化学发光常见问题集锦_107问1

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11化学发光免疫技术

11化学发光免疫技术

化学发光免疫技术(一)单项选择题(A型题)1、化学发光免疫检测的物质不包括A.甲状腺激素B.生殖激素C.肿瘤标记物D.血清IgG含量E.血清总IgE含量2、常用的HRP发光底物为A.鲁米诺或其衍生物B.AMPPD C.4-MUPD.吖啶酯E.三联吡啶钌3、常用的ALP化学发光底物为A.鲁米诺或其衍生物B.对-羟基苯乙酸C.AMPPDD.吖啶酯E.三联吡啶钌4、电化学发光剂为A.鲁米诺或其衍生物B.对-羟基苯乙酸C.4-MUPD.吖啶酯E.三联吡啶钌5、不需酶催化反应即可发光的发光底物是A.鲁米诺B.吖啶酯C.三联吡啶钌D.鲁米若衍生物E.4-MUP6、4-MUP在ALP催化下生成4-甲基伞琪酮,在激发光作用下发出荧光的波长为A.448nm B.360nm C.525nmD.570nm E.640nm7、电化学发光免疫分析中,电化学反应进行在A.液相中B.固相中C.电极表面上D.气相中E.电磁铁表面8、关于微粒子荧光酶免疫测定检测AFP,下列描述错误的是A.常用的检测方法是双抗体夹心法B.以微珠作用载休包被抗体C.发光底物为AMPPD D.常用的标记酶为碱性磷酸酶E.检测时激发长为360nm9、关于电化学发光免疫分析,下列描述错误的是A.是一种在电极表面由电化学引发的特异性化学发光反应B.包括了电化学反应和光致发光两个过程C.化学发光剂主要是三联吡啶钌[Ru (bpy)3]2+D.检测方法主要有双抗体夹心法.固相抗原竞争法等模式E.以磁性微珠作为分离载体10、化学发光免疫分析的标记物为A.碱性磷酸酶B.三联吡啶钌[Ru (bpy)3]2+C.吖啶酯D.鲁米诺E.鲁米诺衍生物11、参与三联吡啶钌电化学发光过程的物质是A.碱性磷酯酶B.三丙胺C.吖淀酯D.鲁米诺E.HRP12.化学发光免疫分析的分类依据主要是A.按检测所需的时间长短分类B.近所检测的物质类型分类C.按检测反应的体系分类D.按所采用的发光反应体系和标志物不同分类E.按检测反应所采用的分离方法分类13、化学发光酶免疫分析中对鲁米诺和过氧化氢起催化作用的酶是A.ALP B.HRP C.LDHD.ALT E.ACP14、关于电化学发光免疫测定检测血清HCG含量,下列描述错误的是A.常用的检测方法是双抗体夹心法B.常用磁珠分离技术C.标记物是ALP-抗HCG抗体D.B/F分离剂是抗HCG抗体包被的磁颗粒E.发光反应需要三丙胺参与15、用化学发光免疫测定技术中固相抗原竞争法测定CEA,若标本中CEA量越多,则A.形成的固相抗原-标记抗体复合物越少B.形成的固相抗原-标记抗体复合物越多C.待没的椟本抗原-标记抗体复合物越少D.未结合游离的固相抗原越少E.游离的标记抗体越多16、血清总IgE的定是分析不能采用的方法是A.ELISA B.化学发光酶免疫测定C.散射比浊免疫测定D.电化学发光免疫测定E.放射免疫分析17、以ALP为标记的化学发光酶免疫技术测定HBsAg,影响测定结果的情况是A.血清B.肝素钠抗凝血浆C.EDTAD.肝素锂抗凝血浆E.用分离胶分离的血清18、可增强HRP催化鲁米诺氧化反应和延长发光时间,提高发光敏感度的物质是A.萤火虫荧光素酶B.H2O2C.D.4-MUP E.三联吡啶钌19、有关化学发光免疫分析测定血清AFP的描述,正确的是A.标记物是吖啶酯标记抗AFP抗体B.B/F分离采用PR沉淀试剂法C.发光促进剂是萤火虫荧光素酶D.常用采间接法E.化学发光的条件是发光体系呈酸性20、在微粒子荧光酶免疫分析中,作用于荧光底物4-MUP的标记酶是A.ALP B.HRP C.萤火虫荧光素酶D.过氧化氢酶E.葡萄糖氧化酶21、在荧光免疫技术中,应用最广的镧系稀土元素是A.镧B.钐C.铀D.钆E.铽22、发光免疫分析可分为A.3种类型B.4种类型C.5种类型D.6种类型E.7种类型23、目前免疫比浊分析中最常用的方法为A.散射比浊B.速率散射比浊C.分光光度计比色D.免疫透射比浊E.肉眼比浊24、化学发光免疫分析中使用的标记物分为A.3类B.4类C.5类D.6类E.7类25、首先应用速率散射比浊进行免疫测定的是A.SternbergB.MileC.RayleighD.ManciniE.Fahey26、关于化学发光酶免疫技术叙述错误的是A.以过氧化物酶为标记酶B.以三联吡啶钌为发光底物C.加入发光增强剂以提高敏感性D.标记酶也可以是碱性磷酸酶E.固相载体为磁性颗粒27、化学发光免疫测定最常用的检测体系为A.气相B.液相C.固相D.半固相E.气溶胶28、下列不属于化学发光免疫测定的优势的是A.敏感性高于RIAB.精密度和准确度远优于RIAC.试剂稳定.无毒害D.测定时间短E.已发展成自动化测定系统29、电化学发光免疫分析中,最常使用的标记物为A.三联吡啶钌B.三丙胺C.啶酯类D.米诺类E.聚氧乙烷30、时间分辨荧光分析法最为常用的稀土金属是A.钐B.镧C.铽D.铕E.镝31、电化学发光免疫分析中,最常使用的方法为A.直接法B.间接法C.竞争法D.补体参与的结合法E.双抗体夹心法32、免疫自动化检测的首要目的是A.提高检测精密度和工作效率B.减低操作者劳动强度C.自动检测及校对D.减少操作程序E.提高可靠性33、目前时间分辨荧光检测系统最常用的激发光源为A.脉冲氙灯B.脉冲钨灯C.氖灯D.卤素灯E.高压汞灯34、不属于化学发光免疫分析类型的是A.微粒子化学发光免疫分析B.CLEIAC.ECLIAD.TRFIAE.ECLI35、电化学发光免疫分析与其他标记发光免疫分析原理的不同之处在于A.化学发光免疫反应在磁珠表面进行B.化学发光免疫反应在液相中进行C.化学发光免疫反应在容器表面进行D.化学发光免疫反应在电极表面进行E.由电能导致发光36、需通过ALP催化才能产生发光效应的物质是A.吖啶脂类B.三丙胺C.鲁米诺类D.三联吡啶钌E.AMPPD37、测定内分泌激素.肿瘤标志物和治疗性药物浓度方面应用最广泛的新技术为A.散射免疫比浊分析B.时间分辨荧光免疫分析C.速率散射比浊分析D.免疫透射比浊分析E.化学发光免疫分析三、名词解释1、发光免疫技术:是将发光分析和免疫反应相结合而建立的一种新的免疫分析技术。

化学发光试剂无发光值

化学发光试剂无发光值

化学发光试剂无发光值
如果化学发光试剂无发光值,可能存在以下几种可能的原因:1. 贮存不当:化学发光试剂可能需要在特定的温度和湿度条件下存储,如果贮存不当,试剂的性能可能会受到影响,导致无法发光。

2. 过期:化学发光试剂通常有一个使用期限,在过期之后可能会失去发光性能。

3. 实验条件不当:化学发光试剂的发光性能可能受到实验条件的影响,例如pH 值、温度、反应时间等,如果实验条件不正确,试剂可能无法发光。

4. 质量问题:化学发光试剂本身的质量可能存在问题,可能是制备过程中的误差或者是质量控制不严格造成的。

如果遇到化学发光试剂无法发光的情况,可以先检查贮存条件是否符合要求,是否过期以及实验操作是否正确。

如果排除了这些可能的原因,那么有可能是化学发光试剂的质量存在问题,可以尝试更换其他批次的试剂或者与供应商联系进行咨询。

发光常见问题

发光常见问题

操作常见问题
3、THCG需要稀释时的操作方法: 输入样品的SID号 — 样品检 测区—点击【THCG】—点击【稀释】(左下角)--点击 【THCG】--选中【稀释倍数】--点击【未稀释】--点击【关 闭稀释】--点击【开始】【确定】。色的深浅来决定稀释倍数,有时会有稀释 倍数不当,结果显示【Error】。点击【结果】按钮,选中所 测项目“标记”栏如果显示“过稀释”表示稀释倍数过高。 “标记”栏显示“>浓度范围”。表示稀释倍数不够。
操作常见问题
操作如下:查看操作电脑界面上已定过标的旧试剂批号,把 旧条形码的后四位数字更改后作为新的试剂批号使用,把此 批号记在本子上(以备以后使用)。然后把新批号条形码标 签撕下来贴到试剂的侧面以备以后试剂定标时使用,把撕过 条形码的试剂(注意使用前混匀)放入机器试剂仓,此试剂 位的指示灯显示持续闪烁的黄灯,点击显示屏“试剂室”的 区域,点击所放试剂的位置如图,在条形码方框内输入已经 记下的新的条形码,点击“可用实验”,显示试剂余量 。如 果余量显示0,则需要重新更改条形码。
二、日常操作避免事项
1、关于标本量的问题,首先要确定标本是不是够,注意如果 血清高度不是很高的话,要提出来。
2、注意架子上的选择器。A,B,C,现在统一用B.不能够乱动。 3、注意酸碱液的量。 4、试剂如果不够的话,机器会报试剂针吸取错误。这个每天 应该及时的注意试剂是否充足。 5、反应杯要及时的添加,防止由于没有杯子而影响机器的正 常工作。 6、每天的吸取探针检测器校准和日保养要及时的做。
操作常见问题
操作常见问题
4、更换新试剂时先把试剂轻轻的混匀。看此批号试剂是否定 过标。操作:点击【结果】按钮,点击【当前校准液】找到 此项目,看有没有要用试剂的批号。或者把试剂放到机器里 看“校准”一栏中此项目所对应的方框。如果显示黄色,表 示未定标或者未延长校准。如果没定标条件又不允许马上定 标时需要更改此试剂的条形码来应急出报告。

化学发光免疫分析法几个常见问题及处理办法

化学发光免疫分析法几个常见问题及处理办法

化学发光免疫分析法几个常见问题及处理办法
陈佩宣;杨春生;吴细妹;陈志娟
【期刊名称】《国际检验医学杂志》
【年(卷),期】2017(038)014
【摘要】化学发光免疫分析是继放射免疫分析和酶联免疫分析之后发展起来的一种成熟的、先进的标记免疫检测技术,是近10年来发展和推广应用最快的免疫检测方法.该文通过对化学发光免疫分析法中几个常见问题进行详细分析,根据产生问题的不同原因总结出一些行之有效的处理办法,并对一个实验室同时拥有多台不同品牌化学发光仪的管理进行探索,提出应根据各品牌仪器的优势项目对检测项目进行安排的观点,对于提高化学发光免疫检测质量和实验室管理水平都具有一定借鉴作用.
【总页数】3页(P2012-2014)
【作者】陈佩宣;杨春生;吴细妹;陈志娟
【作者单位】广东省东莞市广济医院检验科 523690;广东省东莞市广济医院检验科 523690;广东省东莞市广济医院检验科 523690;广东省东莞市广济医院检验科523690
【正文语种】中文
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WB发光检测中常见的问题及解决方法

WB发光检测中常见的问题及解决方法

WB发光检测中常见的问题及解决⽅法免疫印迹试验(Western blot)是分⼦⽣物学、⽣物化学和免疫遗传学中常⽤的⼀种实验⽅法,被⼴泛应⽤于蛋⽩表达⽔平的研究、抗体活性检测和早期疾病诊断等多个⽅⾯。

其中较为简单也为⼤家所普遍接受的Western blot显⾊⽅法为底物化学发光法ECL,⽂章根据发光检测中常见的⼏种问题现象与各位⽣物⼈⼀起探讨。

疫印迹试验(Western blot)是分⼦⽣物学、⽣物化学和免疫遗传学中常⽤的⼀种实验⽅法,被⼴泛应⽤于蛋⽩表达⽔平的研究、抗体活性检测和早期疾病诊断等多个⽅⾯。

其中较为简单也为⼤家所普遍接受的Western blot显⾊⽅法为底物化学发光法ECL,⽂章根据发光检测中常见的⼏种问题现象与各位⽣物⼈⼀起探讨。

众所周知,Western blot的原理是蛋⽩质在电⼒场的作⽤下,由⼤到⼩的进⾏排列,利⽤电泳进⾏分离和富集。

拥有抗原表位的蛋⽩质分⼦被抗体(⼀抗)特异性识别并与之结合。

在此基础上,酶或荧光标记的⼆抗识别并结合⼀抗,通过与底物反应显⾊来观察⽬的蛋⽩。

Western blot显⾊的⽅法主要有以下⼏种:⼀、放射⾃显影,⼆、底物化学发光ECL,三、底物荧光ECF,四、底物DAB呈⾊。

现常⽤的有底物化学发光ECL和底物DAB呈⾊。

⼤部分Western blot显⾊底物是化学发光底物,发表⽂章通常也是⽤底物化学发光ECL。

ECL法检测辣根过氧化物酶的原理是辣根过氧化物酶在H2O2存在下,氧化化学发光物质鲁⽶诺(lumino,氨基苯⼆酰⼀肼)并发光,在化学增强剂存在下光强度可以增⼤1000倍,通过将印记放在照相底⽚上感光就可以检测辣根过氧化物酶的存在。

ECL法操作简便,应⽤现成的试剂盒,按照说明,将两种显⾊底物等体积混合后将其覆盖在膜表⾯使其均匀,⽤玻璃胶⽚把膜包起来,马上在暗室中将X光⽚覆盖在膜的上⾯,显影、定影(或⽤荧光检测仪检测)。

ECL法具有灵敏度⾼,线性范围⼴等特点。

原子荧光问题解答

原子荧光问题解答

1,问:我做Se时的空白在90左右,而做汞和砷空白就到了600左右,差好大啊,这个值是否合理啊,多少是可以接受的范围啊,谢谢;那么空白高得原因怎么样来排查啊答:除了汞的空白在300左右,其余的元素灯大约在100左右;调节负高压和灯电流能降低荧光值。

一般负高压降低20V荧光值降低一倍;另:空白确实有点高。

不知道大家遇到过没有,环境温度高的时候空白就高,大概在8月份,由于有通风橱,空调也不凉了,结果空白特别高,后来到了10月份,空白就下来了。

注:关于空白值,是根据仪器不同而不同的。

用一个厂家的仪器空白值比较接近,不同厂家的仪器就没有可比性了。

再者,像问题中的空白值不同,如果灯电流,负高压给的相同的话,有可能是灯的问题。

不同的灯强度不同,所以空白值就有所不同。

再者,空白值是个相对的概念,不能确切的说多大的空白值是好的,只要你的净强度值够就行。

2,问:海光AFS2202用了4年多,是教学仪器,为什么点火炉丝今年容易烧断,是什么原因导致炉丝烧断呢。

一般灯电流最大采用80mA答:一个可能是炉丝抻的太开了,还有一个可能就是酸度太大了(环境的酸度),被腐蚀了。

和灯电流没有关系。

检查一下玻璃丝棉。

注:这种属于小问题了,一般炉丝是不那么容易烧断的,可能接触不好,接触点老化所致。

3,问:主要问题:同一个样品多次检测,重复性很差,通常都是逐渐降低,不知道是什么原因,请老师们帮忙看看!(注:仪器用的是北京瑞利AF-610A)答:重复性太差是因为载气的流量不够。

仪器的背后有个次级减压阀,固定的0.05MPa,我的仪器由于种种原因没有调上去,导致仪器前面流量调节失去作用,只能在300ml/min左右,通过调节后,流量可以上到需要的水平,重复性就好了很多了。

注:瑞利的仪器我没用过,不过重现性反应的是仪器的整体水平,仪器的稳定性是个综合的指标,进样系统,载气大小,屏蔽气大小,气液分离器的好坏,实验室的温度等等都能影响到仪器的稳定性。

化学发光仪器跳值问题解析及改善措施

化学发光仪器跳值问题解析及改善措施

化学发光仪器跳值问题是一个比较常见的问题,下面是对这个问题的解析以
及改善措施:
一、问题解析
化学发光仪器跳值问题通常是由于仪器内部部件的故障或检测过程中的干扰
因素导致的。

以下是一些可能导致跳值问题的原因:
1. 仪器内部部件故障:例如,检测器、光源等部件的故障可能导致检测过
程中出现异常信号,从而引起跳值。

2. 试剂问题:如果使用的试剂质量不好或者已经过期,也可能会导致跳值
问题。

3. 样品问题:如果样品中含有杂质或者浓度过高,也可能会导致跳值问题。

二、改善措施
为了解决化学发光仪器跳值问题,可以采取以下措施:
1. 定期维护仪器:定期对仪器进行维护和保养,确保仪器内部部件的正常
运行。

2. 更换试剂:如果怀疑试剂有问题,可以尝试更换其他品牌的试剂,以确
保试剂的质量。

3. 优化样品处理:对于复杂的样品,可以进行预处理或者稀释,以降低样
品对检测的干扰。

4. 校准仪器:定期对仪器进行校准,以确保仪器的准确性和稳定性。

5. 参考其他方法:如果怀疑跳值问题是由于仪器故障导致的,可以参考其他方法进行验证,以确定问题的原因。

总之,解决化学发光仪器跳值问题需要从多个方面入手,包括仪器维护、试剂更换、样品处理、仪器校准等。

通过采取这些措施,可以有效地减少跳值问题的发生,提高检测的准确性和稳定性。

发光光谱仪使用中的常见问题解决方法

发光光谱仪使用中的常见问题解决方法

发光光谱仪使用中的常见问题解决方法引言:发光光谱仪是一种常用于分析物质发光特性的仪器,广泛应用于化学、生物、医学等领域。

然而,在使用发光光谱仪的过程中,常会遇到一些问题,影响仪器的准确度和稳定性。

本文将介绍发光光谱仪使用过程中常见的问题,并提供解决方法。

一、背景噪声过高背景噪声过高是发光光谱仪使用中常见的问题之一。

当背景噪声过高时,会导致信号的检测限度下降,从而影响测量结果的准确性。

解决方法:1. 进行光源矫正:首先,检查光源是否正常工作。

确定光源正常后,按照仪器的使用说明进行光源矫正操作,以确保信号的稳定性和准确性。

2. 检查光路径:背景噪声过高可能是由于光路径不良导致的。

清洁光源和检测器之间的光路径,确保光线能够顺畅地传输,减少噪声的干扰。

二、光谱漂移光谱漂移是指光谱在一段时间内发生的波长偏移。

光谱漂移可能是由于环境温度或仪器内部结构的变化引起的。

解决方法:1. 温度控制:光谱漂移常常与环境温度有关。

保持恒定的环境温度,特别是在长时间的测量中,可以减少光谱漂移的影响。

2. 仪器稳定性:定期检查仪器的稳定性,包括光源、检测器等部件的性能。

如有需要,可以校准仪器,以确保其准确性和稳定性。

三、信号强度不稳定信号强度的不稳定会影响测量结果的精度和重复性。

如果信号强度不稳定,很可能是由于光源或检测器的问题引起的。

解决方法:1. 检查光源:检查光源是否需要更换或进行调整。

如果光源老化或损坏,会导致信号强度不稳定。

2. 检查检测器:检查检测器的工作状态,确保其灵敏度和稳定性。

如有需要,可以进行检测器的维护和校准。

四、峰形不对称峰形不对称是指光谱峰的左右两侧形状不一致。

峰形不对称常常与信号强度不均匀、噪声等问题有关。

解决方法:1. 优化参数设置:调整仪器的参数,如积分时间、增益等,以优化信号强度的均匀分布,从而改善峰形的对称性。

2. 滤波噪声:如果峰形不对称与噪声有关,可以采用滤波的方式来减少噪声的干扰,从而改善峰形的对称性。

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AMPPD 是一种金刚基二螺[4,4]二氧己烷的磷酸酯。经 ALP 水解生成一种不稳定的阴离子, 该阴离子分解时持续发光。发光强度稳定,与 ALP 量成比例。
化学式是 4-甲氧基-4-(3-苯磷酸盐)螺-(1,2-二螺[4,4]二氧己烷-3,2’-金刚烷
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试剂盒中有哪几种试剂,作用都是什么?
有五个仓,以 FRT4 为例: R1a: 包被着链霉亲和素的Dynabeads** 顺磁性微粒溶于TRIS 缓冲液[含有蛋 白质( 鸟类)、表面活性剂、0.125% NaN3和0.125% ProClin*** 300]。 R1b: 含蛋白质( 鸟类)、表面活性剂、< 0.1% NaN3和0.1% ProClin 300 的 TRIS 缓冲盐水。 R1c: 含蛋白质( 鸟类)、表面活性剂、0.125% NaN3和0.125% ProClin 300 的 TRIS 缓冲盐水。 R1d: 三碘甲状腺原氨酸- 碱性磷酸酶( 牛) 结合物溶于TRIS 缓冲液 [含蛋白 质( 鸟类)、表面活性剂、< 0.1% NaN3和0.1% ProClin 300]。 R1e: 结合了生物素的小鼠单克隆抗甲状腺素(T4) 溶于TRIS 缓冲液[含蛋白质 ( 鸟类和鼠类)、表面活性剂、0.125% NaN3和0.125% ProClin 300]。 以该测试项目反应原理说明: Access Free T4 测定是两步酶免法测定。将结合了生物素的单克隆抗甲状腺素(T4)抗体、样本、 缓冲蛋白溶液以及包被着链霉亲和素的固相加至反应管中。在这首次温育过程中,结合了生物 素的抗T4 抗体与固相及样本内的游离T4 相结合。在反应管内温育完成后,结合在固相上的物 质将置于一个磁场内被吸住,而未结合的物质被冲洗除去。然后,将缓冲蛋白溶液及三碘甲状 腺原氨酸(T3)- 碱性磷酸酶结合物添加至反应管中。T3- 碱性磷酸酶结合物与空缺的抗T4 抗体 结合位点结合。在反应管内温育完成后,结合在固相上的物质将置于一个磁场内被吸住,而未 结合的物质被冲洗除去。然后,将化学发光底物Lumi-Phos* 530 添加到反应管内,由照度计对 反应中所产生的光进行测量。所产生光的量与样本内游离T4 的浓度成反比。样本内分析物的量 由所储存的多点校准曲线来确定。 11 如何看待说明书中的方法局限性? 此章节的内容极为重要,实验室工作人员必须对其进行理解,因为它关系到实验室能否对 样本分析结果进行正确的解释。在解释结果时, 需参照该病人的整体临床情况,包括:症状、 临床病史以及其它测试所得的数据和其它相应的信息。
ACCESS 化学发光常见问题
Beckman
Coulter
ACCESS
系列全自动微粒子化学发光 免疫分析系统
常见问题及答疑
ACCESS 化学发光常见问题
目录
第一部分:化学发光基础知识 第 1--17 问
第二部分:仪器应用部分
第 18--76 问
第三部分:项目应用部分
第77—109问
ACCESS 化学发光常见问题
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什么是功能灵敏度? 功能灵敏度(Functional sensitivity)为<20%CV 时所能检测到的最低极限浓度,它反映在
实际样品检测时所能达到精确定量的检测极限。 16 如何理解说明书中的稀释回收率? 稀释回收率与稀释线性不不完全是一回事,但是二者可用同一个研究方式来检验,要进行 稀释回收率测定首先用户需要选取一个已知浓度的病人样本,在分析项目的线性范围内对 其进行多点稀释后进行检测,如果所测得结果与最初的样本稀释系数结果相匹配,那么就 验证了稀释回收率与检测线性范围。稀释线性与回收率的区别在于,将一组分析物校准品 当未知样品进行分析,来对其检测线性范围进行验证。
ACCESS 化学发光常见问题
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如何理解最高可报告值? 当样品浓度高时,可以报告大于最高校准品值的结果,有些试剂生产商的的测定系统通常 用亮点调整来代替完全校准,这样的话他们可报告范围是一个拟合而出的最高水平(而非 实际测定值) 。而在 ACCESS 检测系统中,用户自己创建了标准曲线,当该标准曲线意境通 过并且质控检测被接受时,就可以证实其可报告的上限。当样本分析所得的 RLU 值高于最 高校准品时,以样本结果大于最高校准品值的形式报告,多数实验室对大多数测定项目的 分析结果使用这种直接报告模式,如果需要获得确切的测定值,则需要进行机外人工稀释 并重新分析样本。
7
什么是基质效应?
基质是指的是样品中被分析物以外的组分。基质常常对分析物的分析过程有显著
的干扰,并影响分析结果的准确性。目前最常用的去除基质效应的方法是,通过已知分
析物浓度的标准样品,同时尽可能保持样品中基质不变,建立一个校正曲线( calibration curve) 。
8
稀释样品时稀释物不对为何有基质效应?
为抗原提高发光强度、快速达到稳定、持续发光。
6 什么是嗜异性抗体?
病人样品中可能自然产生一些针对动物免疫球蛋白的抗体(通常是鼠或羊),一般来源于暴露 于这些动物或接受过动物血清的治疗, 分析的干扰: 可以在双单克隆夹心法分析模式中引起假阳 性,可以在单克隆/多克隆分析模式中出现假阴性。
厂家在试剂生产中会加入封闭剂,封闭剂可以加在反应基质中或整合在试剂盒内:鼠 (鼠科 类), 鸟 (鸟科类) 和羊蛋白,各个厂家生产的分析试剂都有可能会不同程度的受到任何一个病 人血清的影分:仪器应用部分
18 我想开展一个新项目如 IL-6,详细程序是什么? 试剂 定标液 质控品 稀释液* A16369 A16370 A16371 S0 或样品稀释液 A(81909) 首先在发光项目速查手册(或说明书)中查到该项目订货信息:
ACCESS 化学发光常见问题

激活 IL-6:主菜单下按[F8]-系统设置; 按[F2]-项目; 在项目列表中找到 IL-6(210) 在 Enabled 打上对勾选择打开 按[F2]-单位选择; 将光标点到所需设置样本类型处,按下拉框后出现单位列表; 选择所需单位,按 F1 确认; 将光标右移到有效位数处,可输入“1” 、 “2” 、 “3” 表示小数点后的位数; 按 Back-主菜单 注意:在仪器和中文电脑上选择的项目单位必须一致,才能保证结果准确
13
如何理解最低可报告值? 所有的定量测定在曲线的下端通常都有一个零标准,该标准允许计算结果低至零,当测定 结果越接近零时,测定结果就越不那么精确。在说明书中给出了项目的检测最低下限,建 议以低于该下限来报告结果。
14
什么是分析灵敏度? 分析零敏度通常是对标准曲线上的零点校准品距零值的 2SD 值范围来进行测定计算的(而 SD 值是将零校准品作为未知浓度样品经多管检测后计算均值所得)

在主菜单按 F5 定标 再按 F5 定标设置 按 F1 增加定标液 当出现对话框后,扫描定标液的条形码(或手工输字符) 按 OK 确认。

然后加载试剂,定标即可。
19 反应管最多加入多少? 在 ACCESS 与 ACCESS2 上一次最多加入 3 盒,共 294 只试管,切记放 RV 管架之前要检查是否 有松动的 RV 管。DXI800 一次最多可加入 2 袋(2000 只) ,注意将管均匀分散。 20 装载基质液注意什么,有何影响? 提前 18 小时将需更换的新基质置室温预温, 否则会造成光量子值偏低, 进而影响有些结果 (夹 心法)值偏低而有些结果(竞争法)偏高。 21 装载试剂注意什么,有何影响? 装载试剂前须将试剂轻轻倒转混匀, 使灰色仓均匀浑浊后 (尤其注意粘附在壁上的试剂) 装载, 否则使结果偏低,但一旦开瓶使用后不可再混匀 22 试剂可以在运行中装载吗? 试剂可以在仪器运行中加载, 选择试剂加载申请后, 仪器会有提示剩余多长时间可进行加载, 这时仪器会将正做测试的试剂处理完后允许加载。 23 仪器在运行的时候,为什么有些试剂盒上面有一个小锁的标志? 这表明仪器正在使用这盒试剂,不能更换该盒试剂 24 我想知道某个项目在不同单位之间的换算系数,如何查找? 更换该项目的单位后, 定标曲线里面的浓度值相应会发生变化, 可以记录不同单位下高浓度 定标点(如 S4,S5 点)的数值进行换算。 25 主探针上的超声发射装置有什么作用? 超声装置的作用:混匀试剂、混匀 RV 内容物、检测样本液面、清洁主探针 26 为什么在装载新试剂包前需上下颠倒混匀? 在装载新的试剂包前应轻轻地上下颠倒混匀,这样可去除试剂包顶部粘附的磁性粒子。 27 基质液更换的注意事项? 注意避免污染基质液 - 不要让基质液瓶中的管道及基质液瓶盖的内表面接触到任何物体 的表面 避免使用有滑石粉的手套 基质液装上机器前,必须放置在室温平衡 18 个小时. 基质液开瓶后效期为 14 天 28 为什么在打开 ACCESS2 的仪器外盖前需要先关闭效用检测功能?
分析方法及过程 ACCESS 系统采用磁性微粒作为固相载体,以 AMPPD 作为发光剂,固相载体的应用扩大了测 定的范围。以竞争法、夹心法等免疫测定方法为基础。试剂包装采用特殊的设计,每个试剂包有 5 个小室分别把不同的试剂分开,减少了交叉污染,保证了检测质量。 ⑴、抗原抗体结合:将包被单克隆抗体的顺磁性微粒和待测标本加入反应管中,标本中的 抗原与微粒子表面的抗体结合,再加入碱性磷酸酶标记的抗体,经温育后形成固相包被抗体-抗 原-酶标记抗体复合物。 ⑵、洗涤、分离:在电磁场中进行 3 次洗涤,很快将未结合的多余抗原和酶标记抗体洗去。 ⑶、加入底物 AMPPD 发光剂:AMPPD 被结合在磁性粒子表面的碱性磷酸酶的催化下迅速去 磷酸基因,生成不稳定的中介体 AMPD。AMPD 很快分解,从高能激发态回到低能量的稳定态,同 时发射出光子,这种化学发光持续而稳定,可达数小时之久。通过 光量子阅读系统记录发光强 度,并从标准曲线上计算出待测抗原的浓度。
ACCESS 化学发光常见问题
我们在稀释样品时要考虑到基质效应的影响,稀释必须在适当的基质中进行,对于 大多数测定而言,适当的基质就是零校准品,如果分析物稀释基质效应中所含成分浓度不正 确,稀释回收率就不能对它们进行准确的测定,因为它们稀释后会与 Bing agent 形成新的平衡。
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