抑菌圈法实验流程
实验七杀菌剂生物活性测定方法――抑菌圈法
实验七杀菌剂生物活性测定方法――抑菌圈法一、实验目的掌握抑菌圈法测定杀菌剂的生物活性的方法及步骤。
二、实验原理本实验主要采用抑菌圈法来测定杀菌剂的生物活性。
抑菌圈法是利用杀菌剂在琼脂平板上产生的抑菌效果来对其生物活性进行测定的一种方法。
通常，将杀菌剂溶液滴加到琼脂平板上，使其均匀地分布在琼脂上。
然后，将含有细菌培养物的琼脂平板放入恒温箱中进行培养。
在培养一段时间后，观察平板上是否出现了抑菌圈，并测量抑菌圈的直径来评估杀菌剂的生物活性。
三、实验仪器和材料1.显微镜2.恒温箱3.滴定管或移液管4.琼脂平板5.细菌培养物6.杀菌剂溶液四、实验步骤1.准备琼脂平板。
将琼脂平板置于恒温箱中，加热至溶化状态后取出，待其稍微冷却后均匀地倒入培养皿中。
2.滴加杀菌剂溶液。
将杀菌剂溶液滴加到琼脂平板上，并用移液管在平板上转动，使杀菌剂均匀地分布在琼脂上。
3.检验杀菌剂效果。
取一定量的细菌培养物，将其在琼脂平板上均匀涂布。
4.培养细菌。
将含有细菌培养物的琼脂平板放入预先恒温箱中，设置合适的温度和培养时间。
5.观察抑菌圈。
在培养一段时间后，取出琼脂平板，用显微镜观察平板上是否出现了抑菌圈。
6.测量抑菌圈直径。
使用直尺或量角器等工具测量抑菌圈的直径，并记录结果。
五、实验注意事项1.操作时要注意无菌技术，以避免细菌污染。
2.滴加杀菌剂溶液时要均匀并轻柔，以保证杀菌剂能充分分散在琼脂平板上。
3.培养细菌时要控制好温度和培养时间，以确保细菌能够充分生长。
4.观察抑菌圈时要注意使用合适的放大倍数，以免错过细小的抑菌圈。
5.测量抑菌圈直径时要使用准确的测量工具，以获得准确的结果。
六、实验结果处理根据实验所得的抑菌圈直径数据，可以通过计算其平均值、标准差等统计指标来评估杀菌剂的生物活性。
较大的抑菌圈直径通常表示杀菌剂具有较强的抑菌效果，反之则表示其抑菌效果较弱。
可以将实验结果与已有的标准值进行比较，以判断杀菌剂的生物活性。
七、实验结果分析根据测得的抑菌圈直径结果，可以对杀菌剂的生物活性进行分析。
抑菌圈法实验流程
抑菌圈法实验流程
（1）实验准备：准备相关菌种（二氧化硫克隆体、硝酸盐克隆体等）和试剂；准备法兰管材质的抑菌圈，在它的内部划分两个回路；抑菌圈内
装有空气泵，来实现对空气进行不同强度的抽压，以达到抑菌目的；
（2）实验方法：将抑菌圈里装有的菌种悬液加入到两个回路中，使
用空气泵来实现抽压；在调节空气流量的情况下，可以观察抑菌圈法对菌
种的抑制情况；
（3）数据分析：当抑菌圈的空气流量调节到一定程度时，可以观察
到抑菌圈内的菌种数量有明显的下降；
（4）讨论：抑菌圈法是一种新型的抑菌方法，它可以有效地抑制菌
种的繁殖，有效地减少菌种的数量，保护人类环境。
但是，抑菌圈法也有
一定的缺点，抽压太大会导致菌种基因组的变异，并且会产生抗性菌株，
同时也会使抑菌方法失效。
抑菌圈实验实验报告
一、实验目的本实验旨在通过抑菌圈实验，观察不同抗生素对特定细菌的抑菌效果，了解抗生素的抗菌活性，并学习如何通过抑菌圈的大小判断细菌对抗生素的敏感性。
二、实验原理抑菌圈实验是微生物学中常用的方法之一，用于检测抗生素对细菌的抑制作用。
实验原理基于抗生素对细菌生长的抑制作用，当抗生素与细菌接触时，细菌的生长会受到抑制，从而在含有抗生素的培养基上形成一个无细菌生长的区域，即抑菌圈。
抑菌圈的大小可以反映抗生素的抗菌活性，通常抑菌圈越大，说明抗生素的抗菌活性越强。
三、实验材料与仪器1. 材料：- 细菌菌株：金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）- 抗生素：青霉素、红霉素、庆大霉素、链霉素- 琼脂培养基- 牛肉膏蛋白胨培养基- 水浴箱- 滴管- 铅笔- 玻璃板2. 仪器：- 培养箱- 电子天平- 灭菌器四、实验步骤1. 制备培养基：- 称取牛肉膏蛋白胨培养基，加入适量的蒸馏水，溶解后用电子天平称量，使培养基浓度为10g/L。
- 将溶解后的培养基分装至锥形瓶中，每瓶100mL，121℃高压灭菌15分钟。
- 待培养基冷却至50℃左右，加入琼脂粉，充分搅拌均匀。
- 将琼脂培养基倒入培养皿中，待其凝固。
2. 接种细菌：- 将金黄色葡萄球菌接种至牛肉膏蛋白胨培养基中，37℃培养24小时。
3. 制备抗生素纸片：- 将抗生素粉末用生理盐水溶解，配制成一定浓度的溶液。
- 用滴管将溶液滴加到无菌滤纸上，使滤纸充分浸润。
- 将滤纸晾干，制成抗生素纸片。
4. 抑菌圈实验：- 将制备好的琼脂培养基上的细菌菌落刮去，并用无菌镊子将抗生素纸片贴在培养基表面。
- 将培养皿倒置放入培养箱中，37℃培养24小时。
5. 观察与记录：- 观察培养皿中抗生素纸片周围是否形成抑菌圈，并记录抑菌圈的大小。
五、实验结果与分析1. 实验结果：- 青霉素：抑菌圈直径为15mm- 红霉素：抑菌圈直径为10mm- 庆大霉素：抑菌圈直径为20mm- 链霉素：抑菌圈直径为8mm2. 结果分析：- 根据抑菌圈的大小，可以判断金黄色葡萄球菌对不同抗生素的敏感性。
抑菌试验预习方案
抑菌试验1 定义抑菌试验，用于测定抗菌药物体外抑制细菌生长效力的试验称为抑菌试验抑菌活性的研究实验方案。
实验方法1. 纸片法（抑菌圈法）将测定菌株接种到培养基中，置37度条件下培养6-24小时，取出备用。
再用无菌吸管吸取上述培养液0.1ml，再用三角刮刀将菌液涂匀。
待培养基表面稍干后，用无菌小镊子分别取出所需的药敏纸片均匀地贴在培养基的表面，轻轻压平，各纸片间应有一定距离，并分别做上标记。
将培养皿置37度恒温箱内培养18-24小时后，测量各种药敏纸片抑菌圈直径的大小。
2. 挖孔法（1）在平板上打孔，然后将药液滴入孔内，用经酒精灯灭菌的接种环挑取适量细菌培养物，以划线方式将细菌涂布到平皿培养基上。
具体方式：用灭菌接种环取适量细菌分别在平皿边缘相对四点涂菌，以每点开始划线涂菌至平皿的1/2，依次划线，自至细菌均匀密布于平皿（将测定菌株接种到培养皿中，置37度条件下培养18-24小时，用灭菌的棉拭子将带将细菌混悬液涂布于平皿培养基表面。
要求涂布均匀）。
（2）以无菌操作将灭菌的不锈钢小管，（外径4mm，孔径与孔距均为3mm，管的两端要光滑，也可用玻璃管和瓷管），放置在培养基上打孔，将孔中的培养基用针头挑出，并以火焰封底，使培养基能充分的与平皿融合（3）加样时，按不同药液加样，用无菌滴管将样品加至满而不溢为止。
3. 牛津杯法（1）双碟的制备方法：将灭菌培养基溶化后取15ml倒入灭菌平皿内。
吸取待测菌株的菌液1-5ml与100ml冷至45度的培养基混匀，然后分别每一平皿加入5ml。
并均匀摊布在具有底层培养基的平皿内。
（2）待培养基凝固后，在每碟中均匀立放小钢管（及牛津杯）4个，用陶瓦盖覆盖。
（3）将下列实验药液分别加入小钢管中，置37度培养18-24小时，量取抑菌圈大小，判定抗菌药物抑菌作用的强弱。
乳酸菌的抑菌实验1产抑菌活性物质乳酸菌的初筛采用纸片法。
将培养好的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、蜡样芽孢杆菌培养液 OD 600分别调整到 0.17、0.19、0.10，各取 100μL 接种于 LB 固体培养基，涂布均匀，固定1h。
抑菌圈实验
2.1.1制备方法：取新华1号定性滤纸，用打孔机打成6毫米直径的圆形小纸片。
取圆纸片50片放入清洁干燥的青霉素空瓶中，瓶口以单层牛皮纸包扎。
经15磅15-20分钟高压消毒后，放在37℃温箱或烘箱中数天，使完全干燥。
2.1.2抗菌药纸片制作：在上述含有50片纸片的青霉素瓶内加入药液0.25毫升，并翻动纸片，使各纸片充分浸透药液，翻动纸片时不能将纸片捣烂。
同时在瓶口上记录药物名称，放37℃温箱内过夜，干燥后即密盖，如有条件可真空干燥。
切勿受潮，置阴暗干燥处存放，有效期3-6个月。
几种常用植物性食物原料成分对大肠杆菌的抑菌作用
实验组1 实验组2 平均值 抑菌率
抑菌圈大小比较：大蒜瓣>辣椒>生姜
七、实验讨论
（一）大蒜、生姜和辣椒制剂对大肠杆菌的抑制作 用机理分析 • 大蒜是一种天然的植物抗生素。大蒜中的大蒜素 对多种致病菌，如大肠杆菌、葡萄球菌、伤寒杆 菌、霍乱杆菌、白喉杆菌等有明显的抑菌作用。 这主要是由于大蒜素分子中的活性基团硫醚基 (Is_o—s一)与细菌生长繁殖所必需的半脱氨酸分 子中的巯基相结合，从而抑制了细菌的生长繁殖。 而且大蒜性味辛温，既可以做调味剂，又可以防 治疾病，应用于食品添加剂，可以起到良好的抑 菌防腐作用。
3.玻璃器皿的包装，培养基和玻璃器皿的高压灭菌 ①移液管（4个）、培养皿（8个），分别用报纸将其 包装 ②灭菌 想灭菌器中加入清洁软水→堆放物品→盖上 盖子（对称地紧固螺栓）→打开电源设置灭菌温度 121℃，灭菌时间20min→加热，排放冷空气（打开 排气阀）→待有白烟冒出关掉排气阀→结束，关电 源。待指针归“零”后，打开排气阀，取出物品 4.试验菌悬液的制备：用接种环挑取大肠杆菌至无菌 水中，制成菌悬液
实验方法。
二、实验设备及材料
• 设备：研钵、烧杯、培养皿、 试管、吸管、漏斗、滤纸、分 析天平等 • 材料：大蒜瓣、生姜、青辣椒、 • 菌种：大肠杆菌 • 培养基：牛肉膏蛋白胨培养基
三、理论依据
已知大蒜、生姜、辣椒中含有各种有效 的抑菌成分，对它们采用研磨的方法制 成的提取液也将有抑菌作用。本实验将 研究其制剂对大肠杆菌的抑菌作用，并 进行比较。
七、结论
• 大蒜、生姜、洋葱、青辣椒、红辣椒对大 肠杆菌都有抑菌作用。 • 大蒜对大肠杆菌的抑菌效果最好 • 这几种常用植物性食物原材料可以用于食 品防腐保鲜剂的开发。
• ①向灭菌器加水时，水位不应超过水位线， 以免水进入灭菌桶内，浸湿被灭菌物品 • ②堆放物品时应留有空隙 • ③盖盖子时，应对称的紧固螺栓，注意不 易宁得太紧，以以免损坏橡胶密封垫圈 • ④灭菌结束后一定要待指针归零后，再打 开排气阀，取出物品
抑菌圈实验知识点
抑菌圈实验知识点抑菌圈实验简介抑菌圈实验是一种常见的微生物学实验方法，用于评估抗菌物质对细菌生长的抑制效果。
通过在寒天平板上涂布一定数量的细菌，然后在不同的实验条件下施加待测物，观察生成的抑菌圈直径来判断其抗菌活性强弱。
实验步骤1.准备寒天平板：将寒天溶液煮沸，倒入培养皿中，等待冷却凝固。
2.预处理细菌：选取待测细菌培养液，进行适当稀释，利用吸管在寒天平板上均匀涂布。
3.滴加待测物质：使用滴管将待测物质滴加到已涂布细菌的平板上。
4.孵育：将带有滴加待测物的平板倒置，放入恒温培养箱（通常在37摄氏度）进行孵育。
5.观察抑菌圈：经过一定时间后，观察平板上的抑菌圈，通过测量抑菌圈直径来评估待测物质的抗菌活性。
影响抑菌圈直径的因素1.待测物质浓度：一般来说，随着待测物质浓度的增加，抑菌圈直径也会增加，因为更高浓度的物质具有更强的抗菌活性。
2.细菌菌株的敏感性：不同的细菌对待测物质的敏感程度有所不同，因此不同细菌菌株在相同浓度的待测物质下可能产生不同大小的抑菌圈。
3.孵育时间：不同的细菌在不同时间内生长速度不同，所以孵育时间对抑菌圈直径的大小有一定影响。
4.寒天平板的厚度：寒天平板的厚度越薄，细菌的扩散速度越快，抑菌圈直径也可能相应增大。
实验应用抑菌圈实验是一种常用的筛选抗菌物质的方法，常用于药物研发、食品安全检测和环境监测等领域。
通过观察抑菌圈的大小，可以初步了解待测物质对细菌的抑制能力，并进一步筛选出具有较强抗菌活性的物质进行深入研究。
结论抑菌圈实验是一种简单有效的方法，用于评估抗菌物质的抑菌活性。
实验结果可以提供初步的信息，但需要进一步的实验和研究来验证和确定物质的抗菌效果。
该实验在医学、食品和环境领域具有广泛的应用价值，对于保障人们的健康和安全具有重要意义。
实验教案设计：观察抑菌圈实验及其意义
实验教案设计：观察抑菌圈实验及其意义1.实验目的及意义：通过观察抑菌圈实验，使学生了解细菌的生长与分裂以及抑菌圈的形成原理；同时，通过抑菌圈的直接表示，以简明易懂的形式表达药物的抗菌性能，提高学生的实验动手能力和实验数据的分析能力。
2.实验要求及适用范围：本实验适用于中学生物课程的实验教学，要求学生依据教师提供的实验步骤和实验资料，自行设计实验方案，并进行实验操作。
同时，鼓励学生进行实验数据的分析和实验结果的讨论。
3.实验步骤：(1) 准备无菌培养基和细菌样品。
(2) 在无菌平板上，将细菌悬液接种于其上。
(3) 将教师提供的不同浓度的抗生素药片分别放在不同区域的平板上。
(4) 然后在恒温培养箱中进行培养，观测药片周围的细菌生长情况，以判断患者的感染情况。
(5) 结束实验后，观察每个药片周围的抑菌圈，计算药物的最小抑菌浓度，分析药物的抗菌性能。
4.实验结果分析及讨论：(1) 抗菌药物的抑菌效果会随着药物的浓度或种类不同而产生变化，教师可将不同浓度的抗生素药片和不同种类的药物提供给学生进行实验，以便学生比较不同药物的抗菌效果。
(2) 抑菌圈的大小与药物的抗菌效果成正比，药效越强，则抑菌圈的直径越大。
(3) 抑菌圈的形成是由于药物的杀菌成分能够有效抑制菌落的扩散，因此，抑菌圈的直径越大，则表明药物的抑菌能力更强。
(4) 通过实验观察，学生可以了解细菌在平板上生长的情况，以及药物的抗菌性能；同时，通过实验数据的统计和分析，学生可以进一步掌握实验结果的科学分析方法。
5.实验教学的改进方案：(1) 采用多样化的实验教学方法，例如，采用视频、图像等多媒体方式，使学生更加直观地了解实验流程和结果。
(2) 加强对实验设备、实验流程和实验注意事项的讲解，特别是细菌样品的准备和实验操作的无菌要求。
(3) 激励学生积极参与实验讨论和结果分析，鼓励学生发挥自己的创造力和创新精神，提高学生的实验观察能力和实验数据分析能力。
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抑菌圈法实验流程
实验目的：通过抑菌圈法检测不同抗生素对细菌的敏感性，为临床治疗提供参考依据。
实验原理：利用纸片或圆筒在琼脂平板上制造抑菌圈，测定不同药物对细菌的抑制能力。
当细菌被抗生素抑制生长时，抑菌圈周围的菌落会出现明显的清晰区域，即抑菌圈。
抑菌圈大小与细菌对该药物的敏感性成正比。
实验步骤：
1. 培养细菌：选取待测菌种，在无菌条件下接种于琼脂平板上，进行预培养。
2. 制备药物纸片：将不同抗生素药物浸泡在无菌纸片中，使纸片充分吸收药物。
3. 在琼脂平板上制造抑菌圈：用无菌铁环或无菌棉签将药物纸片放置于琼脂平板表面，轻轻压实，使药物充分扩散。
然后在纸片周围接种待测菌种，使其均匀生长。
4. 培养细菌：将琼脂平板倒置，放入培养箱中，在适宜的温度下培养细菌。
5. 观察抑菌圈：经过一定时间的培养，观察琼脂平板上细菌的生长状态，记录不同药物纸片周围的抑菌圈大小和形态。
6. 结果分析：根据抑菌圈的大小和形态，判断该菌株对不同药物的敏感性，为临床治疗提供参考。
实验注意事项：
1. 所有操作均在无菌条件下进行，避免外界微生物的污染。
2. 选择合适的药物浓度，避免药物过浓或过稀而影响实验结果。
3. 操作时要注意卫生，避免药物接触到皮肤或口腔。
4. 实验后应及时处理琼脂平板和药物纸片，避免造成环境污染。