第二章_骨髓细胞学检查
诊断学骨髓细胞学检测

病理血细胞形态
细胞 形态学
恶性组织细胞增生症 霍奇金淋巴瘤 病理血细胞形态 细胞 形态学
毛细胞白血病 多发性骨髓瘤
病理血细胞形态
细胞 形态学
骨髓转移癌 骨髓坏死
病理血细胞形态 细胞 形态学
利 什 曼 原 虫
细胞 形态学
病理血细胞形态
血细胞化学染色
常见的化学染色包括: 过氧化物酶(POX) 碱性磷酸酶(NAP) 酸性磷酸酶(ACP) 糖原(PAS) 铁染色
FLOW CYTOMETRY
Antibodies
Cell
FLOW CYTOMETRY
流式细胞术
免疫学表型
AML: cMPO 、 CD117 、 CD13 、 CD33、 CD65 、 CD14、CD15、CD64 、 HLA-DR、血型糖蛋白、CD41、CD61。 ALL:B:CD79a 、 cCD22、 cIgM 、 CD19、 CD20 、 CD10 、 CD24。 T:cCD3、TCR 、 CD2 、 CD5、CD7、CD4、 CD8、CD10 、 CD1a 、 TdT。 Stem Cell: CD34+、CD38- 、Lin -
是在保存细胞结构完整的情况下,根据化学反应的原理进行染色,研究其中的化学成分的分布与变化,了解各种细胞的化学组成及病理生理改变,主要用作血细胞类型的鉴别。
细胞发育过程中的过氧化酶
细胞 化学染色
中性粒细胞硷性磷酸酶反应
细胞 化学染色
骨髓穿刺术 细胞 形态学
正常骨髓象 贫血骨髓象 细胞 形态学
正常细胞形态
观察内容: 1.大小、形态。 3.核:位置、大小、形态、染色质。 2.胞浆:量、着色、包含物。 4.核仁:大小、多少、清晰度。
骨髓细胞学检查ppt课件

②组织损伤及坏死:心肌梗死增快, 心绞痛正常(鉴别)
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③良、恶性肿瘤的鉴别:恶性肿瘤多增快, 良性肿瘤多正常
④高球蛋白血症:SLE、多发性骨髓瘤、巨球蛋 白血症等
⑤贫血:贫血越重越快 ⑥高胆固醇血症:动脉粥样硬化、糖尿病等
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平均红细胞血红蛋白浓度
(mean corpuscular hemoglobin concentration,
MCHC)
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参考范围
80~100 27-34 320-360
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【临床意义】用于贫血的形态学分类 教材p263 表4-2-4
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四、红细胞体积分布宽度 p263
(Red blood cell volume distribution width, RDW)
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2. 血小板增多(thrombocytosis) (PLT>400×109/L)
①原发性增多:慢粒、真红。 ②反应性增多:急性化脓性感染、急性大出血等。
2020/8/29
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P261
第三节 红细胞沉降率测定
(erythrocyte sedimentati/29
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参考范围: (100~300)×109/L
Clinical significance 1. 血小板减少(thrombocytopenia) ( PLT<100×109/L) ①血小板生成障碍:再障、放射性损伤、急性白血病 ②血小板破坏或消耗增多:ITP、DIC ③血小板分布异常:如脾肿大、血液被稀释
【定义】
骨髓细胞学检查

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一.骨髓细胞学检查的临床目的
1、诊断造血系统疾病,如:Acute leukemia
(AL)、Aplastic Anemia(AA)、 Multiple myeloma (MM)、Idiopathic thrombocytopenic purpura(ITP)等。 同时定期检查骨髓对分析疗效,判断疾 病预后亦有帮助。
骨髓穿刺:Bone marrow puncture
骨髓活检:Bone marrow biopsy
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骨髓穿刺的部位:
常选用的部位有: 髂前上棘、髂后上棘、 胸骨、腰椎棘突 骨髓穿刺的方法:
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11
骨髓穿刺的禁忌症:
1、血友病等凝血因子重度缺陷的疾 病。
2、穿刺部位局部有炎症,畸形及其
他病变时应避开或更换部位。
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(二)巨核细胞计数与分类
巨核细胞数正常值为每张涂片 (1.5×3.5cm)7-35个 巨核细胞数量增多或正常且伴有成熟障碍:见于 特发性血小板减少性紫癜 巨核细胞数量减少:见于再生障碍性贫血
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原幼巨核细胞增多:见于白血病、骨髓纤维化、
急性ITP
颗粒型巨核细胞增加而产生血小板型减少:见于
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5.细胞涂片检查时,吸取的骨髓液滴在载玻
片上(要有斜度)应迅速推片,避免凝固。 推片数目应根据检查需要决定。 6.骨髓液涂片时,涂膜应厚薄适宜,细胞分 布均匀,同时应在玻片一端标记患者姓名
及日期,以防差错。
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二、骨髓涂片细胞学检查内容
1.骨髓有核细胞的增生程度,低倍镜下 检查。根据成熟红细胞与有核细胞的
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2.比值减低见于 : (1)红系细胞增多时,如各种增生性贫血 (2)粒系细胞减少时,如粒细胞缺乏症
骨髓细胞形态学检查ppt课件

成熟红细胞 成熟红细胞是呈粉红色,中央稍浅,大小近似相等无核的细胞
检查结果的分析
1. 骨髓增生程度:分增生极度活跃,增 生明显活跃,增生活跃,增生减低,增 生明显减低。 2. 骨髓中各系列细胞及其各发育阶段细 胞的比例。一般符合正常参考值。
骨髓增生程度的临床意义
增生极度活跃:反映骨髓造血功能亢进 ,常见于白血病。
核膜:由不明显变明显。 核仁:由清晰可见到消失。
细胞质
量:由少到多。 颗粒:有无到有。 空泡:有无到有(浆细胞)。 着色:红细胞、粒细胞、巨核细胞由嗜 碱性到嗜酸性,由蓝到红。淋巴细胞呈 天蓝色,单细胞呈灰蓝色。浆细胞由浅 灰蓝色变为深蓝色。
骨髓涂片的制作、染色
骨髓细胞学检查的内容和方法
低倍镜检查: 观察骨髓标本的取材和涂片制作是否满 意。 判断骨髓增生程度。以有核细胞的量来 反映。一般低倍镜观察有核细胞与成熟 红细胞之间的比例,正常为1:20。 观察巨核细胞。 注意有无异常细胞。
常用取材部位
髂后上棘(较易掌握分寸) 髂前上棘(较易掌握分寸) 胸骨(对向心性病变阳性率高,
有一定危险性) 胫骨粗隆(2岁以下小儿)
造血干细胞的功能特点
造血干细胞是造血组织中一类目前尚无 形态学特征描述的功能细胞。特点有: 1。具有高度自我更新的能力,可维持干 细胞数量的恒定。 2。具有多向分化的能力,即可向各系列 祖细胞分化,然后增殖分化为各系血细 胞。 生成阶段:干细胞,祖细胞,各系列原 始幼稚细胞阶段,然后继续分化成熟。
原始红细胞
胞体: 直径15-20μm
胞核: 圆形,居中或稍偏于一旁,约占细胞的4/5,紫红 色,染色质颗粒状,核仁明显
核仁: 1-2个,大小不均,模糊或清楚,染浅兰色
胞浆: 量少,或有部分胞浆呈伪足状,深兰色且厚,近核 处不见色浅区
骨髓细胞学检查优秀课件

骨髓涂片的显微镜检查
低倍镜
观察取才、涂片、染色情况 观察骨髓增生程度 计数巨核细、分布均匀的部位, 计数200个有核细胞,分类
骨髓标本的分类部位
骨髓增生程度分级(高倍镜) 增生减低 5~20/HP
极度减低 1~5/HP
增生活跃明显活跃 20~50/H5P0~100/HP
骨髓细胞学检查优秀课件
主要内容
概述 骨髓检查适应症禁忌症 血细胞生成发展规律形态特点 细胞化学染色 正常骨髓象 常见血液病骨髓象
一、概 述
骨髓是人出生后的主要造血组织。 骨髓组织由网状组织、基质、血管系统和神
经等构成的造血微环境,以及充满其间的发 育过程中的血细胞所组成。
骨髓形态学主要检查骨髓中各系列血细胞数 量的增减及其比例的改变,形态的异常,可 以了解骨髓的造血功能和病理改变。
或用-,+,++,+++,++ ++5个等级进行积分值计算
过氧化物酶
过氧化物酶染色 (POX)临床意义
主要用于急性白细胞类型的鉴别
急性粒细胞白血病:
强阳性(颗粒较粗大,呈局灶分布)
急性单核细胞白血病:
弱阳性(颗粒细小、稀少、 散在分布)
急性淋巴细胞白血病:
阴性,ALL骨髓中残留的原粒细胞POX可为(+), 但比例小于3%
【原理】是一种脂溶性染料,可溶于细胞 质内的含脂物质,是之呈棕黑色或深黑 色颗粒。
【临床意义】同POX染色反应
(三)中性粒细胞碱性磷酸酶染色 (NAP)
【原理】碱性磷酸酶主要存在于成熟中性粒
细胞(分叶核及杆状核)内,在碱性条件下 能水解基质液中的α-磷酸萘酚,产生α-萘酚, 其与重氮盐偶联,形成不溶性棕黑色偶氮染 料沉淀。阳性反应为胞质中出现灰色到棕褐 色颗粒,计数100个成熟中性粒细胞,报告阳 性细胞百分率或用-,1+,2+,3+,4+ 进行积分值计算。
骨髓细胞学检验

骨髓细胞学检验第一节骨髓细胞检查步骤一、骨髓取材(一)穿刺部位目前骨髓穿刺部位有胸骨、腰椎棘突、髂骨等处,以髂骨前上棘、后上棘穿刺术最常见。
2 岁以下小儿主张胫骨穿刺。
由于穿刺部位不同,取材可能有明显差异。
如再障贫血往往髂骨首先受损,棘突次之,胸骨增生最好;黑热病检查利-杜体以腰椎穿刺阳性率较高;恶性组织细胞症以胸骨穿刺阳性率较高。
因此必要时多部位穿刺以便能全面了解骨髓情况。
(二)骨髓液抽取量以0.2 ml 为佳,抽量过多,易被血液稀释,失去诊断意义。
二、骨髓涂片制备用推片蘸取有骨髓渣的骨髓液少许(若看上去很浓,蘸量少些;如稀,可多蘸些),尽量将骨髓渣蘸上,放于载玻片右端,将骨髓液迅速沿玻片与推片接触面扩散成一均匀的骨髓液粗线。
然后将玻片与推片成30 ~45°角(骨髓液较浓时,角度小些,推的速度慢些;较稀时,角度大些,速度快些),自右向左用力均匀地向前滑动推之,直至玻片尾部。
立即将涂好的骨髓片在空气中来回摇动,使之快干,以免细胞皱缩而形态变异。
三、涂片染色标本染色一般选用混合染色法(瑞氏-姬姆萨复合染色法)1.染液的配制瑞氏染料1.0g姬姆萨染料0.3g甲醇(分析纯)500 ml将全部染料放入研钵中,加少量甲醇,慢慢研磨片刻,吸出上层染液。
再加入少量甲醇,继续研磨后吸出上液。
如此反复几次,使染料全部溶解于500 ml 甲醇。
收集于洁净的棕色瓶中,每天早、晚各振摇3 分钟,共5 天,存放1 周即可使用。
新配染料染色效果较差,放置时间愈长,染色效果愈好,但须盖严瓶以免甲醇挥发或氧化成甲酸。
2.pH 6.4 ~6.8 磷酸盐缓冲液磷酸二氢钾(K H 2PO 4)6.64g磷酸氢二钠(Na2HP O 4)2.56g加少量蒸馏水溶解,用磷酸盐溶液调整pH ,加水至1000 ml 。
3.染色方法(1)标本平放,最好置于架起的双玻棒上;(2)甲醇固定3 分钟;(3)加染液3 ~5 滴覆盖整个涂片,静置1 分钟;(4)加染液1 ~1.5 倍的磷酸盐缓冲液,使两液混匀,染色约10 ~15 分钟;(5)冲洗涂片上的染液,冲洗后竖置于片架上自然干燥或用洁净吸水纸将水吸干。
实验诊断学课件-骨髓的细胞学检查

原始浆细胞 胞体:直径14-18μ 胞核:较大,约占细胞2/3,圆或椭圆形,常偏于一侧;染色质细致、呈 颗粒状,均匀分散或呈细网状。 核仁:2-5个,淡蓝色,不显著。 胞浆:较其它原始细胞为多,深蓝而不透明,近核处着色较浅,无颗粒, 偶可见到空泡。
幼浆细胞:直径12-16μ;核圆或椭圆形,占细胞1/2左右,位于细胞 中央或偏于一侧,染色质较原始阶段粗而密,开始有浓集现象。核 仁1-2个,不清晰。胞浆深蓝色或呈多染性,近核部分常有呈半月状 的淡染区,偶尔可见到有空泡。
缺点
1.造血组织的天然结构已遭破坏,无法 判断红髓、黄髓比例
2.若抽吸过猛,导致血窦血的稀释
3.若遇“干抽”不能分析
1.有核细胞群集,不易区分原、幼细胞的类型 2.难以观察细胞内的微细结构 3.细胞化学染色结果难以量化
3. 骨髓涂片的显微镜检查
(1)低倍镜检查
1) 观察制片质量(包括取材、制片及染色)好片应符合下列条 件:
血细胞发育形态演变规律要点
胞体: 胞核:
形态 染色质 色 核仁: 胞质: 量 色 颗粒
原始 大 大 圆 疏松细致 淡紫色 可见 少 深蓝 无 非特异性
成熟 小 小
不规则(或消失) 紧密粗糙 深紫色
消失 多
浅蓝或灰(红) 有
特异性
胞体:血细胞随着分化发育其体积逐渐变小
(巨核细胞系除外)
成熟红细胞
早期红细胞
浆细胞:直径8-15μ;核较小,占细胞的1/2以下,多偏于一侧,偶可 见双核;染色质粗密、聚集成堆、常染成紫丁香色、不均匀,在近 核处一边常伸出半月状淡染区;浆中偶见有空泡或有泡沫感。
原始巨核细胞 胞体:15-30μm,圆形或椭圆形 胞核:圆形或椭圆形,有凹陷,折叠,染色质暗深紫红色,粗大 颗粒,排列紧密 核仁:1-2个 胞浆:量少,深蓝色,无颗粒。
第二章 骨髓细胞学检查

二、白血病
急性白血病较多于慢性白血病, 成人以急粒多见,儿童急淋多见
急性白血病
(Acute Leukemia)
〔血 象〕
1. 血红蛋白、红细 胞 减少,可见幼红细胞 2. 白细胞计数不定,以 原幼稚为主 3. 血小板减少
骨髓象: 1.某系增生明显活跃 或极度活跃, 2.某系(原始 + 幼 稚细胞)大于30%, 白血病细胞多见 (发育异常) 3.其它系受抑制
M7 巨核白
复习题 骨髓检查应用于哪些方面? 正常骨髓象各系统各阶段的正常范围?
骨髓增生程度分级?
再障的骨髓象与血象特征? 急性白血病的分类、骨髓象及血象特征
谢谢
(二)、油镜观察 计数200—500个有核细胞,根据 各系形态特点进行分类 (三)、结果报告 骨髓报告单上有 详细内容(包括骨髓象血象特征、组 化染色),并提出诊断意见和建议
(四)、正常骨髓象特征
1. 增 生 活 跃 2. 粒 红 比 正 常(2-4/1) 3. 粒 系(约40-60%)、红 系(约20%): 增 生 良 好、 各 阶 段 比 例 适 当 细胞形态无明显异常 4. 巨 核 细 胞: 易见、产 板 巨 多 见 5. 淋 巴(约20%)、单 核( 约4%) 6.可 见 少 量 非 造 血 细 胞 7. 无 特 殊 细 胞 及 寄 生 虫
骨 髓 细 胞 学 检 查
主要内容 血细胞的生成与发育 正常血细胞形态 常用血细胞化学染色 骨髓细胞检查的临床意义
常见血液病血细胞特征
急性白血病的MICM分型
一、 概述
1、血液细胞发育过程 多能干细胞 定向祖细胞 幼稚细胞 成熟细胞
原始细胞
2、骨髓检查适应症
对一些血液病进行确诊、观察疗效、 判断预后 如白血病、再障、骨髓瘤;
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业务推广部
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• 主要内容
• 血细胞的生成与发育
• 正常血细胞形态
• 常用血细胞化学染色
• 骨髓细胞检查的临床意义
• 常见血液病血细胞特征
• 急性白血病的MICM分型
业务推广部
2
一、 概述
1、血液细胞发育过程
多能干细胞定向祖细胞来自幼稚细胞成熟细胞
原始细胞
业务推广部
3
业务推广部
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2、骨髓检查适应症
业务推广部
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• 急性白血病
(Acute Leukemia) 〔血 象〕 1. 血红蛋白、红细 胞
减少,可见幼红细胞 2. 白细胞计数不定,以
原幼稚为主 3. 血小板减少
业务推广部
21
骨髓象: 1.某系增生明显活跃
或极度活跃, 2.某系(原始 + 幼 稚细胞)大于30%,
白血病细胞多见 (发育异常) 3.其它系受抑制
〉 100 50—100
20—50 5—10 〈5
白血病 白血病、 增生性贫血 正常骨髓象
慢性再障
急性再障
业务推广部
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业务推广部
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(二)、油镜观察
计数200—500个有核细胞,根据 各系形态特点进行分类 (三)、结果报告 骨髓报告单上有 详细内容(包括骨髓象血象特征、组 化染色),并提出诊断意见和建议
对一些血液病进行确诊、观察疗效、 判断预后 如白血病、再障、骨髓瘤;
目 的 协助诊断疾病如贫血、ITP;
查找病原体如黑热病小体、疟原虫、 狼疮细胞
业务推广部
5
适应症
不明原因肝脾、淋巴节肿大 不明原因的发热、骨痛、恶病质
血液细胞数异常、出现幼稚细胞
禁忌症为血友病、严重凝血功能障碍等
业务推广部
6
二、骨髓检查步骤与正常骨髓象
业务推广部
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2、慢性粒细胞白血病
血象WBC↑↑↑ ﹥100× 10 9 / L, 见幼稚细胞
嗜酸嗜碱粒细胞同时↑
M、L、PLT减少
特征: WBC↑↑↑ B↑↑ 费城染色体
业务推广部
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骨髓象:
1.某系极度活跃
粒 / 红比值↑
( 10—50 ) : 1
,
2.(原粒 + 早幼
粒)小于10%,
以中晚幼为主
原粒(原单)+早幼粒 (幼单)>30% 原幼巨>30%
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复习题 • 骨髓检查应用于哪些方面? • 正常骨髓象各系统各阶段的正常范围? • 骨髓增生程度分级? • 再障的骨髓象与血象特征? • 急性白血病的分类、骨髓象及血象特征
业务推广部
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谢谢
业务推广部
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(一)、贫血 1、增生性贫血 包括缺铁贫、失血、溶贫 血象: HB、RBC、HCT均↓,
网红↑,WBC正常 骨髓象:增生活跃或明显活跃
红系增生显著, 粒 / 红比值↓, 巨核系正常
业务推广部
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2、巨幼贫
血象: HB、RBC↓,WBC正常, 核右移,红细胞大小不均
骨髓象: 1、增生明显活跃,红系增生显著,粒 /
红比值↓, 2、幼稚红细胞体积变大且“核幼质老” 3、粒系、巨核系也巨型变
业务推广部
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业务推广部
18
血象:HB、RBC、 WBC均↓ 网红↓
骨髓象: 增生减低或极度减低 红粒巨三系均减少, 成熟淋巴相对增多, 非造血细胞增多
业务推广部
3、再 障
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二、白血病 急性白血病较多于慢性白血病, 成人以急粒多见,儿童急淋多见
6.可 见 少 量 非 造 血 细 胞
7. 无 特 殊业务细推广部胞 及 寄 生 虫
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1. 过氧化物酶
( POX) 2. 非特异性酯酶
( NSE) 3 .特异性酯酶
(SE) 4. 糖原染色 (PAS) 5. 中性粒细胞碱
性磷酶 (NAP) 6. 铁粒染色
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三、常用组化染色
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四、常见血液病血象和骨髓象
(一)、低倍镜检 判断骨髓增生程度; 粗略估计巨核细胞情况;
发现有无特殊细胞如转移癌、尼曼匹克细胞。
业务推广部
7
骨髓增生程度判断
根据有核 / 成熟红细胞比例分五级:
增生程度 有核 / 成熟红细胞 有核细胞数/HP 病因
极度活跃 明显活跃
1 :1 1 :10
增生活跃 1 :20 增生减低 1 :50 增生极度减低 1 :200
3.红系减少
淋巴系相对减
少
业务推广部
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急髓白血病FAB 分 型
M1 急粒未分化型 M2 急粒部分分化型 M3 急早粒 M4 急粒-单 M5 急单 M6 红白血病
M7 巨核白
业务推广部
原粒≥90%( 非红系) 原粒≥30-89% 早幼粒>30% 粒单两系细胞均增生
原幼单>30% 红系>50%且形态异常
业务推广部
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(四)、正常骨髓象特征
1. 增 生 活 跃 2. 粒 红 比 正 常(2-4/1) 3. 粒 系(约40-60%)、红 系(约20%):
增 生 良 好、 各 阶 段 比 例 适 当 细胞形态无明显异常
4. 巨 核 细 胞: 易见、产 板 巨 多 见 5. 淋 巴(约20%)、单 核( 约4%)