和细胞质物质的混和。

22体细胞杂交:完全不经过有性过程,只通过体细胞融合制造杂种的方法称为体细胞杂交。

简答题NAA: 萘乙酸(2,4-D):2,4-二氯苯氧乙酸、6BA(6-苄基嘌呤)BA: 苄氨基腺嘌呤K T: N6-呋喃甲基腺嘌呤IBA:引哆乙酸生长素:IAA IBA NAA 2,4-D 细胞分裂素:KT ZA BA 其他:GA3 ABA1培养基:有MS,Nitsch,Miller,B5和N6。

低浓度的生长素和细胞分裂素相结合,高浓度的蔗糖对花粉的诱导生长有一定作用。

培养基中加入活性炭对提高诱导频率也有一定效果。

2 简述花药培养的操作方法。

采用花药中花粉处于单核中、晚期的花蕾(或幼穗)(2)低温黑暗处理(3)冲洗4小时以上――在无菌室中用70-75%酒精浸泡30S――0.1%升汞表面消毒30-60秒-无菌水冲洗3-5次――无菌滤纸吸干(4)取花药接种到培养基上。

3、花药培养方法:取材地点:大田和温室取材:大多采用单核期的花粉培养,因诱导产生愈伤组织或胚状体的频率较高。

花粉时期的确定:常采用醋酸洋红-碘化钾染色,再压片镜检。

实际操作中常根据花蕾长度、大小与花粉年龄的相关性确定。

预处理:低温、高温或交叉处理4花粉花药培养的意义:1、在单倍体细胞中只有一个染色体组,表现型和基因型一致,一旦发生突变,无论是显性还是隐性,在当代就可表现出来,因此单倍体是体细胞遗传研究和突变育种的理想材料。

2、在品种间杂交育种过程中,通过F1代花药培养得到单倍体后,经染色体加倍立即成为纯合二倍体,从杂交到获得不分离的杂种后代单株只需要2个世代和常规育种相比,显著缩短了育种年限。

5 影响花药培养的因素:1、供体植株的生长条件2、供体植株的年龄3、花粉的发育时期4、花蕾、花药的处理:低温5、供体植株的基因型6、培养基、培养条件及活性碳6花药培养步骤(用改良的NLN培养基):步骤:叶片表面消毒→去除表皮→叶碎片漂浮在含有酶和渗透压稳定剂的溶液中→培育→原生质体沉到培养皿底部→除去酶溶液→将原生质体移入CPW清洗→离心→清洗基质两次→重悬浮于培养基→除去小的个体,用血球计计数→调整到合适的密度重悬浮于培养基。

(1)按配方移取各母液:大量元素母液为200ml,微量元素母液、铁盐母液、有机物母液均为20ml,6-BA激素母液为1ml。

(2)定容:用蒸馏水定容至2L。

(3)称量蔗糖和琼脂:蔗糖50-60g,琼脂14-16g。

(4)培养基熬制:加入蔗糖和琼脂后进行培养液熬制,直至琼脂全部融化。

(5) 调PH值:先用PH计或PH试纸测量后再用0.1MNaOH或HCl调PH值为5.8-6.0。

(6)二次定容:当培养基熬制后总体积少于2L时要定容至2L。

(7)分装并扎瓶口:趁热分装,100ml的三角瓶约装入30-40ml, 35瓶/L。

(8)高压灭菌:及时灭菌,121-123℃条件下保持20-30分钟。

(9)冷却:待接种。

高压湿热灭菌程序⑴培养瓶及培养器械放入高压灭菌锅。

⑵灭菌锅加水至淹没电热丝,封闭高压灭菌锅各出气口,接通电源。

⑶加压至49kPa(0.5MPa),打开排气阀,排冷气至压力为0 kPa。

⑷继续加压至108kPa(1.1mPa-1.2Mpa,即121℃),当压力至108kPa(1.1mPa-1.2Mpa,即121℃)时,稳压在此压力15-20min。

⑸关闭电源,自然冷却至压力为0 kPa,取出培养基和器械冷却,贮存于30℃以下室内。

防止玻璃化措施:1、增加琼脂浓度。

2、提高糖的含量或加入渗透剂,降低培养基中渗透势,减少植物材料可获得的水分。

3、降低培养基中细胞分裂素的含量4、增加光照、控制温度、改善通风换气条件。

幼胚培养方法适宜于幼胚发育时期多为心形胚至鱼雷形胚幼胚剥离是关键的关键基本培养基:MS N6 White等糖的作用:蔗糖是最好的碳源之一,调解渗透压主要作用无机氮以硝酸盐、铵盐的形式存在可以提高钾和钙的浓度氨基酸:谷氨酰胺刺激胚的生长;水解蛋白维生素:促进幼胚的早期发育天然有机物:胚乳看护培养大麦离体胚,在含有同种胚乳的培养基中,对胚的生长促进。

大麦离体胚,在含有异种胚乳的培养基中,对胚的生长促进作用更强。

大麦×黑麦杂交胚,在含有大麦胚乳的培养基中,成苗率提高30-40%。

植物脱毒的意义1、能够有效地保持优良品种的特性2、快速繁殖品种,使优良品种迅速应用3、生产无病毒种苗,防止品种退化4、节约耕地,提高农产品的商品率5、便于运输1、1943年, white提出了植物细胞“全能性”学说,并出版了《植物组织培养手册》,从而使植物组织培养为一门新兴学科。

2、糖在植物组织培养中是不可缺少的,它不但作为离体组织赖以生长的碳源,而且还能维持培养基渗透压。

3、培养基的种类按其态相不同分为固体培养基与液体培养基,其灭菌方法一般采用湿热消毒灭菌方法。

4、愈伤组织形成大致经历诱导期、分裂期和分化期三个时期。

5、无病毒苗的保存分:隔离保存和长期保存两种方法。

6、分离细胞的材料可以是完整植株的各种器官,尤其叶片效果好,也可以选用组织培养物。

7、花粉分离常用的方法有:自然散落、挤压、机械游离。

8、MS、H培养基适合双子叶植物花药培养;B5培养基适合豆科和十字花科花药培养;N6培养基适合禾谷类作物的花药培养。

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