淀粉测定方法
淀粉的国标测定方法

淀粉的国标测定方法测定食物中淀粉的方法有酶水解法、酸水解法、可消化淀粉和抗性淀粉的测定方法(酶-直接法)一、酶水解法1. 原理样品经除去脂肪及可溶性糖类后,其中淀粉用淀粉酶水解成双糖,再用盐酸将双糖水解成单糖,最后按还原糖测定,并折算成淀粉。
2. 适用范围GB5009.9-85,适用于所有含淀粉的食物。
3. 仪器(1)回流冷凝器(2)水浴锅4. 试剂除特殊说明外,实验用水为蒸馏水,试剂为分析纯。
(1)乙醚(3)碘溶液:称取3.6 g碘化钾溶于20 ml水中,加入1.3 g碘,溶解后加水稀释至100 ml。
(4)85 % 乙醇。
(5)其余试剂同《蔗糖测定方法》5. 操作方法5.1样品处理称取2〜5 g样品,置于放有折叠滤纸的漏斗内,先用50 ml乙醚分5次洗除脂肪(注:如果脂肪含量少,此步骤可免),再用约100 ml85聽醇洗去可溶性糖类(注:此步骤目的是去除可溶性糖),将残留物移入250 ml 烧杯内,并用50ml水洗滤纸及漏斗,洗液并入烧杯内,将烧杯置沸水浴上加热15 min,使淀粉糊化,放冷至60 'C以下,力口20ml淀粉酶溶液,再55〜60 'C保温1h,并时时搅拌(注:温度过高,淀粉酶的活性破坏)。
然后取1滴此液加1滴碘溶液,应不现兰色,若显兰色,再加热糊化并加20ml淀粉酶溶液,继续保温,直至加碘不显兰色为止。
加热至沸,冷后移入250ml容量瓶中,并加水至刻度,混匀,过滤。
(注:此时淀粉已水解成双糖,过滤可去除残渣和纤维素)弃去初滤液,取50 ml滤液,置于250ml 锥形瓶中,加5 ml 6 mol/L 盐酸,装上回流冷凝器,在沸水浴中回流1h,冷后加2滴甲基红指示剂,用5mol/L氢氧化钠溶液中和至中性,溶液转入100 ml容量瓶中,洗涤锥形瓶,洗液并入100ml容量瓶中,加水至刻度,混匀备用。
(淀粉在沸水浴条件下糊化是淀粉水解的第一步反应,然后在淀粉酶的作用下,分解成短链淀粉、糊精、麦芽糖等低聚合的糖,所以在淀粉酶解后需用酸进一步水解得到葡萄糖。
碘量法 淀粉

碘量法测定淀粉含量简介碘量法是一种常用的测定淀粉含量的方法。
淀粉是植物体内最重要的储能物质之一,广泛存在于植物的种子、块茎、根状茎和果实等部位。
淀粉的含量对于粮食、食品、饲料等行业具有重要的意义。
通过测定淀粉的含量,可以评估原料的质量和加工过程的效果。
原理碘量法是通过测定淀粉与碘之间的反应来测定淀粉的含量。
在碘溶液中,淀粉会形成蓝色复合物,其颜色的深浅与淀粉的含量成正比。
因此,通过比色法可以测定淀粉的含量。
实验步骤1.准备样品:将待测样品研磨成细粉,取约0.1g的样品称入50mL锥形瓶中。
2.加入试剂:向锥形瓶中加入10mL蒸馏水和2mL 1% 硫酸溶液。
3.摇匀:用玻璃棒搅拌溶解样品。
4.加入试剂:向锥形瓶中加入10mL 1% 碘溶液。
5.加入试剂:向锥形瓶中加入蒸馏水,使溶液体积达到刻度线。
6.摇匀:用玻璃棒搅拌溶液,使样品充分与试剂反应。
7.静置:将锥形瓶放置静置10分钟。
8.滴定:用0.1mol/L Na2S2O3溶液滴定至溶液颜色变为浅黄色。
9.计算:根据滴定所需的Na2S2O3溶液体积计算淀粉的含量。
注意事项1.确保使用的试剂纯度高,以避免对实验结果的影响。
2.在摇匀和静置的过程中,要确保样品与试剂充分反应。
3.在滴定的过程中,要小心控制滴定剂的滴加速度,以避免滴加过多而造成误差。
4.实验过程中,要注意安全操作,避免溶液的飞溅和皮肤接触。
数据处理1.计算滴定所需的Na2S2O3溶液体积,记为V。
2.计算淀粉的含量,公式为:淀粉含量(%)= V × 0.1 × 100 / 0.1结论通过碘量法测定淀粉含量的实验,可以得到样品中淀粉的含量。
该方法简单、快速、准确,被广泛应用于食品、饲料、粮食等行业。
通过测定淀粉含量,可以评估原料的质量和加工过程的效果,为产品质量控制提供科学依据。
淀粉粘度测定方法综述

淀粉粘度测定方法综述淀粉粘度测定方法综述导语:淀粉是一种广泛应用于食品工业、医药行业、生物工程等领域的重要成分。
而淀粉粘度是评估淀粉物性和功能的关键指标之一。
本文将综述淀粉粘度测定的方法,并讨论其在不同领域中的应用。
一、简介淀粉是植物储存能量的主要形式之一,其基本单位是由葡萄糖分子组成的α-D-葡聚糖。
淀粉的粘度与其物理化学性质密切相关,包括分子大小、糊化特性、凝胶化能力等。
对淀粉粘度的准确测定具有重要意义。
二、传统测定方法1. 糊化终点法糊化终点法是一种常用的传统淀粉粘度测定方法。
其基本原理是通过添加盐酸或碱性溶液,使淀粉发生糊化,然后通过滴定剂的加入,测定淀粉溶液中的酸碱度变化,从而确定糊化终点。
这种方法操作简单,但只能粗略地评估淀粉的糊化特性。
2. 粘度计法粘度计法是另一种常见的淀粉粘度测定方法。
通过测量淀粉溶液在一定温度下的粘度,可以得出淀粉的粘度指标。
这种方法需要专业的粘度计仪器,且操作繁琐,但结果比较准确,适用于精细的淀粉粘度测定。
三、现代测定方法1. 空间电荷耦合器空间电荷耦合器(SCC)是一种利用电导率测量法测定淀粉粘度的新技术。
其原理是通过测量电导率的变化,间接获得淀粉分子大小和聚集形态的信息,从而推算出淀粉的粘度。
SCC技术具有测量快速、操作简单、结果准确等优点,已在食品工业中得到广泛应用。
2. 超声波技术超声波技术是一种新兴的淀粉粘度测定方法。
其基本原理是通过测量超声波在淀粉溶液中传播的速度和衰减情况,来推断淀粉的粘度。
这种方法不仅非常灵敏和精确,还可以快速测定多种淀粉样品,适用范围广泛。
四、应用领域及价值淀粉粘度测定方法在不同领域中具有重要的应用价值。
- 食品工业:淀粉粘度是评估食品加工过程中淀粉流变性质的关键指标,对于提高食品品质和改善加工工艺具有重要意义。
- 医药行业:淀粉粘度可以反映药物缓释体系中淀粉的溶胀和释放速率,是药物研发中的重要参考指标。
- 生物工程:淀粉粘度对于生物质转化中淀粉的降解和转化反应具有指导作用,有助于提高生物燃料和生物材料的生产效率。
淀粉检测方法

淀粉检测方法淀粉是一种常见的碳水化合物,广泛存在于植物中,包括谷类、豆类、薯类等。
检测淀粉的方法有很多种,其中常见的有碘液法、酶法和红色亚甲基蓝法等。
下面将分别介绍这几种方法的原理和操作步骤。
碘液法是一种常用的淀粉检测方法。
其原理是淀粉与碘溶液反应生成蓝色复合物。
操作步骤如下:首先取少量待测样品,加入适量的水悬浮均匀;然后加入几滴碘液,观察颜色变化。
如果出现蓝色,即表示样品中含有淀粉。
酶法是利用淀粉酶水解淀粉生成葡萄糖,然后通过葡萄糖检测方法来间接检测淀粉的含量。
操作步骤如下:首先取少量待测样品,加入适量的酶溶液,放置一段时间使样品充分水解;然后加入酶抑制剂停止反应;最后使用葡萄糖检测方法来测定样品中的葡萄糖含量,从而间接得到淀粉的含量。
红色亚甲基蓝法是一种定量检测淀粉的方法。
其原理是淀粉与红色亚甲基蓝在酸性条件下反应生成蓝色复合物,根据复合物的颜色深浅来定量测定淀粉的含量。
操作步骤如下:首先取少量待测样品,加入酸溶液使其酸化;然后加入红色亚甲基蓝溶液,混合均匀;最后使用分光光度计测定样品溶液的吸光度,并根据标准曲线来计算淀粉的含量。
除了以上介绍的几种方法,还有一些其他的淀粉检测方法。
比如用硝酸和亚硝酸盐的混合液进行检测,淀粉会被氧化成胆固醇,然后再用三氟化硼浓溶液滴定,根据滴定的消耗量来确定淀粉的含量。
还有利用红外光谱仪等仪器设备进行淀粉定性定量分析的方法。
总结起来,淀粉的检测方法有碘液法、酶法、红色亚甲基蓝法等,每种方法都有其适用的场合和特点。
在实际应用中,根据需要选择合适的方法来进行淀粉的检测,可以有效地掌握样品中淀粉的含量,为相关研究和应用提供可靠的数据支持。
淀粉的检验方法

淀粉的检验方法有:
1、颜色
淀粉一般呈白色或黄色,并且没有明显的气味。
2、形状
淀粉的形状是比较均匀的,并且表面比较光滑,摸起来比较有韧性。
3、气味
正常的淀粉气味比较轻微,如果发现食物上有明显的氨味,则可能是淀粉。
如果是酸味,可能是食物中的蛋白质分解出的氨气。
4、用手触摸
用手触摸淀粉时,如果淀粉质地比较坚硬,并且表面不光滑,则可能是淀粉。
如果摸起来比较柔软,则可能是糊状的淀粉。
5、做试验
还可以到医院进行淀粉酶的检查,如果淀粉酶含量超过500U/L,则可能是淀粉。
此外,还可以进行尿淀粉酶检查,如果尿液中的淀粉酶含量超过正常值,则可能是淀粉。
淀粉的国标测定方法

淀粉的国标测定方法测定食物中淀粉的方法有酶水解法、酸水解法、可消化淀粉和抗性淀粉的测定方法(酶-直接法)一、酶水解法1.原理样品经除去脂肪及可溶性糖类后,其中淀粉用淀粉酶水解成双糖,再用盐酸将双糖水解成单糖,最后按还原糖测定,并折算成淀粉。
2.适用范围GB5009.9-85,适用于所有含淀粉的食物。
3.仪器(1)回流冷凝器(2)水浴锅4.试剂除特殊说明外,实验用水为蒸馏水,试剂为分析纯。
(1)乙醚(2)0.5 % 淀粉酶溶液:称取淀粉酶(Sigma公司,E.C3.2.1.1)0.5 g,加100ml水溶解,加入数滴甲苯或三氯甲烷,防止长霉,贮于冰箱中。
(注:配成溶液的淀粉酶破坏很快,最好邻用现配。
)(3)碘溶液:称取3.6 g碘化钾溶于20 ml水中,加入1.3 g碘,溶解后加水稀释至100 ml。
(4)85 %乙醇。
(5)其余试剂同《蔗糖测定方法》5.操作方法5.1 样品处理称取2~5 g样品,置于放有折叠滤纸的漏斗内,先用50 ml乙醚分5次洗除脂肪(注:如果脂肪含量少,此步骤可免),再用约100 ml85 %乙醇洗去可溶性糖类(注:此步骤目的是去除可溶性糖),将残留物移入250 ml烧杯内,并用50ml水洗滤纸及漏斗,洗液并入烧杯内,将烧杯置沸水浴上加热15 min,使淀粉糊化,放冷至60 ℃以下,加20ml淀粉酶溶液,再55~60 ℃保温1h,并时时搅拌(注:温度过高,淀粉酶的活性破坏)。
然后取1滴此液加1滴碘溶液,应不现兰色,若显兰色,再加热糊化并加20ml淀粉酶溶液,继续保温,直至加碘不显兰色为止。
加热至沸,冷后移入250ml容量瓶中,并加水至刻度,混匀,过滤。
(注:此时淀粉已水解成双糖,过滤可去除残渣和纤维素)弃去初滤液,取50 ml滤液,置于250ml锥形瓶中,加5 ml 6 mol/L盐酸,装上回流冷凝器,在沸水浴中回流1h,冷后加2滴甲基红指示剂,用5mol/L氢氧化钠溶液中和至中性,溶液转入100 ml容量瓶中,洗涤锥形瓶,洗液并入100ml容量瓶中,加水至刻度,混匀备用。
淀粉的检测方法

淀粉的检测有三种方法。
1、将碘液加入少量待测液中,如果呈现淡紫色,则有淀粉存在:反之没有。
2、将食盐在炒锅里加热一段时间,之后取出待用,向待检验的水中加醋(最好是白醋或醋精),再加少许未加热的盐,搅拌之后加入加热炒过的盐,如果混合液变蓝则说明水中有淀粉.(注:食盐要加碘的)
3、利用丁达尔现象:将待测液装入透明玻璃杯,置于较黑暗处,用手电筒(光柱控制在直径2-3厘米,用白纸裹上)从侧面照射杯中液体,如果看到光柱(光柱中有小颗粒),则说明有淀粉.(因为淀粉溶在水里会形成胶体)。
肉制品中淀粉含量测定方法的比较及关键点

肉制品中淀粉含量测定方法的比较
及关键点
肉制品中淀粉含量测定方法的比较及关键点主要有:
1、杨氏法以淀粉的凝胶溶解性作为测定指标,用定容滴定管测定溶解度,从而间接评价淀粉的含量。
2、沉淀法使用氯化钠溶液作为离子交换剂进行沉淀,将淀粉离子沉淀成淀粉枝状体,再测定淀粉枝状体的重量,从而间接评价淀粉的含量。
3、比重法将肉制品液体加热,使淀粉溶解并形成悬浮液,然后测定悬浮液比重,从而间接评价淀粉的含量。
4、折光率法测定淀粉溶液的折光率,通过折光率和淀粉的折光率的差值,从而间接评价淀粉的含量。
5、放射性核素标记法在淀粉中添加放射性核素,然后在混合物中测定放射性核素的含量,从而精确测定淀粉的含量。
关键点:
1、选择合适的淀粉测定方法:根据肉制品的特性,选择最合适的淀粉测定方法。
2、准备样品:对肉制品进行一定处理,如粉碎、消化、溶解等,以便进行淀粉测定。
3、准备所需药品:根据不同的淀粉测定方法,准备相应的试剂、设备等。
4、正确操作:按照不同淀粉测定方法的步骤,操作正确,保证测定结果的准确性。
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淀粉的测定方法(1)测定食物中淀粉的方法有酶水解法、酸水解法、可消化淀粉和抗性淀粉的测定方法(酶—直接法)一、酶水解法1。
原理样品经除去脂肪及可溶性糖类后,其中淀粉用淀粉酶水解成双糖,再用盐酸将双糖水解成单糖,最后按还原糖测定,并折算成淀粉。
2。
适用范围GB5009。
9-85,适用于所有含淀粉的食物。
3.仪器(1) 回流冷凝器(2)水浴锅4。
试剂除特殊说明外,实验用水为蒸馏水,试剂为分析纯.(1) 乙醚(2) 0.5 % 淀粉酶溶液:称取淀粉酶(Sigma公司, E。
C3。
2。
1.1)0。
5 g,加100 ml水溶解,加入数滴甲苯或三氯甲烷,防止长霉,贮于冰箱中。
(注:配成溶液的淀粉酶破坏很快,最好邻用现配。
)(3)碘溶液:称取3.6 g碘化钾溶于20 ml水中,加入1。
3 g碘,溶解后加水稀释至100 ml。
(4) 85 %乙醇。
(5)其余试剂同《蔗糖测定方法》5.操作方法5.1 样品处理称取2~5 g样品,置于放有折叠滤纸的漏斗内,先用50 ml乙醚分5次洗除脂肪(注:如果脂肪含量少,此步骤可免),再用约100 ml 85 %乙醇洗去可溶性糖类(注:此步骤目的是去除可溶性糖),将残留物移入250 ml烧杯内,并用50 ml水洗滤纸及漏斗,洗液并入烧杯内,将烧杯置沸水浴上加热15 min,使淀粉糊化,放冷至60 ℃以下,加20 ml淀粉酶溶液,再5 5~60 ℃保温1 h,并时时搅拌(注:温度过高,淀粉酶的活性破坏)。
然后取1滴此液加1滴碘溶液,应不现兰色,若显兰色,再加热糊化并加20 ml淀粉酶溶液,继续保温,直至加碘不显兰色为止。
加热至沸,冷后移入250 ml容量瓶中,并加水至刻度,混匀,过滤。
(注:此时淀粉已水解成双糖,过滤可去除残渣和纤维素)弃去初滤液,取50 ml滤液,置于250 ml锥形瓶中,加5 ml 6 mol/L盐酸,装上回流冷凝器,在沸水浴中回流1 h,冷后加2滴甲基红指示剂,用5mol/L氢氧化钠溶液中和至中性,溶液转入100 ml容量瓶中,洗涤锥形瓶,洗液并入100 ml容量瓶中,加水至刻度,混匀备用。
(淀粉在沸水浴条件下糊化是淀粉水解的第一步反应,然后在淀粉酶的作用下,分解成短链淀粉、糊精、麦芽糖等低聚合的糖,所以在淀粉酶解后需用酸进一步水解得到葡萄糖。
)5.2 测定按《还原糖的测定方法》操作。
同时量取50 ml水及与样品处理时相同量的淀粉酶溶液,按同一方法做试剂空白试验。
6.计算X1=(A1—A2)×0.9×100 (1)m1×V1×V3×1000V2100式中: X1——样品中淀粉的含量,%;A1--测定用样品中还原糖的含量。
Mg;A2--试剂空白中还原糖的含量,mg;0。
9-—还原糖(以葡萄糖计)换算成淀粉的换算系数;m1—-称取样品质量,g;V1—-水解用样品溶液体积,ml;V2—-样品定容总体积,ml;V3——测定用样品处理液的体积,ml。
二、酸水解法1.原理样品经除去脂肪及可溶性糖类后,其中淀粉用酸水解成具有还原性的单糖,然后按还原糖测定,折算成淀粉。
2.适用范围本法适用于含淀粉的食物3.仪器(1)水浴锅。
(2)高速组织捣碎机:1200 rpm。
(3)皂化装置并附250 ml锥形瓶.4。
试剂除特殊说明外,实验用水为蒸馏水,试剂为分析纯。
(1)乙醚。
(2) 85%乙醇溶液。
(3) 6mol/L盐酸溶液。
(4) 10mol/L氢氧化钠溶液。
(5) 2。
5mol/L氢氧化钠溶液。
(6)甲基红指示液:0。
2 %乙醇溶液.(7)精密pH试纸。
(8) 20 %乙酸铅溶液,(9) 10 % 硫酸钠溶液。
(10)其余试剂同还原糖的测定。
5.操作方法5.1样品处理5.1。
1粮食、豆类、糕点、饼干等较干燥的样品:称取2。
0~5。
0 g磨碎过40目筛的样品,置于放有慢速滤纸的漏斗中,用30 ml乙醚分三次洗去样品中脂肪,弃去乙醚。
再用150 ml 85 %乙醇溶液分数次洗涤残渣,除去可溶性糖类物质。
并滤干乙醇溶液,以100 ml水洗涤漏斗中残渣并转移至250ml锥形瓶中,加入30 ml 6 mol/L盐酸,接好冷凝管,置沸水浴中回流2 h.回流完毕后,立即置流水中冷却。
待样品水解冷却后,加入2滴甲基红指示剂,先以40 %氢氧化钠溶液调至黄色,再以6 mol/L盐酸校正至水解液刚变红色为宜。
若水解液颜色较深,可用精密pH试纸测试,使样品水解液的pH约为7。
然后加20 ml 20 %乙酸铅溶液,摇匀,放置10 min。
再加20 ml 10 %硫酸钠溶液,以除去过量的铅。
摇匀后将全部溶液及残渣转入500 ml容量瓶中,用水洗涤锥形瓶,洗液合并于容量瓶中,加水稀释至刻度。
过滤,弃去初滤液20 ml,滤液供测定用.5.1。
2蔬菜、水果、各种粮豆含水熟食制品:按1:1加水在组织捣碎机种捣成匀浆(蔬菜、水果需先洗净、凉干,取可食部分)。
称取5~10 g匀浆(液体样品可直接量取),于250 ml锥形瓶中,加30 ml乙醚振摇提取(除去样品中脂肪),用滤液过滤去除乙醚,再用30 ml乙醚淋洗两次,弃去乙醚。
以下按5。
1.1自”再用150 ml 85%乙醇溶液”起依法操作。
5.2 测定按还原糖的测定步骤操作。
6.计算X2 =(A3-A4)×0。
9×100 (1)m2×50×V2×1000250100式中: X2-—样品中淀粉的含量,%;A3——测定用样品中还原糖的含量.mg;A4--试剂空白中还原糖的含量,mg;m2——称取样品质量,g;V2-—测定用样品处理液的体积,ml.500——样品液总体积,ml;0。
9——还原糖(以葡萄糖计)换算成淀粉的换算系数;(注:酸水解能分解部分半纤维素,形成具有还原力的单糖,如木糖、阿拉伯糖等,可影响分析结果。
为了比较正确地测定食物中淀粉含量,建议采用淀粉酶糖化淀粉,除去不可溶性的残渣后,再用酸水解使之成为葡萄糖,然后测定其含量,最后换算成淀粉.三、可消化淀粉和抗性淀粉的测定方法(酶—直接法)1。
原理样品先在37℃下经α-淀粉酶水解,使可消化淀粉转化成葡萄糖,用80%乙醇提取,未水解的抗性淀粉部分经沸水浴凝胶化后,在淀粉葡萄糖苷酶转化成葡萄糖,用葡萄糖氧化酶法分别测定葡萄糖含量,再换算成可消化淀粉和抗性淀粉含量。
2。
适用范围参考Englyst和Champ的方法.适用于所有含淀粉食物的测定。
3.仪器(1)恒温水浴箱(2)温箱(3) 分光光度计4.试剂除特殊说明外,实验用水为蒸馏水,试剂为分析纯。
(1) 0。
1mol/L乙酸缓冲液(pH 5.0):称取14。
28 g 乙酸钠(CH3COONa·3H2O)溶于水中,加入2.7 ml 冰乙酸,并调节pH 5。
0,用水定容至1 L。
(2)酶溶液:分别称取4gα-淀粉酶溶液(α-amylase,Sigma 公司)、1g淀粉葡萄糖苷酶溶液(amyloglucosidase,Sigm a 公司)和0.3g转换酶(invertase,Sigma 公司)溶液于研钵中,用 0.1mol/L 乙酸缓冲液研磨制成匀浆,并调节体积为100ml.3000rpm离心5min,取上清液.(3)淀粉葡萄糖苷酶溶液: 称取2 g 淀粉葡萄糖苷酶(amyloglucosidase, Sigma 公司),加100 ml 0。
1 mol/L 乙酸缓冲液研磨成匀浆.3000 rpm离心5 min,取上清液。
(4) 80%乙醇:800ml 乙醇加水至1L。
(5) 4mol/L氢氧化钾溶液:称取224g氢氧化钾,用水溶解并加至1L。
(6) 2 mol/L乙酸溶液:量取冰乙酸118ml,加水至1L,混匀.(7)其它试剂同《葡萄糖测定方法》.5.操作步骤5.1样品处理:测定RS1时,直接称取样品0。
2g~1g;测定RS2时,选用生的样品,先研磨打碎后再称取样品0。
2g~1g,。
测定RS3时,则先将样品加水煮沸至少15 min,使之凝胶化,然后取出放入4℃冰箱冷藏过夜,再混匀后称取样品0。
2g~1 g (需折合水分)。
加入10 ml 酶溶液,轻轻混匀.37℃温箱或水浴中酶解16 h。
加入40 ml 无水乙醇,使乙醇含量终浓度为80%,充分摇匀.静置30 min,3000 rpm 离心15min,上清液转移至100ml 容量瓶中.用80%乙醇反复洗涤沉淀2 ~ 3次.合并上清液并用乙酸缓冲液定容,供测定可消化淀粉用.5.2水解抗性淀粉:将经反复洗涤的沉淀置于100℃干燥,然后用15ml水将沉淀转移至锥形瓶中,沸水浴中加热30 min。
冷却至室温。
加入1倍体积的4 mol/L 氢氧化钾溶液,使氢氧化钾终浓度为2mol/L,室温下混合30 min。
(注:在样品凝胶化后,2mol/L氢氧化钾的作用是进一步破坏淀粉结构,如果氢氧化钾的浓度过高或过低,不利于结构破坏,操作中需注意。
)加入约30ml 2 mol/L 乙酸溶液,调节pH为5.0,再加入淀粉葡萄糖苷酶溶液5 ml,65℃~70℃水浴90 min.冷却后将水解液转移至100ml容量瓶中,用乙酸缓冲液定容至刻度.过滤。
5。
3测定:吸取0。
5ml 上清液(5。
1)和抗性淀粉水解液(5.2),按照葡萄糖氧化酶法分别测定葡萄糖含量(从测定步骤开始)。
同时做葡萄糖标准曲线。
6.计算根据葡萄糖标准曲线得出上清液中和抗性淀粉水解液中葡萄糖浓度,再根据稀释定容体积和称样量分别计算出可消化淀粉和抗性淀粉含量。
X=(As—Ab)×V×F×0。
1×0.90。
5×m式中: X——样品中可消化淀粉/抗性淀粉含量,g/100g;As——由标准回归方程求出的样品测定管中葡萄糖含量,mg;Ab-—由标准回归方程求出的样品空白管中葡萄糖含量,mg;V-—样品定容体积,ml;F—-稀释倍数0。
5——测定时吸取样品提取液的体积,ml;m—-样品质量,g;0.1--将mg/g转换成g/100g的系数。
7.注意事项7。
1 Eglyst根据抗性淀粉的分类,对样品处理采用不同的处理方法.读者可根据实验需要选择相应的方法。
7.2 Eglyst测定抗性淀粉时,模拟胃肠道内环境,根据α—淀粉酶水解时间长短,将20min时已水解的淀粉称为快消化淀粉,20min~120 min 水解的淀粉称为慢消化淀粉,120min后仍没有水解的淀粉称为抗性淀粉。
有的学者指出在体内实验中,肠道对淀粉的消化能力可能超过6h,认为120min的水解时间过于短暂,并建议水解时间应延长至16h。
目前国际上检测方法尚没有完全统一,多采用的是Eglyst和Champ的方法,这里的方法是对二者的综合并略加改进.7.3如果将样品先用80%乙醇去除可溶性糖后,再加水煮沸,使之凝胶化,然后用氢氧化钾破坏淀粉结构,进而采用淀粉葡萄糖苷酶水解,所测定的结果即为总葡萄糖(total glucose)含量。