采用Ⅳ 型胶原酶构建大鼠脑出血模型
不同剂量胶原酶Ⅳ尾壳核内注射建立重度出血性脑卒中大鼠模型

第3 8卷 第 4期
20 0 8年 7月
温
州
医
学
院
学
报
V0 3 8 NO. l 4 J 12 0 u .0 8
J u n lo e ho e c lCo l g o r a f W nz u M di a le e
融
不同剂量胶原酶 I 尾壳核 内注射建立重度ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ血性 V
脑卒 中 大 鼠模 型
王 振 忠 , 诸 葛 启 钏
( 温州医学院第一附属医院 神经外科 ,浙江 温州 3 5 0 ) 2 0 0
霸
[ 要] 目的 : 摘 通过胶原酶 I尾壳核内注射 , 索建立一种稳定的重度 出 V 探 血性脑卒 中大鼠 模型。方法 :4 5
r d m y d v d d i t r u ,g o p B a d g o p C n m l n 3 g o p e e v d i j c i n o o l g n s n a o l i i e n o g o p A r u r u .A i a s i u s r c i e n e t o f c l a e a e n r
A 、 组 间作 两 两比较 差 异均 有显 著性 ( < .1 。脑血 肿 区组 织病 理 学观 察表现 为典型 的脑 出血 改 变。 、B C 3 P O0 )
结论:0 7 V型胶原酶尾壳核 内注射可以诱导建立稳定的重度 出血性脑卒中大鼠模型,该模型肢体 功 .5 U I
能缺损 明显 , 存活 率 高 ,能作 为促进 出血性 脑 卒 中大 鼠神经 功 能 恢 复研 究 的可 靠应 用平 台。
[ 关键词] 胶原酶类;脑血 管意外;模型 ,动物 [ 中图分类号] R 4 .4 [ 733 文献标识码] A [ 文章编号] 10— 18 20 )40 1—3 0023(08 0— 340
两种脑出血动物模型的制备和比较研究

两种脑出血动物模型的制备和比较研究魏纯纯;王培;缪朝玉【摘要】目的本研究制备两种脑出血动物模型:脑缺血后使用tPA诱导的出血转化模型(MCAO-HT)及胶原酶注射诱导的脑出血模型(clCH),并比较两种出血模型的异同及可能的优缺点.方法 MCAO-HT模型:栓线经颈内动脉入颅,堵塞大脑中动脉,构建线栓法大脑中动脉堵塞模型,堵塞后5h静脉注射组织型纤溶酶原激活剂(tPA,10mg/kg)制备脑缺血后出血转化模型;cICH模型:利用脑立体定位技术,直接向纹状体注射0.05U胶原酶Ⅳ,诱导脑出血模型.结果 MCAO-HT模型小鼠较MCAO模型小鼠,24h患侧半脑血红蛋白含量显著升高,MCAO-HT模型小鼠血-脑脊液屏障(BBB)通透性显著高于MCAO模型小鼠;cICH模型小鼠,较假手术组小鼠,24h神经功能损伤、脑水肿、出血量和炎性水平都有显著升高.结论 MCAO-HT 模型引起的出血为tPA诱导BBB通透性增加,导致的“渗血”,可能更适用于对血-脑脊液屏障及血管通透性的研究.而clCH模型引起的出血为胶原酶直接破坏小血管壁导致的“漏血”,可能更适用于出血诱导的水肿、炎性反应、细胞死亡和氧化应激的研究.【期刊名称】《医学研究杂志》【年(卷),期】2016(045)011【总页数】6页(P39-44)【关键词】脑缺血;出血转化;脑出血;动物模型【作者】魏纯纯;王培;缪朝玉【作者单位】200433 上海,中国人民解放军第二军医大学药理学教研室;200433 上海,中国人民解放军第二军医大学药理学教研室;200433 上海,中国人民解放军第二军医大学药理学教研室【正文语种】中文【中图分类】R96脑卒中是脑血液循环障碍引起的急性脑血管病,因为循环障碍的原因不同主要分为缺血性脑卒中和出血性脑卒中,也分别称为脑缺血和脑出血(intracerebral hemorrhage,ICH)。
缺血性脑卒中约占全部卒中的80%,是由各种原因引起的局部脑组织供血障碍,导致缺血缺氧性的脑组织病变坏死,进而造成一系列的神经功能损伤。
米诺环素对大鼠脑出血后bFGF表达的影响

米 诺 环 素 对 大 鼠脑 出血 后 b G F F表 达 的 影 响
王 睿智 ,师 蔚 ,濮瑶楠 ,王子章。
( . 安 交 通 大 学 医学 院第 二 附 属 医 院神 经 外 科 , 1西 陕西 西 安 7 0 0 ;. 西省 肿 瘤 医 院 头颈 外 科 , 西 西 安 7 0 6 ) 1042陕 陕 1 0 1
【 要】 目的 摘
研 究 米诺 环 素 ( MC) 实验 性 脑 出血 后 碱 性 成 纤 维 细胞 生长 因子 ( F ) 达 的 影 响 。方 法 选 用 对 b GF 表 i )I 0 ,CH 组 、 MC组 随机 分 为 1 2 4 7和 、、、
sa go p( h m r u 一 1 0,wih 4 d y fe d l ga h e e a o t o o n ,n 5f ri t a sa t rmo e i st e g n r l n r lp i t = o mmu o it c e s r n : 5f r n c n h s o h mit ya d o RT— PCR) .Th n CH o t o r u n e ,I c n r lg o p a d MC r a me tg o p we er n o y s b i i e n o 5 s b r u s ( d,2 t e t n r u r a d ml u d v d d it u g o p 1 d,4 d,
1 0 ma eS r t 2 0 2 0 ) we e r n o y d vd d i t CH o to r u ( = 5 ) 1 l D a s( 0 — 5 g r a d ml i i e n o I c nr l o p n g 0 ,M C t e t n r u ( r a me tg o p : 5 )a d 0 n
胶原酶和自体血注入法建立脑出血动物模型的比较

Co p rs n o n r c r b a e r h g ni a o e se t b ihe m a io f i t a e e r lh mo r a e a m lm d l sa ls d
b jcigc l gn s n uoo o sbo d yi et ol e aea da tl u lo n n a g
401) 0 0 6
伍修 宇
( 重庆 医科大学神经科学研究 中心 , 重庆
摘要
目的: 为脑 出血发病机制和/ 或干预性状核 建立脑
出血 ( H) I 模型 , C 运用磁共振成像( I、 MR )干湿重法 、 伊文思蓝( B 测定法 、 E) 免疫荧 光和免疫 印迹分别 比较两组脑 出血模型 的 血肿体积 、 脑含水量 (WC 、 B )血脑屏 障 ( B ) 透性 和水通 道蛋 白 4 AQ 4 的表 达变 化。结果 : B B通 ( P) 两组 脑 出血模 型在 MR 、 I B 、 B含量和 A 4的表达变化均存在差异。结论 : WC E QP 自体血模型是较为接近临床的脑 出血动物模型 。 关键词 脑出血 ;动物模型 ; 胶原酶 ;自体血 ; 水通道蛋白 4 大 鼠 ;
采用胶原酶加肝素构建大鼠脑出血致多器官功能障碍综合征模型

+肝 素钠 组 缓 慢 注入 Ⅶ 型胶 原 酶 66 8n a 和 3 U . kt 6 . I 5
O 引 言
肝 素钠 混 合液 2 L Ⅶ 型胶 原酶 1 .3 k t 肝素 钠 ; 33 6n a + 组 注 入 Ⅶ 型 胶 原酶 1.3 k t 35I 肝 素钠 混 合 33 6n a 和 . U 液 2 L 留针 1 i , 0m n后缓 慢退 出。假手 术组 注射 等体
1 材 料和方 法 设计 : 随机对 照实 验 。 单位: 山东大 学齐 鲁 医院神经 内科 。 材 料 : 验 于 2 0 一 12 o — 2在 山东 省 医学 科 实 0 3 l/ 0 4 0
意识 、 精神 状态 、 肢体 活动 等情 况 。 动 物麻 醉后 , 录 将 记
各时相 点 动物 的体 温 、 吸 、 率改 变 。 呼 心 常规 消毒 皮肤 , 颈 静 脉抽 血 5 m , 于 化 验 血 常 规 、 肾功 能 、 肌 L用 肝 心
酶 。 开胸 暴露 心 脏 从 左 心 室 经 升 主 动 脉 插 管 ,先 以 2 0m 0 L生 理盐水 快速 灌注 , 以质 量浓 度为 4 / 后 0gL的
多聚 甲醛 2 0mL缓慢 灌 注 , 0 注毕 立 即取 脑 置于 4 / 0g L 的多 聚 甲醛 溶液 内固定 。 同时 迅速取 肺脏 、 脏 、 肝 肾脏 、 小肠 , 察 大体 标本 的形 态 变 化 , 于 4 / 观 置 0g L的 中性
升高( P(0O ) 且 Ⅶ型 胶 原 酶 l . 6 n a + 肝 素钠 组 各指 标 升高 幅 度 .1 , 33 k t 3
动 物模 型 的建 及给 药 : 除正 常对照组 外 , 其余 组
均 造模 ~调 整 肭立 体 定 向仪 , 门齿 钩平 面 比耳 问线 使 平 面 低 24 ml 将 大 鼠俯 卧 [ 定 在立 体 定 向仪 上 , . i, l 舌 1 此 时前 囟 和后 肉基 本 在 同 一平 面 . ] E 。常规 消 毒 头顶 皮 肤 , 矢 状缝 切 开 头 皮 , 沿 暴露 前 囟 及冠状 缝 , 于前 囟前 02mm,中线 右侧 旁 开 3Im,用 牙科 钻 钻 一 直径 约 . l Y 1 m 的 圆孔 , 度 达 硬 脑 膜 表 面 , 伤 及 脑 组 织 。 .m 5 深 不 在 立 体 定 向仪 的引 导 下 , 微 量 注射 器 ( 头 直 径 约 用 针
地塞米松对高血压脑出血大鼠模型水通道蛋白4表达的影响

地塞米松对高血压脑出血大鼠模型水通道蛋白4表达的影响(2.陕西省人民医院陕西西安 710068)【摘要】目的:观察地塞米松对高血压脑出血大鼠模型脑组织水通道蛋白-4表达的影响。
方法:将60只成年健康雄性SD大鼠均用胶原酶诱导脑出血,并随机分为2组,无干预组(n=30)、地塞米松干预组(n=30),并按时间分成6h、12h、1d、3d、5d、7d 6个亚组(n=5)。
分别检测各组大鼠脑水含量和脑组织AQP4表达。
结果:与无干预组相比较:1.地塞米松干预组大鼠脑组织含水量在1、3、5d时间点显著低降低(P<0.05);2.AQP4表达水平减弱,尤其是在3d时间点(P<0.05)。
结论:(1)地塞米松能减少胶原酶诱导的脑出血模型大鼠脑组织水含量;(2)地塞米松可以降低胶原酶诱导的脑出血模型大鼠脑组织AQP4表达水平。
【关键词】高血压;脑出血;地塞米松;水通道蛋白-4【中图分类号】R459 【文献标识码】B 【文章编号】1003-5028(2015)6-0779-021 前言近年来有许多研究发现,高血压脑出血(Hypertensive intracerebral hemorrhage,HICH) 与在脑内高度表达的水通道蛋白-4(AQP4)关系密切[1]。
本实验通过建立胶原酶诱导的大鼠脑出血模型,评估应用地塞米松(DEX)后,血肿周围水肿区脑组织含水量的变化及AQP4表达的变化,并探讨水通道蛋白-4与脑水肿的相关性。
2 材料和方法2.1动物和药品SD健康雄性大鼠60只,体重220-250g,标准颗粒喂养和饮用纯净水,由大连医科大学动物实验中心提供。
大鼠随机分为2组:胶原酶诱导脑出血组(n=30)、脑出血后地塞米松干预组(n=30)。
其中胶原酶诱导脑出血组和脑出血后地塞米松干预组按造模后6h、12h、1d、3d、5d、7d时间点分成6个亚组(n=5)。
从实验开始到结束,饲养室温度始终保持20-25℃和湿度恒定。
t细胞免疫球蛋白黏蛋白分子-3在脑出血大鼠模型血肿周围组织中的表达

临床医药文献电子杂志Electronic Journal of Clinical Medical Literature 2020年第 7 卷第 8 期2020 Vol.7 No.889 T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子-3在脑出血大鼠模型血肿周围组织中的表达王光进(招远市人民医院外一科,山东烟台 265400)【摘要】目的 目前对T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子-3(TIM-3)的研究主要倾向于其免疫介导作用,在脑出血领域研究不多。
同样作为一种炎性指标,本文重在研究其在脑出血大鼠模型血肿周围组织中的表达,探讨TIM-3在脑出血损伤中的价值,减少脑出血二次损伤造成的病情加重,并为脑出血免疫治疗提供依据。
方法 大鼠脑出血模型的建立依靠Ⅳ型胶原酶,分为脑出血≤6 h组(1组)、6~24 h组(2组)、24~72 h组(3组)和>72 h组(4组),每组10只,另外选取正常脑组织10例作为对照组(5组),灌注取脑后,逆转录聚合酶链反应法检测T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子-3 mRNA的表达。
用SPSS 11.0及Excel软件进行统计处理。
采用方差分析和t检验进行分析。
结果 1-4为不同脑出血时间实验组TIM-3基因扩增产物,5为对照组TIM-3基因扩增产物。
TIM-3基因扩增产物为558bp,β-action扩增产物为299bp。
图像分析仪测琼脂糖凝胶上TIM-3/β-action扩增产物的平均灰度,1-5其基因表达量与其对应的β-action表达量的比值分别0.30±0.07、0.45±0.13、0.67±0.12、0.53±0.16、0.26±0.12。
与对照组相比,1组血肿周围组织TIM-3的表达差异无统计学意义(P>0.05),其他组血肿周围组织中TIM-3的表达提示差异有统计学意义(P<0.05)。
3组血肿周围组织中TIM-3的表达显著高于其他各实验组,差异具有统计学意义(P<0.05)。
脑出血动物模型研究进展

脑出血动物模型研究进展段晓春王中陈罡【摘要】本综述为了深入研究脑出血的病理生理过程,对目前用来开展科学研究的常用脑出血模型,包括胶原酶注射脑出血模型,自体血注入脑出血模型,微球囊充盈脑出血模型,高血压性脑出血模型进行了总结。
在本文中笔者将详细探讨狗、兔子、猪等不同动物模型制作方法、病理生理机制以及在研究中的优点和缺点。
【关键词】脑出血;动物模型;研究进展The research progress of animal model of cerebral hemorrhage Duan Xiaochun,Wang Zhong, Chen Gang.The Department of Neurosurgery,The First Affiliated Hospital of Soochow University, Suzhou215006,ChinaCorresponding author:Chen Gang,Email:nju_neurosurgery@【Abstract】For the reason to study the procedure of pathophysiology of cerebral hemorrhage, this review has summarized the models currently used in cerebral hemorrhage scientific research including cerebral hemorrhage model by injection of collagenase,by injection of autologous blood,by filling microsphere and by hypertensive.In this paper,the author will discuss in detail the making method of different animal model such as dog,rabbit,pig,etc.and pathophysiological mechanism and advantages and disadvantages in the research work.【Key words】Cerebral hemorrhage;Animal model;Research progress脑出血是一种致残率和致死率极高的疾病,占所有中风病例的15%[1]。
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Z AN a—n ,C E 6 —ig H O S uqn H GY nlg H N I i mgnn ,S A h—i,WA G Yn ( eam n o Nu ly Su ws Hsil hdMl r Md a Ui rt N i g Dpr et f e o g, ot e o t,Ti ia ei l ne i t ro h t pa r iy t c v sy
n i e n i f m t ai i cr ao i o m f u o j t t h ba adrl l,adteseo e a m orlinwt tevl eo sl i s n c di ot ri. ea b h z h o sn et hh u tn ie e n e o n
中 图 法 分 类 号 : 一3 ; 35 R 4 .4 R 32 R 4 ; 7 33 文 献 标 识 码 :A
E tbi me t frtcrb a e rh g d l ytp sa lh n a ee rl mo r a emo e eⅣc l gn s jcin s o h b y ol e aei et a n o
心提供 ; Ⅳ型胶原 酶 ( 国 St a公 司) 肝 素钠 注射 液 ( 生物 美 i  ̄l ; 沪 1 0 / )江湾 型动物头颅 立体定位仪 ; 250U2m ; 1 微量 注射 器 ; 微量
分析天平 ; 恒冷 冰冻切片机 。
12 . 方法
12 1 动物分组 Wia 大 鼠随机分 为生 理盐 水对 照组 、 .. sr t Ⅳ 型胶原酶组 、 Ⅳ型胶原酶, 肝素 钠组 , 中 Ⅳ型胶原 酶, 其 肝素 钠组
提 要 :目的 利用 Ⅳ型胶原酶构建 大 鼠脑 出血模 型 , 并研究血肿 形成速度 和血肿 形成 大小 的影响 因素 。方法 使 用健 康雄
性 2 0 5 Wia 大 鼠, 0 ~20g s r t 随机分组 , 分别脑 内尾状核 注 射不 同容 积 Ⅳ型胶原 酶, 素 生理 盐水 溶 液 、 肝 单纯 Ⅳ型胶 原酶 生理 盐 水溶 液、 单纯生理 盐水 , 于术后 6h 1 、 、 d7d 、2h2 h 3 、 分别 观察冰冻切 片连 续切 片血肿大小 。结 果 单纯 生理盐水注 射仅引起 1 4 2h内的 针道 渗血 , 纯胶原酶生理 盐水注射 3d可以形成直径 3F 单 l 右 的血肿 , i m左 Ⅳ型胶 原酶, 素生理盐水 注射 2 肝 4 h可形 成直径 3F l i m左 右 的血肿 。结论 Ⅳ型胶原酶, 素生理盐 水注射可 以建立 理想稳定 的脑 出血动物 模型 , 肝 且血肿大小 和注射溶 液容积呈正相 关 。 关键词 : 原酶 ; 出血 ; 胶 脑 动物模 型
研究很多 , 动物模型有很多种 。曾经使用水 、 气囊模仿 脑 出血 的 占位 效应 , 后 采 用 自体 血 脑 内注 射 的 自体 之 血肿 模 型 … , 及 目前 使 用 较 多 的 胶 原 酶 脑 出 血 模 以 型l 。水 、 2 J 气囊可以模仿脑 出血后的 占位效应 , 但不能 反映 出血后 局 部红 细胞 在 病 理 生 理 中 的作 用 ; 自体 血 肿 模 型很 好 的解 决 了 上述 问 题 , 是 自体血 肿 模 型 是 但 人 为 的血 肿 过程 , 肿来 势 突然 ; 血 胶原 酶脑 出血模 型 相 对 更接 近 病理 过 程 , 现 了一 个 逐 渐 渗 血 的过 程 。 目 体 前 利 用胶 原 酶构 建脑 出 血 动 物 模 型 主要 有 两 种 , 别 分 使 用 Ⅳ型胶 原酶 和 Ⅶ型 胶 原酶 。我们 使 用 Ⅳ型 胶原 酶 配合肝素建立动物模型 , 实验证 实Ⅳ型胶原酶可达到 稳定的脑 出血效果 , 配合肝 素局部注射可 以加快脑 出 血血 肿 形成 的速度 。
的方 法参 照文献 E ~6 , 鼠术前 1 禁食 , 禁水 , 0 4 3 ]大 2h 4h 用 .% 戊 巴比妥钠 腹腔麻 醉 , 保证 手 术操 作 期间 大 鼠有 自主 呼吸 , 俯 卧 固定 于江湾型动 物头 颅 立体 定位 仪上 , 头皮 丁 字切 开 , 取前 囟为原点 , 向右 3F 向后 1F 深 度 5F i l m, i l m, i l 注射点( m为 尾状 核 )骨钻钻 开 颅骨 , 针后 缓慢 注 射药 物溶 液 , , 进 留针 2mn 缓 i, 慢退 针 , 骨蜡 封闭颅骨钻 孔。缝合 皮肤 。术 中大 鼠肛温 保持 在
从事脑血管病方 面的研究。电话 : 36 720 ( )8 595
收 稿 日期 : 0 4 ,9 修回 日期 :O21- 2 2) 1; 0 7 2O , 1 05
第l 2期
张艳玲 , . 等 采用 Ⅳ型胶 原酶构建大 鼠脑 出血模 型
l9 35
心耳剪开一小 口做 出 口。4 ℃生 理盐 水 10m 快 速灌 注 , 后 0 l 之 稍减慢灌注速 度冲洗至 流出液 清亮 , 4 换 %多聚 甲醛 10m 快 0 l 速灌注 , 之后稍减慢 灌注 速度 继续 固定 , 灌注 约 3 n至动 物 0mi 四肢变硬 。断头取脑 , 以注射针道 为中心做冠状 切片 , 厚度约 5 m 3 %蔗糖,%多聚 甲醛 液脱水后至恒 冷 冰冻切 片机做连 续 m,0 4 切片, 切片后测量 血肿直径 。
文章编 号 : 0 — O (02 1— 9 - 1 05 42O )21 4 2 0 4 3 0
采 用 Ⅳ 型 胶 原 酶 构 建 大 鼠脑 出血 模 型
张艳玲 陈康 宁 邵淑 琴 王 英 ( , , , 第三军医大学: 附属西南医院神经内科; 基础医学部病原生物学教研室 , 重庆 403) 008
v e t 3g us cnr , oaeae ndcl eaehp r op. n a oeg us ci j t no sle o aea 0 2U i dio r p , o tl cl n ,a o a n /ea ng us A i li t s r p e e i e i i ,cl n e( . / d n o o l s g l s g i r m s nh o r v n o fa n e d c l s g ) ndcl eae(al ds)adhpr 2u t)wt dfrn vl ers cvl a tecuaenc u. h o m f ehm t ai ,a oa n l s SB o n ea n( / g e e i a i ie t o m p te t adt ul s T evl eo e a m h e u ee i y h e u h t o n t t n=6a ec m o t a bev ,1 , d2 , d3 7 fr ei etn R s l Pr et no odW udi 1 h r s( ea t aht epi )w s sre 6 2 a h a , dae jco . e us em ao f l a f n 2h i n o d n 4 n t t n i h t i bo s o n
l9 34
第2 4卷第 l 2期 20 02年 l 2月
第
三
军
医
大
学
学
报
Vo .2 1 4.No. 1 2
A ’ AC DE AE ME I N MⅡ T RI T RⅡA (I A A MI D Cl AE J A S E r E
Dc 02 e .2 0
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ig te s e d a d v lmeo e t omai n n h p e ou fh mao fr t .M酬 1 d A tt f1 0 h aty mae W i a t eg ig f m 0 o2 0 g w r a d m y d— n ma o Os oa o 5 e h l s rr s w ihn o 2 0 t 5 e rn o l i l l t a r e
Ke r s ol e a e c rb a e rh e a i lmo e y w d :c l n ; e r l mo a ; nma d l g a s e h g
脑 出血 是 一种 常 见病 、 多发 病 , 于脑 出血 的实验 关
鼠龄 4~7月 , 由第 三军 医大学 附 属大坪 医 院医用 实验 动物 中
3 . 75C, 65~3 . ̄ 手术后动物被送 至通风 和有空调 的动物房 饲养 。
Ⅳ型胶原酶, 肝素 钠组 ( oaeaehpr ) 3个小组 分别注射 C l n /eai 的 l s g n Ⅳ胶 原酶, 肝素, 生理盐水溶 液 0 7 、. 和 20 ( 1 含 . 14 . 每
C ogi 00 8 C ia hnq g40 3 ,hn ) n
A s at bete oet lha eer e oraem dlnrsb ai etno t eⅣcl eae adep r te at s f t bt c:O j i T s b s rbahm r g oe i a yl l n co fy r cv ai c l h t c o j i p oa n , n xl c r ae — l s g o h f o c e
1 材 料 和方 法
1 1 材料 .
实验动物选用健康雄性 Wia 大鼠 lI只, sr t 5 ) 体重 20 5 , 0 ~20g
基金项 目: 第三军医大学基金 资助项 目( o2 2o ) 作者简介 : 张艳玲(9 4 , , 北省 石家庄 市人 、 士研 究生 , 师, 1 一)女 河 7 硕 医 主要