交叉配血中的各种不配合性问题处理方法与实验

解决交叉配血中的不配合性问题
（一）、红细胞缗钱状形成。

红细胞缗钱状形成是血清在室温和37摄氏度引起所有试验细胞出现凝集的一种性质。

因为洗涤去掉了所有的血清，所以缗线状形成不影响抗球蛋白试验。

当形成缗钱状时，可采用下述两种方法对其进行分散： 1、在试管内加1--3滴生理盐水，缗线状可消散。

2、如果加了盐水而缗钱状继续存在，可将血清和细胞孵育的一，离心移出血清，用等量生理盐水代替，轻轻混合，离心，并在显微镜下观察。

由于蛋白已经稀释，所以缗钱状应消散，而凝集不会因此种处理而改变。

（二）、特异性同种抗体的存在。

交叉配血中抗体筛选试验阳性和自身对照阴性就表明有一种或数种同种抗体存在。

如果这种抗体是对抗一种稀有抗原的，则抗体筛选试验可以是阴性，在做单一的交驻配血时，可以出现不配合，当检出意外的同种抗体时： 1、如果可能，检写抗体的特异性。

2、如不符合，用缺乏相应A或B型细胞确定ABO血清的型别。

3、用特异性抗血清试剂检定供血者的型别，而且只选择缺少相应抗原的供血者的细胞做交叉配血。

4、如果抗体是高频率红细胞抗原的或有多种抗体存在，可选用病人的直系亲属作供血者。

（三）、自身抗体：
自身抗体通常是抗I或抗IH，在室温条件下与所有试验的红细胞发生阳性反应，在检查病人细胞的ABO和Rh血型中，由于这种抗体吸附在自己的红细胞上，试验可以遇到困难。

1、用37摄氏度温盐水洗涤病人的红细胞，通常可以去除红细胞上的自身抗体。

2、用洗涤过的细胞来确定ABO和Rh血型。

3、自身吸收病人的血清，并用已吸收的血清确定ABO血清型。

4、用吸收过的血清做抗体筛选和交叉配血。

如果发现同种抗体也存在，鉴定此种抗体并挑选缺乏相应抗原的供血者的细胞作交叉配血。

（四）在抗球蛋白试验中反应的自身抗体：
如果病人直接抗球蛋白试验阳性，他们的自身对照同时也出现阳性，这发生在自身免疫性贫血中，在多种药物致敏中以及在有同种抗体的受血者中，这种同种抗体已吸附在输注的供血者的细胞上。

当药物治疗引起的抗球蛋白试验阳性时，交叉配血很少发生困难，因为抗体不与筛选细胞上或供血者细胞上的抗原发生反应。

如果病人在3个月内输过血，可以产生同种抗体。

这种抗体可以吸附在供血者的红细胞上，如果这种抗体弱，在病人血清中可能显现不出，因为血液循环中的细胞完全把它吸收了，血清还可以含有与吸收过的抗体不同特异性的同种抗体。

当在新输血的病人中，用抗球蛋白血清的自身对照是阳性：
1、用IgG和C3单特异性抗球蛋白血清，以确定包被红细胞的蛋白质的性质。

2、如果证明它是IgG，从这些细胞上洗脱蛋白质，并检查洗脱物，以鉴定抗体的特异性。

如果补体是病人的细胞上唯一的蛋白质，则在洗脱物中查不出抗体的活性。

3、鉴定病人的血清内的抗体。

4、对已在洗脱物和血清中检出抗体的病人，选择缺乏此抗体的相应抗原的供血者血液。

5、如果在红细胞上和血清中是同样抗体，而血清抗体相当强，就用病人的血清与供血者细胞做交叉配血。

6、如果在血清中没有检出抗体活性，用洗脱物做交叉配血。

7、如果抗体具有不同的特异性，用洗脱物和病人的血清两者作交叉配血。

具有阳性直接球蛋白试验的红细胞不能用需要抗球蛋白技术的抗血清来检定血型，如果用高蛋白抗D，致敏的细胞可以产生假的Rh结果。

应当用在盐水稀释剂中的抗血甭或经
化学上改性的抗血清作抗原检查。

如果病人的Rh状况可疑而输血又是必须的，应当输Rh 阴性血液。

（五）假阴性反应：
应该出现凝集而未凝集，称假阴性反应。

1、标准血清效价太低，亲和力不强。

标准血清效价低，保存方法不当或贮存过久，使其凝集力减弱。

可将A2型误认为是O型，A2B型误认为是B型。

在这种情况下，除使用A、B血清外，坚持增加标准O型血清定型。

2、被检红细胞敏感度过低，如新称儿红细胞血型扩原形成不足，老年人红细胞敏感性下降，A2及A2B型红细胞中的A抗原较弱，需要用标准的A、B、O型红细胞检测血清中抗体来正确定型。

3、红细胞悬液过浓或过淡。

如果红细胞悬液过浓，标准血清中的抗体全部被吸收，而不凝集，红细胞悬液太淡，抗体浓度高，而不易凝集或凝集很弱，未被发现。

4、溶血反应：如果标准血清灭活不全，可以溶血。

由于溶血后红细胞减少，容易将溶血误认为不凝集，造成配血错误。

5、溶解抗原或血型物质的中和作用。

未经洗涤的红细胞悬液中带有血清或血浆中的血型物质。

特别是轻度溶血时，部分红细胞溶解，释出大量溶解抗原，可将血清中相对抗体中和，导致抗体不足，使红细胞不能凝集。

6、试验时间过短。

血型抗原抗体反应需要一定时间，时间不足，较弱的凝集就不能出现。

因此，玻片法不能少于10min，不完全抗体配血不得少于1小时。

7、温度不适当。

完全抗体作用最适温度多在20摄氏度，不完全抗体作用的最适温度是37摄氏度。

因此，ABO血型定型和盐水配血应室温，检查不完全抗体应在37摄氏度下进行。

8、轻度凝集误认为不凝集，需要在显微镜下观察。

9、不完全抗体遮断引直的假阴性。

新生儿溶血病时，细胞上的血型抗原被体内的不完全抗体致敏，从而遮断其与同一种特异性的完全抗体的反应，以致定型出现错误。

（六）假阳性反应：
在血型鉴定或配血中，凡没有相对应的特异性抗原抗休存在，本不应发生凝集，而出现了非特异性凝集或类凝集现象，称假阳性反应。

1、寒冷凝集：健康人血清中的冷凝集素效价一般不超过1：16，在0--5摄氏度时作用最强，在28摄氏度时通常不发生凝集。

鉴定时可以在37摄氏度下进行，报告时要注明有寒冷凝集现象。

2、H凝集：各型人红细胞都含有H抗原，如标准血清受到细菌污染，可以产生一种抗H 抗体，与红细胞上的H抗原对应，所以这种血清能凝集任何人的红细胞，称全凝集。

3、T凝集：细菌污染红细胞悬液，或病人有感染史，可使红细胞产生全凝集或多凝集现象。

因为人的血清中含有T抗体，红细胞含有不活动的T抗原，某些细菌污染细胞后，能使原来无活动性的T抗原，从而能被各型人的血清凝集。

4、类B抗原：某些受肠道革兰氏阴性杆菌感染的病人，红细胞获得类B抗原，A型病人可误定为AB型，O型误定为B型。

5、脐带华通氏胶引起的凝集：脐带中含有华通氏胶带，如脐血污染，此胶可以出现假凝集。

其特点是在混匀玻片时，随着玻片的侧动而出现凝集，放置后，凝集又可散开。

6、青霉素抗体引起凝集：注射青霉素后，有些人的血清中含有青霉素抗体，而青霉素可以吸附在红细胞的表面，当此红细胞与含有青霉素抗体血清相遇时便能发生凝集。

7、磺胺引起凝集。

8、自发性或继发性凝固不是抗原抗体反应，而是因为采血动作迟缓，血液自行凝固，或是红细胞未经洗涤，这种凝固往往可以看到白色的纤维蛋白网。