动物组织细胞培养实验室的设计
动物细胞工程设计方案模板
动物细胞工程设计方案一、项目名称：____________________二、项目背景：____________________三、项目目标：____________________四、实验材料：1. 动物细胞：____________________2. 试剂：____________________3. 仪器设备：____________________五、实验方法与步骤：1. 动物细胞的培养：（1）取动物组织，剪碎并加入胰蛋白酶分解成单个细胞。
（2）制备动物细胞培养液体培养基，将细胞接种至培养基，放入二氧化碳培养箱中进行初代培养。
（3）当细胞增殖达到一定程度，出现接触抑制现象时，用胰蛋白酶再次处理，并用细胞悬液吹打贴壁生长的细胞。
进行细胞计数。
（4）依照计数结果，分瓶培养，进行传代培养。
获得细胞系或细胞株。
2. 动物细胞融合：（1）选择适当的融合方法，如电融合、聚乙二醇诱导融合等。
（2）将目的细胞和辅助细胞进行融合实验。
（3）筛选融合细胞，并进行鉴定。
3. 动物细胞核移植：（1）取成熟雄性青蛙的体细胞，去除细胞核。
（2）将正常雄性青蛙的体细胞的细胞核移植到去核卵细胞中。
（3）将移植后的卵细胞培养至胚胎阶段。
（4）将胚胎移植到受体青蛙中，观察发育情况。
六、预期结果：1. 成功培养出所需的动物细胞株。
2. 实现动物细胞融合，获得具有特定性状的融合细胞。
3. 成功进行动物细胞核移植，获得具有全能性的核移植胚胎。
七、实验结果分析与讨论：1. 分析培养出的动物细胞株的特性，与预期目标进行对比。
2. 分析融合细胞的性状，探讨融合效率和稳定性。
3. 分析核移植胚胎的发育情况，探讨细胞核全能性的实现程度。
八、实验结论：1. 成功实现了动物细胞工程的实验目标。
2. 掌握了动物细胞培养、融合和核移植的基本技术。
3. 为后续相关研究提供了实验基础和参考。
九、实验注意事项：1. 严格遵守无菌操作原则，确保实验材料的纯净度。
动物细胞培养的研究和应用
动物细胞培养的研究和应用动物细胞培养是一种非常重要的技术，它可以用来进行重要的研究、药物开发和生产等。
近年来，随着科技的进步，动物细胞培养技术也得到了很大的发展和广泛的应用。
本文将对动物细胞培养的研究和应用进行介绍和分析。
一、动物细胞培养的方法动物细胞培养是指将生物组织中的细胞，以一定条件下的体外培养方式，使细胞继续生长和增殖的技术。
动物细胞培养可以分为原代细胞培养和细胞系培养两种。
原代细胞培养是指将从生物组织中直接分离出来的细胞在一定条件下培养，可培养出小规模的细胞群，用于相关的实验研究。
而细胞系培养是先从生物组织中原代培养得到的细胞，经过放射线和化学物质等处理，其中一部分细胞经过某些条件或选择，使其具有无限增殖和传代的潜力，形成细胞系。
二、动物细胞培养的意义动物细胞培养具有重要意义，其主要体现在以下几个方面：1、科学研究动物细胞培养技术可以为生物学、医学、药学等科学领域的研究提供大量的细胞材料，推动了相关领域的研究进展。
在细胞遗传和细胞代谢研究方面，动物细胞培养也发挥了重要作用。
2、药物开发和生产动物细胞培养技术被广泛用于药物开发和生产领域。
通过长期大规模的细胞培养和检测，可以获得大量的生物数据，为开发新的药物提供重要的基础。
目前，动物细胞培养技术已应用于制造多种生物制品和药物。
3、临床医学动物细胞培养技术在临床医学领域也得到了广泛的应用，例如在体外人工合成器官等方面。
三、动物细胞培养的挑战和问题尽管动物细胞培养技术非常重要，但还存在着一些挑战和问题：1、细胞生长和传代能力在动物细胞培养过程中，细胞的生长和传代能力往往是一个挑战。
为了维持细胞的生命，需要给细胞提供适宜的生长和存活条件。
2、细胞纯度和稳定性动物细胞培养过程中，随着培养时间的增加及细胞的转移，细胞浓度和杂质含量会发生变化，需要对培养物进行定期监测，以保证细胞纯度和稳定性。
3、较高的成本和复杂性动物细胞培养技术往往需要耗费大量的时间、人力和物力，成本也相对较高。
1 动物细胞与组织培养_细胞工程
1）恒定的温度:37 ℃
41
2）PH：7.2-7.４
• 当PH低于6或高于7.6时的生长会受到 影响，甚至死亡。
石蕊试剂用来检测PH的变化： 红色--pH7.4，橙色--pH7.0，黄色-pH6.5，蓝红色--pH7.6，紫色--pH7.8。 更精确的检测，PH计。
42
3) 气体：
• 所需气体主要有氧气和二氧化碳。 • 氧气参与三羧酸循环，产生供给细胞生长 增殖的能量和合成细胞生长所需用的各种 成分。 • CO2有调节PH的作用。 • 开放培养时一般把细胞置于95%空气加5% 二氧化碳混合气体环境中。
根据培养细胞种类要求不同培养瓶的形态 各异，用于细胞传代培养的细胞要求瓶壁 厚簿均匀，便于细胞贴壁生长和观察，瓶 口要大小一致，口径一般不小于1cm，允许 吸管伸入瓶内任何部位。
39
三、培养条件
细胞在体外培养中所需的条件与体内细胞基本相同。
• 【讨论】
多细胞动物和人体的细胞都生活在内环境中，讨论体外培养 细胞时需要提供哪些条件？ 提示：充足的营养供给、适宜的温度、适宜的pH和气体环境， 无菌。
32
1、游走型细胞在支持物上分散生长，一般不连接成 片、形成群落； 2、细胞胞质常伸出伪足和突起。 3、生长位置不固定，呈游走和变形运动，速度快、 方向不规则。 4、细胞内易出现色暗的吞噬性颗粒。
33
（二）非附型细胞
• 悬浮生长细胞：血液白细胞、淋巴组织细
胞、某些肿瘤细胞、杂交瘤细胞、转化细
胞系等。
43
4）营养—培养基：
• 在保证细胞渗透压的情况下，培养液 里的成分要满足细胞进行代谢所需要的 各种营养，如包括十几种必需氨基酸及 其他多种非必需氨基酸、维生素、碳水 化合物及无机盐类等。只有满足了这些 基本条件，细胞才能在体外正常存活、 生长。 • 动物细胞的培养基一般分为天然、合 成、此外细胞培养还需要一些常用的溶 液。
高中生物《动物细胞培养》优质课教案、教学设计
2.2.1 动物细胞培养教学设计1.讲授法：对细胞培养过程进行疑难讲解。
2.自学法：学生先自学基本知识，完成导学案。
3.学案导学4.新授课教学基本环节：情境导入、激发兴趣→合作探究、精讲点拨→阅读教材、独立思考→反思总结、当堂检测课时安排：1 课时引入：烧伤病人的治疗通常是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植，但对于大面积烧伤病人来讲，健康皮肤很有限，请同学们想一想如何来治疗该病人？[动物细胞培养]动物细胞培养的概念：动物细胞培养就是从动物有机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后,放在适宜的培养基中, 让这些细胞生长和增殖. 动物细胞的培养过程：见课本P45：动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础（一）动物细胞培养的过程学习活动一：【合作学习】阅读教材并完成下列问题：1.为何动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞的呢？2.如何将动物组织分散成单个的细胞？系3. 胰蛋白酶的作用是什么？ 由此可说明细胞间的物质主要是什么成分？4. 培养瓶或培养皿的内表面为何要光滑、无毒？5、培养瓶中的细胞培养到什么时候就不再分裂、增殖？ 【动动手】请完成动物细胞培 养的流程图。
有关概念:• 原代培养： 从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。
初次培养称为原代细胞培养。
细胞株细传代培养： 将原代细胞 胞从培养瓶中取出， 配制成细胞悬浮液， 分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养， 称为传代培养。
细胞株： 原代细胞一般传至 10 代左右细胞生长停滞， 大 部分细胞衰老死亡， 少数细胞存活到 40~50 代， 这种传代细胞为细胞株。
细胞系： 细胞株传代至 50 代后又出现细胞生长停滞状态， 只有部分细胞由于遗传物质的改变，使其在培养条件 下可以无限制传代，这种传代细胞为细胞系。
传代培养原代培养细胞株和细胞系的区别：细胞系的遗传物质改变，具有癌细胞的特点，失去接触抑制，容易传代培养。
学习活动二：寻根问底，加深巩固1、选用组织时，一般用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做培养材料，而不用老龄动物的，这是为什么？2、胰蛋白酶处理组织时要注意什么问题？能够用胃蛋白酶代替吗？3、动物细胞培养能否最终培养成新个体？(二）动物细胞培养的条件思考：多细胞动物和人体的细胞都生活在内环境中，根据你所学的内环境的知识，思考并讨论以下问题：1.动物细胞培养时通常要添加抗生素，为什么？2.动物细胞培养时通常要添加血清，为什么？3.添加5%的CO2 是为了刺激细胞呼吸，还是为了维持培养液的pH 值？（三）动物细胞培养技术的应用1.大规模生产有重要价值的生物制品。
组织细胞实验室设计
组织细胞实验室设计以下是一个组织细胞实验室的设计，用于进行细胞培养和组织工程的研究：1.实验室布局：实验室应设计为开放式的，以便研究人员可以方便地进行交流和合作。
实验室应包括多个工作台、试剂柜和储存柜。
实验室应具有良好的通风和光线条件，以及适当的温度和湿度控制系统。
2.培养室：实验室的一部分应专门用于细胞培养。
这个区域应该有一个无菌环境，并且必须配备培养箱、细胞培养罩和显微镜等设备。
培养室还应配备培养介质、培养皿、离心机和冰箱等设备，以满足细胞培养的需求。
3.流体系统：实验室应配备适当的流体系统，以便提供细胞培养所需的培养液和其他溶液。
这个系统应包括水槽、水龙头、紫外线消毒设备和净化器等设备。
4.分析设备：实验室应配备各种分析设备，以便研究人员可以分析细胞的功能和特性。
这些设备可能包括流式细胞术仪、荧光显微镜和倒置显微镜等。
5.实验台和器材：实验室应提供充足的实验台和器材，以便研究人员可以进行实验和研究。
这些工作台应具有足够的空间，以便容纳实验设备和试剂。
实验台上还应配备显微镜、离心机、冷冻离心机、电子天平、振荡器等设备。
6.数据分析和处理：实验室应配备计算机和数据分析软件，以便研究人员可以对收集到的数据进行分析和处理。
这些设备应具有高性能和高存储容量，以满足分析和处理大量数据的需求。
7.安全设备和措施：实验室应配备必要的安全设备和措施，以确保研究人员和实验品的安全。
这些设备可能包括生物安全柜、防护服、手套和眼镜等。
8.储存和管理：实验室应配备适当的储存设备和管理系统，以便存储实验数据和实验样本。
这些设备包括冰箱、液氮罐和标本柜等。
综上所述，一个组织细胞实验室的设计需要考虑到各种方面，包括实验室布局、培养室、流体系统、分析设备、实验台和器材、数据分析和处理、安全设备和措施以及储存和管理。
这些设备和措施的配备将有助于研究人员开展细胞生物学和组织工程的研究工作。
《动物细胞培养》一节教学设计及实践反思
《动物细胞培养》一节教学设计及实践反思导读：学校每学期每位老师都有一节校内公开课。
本学期我选择了《2.2.1动物细胞培养和核移植技术（第一课时）》即《动物细胞培养》作为公开课即录像课的教学内容。
在课前经过了自己精心准备但是具体实施的教学结果却不令人满意。
通过“有效上课”专题的学习研究，我认真反思了自己这节课不成功的原因，与大家交流。
说明：第一部分公开课时《动物细胞培养》的教学设计第二部分课后的几点教学反思第三部分反思后的《动物细胞培养》教学设计一、教学目标简述动物细胞培养的过程、条件及应用。
二、教学重点、难点1. 教学重点动物细胞培养的过程及条件。
2. 教学难点动物细胞培养的过程及条件三、教材分析动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。
在动物细胞培养技术之后介绍的核移植技术、动物细胞融合技术、生产单克隆抗体以及胚胎工程都要用到动物细胞培养技术。
掌握好这项技术才能为其他技术打好铺垫。
所以把动物细胞培养讲的清清楚楚、明明白白就十分重要了。
在动物细胞培养的教学中，可把这部分内容归纳成三个问题：（1）为什么要进行动物细胞的培养？——即培养的用途（2）什么是动物细胞的培养？（3）怎样进行动物细胞的培养？第三个问题是本节课的重点。
四、学情分析动物细胞在体内的增殖学生是了解的，在体外如何实现细胞增殖的，有什么特点以及培养后的细胞有什么用途都是可以激发学生的学习兴趣。
对于动物细胞培养的条件，则要从学生已有的内环境的知识出发，启发学生自己动脑思考这个问题，以加深对培养条件的理解。
学习了植物细胞工程的基础上再去联系动物细胞培养技术，并能作出二者的比较。
五、教学过程（我将本节所以设置的问题或问题组或活动编号）5.1课堂导入：师展示两幅烧伤程度不同的病人图片。
提问如何治疗呢？生答。
师进一步提问：如何获得大量健康的自体皮肤来治疗？生答。
5.2新知学习师：通过培养皮肤细胞可获得健康皮肤细胞，那么什么是动物细胞培养?培养过程有什么特点以及培养的细胞用途有哪些呢？本节课一起来解决？师展示图片:动物细胞培养的概念。
动物细胞组织培养(精)
将贴满细胞壁的细胞用胰蛋白酶处理，然 后继续增殖。 这样的过程叫做传代培养
8、如何理解原代培养和传代培养？ 在第一培养瓶中培养就是原代培养，之 后转移到其它培养瓶中培养就是传代培 养 9、传代培养的细胞能一直传代下去吗？ 不都能 10、有些为何能一直传下去？ 发生突变，朝着癌细胞方向发展 11、人类一般保存的是哪类细胞呢？为什么？ 保存10代以内的细胞，因为10－50部分 细胞的细胞核型可能发生变化，有少部分 还发生突变向癌细胞方向发展
4、为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞？
成块组织不利培养，分散了做成细胞悬浮 液利于培养，使每个细胞与培养液接触
5、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成 新个体？
不能，动物细胞培养只能使细胞数目增多，因 为动物细胞的全能性会随着动物细胞分化程度 的提高而逐渐受到抑制
6、培养瓶中的细胞培养到什么时候就不再 分裂、增殖？ 当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时， 细胞分裂就会停止分裂增殖，这种现象 叫接触抑制。 7、如此时细胞数量并未达到人们的需求，应 该怎样办？
?）
防止培养过程中污染 防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害
(2)、培养基 成分： 葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等
种类： 天然培养基：主要取自动物血清，组织提取液，营 养价值高，成分复杂 合成培养基：人工配置，成分明确，便于控制试验 条件
和植物组织培养基相比有何独特之处？
液体培养基 、成分中有动物血清等
(3)、温度和PH 36.5+（-）0.5度, 7.2-7.4 (4)、气体环境 O2和CO2
4.动物细胞生长特性：
细胞贴壁： 悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上， 称为细胞贴壁。 要求： 培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴 附。 细胞的接触抑制： 当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞 就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑 制。
细胞工程第二章：动物细胞培养实验前准备yhy
1．无菌操作区 （1）无菌操作室应划为三部分：更衣室、缓冲间、无菌
操作间。无菌操作间专用于无菌操作、细胞培养。其大小 要适当，且其顶部不宜过高（不超过2.5m）以保证紫外线 的有效灭菌效果；无菌操作间的空气消毒：紫外线灯产生 臭氧，并且室内温度及湿度均较高，不利工作人员健康； 要装备空气过滤功能恒温恒湿装置。 （2）净化工作台：操作简单，安装方便，占用空间小且 净化效果很好。一般细胞培养室使用的净化工作台主要有 两种：a)侧流式或称垂直式 b)外流式或称水平层流式。 2．孵育区 本区对无菌的要求虽不比无菌区严格，但仍需清洁无尘， 因此也应设置在干扰少而非来往穿行的区域。
动物细胞室实验制度与规范1：
6．实验室中的昂贵设备，未经许可，不得擅自开关。精 密仪器必须经过专门培训方能上机操作，并严格遵守操作 规程。
7．实验人员必须按规定的主要仪器参数进行操作，未经 许可，不得随意更改有关仪器设备的技术参数，仪器设备 出现故障或发生事故，应立即报告。
8．操作完成后，用1：1000的新洁尔敏溶液或75％酒精 擦台面。出门前注意关闭酒精灯、照明灯，超净台。
3．制备区 在该区主要进行培养液及有关培养用的液体等的制备。
4．储藏区 主要存放各类冰箱、干燥箱、液氮罐、无菌培养液、培养
瓶等，此环境也需要清洁无尘。
5．清洗和消毒灭菌区 清洁和消毒灭菌区应与其他区域分开，主要进行所有细胞
细胞工程 Cell Engineering
第二章 动物细胞培养
动物细胞培 养就是从动物有 机体中取出相关 的组织,将它分散 成单个细胞,然后, 放在适宜的培养 基中,让这些细胞 生长和增殖.
动物细胞培养技术的应用
蛋白质生物制品的生产 如病毒疫苗、干ห้องสมุดไป่ตู้素、单克隆抗体